Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia serta Isolasi Senyawa Flavonoid dari Fraksi Etilasetat Daun Gaharu (Aquilaria malaccencis Lamk.)

KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING
FITOKIMIA SERTA ISOLASI SENYAWA
FLAVONOID DARI FRAKSI ETILASETAT DAUN
GAHARU
(Aquilaria malaccencis Lamk.)

SKRIPSI

Diajukan untuk mUniversitas Sumatera Uta
OLEH:
AITY
NIM 101501102

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2014

Universitas Sumatera Utara

KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING
FITOKIMIA SERTA ISOLASI SENYAWA
FLAVONOID DARI FRAKSI ETILASETAT DAUN
GAHARU
(Aquilaria malaccencis Lamk.)
SKRIPSI
Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh
gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara

iajukan untuk mUniversitas Sumatera Uta
OLEH:
AITY
NIM 101501102

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2014

Universitas Sumatera Utara

PENGESAHAN SKRIPSI

KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING
FITOKIMIA SERTA ISOLASI SENYAWA
FLAVONOID DARI FRAKSI ETILASETAT DAUN
GAHARU
(Aquilaria malaccencis Lamk.)
OLEH:
AITY
NIM 101501102
Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal : Oktober 2014
Pembimbing I,

Panitia Penguji,

Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt.
NIP 195112231980032002

Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt.
NIP 195304031983032001

Pembimbing II,

Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt.
NIP 195112231980032002

Dr. M. Pandapotan Nasution, MPS., Apt.
NIP 194908111976031001

Drs. Awaluddin Saragih, M.Si., Apt.
NIP 195008221974121002
Dr. Panal Sitorus, M.Si., Apt.
NIP 195310301980031002

Medan,

Oktober 2014
Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
Dekan,

Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt.
NIP 195311281983031002

Universitas Sumatera Utara

KATA PENGANTAR

Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, karena limpahan rahmat
dan kasihnya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul
“Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia serta Isolasi Senyawa Flavonoid
dari Fraksi Etilasetat Daun Gaharu (Aquilaria malaccencis Lamk.)”. Skripsi ini
diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi pada
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini penulis juga mengucapkan terima kasih yang tulus
dan ilkhas kepada Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan

Fakultas Farmasi USU Medan yang telah memberikan fasilitas sehingga penulis
dapat menyelesaikan pendidikan dan sebagai penasehat akademik yang telah
memberikan bimbingan kepada penulis selama masa perkuliahan. Ibu Dra.
Herawaty Ginting, M.Si., Apt., dan Bapak Dr. M. Pandapotan Nasution, MPS.,
Apt., selaku pembimbing yang telah memberikan waktu, bimbingan dan nasehat
selama penulisan hingga selesainya penyusunan skripsi ini. Bapak dan Ibu staf
pengajar Fakultas Farmasi USU Medan yang telah mendidik selama perkuliahan.
Bapak dan Ibu Kepala Laboratorium Penulisan dan Farmakognosi yang telah
memberikan fasilitas, petunjuk dan membantu selama penulisan. Ibu Dra. Aswita
Hafni Lubis, M.Si., Apt., Bapak Drs. Awaluddin Saragih, M.Si., Apt. dan Bapak
Dr. Panal Sitorus, M.Si., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan kritik,
saran dan arahan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. Ayahanda dan
Ibunda tercinta, Adi Dharma dan Yenni yang tiada hentinya memberi semangat
dan doa dengan tulus ikhlas bagi kesuksesan penulis, juga kepada Adikku

Universitas Sumatera Utara

tersayang, Aily, Kuandi Dharma dan Evandi Dharma yang selalu memberi doa,
dorongan dan semangat. Sahabat-sahabatku Erawaty, S.E., Daimin Japar, B.Arch.
dan dari stambuk 2010 Cinta Suci, S.Farm., Felicia Christine, S.Farm., Novita

Sari, S.Farm., Stephanie, S.Farm., Mita Joselin, S.Farm., Maya Octavia, S.Farm.,
Anddora Michi, S.Farm., Freddy, S.Farm., Hendrik, S.Farm. dan Jimmy Angga,
S.Farm. yang telah memberi bantuan, dukungan dan motivasi.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam penulisan skripsi ini masih
jauh dari kesempurnaan, oleh karena itu dengan segala kerendahan hati, penulis
menerima kritik dan saran demi kesempurnaan skripsi ini. Akhirnya, penulis
berharap semoga skripsi ini dapat memberi manfaat bagi kita semua.

Medan, Oktober 2014
Penulis,

Aity
NIM 101501102

Universitas Sumatera Utara

KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA
ISOLASI SENYAWA FLAVONOID DARI FRAKSI ETILASETAT
DAUN GAHARU (Aquilaria malaccencis Lamk.)

ABSTRAK

Tanaman gaharu termasuk ke dalam suku Thymelaeaceae, daunnya
memiliki aktivitas antioksidan karena mengandung senyawa flavonoid. Tujuan
penulisan ini adalah untuk mengisolasi senyawa flavonoid dan diidentifikasi
dengan spektrofotometri UV menggunakan pereaksi geser (shift reagent) dan
spektrofotometri IR.
Penelitian ini meliputi karakterisasi simplisia, skrining fitokimia,
pembuatan ekstrak dan isolasi flavonoid. Ekstraksi dilakukan secara perkolasi dan
fraksinasi, sehingga diperoleh fraksi etilasetat. Fraksi etilasetat kemudian diisolasi
dengan kromatografi kolom, kromatografi lapis tipis dan kromatografi preparatif
sehingga diperoleh flavonoid. Uji kemurnian dengan kromatografi lapis tipis
dengan fase gerak yaitu etilasetat, etilasetat:metanol (90:10 v/ v), toluen:etilasetat
(70:30 v/ v) dan n-heksana:etilasetat (80:20 v/ v ). Isolat yang diperoleh
dikarakterisasi dengan spektrofotometri UV menggunakan pereaksi geser (shift
reagent) dan spektrofotometri IR.
Hasil karakterisasi simplisia diperoleh kadar air sebesar 3,53%, kadar sari
larut air 12,09%, kadar sari larut etanol 9,56%, kadar abu total 7,04% dan kadar
abu tidak larut asam 0,62%. Hasil skrining fitokimia terhadap daun gaharu
mengandung senyawa steroid/triterpenoid, glikosida, flavonoid, tanin dan

saponin. Analisis isolat menunjukkan bahwa isolat yang diperoleh adalah senyawa
golongan flavonoid berfluoresensi lembayung biru dengan sinar UV 366 nm dan
isolat yang diperoleh dianalisis secara spektrofotometri UV dengan pereaksi geser
diduga merupakan senyawa golongan flavon dengan gugus hidroksi pada posisi 3,
4’ dan 7. Hasil spektrofotometri IR menunjukkan adanya gugus C-O, C-H
aromatis, C=C, C-H, C-H alifatis dan –OH.
Kata kunci: Aquilaria malaccencis, karakterisasi, skrining fitokimia, isolasi,
flavonoid.

Universitas Sumatera Utara

SIMPLEX CHARACTERIZATION AND PHYTOCHEMICAL
SCREENING AND ISOLATION OF FLAVONOID COMPOUND FROM
ETHYLACETATE FRACTION OF AGARWOOD LEAVES
(Aquilaria malaccencis Lamk.)
ABSTRACT
Agarwood plant belong to the Thymelaeaceae family contain antioxidant
activity because of the chemical compound called flavonoids. The purpose of this
research was to isolate the flavonoid compound and determined it using UV
spectrophotometry with shift reagent and IR spectrophotometry.

This research covered simplex characterization, phytochemical screening,
extraction and flavonoid isolation. Extraction was done through percolation and
fractionation which produced ethylacetate fraction. The ethylacetate fraction was
then isolated further using column chromatography, thin layer chromatography,
and preparative thin layer chromatography until flavonoid was produced. The
purity test was performed with thin layer chromatography using ethylacetate,
ethylacetate:methanol (90:10 v/ v ), toluen:ethylacetate (70:30 v/ v ) and nhexane:ethylacetate (80:20 v/ v ) as the mobile phase, and the resulting isolate was
identified by UV spectrophotometry and IR spectrophotometry.
The result of simplex characterization produced 3.53% of water content,
12.09% of water-soluble extract content, 9.56% of ethanol-soluble extract content,
7.04% of total ash content and 0.62% of acid-insoluble ash content. The result of
phytochemical screening of agarwood leaves contained steroid/triterpenoid,
glycoside, flavonoid, tannin and saponin. The result of isolate analysis indicated
that the isolate was flavonoid compound that showed violet blue fluorescence with
366 nm of UV light. The resulting isolate was then analyzed using UV
spectrophotometry with shift reagent and it was indicated as flavones type with 3,
4’, and 7 trihydroxy group. The result of IR spectrophotometry indicated the
presence of C-O, CH aromatics, C=C, C-H, aliphatic C-H and –OH functional
groups.
Key words: Aquilaria malaccencis, characterization, phytochemical screening,

isolation, flavonoid.

Universitas Sumatera Utara

DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL .................................................................................................

i

LEMBAR PENGESAHAN ...................................................................

iii

KATA PENGANTAR ..........................................................................

iv

ABSTRAK ...........................................................................................

vi

ABSTRACT .........................................................................................

vii

DAFTAR ISI ........................................................................................

viii

DAFTAR TABEL .................................................................................

xiii

DAFTAR LAMPIRAN .........................................................................

xiv

BAB I PENDAHULUAN .....................................................................

1

1.1 Latar Belakang ....................................................................

1

1.2 Perumusan Masalah .............................................................

3

1.3 Hipotesis .............................................................................

3

1.4 Tujuan Penulisan .................................................................

3

1.5 Manfaat Penulisan ...............................................................

4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ...........................................................

5

2.1 Uraian Tumbuhan ................................................................

5

2.1.1 Daerah tumbuh ..........................................................

5

2.1.2 Nama daerah .............................................................

5

2.1.3 Nama asing ................................................................

6

2.1.4 Sistematika tumbuhan ................................................

6

2.1.5 Morfologi tumbuhan ..................................................

6

2.1.3 Kegunaan ..................................................................

7

Universitas Sumatera Utara

2.2 Uraian Kandungan Kimia Tumbuhan ...................................

7

2.2.1 Alkaloid ....................................................................

7

2.2.2 Flavonoid ..................................................................

7

2.2.3 Saponin .....................................................................

8

2.2.4 Tanin .........................................................................

8

2.2.5 Glikosida ..................................................................

8

2.2.6 Glikosida antrakuinon ................................................

9

2.2.7 Steroid/ triterpenoid ...................................................

10

2.3 Ekstraksi ..............................................................................

10

2.4 Fraksinasi ............................................................................

12

2.5 Isolasi Senyawa Kimia .........................................................

12

2.5.1 Kromatografi lapis tipis .............................................

13

2.5.2 Kromatografi kolom ..................................................

15

2.5.3 Kromatografi lapis tipis preparatif .............................

15

2.6 Spektrofotometri ..................................................................

16

2.6.1 Spektrofotometri UV .................................................

17

2.6.2 Penggunaan pereaksi geser (shift reagen) dalam
spektrofotometri UV ..................................................

17

2.6.3 Spektrofotometri IR ...................................................

18

BAB III METODE PENULISAN .........................................................

19

3.1 Alat-alat ...............................................................................

19

3.2 Bahan-bahan ........................................................................

19

3.3 Pembuatan Pereaksi .............................................................

20

3.3.1 Pereaksi Bouchardat ..................................................

20

Universitas Sumatera Utara

3.3.2 Pereaksi Meyer ..........................................................

20

3.3.3 Larutan Dragendorff ...................................................

20

3.3.4 Larutan Molisch ........................................................

21

3.3.5 Pereaksi asam klorida 2 N ..........................................

21

3.3.6 Larutan asam sulfat 2 N ..............................................

21

3.3.7 Larutan asam nitrat 0,5 N ..........................................

21

3.3.8 Larutan timbal (II) asetat 0,4 M .................................

21

3.3.9 Larutan besi (III) klorida 1% b/v ................................

21

3.3.10 Larutan pereaksi kloralhidrat ...................................

21

3.3.11 Larutan Pereaksi Liebermann-Burchard ....................

21

3.4 Pengumpulan dan Pengolahan Tumbuhan ............................

21

3.4.1 Pengumpulan bahan tumbuhan ...................................

21

3.4.2 Identifikasi tumbuhan .................................................

22

3.4.2 Pembuatan simplisia ...................................................

22

3.5 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia ....................................

22

3.5.1 Pemeriksaan makroskopik ..........................................

22

3.5.2 Pemeriksaan mikroskopik ..........................................

22

3.5.2 Penetapan kadar air ....................................................

23

3.5.3 Penetapan kadar sari yang larut air .............................

24

3.5.4 Penetapan kadar sari yang larut etanol ........................

24

3.5.5 Penetapan kadar abu total ...........................................

24

3.5.6 Penetapan kadar abu yang tidak larut asam .................

25

3.6 Skrining Fitokimia ...............................................................

25

3.6.1 Pemeriksaan alkaloid .................................................

25

Universitas Sumatera Utara

3.6.2 Pemeriksaan glikosida ................................................

26

3.6.3 Pemeriksaan saponin ...................................................

26

3.6.4 Pemeriksaan flavonoid ................................................

26

3.6.5 Pemeriksaan antrakinon .............................................

27

3.6.6 Pemeriksaan tanin ......................................................

27

3.6.7 Pemeriksaan steroid/triterpenoid ................................

27

3.7 Pembuatan Ekstrak ..............................................................

27

3.8 Fraksinasi Cair-cair ..............................................................

28

3.9 Analisis Fraksi etilasetat secara KLT ...................................

28

3.10 Pemisahan Fraksi etilasetat dengan Kromatografi Kolom ...

29

3.11 Isolasi Senyawa Flavonoid Hasil Kromatografi Kolom ......

30

3.12 Uji Kemurnian terhadap Isolat ............................................

31

3.13 Karakterisasi Isolat ............................................................

31

3.12.1 Karakterisasi isolat secara spektrofotometri UV........

31

3.12.2 Karakterisasi isolat secara spektrofotometri IR ........

32

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ...............................................

33

4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan ................................................

33

4.2 Hasil Karakterisasi Bahan Tumbuhan dan Serbuk Simplisia

33

4.3 Hasil Skrinning Fitokimia ....................................................

34

4.4 Hasil Ekstraksi Simplisia Daun Gaharu ................................

35

4.5 Hasil Isolasi Kromatografi Kolom .......................................

36

4.6 Hasil Penafsiran Spektrum UV dengan Pereaksi Geser ........

37

4.7 Hasil Penafsiran Spektrum IR ..............................................

44

BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN ...............................................

46

Universitas Sumatera Utara

5.1 Kesimpulan

.......................................................................

46

5.2 Saran .................................................................................

46

DAFTAR PUSTAKA ...........................................................................

47

LAMPIRAN ........................................................................................

49

Universitas Sumatera Utara

DAFTAR TABEL
Tabel

Halaman

4.1 Hasil Karakteristik Simplisia dari Daun Gaharu .....................

34

4.2 Hasil Skrining Fitokimia dari simplisia
Daun Gaharu .........................................................................

35

4.3 Hasil Spektrofotometri UV dalam metanol ............................

37

4.4 Hasil Spektrofotometri UV dalam metanol ditambah NaOH
.................................................................................................

38

4.5 Hasil Spektrofotometri UV dalam metanol ditambah NaOH
setelah 5 menit .......................................... ..............................

39

4.6 Hasil Spektrofotometri UV dalam metanol ditambah AlCl3 .
.................................................................................................

41

4.7 Hasil Spektrofotometri UV dalam metanol ditambah
AlCl3 /HCl .......................................... .....................................

42

4.8 Hasil Spektrofotometri UV dalam metanol ditambah natrium
asetat .......................................... .............................................

43

4.9 Hasil Spektrofotometri UV dalam metanol ditambah natrium
asetat/ asam borat ..................................................................

44

4.10 Hasil Spektrofotometri IR .......................................... .............

45

Universitas Sumatera Utara

DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran

Halaman

1

Identifikasi Tumbuhan ..........................................................

49

2

Bagan pembuatan serbuk simplisia ........................................

50

3

Bagan pembuatan ekstrak ......................................................

51

4

Bagan kromatografi kolom ....................................................

52

5

Bagan KLT preparatif ...........................................................

53

6

Bagian makroskopik daun gaharu ..........................................

54

7

Bagian mikroskopik daun gaharu ..........................................

57

8

Kromatogram dan harga Rf dari fraksi etilasetat daun gaharu

59

9

Kromatogram hasil Kromatografi Kolom ...............................

65

10

Kromatogram hasil KLT Preparatif dari E3 (vial 191-226) ...

68

11

Kromatogram KLT uji kemurnian isolat .................................

71

12

Perhitungan hasil penetapan kadar .........................................

74

Universitas Sumatera Utara