Uji Efek Diuretik Ekstrak Etanol daun Senduduk (Melastoma malabathricum Linn.) Terhadap Tikus Jantan
Lampiran1.
Hasil determinasi
malabathricum L.)
tumbuhan
daun
senduduk
(Melastoma
47
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 2. Tumbuhan senduduk
Daun senduduk
48
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3. Simplisia daun senduduk
Simplisia daun senduduk
Serbuk simplisia daun senduduk
49
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 4.Hasil mikroskopik
1
2
3
4
Keterangan:
1. Rambut penutup
2. Parenkim
3. Stomata tipe anomositik
4. Kristal kalsium oksalat tipe roset
50
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 5.Perhitungan karakterisasi simplisia daun senduduk
Perhitungan penetapan kadar air dari serbuk simplisia daun senduduk
No
Berat Sampel (g)
1
2
3
Volume Awal (ml)
5,013
5,021
5,032
% Kadar Air =
0,6
0,8
1,0
Volume air
Berat sampel
1. % Kadar Air I =
5,013
× 100% = 3,99%
1,0−0,8
3. % Kadar Air III =
0,8
1,0
1,2
× 100%
0,8−0,6
2. % Kadar Air II =
Volume Akhir (ml)
5,021
× 100% = 3,98%
1,2−1,0
5,032
% Kadar Air Rata-Rata =
× 100% = 3,98%
3,99+3,98+3,98
3
= 3,98%
51
Universitas Sumatera Utara
Perhitungan penetapan kadar sari larut air dari serbuk simplisia daun senduduk
No
Berat Sampel (g)
Berat Sari (g)
1
5,034
0,3
2
5,016
0,27
3
5,020
0,28
% Kadar Sari Larut Air =
1. % Kadar Sari I =
100
×
×100%
Berat Sampel 20
Berat Sari
0,3
×
100
5,034 20
2. % Kadar Sari II =
×100% = 29,79%
0,27 100
×
×100% = 26,91%
5,016 20
3. % Kadar Sari III =
0,28 100
×
×100% = 27,89%
5,020 20
% Kadar Sari Larut Air Rata-Rata =
29,79+26,91+27,89
3
= 28.19%
52
Universitas Sumatera Utara
Perhitungan penetapan kadar sari larut etanol dari serbuk simplisia daun senduduk
No
Berat Sampel (g)
Berat Sari (g)
1
5,046
0,3
2
5,040
0,34
3
5,032
0,29
% Kadar Sari Larut Air =
1. % Kadar Sari I =
100
×
×100%
Berat Sampel 20
Berat Sari
0,3
×
100
5,046 20
2. % Kadar Sari II =
×100% = 29,72%
0,34 100
×
×100% = 33,73%
5,040 20
3. % Kadar Sari III =
0,29 100
×
×100% = 28,81%
5,032 20
% Kadar Sari Larut Air Rata-Rata =
29,72+33,73+28,81
3
= 30,75%
53
Universitas Sumatera Utara
Perhitungan penetapan kadar abu total dari serbuk simplisia daun senduduk
No
Berat Sampel (g)
Berat Abu (g)
1
2,002
0,087
2
2,005
0,138
3
2,005
0,092
% Kadar Abu Total =
Berat Abu
Berat Sampel
1. % Kadar Abu Total I =
0,087
2,002
2. % Kadar Abu Total II =
3.
× 100%
× 100% = 4,34%
0,138
2,005
% Kadar Abu Total III =
× 100% = 6,88%
0,092
2,005
% Kadar Abu Total Rata-Rata =
× 100% = 4,58%
4,34+6,88+4,58
3
= 5,27%
54
Universitas Sumatera Utara
Perhitungan penetapan kadar abu tidak larut asam dari serbuk simplisia daun
senduduk
No
Berat Sampel (g)
Berat Abu (g)
1
2,002
0,008
2
2,005
0,014
3
2,005
0,010
% Kadar Abu tidak Larut Asam =
1. % Kadar Abu Total I =
Berat Sampel
0,008
2,002
2. % Kadar Abu Total II =
3.
Berat Abu
× 100% = 0,39%
0,014
2,005
% Kadar Abu Total III =
× 100%
× 100% = 0,69%
0,010
2,005
× 100% = 0,49%
% Kadar Abu tidak Larut Asam Rata-Rata =
0,39+0,69+0,49
3
= 0,52%
55
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 6. Alat yang digunakan
Modifikasi alat penampung urin
Spektrofotometer serapan atom
56
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 7. Data volume urin (ml), kadar natrium, dan kadar kalium (meq/l)
No
1
Parameter
Volume urin
(ml)
2
Rata-rata ±
SD
Kadar
natrium
(meq/l)
3
Rata-rata ±
SD
Kadar
kalium
(meq/l)
Rata-rata ±
SD
Kontrol
CMC Na
0,5%
Furosemid
Ekstrak Etanol Daun Senduduk
1,1
1,3
1,4
1,6
1,3
1,34 ±
0,18
27,89
29,19
35,35
36,48
30,93
31,97 ±
3,78
16,03
19,87
21,09
22,34
17,78
19,42 ±
2,53
4,2
4
3,8
3,8
3,6
3,88 ±
0,22
102,4
94,27
95,48
99,31
92,62
96,81 ±
3,96
57,35
51,53
52,49
48,35
46,74
51,29 ±
4,11
Dosis
Dosis
Dosis
400
500
600 mg/
mg/kg bb mg/kg bb
kg bb
2,5
2,5
3,2
2,2
3,1
3,1
1,9
2,6
3,5
1,9
2,5
2,9
2,5
2,8
3,2
2,2 ±
2,7 ±
3,18 ±
0,30
0,25
0,21
52,48
60,48
74,98
50,39
49,69
73,68
46,30
63,07
83,41
48,48
57,26
79,76
53,96
61,00
76,89
50,32 ±
58,30 ± 77,74 ±
3,06
5,24
3,91
25,81
27,70
39,22
29,20
37,02
40,94
27,65
38,26
41,92
26,48
36,22
37,77
29,98
29,94
36,40
27,82 ±
33,83 ± 39,25 ±
1,76
4,70
2,25
57
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 8. Contoh perhitungan dosis kontrol CMC-Na 0,5%
-
Pembuatan CMC 0,5%
= 500 mg/ 100 ml
= 5 mg/ml
-
Perhitungan CMC-Na 0,5% pada tikus 200
=
1
100
× 200 g
Volume yang diberikan = 2 ml
58
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 9. Contoh perhitungan dosis furosemid
Dosis penggunaan furosemid 10 mg/kg bb pada tikus
-
Menurut FI edisi III, penetapan kadar tablet = 20 tablet, maka diambil
20 tablet furosemid, digerus dan ditimbang berat totalnya = 3384,8 mg
-
Berat bahan aktif furosemid dalam 20 tablet furosemid adalah
= 40 mg/tab x 20 tab = 800 mg.
-
Serbuk tablet furosemid yang digunakan :
10
800 mg
-
=
X
x = 42,31 ≈ 42 mg
3384 ,8 mg
1
Volume yang diberikan = 100 x BB
Misal BB tikus = 200 g
1
Maka volume suspensi furosemid yang diberikan 100 x 200 g = 2 ml.
59
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 10.Contoh perhitungan dosis dari ekstrak etanol daun senduduk
1. Untuk dosis 400 mg/kg bb pada tikus 153,2 g
=
153,2 g
1000 g
× 400 mg/kg bb = 61,28 mg
Volume yang diberikan =
61,28 mg
400 mg
× 10 ml = 1,53 ml
2. Untuk dosis 500 mg/kg bb pada tikus 158,2 g
=
158,2 g
1000 g
× 500 mg/kg bb = 79,1 mg
Volume yang diberikan =
79,1 mg
500 mg
× 10 ml = 1,58 ml
3. Untuk dosis 600 mg/kg bb pada tikus 162,1
=
162,1 g
1000 g
× 600 mg/kg bb = 97,26 mg
Volume yang diberikan =
97,26 mg
600 mg
× 10 ml = 1,62 mg
60
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 11.Hasil pengujian aas dari volume urin untuk kadar Na+ dan K+
No
Kelompok pengujian
1
Kontrol CMC-Na
0,5%
2
Furosemid
3
EEDS dosis 400
mg/kg bb
4
EEDS dosis 500
mg/kg bb
5
EEDS dosis 600
mg/kg bb
Tikus
1
2
3
4
5
1
2
3
4
5
1
2
3
4
5
1
2
3
4
5
1
2
3
4
5
Konsentrasi
Na+
0,2566
0,2686
0,3253
0,3357
0,2846
0,9416
0,8673
0,8785
0,9137
0,8521
0,4828
0,4636
0,4260
0,4460
0,4964
0,5564
0,4572
0,5803
0,5268
0,5612
0,6898
0,6779
0,7674
0,7338
0,7074
K+
2,5000
3,1000
3,2895
3,4842
2,7737
8,9474
8,0395
8,1895
7,5421
7,2921
4,0263
4,5553
4,3132
4,1316
4,6762
4,3210
5,7763
5,9684
5,6500
4,6711
6,1184
6,3868
6,5395
5,8921
5,6789
61
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 12. Contoh perhitungan kadar elektrolit
mcg
Konsentrasi ( ml )
× volume sampel × fp
Kadar Na =
volume pemipetan sampel (ml )
Ket: fp = faktor pengenceran
Pembacaan pada AAS = 0,2566 mcg/ml
Kadar Na =
0,2566 mcg /ml
1 ml
× 100 × 25 = 641,5 mcg/ml
= 0,6415 mg/ml
mg
Kadar Na ( ml )
meq/l =
× 1 meq
BM Na
=
0,6415 mg /ml
23
× 1 meq = 0,02789 meq/ml
= 27,89 meq/l
62
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 13. Data kalibrasi natrium dengan aas, perhitungan persamaan garis
regresi dan koefisien korelasi
No
1
2
3
4
5
6
No
1
2
3
4
5
6
∑
X
0,0000
0,2000
0,4000
0,6000
0,8000
1,0000
3,0000
x = 0,5000
Y
-0,0004
0,0260
0,0491
0,0762
0,0987
0,1257
0,3753
ȳ = 0,06255
Absorbansi
(Y)
-0,0004
0,0260
0,0491
0,0762
0,0987
0,1257
XY
0
0,0052
0,01964
0,04572
0,07896
0,1257
0,27522
X2
0
0,0400
0,1600
0,3600
0,6400
1,0000
2,2000
Y2
0,00000016
0,000676
0,00241081
0,00580644
0,00974169
0,01580049
0,03443559
∑XY −(∑X)(∑Y)/n
a=
=
Konsentrasi (µg/ml)
(X)
0,0000
0,2000
0,4000
0,6000
0,8000
1,0000
∑X 2 −(∑X)²/n
0,27522 −(3,0000)(0,3753 )/6 0,08757
=
= 0,1251
0,7
2,2000 −(3,0000 )2 /6
Y=aX+b
b=Y–aX
= 0,06255 – 0,1251 (0,5000)
= 0,0000
Persamaan regresi : Y = 0,1251 (X) + 0,0000
Dengan nilai r sebagai berikut :
r =
=
∑XY −(∑X)(∑Y)/n
�∑X 2 −(∑X)²/n (∑Y 2 −(∑Y)2 /n)
0,27522 −(3,0000)(0,3753 )/6
=
0,08757
�(2,2000)−(3,0000 )²/6(0,03443559 )−(0,3753 )2 /6 0,08759
= 0,9997
63
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 14.Data kalibrasi kalium dengan AAS, perhitungan persamaan garis
regresi dan koefisien korelasi
No
Konsentrasi (µg/ml)
(X)
0,0000
2,0000
4,0000
6,0000
8,0000
10,000
1
2
3
4
5
6
No
1
2
3
4
5
6
∑
Y
0,0011
0,0880
0,1588
0,2297
0,3086
0,3868
1,173
ȳ = 0,1955
XY
0
0,176
0,6352
0,3782
2,4688
3,868
0,27522
X2
0
0,0400
0,1600
0,3600
0,6400
1,0000
2,2000
Y2
0,00000016
0,000676
0,00241081
0,00580644
0,00974169
0,01580049
0,03443559
∑XY −(∑X)(∑Y)/n
a=
=
X
0,0000
2,0000
4,0000
6,0000
8,0000
10,0000
30,0000
x = 5,0000
Absorbansi
(Y)
0,0011
0,0880
0,1588
0,2297
0,3086
0,3868
∑X 2 −(∑X)²/n
8,5262−(30,0000)(1,173)/6 2,6612
=
= 0,0380
220,0000 −(30,0000 )2 /6
70
Y=aX+b
b=Y–aX
= 0,1955 – 0,0380 (5,0000)
= 0,0055
Persamaan regresi : Y = 0,0380 (X) + 0,0055
Dengan nilai r sebagai berikut :
∑XY −(∑X)(∑Y)/n
r =
�∑X 2 −(∑X)²/n (∑Y 2 −(∑Y)2 /n)
=
=
8,5262 −(30,0000 )(1,173)/6
�(220,0000)−(30,0000 )²/6(0,33057294 )−(1,173)2 /6
2,6612
2,6622
= 0,9996
64
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 15.Skema pembuatan ekstrak etanol daun senduduk dan uji aktivitas
diuretik
Serbuk simplisia daun senduduk
Direndam dengan pelarut etanol 96% selama 3 jam
Dipindahkan kedalam perkolator
Didiamkan selama 24 jam
Dibuka kran dan dibiarkan ekstrak menetes dari
perkolator
Ampas
Perkolat
Dipekatkan dengan
rotary evaporator
Ekstrak etanol daun senduduk
Uji aktivitas diuretik
Tikus
Dikondisikan selama 1 minggu
Dipuasakan selama ± 18 jam
Diberi ekstrak etanol daun senduduk
(EEDS) dengan dosis berbeda
Urin
Volume
Elektrolit
Diukur dengan
AAS
Kadar Na+ dan K+ (meq/l)
65
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 16.Hasil Data Statistik ANAVA dengan Uji Tukey
Data statistik volume urin per jam
ANOVA
rata_rata_vol_urin_jam_ke_1
Sum of Squares
Between Groups
Df
Mean Square
.466
4
.117
Within Groups
6.128
20
.306
Total
6.594
24
F
Sig.
.381
.820
rata_rata_vol_urin_jam_ke_1
Kelompok
Subset for alpha
= 0.05
N
Tukey HSD
a
1
CMC-Na 0,5%
5
.2800
EEDS 400 mg/kg bb
5
.5000
EEDS 500 mg/kg bb
5
.6000
EEDS 600 mg/kg bb
5
.6200
Furosemid
5
.6600
Sig.
.812
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
ANOVA
rata_rata_vol_urin_jam_ke_2
Sum of Squares
Df
Mean Square
Between Groups
3.270
4
.818
Within Groups
2.744
20
.137
Total
6.014
24
F
Sig.
5.959
.003
rata_rata_vol_urin_jam_ke_2
Kelompok
Subset for alpha = 0.05
N
Tukey HSDa
1
2
3
CMC-Na 0,5%
5
.6000
EEDS 400 mg/kg bb
5
.8400
EEDS 500 mg/kg bb
5
1.0600
1.0600
EEDS 600 mg/kg bb
5
1.1600
1.1600
Furosemid
5
Sig.
1.6800
.159
.099
66
Universitas Sumatera Utara
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
ANOVA
rata_rata_vol_urin_jam_ke_3
Sum of Squares
Between Groups
Mean Square
10.208
4
2.552
5.512
20
.276
15.720
24
Within Groups
Total
Df
F
Sig.
9.260
.000
rata_rata_vol_urin_jam_ke_3
Kelompok
Subset for alpha = 0.05
N
Tukey HSDa
1
2
3
CMC-Na 0,5%
5
.6600
EEDS 400 mg/kg bb
5
1.4600
1.4600
EEDS 500 mg/kg bb
5
1.6200
1.6200
EEDS 600 mg/kg bb
5
Furosemid
5
1.9400
1.9400
2.6200
Sig.
.061
.607
.280
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
ANOVA
rata_rata_vol_urin_jam_ke_4
Sum of Squares
Between Groups
Mean Square
16.950
4
4.238
9.844
20
.492
26.794
24
Within Groups
Total
Df
F
Sig.
8.610
.000
rata_rata_vol_urin_jam_ke_4
Kelompok
Subset for alpha = 0.05
N
Tukey HSD
a
1
2
3
CMC-Na 0,5%
5
.8600
EEDS 400 mg/kg bb
5
1.8600
1.8600
EEDS 500 mg/kg bb
5
2.0600
2.0600
2.0600
EEDS 600 mg/kg bb
5
2.5000
2.5000
Furosemid
5
3.3800
67
Universitas Sumatera Utara
Sig.
a
Duncan
.089
.609
CMC-Na 0,5%
5
EEDS 400 mg/kg bb
5
1.8600
EEDS 500 mg/kg bb
5
2.0600
EEDS 600 mg/kg bb
5
2.5000
Furosemid
5
.052
.8600
2.5000
3.3800
Sig.
1.000
.187
.061
F
Sig.
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
ANOVA
rata_rata_vol_urin_jam_ke_5
Sum of Squares
Between Groups
Mean Square
18.572
4
4.643
1.148
20
.057
19.720
24
Within Groups
Total
df
80.889
.000
rata_rata_vol_urin_jam_ke_5
Kelompok
Subset for alpha = 0.05
N
Tukey HSDa
1
CMC-Na 0,5%
5 1.3400
EEDS 400 mg/kg
5
2
3
4
5
2.2000
bb
EEDS 500 mg/kg
5
2.7000
bb
EEDS 600 mg/kg
5
3.1800
bb
Furosemid
5
Sig.
3.8800
1.000
1.000
1.000
1.000
1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
68
Universitas Sumatera Utara
Data statistik volume urin total
ANOVA
volume_urin
Sum of Squares
Between Groups
Within Groups
Total
Df
Mean Square
18.572
4
4.643
1.148
20
.057
19.720
24
F
Sig.
80.889
.000
volume_urin
Kelompok
Subset for alpha = 0.05
N
Tukey HSD
a
1
CMC-Na
5
EEDS
5
2
3
4
5
1.3400
2.2000
400mg/kgbb
EEDS
5
2.7000
500mg/kgbb
EEDS
5
3.1800
600mg/kgbb
Furosemid
5
Sig.
3.8800
1.000
1.000
1.000
1.000
1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
Data statistik kadar natrium pada urin tikus jantan
ANOVA
kadar_Na
Sum of Squares
Between Groups
Within Groups
Total
Df
Mean Square
12530.170
4
3132.542
328.467
20
16.423
12858.637
24
F
190.737
Sig.
.000
69
Universitas Sumatera Utara
kadar_Na
kelompok
Subset for alpha = 0.05
N
Tukey
HSD
a
1
CMC-Na 0,5%
5
EEDS
5
2
3
4
5
31.9680
50.3220
400mg/kgbb
EEDS
5
58.3000
500mg/kgbb
EEDS
5
77.7440
600mg/kgbb
Furosemid
5
96.8060
Sig.
1.000
1.000
1.000
1.000
1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a.
Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
Data statistik kadar kalium pada urin tikus jantan
ANOVA
kadar_k
Sum of Squares
Between Groups
Within Groups
Total
Df
Mean Square
2883.721
4
720.930
214.222
20
10.711
3097.943
24
F
Sig.
67.307
.000
kadar_k
Kelompok
Subset for alpha = 0.05
N
Tukey
HSDa
1
2
3
CMC-Na 0,5%
5
EEDS
5
27.8240
5
33.8280
4
5
19.4220
400mg/kgbb
EEDS
33.8280
500mg/kgbb
EEDS
5
39.2500
600mg/kgbb
Furosemid
5
Sig.
51.2920
1.000
.060
.104
1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
70
Universitas Sumatera Utara
Hasil determinasi
malabathricum L.)
tumbuhan
daun
senduduk
(Melastoma
47
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 2. Tumbuhan senduduk
Daun senduduk
48
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3. Simplisia daun senduduk
Simplisia daun senduduk
Serbuk simplisia daun senduduk
49
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 4.Hasil mikroskopik
1
2
3
4
Keterangan:
1. Rambut penutup
2. Parenkim
3. Stomata tipe anomositik
4. Kristal kalsium oksalat tipe roset
50
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 5.Perhitungan karakterisasi simplisia daun senduduk
Perhitungan penetapan kadar air dari serbuk simplisia daun senduduk
No
Berat Sampel (g)
1
2
3
Volume Awal (ml)
5,013
5,021
5,032
% Kadar Air =
0,6
0,8
1,0
Volume air
Berat sampel
1. % Kadar Air I =
5,013
× 100% = 3,99%
1,0−0,8
3. % Kadar Air III =
0,8
1,0
1,2
× 100%
0,8−0,6
2. % Kadar Air II =
Volume Akhir (ml)
5,021
× 100% = 3,98%
1,2−1,0
5,032
% Kadar Air Rata-Rata =
× 100% = 3,98%
3,99+3,98+3,98
3
= 3,98%
51
Universitas Sumatera Utara
Perhitungan penetapan kadar sari larut air dari serbuk simplisia daun senduduk
No
Berat Sampel (g)
Berat Sari (g)
1
5,034
0,3
2
5,016
0,27
3
5,020
0,28
% Kadar Sari Larut Air =
1. % Kadar Sari I =
100
×
×100%
Berat Sampel 20
Berat Sari
0,3
×
100
5,034 20
2. % Kadar Sari II =
×100% = 29,79%
0,27 100
×
×100% = 26,91%
5,016 20
3. % Kadar Sari III =
0,28 100
×
×100% = 27,89%
5,020 20
% Kadar Sari Larut Air Rata-Rata =
29,79+26,91+27,89
3
= 28.19%
52
Universitas Sumatera Utara
Perhitungan penetapan kadar sari larut etanol dari serbuk simplisia daun senduduk
No
Berat Sampel (g)
Berat Sari (g)
1
5,046
0,3
2
5,040
0,34
3
5,032
0,29
% Kadar Sari Larut Air =
1. % Kadar Sari I =
100
×
×100%
Berat Sampel 20
Berat Sari
0,3
×
100
5,046 20
2. % Kadar Sari II =
×100% = 29,72%
0,34 100
×
×100% = 33,73%
5,040 20
3. % Kadar Sari III =
0,29 100
×
×100% = 28,81%
5,032 20
% Kadar Sari Larut Air Rata-Rata =
29,72+33,73+28,81
3
= 30,75%
53
Universitas Sumatera Utara
Perhitungan penetapan kadar abu total dari serbuk simplisia daun senduduk
No
Berat Sampel (g)
Berat Abu (g)
1
2,002
0,087
2
2,005
0,138
3
2,005
0,092
% Kadar Abu Total =
Berat Abu
Berat Sampel
1. % Kadar Abu Total I =
0,087
2,002
2. % Kadar Abu Total II =
3.
× 100%
× 100% = 4,34%
0,138
2,005
% Kadar Abu Total III =
× 100% = 6,88%
0,092
2,005
% Kadar Abu Total Rata-Rata =
× 100% = 4,58%
4,34+6,88+4,58
3
= 5,27%
54
Universitas Sumatera Utara
Perhitungan penetapan kadar abu tidak larut asam dari serbuk simplisia daun
senduduk
No
Berat Sampel (g)
Berat Abu (g)
1
2,002
0,008
2
2,005
0,014
3
2,005
0,010
% Kadar Abu tidak Larut Asam =
1. % Kadar Abu Total I =
Berat Sampel
0,008
2,002
2. % Kadar Abu Total II =
3.
Berat Abu
× 100% = 0,39%
0,014
2,005
% Kadar Abu Total III =
× 100%
× 100% = 0,69%
0,010
2,005
× 100% = 0,49%
% Kadar Abu tidak Larut Asam Rata-Rata =
0,39+0,69+0,49
3
= 0,52%
55
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 6. Alat yang digunakan
Modifikasi alat penampung urin
Spektrofotometer serapan atom
56
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 7. Data volume urin (ml), kadar natrium, dan kadar kalium (meq/l)
No
1
Parameter
Volume urin
(ml)
2
Rata-rata ±
SD
Kadar
natrium
(meq/l)
3
Rata-rata ±
SD
Kadar
kalium
(meq/l)
Rata-rata ±
SD
Kontrol
CMC Na
0,5%
Furosemid
Ekstrak Etanol Daun Senduduk
1,1
1,3
1,4
1,6
1,3
1,34 ±
0,18
27,89
29,19
35,35
36,48
30,93
31,97 ±
3,78
16,03
19,87
21,09
22,34
17,78
19,42 ±
2,53
4,2
4
3,8
3,8
3,6
3,88 ±
0,22
102,4
94,27
95,48
99,31
92,62
96,81 ±
3,96
57,35
51,53
52,49
48,35
46,74
51,29 ±
4,11
Dosis
Dosis
Dosis
400
500
600 mg/
mg/kg bb mg/kg bb
kg bb
2,5
2,5
3,2
2,2
3,1
3,1
1,9
2,6
3,5
1,9
2,5
2,9
2,5
2,8
3,2
2,2 ±
2,7 ±
3,18 ±
0,30
0,25
0,21
52,48
60,48
74,98
50,39
49,69
73,68
46,30
63,07
83,41
48,48
57,26
79,76
53,96
61,00
76,89
50,32 ±
58,30 ± 77,74 ±
3,06
5,24
3,91
25,81
27,70
39,22
29,20
37,02
40,94
27,65
38,26
41,92
26,48
36,22
37,77
29,98
29,94
36,40
27,82 ±
33,83 ± 39,25 ±
1,76
4,70
2,25
57
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 8. Contoh perhitungan dosis kontrol CMC-Na 0,5%
-
Pembuatan CMC 0,5%
= 500 mg/ 100 ml
= 5 mg/ml
-
Perhitungan CMC-Na 0,5% pada tikus 200
=
1
100
× 200 g
Volume yang diberikan = 2 ml
58
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 9. Contoh perhitungan dosis furosemid
Dosis penggunaan furosemid 10 mg/kg bb pada tikus
-
Menurut FI edisi III, penetapan kadar tablet = 20 tablet, maka diambil
20 tablet furosemid, digerus dan ditimbang berat totalnya = 3384,8 mg
-
Berat bahan aktif furosemid dalam 20 tablet furosemid adalah
= 40 mg/tab x 20 tab = 800 mg.
-
Serbuk tablet furosemid yang digunakan :
10
800 mg
-
=
X
x = 42,31 ≈ 42 mg
3384 ,8 mg
1
Volume yang diberikan = 100 x BB
Misal BB tikus = 200 g
1
Maka volume suspensi furosemid yang diberikan 100 x 200 g = 2 ml.
59
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 10.Contoh perhitungan dosis dari ekstrak etanol daun senduduk
1. Untuk dosis 400 mg/kg bb pada tikus 153,2 g
=
153,2 g
1000 g
× 400 mg/kg bb = 61,28 mg
Volume yang diberikan =
61,28 mg
400 mg
× 10 ml = 1,53 ml
2. Untuk dosis 500 mg/kg bb pada tikus 158,2 g
=
158,2 g
1000 g
× 500 mg/kg bb = 79,1 mg
Volume yang diberikan =
79,1 mg
500 mg
× 10 ml = 1,58 ml
3. Untuk dosis 600 mg/kg bb pada tikus 162,1
=
162,1 g
1000 g
× 600 mg/kg bb = 97,26 mg
Volume yang diberikan =
97,26 mg
600 mg
× 10 ml = 1,62 mg
60
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 11.Hasil pengujian aas dari volume urin untuk kadar Na+ dan K+
No
Kelompok pengujian
1
Kontrol CMC-Na
0,5%
2
Furosemid
3
EEDS dosis 400
mg/kg bb
4
EEDS dosis 500
mg/kg bb
5
EEDS dosis 600
mg/kg bb
Tikus
1
2
3
4
5
1
2
3
4
5
1
2
3
4
5
1
2
3
4
5
1
2
3
4
5
Konsentrasi
Na+
0,2566
0,2686
0,3253
0,3357
0,2846
0,9416
0,8673
0,8785
0,9137
0,8521
0,4828
0,4636
0,4260
0,4460
0,4964
0,5564
0,4572
0,5803
0,5268
0,5612
0,6898
0,6779
0,7674
0,7338
0,7074
K+
2,5000
3,1000
3,2895
3,4842
2,7737
8,9474
8,0395
8,1895
7,5421
7,2921
4,0263
4,5553
4,3132
4,1316
4,6762
4,3210
5,7763
5,9684
5,6500
4,6711
6,1184
6,3868
6,5395
5,8921
5,6789
61
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 12. Contoh perhitungan kadar elektrolit
mcg
Konsentrasi ( ml )
× volume sampel × fp
Kadar Na =
volume pemipetan sampel (ml )
Ket: fp = faktor pengenceran
Pembacaan pada AAS = 0,2566 mcg/ml
Kadar Na =
0,2566 mcg /ml
1 ml
× 100 × 25 = 641,5 mcg/ml
= 0,6415 mg/ml
mg
Kadar Na ( ml )
meq/l =
× 1 meq
BM Na
=
0,6415 mg /ml
23
× 1 meq = 0,02789 meq/ml
= 27,89 meq/l
62
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 13. Data kalibrasi natrium dengan aas, perhitungan persamaan garis
regresi dan koefisien korelasi
No
1
2
3
4
5
6
No
1
2
3
4
5
6
∑
X
0,0000
0,2000
0,4000
0,6000
0,8000
1,0000
3,0000
x = 0,5000
Y
-0,0004
0,0260
0,0491
0,0762
0,0987
0,1257
0,3753
ȳ = 0,06255
Absorbansi
(Y)
-0,0004
0,0260
0,0491
0,0762
0,0987
0,1257
XY
0
0,0052
0,01964
0,04572
0,07896
0,1257
0,27522
X2
0
0,0400
0,1600
0,3600
0,6400
1,0000
2,2000
Y2
0,00000016
0,000676
0,00241081
0,00580644
0,00974169
0,01580049
0,03443559
∑XY −(∑X)(∑Y)/n
a=
=
Konsentrasi (µg/ml)
(X)
0,0000
0,2000
0,4000
0,6000
0,8000
1,0000
∑X 2 −(∑X)²/n
0,27522 −(3,0000)(0,3753 )/6 0,08757
=
= 0,1251
0,7
2,2000 −(3,0000 )2 /6
Y=aX+b
b=Y–aX
= 0,06255 – 0,1251 (0,5000)
= 0,0000
Persamaan regresi : Y = 0,1251 (X) + 0,0000
Dengan nilai r sebagai berikut :
r =
=
∑XY −(∑X)(∑Y)/n
�∑X 2 −(∑X)²/n (∑Y 2 −(∑Y)2 /n)
0,27522 −(3,0000)(0,3753 )/6
=
0,08757
�(2,2000)−(3,0000 )²/6(0,03443559 )−(0,3753 )2 /6 0,08759
= 0,9997
63
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 14.Data kalibrasi kalium dengan AAS, perhitungan persamaan garis
regresi dan koefisien korelasi
No
Konsentrasi (µg/ml)
(X)
0,0000
2,0000
4,0000
6,0000
8,0000
10,000
1
2
3
4
5
6
No
1
2
3
4
5
6
∑
Y
0,0011
0,0880
0,1588
0,2297
0,3086
0,3868
1,173
ȳ = 0,1955
XY
0
0,176
0,6352
0,3782
2,4688
3,868
0,27522
X2
0
0,0400
0,1600
0,3600
0,6400
1,0000
2,2000
Y2
0,00000016
0,000676
0,00241081
0,00580644
0,00974169
0,01580049
0,03443559
∑XY −(∑X)(∑Y)/n
a=
=
X
0,0000
2,0000
4,0000
6,0000
8,0000
10,0000
30,0000
x = 5,0000
Absorbansi
(Y)
0,0011
0,0880
0,1588
0,2297
0,3086
0,3868
∑X 2 −(∑X)²/n
8,5262−(30,0000)(1,173)/6 2,6612
=
= 0,0380
220,0000 −(30,0000 )2 /6
70
Y=aX+b
b=Y–aX
= 0,1955 – 0,0380 (5,0000)
= 0,0055
Persamaan regresi : Y = 0,0380 (X) + 0,0055
Dengan nilai r sebagai berikut :
∑XY −(∑X)(∑Y)/n
r =
�∑X 2 −(∑X)²/n (∑Y 2 −(∑Y)2 /n)
=
=
8,5262 −(30,0000 )(1,173)/6
�(220,0000)−(30,0000 )²/6(0,33057294 )−(1,173)2 /6
2,6612
2,6622
= 0,9996
64
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 15.Skema pembuatan ekstrak etanol daun senduduk dan uji aktivitas
diuretik
Serbuk simplisia daun senduduk
Direndam dengan pelarut etanol 96% selama 3 jam
Dipindahkan kedalam perkolator
Didiamkan selama 24 jam
Dibuka kran dan dibiarkan ekstrak menetes dari
perkolator
Ampas
Perkolat
Dipekatkan dengan
rotary evaporator
Ekstrak etanol daun senduduk
Uji aktivitas diuretik
Tikus
Dikondisikan selama 1 minggu
Dipuasakan selama ± 18 jam
Diberi ekstrak etanol daun senduduk
(EEDS) dengan dosis berbeda
Urin
Volume
Elektrolit
Diukur dengan
AAS
Kadar Na+ dan K+ (meq/l)
65
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 16.Hasil Data Statistik ANAVA dengan Uji Tukey
Data statistik volume urin per jam
ANOVA
rata_rata_vol_urin_jam_ke_1
Sum of Squares
Between Groups
Df
Mean Square
.466
4
.117
Within Groups
6.128
20
.306
Total
6.594
24
F
Sig.
.381
.820
rata_rata_vol_urin_jam_ke_1
Kelompok
Subset for alpha
= 0.05
N
Tukey HSD
a
1
CMC-Na 0,5%
5
.2800
EEDS 400 mg/kg bb
5
.5000
EEDS 500 mg/kg bb
5
.6000
EEDS 600 mg/kg bb
5
.6200
Furosemid
5
.6600
Sig.
.812
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
ANOVA
rata_rata_vol_urin_jam_ke_2
Sum of Squares
Df
Mean Square
Between Groups
3.270
4
.818
Within Groups
2.744
20
.137
Total
6.014
24
F
Sig.
5.959
.003
rata_rata_vol_urin_jam_ke_2
Kelompok
Subset for alpha = 0.05
N
Tukey HSDa
1
2
3
CMC-Na 0,5%
5
.6000
EEDS 400 mg/kg bb
5
.8400
EEDS 500 mg/kg bb
5
1.0600
1.0600
EEDS 600 mg/kg bb
5
1.1600
1.1600
Furosemid
5
Sig.
1.6800
.159
.099
66
Universitas Sumatera Utara
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
ANOVA
rata_rata_vol_urin_jam_ke_3
Sum of Squares
Between Groups
Mean Square
10.208
4
2.552
5.512
20
.276
15.720
24
Within Groups
Total
Df
F
Sig.
9.260
.000
rata_rata_vol_urin_jam_ke_3
Kelompok
Subset for alpha = 0.05
N
Tukey HSDa
1
2
3
CMC-Na 0,5%
5
.6600
EEDS 400 mg/kg bb
5
1.4600
1.4600
EEDS 500 mg/kg bb
5
1.6200
1.6200
EEDS 600 mg/kg bb
5
Furosemid
5
1.9400
1.9400
2.6200
Sig.
.061
.607
.280
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
ANOVA
rata_rata_vol_urin_jam_ke_4
Sum of Squares
Between Groups
Mean Square
16.950
4
4.238
9.844
20
.492
26.794
24
Within Groups
Total
Df
F
Sig.
8.610
.000
rata_rata_vol_urin_jam_ke_4
Kelompok
Subset for alpha = 0.05
N
Tukey HSD
a
1
2
3
CMC-Na 0,5%
5
.8600
EEDS 400 mg/kg bb
5
1.8600
1.8600
EEDS 500 mg/kg bb
5
2.0600
2.0600
2.0600
EEDS 600 mg/kg bb
5
2.5000
2.5000
Furosemid
5
3.3800
67
Universitas Sumatera Utara
Sig.
a
Duncan
.089
.609
CMC-Na 0,5%
5
EEDS 400 mg/kg bb
5
1.8600
EEDS 500 mg/kg bb
5
2.0600
EEDS 600 mg/kg bb
5
2.5000
Furosemid
5
.052
.8600
2.5000
3.3800
Sig.
1.000
.187
.061
F
Sig.
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
ANOVA
rata_rata_vol_urin_jam_ke_5
Sum of Squares
Between Groups
Mean Square
18.572
4
4.643
1.148
20
.057
19.720
24
Within Groups
Total
df
80.889
.000
rata_rata_vol_urin_jam_ke_5
Kelompok
Subset for alpha = 0.05
N
Tukey HSDa
1
CMC-Na 0,5%
5 1.3400
EEDS 400 mg/kg
5
2
3
4
5
2.2000
bb
EEDS 500 mg/kg
5
2.7000
bb
EEDS 600 mg/kg
5
3.1800
bb
Furosemid
5
Sig.
3.8800
1.000
1.000
1.000
1.000
1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
68
Universitas Sumatera Utara
Data statistik volume urin total
ANOVA
volume_urin
Sum of Squares
Between Groups
Within Groups
Total
Df
Mean Square
18.572
4
4.643
1.148
20
.057
19.720
24
F
Sig.
80.889
.000
volume_urin
Kelompok
Subset for alpha = 0.05
N
Tukey HSD
a
1
CMC-Na
5
EEDS
5
2
3
4
5
1.3400
2.2000
400mg/kgbb
EEDS
5
2.7000
500mg/kgbb
EEDS
5
3.1800
600mg/kgbb
Furosemid
5
Sig.
3.8800
1.000
1.000
1.000
1.000
1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
Data statistik kadar natrium pada urin tikus jantan
ANOVA
kadar_Na
Sum of Squares
Between Groups
Within Groups
Total
Df
Mean Square
12530.170
4
3132.542
328.467
20
16.423
12858.637
24
F
190.737
Sig.
.000
69
Universitas Sumatera Utara
kadar_Na
kelompok
Subset for alpha = 0.05
N
Tukey
HSD
a
1
CMC-Na 0,5%
5
EEDS
5
2
3
4
5
31.9680
50.3220
400mg/kgbb
EEDS
5
58.3000
500mg/kgbb
EEDS
5
77.7440
600mg/kgbb
Furosemid
5
96.8060
Sig.
1.000
1.000
1.000
1.000
1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a.
Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
Data statistik kadar kalium pada urin tikus jantan
ANOVA
kadar_k
Sum of Squares
Between Groups
Within Groups
Total
Df
Mean Square
2883.721
4
720.930
214.222
20
10.711
3097.943
24
F
Sig.
67.307
.000
kadar_k
Kelompok
Subset for alpha = 0.05
N
Tukey
HSDa
1
2
3
CMC-Na 0,5%
5
EEDS
5
27.8240
5
33.8280
4
5
19.4220
400mg/kgbb
EEDS
33.8280
500mg/kgbb
EEDS
5
39.2500
600mg/kgbb
Furosemid
5
Sig.
51.2920
1.000
.060
.104
1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
70
Universitas Sumatera Utara