KATA PENGANTAR - Karakterisasi Simplisia Dan Skrining Fitokimia Serta Isolasi Senyawa Steroid/Triterpenoid Dari Fraksi N-Heksana Daun Gaharu (Aquilaria Malaccensis Lam.)

KATA PENGANTAR

  Puji syukur penulis ucapkan ke hadirat Allah Swt. atas segala limpahan berkat, rahmat dan karuniaNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini yang berjudul “Karakterisasi dan Skrining Fitokimia serta Isolasi Senyawa Steroid/Triterpenoid dari Fraksi n-Heksana Daun Gaharu (Aquilaria malaccensis Lam.)”. Skripsi ini disusun sebagai salah satu syarat mencapai gelar sarjana farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.

  Pada kesempatan ini dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi USU Medan, yang telah memberikan fasilitas sehingga penulis dapat menyelesaikan pendidikan. Ibu Dra.

  dan Dr. M. Pandapotan Nasution, M.P.S., Apt., yang telah membimbing dan memberikan petunjuk serta saran-saran selama penelitian hingga selesainya skripsi ini. Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU Medan yang telah mendidik selama perkuliahan. Bapak dan Ibu Kepala Laboratorium Penelitian dan Farmakognosi yang telah memberikan fasilitas, petunjuk dan membantu selama penelitian. Ibu Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt., Ibu Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt., dan Ibu Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan kritik, saran dan arahan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.

  Penulis juga mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang tiada terhingga kepada Ayahanda H. Supriyadi, S.H., dan Ibunda Hj. Armawati, S.H., S.Mn., M.H., yang telah memberikan semangat, doa yang tulus dan pengorbanan baik moril maupun materi, juga kepada adik-adikku tersayang Widya Kumalasari, Amelia Hapsari dan Choirunnisa Alqholiasari yang selalu memberi doa, dorongan dan semangat.

  Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam penulisan skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan, oleh karena itu penulis menerima kritik dan saran demi kesempurnaan skripsi ini. Penulis berharap semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi kita semua.

  Medan, Desember 2014 Penulis Intan Purnamasari NIM 121524091

  DAFTAR ISI

  Halaman JUDUL .................................................................................................... i HALAMAN JUDUL ............................................................................... ii HALAMAN PENGESAHAN ................................................................. iii KATA PENGANTAR ........................................................................... iv ABSTRAK .............................................................................................. vi ABSTRACT ............................................................................................ vii DAFTAR ISI ........................................................................................... viii DAFTAR TABEL ................................................................................... xiii DAFTAR GAMBAR .............................................................................. xiv DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................... xv BAB I PENDAHULUAN ....................................................................

  1 1.1 Latar Belakang .....................................................................

  1

  1.2 Perumusan Masalah ............................................................ 3

  1.3 Hipotesis ............................................................................. 3

  1.4 Tujuan Penelitian ................................................................ 4

  1.5 Manfaat Penelitian .............................................................. 5

  BAB II TINJAUAN PUSTAKA ............................................................. 6

  2.1 Uraian Tumbuhan ............................................................... 6

  2.1.1 Daerah tumbuh ........................................................... 6

  2.1.2 Nama daerah dan nama asing ..................................... 7

  2.1.3 Sistematika tumbuhan ................................................. 7

  2.1.4 Morfologi tumbuhan .................................................. 8

  2.1.5 Kandungan kimia ....................................................... 9

  2.1.6 Kegunaan ..................................................................... 9

  2.2 Uraian Kandungan Kimia Tumbuhan ................................ 10

  2.2.1 Alkaloid ..................................................................... 10

  2.2.2 Flavonoid .................................................................... 11

  2.2.3 Saponin ....................................................................... 12

  2.2.4 Tanin ........................................................................... 12

  2.2.5 Glikosida ..................................................................... 13

  2.2.6 Glikosida antrakuinon ................................................ 15

  2.2.7 Steroid/ triterpenoid .................................................... 15

  2.3 Ekstraksi .............................................................................. 18

  2.4 Fraksinasi ............................................................................ 20

  2.5 Kromatografi ....................................................................... 20

  2.5.1 Kromatografi lapis tipis .............................................. 21

  2.5.2 Kromatografi kolom ................................................... 24

  2.5.3 Kromatografi lapis tipis preparatif ............................. 25

  2.5.4 Kromatografi lapis tipis dua arah .............................. 26

  2.6 Spektrofotometri .................................................................... 27

  2.6.1 Spektrofotometri ultraviolet ....................................... 27

  2.6.2 Spektrofotometri inframerah ...................................... 27

  BAB III METODE PENELITIAN ......................................................... 29

  3.1 Alat-alat .......................................................................... 29

  3.2 Bahan-bahan ................................................................... 29

  3.3 Pembuatan Pereaksi ....................................................... 30

  3.3.1 Pereaksi Bouchardat ................................................... 30

  3.4.2 Identifikasi tumbuhan .................................................. 32

  3.6.6 Penetapan kadar abu total ............................................ 35

  3.6.5 Penetapan kadar sari yang larut etanol ........................ 34

  3.6.4 Penetapan kadar sari yang larut air ............................. 34

  3.6.3 Penetapan kadar air ..................................................... 33

  3.6.2 Pemeriksaan mikroskopik simplisia ............................ 33

  3.6.1 Pemeriksaan makroskopik .......................................... 33

  3.6 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia .................................... 32

  3.5 Pemeriksaan Mikroskopik Daun Gaharu Segar .................... 32

  3.4.3 Pengolahan tumbuhan ................................................. 32

  3.4.1 Pengumpulan tumbuhan .............................................. 31

  3.3.2 Pereaksi Meyer ........................................................... 30

  3.4 Penyiapan Bahan Tumbuhan ................................................. 31

  3.3.11 Larutan Pereaksi Liebermann-Burchard ................... 31

  3.3.10 Larutan pereaksi kloralhidrat 70% b/b ..................... 31

  3.3.9 Larutan besi (III) klorida 1% b/v ................................ 31

  3.3.8 Larutan timbal (II) asetat 0,4 M ................................. 31

  3.3.7 Larutan asam nitrat 0,5 N ........................................... 31

  3.3.6 Larutan asam sulfat 2N ............................................... 31

  3.3.5 Pereaksi asam klorida 2N ........................................... 30

  3.3.4 Pereaksi Molisch ........................................................ 30

  3.3.3 Pereaksi Dragendorff ................................................. 30

  3.6.7 Penetapan kadar abu yang tidak larut asam ................ 35

  3.7 Skrining Fitokimia ................................................................ 35

  3.7.1 Pemeriksaan alkaloid .................................................. 35

  3.7.2 Pemeriksaan flavonoid ................................................ 36

  3.7.3 Pemeriksaan tanin ....................................................... 36

  3.7.4 Pemeriksaan glikosida ................................................. 36

  3.7.5 Pemeriksaan saponin ................................................... 37

  3.7.6 Pemeriksaan steroid/triterpenoid ................................. 37

  3.7.7 Pemeriksaan glikosida antrakinon ............................... 37

  3.8 Pembuatan Ekstrak Etanol dan Fraksinasi ............................ 38

  3.8.1 Pembuatan ekstrak etanol daun gaharu ....................... 38

  3.8.2 Fraksinasi ekstrak etanol ............................................. 38

  3.9 Analisis Fraksi n-heksana secara KLT .................................. 39

  3.10 Pemisahan Fraksi n-heksana dengan Kromatografi Kolom . 40

  3.11 Pencucian Kristal Isolat ...................................................... 41

  3.12 Isolasi Senyawa Steroid/Triterpenoid secara KLT Preparatif 41

  3.13 Uji Kemurnian terhadap Isolat ............................................ 42

  3.13.1 Uji KLT satu arah ..................................................... 42

  3.13.2 Uji KLT dua arah ...................................................... 42

  3.14 Karakterisasi Isolat .............................................................. 43

  3.14.1 Karakterisasi isolat dengan spektrofotometri UV ..... 43

  3.14.2 Karakterisasi isolat dengan spektrofotometri IR ....... 43

  BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................ 45

  4.1 Hasil Identifikasi Sampel ...................................................... 45

  4.2 Hasil Karakterisasi Bahan Tumbuhan dan Serbuk Simplisia 45

  4.3 Hasil Skrinning Fitokimia .....................................................

  52 b. Isolat 2 .............................................................................

  57 LAMPIRAN ............................................................................................

  56 DAFTAR PUSTAKA .............................................................................

  5.1 Kesimpulan ............................................................................ 56 5.2 Saran ......................................................................................

  56

  55 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ...................................................

  4.9 Hasil Karakterisasi Isolat dengan Spektrofotometri Sinar Inframerah ..........................................................................

  53

  52 c. Isolat 3 .............................................................................

  52 a. Isolat 1 .............................................................................

  47

  4.9 Hasil Karakterisasi Isolat dengan Spektrofotometri Sinar Ultra Violet ..........................................................................

  51

  51 4.8 Hasil Uji Kemurnian dengan KLT dua arah .........................

  n -heksana Daun Gaharu dengan Kromatografi Kolom ......... 50 4.7 Hasil Uji Kemurnian dengan KLT satu arah ........................

  4.6 Hasil Isolasi Senyawa Steroid/Triterpenoid dari Fraksi

  49

  4.5 Hasil Analisis Fraksi n-heksana dengan cara Kromatografi Lapis Tipis .............................................................................

  4.4 Hasil Ekstraksi dan Fraksinasi .............................................. 49

  59

  DAFTAR TABEL

  Halaman Tabel 4.1 Tabel hasil karakteristik simplisia daun gaharu ....................

  45 Tabel 4.2 Tabel hasil skrining fitokimia dari simplisia daun gaharu ....

  47 Tabel 4.3 Tabel hasil Rf hasil analisis fraksi n-heksana dengan cara kromatografi lapis tipis ........................................................

  48 Tabel 4.4 Tabel hasil analisis spektrum inframerah .............................

  53

  DAFTAR GAMBAR

  Halaman

Gambar 2.1 Gambar struktur nikotin .................................................. 11 Gambar 2.2 Gambar struktur kuersetin ...............................................

  11 Gambar 2.3 Gambar struktur ikatan karbon-oksigen antara gula dan cincin aromatik ................................................................

  14 Gambar 2.4 Gambar struktur ikatan karbon-karbon antara gula dan cincin aromatik ................................................................

  14 Gambar 2.5 Gambar struktur sinigrin ................................................. 14

Gambar 2.6 Gambar struktur nikleosidin ............................................ 15 Gambar 2.7 Gambar struktur antrakuinon ..........................................

  15 Gambar 2.8 Gambar struktur asam glisiretat ......................................

  16 Gambar 2.9 Gambar struktur β-sitosterol ........................................... 16

Gambar 2.10 Gambar struktur diosgenin .............................................. 16Gambar 2.11 Gambar struktur digitogenin ........................................... 16Gambar 2.12 Gambar struktur dasar steroida dan sistem penomorannya 17Gambar 2.13 Gambar struktur kolesterol ............................................. 18Gambar 2.14 Gambar struktur

  β-sitosterol dan stigmasterol ............... 18

Gambar 2.15 Rumus bangun ergosterol ................................................ 18Gambar 2.16 Rumus bangun spongesterol ........................................... 18Gambar 4.1 Spektrum inframerah isolat pertama ................................ 53Gambar 4.2 Spektrum inframerah isolat kedua .................................... 54Gambar 4.3 Spektrum inframerah isolat ketiga .................................... 54

  DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1 Identifikasi tumbuhan ...................................................

  59 Lampiran 2 Bagan kerja penelitian ...................................................

  60 Lampiran 3 Bagan pembuatan ekstrak etanol daun gaharu .............. 61 Lampiran 4 Gambar makroskopik tumbuhan gaharu ...................... 62 Lampiran 5 Gambar mikroskopik dari daun gaharu ........................ 64 Lampiran 6 Perhitungan hasil penetapan kadar ................................ 66 Lampiran 7 Bagan isolasi senyawa steroid dari daun gaharu ........... 71 Lampiran 8 Gambar kromatogram dari fraksi n-heksana daun gaharu 72 Lampiran 9 Kromatogram KLT dari hasil fraksinasi kolom ........... 73 Lampiran 10 Kromatogram hasil KLT Preparatif dari F7 .................. 78 Lampiran 11 Kromatogram hasil KLT satu arah isolat pertama ....... 79 Lampiran 12 Kromatogram hasil KLT satu arah isolat kedua ..........

  80 Lampiran 13 Kromatogram hasil KLT satu arah isolat ketiga .......... 81 Lampiran 14 Kromatogram hasil KLT dua arah isolat pertama ........ 82 Lampiran 15 Kromatogram hasil KLT dua arah isolat kedua ........... 83 Lampiran 16 Kromatogram hasil KLT dua arah isolat ketiga ........... 84

BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

  Indonesia merupakan negara yang mempunyai hutan tropis terluas kedua di dunia setelah Brazil dan menduduki peringkat pertama di Asia Pasifik. Khusus dari hasil hutannya, hutan tropis Indonesia mempunyai kurang lebih 27 spesies pohon gaharu yang dikelompokkan ke dalam delapan marga dan tiga suku yang tersebar di Sumatera, Kalimantan, Maluku, dan Irian (Sumarna, 2005).

  Pohon gaharu merupakan salah satu jenis tanaman kehutanan yang telah dibudidayakan dengan teknik kultur jaringan. Gaharu dikenal sebagai pohon termahal di dunia. Nilai ekonomis gaharu terletak pada gubal gaharu yang muncul setelah pohon gaharu terinfeksi dan mati. Gubal gaharu mengandung resin atau damar yang berbau harum apabila dibakar. Aroma khas gaharu inilah yang terkenal dan disukai oleh masyarakat Asia, Timur Tengah, daratan Cina, Jepang, Uni Emirat sampai ke Eropa (Sumarna, 2002).

  Dilihat dari segi pemanfaatan, semula tanaman gaharu memiliki nilai guna terbatas hanya untuk mengharumkan tubuh dan ruangan serta kelengkapan upacara ritual keagamaan masyarakat Hindu, Buddha dalam bentuk dupa dan tasbih. Sejalan dengan perkembangan ilmu pengetahuan dan teknologi serta didukung dengan tren back to nature yang berkembang pada masyarakat, saat ini pemanfaatan tanaman gaharu telah berkembang demikian meluas antara lain untuk bahan baku industri kosmetik, parfum, aroma terapi, sabun, body lotion dan obat-obatan tradisional (Susetya, 2014).

  Bagian tanaman gaharu yang dapat digunakan untuk tujuan pengobatan yaitu pada daun yang telah dikeringkan, gubal gaharu, serbuk kayu, akar gaharu, dan kandungan minyak atsirinya. Di Cina dan Jepang gaharu dikenal sebagai obat reumatik, obat untuk meredakan stress, liver, radang lambung dan kanker. Di Indonesia, secara tradisional masyarakat Papua telah menggunakan daun, kulit dan akar gaharu sebagai obat malaria dan perawatan kulit. Kini sudah dikembangkan daun gaharu dari jenis Aquilaria dan Gyrinops yang diolah menjadi bahan baku pembuatan produk minuman herbal (teh dan sirup) karena kandungan zat antioksidan dalam daun yang cukup tinggi (Sumarna, 2002). Menurut penelitian Pranakhon (2011), seorang penderita diabetes di Thailand yang mengkonsumsi teh daun gaharu dalam jangka waktu tertentu diketahui mengalami penurunan kadar gula darah kembali normal.

  Sejumlah kandungan metabolit sekunder pada daun gaharu yang telah diketahui dari penelitian sebelumnya adalah flavonoid, glikosida, tanin dan steroid/triterpenoid (Silaban, 2014). Steroid/triterpenoid merupakan senyawa aktif dalam tumbuhan obat yang telah digunakan untuk penanganan penyakit termasuk diabetes mellitus, gangguan menstruasi, kontrasepsi, patukan ular, gangguan kulit, kerusakan hati dan malaria. Salah satu fungsi penting triterpenoid tipe steroid pada manusia dan mamalia terutama sebagai peningkatan ataupun pengendalian hormon seks, misalnya estradiol, progesteron dan testosteron. Tipe sterol dan triterpen pentasiklik digunakan sebagai obat anti radang dan anti lebam serta pengobatan ulser lambung (Heinrich, et al., 2005; Robinson, 1995).

  Diketahui bahwa struktur senyawa steroid/triterpenoid sangat beragam, maka jelas tidak akan ada metode isolasi umum yang dapat dipakai untuk semuanya. Strategi isolasi untuk mendapatkan senyawa murni terdiri dari beberapa langkah meliputi ekstraksi, partisi dan beberapa langkah kromatografi. Sesudah dilakukan ekstraksi simplisia, dihasilkan larutan yang mengandung fraksi yang terlarut. Tahap selanjutnya bertujuan mendapatkan komponen tertentu, lazimnya dilakukan proses partisi menggunakan dua pelarut yang tak bercampur. Ekstrak tersebut dipartisi menggunakan pelarut terpilih untuk isolasi komponen tertentu, dalam penelitian ini pelarut yang dipakai adalah n-heksana untuk mengisolasi senyawa steroid/triterpenoid (Robinson, 1995; Agoes, 2007).

  Sejumlah besar steroid/triterpenoid bebas merupakan senyawa non polar sehingga dapat dipisahkan dengan mengekstraksi menggunakan pelarut non polar, namun sebagian kecil senyawa glikosida steroid seperti saponin dan glikosida jantung tidak larut dalam pelarut non polar. Tujuan menggunakan pelarut etanol (bersifat polar) pada ekstraksi daun gaharu pada tahap pertama adalah untuk menyari steroid bebas maupun glikosida steroid, selanjutnya difraksinasi dengan

  

n -heksana (bersifat non polar) untuk menyari bagian steroid bebasnya (Robinson,

1995; Dinan, et al., 2001).

  Penelitian tentang identifikasi senyawa kimia yang terkandung dalam tanaman gaharu berbagai jenis sudah banyak dilakukan, namun karakterisasi simplisia dan isolasi senyawa metabolit sekunder dari ekstrak daun gaharu belum banyak dilakukan (Silaban, 2014). Berdasarkan uraian di atas penulis tertarik untuk meneliti tentang karakterisasi simplisia dan skrining fitokimia serta isolasi senyawa steroid/triterpenoid dari fraksi n-heksana daun gaharu (Aquilaria

  malaccensis Lam.).

  1.2 Perumusan Masalah a.

  apakah karakterisasi simplisia daun gaharu dapat ditentukan.

  b. apakah golongan senyawa kimia yang terkandung di dalam simplisia daun gaharu dapat ditentukan.

  c. apakah senyawa steroid/triterpenoid dapat diisolasi dari fraksi n-heksana daun gaharu dan isolatnya dapat dikarakterisasi secara spektrofotometri

  UV dan spektrofotometri IR.

  1.3 Hipotesis

  a. karakterisasi simplisia daun gaharu dapat ditentukan dengan

  menggunakan prosedur karakterisasi simplisia pada Materia Medika Indonesia dan World Health Organization (WHO).

  b. golongan senyawa kimia dari daun gaharu dapat ditentukan dengan menggunakan prosedur skrining fitokimia pada Materia Medika Indonesia dan Farnsworth.

  c. senyawa steroid/triterpenoid dapat diisolasi dari fraksi n-heksana daun gaharu dan isolat yang diperoleh dapat dikarakterisasi dengan spektrofotometri ultraviolet (UV) dan spektrofotometri infrared (IR).

  1.4 Tujuan Penelitian a.

  untuk mengetahui karakteristik simplisia daun gaharu.

  b. untuk mengetahui golongan senyawa kimia yang terdapat pada daun gaharu.

  c. untuk mengisolasi senyawa steroid/triterpenoid fraksi n-heksana daun gaharu dan karakterisasi isolat dengan spektrofotometri ultraviolet (UV) dan spektrofotometri infrared (IR).

1.5 Manfaat Penelitian

  Manfaat penelitian ini adalah untuk menambah informasi tentang steroid/triterpenoid alam yang diperoleh dari daun gaharu dan pengembangan steroid/triterpenoid dalam bidang farmasi.