Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia serta Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak n-heksan Etilasetat dan Etanol Daun Sisik Naga (Pyrrosia piloselloides (L) M.G.Price)

48 Lampiran 1. Surat Hasil Identifikasi Tumbuhan

50 Lampiran 2.

51 Gambar 3.2 Daun sisik naga segar

52 Lampiran 4.

53

Gambar 3.5 Hasil pemeriksaan mikroskopik serbuk simplisia daun sisik naga (Perbesaran 10x40)

Keterangan:

1. Stomata tipe anomositik

2. Berkas pengangkut dengan penebalan spiral 3. Rambut penutup

4. Epidermis

5. Rambut penutup bentuk bintang

1

2

3 4

54 Lampiran 6.

Gambar 3.6 Bagan kerja penelitian

Serbuk simplisia Daun sisik naga (3.95 g)

Simplisia (0.62 g)

Dicuci, ditiriskan, dipotong menjadi bagian kecil dan ditimbang sebagai berat basah

Dikeringkan dalam lemari pengering

Ditimbang berat kering Dihaluskan

Pemeriksaan makroskopik Pemeriksaan mikroskopik Penetapan kadar air

Penetapan kadar sari yang larut

dalam air Penetapan kadar

sari yang larut dalam etanol Penetapan kadar

abu total Penetapan kadar

abu yang tidak larut dalam asam

Pemeriksaan alkaloida Pemeriksaan

glikosida Pemeriksaan

flavonoida Pemeriksaan

tanin Pemeriksaan

saponin Pemeriksaan

Steroida/ triterpenoida

Karakterisasi simplisia Skrining Fitokimia Pembuatan Ekstrak

Maserat

Ekstrak kental

Hasil

Dimaserasi bertahap dengan penyari

n-heksan; etilasetat dan etanol

Diuapkan dengan rotary evaporator

Dilakukan uji aktivitas antioksidan secara spektrofotometri UV-Visible

55

56

Lampiran 8. Perhitungan pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia daun sisik naga

1. Perhitungan kadar air serbuk simplisia daun sisik naga

% Kadar air simplisia =

(g) sampel berat (ml) air volume x 100%

No. Berat sampel (g) Volume awal (ml) Volume akhir (ml)

1. 5,021 2,1 2,3

2. 5,022 2,3 2,5

3. 5,029 2,5 2,75

1. Kadar air = x 100%

5,021 1 , 2 3 , 2 − = 3,98%

2. Kadar air = x 100%

5,022 3 , 2 5 , 2 − = 3,98%

3. Kadar air = x 100%

5,029 5 , 2 75 , 2 − = 4,97% % Rata-rata kadar air =

3 97 , 4 98 , 3 98 ,

3 + +

= 4,31%

2. Perhitungan kadar sari larut air

% Kadar sari larut air = x 100% 20 100 x (g) sampel Berat (g) sari Berat

No. Berat sampel (g) Berat sari (g)

1. 5,023 0,259

2. 5,079 0,210

3. 5,003 0,266

1. Kadar sari larut air = x 5,023 259 , 0 100% x 20 100 = 25,78% 2. Kadar sari larut air = x

5,079 210 , 0 100% x 20 100 = 20,67%

57 3. Kadar sari larut air = x

5,003 266 , 0 100% x 20 100 = 26,58% % Rata-rata kadar sari larut air =

3 58 , 26 67 , 20 78 ,

25 + +

= 24,34%

3. Perhitungan kadar sari simplisia larut etanol

% Kadar sari larut etanol = x 100%

20 100 x (g) simplisia Berat (g) sari Berat

No. Berat sampel (g) Berat sari (g)

1. 5,010 0,083

2. 5,010 0,084

3. 5,009 0,083

1. Kadar sari larut etanol = x 5,010 083 , 0 100% x 20 100 = 8,28% 2. Kadar sari larut etanol = x

5,010 084 , 0 100% x 20 100 = 8,38% 3. Kadar sari larut etanol = x

5,009 083 , 0 100% x 20 100 = 8,28% % Rata-rata kadar sari larut etanol =

3 28 , 8 38 , 8 28 ,

8 + +

= 8,31%

4. Perhitungan kadar abu total simplisia

% Kadar abu total = x 100%

(g) simplisia Berat (g) abu Berat

No. Berat sampel (g) Berat abu (g)

1. 2,0003 0,1295

2. 2,0001 0,1299

58 Lampiran 8 (lanjutan)

1. Kadar abu total = x 100% 2,0003

1295 , 0

= 6,47% 2. Kadar abu total = x 100%

2,0001 1299 , 0

= 6,49% 3. Kadar abu total = x 100%

2,0001 1298 , 0

= 6,18% % Rata-rata kadar abu total =

3 18 , 6 49 , 6 47 ,

6 + +

= 6,38%

5. Perhitungan kadar abu simplisia tidak larut asam

% Kadar abu tidak larut dalam asam = x 100% (g) simplisia Berat (g) abu Berat

No. Berat sampel (g) Berat abu (g)

1. 2,0001 0,0092

2. 2,0003 0,0089

3. 2,0001 0,0099

1. Kadar abu tidak larut asam = x 100% 2,0001

0092 , 0

= 0,46% 2. Kadar abu tidak larut asam = x 100%

2,0072 0089 , 0

= 0,45% 3. Kadar abu tidak larut asam = x 100%

2,0001 0099 , 0

= 0,49% % Rata-rata kadar abu tidak larut asam =

3 49 , 0 45 , 0 46 ,

0 + +

59

No. ABS K*ABS

1 1,0076 1,0076

2 1,0168 1,0168

3 1,0314 1,0314

4 1,0411 1,0411

5 1,0560 1,0560

6 1,0664 1,0664

7 1,0739 1,0739

8 1,0898 1,0898

9 1,1018 1,1018

10 1,1359 1,1359

11 1,1366 1,1366

12 1,1366 1,1366

13 1,1366 1,1366

14 1,1366 1,1366

15 1,1366 1,1366

16 1,1366 1,1366

17 1,1366 1,1366

18 1,1366 1,1366

19 1,1366 1,1366

60 Lampiran 10. Hasil Uji Aktivitas Antioksidan

1. Tabel hasil uji aktivitas antioksidan ekstrak n-heksan daun sisik naga Larutan

uji

Konsentrasi (ppm)

Absorbansi % Peredaman

I II III I II III

Rata-rata

Ekstrak n-heksan

0 1,112 1,128 1,128 0,00 0,00 0,00 0,00 100 0,983 0,982 0,982 12,88 12,95 25,79 17,19 200 0,903 0,888 0,882 32,77 34,10 34,65 33,84 400 0,858 0,849 0,846 36,75 37,57 37,82 37,38 800 0,658 0,655 0,653 54,46 54,75 47,47 52,23

2. Tabel hasil uji aktivitas antioksidan ekstrak etilasetat daun sisik naga Larutan

uji

Konsentrasi (ppm)

Absorbansi % Peredaman

I II III I II III

Rata-rata

Ekstrak etilasetat

0 1,112 1,100 1,096 0,00 0,00 0,00 0,00 100 0,931 0,909 0,905 17,36 12,95 27,08 19,13 200 0,856 0,833 0,824 23 24,27 34,55 27,27 400 0,693 0,670 0,664 37,63 39,05 49,11 41,93 800 0,386 0,383 0,380 65,21 75,26 75 71,82

3. Tabel hasil uji aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun sisik naga Larutan

uji

Konsentrasi (ppm)

Absorbansi % Peredaman

I II III I II III

Rata-rata

Ekstrak etanol

0 1.137 1.137 1,137 0,00 0,00 0,00 0,00 100 0.090 0.090 0.090 92,03 92,03 92,03 92,03 200 0.075 0.075 0.075 93,37 93,40 93,39 93,38 400 0.066 0.066 0,665 94,15 94,19 94,04 94,12 800 0.061 0.061 0.061 94,57 94,55 94,06 94,39

61

4. Tabel hasil uji aktivitas antioksidan vitamin C

Larutan uji

Konsentrasi (ppm)

Absorbansi % Peredaman

I II III I II III

Rata-rata

Vitamin C

0 0,983 0,988 0,990 0,00 0,00 0,00 0,00 1 0,758 0,758 0,758 22,89 23,28 23,43 23,20 2 0,531 0,531 0,531 45,98 46,26 46,36 46,20 4 0,189 0,190 0,190 80,77 80,77 80,81 80,78 8 0,098 0,097 0,097 90,03 90,18 90,20 90,14

62

Lampiran 11. Contoh perhitungan persen peredaman dan nilai IC50

a. Contoh perhitungan persen peredaman ekstrak n-heksan daun sisik

naga

Tabel data absorbansi DPPH pengukuran II ekstrak n-heksan daun sisik naga No. Konsentrasi Larutan Uji (ppm) Absorbansi

1. 0 1,1284

2. 100 0,9823

3. 200 0,8885

4. 400 0,8493

5. 800 0,6555

% Peredaman = x 100%

kontrol A sampel A -kontrol A

Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel Asampel = Absorbansi sampel

Perhitungan % peredaman ekstrak n-heksan daun sisik naga sebagai berikut: Konsentrasi 100 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A sampel A -kontrol A

% Peredaman = x 100%

1,1284 9823 , 0 1,1284− = 12,95% Konsentrasi 200 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A sampel A -kontrol A

% Peredaman = x 100%

1,1284 8885 , 0 ,1284 1 − = 34,10% Konsentrasi 400 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A sampel A -kontrol A

% Peredaman = x 100%

1,1284 8493 , 0 1,1284− = 37,57% Konsentrasi 800 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A sampel A -kontrol A

63

% Peredaman = x 100%

1,1284 6555 , 0 1,1284− = 54,75%

Tabel IC50 ekstrak n-heksan daun sisik naga pengukuran II

X Y XY X2

0 0 0 0

100 22,95 2295 10000

200 34,10 6820 40000

400 37,57 15028 160000

800 54,75 43800 640000

ΣX= 1500 300

ΣY= 149,37 29,87

ΣXY= 67943 ΣX2= 850000

X = Konsentrasi (ppm) Y = % Peredaman a =

n / ) X ( ) X ( n / Y) X)( ( -XY) ( 2 2 − ∑ ∑ ∑ ∑ = 400000 23132 5 / ) 1500 ( ) 850000 ( 5 / ) 37 , 149 )( 1500 ( ) 67943 (

2 = =

− −

0,0578

b = y-a x = 29,87 – (0,0578)(300)

= 12,53

Jadi, persamaan garis regresi Y = 0,0578X + 12,53 Nilai IC50 = Y = 0,0578X + 12,53

50 = 0,0578X + 12,53 X = 648,26 ` IC50= 648,26 ppm

64 Lampiran 11 (lanjutan)

b. Contoh perhitungan persen peredaman ekstrak etilasetat daun sisik

naga

Tabel data absorbansi DPPH pengukuran III

No. Konsentrasi Larutan Uji (ppm) Absorbansi

1. 0 1,0968

2. 100 0,9059

3. 200 0,8240

4. 400 0,6643

5. 800 0,3803

% Peredaman = x 100%

kontrol A sampel A -kontrol A

Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel Asampel = Absorbansi sampel

Perhitungan % peredaman ekstrak etilasetat daun sisik naga Konsentrasi 100 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A sampel A -kontrol A

% Peredaman = x 100%

1,0968 9059 , 0 1,0968− = 27,08% Konsentrasi 200 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A sampel A -kontrol A

% Peredaman = x 100%

1,0968 8240 , 0 1,0968− = 34,55% Konsentrasi 400 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A sampel A -kontrol A

% Peredaman = x 100%

1,0968 6643 , 0 1,0968− = 49,11%

65 Konsentrasi 800 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A sampel A -kontrol A

% Peredaman = x 100%

,0968 1 3803 , 0 1,0968− = 75%

Tabel IC50 ekstrak etillasetat daun sisik naga pengukuran III

X Y XY X2

0 0 0 0

100 27,08 2708 10000

200 34,55 6910 40000

400 49,11 19644 160000

800 75 60000 640000

ΣX= 1500 300

ΣY= 185,74 37,148

ΣXY= 89262 ΣX2

= 850000

X = Konsentrasi (ppm) Y = % Peredaman a =

n / ) X ( ) X ( n / Y) X)( ( -XY) ( 2 2 − ∑ ∑ ∑ ∑

= 0,0838

400000 33540 5 / ) 1500 ( ) 850000 ( 5 / ) 74 , 185 )( 1500 ( ) 89262 (

2 = =

− −

b = y-a x = 37,148– (0,0838)(300)

= 12

Jadi, persamaan garis regresi Y = 0,0838X + 12 Nilai IC50 = Y = 0,0838X + 12

50 = 0,0838X + 12 X = 453,46

66 Lampiran 11 (lanjutan)

c. Contoh perhitungan persen peredaman ekstrak etilasetat daun sisik

naga

Tabel data absorbansi DPPH pengukuran III

No. Konsentrasi Larutan Uji (ppm) Absorbansi

1. 0 1,1375

2. 100 0,0907

3. 200 0,0752

4. 400 0,0657

5. 800 0,0618

% Peredaman = x 100%

kontrol A sampel A -kontrol A

Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel Asampel = Absorbansi sampel

Perhitungan % peredaman ekstrak etanol daun sisik naga sebagai berikut: Konsentrasi 100 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A sampel A -kontrol A

% Peredaman = x 100%

1,1375 0907 , 0 1,1375− = 92,03% Konsentrasi 200 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A sampel A -kontrol A

% Peredaman = x 100%

1,1375 0752 , 0 1,1375− = 93,39% Konsentrasi 400 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A sampel A -kontrol A

% Peredaman = x 100%

1,1375 0678 , 0 1,1375− = 94,04%

67 Lampiran 11 (lanjutan)

Konsentrasi 800 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A sampel A -kontrol A

% Peredaman = x 100%

1,1375 0618 , 0 1,1375− = 94,57%

Tabel IC50 ekstrak etanol daun sisik naga pengukuran III

X Y XY X2

0 0 0 0

100 92,03 9203 10000

200 93,39 18678 40000

400 94,04 37616 160000

800 94,57 75656 640000

ΣX= 1500 300

ΣY= 374,03 74,806

ΣXY= 141153 ΣX2

= 850000

X = Konsentrasi (ppm) Y = % Peredaman a =

n / ) X ( ) X ( n / Y) X)( ( -XY) ( 2 2 − ∑ ∑ ∑ ∑

= 0,0724

400000 28944 5 / ) 1500 ( ) 21600 ( 5 / ) 03 , 374 )( 1500 ( ) 141153 (

2 = =

− −

b = y-a x = 74,806– (0,0724)(300)

= 53,08

Jadi, persamaan garis regresi Y = 0,0724X - 53,08 Nilai IC50 = Y = 0,0724X - 53,08

50 = 0,0724X - 53,08 X = 42,62

62

a. Contoh perhitungan persen peredaman ekstrak n-heksan daun sisik naga

Tabel data absorbansi DPPH pengukuran II ekstrak n-heksan daun sisik naga No. Konsentrasi Larutan Uji (ppm) Absorbansi

1. 0 1,1284

2. 100 0,9823

3. 200 0,8885

4. 400 0,8493

5. 800 0,6555

% Peredaman = x 100%

kontrol A

sampel A -kontrol A

Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel Asampel = Absorbansi sampel

Perhitungan % peredaman ekstrak n-heksan daun sisik naga sebagai berikut: Konsentrasi 100 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A

sampel A -kontrol A

% Peredaman = x 100%

1,1284 9823 , 0 1,1284−

= 12,95% Konsentrasi 200 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A

sampel A -kontrol A

% Peredaman = x 100%

1,1284 8885 , 0 ,1284

1 −

= 34,10% Konsentrasi 400 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A

sampel A -kontrol A

% Peredaman = x 100%

1,1284 8493 , 0 1,1284−

= 37,57% Konsentrasi 800 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A

sampel A -kontrol A

63 Lampiran 11 (lanjutan)

% Peredaman = x 100%

1,1284 6555 , 0 1,1284−

= 54,75%

Tabel IC50 ekstrak n-heksan daun sisik naga pengukuran II

X Y XY X2

0 0 0 0

100 22,95 2295 10000

200 34,10 6820 40000

400 37,57 15028 160000

800 54,75 43800 640000

ΣX= 1500 300

ΣY= 149,37 29,87

ΣXY= 67943 ΣX2= 850000

X = Konsentrasi (ppm) Y = % Peredaman a =

n / ) X ( ) X (

n / Y) X)( ( -XY) (

2 2 −

∑

∑ ∑ ∑

=

400000 23132 5

/ ) 1500 ( ) 850000 (

5 / ) 37 , 149 )( 1500 ( ) 67943 (

2 = =

− −

0,0578

b = y-a x = 29,87 – (0,0578)(300)

= 12,53

Jadi, persamaan garis regresi Y = 0,0578X + 12,53 Nilai IC50 = Y = 0,0578X + 12,53

50 = 0,0578X + 12,53 X = 648,26 ` IC50 = 648,26 ppm

64

b. Contoh perhitungan persen peredaman ekstrak etilasetat daun sisik naga

Tabel data absorbansi DPPH pengukuran III

No. Konsentrasi Larutan Uji (ppm) Absorbansi

1. 0 1,0968

2. 100 0,9059

3. 200 0,8240

4. 400 0,6643

5. 800 0,3803

% Peredaman = x 100%

kontrol A

sampel A -kontrol A

Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel Asampel = Absorbansi sampel

Perhitungan % peredaman ekstrak etilasetat daun sisik naga Konsentrasi 100 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A

sampel A -kontrol A

% Peredaman = x 100%

1,0968 9059 , 0 1,0968−

= 27,08% Konsentrasi 200 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A

sampel A -kontrol A

% Peredaman = x 100%

1,0968 8240 , 0 1,0968−

= 34,55% Konsentrasi 400 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A

sampel A -kontrol A

% Peredaman = x 100%

1,0968 6643 , 0 1,0968−

65 Lampiran 11 (lanjutan)

Konsentrasi 800 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A

sampel A -kontrol A

% Peredaman = x 100%

,0968 1

3803 , 0 1,0968−

= 75%

Tabel IC50 ekstrak etillasetat daun sisik naga pengukuran III

X Y XY X2

0 0 0 0

100 27,08 2708 10000

200 34,55 6910 40000

400 49,11 19644 160000

800 75 60000 640000

ΣX= 1500 300

ΣY= 185,74 37,148

ΣXY= 89262 ΣX2

= 850000

X = Konsentrasi (ppm) Y = % Peredaman a =

n / ) X ( ) X (

n / Y) X)( ( -XY) (

2 2 −

∑

∑ ∑ ∑

= 0,0838

400000 33540 5

/ ) 1500 ( ) 850000 (

5 / ) 74 , 185 )( 1500 ( ) 89262 (

2 = =

− −

b = y-a x = 37,148– (0,0838)(300)

= 12

Jadi, persamaan garis regresi Y = 0,0838X + 12 Nilai IC50 = Y = 0,0838X + 12

50 = 0,0838X + 12 X = 453,46

66 Lampiran 11 (lanjutan)

c. Contoh perhitungan persen peredaman ekstrak etilasetat daun sisik naga

Tabel data absorbansi DPPH pengukuran III

No. Konsentrasi Larutan Uji (ppm) Absorbansi

1. 0 1,1375

2. 100 0,0907

3. 200 0,0752

4. 400 0,0657

5. 800 0,0618

% Peredaman = x 100%

kontrol A

sampel A -kontrol A

Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel Asampel = Absorbansi sampel

Perhitungan % peredaman ekstrak etanol daun sisik naga sebagai berikut: Konsentrasi 100 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A

sampel A -kontrol A

% Peredaman = x 100%

1,1375 0907 , 0 1,1375−

= 92,03% Konsentrasi 200 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A

sampel A -kontrol A

% Peredaman = x 100%

1,1375 0752 , 0 1,1375−

= 93,39% Konsentrasi 400 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A

sampel A -kontrol A

% Peredaman = x 100%

1,1375 0678 , 0 1,1375−

67 Lampiran 11 (lanjutan)

Konsentrasi 800 ppm

% Peredaman = x 100%

kontrol A

sampel A -kontrol A

% Peredaman = x 100%

1,1375 0618 , 0 1,1375−

= 94,57%

Tabel IC50 ekstrak etanol daun sisik naga pengukuran III

X Y XY X2

0 0 0 0

100 92,03 9203 10000

200 93,39 18678 40000

400 94,04 37616 160000

800 94,57 75656 640000

ΣX= 1500 300

ΣY= 374,03 74,806

ΣXY= 141153 ΣX2

= 850000

X = Konsentrasi (ppm) Y = % Peredaman a =

n / ) X ( ) X (

n / Y) X)( ( -XY) (

2 2 −

∑

∑ ∑ ∑

= 0,0724

400000 28944 5

/ ) 1500 ( ) 21600 (

5 / ) 03 , 374 )( 1500 ( ) 141153 (

2 = =

− −

b = y-a x = 74,806– (0,0724)(300)

= 53,08

Jadi, persamaan garis regresi Y = 0,0724X - 53,08 Nilai IC50 = Y = 0,0724X - 53,08

50 = 0,0724X - 53,08 X = 42,62