Penetapan Kadar Cefadroxil Dalam Sediaan Kapsul Dengan Nama Dagang Dan Generik Secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi
PENETAPAN KADAR CEFADROXIL DALAM
SEDIAAN KAPSUL DENGAN NAMA DAGANG DAN
GENERIK SECARA KROMATOGRAFI CAIR
KINERJA TINGGI
SKRIPSI
Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh
gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
ELLORA
NIM 081501037
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2012
Universitas Sumatera Utara
PENETAPAN KADAR CEFADROXIL DALAM
SEDIAAN KAPSUL DENGAN NAMA DAGANG DAN
GENERIK SECARA KROMATOGRAFI CAIR
KINERJA TINGGI
SKRIPSI
Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh
gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
ELLORA
NIM 081501037
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2012
Universitas Sumatera Utara
PENGESAHAN SKRIPSI
PENETAPAN KADAR CEFADROXIL DALAM
SEDIAAN KAPSUL DENGAN NAMA DAGANG DAN
GENERIK SECARA KROMATOGRAFI CAIR
KINERJA TINGGI
OLEH:
ELLORA
NIM 081501037
Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal : Juli 2012
Pembimbing I,
Panitia Penguji,
Prof. Dr. rer. nat. E. De Lux Putra, S.U., Apt. Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt.
NIP 195306191983031001
NIP 195008281976032002
Prof. Dr. rer. nat. E. De Lux Putra, S.U., Apt.
Pembimbing II,
NIP 195306191983031001
Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt.
NIP 195201041980031002
Drs. Syafruddin, M.S., Apt.
NIP 194811111976031003
Drs. Nahitma Ginting, M.Si., Apt.
NIP 195406281983031002
Medan,
Juli 2012
Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
Dekan,
Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt.
NIP 195311281983031002
Universitas Sumatera Utara
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur penulis ucapkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas
segala karuniaNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan
penyusunan skripsi ini. Skripsi ini disusun untuk melengkapi salah satu syarat
mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera
Utara, dengan judul Penetapan Kadar Cefadroxil Dalam Sediaan Kapsul dengan
Nama Dagang dan Generik secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi.
Pada kesempatan ini dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan
terima kasih yang sebesar-besarnya kepada, Bapak Prof. Dr. Sumadio
Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi USU Medan, yang telah
memberikan fasilitas sehingga penulis dapat menyelesaikan pendidikan. Bapak
Prof. Dr. rer. nat. Effendy De Lux Putra, S.U., Apt., dan Bapak Drs. Fathur
Rahman Harun, M.Si., Apt., yang telah membimbing dan memberikan petunjuk
serta saran-saran selama penelitian hingga selesainya skripsi ini. Ibu Prof. Dr. Siti
Morin Sinaga, M.Sc., Apt., Bapak Drs. Syafruddin, M.S., Apt., dan Bapak Drs.
Nahitma Ginting, M.Si., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan kritik,
saran dan arahan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. Bapak dan Ibu
staf pengajar Fakultas Farmasi USU Medan yang telah mendidik selama
perkuliahan dan Bapak Drs. Rasmadin Muchtar, M.S., Apt., selaku penasehat
akademik yang selalu memberikan bimbingan, perhatian dan motivasi kepada
penulis selama masa perkuliahan.
Penulis juga mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang tiada
terhingga kepada Papa dan Mama yang telah memberikan cinta dan kasih sayang
Universitas Sumatera Utara
yang tidak ternilai dengan apapun, pengorbanan baik materi maupun motivasi
beserta doa yang tulus yang tidak pernah berhenti. Kakak, Hen dan adik-adikku
tercinta serta seluruh keluarga yang selalu mendoakan dan memberikan semangat.
Sahabat-sahabat terbaikku STF 2008, terima kasih untuk perhatian, semangat, doa
dan kebersamaannya selama ini.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam penulisan skripsi ini masih
jauh dari kesempurnaan, oleh karena itu dengan segala kerendahan hati, penulis
menerima kritik dan saran demi kesempurnaan skripsi ini. Akhirnya, penulis
berharap semoga skripsi ini dapat memberi manfaat bagi kita semua.
Medan, Juli 2012
Penulis,
Ellora
NIM 081501037
Universitas Sumatera Utara
PENETAPAN KADAR CEFADROXIL DALAM SEDIAAN KAPSUL
DENGAN NAMA DAGANG DAN GENERIK SECARA KROMATOGRAFI
CAIR KINERJA TINGGI
ABSTRAK
Kapsul cefadroxil merupakan salah satu antibiotik golongan β-laktam
yang banyak terdapat di pasaran. Penetapan kadar kapsul cefadroxil dalam USP
Edisi XXX tahun 2007 ditentukan secara KCKT menggunakan fase gerak
campuran buffer pH 5 dan asetonitril (960:40). Tujuan penelitian ini adalah
menetapkan kadar cefadroxil dalam kapsul generik dan nama dagang secara
KCKT menggunakan kolom VP-ODS (250 x 4,6 mm) (Shimadzu) dengan fase
gerak metanol:air (60:40), laju air 1 ml/menit dan dideteksi pada panjang
gelombang 264 nm.. Untuk menguji validitas metode ini dilakukan uji akurasi,
presisi, batas deteksi (LOD) dan batas kuantitasi (LOQ).
Uji validasi metode yang dilakukan terhadap kapsul Librocef (PT
Hexpharm Jaya) diperoleh persen perolehan kembali sebesar 99,86%, Relatif
Standar Deviasi (RSD) = 0,86%. Ini berarti metode yang digunakan memiliki
ketepatan dan ketelitian yang baik. Batas Deteksi (LOD) = 0,8974 µg/ml dan
Batas Kuantitasi (LOQ) = 2,9915 µg/ml.
Hasil penelitian menunjukkan kadar cefadroxil (PT Dexa Medica)
= 118,06% ± 1,51%, cefadroxil (PT Hexpharm Jaya) = 117,56% ± 0,97%,
cefadroxil (PT Bernofarm) = 114,41% ± 1,34%, cefadroxil (PT Sanbe Farma) =
118,87% ± 0,64%, Longcef (PT Dankos) = 96,25% ± 0,58%, Librocef (PT
Hexpharm Jaya) = 102,94% ± 1,57%, Alxil (PT Bernofarm) = 116,03% ± 1,24%,
Cefat (PT Sanbe Farma) = 110,88% ± 1,62%. Hal ini menunjukkan bahwa semua
kapsul cefadroxil yang dianalisis memenuhi persyaratan kadar dari sediaan kapsul
yang tercantum dalam USP Edisi XXX tahun 2007, yaitu mengandung cefadroxil
tidak kurang dari 90% dan tidak lebih dari 120% dari jumlah yang tertera pada
etiket.
Kata kunci : Cefadroxil, KCKT, validasi, generik dan nama dagang.
Universitas Sumatera Utara
DETERMINATION OF CEFADROXIL IN CAPSULE WITH TRADE AND
GENERIC NAMES BY HIGH PERFORMANCE LIQUID
CHROMATOGRAPHY
ABSTRACT
Capsule cefadroxil is one of the β-lactam group of antibiotics that can be
found easily in the market. Determination of capsule cefadroxil in USP 30th
Edition 2007 confirmed by HPLC use mobile phase of buffer pH 5 and
acetonitrile (960:40). The purpose of this study is the determination of cefadroxil
in the capsule of generic and trade names by HPLC using column VP-ODS (250 x
4,6 mm) (Shimadzu) with mobile phase methanol:water (60:40), flow rate 1
ml/minute and detected at wavelength of 264 nm.. The validity test of this method
is performed test of the accuracy, the precision, the Limit of Detection (LOD) and
the Limit of Quantitation (LOQ).
Validation test performed at the Librocef capsules (PT Hexpharm Jaya)
show the percent recovery 99.86%, the Relative Standard Deviation (RSD) =
0.86%. This means that the method used has good accuracy and precision. The
Limit of Detection (LOD) = 0.8974 µg/ml and the Limit of Quantitation (LOQ) =
2.9915 µg/ml.
The results showed that the levels of cefadroxil (PT Dexa Medica)
= 118.06% ± 1.51%, cefadroxil (PT Hexpharm Jaya) = 117.56% ± 0.97%,
cefadroxil (PT Bernofarm) = 114.41% ± 1.34%, cefadroxil (PT Sanbe Farma) =
118.87% ± 0.64%, Longcef (PT Dankos) = 96.25% ± 0.58%, Librocef (PT
Hexpharm Jaya) = 102.94% ± 1.57%, Alxil (PT Bernofarm) = 116.03% ± 1.24%,
Cefat (PT Sanbe Farma) = 110.88% ± 1.62%. This indicated that all the analyzed
cefadroxil capsules meet the requirements levels specified in USP 30th Edition
2007, which contains not less than cefadroxil 90.0 percent and not more than
120.0 percent of the labeled amount.
Keywords : Cefadroxil, HPLC, validation, generic and trade names.
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL .............................................................................
i
LEMBAR PENGESAHAN ...................................................................
iii
KATA PENGANTAR ...........................................................................
iv
ABSTRAK ............................................................................................
vi
ABSTRACT ..........................................................................................
vii
DAFTAR ISI .........................................................................................
viii
DAFTAR TABEL .................................................................................
xii
DAFTAR GAMBAR .............................................................................
xiii
DAFTAR LAMPIRAN ..........................................................................
xiv
BAB I
BAB II
PENDAHULUAN .................................................................
1
1.1 Latar Belakang ................................................................
1
1.2 Perumusan Masalah ........................................................
2
1.3 Hipotesis .........................................................................
2
1.4 Tujuan Penelitian ............................................................
3
1.5 Manfaat Penelitian ..........................................................
3
TINJAUAN PUSTAKA ........................................................
4
2.1 Cefadroxil .......................................................................
4
2.1.1 Sifat Fisikokimia ....................................................
4
2.1.2 Farmakologi ...........................................................
4
2.2 Kromatografi ..................................................................
5
2.2.1 Penggunaan Kromatografi ......................................
5
2.3 Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) .....................
5
Universitas Sumatera Utara
2.3.1 Cara Kerja KCKT ..................................................
6
2.3.2 Komponen KCKT ..................................................
7
2.3.3 Wadah Fase Gerak .................................................
7
2.3.4 Pompa ....................................................................
7
2.3.5 Injektor ..................................................................
8
2.3.6 Kolom ....................................................................
9
2.3.7 Detektor .................................................................
9
2.3.8 Pengolahan Data ....................................................
10
2.3.9 Fase Gerak .............................................................
10
2.3.10 Fase Diam .............................................................
11
2.3.11 Elusi Gradien dan Isokratik .................................
11
2.3.12 Jenis Pemisahan KCKT ........................................
12
2.4 Validasi Metode ..............................................................
12
2.4.1 Akurasi (Kecermatan) ............................................
13
2.4.2 Presisi (Keseksamaan) ...........................................
13
2.4.3 Batas Deteksi (LOD) ..............................................
13
2.4.4 Batas Kuantitasi (LOQ) ..........................................
13
BAB III METODE PENELITIAN .......................................................
14
3.1 Tempat dan Waktu Penelitian ..........................................
14
3.2 Alat .................................................................................
14
3.3 Bahan ..............................................................................
14
3.4 Pengambilan Sampel .......................................................
15
3.5 Prosedur Penelitian .........................................................
15
3.5.1 Pembuatan Fase Gerak ...........................................
15
Universitas Sumatera Utara
3.5.2 Prosedur Analisis ...................................................
15
3.5.2.1 Penyiapan KCKT .......................................
15
3.5.2.2 Penentuan Perbandingan Fase Gerak yang
Optimum ....................................................
15
3.5.3 Analisis Kualitatif Menggunakan KCKT ................
16
3.5.3.1 Uji Identifikasi Cefadroxil Menggunakan
KCKT .........................................................
16
3.5.4 Analisis Kuantitatif ................................................
16
3.5.4.1 Pembuatan Larutan Induk Baku Cefadroxil
BPFI ............................................................
16
3.5.4.2 Pembuatan Kurva Kalibrasi Cefadroxil BPFI
....................................................................
16
3.5.4.3 Penetapan Kadar Sampel ............................
17
3.5.4.4 Analisis Data Penetapan Kadar Secara
Statistik .......................................................
17
3.5.5 Validasi Metode .....................................................
18
3.5.5.1 Akurasi (Kecermatan) ................................
18
3.5.5.2 Presisi (Keseksamaan) ................................
19
3.5.5.3 Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi
(LOQ) .........................................................
20
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ..............................................
21
4.1 Penentuan Komposisi Fase Gerak untuk Mendapatkan
Kondisi Kromatografi yang Optimal ...............................
21
4.2 Analisis Kualitatif ...........................................................
21
4.3 Analisis Kuantitatif ........................................................
23
4.3.1 Penentuan Kurva Kalibrasi .....................................
23
4.3.2 Penetapan Kadar Analit dalam Sampel yang
Dianalisis ...............................................................
24
Universitas Sumatera Utara
4.4 Hasil Uji Validasi ............................................................
25
KESIMPULAN DAN SARAN ..............................................
28
5.1 Kesimpulan .....................................................................
28
5.2 Saran ...............................................................................
28
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................
29
LAMPIRAN ..........................................................................................
31
BAB V
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1.
Tabel 2.
Tabel 3.
Pengaruh Komposisi Fase Gerak terhadap Parameter
Kromatogram .......................................................................
21
Hasil Penetapan Kadar Cefadroxil dalam Sediaan Kapsul
dengan Nama Dagang dan Generik ......................................
25
Hasil Pengujian Validasi, dengan parameter Akurasi, Presisi,
Batas Deteksi (LOD), Batas Kuantitasi (LOQ) Cefadroxil
pada kapsul Librocef (PT Hexpharm Jaya) dengan Menggunakan
Metode Adisi Standar ...........................................................
26
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1.
Struktur Cefadroxil ..........................................................
4
Gambar 2.
Instrumen Dasar KCKT ...................................................
7
Gambar 3.
Tipe Injektor Putaran .......................................................
9
Gambar 4.
Kromatogram kapsul cefadroxil secara KCKT menggunakan
kolom Shimadzu VP-ODS (250 x 4,6 mm) dengan perbandingan fase gerak metanol:air (60:40) dan laju alir 1 ml/menit,
volume penyuntikan 20 µl dan deteksi pada panjang
gelombang 264 nm ...........................................................
22
Gambar 5.
Kromatogram hasil spike secara KCKT menggunakan kolom
Shimadzu VP-ODS (250 x 4,6 mm) dengan perbandingan fase
gerak metanol:air (60:40) dan laju alir 1 ml/menit, volume
penyuntikan 20 µl dan deteksi pada panjang gelombang
264 nm ............................................................................
23
Gambar 6.
Kurva kalibrasi Cefadroxil BPFI secara KCKT menggunakan
kolom Shimadzu VP-ODS (250 x 4,6 mm) dengan perbandingan
fase gerak metanol:air (60:40) dan laju alir 1 ml/menit, volume
penyuntikan 20 µl dan deteksi pada panjang gelombang
264 nm .............................................................................
24
Gambar 7.
Alat KCKT Shimadzu .....................................................
124
Gambar 8.
Alat Sonifikator Branson (1510).......................................
125
Gambar 9.
Pompa Vakum (Gast DO A-PG04-BN) dan Alat Penyaring
Fase Gerak ......................................................................
125
Gambar 10. Sonifikator Kudos ............................................................
126
Gambar 11. Neraca Analitik ...............................................................
126
Syringe KCKT....................................................................
127
Gambar 12.
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Kromatogram Penyuntikan Larutan Cefadroxil untuk Mencari
Komposisi Fase Gerak Metanol-Air yang Optimum pada
Analisis ............................................................................
31
Lampiran 2. Kromatogram Larutan Cefadroxil BPFI pada Pembuatan
Kurva Kalibrasi ...............................................................
33
Lampiran 3. Perhitungan Persamaan Regresi dari Kurva Kalibrasi
Cefadroxil BPFI yang Diperoleh secara KCKT pada
Panjang Gelombang 264 nm ............................................
43
Lampiran 4. Perhitungan Recovery dengan Metode Adisi Standar .......
45
Lampiran 5. Kromatogram Hasil Recovery dari sampel Librocef
(PT Hexpharm Jaya) ........................................................
49
Lampiran 6. Hasil Pengujian Validasi, dengan parameter Akurasi, Presisi,
Batas Deteksi (LOD), Batas Kuantitasi (LOQ) Cefadroxil
pada Kapsul Librocef (PT Hexpharm Jaya) .....................
61
Lampiran 7. Contoh Perhitungan % Recovery dengan Metode Adisi
Standar ............................................................................
62
Lampiran 8. Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas kuantitasi (LOQ)
Persamaan Regresi : Y = ax + b.......................................
63
Lampiran 9. Kromatogram dari Larutan kapsul Cefadroxil (PT Dexa
Medica)............................................................................
64
Lampiran 10. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya
dari Penyuntikkan Larutan kapsul Cefadroxil (PT Dexa
Medica)............................................................................
68
Lampiran 11. Kromatogram dari kapsul Cefadroxil (PT Hexpharm Jaya)
........................................................................................
70
Lampiran 12. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya
dari Penyuntikkan Larutan kapsul Cefadroxil (PT Hexpharm
Jaya) ...............................................................................
74
Lampiran 13. Kromatogram dari larutan kapsul Cefadroxil (PT Bernofarm)
........................................................................................
76
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 14. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya
dari Penyuntikkan Larutan kapsul Cefadroxil (PT Bernofarm)
........................................................................................
80
Lampiran 15. Kromatogram dari Larutan kapsul Cefadroxil (PT Sanbe
Farma) .............................................................................
82
Lampiran 16. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya
dari Penyuntikkan Larutan kapsul Cefadroxil (PT Sanbe
Farma) ..............................................................................
86
Lampiran 17. (Lanjutan) Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar
Sebenarnya dari Larutan kapsul Cefadroxil (PT Sanbe
Farma) .............................................................................
87
Lampiran 18. Kromatogram dari Larutan kapsul Longcef (PT Dankos) .
89
Lampiran 19. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya
dari Penyuntikkan Larutan kapsul Longcef (PT Dankos) .
93
Lampiran 20. (Lanjutan) Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar
Sebenarnya dari Larutan kapsul Longcef (PT Dankos) ....
94
Lampiran 21. Kromatogram dari Larutan kapsul Librocef (PT Hexpharm
Jaya) ................................................................................
96
Lampiran 22. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya dari
Larutan kapsul Librocef (PT Hexpharm Jaya) ...................
100
Lampiran 23. Kromatogram dari Larutan kapsul Alxil (PT Bernofarm)...
102
Lampiran 24. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya dari
Larutan kapsul Alxil (PT Bernofarm) ...............................
106
Lampiran 25. Kromatogram dari Larutan kapsul Cefat (PT Sanbe
Farma)... ..........................................................................
108
Lampiran 26. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya dari
Larutan kapsul Cefat (PT Sanbe Farma) ...........................
112
Lampiran 27. Contoh Perhitungan Penimbangan Sampel .......................
114
Lampiran 28. Hasil Analisa Kadar Cefadroxil dalam Sampel ................
115
Lampiran 29. Contoh Perhitungan untuk Mencari Kadar Kapsul Cefadroxil
(PT Dexa Medica) ............................................................
118
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 30. Daftar Spesifikasi Sampel ................................................
119
Lampiran 31. Tabel Nilai Distribusi t .....................................................
122
Lampiran 32. Sertifikat Cefadroxil BPFI................................................
123
Lampiran 33. Gambar alat KCKT (Shimadzu) .......................................
124
Lampiran 34. Gambar Sonifikator (Branson 1510) dan Penyaring ..........
125
Universitas Sumatera Utara
SEDIAAN KAPSUL DENGAN NAMA DAGANG DAN
GENERIK SECARA KROMATOGRAFI CAIR
KINERJA TINGGI
SKRIPSI
Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh
gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
ELLORA
NIM 081501037
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2012
Universitas Sumatera Utara
PENETAPAN KADAR CEFADROXIL DALAM
SEDIAAN KAPSUL DENGAN NAMA DAGANG DAN
GENERIK SECARA KROMATOGRAFI CAIR
KINERJA TINGGI
SKRIPSI
Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh
gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
ELLORA
NIM 081501037
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2012
Universitas Sumatera Utara
PENGESAHAN SKRIPSI
PENETAPAN KADAR CEFADROXIL DALAM
SEDIAAN KAPSUL DENGAN NAMA DAGANG DAN
GENERIK SECARA KROMATOGRAFI CAIR
KINERJA TINGGI
OLEH:
ELLORA
NIM 081501037
Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal : Juli 2012
Pembimbing I,
Panitia Penguji,
Prof. Dr. rer. nat. E. De Lux Putra, S.U., Apt. Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt.
NIP 195306191983031001
NIP 195008281976032002
Prof. Dr. rer. nat. E. De Lux Putra, S.U., Apt.
Pembimbing II,
NIP 195306191983031001
Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt.
NIP 195201041980031002
Drs. Syafruddin, M.S., Apt.
NIP 194811111976031003
Drs. Nahitma Ginting, M.Si., Apt.
NIP 195406281983031002
Medan,
Juli 2012
Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
Dekan,
Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt.
NIP 195311281983031002
Universitas Sumatera Utara
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur penulis ucapkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas
segala karuniaNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan
penyusunan skripsi ini. Skripsi ini disusun untuk melengkapi salah satu syarat
mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera
Utara, dengan judul Penetapan Kadar Cefadroxil Dalam Sediaan Kapsul dengan
Nama Dagang dan Generik secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi.
Pada kesempatan ini dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan
terima kasih yang sebesar-besarnya kepada, Bapak Prof. Dr. Sumadio
Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi USU Medan, yang telah
memberikan fasilitas sehingga penulis dapat menyelesaikan pendidikan. Bapak
Prof. Dr. rer. nat. Effendy De Lux Putra, S.U., Apt., dan Bapak Drs. Fathur
Rahman Harun, M.Si., Apt., yang telah membimbing dan memberikan petunjuk
serta saran-saran selama penelitian hingga selesainya skripsi ini. Ibu Prof. Dr. Siti
Morin Sinaga, M.Sc., Apt., Bapak Drs. Syafruddin, M.S., Apt., dan Bapak Drs.
Nahitma Ginting, M.Si., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan kritik,
saran dan arahan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. Bapak dan Ibu
staf pengajar Fakultas Farmasi USU Medan yang telah mendidik selama
perkuliahan dan Bapak Drs. Rasmadin Muchtar, M.S., Apt., selaku penasehat
akademik yang selalu memberikan bimbingan, perhatian dan motivasi kepada
penulis selama masa perkuliahan.
Penulis juga mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang tiada
terhingga kepada Papa dan Mama yang telah memberikan cinta dan kasih sayang
Universitas Sumatera Utara
yang tidak ternilai dengan apapun, pengorbanan baik materi maupun motivasi
beserta doa yang tulus yang tidak pernah berhenti. Kakak, Hen dan adik-adikku
tercinta serta seluruh keluarga yang selalu mendoakan dan memberikan semangat.
Sahabat-sahabat terbaikku STF 2008, terima kasih untuk perhatian, semangat, doa
dan kebersamaannya selama ini.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam penulisan skripsi ini masih
jauh dari kesempurnaan, oleh karena itu dengan segala kerendahan hati, penulis
menerima kritik dan saran demi kesempurnaan skripsi ini. Akhirnya, penulis
berharap semoga skripsi ini dapat memberi manfaat bagi kita semua.
Medan, Juli 2012
Penulis,
Ellora
NIM 081501037
Universitas Sumatera Utara
PENETAPAN KADAR CEFADROXIL DALAM SEDIAAN KAPSUL
DENGAN NAMA DAGANG DAN GENERIK SECARA KROMATOGRAFI
CAIR KINERJA TINGGI
ABSTRAK
Kapsul cefadroxil merupakan salah satu antibiotik golongan β-laktam
yang banyak terdapat di pasaran. Penetapan kadar kapsul cefadroxil dalam USP
Edisi XXX tahun 2007 ditentukan secara KCKT menggunakan fase gerak
campuran buffer pH 5 dan asetonitril (960:40). Tujuan penelitian ini adalah
menetapkan kadar cefadroxil dalam kapsul generik dan nama dagang secara
KCKT menggunakan kolom VP-ODS (250 x 4,6 mm) (Shimadzu) dengan fase
gerak metanol:air (60:40), laju air 1 ml/menit dan dideteksi pada panjang
gelombang 264 nm.. Untuk menguji validitas metode ini dilakukan uji akurasi,
presisi, batas deteksi (LOD) dan batas kuantitasi (LOQ).
Uji validasi metode yang dilakukan terhadap kapsul Librocef (PT
Hexpharm Jaya) diperoleh persen perolehan kembali sebesar 99,86%, Relatif
Standar Deviasi (RSD) = 0,86%. Ini berarti metode yang digunakan memiliki
ketepatan dan ketelitian yang baik. Batas Deteksi (LOD) = 0,8974 µg/ml dan
Batas Kuantitasi (LOQ) = 2,9915 µg/ml.
Hasil penelitian menunjukkan kadar cefadroxil (PT Dexa Medica)
= 118,06% ± 1,51%, cefadroxil (PT Hexpharm Jaya) = 117,56% ± 0,97%,
cefadroxil (PT Bernofarm) = 114,41% ± 1,34%, cefadroxil (PT Sanbe Farma) =
118,87% ± 0,64%, Longcef (PT Dankos) = 96,25% ± 0,58%, Librocef (PT
Hexpharm Jaya) = 102,94% ± 1,57%, Alxil (PT Bernofarm) = 116,03% ± 1,24%,
Cefat (PT Sanbe Farma) = 110,88% ± 1,62%. Hal ini menunjukkan bahwa semua
kapsul cefadroxil yang dianalisis memenuhi persyaratan kadar dari sediaan kapsul
yang tercantum dalam USP Edisi XXX tahun 2007, yaitu mengandung cefadroxil
tidak kurang dari 90% dan tidak lebih dari 120% dari jumlah yang tertera pada
etiket.
Kata kunci : Cefadroxil, KCKT, validasi, generik dan nama dagang.
Universitas Sumatera Utara
DETERMINATION OF CEFADROXIL IN CAPSULE WITH TRADE AND
GENERIC NAMES BY HIGH PERFORMANCE LIQUID
CHROMATOGRAPHY
ABSTRACT
Capsule cefadroxil is one of the β-lactam group of antibiotics that can be
found easily in the market. Determination of capsule cefadroxil in USP 30th
Edition 2007 confirmed by HPLC use mobile phase of buffer pH 5 and
acetonitrile (960:40). The purpose of this study is the determination of cefadroxil
in the capsule of generic and trade names by HPLC using column VP-ODS (250 x
4,6 mm) (Shimadzu) with mobile phase methanol:water (60:40), flow rate 1
ml/minute and detected at wavelength of 264 nm.. The validity test of this method
is performed test of the accuracy, the precision, the Limit of Detection (LOD) and
the Limit of Quantitation (LOQ).
Validation test performed at the Librocef capsules (PT Hexpharm Jaya)
show the percent recovery 99.86%, the Relative Standard Deviation (RSD) =
0.86%. This means that the method used has good accuracy and precision. The
Limit of Detection (LOD) = 0.8974 µg/ml and the Limit of Quantitation (LOQ) =
2.9915 µg/ml.
The results showed that the levels of cefadroxil (PT Dexa Medica)
= 118.06% ± 1.51%, cefadroxil (PT Hexpharm Jaya) = 117.56% ± 0.97%,
cefadroxil (PT Bernofarm) = 114.41% ± 1.34%, cefadroxil (PT Sanbe Farma) =
118.87% ± 0.64%, Longcef (PT Dankos) = 96.25% ± 0.58%, Librocef (PT
Hexpharm Jaya) = 102.94% ± 1.57%, Alxil (PT Bernofarm) = 116.03% ± 1.24%,
Cefat (PT Sanbe Farma) = 110.88% ± 1.62%. This indicated that all the analyzed
cefadroxil capsules meet the requirements levels specified in USP 30th Edition
2007, which contains not less than cefadroxil 90.0 percent and not more than
120.0 percent of the labeled amount.
Keywords : Cefadroxil, HPLC, validation, generic and trade names.
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL .............................................................................
i
LEMBAR PENGESAHAN ...................................................................
iii
KATA PENGANTAR ...........................................................................
iv
ABSTRAK ............................................................................................
vi
ABSTRACT ..........................................................................................
vii
DAFTAR ISI .........................................................................................
viii
DAFTAR TABEL .................................................................................
xii
DAFTAR GAMBAR .............................................................................
xiii
DAFTAR LAMPIRAN ..........................................................................
xiv
BAB I
BAB II
PENDAHULUAN .................................................................
1
1.1 Latar Belakang ................................................................
1
1.2 Perumusan Masalah ........................................................
2
1.3 Hipotesis .........................................................................
2
1.4 Tujuan Penelitian ............................................................
3
1.5 Manfaat Penelitian ..........................................................
3
TINJAUAN PUSTAKA ........................................................
4
2.1 Cefadroxil .......................................................................
4
2.1.1 Sifat Fisikokimia ....................................................
4
2.1.2 Farmakologi ...........................................................
4
2.2 Kromatografi ..................................................................
5
2.2.1 Penggunaan Kromatografi ......................................
5
2.3 Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) .....................
5
Universitas Sumatera Utara
2.3.1 Cara Kerja KCKT ..................................................
6
2.3.2 Komponen KCKT ..................................................
7
2.3.3 Wadah Fase Gerak .................................................
7
2.3.4 Pompa ....................................................................
7
2.3.5 Injektor ..................................................................
8
2.3.6 Kolom ....................................................................
9
2.3.7 Detektor .................................................................
9
2.3.8 Pengolahan Data ....................................................
10
2.3.9 Fase Gerak .............................................................
10
2.3.10 Fase Diam .............................................................
11
2.3.11 Elusi Gradien dan Isokratik .................................
11
2.3.12 Jenis Pemisahan KCKT ........................................
12
2.4 Validasi Metode ..............................................................
12
2.4.1 Akurasi (Kecermatan) ............................................
13
2.4.2 Presisi (Keseksamaan) ...........................................
13
2.4.3 Batas Deteksi (LOD) ..............................................
13
2.4.4 Batas Kuantitasi (LOQ) ..........................................
13
BAB III METODE PENELITIAN .......................................................
14
3.1 Tempat dan Waktu Penelitian ..........................................
14
3.2 Alat .................................................................................
14
3.3 Bahan ..............................................................................
14
3.4 Pengambilan Sampel .......................................................
15
3.5 Prosedur Penelitian .........................................................
15
3.5.1 Pembuatan Fase Gerak ...........................................
15
Universitas Sumatera Utara
3.5.2 Prosedur Analisis ...................................................
15
3.5.2.1 Penyiapan KCKT .......................................
15
3.5.2.2 Penentuan Perbandingan Fase Gerak yang
Optimum ....................................................
15
3.5.3 Analisis Kualitatif Menggunakan KCKT ................
16
3.5.3.1 Uji Identifikasi Cefadroxil Menggunakan
KCKT .........................................................
16
3.5.4 Analisis Kuantitatif ................................................
16
3.5.4.1 Pembuatan Larutan Induk Baku Cefadroxil
BPFI ............................................................
16
3.5.4.2 Pembuatan Kurva Kalibrasi Cefadroxil BPFI
....................................................................
16
3.5.4.3 Penetapan Kadar Sampel ............................
17
3.5.4.4 Analisis Data Penetapan Kadar Secara
Statistik .......................................................
17
3.5.5 Validasi Metode .....................................................
18
3.5.5.1 Akurasi (Kecermatan) ................................
18
3.5.5.2 Presisi (Keseksamaan) ................................
19
3.5.5.3 Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi
(LOQ) .........................................................
20
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ..............................................
21
4.1 Penentuan Komposisi Fase Gerak untuk Mendapatkan
Kondisi Kromatografi yang Optimal ...............................
21
4.2 Analisis Kualitatif ...........................................................
21
4.3 Analisis Kuantitatif ........................................................
23
4.3.1 Penentuan Kurva Kalibrasi .....................................
23
4.3.2 Penetapan Kadar Analit dalam Sampel yang
Dianalisis ...............................................................
24
Universitas Sumatera Utara
4.4 Hasil Uji Validasi ............................................................
25
KESIMPULAN DAN SARAN ..............................................
28
5.1 Kesimpulan .....................................................................
28
5.2 Saran ...............................................................................
28
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................
29
LAMPIRAN ..........................................................................................
31
BAB V
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1.
Tabel 2.
Tabel 3.
Pengaruh Komposisi Fase Gerak terhadap Parameter
Kromatogram .......................................................................
21
Hasil Penetapan Kadar Cefadroxil dalam Sediaan Kapsul
dengan Nama Dagang dan Generik ......................................
25
Hasil Pengujian Validasi, dengan parameter Akurasi, Presisi,
Batas Deteksi (LOD), Batas Kuantitasi (LOQ) Cefadroxil
pada kapsul Librocef (PT Hexpharm Jaya) dengan Menggunakan
Metode Adisi Standar ...........................................................
26
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1.
Struktur Cefadroxil ..........................................................
4
Gambar 2.
Instrumen Dasar KCKT ...................................................
7
Gambar 3.
Tipe Injektor Putaran .......................................................
9
Gambar 4.
Kromatogram kapsul cefadroxil secara KCKT menggunakan
kolom Shimadzu VP-ODS (250 x 4,6 mm) dengan perbandingan fase gerak metanol:air (60:40) dan laju alir 1 ml/menit,
volume penyuntikan 20 µl dan deteksi pada panjang
gelombang 264 nm ...........................................................
22
Gambar 5.
Kromatogram hasil spike secara KCKT menggunakan kolom
Shimadzu VP-ODS (250 x 4,6 mm) dengan perbandingan fase
gerak metanol:air (60:40) dan laju alir 1 ml/menit, volume
penyuntikan 20 µl dan deteksi pada panjang gelombang
264 nm ............................................................................
23
Gambar 6.
Kurva kalibrasi Cefadroxil BPFI secara KCKT menggunakan
kolom Shimadzu VP-ODS (250 x 4,6 mm) dengan perbandingan
fase gerak metanol:air (60:40) dan laju alir 1 ml/menit, volume
penyuntikan 20 µl dan deteksi pada panjang gelombang
264 nm .............................................................................
24
Gambar 7.
Alat KCKT Shimadzu .....................................................
124
Gambar 8.
Alat Sonifikator Branson (1510).......................................
125
Gambar 9.
Pompa Vakum (Gast DO A-PG04-BN) dan Alat Penyaring
Fase Gerak ......................................................................
125
Gambar 10. Sonifikator Kudos ............................................................
126
Gambar 11. Neraca Analitik ...............................................................
126
Syringe KCKT....................................................................
127
Gambar 12.
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Kromatogram Penyuntikan Larutan Cefadroxil untuk Mencari
Komposisi Fase Gerak Metanol-Air yang Optimum pada
Analisis ............................................................................
31
Lampiran 2. Kromatogram Larutan Cefadroxil BPFI pada Pembuatan
Kurva Kalibrasi ...............................................................
33
Lampiran 3. Perhitungan Persamaan Regresi dari Kurva Kalibrasi
Cefadroxil BPFI yang Diperoleh secara KCKT pada
Panjang Gelombang 264 nm ............................................
43
Lampiran 4. Perhitungan Recovery dengan Metode Adisi Standar .......
45
Lampiran 5. Kromatogram Hasil Recovery dari sampel Librocef
(PT Hexpharm Jaya) ........................................................
49
Lampiran 6. Hasil Pengujian Validasi, dengan parameter Akurasi, Presisi,
Batas Deteksi (LOD), Batas Kuantitasi (LOQ) Cefadroxil
pada Kapsul Librocef (PT Hexpharm Jaya) .....................
61
Lampiran 7. Contoh Perhitungan % Recovery dengan Metode Adisi
Standar ............................................................................
62
Lampiran 8. Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas kuantitasi (LOQ)
Persamaan Regresi : Y = ax + b.......................................
63
Lampiran 9. Kromatogram dari Larutan kapsul Cefadroxil (PT Dexa
Medica)............................................................................
64
Lampiran 10. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya
dari Penyuntikkan Larutan kapsul Cefadroxil (PT Dexa
Medica)............................................................................
68
Lampiran 11. Kromatogram dari kapsul Cefadroxil (PT Hexpharm Jaya)
........................................................................................
70
Lampiran 12. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya
dari Penyuntikkan Larutan kapsul Cefadroxil (PT Hexpharm
Jaya) ...............................................................................
74
Lampiran 13. Kromatogram dari larutan kapsul Cefadroxil (PT Bernofarm)
........................................................................................
76
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 14. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya
dari Penyuntikkan Larutan kapsul Cefadroxil (PT Bernofarm)
........................................................................................
80
Lampiran 15. Kromatogram dari Larutan kapsul Cefadroxil (PT Sanbe
Farma) .............................................................................
82
Lampiran 16. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya
dari Penyuntikkan Larutan kapsul Cefadroxil (PT Sanbe
Farma) ..............................................................................
86
Lampiran 17. (Lanjutan) Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar
Sebenarnya dari Larutan kapsul Cefadroxil (PT Sanbe
Farma) .............................................................................
87
Lampiran 18. Kromatogram dari Larutan kapsul Longcef (PT Dankos) .
89
Lampiran 19. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya
dari Penyuntikkan Larutan kapsul Longcef (PT Dankos) .
93
Lampiran 20. (Lanjutan) Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar
Sebenarnya dari Larutan kapsul Longcef (PT Dankos) ....
94
Lampiran 21. Kromatogram dari Larutan kapsul Librocef (PT Hexpharm
Jaya) ................................................................................
96
Lampiran 22. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya dari
Larutan kapsul Librocef (PT Hexpharm Jaya) ...................
100
Lampiran 23. Kromatogram dari Larutan kapsul Alxil (PT Bernofarm)...
102
Lampiran 24. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya dari
Larutan kapsul Alxil (PT Bernofarm) ...............................
106
Lampiran 25. Kromatogram dari Larutan kapsul Cefat (PT Sanbe
Farma)... ..........................................................................
108
Lampiran 26. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya dari
Larutan kapsul Cefat (PT Sanbe Farma) ...........................
112
Lampiran 27. Contoh Perhitungan Penimbangan Sampel .......................
114
Lampiran 28. Hasil Analisa Kadar Cefadroxil dalam Sampel ................
115
Lampiran 29. Contoh Perhitungan untuk Mencari Kadar Kapsul Cefadroxil
(PT Dexa Medica) ............................................................
118
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 30. Daftar Spesifikasi Sampel ................................................
119
Lampiran 31. Tabel Nilai Distribusi t .....................................................
122
Lampiran 32. Sertifikat Cefadroxil BPFI................................................
123
Lampiran 33. Gambar alat KCKT (Shimadzu) .......................................
124
Lampiran 34. Gambar Sonifikator (Branson 1510) dan Penyaring ..........
125
Universitas Sumatera Utara