Identifikasi fraksi I ekstrak n-heksana daun binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) - USD Repository

IDENTIFIKASI SENYAWA (A

  Diajuka Mempe

  UN

WA FRAKSI I EKSTRAK n-HEKSANA DA

(Anredera cordifolia (Ten.) Steenis)

  SKRIPSI

  jukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat mperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm) Program Studi Farmasi

  Oleh: Wilfrida Maria Du’a

  NIM : 088114071

FAKULTAS FARMASI NIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2012 AUN BINAHONG

IDENTIFIKASI SE

  I SENYAWA FRAKSI I EKSTRAK n-HEKS KSANA DAUN

BINA AHONG (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) is)

SKRIPSI

  Dia Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm) Me

  Program Studi Farmasi Oleh:

  Wilfrida Maria Du’a NIM : 088114071

  

FAKULTAS FARMASI

U UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2012

i ii

iii

  

Berpikirlah bahwa kita tidak ingin menjadi seperti ini agar kelak kita tidak akan melakukan kesalahan yang sama

tetap lakukan apa yg bisa kita lakukan sekarang seperti yang kita mau aku ada, aku berdiri, aku bisa terus berjuang dengan semangat dan tidak menyerah pada keadaan karena ada banyak kasih yang senantiasa memelukku dan aku tahu di belakangku selalu ada doa dari orang-orang yang menyayangiku papa

iv v

vi

  

vii

PRAKATA

  Segala pujian dan syukur penulis haturkan kepada Tuhan karena hanya dengan anugerah, berkat, cinta, kasih, dan pertolongan-Nya, penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi yang berjudul ”Identifikasi

  

Senyawa Fraksi I Ekstrak n-Heksana Daun Binahong (Anredera cordifolia

(Ten.) Steenis)”. Skripsi ini disusun guna memenuhi salah satu syarat untuk

  memperoleh gelar Sarjana Strata Satu Program Studi Farmasi (S.Farm).

  Terselesaikannya penulisan laporan akhir ini tidak lepas dari bantuan berbagai pihak, karena itu penulis mengucapkan terima kasih kepada:

  1. Ibu Lucia Wiwid Wijayanti, M.Si. selaku Dosen Pembimbing yang telah memberikan petunjuk, saran, arahan, dan bimbingan kepada penulis dalam proses penyusunan skripsi ini 2. Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si. dan Prof. Dr. C. J. Soegihardjo, Apt. selaku Dosen Penguji skripsi yang telah memberikan saran dan masukan demi kesempurnaan skripsi ini

  3. Bapak Ipang Djunarko, M.Sc., Apt. selaku Dekan dan segenap staf serta karyawan Laboratorium Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta

  4. Ma’Epa, teman seperjuangkanku yang telah dengan sabar menghadapi semua kemalasanku, mendukung dan menyemangati aku selama masa-masa galau bersama di lab.

  5. Unyil dan Pitoeng yang mau-maunya dengerin semua keluhanku.

  6. Kawan-kawan seperjuangan di lab: Paul, Hepy, Adi, Pandu, Aldosa, Valent, Novie, Ike, Usi, Satya, Sasa, Vica, Dimbek, Seco, Yuni, Elisa, dan Brian atas kerja sama, kebersamaan dan keceriaan di lab selama proses penelitian ini

  7. Seluruh teman-teman farmasi, khususnya kelas B angkatan 2008 dan FST A 2008 yang telah banyak berbagi keceriaan dan kesedihan

  8. Nenek, Tante, Ma Heny, Tanta Ratna, Om Bruno, Kugu, Steve, Ceci, Ka Ibet, Enenk, Metonk, Indah, Boge, Ma’u, Yelly, Putri , dan semua keluarga yang selalu jadi saya punya semangat dan jadi obat waktu saya rindu rumah

  9. “Cika-cika muah”: Rodhu, Giting dan Lombok yang selalu dukung beta dengan besong pung cara masing-masing. Sayang besong buanyak2 :-*

  10. Papao, yang setelah marah-marah karena beta ngawur tulis skripsweet tapi terus rasa bersalah dan minta maaf

  11. Huluk, Ivon, Nitha, Itin, Cumy, Liany, Stefi, Lina, Kaco-kaco, Tikus Klapa, Anak Pelangi, Komunitas Sant’ Egidio

  12. Serta semua pihak yang telah banyak membantu penyusunan skripsi ini yang tidak dapat disebutkan satu per satu Penulis menyadari bahwa penulisan skripsi ini masih banyak kekurangan dan kelemahan karena keterbatasan pikiran, tenaga, dan waktu penulis. Untuk itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang membangun dari semua pihak. Akhir kata semoga skripsi ini dapat berguna dan bermanfaat bagi pembaca semua.

  Yogyakarta, 6 Juni 2012 Penulis

  

viii

  

DAFTAR ISI

  Halaman HALAMAN JUDUL.............................................................................. i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING .................................... ii HALAMAN PENGESAHAN................................................................ iii HALAMAN PERSEMBAHAN ............................................................ iv PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ................................................ v LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA

  ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS ............................... vi PRAKATA............................................................................................. vii DAFTAR ISI.......................................................................................... ix DAFTAR TABEL.................................................................................. xiv DAFTAR GAMBAR ............................................................................. xvi DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................... xix

  INTISARI............................................................................................... xx

  ABSTRACT ............................................................................................. xxi BAB I PENGANTAR ............................................................................

  1 A. Latar Belakang .................................................................................

  1 1. Permasalahan..............................................................................

  4 2. Keaslian penelitian .....................................................................

  4 3. Manfaat penelitian......................................................................

  5 B. Tujuan Penelitian .............................................................................

  6

  

ix

  x 1. Tujuan umum .............................................................................

  12 3. Tanin...........................................................................................

  23 G. Hipotesis............................................................................................

  17 F. Landasan Teori................................................................................

  18 1. Spektroskopi ...............................................................................

  15 E. Elusidasi Struktur............................................................................

  15 1. Kromatografi ..............................................................................

  15 D. Isolasi ..............................................................................................

  14 6. Steroid ........................................................................................

  14 5. Terpenoid ...................................................................................

  13 4. Saponin.......................................................................................

  11 2. Flavonoid....................................................................................

  6 2. Tujuan khusus ............................................................................

  11 1. Alkaloid ......................................................................................

  11 C. Skrining Fitokimia ..........................................................................

  10 5. Ekstraksi secara penyulingan .....................................................

  10 4. Ekstraksi secara refluks ..............................................................

  9 3. Ekstraksi secara maserasi ...........................................................

  9 2. Ekstraksi secara perkolasi ..........................................................

  9 1. Ekstraksi dengan alat sokhlet .....................................................

  7 B. Ekstraksi..........................................................................................

  7 A. Tanaman Binahong .........................................................................

  6 BAB II PENELAHAAN PUSTAKA.....................................................

  24

  BAB III METODE PENELITIAN.........................................................

  25 A. Jenis dan Rancangan Penelitian ......................................................

  25 B. Variabel dan Defenisi Operasional .................................................

  25 1. Variabel penelitian .....................................................................

  25 2. Defenisi operasional ...................................................................

  25 C. Bahan Penelitian .............................................................................

  26 D. Alat Penelitian.................................................................................

  27 E. Tata Cara Penelitian ........................................................................

  27 1. Determinasi tanaman binahong ..................................................

  27 2. Preparasi sampel.........................................................................

  27 3. Uji pandahuluan .........................................................................

  28 4. Optimasi fase gerak 1 .................................................................

  33 5. Kromatografi kolom 1 ................................................................

  33 6. Kromatografi lapis tipis 1...........................................................

  34 7. Kromatografi kolom 2 ................................................................

  34 8. Kromatografi lapis tipis 2...........................................................

  35 9. Optimasi fase gerak 2 .................................................................

  35 10. Kromatografi lapis tipis preparatif .............................................

  36 11. Kromatografi lapis tipis 3...........................................................

  37 12. Spektroskopi UV/Vis .................................................................

  37 13. GC-MS .......................................................................................

  37 14. Spektroskopi inframerah ............................................................

  38

  xi

  H. Analisis Data ...................................................................................

  38 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ...............................................

  39 A. Determinasi Tanaman Binahong.....................................................

  39 B. Preparasi Sampel.............................................................................

  39 C. Ekstraksi Sampel.............................................................................

  41 D. Uji Pendahuluan..............................................................................

  42 1. Alkaloid.......................................................................................

  43 2. Flavonoid ....................................................................................

  46 3. Tanin ...........................................................................................

  48 4. Saponin .......................................................................................

  50 5. Triterpenoid dan steroid ..............................................................

  51 E. Optimasi Fase Gerak 1....................................................................

  53 F. Kromatografi Kolom 1....................................................................

  55 G. Kromatografi Lapis Tipis 1.............................................................

  55 H. Kromatografi Kolom 2....................................................................

  57 I. Kromatografi Lapis Tipis 2.............................................................

  57 J. Optimasi Fase Gerak 2....................................................................

  58 K. Kromatografi Lapis Tipis Preparatif ...............................................

  61 L. Kromatografi Lapis Tipis 3.............................................................

  62 M. Spektroskopi UV/Vis ......................................................................

  63 N. GC-MS ............................................................................................

  65 O. Spektroskopi Inframerah.................................................................

  78 P. Analisis Hasil ..................................................................................

  80

  xii

  xiii BAB V KESIMPULAN DAN SARAN.................................................

  81 A. Kesimpulan .....................................................................................

  81 B. Saran ...............................................................................................

  81 DAFTAR PUSTAKA ............................................................................

  82 LAMPIRAN ...........................................................................................

  84 BIOGRAFI PENULIS ........................................................................... 101

  

DAFTAR TABEL

  Halaman Tabel I. Hasil uji pendahuluan ekstrak n-heksana daun binahong .

  43 Tabel II. Hasil KLT senyawa alkaloid dalam (a) ekstrak n-heksana daun binahong dan (b) fraksi I kromatografi kolom 2 ekstrak n-heksana daun binahong .....................................

  45 Tabel III. Hasil KLT senyawa flavonoid dalam (a) ekstrak n- heksana daun binahong dan (b)fraksi I kromatografi kolom 2 ekstrak n-heksana daun binahong.......................

  47 Tabel IV. Hasil KLT senyawa triterpenoid dan steroid dalam (a) ekstrak n-heksana daun binahong dan (b) fraksi I kromatografi kolom 2 ekstrak n-heksana daun binahong .

  52 Tabel V. Hasil KLT ekstrak n-heksana daun binahong dengan fase diam silika gel dan fase gerak asetonitril; n- heksana; kloroform; kloroform : metanol (1:1); dan metanol...............................................................................

  54 Tabel VI. Hasil KLT fraksi I kromatografi kolom 1 dengan fase diam silika gel dan fase gerak a. kloroform; b. kloroform : metanol (1:1); c. metanol................................

  56 Tabel VII. Hasil KLT fraksi I kromatografi kolom 2 ekstrak n- heksana daun binahong dengan fase diam silika gel dan fase gerak a. kloroform; b. kloroform : metanol (1:1); c. metanol...............................................................................

  58

  

xiv

  Tabel VIII. Hasil KLT fraksi I kromatografi kolom 2 ekstrak n- heksana daun binahong dengan fase diam silika gel dan fase gerak a. kloroform; b. kloroform : metanol (1:1); c. metanol...............................................................................

  60 Tabel IX. Hasil KLT fraksi I kromatografi kolom 2 ekstrak n- heksana daun binahong dengan fase diam silika gel dan fase gerak a. kloroform; b. kloroform : metanol (1:1); c. metanol...............................................................................

  62 Tabel X. Hasil spektrum MS senyawa yang diisolasi dari ekstrak n-heksana daun binahong .....................................

  73

  xv

  

DAFTAR GAMBAR

  Halaman Gambar 1. Kromatografi kolom .........................................................

  16 Gambar 2. Reaksi antara alkaloid dan reagen Mayer .........................

  43 Gambar 3. Hasil KLT ekstrak n-heksana ekstrak daun binahong dan fraksi 1 kromatografi kolom 2 ekstrak n-heksana daun binahong dengan a. pereaksi Dragendorff; b. asam sulfat

  45 Gambar 4. Reaksi pembentukan warna antara flavonoid dengan logam magnesium (Mg) .......................................

  46 Gambar 5. Hasil KLT ekstrak n-heksana ekstrak daun binahong dan fraksi 1 kromatografi kolom 2 ekstrak n-heksana daun binahong dengan pereaksi amonia ....................................

  47 Gambar 6. Reaksi pembentukan warna antara tanin dengan besi (III) klorida (FeCl

  3 ) ...................................................

  49 Gambar 7. Reaksi pengendapan antara tanin dengan gelatin .............

  50 Gambar 8. Hasil KLT ekstrak n-heksana ekstrak daun binahong dan fraksi 1 kromatografi kolom 2 ekstrak n-heksana daun binahong dengan pereaksi Lieberman-Buncard................

  53 Gambar 9. Hasil KLT ekstrak n-heksana daun binahong dengan fase gerak a. asetonitril; b. n-heksana; c. kloroform; d. kloroform : metanol (1:1); e. metanol...............................

  54 Gambar 10. Kromatografi kolom ekstrak n-heksana daun binahong dengan fase diam silika gel dan fase gerak kloroform......

  55

  

xvi

  Gambar 11. Hasil KLT fraksi I kromatografi kolom 1 ekstrak n- heksana daun binahong dengan fase diam silika gel dan fase gerak a. kloroform; b. kloroform : metanol (1:1); c. metanol..............................................................................

  56 Gambar 12. Hasil KLT fraksi I kromatografi kolom 2 ekstrak n- heksana daun binahong dengan fase diam silika gel dan fase gerak a. kloroform; b. kloroform : metanol (1:1); c. metanol..............................................................................

  58 Gambar 13. Hasil KLT fraksi I hasil kromatografi kolom 2 ekstrak n- heksana daun binahong dengan fase diam silika gel dan fase gerak kloroform : metanol; a. 15:1, b. 13:1, c. 11:1, d. 9:1, e. 7:1, f. 5:1, g. 2:1, h. kloroform, i. 1:1, j. metanol, k. 1:2, l. 1:3, m. 1:5, n. 1:9, dan o. 1:19 .............

  61 Gambar 14. Hasil KLT preparatif dengan fase gerak kloroform : metanol 1:19 ..................................................

  61 Gambar 15. Hasil KLT dengan fase gerak a. kloroform; b. kloroform : metanol (1:1); c. metanol...........................

  62 Gambar 16. Spektrum UV/Vis fraksi I ekstrak n-heksana ...................

  63 Gambar 17. Senyawa 1,2,8a-trimethyl-1,2,3,4,8,8a- hexahydronaphthalene ......................................................

  64 Gambar 18. Spektrum MS peak 1 pada GC dengan Retention time 18,721menit ......................................................................

  65 Gambar 19. Fragmen hasil penyusunan ulang senyawa karbonil.........

  66

  xvii

  xviii

  70 Gambar 28. isobenzofuran-1,3-dione.....................................................

  72 Gambar 32. Spektrum IR fraksi I ekstrak n-heksana daun binahong ...

  72 Gambar 31. Spektrum MS peak 7 pada GC dengan Retention time 26,961menit ......................................................................

  71 Gambar 30. Spektrum MS peak 6 pada GC dengan Retention time 25,505menit ......................................................................

  8 H 17 ).............

  8 H 17 dan –C

  71 Gambar 29. Fragmen hasil pemutusan (-OC

  69 Gambar 27. Spektrum MS peak 5 pada GC dengan Retention time 24,509menit ......................................................................

  Gambar 20. (a) keton; (b) potongan gugus metil; (c) metil karboksilat; (d) metil etil ester ..........................................

  8 H 17 )................................

  69 Gambar 26. Fragmen hasil pemutusan (-OC

  69 Gambar 25. (a) ion 1-oktanol; (b) ion hasil pemutusan ion 1-oktanol dari dioktil adipat..............................................

  68 Gambar 24. Spektrum MS peak 4 pada GC dengan Retention time 23,192menit ......................................................................

  67 Gambar 23. Spektrum MS peak 3 pada GC dengan Retention time 20,728menit ......................................................................

  66 Gambar 22. Spektrum MS peak 2 pada GC dengan Retention time 20,496menit ......................................................................

  66 Gambar 21. Fragmen hasil pemutusan (-OCH 3 )...................................

  79

  

xix

DAFTAR LAMPIRAN

  Lampiran 1. Surat Determinasi Binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) ..............................

  85 Lampiran 2. Contoh Perhitungan Nilai Rf KLT .................................

  86 Lampiran 3. Spektrum UV/Vis ...........................................................

  86 Lampiran 4. Kromatogram GC dan Spektrum MS .............................

  88 Lampiran 5. Spektrum IR.................................................................... 100

  

INTISARI

  Tanaman binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) telah diketahui secara turun-temurun sebagai tanaman obat di Indonesia dan berpotensi untuk dijadikan bahan fitofarmaka. Penelitian ini dilakukan untuk mengidentifikasi senyawa yang terdapat dalam fraksi I ekstrak n-heksana daun binahong khususnya senyawa terpenoid, steroid dan asam lemak.

  Metode penelitian dilakukan secara deskriptif eksperimental. Penelitian ini diawali dengan melakukan maserasi pada daun binahong menggunakan pelarut n-heksana, skrining fitokimia, fraksinasi menggunakan kromatografi kolom dan fraksi I hasil kromatografi kolom diisolasi menggunakan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) preparatif. Hasil isolasi dinyatakan murni setelah hasil KLT yang diperoleh menghasilkan satu bercak dengan harga Rf yang berbeda pada tiga fase gerak dengan kepolaran yang berbeda. Fase gerak yang dipilih adalah kloroform (IP=4,1), kloroform:metanol (1:1) (IP=4,6) dan metanol (IP=5,1). Senyawa yang terbukti murni secara KLT lalu dielusidasi strukturnya dengan menggunakan UV/Vis, GC-MS, dan IR. Dari hasil skrining fitokimia dan elusidasi struktur maka dapat disimpulkan bahwa senyawa yang terdapat pada ekstrak n-heksana daun binahong adalah senyawa golongan steroid, asam lemak (metil heksadekanoat, asam oleat, metil 16-metilheptadekanoat, dioktil adipat, dioktil ptalat) dan alkana (metil oktakosana dan tetratetrakontana). Kata kunci : maserasi, binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis), steroid, asam lemak, UV/Vis, GC-MS, IR.

  

xx

  

ABSTRACT

  Binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) has been known for generations as medicinal plants in Indonesia and potential to make an phytopharmaca. The study was conducted to identify the compounds contained in

  st

  1 fraction on n-hexane extracts from binahong leaves especially terpenoid, steroids and fatty acids compounds.

  The method of research conducted by experiment description. The first phase of the study was carried out by maceration of binahong leaves using the n- hexane solvent, further identification of the compound, fractionation by column chromatography and isolated by preparative Thin Layer Chromatography (TLC). The results revealed the pure isolation if the isolate obtained a single spot on TLC with different Rf on the three mobile phases with different polarity. The selected mobile phase was chloroform (IP = 4.1), chloroform: methanol (1:1) (IP = 4.6) and methanol (IP = 5.1). Compound which proved to be pure by TLC and its structure was identification using UV/Vis, GC-MS, and IR. From the results of phytochemical screening and identification of the structure it can be concluded that the compounds contained in extracts of n-hexane from binahong leaves are steroids, fatty acids (methyl hexadecanoate, oleic acid, methyl 16- methylheptadecanoate, dioctyl adipate, dioctyl phthalate) and alcane (octacosane dan tetratetracontane).

  Keywords: maceration, binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis), steroids, fatty acids, UV/Vis, GC-MS, IR.

  

xxi

BAB I PENDAHULUAN A. Latar Belakang Sejak dahulu manusia telah menggunakan tanaman sebagai bahan obat

  secara tradisional yang berfungsi untuk menjaga kesegaran tubuh, mencegah penyakit, mengurangi rasa sakit, menyembuhkan penyakit, bahkan untuk mempercantik diri. Salah satu tanaman yang biasa dijadikan sebagai bahan obat ialah tanaman binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis). Tanaman ini memiliki potensi yang sangat besar untuk dijadikan bahan fitofarmaka mengingat manfaatnya yang banyak digunakan untuk mengobati berbagai macam penyakit.

  Penggunaan tanaman binahong biasanya dengan langsung mengunyah daun binahong, merebusnya, mencampurkan daun binahong dengan makanan lain seperti ketika membuat mie serta dengan dibuat dalam bentuk jus. Secara tradisional tanaman binahong telah digunakan untuk menyembuhkan sakit batuk, muntah darah, penyakit paru-paru, diabetes melitus, radang ginjal, ambeien, disentri, gusi berdarah, luka paska operasi dan melahirkan, jerawat, luka akibat kecelakaan, luka bakar, meningkatkan vitalitas pria, menjaga stamina, serta menurunkan kolesterol (Manoi, 2009). Namun belum dilakukan uji praklinis dan klinis untuk membuktikan khasiat tanaman binahong tersebut.

  Melihat begitu banyak khasiat binahong sebagai tanaman obat maka banyak dilakukan penelitian terhadap senyawa metabolit sekunder yang terdapat dalam tanaman binahong dengan skrining fitokimia untuk mengetahui golongan senyawa metabolit sekunder yang bertanggung jawab terhadap khasiat tanaman

  2 binahong sebagai bahan obat. Golongan senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada tanaman binahong antara lain steroid (Barboza, Cantero, Nunez, Pacciaroni, and Espinar, 2009). Dalam jurnal ini dikatakan bahwa tanaman binahong memiliki aktivitas biologi sebagai antibakteri dengan menggunakan daun yang telah dikeringkan dan secara tradisional, daun kering tanaman binahong digunakan sebagai antineuralgik, eye washes, neonatal dan paediatries

  

care , serta untuk perawatan kulit (jamur, kutil, gigitan serangga, gatal-gatal dan

  iritasi). Dalam jurnal lain (Fai and Tao, 2009) dikemukakan bahwa tanaman binahong mengandung asam oleanolat dan saponin, serta asam ursolat (Wibisono, 2010) yang telah ditetapkan kadarnya dengan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi fase terbalik. Berdasarkan hasil penelitian pendahuluan Universitas Gadjah Mada, dinyatakan bahwa pada kultur in vitro daun binahong terkandung senyawa aktif flavonoid, alkaloid, terpenoid, dan saponin (Manoi, 2009). Hasil uji pendahuluan yang dilakukan oleh Khunaifi (2010) pada ekstrak etil asetat daun binahong menunjukkan adanya alkaloid, flavonoid, dan polifenol, sedangkan menurut Arisandi dan Andriani (2006) dikatakan bahwa daun tanaman binahong memiliki kandungan kimia berupa γ-glucan, karoten, asam organik, mukopolisakarida dan asam aldonat, juga mengandung saponin, vitamin A, B, dan C.

  Selain kandungan metabolit sekunder, telah dilakukan juga uji efek farmakologi yang dilakukan antara lain uji aktivitas antibakteri ekstrak daun binahong terhadap bakteri staphylococcus aureus dan pseudomonas aerugino (Khunaifi, 2010), uji aktivitas antimikroba ekstrak n-heksana dan fraksi terpenoid tanaman Anredera cordifolia (Ten.) Steenis terhadap Staphylococcus aureus,

  3

  Eschericia coli dan Candida albicans (Arisadsita, 2010), uji efek tonikum infusa

  daun binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) pada mencit putih (Mus

  

musculus ) jantan galur Swiss Webster (Asriani, 2011), uji efektivitas ekstrak daun

  binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis.) sebagai antibakteri Salmonella

  

typhi penyebab tifus (Kurniati, 2011), dan uji aktivitas penangkap radikal ekstrak

  petroleum eter, etil asetat dan etanol daun binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Stenis) dengan metode DPPH (2,2-difenil-1- pikrihidrazil) (Handayani, 2009).

  Dilihat dari penggunaanya secara tradisional, senyawa metabolit sekunder dan uji efek farmakologi maka tanaman binahong berpotensi sangat besar untuk dijadikan bahan fitofarmaka. Potensi ini khususnya terkait dengan kegunaannya secara tradisional untuk meningkatkan stamina dan vitalitas pria yang berhubungan dengan kandungan metabolit sekunder berupa senyawa golongan sterid yang belum banyak ditemukan pada tanaman lain serta uji farmakologi berupa efek tonikum. Karena itu, pada penelitian ini akan digunakan pelarut yang bersifat nonpolar untuk proses ekstraksi agar senyawa streroid yang bersifat nonpolar akan ikut terekstrak. Namun, karena terdapat banyak senyawa lain yang terkandung dalam tanaman binahong maka yang terdapat dalam ekstrak bukan hanya senyawa metabolit sekunder golongan steroid tetapi terdapat juga golongan terpenoid dan asam lemak yang bersifat nonpolar.

  Seluruh bagian dari tanaman binahong ini dapat digunakan sebagai bahan obat, namun bahan yang paling sering digunakan dalam penelitian adalah bagian daun tanaman karena mudah diperoleh dan dibersihkan serta memiliki kemampuan sebagai bahan obat yang baik.

  4 Pada penelitian ini, daun tanaman binahong yang telah dikeringkan akan dimaserasi dengan menggunakan n-heksana, kemudian akan dilakukan fraksinasi dengan sistem kromatografi kolom serta KLT preparatif dan struktur dari senyawa tersebut akan diketahui dengan spektrometri UV/Vis, GC-MS dan IR.

  1. Permasalahan

  a. Berdasarkan skrining fitokimia, senyawa golongan apakah yang terkandung dalam fraksi I ekstrak n-heksana daun binahong? b. Berdasarkan analisis spektroskopi, senyawa apakah yang terkandung dalam fraksi I ekstrak n-heksana daun binahong?

  2. Keaslian penelitian

  Penelitian terhadap tanaman binahong telah banyak dilakukan, namun penelitian ini hanya berkisar pada skrining fitokimia untuk mengetahui golongan senyawa metabolit sekunder dan uji efek farmakologi dari tanaman binahong tetapi belum diketahui secara spesifik senyawa kimia apa dari golongan metabolit sekunder yang telah terbukti ada pada tanaman binahong ini.

  Golongan senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada tanaman binahong antara lain steroid (Barboza, Cantero, Nunez, Pacciaroni, and Espinar, 2009). Dalam jurnal ini dikatakan bahwa tanaman binahong memiliki aktivitas biologi sebagai antibakteri dengan menggunakan daun yang telah dikeringkan dan secara tradisional, daun kering tanaman binahong digunakan sebagai antineuralgik, eye washes, neonatal dan paediatries care, serta untuk perawatan kulit (jamur, kutil, gigitan serangga, gatal-gatal dan iritasi). Dalam jurnal lain (Fai and Tao, 2009) dikemukakan bahwa tanaman binahong mengandung asam

  5 oleanolat dan saponin, serta asam ursolat (Wibisono, 2010) yang telah ditetapkan kadarnya dengan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi fase terbalik. Berdasarkan hasil penelitian pendahuluan Universitas Gadjah Mada, dinyatakan bahwa pada kultur in vitro daun binahong terkandung senyawa aktif flavonoid, alkaloid, terpenoid, dan saponin (Manoi, 2009). Hasil uji pendahuluan yang dilakukan oleh Khunaifi (2010) pada ekstrak etil asetat daun binahong menunjukkan adanya alkaloid, flavonoid, dan polifenol, sedangkan dari menurut Arisandi dan Andriani (2006) dikatakan bahwa daun tanaman binahong memiliki kandungan kimia berupa γ-glucan, karoten, asam organik, mukopolisakarida, asam aldonat, juga mengandung saponin, vitamin A, B, dan C.

  Uji efek farmakologi yang dilakukan antara lain uji aktivitas antibakteri ekstrak daun binahong terhadap bakteri staphylococcus aureus dan pseudomonas

  

aerugino (Khunaifi, 2010), uji aktivitas antimikroba ekstrak n-heksana dan fraksi

  terpenoid tanaman binahong terhadap Staphylococcus aureus, Eschericia coli dan

  

Candida albicans (Arisadsita, 2010), uji efek tonikum infusa daun binahong pada

  mencit putih (Mus musculus) jantan galur Swiss Webster (Asriani, 2011), uji efektivitas ekstrak daun binahong sebagai antibakteri Salmonella typhi penyebab tifus (Kurniati, 2011), dan uji aktivitas penangkap radikal ekstrak petroleum eter, etil asetat dan etanol daun binahong dengan metode DPPH (2,2-difenil-1- pikrihidrazil) (Handayani, 2009).

  Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan sebelumnya, maka peneliti ingin mengisolasi senyawa steroid yang dapat berfungsi untuk meningkatkan imunitas dan dapat dikatakan meruuakan salah satu senyawa yang bertanggung

  6 jawab terhadap efek farmakologis sebagai efek tonikum. Karena itu perlu dilakukan penelitian lebih lanjut dengan skrining fitokimia untuk mencari kandungan senyawa hasil isolasi dan identifikasi dengan metode spektroskopi untuk mengetahui struktur senyawa kimia dalam tanaman binahong.

3. Manfaat penelitian

  a. Manfaat teoritis. Mendapatkan informasi sebagai data kimia, metabolit sekunder yang terkandung dalam daun tanaman binahong.

  b. Manfaat metodologis. Mendapatkan informasi mengenai metode yang digunakan untuk melakukan fraksinasi dan identifikasi senyawa kimia dalam fraksi I ekstrak n-heksana daun binahong.

  c. Manfaat praktis. Mengetahui kandungan senyawa kimia dalam fraksi I ekstrak n-heksana daun binahong sehingga tanaman binahong dapat dikembangkan menjadi suatu fitofarmaka.

B. Tujuan Penelitian

  1. Tujuan umum

  Mendukung memberikan informasi tentang aktifitas tanaman binahong berdasarkan senyawa kimia yang terkandung di dalamnya.

  2. Tujuan khusus

  Mengetahui golongan senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam ekstrak fraksi I n-heksana daun binahong dengan skrining fitokimia dan mengidentifikasinya senyawa kimia tersebut dengan metode spektroskopi.

BAB II PENELAAHAN PUSTAKA A. Tanaman Binahong Binahong berupa tumbuhan menjalar, berumur panjang (perenial), bisa

  mencapai panjang ± 5m. Akar berbentuk rimpang, berdaging lunak. Batang lunak, silindris, saling membelit, berwarna hijau, bagian dalam solid, permukaan halus, kadang membentuk semacam umbi yang melekat di ketiak daun dengan bentuk tak beraturan dan bertekstur kasar. Daun tunggal, bertangkai sangat pendek (subsessile), tersusun berseling, berwarna hijau, bentuk jantung (cordata), panjang 5-10cm, lebar 3-7cm, helaian daun tipis lemas, ujung runcing, pangkal berlekuk (emerginatus), tepi rata, permukaan licin, bisa dimakan. Bunga majemuk berbentuk tandan, bertangkai panjang, muncul di ketiak daun, mahkota berwarna krem keputih-putihan berjumlah lima helai tidak berlekatan, panjang helai mahkota 0,5-1cm, berbau harum. Perbanyakan generatif (biji), namun lebih sering berkembang atau dikembangbiakan secara vegetatif melalui akar rimpangnya (Manoi, 2009).

  Klasifikasi tanaman binahong Kingdom : Plantae (tumbuhan) Subkingdom : Tracheobionta (tumbuhan berpembuluh) Super Divisi : Spermatophyta (menghasilkan biji) Divisi : Magnoliophyta (tumbuhan berbunga) Kelas : Magnoliopsida (berkeping dua/dikotil) Sub Kelas : Hamamelidae

  8 Ordo : Caryophyllales Famili : Basellaceae Genus : Anredera Spesies : Anredera cordifolia (Ten.) Steenis (Manoi, 2009).

  Secara tradisional tanaman binahong telah digunakan untuk menyembuhkan sakit batuk, muntah darah, penyakit paru-paru, diabetes melitus, radang ginjal, ambeien, disentri, gusi berdarah, luka paska operasi dan melahirkan, jerawat, luka akibat kecelakaan, luka bakar, meningkatkan vitalitas pria, menjaga stamina, serta menurunkan kolesterol. Cara penggunaan tanaman binahong sebagai bahan obat biasanya dilakukan dengan langsung mengunyah daun binahong, merebusnya, mencampurkan daun binahong dengan makanan lain seperti ketika membuat mie serta dengan dibuat dalam bentuk jus (Manoi, 2009).

  Golongan senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada tanaman binahong berdasarkan penelitian yang telah dilakukan antara lain: steroid (Barboza, dkk., 2009), asam oleanolat, saponin, dan asam ursolat (Wibisono, 2010), flavonoid, alkaloid, terpenoid dan saponin (Anonim, 2009), alkaloid, flavonoid dan polifenol pada ekstrak etil asetat daun binahong (Khunaifi, 2010), serta γ-glukan, karoten, asam organik, dan mukopolisakarida seperti L-arabinosa, D-galaktosa, L-ramnosa, dan asam aldonat, juga saponin, vitamin A, B, dan C pada daun binahong (Arisandi dan Andriani, 2006).

  9

B. Ekstraksi

  Ekstraksi adalah penyarian zat-zat berkhasiat atau zat-zat aktif dari bagian tanaman obat, hewan dan beberapa jenis ikan termasuk biota laut. Tujuan ekstraksi bahan alam adalah untuk menarik komponen kimia yang terdapat pada bahan alam. Ekstraksi ini didasarkan pada prinsip perpindahan massa komponen zat ke dalam pelarut, dimana perpindahan mulai terjadi pada lapisan antar muka kemudian berdifusi masuk ke dalam pelarut (Umi, 2011).

  Jenis ekstraksi bahan alam yang sering dilakukan adalah ekstraksi secara panas dengan cara refluks, penyulingan uap air dan dengan alat sokhlet, serta ekstraksi secara dingin dengan cara maserasi dan perkolasi (Umi, 2011).

  1. Ekstraksi dengan alat sokhlet

  Ekstraksi ini merupakan ekstraksi secara berkesinambungan. Cairan penyari dipanaskan sampai mendidih, uap penyari akan naik melalui pipa samping, kemudian diembunkan oleh pendingin tegak. Cairan penyari turun untuk menyari zat aktif dalam simplisia. Selanjutnya bila cairan penyari mencapai sifon, maka seluruh cairan akan turun ke labu alas bulat dan terjadi proses sirkulasi. Demikian seterusnya sampai zat aktif yang terdapat dalam simplisia tersari seluruhnya yang ditandai jernihnya cairan yang lewat pada tabung sifon (Umi, 2011).

  2. Ekstraksi secara perkolasi

  Perkolasi dilakukan dengan cara membasahkan 10 bagian simplisia dengan derajat halus yang cocok, menggunakan 2,5 bagian sampai 5 bagian cairan penyari dimasukkan dalam bejana tertutup sekurang-kurangnya 3 jam. Massa

  10 dipindahkan sedikit demi sedikit ke dalam perkolator dan ditambahkan cairan penyari. Perkolator ditutup dibiarkan selama 24 jam, kemudian kran dibuka dengan kecepatan 1 ml permenit, sehingga simplisia tetap terendam. Filtrat dipindahkan ke dalam bejana, ditutup dan dibiarkan selama 2 hari pada tempat terlindung dari cahaya (Umi, 2011).

  3. Ekstraksi secara maserasi

  Maserasi dilakukan dengan cara memasukkan 10 bagian simplisia dengan derajat halus yang cocok ke dalam bejana, kemudian dituangi dengan penyari 75 bagian, ditutup dan dibiarkan selama 5 hari, terlindung dari cahaya sambil diaduk sekali-kali setiap hari lalu diperas dan ampasnya dimaserasi kembali dengan cairan penyari. Penyarian diakhiri setelah pelarut tidak berwarna lagi, lalu dipindahkan ke dalam bejana tertutup, dibiarkan pada tempat yang tidak bercahaya, setelah dua hari lalu endapan dipisahkan (Umi, 2011).

  4. Ekstraksi secara refluks

  Ekstraksi dengan cara ini pada dasarnya adalah ekstraksi berkesinambungan. Bahan yang akan diekstraksi direndam dengan cairan penyari dalam labu alas bulat yang dilengkapi dengan alat pendingin tegak, lalu dipanaskan sampai mendidih. Cairan penyari akan menguap, uap tersebut akan diembunkan dengan pendingin tegak dan akan kembali menyari zat aktif dalam simplisia tersebut, demikian seterusnya. Ekstraksi ini biasanya dilakukan 3 kali dan setiap kali diekstraksi selama 4 jam (Umi, 2011).

  11

5. Ekstraksi secara penyulingan

  Penyulingan dapat dipertimbangkan untuk menyari serbuk simplisia yang mengandung komponen kimia yang mempunyai titik didih yang tinggi pada tekanan udara normal, yang pada pemanasan biasanya terjadi kerusakan zat aktifnya. Untuk mencegah hal tersebut, maka penyari dilakukan dengan penyulingan (Umi, 2011).

C. Skrining Fitokimia

  Salah satu pendekatan untuk penelitian tumbuhan obat adalah penampisan senyawa kimia yang terkandung dalam tanaman. Cara ini digunakan untuk mendeteksi senyawa tumbuhan berdasarkan golongannya. Sebagai informasi awal dalam mengetahui senyawa kimia apa yang mempunyai aktivitas biologi dari suatu tanaman (Umi, 2011).

1. Alkaloid

  Alkaloid, sekitar 5500 telah diketahui, merupakan zat tumbuhan sekunder yang terbesar. Pada umumnya alkaloid mencakup senyawa bersifat basa yang mengandung satu atau lebih atom nitrogen, biasanya dalam gabungan, sebagai bagian dari sistem siklik. Alkaloid sering kali beracun bagi manusia dan banyak yang mempunyai kegiatan fisiologi yang menonjol; jadi digunakan secara luas dalam bidang pengobatan. Alkaloid biasanya tidak berwarna, sering kali bersifat optis aktif, kebanyakan berbentuk kristal tetapi hanya sedikit yang berupa cairan pada suhu kamar. Uji sederhana, tetapi sama sekali tidak sempurna, untuk alkaloid dalam daun atau buah segar adalah rasa pahitnya di lidah (Harborne, 1987).

  12 Secara umum, golongan senyawa alkaloid mempunyai sifat-sifat sebagai berikut:

  I. Biasanya berupa kristal tak berwarna, tidak mudah menguap, tidak larut dalam air, larut dalam pelarut-pelarut organik seperti etanol, eter dan kloroform. Beberapa alkaloid (seperti koniina dan nikotina) berwujud cair dan larut dalam air. Ada juga alkaloid yang berwarna, misalnya berberina (kuning).

  II. Bersifat basa; pada umumnya berasa pahit, bersifat racun, mempunyai efek fisiologis serta optik aktif.

  III. Dapat membentuk endapan dengan larutan asam fosfolframat, asam fosfomolibdat, asam pikrat, kalium merkuriiodida, dan lain sebagainya. Dari endapan-endapan ini, banyak juga yang memiliki bentuk kristal yang khusus sehingga sangat bermanfaat dalam identifikasinya (Tobing, 1989).

2. Flavonoid

  Semua flavonoid, menurut strukturnya, merupakan turunan senyawa induk flavon yang terdapat berupa tepung putih pada tumbuhan primula, dan semuanya mempunyai sejumlah sifat yang sama. Flavonoid terutama berupa senyawa yang larut dalam air. Dapat diekstraksi dengan etanol 70% dan tetap ada dalam lapisan air setelah ekstrak ini dikocok dengan eter minyak bumi. Flavonoid berupa senyawa fenol, karena itu warnanya berubah bila ditambah basa atau amonia; jadi, mereka mudah dideteksi pada kromatogram atau dalam larutan (Harborne, 1987).

  13 Flavonoid mengandung sistem aromatik yang terkonjugasi dan karena itu menunjukan pita serapan kuat pada daerah spektrum UV dan spektrum tampak.

  Flavonoid umumnya terdapat pada tumbuhan, terikat pada gula sebagai glikosida dan aglikon flavonoid yang manapun mungkin terdapat dalam satu tumbuhan dalam beberapa bentuk kombinsi glikosida. Flavonoid terdapat pada semua tumbuhan berpembuluh tetapi beberapa kelas lebih tersebar dari pada yang lainnya (Harborne, 1987).

3. Tanin

  Tanin terdapat luas dalam tumbuhan berpembuluh, dalam angiospermae terdapat khusus dalam jaringan kayu. Menurut batasanya, tanin dapat bereaksi dengan protein membentuk kepolumer mantap yang tidak larut dalam air. Dalam industri, tanin adalah senyawa yang berasal dari tumbuhan, yang mampu mengubah kulit hewan yang mentah menjadi kulit siap pakai karena kemampuanya menyambung silang protein (Harbrorne, 1987).

  Di dalam tumbuhan letak tanin terpisah dari protein dan enzim sitoplasma, tetapi bila jaringan rusak, misalnya bila hewan memakanya, maka reaksi penyamakan dapat terjadi. Reaksi ini menyebabkan protein lebih sukar dicapai oleh cairan pencernaan hewan. Pada kenyataanya, sebagian besar tumbuhan yang banyak bertanin dihindari oleh hewan pemakan tumbuhan karena rasanya yang sepat. Kita menganggap salah satu fungsi utama tanin dalam tumbuhan ialah sebagai penolak hewan pemakan tumbuhan (Harbrorne, 1987).