Pemeriksaan Flavonoid dan Polifenol Serta Uji Aktivitas Antioksidan Teh Daun Sirsak Kemasan (Annona muricata Linn.) Dengan Metode Pemerangkapan DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)
Lampiran 1. Bagan kerja penelitian
1 g Serbuk sampel
Dimasukkan kedalam beaker glass,
ditambahkan 100 ml air panas dan
diletakkan diatas hot plate.
Didihkan.
Seduhan Teh Daun
Sirsak Kemasan
Dilakukan uji aktivitas
antioksidan secara
spektrofotometri UVVisible
Pemeriksaan Senyawa
Bersifat Antioksidan
Senyawa
Flavonoid
Hasil
Senyawa
Polifenol
35
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 2. Data kemasan teh daun sirsak
2.1 K1: Kemasan
Nama Produk
Komposisi
Isi
Produksi
No. Registrasi
Tgl. Produksi
Exp. Date
: Griya Herba Drink
: Daun Sirsak (Annona muricata folium)
: 40 g (20 x 2 g)
: UD. Herba Sari Sukoharjo – Indonesia untuk
CV. Griya Herba Semarang – Indonesia
: P.IRT No. 810331114343
: 19 Januari 2016
: 19 Januari 2018
2.2 K2: Kemasan 2
Nama Produk
Komposisi
Isi
Produksi
No. Registrasi
Tgl. Produksi
Exp. Date
No. Batch
: Teh Herbal Celup Laurico Daun Sirsak (Soursop leaf bag)
: Daun Sirsak (Annona muricata folium)
: 50 g (25 x 2 g)
: PT. Palma Natura Sanat Depok – Jawa Barat
: Dinkes P.IRT No. 81327603115
:: 28 November 2016
: 1056
2.3 K3: Kemasan 3
Nama Produk
Komposisi
Isi
Produksi
No. Registrasi
Tgl. Produksi
Exp. Date
No. Batch
: Gravila Teh Celup Daun Sirsak
: Daun Sirsak (Annona muricata folium)
: 50 g (25 x 2 g)
: CV. Permana Putra Mandiri Jakarta - Indonesia
: Dinkes P.IRT No. 310321301554
:: April 2018
: 011015
36
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3. Gambar kantongan dan serbuk teh daun sirsak.
Gambar 1. Kantongan dan serbuk teh daun sirsak K1
Gambar 2. Kantongan dan serbuk teh daun sirsak K2
Gambar 3. Kantongan dan serbuk teh daun sirsak K3
37
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 4. Gambar seperangkat alat spektrofotometer UV-Visibel
(UV 1800 - Shimadzu)
Gambar 4. Gambar seperangkat alat spektrofotometer UV - Visibel (UV 1800 Shimadzu)
38
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 5. Perhitungan Pembuatan larutan blanko DPPH 0,5 mM
M=
0,5 mM =
g 1000
�
��
�
mg
1000
�
394,32 g/mol 100 ��
mg = 19,716 mg ≈ 20 mg
Jadi, serbuk DPPH yang ditimbang adalah 20 mg untuk membuat larutan
blanko DPPH 0,5 mM didalam volume 100 ml.
39
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 6. Hasil Pengukuran Operating Time
6.1 Hasil Pengukuran Operating Time Tanpa Sampel.
Time
Raw
(Minute)
Data
0.0000
1.1426
1.0000
1.1381
2.0000
1.1345
3.0000
1.1314
4.0000
1.1285
5.0000
1.1263
6.0000
1.1239
7.0000
1.1232
8.0000
1.1212
9.0000
1.1193
10.0000
1.1188
11.0000
1.1176
12.0000
1.1160
13.0000
1.1152
14.0000
1.1142
15.0000
1.1131
16.0000
1.1124
17.0000
1.1115
18.0000
1.1104
19.0000
1.1097
20.0000
1.1092
21.0000
1.1082
22.0000
1.1076
23.0000
1.1065
24.0000
1.1059
25.0000
1.1053
26.0000
1.1048
27.0000
1.1043
28.0000
1.1035
29.0000
1.1033
30.0000
1.1033
31.0000
1.1033
32.0000
1.1025
33.0000
1.1021
34.0000
1.1021
35.0000
1.1021
36.0000
1.1011
37.0000
1.1007
38.0000
1.1005
39.0000
1.1001
40.0000
1.0996
41.0000
1.0997
42.0000
1.0992
40
Universitas Sumatera Utara
43.0000
44.0000
45.0000
46.0000
47.0000
48.0000
49.0000
50.0000
51.0000
52.0000
53.0000
54.0000
55.0000
56.0000
57.0000
58.0000
59.0000
60.0000
61.0000
62.0000
63.0000
64.0000
65.0000
66.0000
67.0000
68.0000
69.0000
70.0000
71.0000
72.0000
73.0000
74.0000
75.0000
76.0000
77.0000
78.0000
79.0000
80.0000
1.0986
1.0989
1.0984
1.0981
1.0978
1.0978
1.0974
1.0973
1.0967
1.0972
1.0970
1.0966
1.0965
1.0962
1.0963
1.0961
1.0956
1.0956
1.0956
1.0952
1.0952
1.0952
1.0961
1.0971
1.0965
1.0964
1.0963
1.0963
1.0961
1.0959
1.0958
1.0957
1.0961
1.0962
1.0965
1.0967
1.0969
1.0966
41
Universitas Sumatera Utara
6.2 Hasil Pengukuran Operating Time dengan C = 500 ppm pada K1: kemasan 1
Time
Raw
(Minute)
Data
0.0000
0.7496
1.0000
0.7493
2.0000
0.7492
3.0000
0.7493
4.0000
0.7492
5.0000
0.7495
6.0000
0.7495
7.0000
0.7497
8.0000
0.7500
9.0000
0.7499
10.0000
0.7499
11.0000
0.7500
12.0000
0.7503
13.0000
0.7503
14.0000
0.7504
15.0000
0.7505
16.0000
0.7513
17.0000
0.7507
18.0000
0.7510
19.0000
0.7511
20.0000
0.7514
21.0000
0.7514
22.0000
0.7514
23.0000
0.7518
24.0000
0.7518
25.0000
0.7521
26.0000
0.7523
27.0000
0.7525
28.0000
0.7527
29.0000
0.7529
30.0000
0.7529
31.0000
0.7531
32.0000
0.7533
33.0000
0.7534
34.0000
0.7536
35.0000
0.7537
36.0000
0.7539
37.0000
0.7540
38.0000
0.7541
39.0000
0.7542
40.0000
0.7543
41.0000
0.7546
42.0000
0.7548
42
Universitas Sumatera Utara
43.0000
44.0000
45.0000
46.0000
47.0000
48.0000
49.0000
50.0000
51.0000
52.0000
53.0000
54.0000
55.0000
56.0000
57.0000
58.0000
59.0000
60.0000
61.0000
62.0000
63.0000
64.0000
65.0000
66.0000
67.0000
68.0000
69.0000
70.0000
71.0000
72.0000
73.0000
74.0000
75.0000
76.0000
77.0000
78.0000
79.0000
80.0000
0.7547
0.7550
0.7551
0.7553
0.7557
0.7566
0.7563
0.7567
0.7568
0.7570
0.7570
0.7571
0.7574
0.7574
0.7577
0.7578
0.7580
0.7580
0.7580
0.7580
0.7593
0.7595
0.7598
0.7597
0.7599
0.7599
0.7599
0.7603
0.7612
0.7614
0.7624
0.7628
0.7631
0.7635
0.7639
0.7643
0.7650
0.7654
43
Universitas Sumatera Utara
6.3 Hasil Pengukuran Operating Time dengan C = 500 ppm pada K2: kemasan 2
Time
Raw
(Minute)
Data
0.0000
0.8262
1.0000
0.8251
2.0000
0.8226
3.0000
0.8216
4.0000
0.8203
5.0000
0.8189
6.0000
0.8176
7.0000
0.8165
8.0000
0.8159
9.0000
0.8143
10.0000
0.8139
11.0000
0.8131
12.0000
0.8117
13.0000
0.8111
14.0000
0.8100
15.0000
0.8098
16.0000
0.8087
17.0000
0.8084
18.0000
0.8075
19.0000
0.8065
20.0000
0.8074
21.0000
0.8085
22.0000
0.8093
23.0000
0.8106
24.0000
0.8107
25.0000
0.8114
26.0000
0.8114
27.0000
0.8114
28.0000
0.8114
29.0000
0.8111
30.0000
0.8113
31.0000
0.8116
32.0000
0.8121
33.0000
0.8120
34.0000
0.8121
35.0000
0.8189
36.0000
0.8202
37.0000
0.8186
38.0000
0.8191
39.0000
0.8191
40.0000
0.8190
41.0000
0.8188
42.0000
0.8186
44
Universitas Sumatera Utara
43.0000
44.0000
45.0000
46.0000
47.0000
48.0000
49.0000
50.0000
51.0000
52.0000
53.0000
54.0000
55.0000
56.0000
57.0000
58.0000
59.0000
60.0000
61.0000
62.0000
63.0000
64.0000
65.0000
66.0000
67.0000
68.0000
69.0000
70.0000
71.0000
72.0000
73.0000
74.0000
75.0000
76.0000
77.0000
78.0000
79.0000
80.0000
0.8184
0.8182
0.8182
0.8183
0.8182
0.8183
0.8180
0.8175
0.8175
0.8172
0.8166
0.8164
0.8158
0.8156
0.8154
0.8150
0.8148
0.8144
0.8144
0.8144
0.8144
0.8158
0.8162
0.8157
0.8155
0.8153
0.8149
0.8147
0.8145
0.8139
0.8144
0.8138
0.8131
0.8129
0.8217
0.8211
0.8210
0.8212
45
Universitas Sumatera Utara
6.4 Hasil Pengukuran Operating Time dengan C = 500 ppm pada K3: kemasan 3
Time
Raw
(Minute)
Data
0.0000
0.8235
1.0000
0.8221
2.0000
0.8215
3.0000
0.8213
4.0000
0.8211
5.0000
0.8212
6.0000
0.8211
7.0000
0.8211
8.0000
0.8211
9.0000
0.8211
10.0000
0.8209
11.0000
0.8212
12.0000
0.8208
13.0000
0.8208
14.0000
0.8208
15.0000
0.8206
16.0000
0.8206
17.0000
0.8228
18.0000
0.8228
19.0000
0.8255
20.0000
0.8256
21.0000
0.8295
22.0000
0.8317
23.0000
0.8329
24.0000
0.8333
25.0000
0.8343
26.0000
0.8348
27.0000
0.8353
28.0000
0.8357
29.0000
0.8365
30.0000
0.8379
31.0000
0.8385
32.0000
0.8390
33.0000
0.8395
34.0000
0.8400
35.0000
0.8402
36.0000
0.8407
37.0000
0.8434
38.0000
0.8443
39.0000
0.8450
40.0000
0.8450
41.0000
0.8466
42.0000
0.8466
46
Universitas Sumatera Utara
43.0000
44.0000
45.0000
46.0000
47.0000
48.0000
49.0000
50.0000
51.0000
52.0000
53.0000
54.0000
55.0000
56.0000
57.0000
58.0000
59.0000
60.0000
61.0000
62.0000
63.0000
64.0000
65.0000
66.0000
67.0000
68.0000
69.0000
70.0000
71.0000
72.0000
73.0000
74.0000
75.0000
76.0000
77.0000
78.0000
79.0000
80.0000
0.8469
0.8472
0.8473
0.8474
0.8475
0.8477
0.8478
0.8481
0.8482
0.8483
0.8484
0.8487
0.8488
0.8490
0.8492
0.8492
0.8496
0.8498
0.8498
0.8498
0.8498
0.8499
0.8504
0.8504
0.8505
0.8506
0.8506
0.8507
0.8509
0.8509
0.8510
0.8511
0.8512
0.8513
0.8516
0.8518
0.8519
0.8520
47
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 7. Pemeriksaan senyawa Flavonoid dan Polifenol
1.
Pemeriksaan Senyawa Flavonoid
2. Pemeriksaan Senyawa Polifenol
Identifikasi senyawa flavonoid K1
Identifikasi senyawa polifenol K1
Identifikasi senyawa flavonoid K2
Identifikasi senyawa polifenol K2
Identifikasi senyawa flavonoid K3
Identifikasi senyawa polifenol K3
48
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 8. Hasil uji aktivitas antioksidan
5.1 Tabel hasil uji aktivitas antioksidan STDSK K1.
Larutan Konsentrasi
Absorbansi
% Pemerangkapan
Uji
(ppm)
I
II
III
I
II
III Ratarata
K1
Blanko
0,846 0,844 0,847
0
0
0
0
500
0,736 0,731 0,742 13,00 13,39 12,40 12,93
1000
0,614 0,610 0,618 27,42 27,73 27,04 27,40
1500
0,509 0,510 0,508 33,70 39,57 40,02 37,76
2000
0,399 0,400 0,398 44,70 52,61 53,01 50,12
2500
0267 0,270 0,263 68,44 68,01 68,95 68,47
3000
0,169 0,166 0,172 80,02 80,33 79,69 80,01
5.2 Tabel hasil uji aktivitas antioksidan STDSK K2.
Larutan Konsentrasi
Absorbansi
% Pemerangkapan
Uji
(ppm)
I
II
III
I
II
III Ratarata
K2
Blanko
0,880 0,877 0,874
0
0
0
0
500
0,760 0,753 0,746 13,63 14,14 14,65 14,14
1000
0,656 0,628 0,600 25,45 28,39 31,35 28,39
1500
0,540 0,545 0,550 38,64 37,86 37,07 37,85
2000
0,409 0,406 0,403 53,52 53,71 53,89 53,70
2500
0,360 0,365 0,370 59,09 58,38 57,67 58,38
3000
0,249 0,253 0,257 71,70 71,15 70,59 71,15
5.3 Tabel hasil uji aktivitas antioksidan STDSK K3.
Larutan Konsentrasi
Absorbansi
% Pemerangkapan
Uji
(ppm)
I
II
III
I
II
III Ratarata
0
K3
Blanko
0,802 0,803 0,805
0
0
0
500
0,729 0,724 0,720 9,10 9,84 10,56 9,83
1000
0,628 0,638 0,648 21,70 20,55 19,50 20,58
1500
0,541 0,550 0,564 32,54 31,51 29,93 31,32
2000
0,480 0,477 0,474 40,15 40,60 41,11 40,62
2500
0,380 0,370 0,360 52,61 53,92 55,28 53,93
3000
0,279 0,284 0,289 65,21 64,63 64,09 64,64
49
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 9. Contoh perhitungan persen pemerangkapan dan perhitungan nilai
IC50
9.1 Perhitungan persen pemerangkapan STDSK K1. Tabel data absorbansi DPPH
pengukuran 1
No.
Konsentrasi Larutan Uji (ppm)
Absorbansi
0,846
1
0
0,736
2
500
0,614
3
1000
0,509
4
1500
0,399
5
2000
0267
6
2500
0,169
7
3000
Aktivitas pemerangkapan (%) =
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
Asampel = Absorbansi sampel
1. Konsentrasi 500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,846 - 0,736
x 100%
0,846
= 13,00
2. Konsentrasi 1000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,846 - 0,614
x 100%
0,846
= 27,42
3. Konsentrasi 1500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,846 - 0,509
x 100%
0,846
= 33,70
4. Konsentrasi 2000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,846 - 0,399
x 100%
0,846
= 44,70
50
Universitas Sumatera Utara
5. Konsentrasi 2500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,846 - 0,267
x 100%
0,846
= 68,44
6. Konsentrasi 3000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,846 - 0,169
x 100%
0,846
= 80,02.
•
No.
1
2
3
4
5
6
7
Tabel data absorbansi DPPH pengukuran 2
Konsentrasi Larutan Uji (ppm)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
Absorbansi
0,844
0,731
0,610
0,510
0,400
0,270
0,166
Aktivitas pemerangkapan (%) =
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
Asampel = Absorbansi sampel
1. Konsentrasi 500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,844 - 0,731
x 100%
0,844
= 13,39
2. Konsentrasi 1000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,844 - 0,610
x 100%
0,844
= 27,73
3. Konsentrasi 1500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,844 - 0,510
x 100%
0,844
= 39,57
51
Universitas Sumatera Utara
4. Konsentrasi 2000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,844 - 0,400
x 100%
0,844
= 52,61
5. Konsentrasi 2500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,844 - 0,270
x 100%
0,844
= 68,01
6. Konsentrasi 3000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,844 - 0,166
x 100%
0,844
= 80,33
•
No.
1
2
3
4
5
6
7
Tabel data absorbansi DPPH pengukuran 3
Konsentrasi Larutan Uji (ppm)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
Aktivitas pemerangkapan (%) =
Absorbansi
0,847
0,742
0,618
0,508
0,398
0,263
0,172
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
Asampel = Absorbansi sampel
1. Konsentrasi 500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,847 - 0,742
x 100%
0,848
= 12,40
52
Universitas Sumatera Utara
2. Konsentrasi 1000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,847 - 0,618
x 100%
0,848
= 27,04
3. Konsentrasi 1500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,847 - 0,508
x 100%
0,848
= 40,02
4. Konsentrasi 2000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,847 - 0,398
x 100%
0,848
= 53,01
5. Konsentrasi 2500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,847 - 0,263
x 100%
0,848
= 68,95
6. Konsentrasi 3000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,847 - 0,172
x 100%
0,848
= 79,69.
53
Universitas Sumatera Utara
Perhitungan nilai IC50
Tabel IC50 dari STDSK K1
X
Y
XY
X2
0
0
0
0
500
12,93
6465
250000
1000
27,40
27400
1000000
1500
37,76
56640
2250000
2000
50,11
100220
4000000
2500
68,47
171175
6250000
3000
80,01
240030
9000000
ΣX = 10500
X = 1500
ΣY = 276,68
Y = 39,53
ΣXY = 601930
ΣX2 = 22750000
Keterangan:
X = Konsentrasi (ppm)
Y = % Pemerangkapan
a =
=
(∑ XY) - (∑ X)(∑ Y) / n
(∑ X 2 ) − (∑ X) 2 / n
(601930) − (10500)(276,68) / 7 186970
=
= 0,026
7000000
(22750000) − (10500) 2 / 7
b = Y − aX
= 39,53 – (0,026) (1500) = -0,535
Jadi, persamaan garis regresi Y = 0,026x – 0,526
Nilai IC50 = Y = 0,026x – 0,535
50 = 0,026x – 0,535
X = 1943
IC50 = 1943 ppm
54
Universitas Sumatera Utara
9.2 Contoh perhitungan persen pemerangkapan STDSK K2
•
No.
1
2
3
4
5
6
7
Tabel data absorbansi DPPH pengukuran 1
Konsentrasi Larutan Uji (ppm)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
Aktivitas pemerangkapan (%) =
Absorbansi
0,880
0,760
0,656
0,540
0,409
0,360
0,249
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
Asampel = Absorbansi sampel
1. Konsentrasi 500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,880 - 0,760
x 100%
0,880
= 13,63
2. Konsentrasi 1000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,880 - 0,656
x 100%
0,880
= 25,45
3. Konsentrasi 1500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,880 - 0,540
x 100%
0,880
= 38,64
4. Konsentrasi 2000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,880 - 0,409
x 100%
0,880
= 53,52
55
Universitas Sumatera Utara
5. Konsentrasi 2500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,880 - 0,360
x 100%
0,880
= 59,09
6. Konsentrasi 3000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,880 - 0,249
x 100%
0,880
= 71,70
•
No.
1
2
3
4
5
6
7
Tabel data absorbansi DPPH pengukuran 2
Konsentrasi Larutan Uji (ppm)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
Aktivitas pemerangkapan (%) =
Absorbansi
0,877
0,753
0,628
0,545
0,406
0,365
0,253
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
Asampel = Absorbansi sampel
1. Konsentrasi 500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,877 - 0,753
x 100%
0,877
= 14,14
2. Konsentrasi 1000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,877 - 0,628
x 100%
0,877
= 28,39
56
Universitas Sumatera Utara
3. Konsentrasi 1500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,877 - 0,545
x 100%
0,877
= 37,86
4. Konsentrasi 2000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,877 - 0,406
x 100%
0,877
= 53,71
5. Konsentrasi 2500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,877 - 0,365
x 100%
0,877
= 58,38
6. Konsentrasi 3000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,877 - 0,253
x 100%
0,877
= 71,15
•
No.
1
2
3
4
5
6
7
Tabel data absorbansi DPPH pengukuran 3
Konsentrasi Larutan Uji (ppm)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
Aktivitas pemerangkapan (%) =
Absorbansi
0,874
0,746
0,600
0,550
0,403
0,370
0,257
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
Asampel = Absorbansi sampel
1. Konsentrasi 500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,874 - 0,746
x 100%
0,874
= 14,65
57
Universitas Sumatera Utara
2. Konsentrasi 1000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,874 - 0,600
x 100%
0,874
= 31,35
3. Konsentrasi 1500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,874 - 0,550
x 100%
0,874
= 37,07
4. Konsentrasi 2000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,874 - 0,403
x 100%
0,874
= 53,89
5. Konsentrasi 2500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,874 - 0,370
x 100%
0,874
= 57,67
6. Konsentrasi 3000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,874 - 0,257
x 100%
0,874
= 70,59.
58
Universitas Sumatera Utara
Perhitungan nilai IC50
Tabel IC50 dari STDSK K2
X
Y
XY
X2
0
0
0
0
500
14,14
7070
250000
1000
28,39
28390
1000000
1500
37,86
56790
2250000
2000
53,71
107420
4000000
2500
57,67
144175
6250000
3000
71,15
213450
9000000
ΣX = 10500
X = 1500
ΣY = 263,63
Y = 37,66
ΣXY = 557295
ΣX2 = 22750000
Keterangan:
X = Konsentrasi (ppm)
Y = % Pemerangkapan
a =
=
(∑ XY) - (∑ X)(∑ Y) / n
(∑ X 2 ) − (∑ X) 2 / n
(557295) − (10500)(263,63) / 7 161850
=
= 0,023
7000000
(22750000) − (10500) 2 / 7
b = Y − aX
= 37,66 – (0,023) (1500) = 2,601
Jadi, persamaan garis regresi Y = 0,023x + 2,601
Nilai IC50 = Y = 0,023x + 2,601
50 = 0,023x + 2,601
X = 2287
IC50 = 2287 ppm
59
Universitas Sumatera Utara
9.3 Contoh perhitungan persen pemerangkapan STDSK K3
•
No.
1
2
3
4
5
6
7
Tabel data absorbansi DPPH pengukuran 1
Konsentrasi Larutan Uji (ppm)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
Aktivitas pemerangkapan (%) =
Absorbansi
0,802
0,729
0,628
0,541
0,480
0,380
0,279
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
Asampel = Absorbansi sampel
1. Konsentrasi 500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,802 - 0,729
x 100%
0,802
= 9,10
2. Konsentrasi 1000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,802 - 0,628
x 100%
0,802
= 21,69
3. Konsentrasi 1500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,802 - 0,541
x 100%
0,802
= 32,54
4. Konsentrasi 2000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,802 - 0,480
x 100%
0,802
= 40,15
60
Universitas Sumatera Utara
5. Konsentrasi 2500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,802 - 0,380
x 100%
0,802
= 52,61
6. Konsentrasi 3000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,802 - 0,279
x 100%
0,802
= 65,21
•
No.
1
2
3
4
5
6
7
Tabel data absorbansi DPPH pengukuran 2
Konsentrasi Larutan Uji (ppm)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
Aktivitas pemerangkapan (%) =
Absorbansi
0,803
0,724
0,638
0,550
0,477
0,370
0,284
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
Asampel = Absorbansi sampel
1. Konsentrasi 500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,803 - 0,724
x 100%
0,803
= 9,84
2. Konsentrasi 1000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,803 - 0,638
x 100%
0,803
= 20,55
61
Universitas Sumatera Utara
3. Konsentrasi 1500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,803 - 0,550
x 100%
0,803
= 31,51
4. Konsentrasi 2000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,803 - 0,477
x 100%
0,803
= 40,60
5. Konsentrasi 2500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,803 - 0,370
x 100%
0,803
= 53,92
6. Konsentrasi 3000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,803 - 0,284
x 100%
0,803
= 64,63
•
Tabel data absorbansi DPPH pengukuran 3
No.
Konsentrasi Larutan Uji (ppm)
Absorbansi
1
0
0,805
2
500
0,720
3
1000
0,648
4
1500
0,564
5
2000
0,474
6
2500
0,360
7
3000
0,289
Aktivitas pemerangkapan (%) =
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
Asampel = Absorbansi sampel
62
Universitas Sumatera Utara
1. Konsentrasi 500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,805 - 0,720
x 100%
0,805
= 9,83
2. Konsentrasi 1000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,805 - 0,648
x 100%
0,805
= 19,50
3. Konsentrasi 1500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,805 - 0,564
x 100%
0,805
= 29,93
4. Konsentrasi 2000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,805 - 0,474
x 100%
0,805
= 41,11
5. Konsentrasi 2500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,805 - 0,380
x 100%
0,804
= 55,28
6. Konsentrasi 3000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,805 - 0,289
x 100%
0,804
= 64,09
63
Universitas Sumatera Utara
Perhitungan nilai IC50
Tabel IC50 dari LTDSK K3
X
Y
XY
X2
0
0
0
0
500
9,83
4915
250000
1000
20,57
20570
1000000
1500
31,32
46980
2250000
2000
40,62
81240
4000000
2500
53,93
134825
6250000
3000
64,64
193920
9000000
ΣX = 10500
X = 1500
ΣY = 220,91
Y = 31,55
ΣXY = 482450
ΣX2 = 22750000
Keterangan:
X = Konsentrasi (ppm)
Y = % Pemerangkapan
a =
=
(∑ XY) - (∑ X)(∑ Y) / n
(∑ X 2 ) − (∑ X) 2 / n
(482450 ) − (10500)(220,91) / 7 151085
=
= 0,021
7000000
(22750000) − (10500) 2 / 7
b = Y − aX
= 31,55 – (0,021) (1500) = 0,05
Jadi, persamaan garis regresi Y = 0,021x – 0,05
Nilai IC50 = Y = 0,021x – 0,05
50 = 0,021x – 0,769
X = 2383
IC50 = 2383 ppm
64
Universitas Sumatera Utara
1 g Serbuk sampel
Dimasukkan kedalam beaker glass,
ditambahkan 100 ml air panas dan
diletakkan diatas hot plate.
Didihkan.
Seduhan Teh Daun
Sirsak Kemasan
Dilakukan uji aktivitas
antioksidan secara
spektrofotometri UVVisible
Pemeriksaan Senyawa
Bersifat Antioksidan
Senyawa
Flavonoid
Hasil
Senyawa
Polifenol
35
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 2. Data kemasan teh daun sirsak
2.1 K1: Kemasan
Nama Produk
Komposisi
Isi
Produksi
No. Registrasi
Tgl. Produksi
Exp. Date
: Griya Herba Drink
: Daun Sirsak (Annona muricata folium)
: 40 g (20 x 2 g)
: UD. Herba Sari Sukoharjo – Indonesia untuk
CV. Griya Herba Semarang – Indonesia
: P.IRT No. 810331114343
: 19 Januari 2016
: 19 Januari 2018
2.2 K2: Kemasan 2
Nama Produk
Komposisi
Isi
Produksi
No. Registrasi
Tgl. Produksi
Exp. Date
No. Batch
: Teh Herbal Celup Laurico Daun Sirsak (Soursop leaf bag)
: Daun Sirsak (Annona muricata folium)
: 50 g (25 x 2 g)
: PT. Palma Natura Sanat Depok – Jawa Barat
: Dinkes P.IRT No. 81327603115
:: 28 November 2016
: 1056
2.3 K3: Kemasan 3
Nama Produk
Komposisi
Isi
Produksi
No. Registrasi
Tgl. Produksi
Exp. Date
No. Batch
: Gravila Teh Celup Daun Sirsak
: Daun Sirsak (Annona muricata folium)
: 50 g (25 x 2 g)
: CV. Permana Putra Mandiri Jakarta - Indonesia
: Dinkes P.IRT No. 310321301554
:: April 2018
: 011015
36
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3. Gambar kantongan dan serbuk teh daun sirsak.
Gambar 1. Kantongan dan serbuk teh daun sirsak K1
Gambar 2. Kantongan dan serbuk teh daun sirsak K2
Gambar 3. Kantongan dan serbuk teh daun sirsak K3
37
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 4. Gambar seperangkat alat spektrofotometer UV-Visibel
(UV 1800 - Shimadzu)
Gambar 4. Gambar seperangkat alat spektrofotometer UV - Visibel (UV 1800 Shimadzu)
38
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 5. Perhitungan Pembuatan larutan blanko DPPH 0,5 mM
M=
0,5 mM =
g 1000
�
��
�
mg
1000
�
394,32 g/mol 100 ��
mg = 19,716 mg ≈ 20 mg
Jadi, serbuk DPPH yang ditimbang adalah 20 mg untuk membuat larutan
blanko DPPH 0,5 mM didalam volume 100 ml.
39
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 6. Hasil Pengukuran Operating Time
6.1 Hasil Pengukuran Operating Time Tanpa Sampel.
Time
Raw
(Minute)
Data
0.0000
1.1426
1.0000
1.1381
2.0000
1.1345
3.0000
1.1314
4.0000
1.1285
5.0000
1.1263
6.0000
1.1239
7.0000
1.1232
8.0000
1.1212
9.0000
1.1193
10.0000
1.1188
11.0000
1.1176
12.0000
1.1160
13.0000
1.1152
14.0000
1.1142
15.0000
1.1131
16.0000
1.1124
17.0000
1.1115
18.0000
1.1104
19.0000
1.1097
20.0000
1.1092
21.0000
1.1082
22.0000
1.1076
23.0000
1.1065
24.0000
1.1059
25.0000
1.1053
26.0000
1.1048
27.0000
1.1043
28.0000
1.1035
29.0000
1.1033
30.0000
1.1033
31.0000
1.1033
32.0000
1.1025
33.0000
1.1021
34.0000
1.1021
35.0000
1.1021
36.0000
1.1011
37.0000
1.1007
38.0000
1.1005
39.0000
1.1001
40.0000
1.0996
41.0000
1.0997
42.0000
1.0992
40
Universitas Sumatera Utara
43.0000
44.0000
45.0000
46.0000
47.0000
48.0000
49.0000
50.0000
51.0000
52.0000
53.0000
54.0000
55.0000
56.0000
57.0000
58.0000
59.0000
60.0000
61.0000
62.0000
63.0000
64.0000
65.0000
66.0000
67.0000
68.0000
69.0000
70.0000
71.0000
72.0000
73.0000
74.0000
75.0000
76.0000
77.0000
78.0000
79.0000
80.0000
1.0986
1.0989
1.0984
1.0981
1.0978
1.0978
1.0974
1.0973
1.0967
1.0972
1.0970
1.0966
1.0965
1.0962
1.0963
1.0961
1.0956
1.0956
1.0956
1.0952
1.0952
1.0952
1.0961
1.0971
1.0965
1.0964
1.0963
1.0963
1.0961
1.0959
1.0958
1.0957
1.0961
1.0962
1.0965
1.0967
1.0969
1.0966
41
Universitas Sumatera Utara
6.2 Hasil Pengukuran Operating Time dengan C = 500 ppm pada K1: kemasan 1
Time
Raw
(Minute)
Data
0.0000
0.7496
1.0000
0.7493
2.0000
0.7492
3.0000
0.7493
4.0000
0.7492
5.0000
0.7495
6.0000
0.7495
7.0000
0.7497
8.0000
0.7500
9.0000
0.7499
10.0000
0.7499
11.0000
0.7500
12.0000
0.7503
13.0000
0.7503
14.0000
0.7504
15.0000
0.7505
16.0000
0.7513
17.0000
0.7507
18.0000
0.7510
19.0000
0.7511
20.0000
0.7514
21.0000
0.7514
22.0000
0.7514
23.0000
0.7518
24.0000
0.7518
25.0000
0.7521
26.0000
0.7523
27.0000
0.7525
28.0000
0.7527
29.0000
0.7529
30.0000
0.7529
31.0000
0.7531
32.0000
0.7533
33.0000
0.7534
34.0000
0.7536
35.0000
0.7537
36.0000
0.7539
37.0000
0.7540
38.0000
0.7541
39.0000
0.7542
40.0000
0.7543
41.0000
0.7546
42.0000
0.7548
42
Universitas Sumatera Utara
43.0000
44.0000
45.0000
46.0000
47.0000
48.0000
49.0000
50.0000
51.0000
52.0000
53.0000
54.0000
55.0000
56.0000
57.0000
58.0000
59.0000
60.0000
61.0000
62.0000
63.0000
64.0000
65.0000
66.0000
67.0000
68.0000
69.0000
70.0000
71.0000
72.0000
73.0000
74.0000
75.0000
76.0000
77.0000
78.0000
79.0000
80.0000
0.7547
0.7550
0.7551
0.7553
0.7557
0.7566
0.7563
0.7567
0.7568
0.7570
0.7570
0.7571
0.7574
0.7574
0.7577
0.7578
0.7580
0.7580
0.7580
0.7580
0.7593
0.7595
0.7598
0.7597
0.7599
0.7599
0.7599
0.7603
0.7612
0.7614
0.7624
0.7628
0.7631
0.7635
0.7639
0.7643
0.7650
0.7654
43
Universitas Sumatera Utara
6.3 Hasil Pengukuran Operating Time dengan C = 500 ppm pada K2: kemasan 2
Time
Raw
(Minute)
Data
0.0000
0.8262
1.0000
0.8251
2.0000
0.8226
3.0000
0.8216
4.0000
0.8203
5.0000
0.8189
6.0000
0.8176
7.0000
0.8165
8.0000
0.8159
9.0000
0.8143
10.0000
0.8139
11.0000
0.8131
12.0000
0.8117
13.0000
0.8111
14.0000
0.8100
15.0000
0.8098
16.0000
0.8087
17.0000
0.8084
18.0000
0.8075
19.0000
0.8065
20.0000
0.8074
21.0000
0.8085
22.0000
0.8093
23.0000
0.8106
24.0000
0.8107
25.0000
0.8114
26.0000
0.8114
27.0000
0.8114
28.0000
0.8114
29.0000
0.8111
30.0000
0.8113
31.0000
0.8116
32.0000
0.8121
33.0000
0.8120
34.0000
0.8121
35.0000
0.8189
36.0000
0.8202
37.0000
0.8186
38.0000
0.8191
39.0000
0.8191
40.0000
0.8190
41.0000
0.8188
42.0000
0.8186
44
Universitas Sumatera Utara
43.0000
44.0000
45.0000
46.0000
47.0000
48.0000
49.0000
50.0000
51.0000
52.0000
53.0000
54.0000
55.0000
56.0000
57.0000
58.0000
59.0000
60.0000
61.0000
62.0000
63.0000
64.0000
65.0000
66.0000
67.0000
68.0000
69.0000
70.0000
71.0000
72.0000
73.0000
74.0000
75.0000
76.0000
77.0000
78.0000
79.0000
80.0000
0.8184
0.8182
0.8182
0.8183
0.8182
0.8183
0.8180
0.8175
0.8175
0.8172
0.8166
0.8164
0.8158
0.8156
0.8154
0.8150
0.8148
0.8144
0.8144
0.8144
0.8144
0.8158
0.8162
0.8157
0.8155
0.8153
0.8149
0.8147
0.8145
0.8139
0.8144
0.8138
0.8131
0.8129
0.8217
0.8211
0.8210
0.8212
45
Universitas Sumatera Utara
6.4 Hasil Pengukuran Operating Time dengan C = 500 ppm pada K3: kemasan 3
Time
Raw
(Minute)
Data
0.0000
0.8235
1.0000
0.8221
2.0000
0.8215
3.0000
0.8213
4.0000
0.8211
5.0000
0.8212
6.0000
0.8211
7.0000
0.8211
8.0000
0.8211
9.0000
0.8211
10.0000
0.8209
11.0000
0.8212
12.0000
0.8208
13.0000
0.8208
14.0000
0.8208
15.0000
0.8206
16.0000
0.8206
17.0000
0.8228
18.0000
0.8228
19.0000
0.8255
20.0000
0.8256
21.0000
0.8295
22.0000
0.8317
23.0000
0.8329
24.0000
0.8333
25.0000
0.8343
26.0000
0.8348
27.0000
0.8353
28.0000
0.8357
29.0000
0.8365
30.0000
0.8379
31.0000
0.8385
32.0000
0.8390
33.0000
0.8395
34.0000
0.8400
35.0000
0.8402
36.0000
0.8407
37.0000
0.8434
38.0000
0.8443
39.0000
0.8450
40.0000
0.8450
41.0000
0.8466
42.0000
0.8466
46
Universitas Sumatera Utara
43.0000
44.0000
45.0000
46.0000
47.0000
48.0000
49.0000
50.0000
51.0000
52.0000
53.0000
54.0000
55.0000
56.0000
57.0000
58.0000
59.0000
60.0000
61.0000
62.0000
63.0000
64.0000
65.0000
66.0000
67.0000
68.0000
69.0000
70.0000
71.0000
72.0000
73.0000
74.0000
75.0000
76.0000
77.0000
78.0000
79.0000
80.0000
0.8469
0.8472
0.8473
0.8474
0.8475
0.8477
0.8478
0.8481
0.8482
0.8483
0.8484
0.8487
0.8488
0.8490
0.8492
0.8492
0.8496
0.8498
0.8498
0.8498
0.8498
0.8499
0.8504
0.8504
0.8505
0.8506
0.8506
0.8507
0.8509
0.8509
0.8510
0.8511
0.8512
0.8513
0.8516
0.8518
0.8519
0.8520
47
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 7. Pemeriksaan senyawa Flavonoid dan Polifenol
1.
Pemeriksaan Senyawa Flavonoid
2. Pemeriksaan Senyawa Polifenol
Identifikasi senyawa flavonoid K1
Identifikasi senyawa polifenol K1
Identifikasi senyawa flavonoid K2
Identifikasi senyawa polifenol K2
Identifikasi senyawa flavonoid K3
Identifikasi senyawa polifenol K3
48
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 8. Hasil uji aktivitas antioksidan
5.1 Tabel hasil uji aktivitas antioksidan STDSK K1.
Larutan Konsentrasi
Absorbansi
% Pemerangkapan
Uji
(ppm)
I
II
III
I
II
III Ratarata
K1
Blanko
0,846 0,844 0,847
0
0
0
0
500
0,736 0,731 0,742 13,00 13,39 12,40 12,93
1000
0,614 0,610 0,618 27,42 27,73 27,04 27,40
1500
0,509 0,510 0,508 33,70 39,57 40,02 37,76
2000
0,399 0,400 0,398 44,70 52,61 53,01 50,12
2500
0267 0,270 0,263 68,44 68,01 68,95 68,47
3000
0,169 0,166 0,172 80,02 80,33 79,69 80,01
5.2 Tabel hasil uji aktivitas antioksidan STDSK K2.
Larutan Konsentrasi
Absorbansi
% Pemerangkapan
Uji
(ppm)
I
II
III
I
II
III Ratarata
K2
Blanko
0,880 0,877 0,874
0
0
0
0
500
0,760 0,753 0,746 13,63 14,14 14,65 14,14
1000
0,656 0,628 0,600 25,45 28,39 31,35 28,39
1500
0,540 0,545 0,550 38,64 37,86 37,07 37,85
2000
0,409 0,406 0,403 53,52 53,71 53,89 53,70
2500
0,360 0,365 0,370 59,09 58,38 57,67 58,38
3000
0,249 0,253 0,257 71,70 71,15 70,59 71,15
5.3 Tabel hasil uji aktivitas antioksidan STDSK K3.
Larutan Konsentrasi
Absorbansi
% Pemerangkapan
Uji
(ppm)
I
II
III
I
II
III Ratarata
0
K3
Blanko
0,802 0,803 0,805
0
0
0
500
0,729 0,724 0,720 9,10 9,84 10,56 9,83
1000
0,628 0,638 0,648 21,70 20,55 19,50 20,58
1500
0,541 0,550 0,564 32,54 31,51 29,93 31,32
2000
0,480 0,477 0,474 40,15 40,60 41,11 40,62
2500
0,380 0,370 0,360 52,61 53,92 55,28 53,93
3000
0,279 0,284 0,289 65,21 64,63 64,09 64,64
49
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 9. Contoh perhitungan persen pemerangkapan dan perhitungan nilai
IC50
9.1 Perhitungan persen pemerangkapan STDSK K1. Tabel data absorbansi DPPH
pengukuran 1
No.
Konsentrasi Larutan Uji (ppm)
Absorbansi
0,846
1
0
0,736
2
500
0,614
3
1000
0,509
4
1500
0,399
5
2000
0267
6
2500
0,169
7
3000
Aktivitas pemerangkapan (%) =
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
Asampel = Absorbansi sampel
1. Konsentrasi 500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,846 - 0,736
x 100%
0,846
= 13,00
2. Konsentrasi 1000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,846 - 0,614
x 100%
0,846
= 27,42
3. Konsentrasi 1500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,846 - 0,509
x 100%
0,846
= 33,70
4. Konsentrasi 2000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,846 - 0,399
x 100%
0,846
= 44,70
50
Universitas Sumatera Utara
5. Konsentrasi 2500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,846 - 0,267
x 100%
0,846
= 68,44
6. Konsentrasi 3000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,846 - 0,169
x 100%
0,846
= 80,02.
•
No.
1
2
3
4
5
6
7
Tabel data absorbansi DPPH pengukuran 2
Konsentrasi Larutan Uji (ppm)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
Absorbansi
0,844
0,731
0,610
0,510
0,400
0,270
0,166
Aktivitas pemerangkapan (%) =
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
Asampel = Absorbansi sampel
1. Konsentrasi 500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,844 - 0,731
x 100%
0,844
= 13,39
2. Konsentrasi 1000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,844 - 0,610
x 100%
0,844
= 27,73
3. Konsentrasi 1500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,844 - 0,510
x 100%
0,844
= 39,57
51
Universitas Sumatera Utara
4. Konsentrasi 2000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,844 - 0,400
x 100%
0,844
= 52,61
5. Konsentrasi 2500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,844 - 0,270
x 100%
0,844
= 68,01
6. Konsentrasi 3000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,844 - 0,166
x 100%
0,844
= 80,33
•
No.
1
2
3
4
5
6
7
Tabel data absorbansi DPPH pengukuran 3
Konsentrasi Larutan Uji (ppm)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
Aktivitas pemerangkapan (%) =
Absorbansi
0,847
0,742
0,618
0,508
0,398
0,263
0,172
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
Asampel = Absorbansi sampel
1. Konsentrasi 500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,847 - 0,742
x 100%
0,848
= 12,40
52
Universitas Sumatera Utara
2. Konsentrasi 1000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,847 - 0,618
x 100%
0,848
= 27,04
3. Konsentrasi 1500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,847 - 0,508
x 100%
0,848
= 40,02
4. Konsentrasi 2000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,847 - 0,398
x 100%
0,848
= 53,01
5. Konsentrasi 2500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,847 - 0,263
x 100%
0,848
= 68,95
6. Konsentrasi 3000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,847 - 0,172
x 100%
0,848
= 79,69.
53
Universitas Sumatera Utara
Perhitungan nilai IC50
Tabel IC50 dari STDSK K1
X
Y
XY
X2
0
0
0
0
500
12,93
6465
250000
1000
27,40
27400
1000000
1500
37,76
56640
2250000
2000
50,11
100220
4000000
2500
68,47
171175
6250000
3000
80,01
240030
9000000
ΣX = 10500
X = 1500
ΣY = 276,68
Y = 39,53
ΣXY = 601930
ΣX2 = 22750000
Keterangan:
X = Konsentrasi (ppm)
Y = % Pemerangkapan
a =
=
(∑ XY) - (∑ X)(∑ Y) / n
(∑ X 2 ) − (∑ X) 2 / n
(601930) − (10500)(276,68) / 7 186970
=
= 0,026
7000000
(22750000) − (10500) 2 / 7
b = Y − aX
= 39,53 – (0,026) (1500) = -0,535
Jadi, persamaan garis regresi Y = 0,026x – 0,526
Nilai IC50 = Y = 0,026x – 0,535
50 = 0,026x – 0,535
X = 1943
IC50 = 1943 ppm
54
Universitas Sumatera Utara
9.2 Contoh perhitungan persen pemerangkapan STDSK K2
•
No.
1
2
3
4
5
6
7
Tabel data absorbansi DPPH pengukuran 1
Konsentrasi Larutan Uji (ppm)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
Aktivitas pemerangkapan (%) =
Absorbansi
0,880
0,760
0,656
0,540
0,409
0,360
0,249
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
Asampel = Absorbansi sampel
1. Konsentrasi 500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,880 - 0,760
x 100%
0,880
= 13,63
2. Konsentrasi 1000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,880 - 0,656
x 100%
0,880
= 25,45
3. Konsentrasi 1500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,880 - 0,540
x 100%
0,880
= 38,64
4. Konsentrasi 2000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,880 - 0,409
x 100%
0,880
= 53,52
55
Universitas Sumatera Utara
5. Konsentrasi 2500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,880 - 0,360
x 100%
0,880
= 59,09
6. Konsentrasi 3000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,880 - 0,249
x 100%
0,880
= 71,70
•
No.
1
2
3
4
5
6
7
Tabel data absorbansi DPPH pengukuran 2
Konsentrasi Larutan Uji (ppm)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
Aktivitas pemerangkapan (%) =
Absorbansi
0,877
0,753
0,628
0,545
0,406
0,365
0,253
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
Asampel = Absorbansi sampel
1. Konsentrasi 500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,877 - 0,753
x 100%
0,877
= 14,14
2. Konsentrasi 1000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,877 - 0,628
x 100%
0,877
= 28,39
56
Universitas Sumatera Utara
3. Konsentrasi 1500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,877 - 0,545
x 100%
0,877
= 37,86
4. Konsentrasi 2000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,877 - 0,406
x 100%
0,877
= 53,71
5. Konsentrasi 2500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,877 - 0,365
x 100%
0,877
= 58,38
6. Konsentrasi 3000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,877 - 0,253
x 100%
0,877
= 71,15
•
No.
1
2
3
4
5
6
7
Tabel data absorbansi DPPH pengukuran 3
Konsentrasi Larutan Uji (ppm)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
Aktivitas pemerangkapan (%) =
Absorbansi
0,874
0,746
0,600
0,550
0,403
0,370
0,257
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
Asampel = Absorbansi sampel
1. Konsentrasi 500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,874 - 0,746
x 100%
0,874
= 14,65
57
Universitas Sumatera Utara
2. Konsentrasi 1000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,874 - 0,600
x 100%
0,874
= 31,35
3. Konsentrasi 1500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,874 - 0,550
x 100%
0,874
= 37,07
4. Konsentrasi 2000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,874 - 0,403
x 100%
0,874
= 53,89
5. Konsentrasi 2500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,874 - 0,370
x 100%
0,874
= 57,67
6. Konsentrasi 3000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,874 - 0,257
x 100%
0,874
= 70,59.
58
Universitas Sumatera Utara
Perhitungan nilai IC50
Tabel IC50 dari STDSK K2
X
Y
XY
X2
0
0
0
0
500
14,14
7070
250000
1000
28,39
28390
1000000
1500
37,86
56790
2250000
2000
53,71
107420
4000000
2500
57,67
144175
6250000
3000
71,15
213450
9000000
ΣX = 10500
X = 1500
ΣY = 263,63
Y = 37,66
ΣXY = 557295
ΣX2 = 22750000
Keterangan:
X = Konsentrasi (ppm)
Y = % Pemerangkapan
a =
=
(∑ XY) - (∑ X)(∑ Y) / n
(∑ X 2 ) − (∑ X) 2 / n
(557295) − (10500)(263,63) / 7 161850
=
= 0,023
7000000
(22750000) − (10500) 2 / 7
b = Y − aX
= 37,66 – (0,023) (1500) = 2,601
Jadi, persamaan garis regresi Y = 0,023x + 2,601
Nilai IC50 = Y = 0,023x + 2,601
50 = 0,023x + 2,601
X = 2287
IC50 = 2287 ppm
59
Universitas Sumatera Utara
9.3 Contoh perhitungan persen pemerangkapan STDSK K3
•
No.
1
2
3
4
5
6
7
Tabel data absorbansi DPPH pengukuran 1
Konsentrasi Larutan Uji (ppm)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
Aktivitas pemerangkapan (%) =
Absorbansi
0,802
0,729
0,628
0,541
0,480
0,380
0,279
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
Asampel = Absorbansi sampel
1. Konsentrasi 500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,802 - 0,729
x 100%
0,802
= 9,10
2. Konsentrasi 1000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,802 - 0,628
x 100%
0,802
= 21,69
3. Konsentrasi 1500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,802 - 0,541
x 100%
0,802
= 32,54
4. Konsentrasi 2000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,802 - 0,480
x 100%
0,802
= 40,15
60
Universitas Sumatera Utara
5. Konsentrasi 2500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,802 - 0,380
x 100%
0,802
= 52,61
6. Konsentrasi 3000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,802 - 0,279
x 100%
0,802
= 65,21
•
No.
1
2
3
4
5
6
7
Tabel data absorbansi DPPH pengukuran 2
Konsentrasi Larutan Uji (ppm)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
Aktivitas pemerangkapan (%) =
Absorbansi
0,803
0,724
0,638
0,550
0,477
0,370
0,284
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
Asampel = Absorbansi sampel
1. Konsentrasi 500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,803 - 0,724
x 100%
0,803
= 9,84
2. Konsentrasi 1000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,803 - 0,638
x 100%
0,803
= 20,55
61
Universitas Sumatera Utara
3. Konsentrasi 1500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,803 - 0,550
x 100%
0,803
= 31,51
4. Konsentrasi 2000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,803 - 0,477
x 100%
0,803
= 40,60
5. Konsentrasi 2500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,803 - 0,370
x 100%
0,803
= 53,92
6. Konsentrasi 3000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,803 - 0,284
x 100%
0,803
= 64,63
•
Tabel data absorbansi DPPH pengukuran 3
No.
Konsentrasi Larutan Uji (ppm)
Absorbansi
1
0
0,805
2
500
0,720
3
1000
0,648
4
1500
0,564
5
2000
0,474
6
2500
0,360
7
3000
0,289
Aktivitas pemerangkapan (%) =
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
Asampel = Absorbansi sampel
62
Universitas Sumatera Utara
1. Konsentrasi 500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,805 - 0,720
x 100%
0,805
= 9,83
2. Konsentrasi 1000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,805 - 0,648
x 100%
0,805
= 19,50
3. Konsentrasi 1500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,805 - 0,564
x 100%
0,805
= 29,93
4. Konsentrasi 2000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,805 - 0,474
x 100%
0,805
= 41,11
5. Konsentrasi 2500 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,805 - 0,380
x 100%
0,804
= 55,28
6. Konsentrasi 3000 ppm
Aktivitas pemerangkapan (%) =
0,805 - 0,289
x 100%
0,804
= 64,09
63
Universitas Sumatera Utara
Perhitungan nilai IC50
Tabel IC50 dari LTDSK K3
X
Y
XY
X2
0
0
0
0
500
9,83
4915
250000
1000
20,57
20570
1000000
1500
31,32
46980
2250000
2000
40,62
81240
4000000
2500
53,93
134825
6250000
3000
64,64
193920
9000000
ΣX = 10500
X = 1500
ΣY = 220,91
Y = 31,55
ΣXY = 482450
ΣX2 = 22750000
Keterangan:
X = Konsentrasi (ppm)
Y = % Pemerangkapan
a =
=
(∑ XY) - (∑ X)(∑ Y) / n
(∑ X 2 ) − (∑ X) 2 / n
(482450 ) − (10500)(220,91) / 7 151085
=
= 0,021
7000000
(22750000) − (10500) 2 / 7
b = Y − aX
= 31,55 – (0,021) (1500) = 0,05
Jadi, persamaan garis regresi Y = 0,021x – 0,05
Nilai IC50 = Y = 0,021x – 0,05
50 = 0,021x – 0,769
X = 2383
IC50 = 2383 ppm
64
Universitas Sumatera Utara