Penetapan Kadar Campuran Rifampisin dan Isoniazid dalam Sediaan Tablet Secara Spektrofotometri Ultraviolet dengan Metode Panjang Gelombang Berganda
Lampiran 1. Sampel Tablet Rimactazid®
Gambar 1.1 Tablet Rimactazid®
42
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 2. Komposisi Tablet Rimactazid®
Daftar Spesifikasi Sampel
No. Reg
: DKL1031608509A1
Expired Date : Juli 2017
Komposisi
: Rifampisin .…………................... 450 mg
Isoniazid .…………...................... 300 mg
43
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3. Gambar Alat
Gambar 3.1 Spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu 1800)
Gambar 3.2 Neraca analitik (Mettler Toledo)
Gambar 3.3 Sonikator (Branson 1510)
44
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 4. Perhitungan Pembuatan HCl 0,1N
HCl pekat
=
37% setara dengan 12 N
V1 x N1
=
V2 x N2
V1 x 12 N
=
1000 mL x 0,1 N
V1
=
1000 mL
x 12 N
0,1 N
=
8,3 mL
45
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 5. Bagan Alir Prosedur Penelitian
Rifampisin baku ARS
ditimbang 10 mg
dimasukkan ke dalam labu tentukur 10
mL
Larutan rifampisin 1000 μg/mL (LIB I)
diambil 5 mL
dimasukkan ke dalam labu tentukur
100 mL
Larutan rifampisin 50 μg/mL (LIB II)
diambil 1,2 mL
diambil 2,4 mL
diambil 3 mL
diambil
3,6 mL
dilarutkan dan
dicukupkan dengan
HCl
dilarutkan dan
dicukupkan
dengan HCl
dilarutkan dan
dicukupkan
dengan HCl
12 μg/mL
6 μg/mL
15 μg/mL
diambil 1,8 mL
dilarutkan
dan
dicukupkan
dengan HCl
diambil 2,7 mL
18 μg/mL
dilarutkan dan
dicukupkan
dengan HCl
9 μg/mL
13,5 μg/mL
dilarutkan dan
dicukupkan
dengan HCl
diukur serapan
maksimum
pada λ 200-400
nm
Serapan
Maksimum
46
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 6. (Lanjutan)
Isoniazid baku BPFI
ditimbang 10 mg
dimasukkan ke dalam labu tentukur 10
mL
Larutan isoniazid 1000 μg/mL (LIB I)
diambil 5 mL
dimasukkan ke dalam labu tentukur
100 mL
Larutan isoniazid 50 μg/mL (LIB II)
diambil 1 mL
diambil 2 mL
diambil 2,5 mL
diambil
3 mL
dilarutkan dan
dicukupkan dengan
HCl
dilarutkan dan
dicukupkan
dengan HCl
10 μg/mL
5 μg/mL
diambil 1,5 mL
dilarutkan dan
dicukupkan
dengan HCl
12,5 μg/mL
d l
dilarutkan
dan
dicukupkan
dengan HCl
diambil 2,2 mL
15 μg/mL
dilarutkan dan
dicukupkan
dengan HCl
7,5 μg/mL
dilarutkan dan
dicukupkan
dengan HCl
diukur serapan
11 μg/mL
maksimum
pada λ 200-400
nm
Serapan
Maksimum
47
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 7. (Lanjutan)
5. Penentuan Panjang Gelombang Analisis Rifampisin dan Isoniazid
Rifampisin 7,5 μg/mL
Isoniazid 5,0μg/mL
diukur serapan dari masing-masing rifampisin
dan isoniazid panjang gelombang 200 - 400 nm
ditumpang tindihkan
ditentukan 5 titik panjang panjang gelombang
analisis
diambil panjang gelombang dari spektrum
serapan komponen mulai memberikan
serapan sampai hamper tidak memberikan
serapan.
215 nm
225 nm
250 nm
232 nm
267 nm
48
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 8. (Lanjutan)
6. Pembuatan Larutan Baku Campuran Rifampisin dan Isoniazid
Rifampisin 10 mg
Isoniazid 10 mg
Dimasukkan ke dalam labu
tentukur 10 mL
Dimasukkan ke dalam labu
tentukur 10 mL
Dilarutkan dan dicukupkan
dengan HCL 0,1 N
Dilarutkan dan dicukupkan
dengan HCL 0,1 N
Larutan Rifampisin
Larutan Isoniazid
1000 µg/mL
1000 µg/mL
Diambil 1,5 mL
Diambil 1 mL
kedua larutan dicampurkan ke dalam labu tentukur 10 mL dicukupkan dengan HCL 0,1
N. Diambil dari larutan tersebut 0,5 mL dimasukkan ke dalam labu tentukur 10 mL
dicukupkan dengan HCL 0,1 N
Larutan diukur pada lima panjang gelombang yang telah ditentukan
Lakukan replikasi sebanyak 6 kali
49
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 9. (Lanjutan)
20 tablet
ditimbang
digerus dalam lumpang sampai halus dan homogen
Serbuk
ditimbang setara 50 mg rifampisin
dihitung kesetaraan isoniazid yang terkandung
didalamnya (penimbangan dilakukan sebanyak 6
kali pengulangan)
dimasukkan kedalam labu tentukur 50 mL
dicukupkan dengan HCl 0,1N sampai garis tanda
dibantu pelarutannya dengan sonikator selama 20
menit
disaring
dibuang ± 10 mL filtrat pertama
filtrat selanjutnya ditampung
dipipet 1,5 mL
dimasukkan kedalam labu tentukur 10 mL
dicukupkan dengan HCl 0,1 N sampai garis tanda
dipipet 0,5 mL
dimasukkan kedalam labu tentukur 10 mL
dicukupkan dengan HCl 0,1 N sampai garis tanda
diukur pada 5 titik λ
Nilai Absorbansi
dihitung
Kadar
50
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 10. Data perhitungan kadar Rifampisin dan Isoniazid
-
x
=
-
x
-
x
-
x
-
x
=
=
=
=
-
x
=
Keterangan :
C1 = kadar Rifampisin
C2 = kadar Isoniazid
51
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 11. Data perhitungan kadar teoritis baku Rifampisin dan Isoniazid
Replikasi I
Kadar Rifampisin
: V1 x C1 = V2 x C2
1,5 x 1000 = 10 x C2
X
= 150 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 150 = 10 x C3
X
= 7,50 µg/mL (kadar akhir)
Kadar Isoniazid
: V1 x C1 = V2 x C2
1,0 x 1060 = 10 x C2
X
= 106 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 106 = 10 x C3
X
= 5,30 µg/mL (kadar akhir)
Keterangan:
V = mL
C = µg/mL
Replikasi II
Kadar Rifampisin
: V1 x C1 =
V2 x C2
1,5 x 1062 = 10 x C2
X
= 159,3 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 159,3 = 10 x C3
X
= 7,97 µg/mL (kadar akhir)
Kadar Isoniazid
: V1 x C1 =
V2 x C2
1,0 x 1052 = 10 x C2
X = 105,2 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 105,2 = 10 x C3
X
= 5,26 µg/mL (kadar akhir)
52
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 12. (Lanjutan)
Keterangan:
V = mL
C = µg/mL
Replikasi III
Kadar Rifampisin
: V1 x C1 = V2 x C2
1,5 x 1065 = 10 x C2
X
= 159,7 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 159,7 = 10 x C3
X
= 7,99 µg/mL (kadar akhir)
Kadar Isoniazid
: V1 x C1 = V2 x C2
1,0 x 1010 = 10 x C2
X
= 101,0 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 101,0 = 10 x C3
X
= 5,05 µg/mL (kadar akhir)
Keterangan:
V = mL
C = µg/mL
Replikasi IV
Kadar Rifampisin
: V1 x C1 = V2 x C2
1,5 x 1056 = 10 x C2
X = 158,4 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 158,4 = 10 x C3
X
= 7,92 µg/mL (kadar akhir)
Kadar Isoniazid
: V1 x C1 =
V2 x C2
1,0 x 1008 = 10 x C2
X = 100,8 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 100,8 = 10 x C3
X
= 5,04 µg/mL (kadar akhir)
53
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 13. (Lanjutan)
Keterangan:
V = mL
C = µg/mL
Replikasi V
Kadar Rifampisin
: V1 x C1 = V2 x C2
1,5 x 1142 = 10 x C2
X
= 171,3 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 171,3 = 10 x C3
X
= 8,57 µg/mL (kadar akhir)
Kadar Isoniazid
: V1 x C1 =
V2 x C2
1,0 x 1030 = 10 x C2
X
= 103,0 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 103,0 = 10 x C3
X
= 5,15 µg/mL (kadar akhir)
Keterangan:
V = mL
C = µg/mL
Replikasi VI
Kadar Rifampisin
: V1 x C1 = V2 x C2
1,5 x 1029 = 10 x C2
X
= 154,3 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 154,3 = 10 x C3
X
= 7,72 µg/mL (kadar akhir)
Kadar Isoniazid
: V1 x C1 = V2 x C2
1,0 x 1012 = 10 x C2
X
= 101,2 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 101,2 = 10 x C3
X
= 5,06 µg/mL (kadar akhir)
54
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 14. (Lanjutan)
Keterangan:
V = mL
C = µg/mL
55
Universitas Sumatera Utara
Lampiran
15.
Data penimbangan baku rifampsin
teoritis dari rifampsin dan isoniazid
dan
isoniazid,
serta
kadar
Penimbangan
rifampisin
(mg)
Penimbangan
isoniazid
kadar teoritis
rifampsin
(mg)
(µg/mL)
Kadar teoritis
isoniazid
(µg/mL)
1
10,0
10,60
7,50
5,30
2
10,62
10,52
7,97
5,26
3
10,65
10,10
7,99
5,05
4
10,56
10,08
7,92
5,04
5
11,42
10,30
6
10,29
10,12
Pengulangan
5,15
7,72
5,06
56
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 16. Data Kalibrasi Replikasi VI dari Rifampisin baku ARS, Persamaan
Regresi dan Koefisien Korelasi
Kalibrasi Serapan Rifampisin pada Panjang Gelombang 215,00 nm
No.
Konsentrasi (μg/mL) (X)
Absorbansi (Y)
1.
0,0000
0,00000
2.
6,0000
0,14207
3.
9,0000
0,21659
4.
12,0000
0,30078
5.
15,0000
0,39561
6.
18,0000
0,44356
Perhitungan Persamaan Garis Regresi
No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
X
0,00000
6,00000
9,00000
12,00000
15,00000
18,00000
ΣX = 60
= 10
Y
0,00000
0,14207
0,21659
0,30078
0,39561
0,44356
ΣY = 1,49861
= 0,2498
XY
0,0000
0,85242
1,94931
3,60936
5,93415
7,98408
ΣXY =
20,3293
X2`
0,0000
36,0000
81,0000
144,0000
225,0000
324,0000
ΣX2 =
810,0000
Y2
0
0,02018388
0,04691123
0,09046861
0,15650727
0,19674547
Σ Y2 =
0,51081647
0,02544
-0,0047
Maka, persamaan garis regresinya adalah
57
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 17. (Lanjutan)
Perhitungan Koefisien Korelasi ( )
=
= 0,9980
Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan rifampisin pada panjang gelombang
215,00 nm adalah 0,9980.
58
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 18. Data Kalibrasi Replikasi VI dari Rifampisin baku ARS, Persamaan
Regresi dan Koefisien Korelasi
Kalibrasi Serapan Rifampisin pada Panjang Gelombang 225,00 nm
No.
Konsentrasi (μg/mL) (X)
Absorbansi (Y)
1.
0,0000
0,00000
2.
6,0000
0,16347
3.
9,0000
0,23586
4.
12,0000
0,33188
5.
15,0000
0,44412
6.
18,0000
0,49872
Perhitungan Persamaan Garis Regresi
No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
X
0,00000
6,00000
9,00000
12,00000
15,00000
18,00000
ΣX = 60
= 10
Y
0,00000
0,16347
0,23586
0,33188
0,44412
0,49872
ΣY = 1,67405
= 0,2790
XY
0,0000
0,98082
2,12274
3,98256
6,6618
8,97696
ΣXY =
22,7249
X2`
0,0000
36,0000
81,0000
144,0000
225,0000
324,0000
Y2
0
0,02672244
0,05562994
0,11014433
0,19724257
0,24872164
Σ Y2 =
0,63846093
ΣX2 =
810,0000
0,02850
-0,0060
)
Maka, persamaan garis regresinya adalah
59
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 19. (Lanjutan)
Perhitungan Koefisien Korelasi ( )
=
= 0,9975
Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan rifampisin pada panjang gelombang
225,00 nm adalah 0,9975.
60
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 20. Data Kalibrasi Replikasi VI dari Rifampisin baku ARS, Persamaan
Regresi dan Koefisien Korelasi
Kalibrasi Serapan Rifampisin pada Panjang Gelombang 232,00 nm
No.
Konsentrasi (μg/mL) (X)
Absorbansi (Y)
1.
0,0000
0,00000
2.
6,0000
0,16655
3.
9,0000
0,23371
4.
12,0000
0,33019
5.
15,0000
0,4449
6.
18,0000
0,49858
Perhitungan Persamaan Garis Regresi
No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
X
0,00000
6,00000
9,00000
12,00000
15,00000
18,00000
ΣX = 60
= 10
Y
0,00000
0,16655
0,23371
0,33019
0,4449
0,49858
ΣY = 1,67393
= 0,2790
XY
0,0000
0,9993
2,10339
3,96228
6,6735
8,97444
ΣXY =
22,7129
X2`
0,0000
36,0000
81,0000
144,0000
225,0000
324,0000
ΣX2 =
810,0000
Y2
0
0,0277389
0,05462036
0,10902544
0,19793601
0,24858202
Σ Y2 =
0,63790273
0,02845
-0,0055
Maka, persamaan garis regresinya adalah
61
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 21. (Lanjutan)
Perhitungan Koefisien Korelasi ( )
=
= 0,9972
Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan rifampisin pada panjang gelombang
232,00 nm adalah 0,9972.
62
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 22. Data Kalibrasi Replikasi VI dari Rifampisin baku ARS, Persamaan
Regresi dan Koefisien Korelasi
Kalibrasi Serapan Rifampisin pada Panjang Gelombang 250,00 nm
No.
Konsentrasi (μg/mL) (X)
Absorbansi (Y)
1.
0,0000
0,00000
2.
6,0000
0,14554
3.
9,0000
0,20213
4.
12,0000
0,28771
5.
15,0000
0,38926
6.
18,0000
0,43784
Perhitungan Persamaan Garis Regresi
No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
X
0,00000
6,00000
9,00000
12,00000
15,00000
18,00000
ΣX = 60
= 10
Y
0
0,14554
0,20213
0,28771
0,38926
0,43784
ΣY = 1,46248
= 0,2437
XY
0,0000
0,87324
1,81917
3,45252
5,8389
7,88112
ΣXY =
19,8650
X2`
0,0000
36,0000
81,0000
144,0000
225,0000
324,0000
ΣX2 =
810,0000
Y2
0
0,02118189
0,04085654
0,08277704
0,15152335
0,19170387
Σ Y2 =
0,48804269
0,02850
-0,0058
Maka, persamaan garis regresinya adalah
63
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 23. (Lanjutan)
Perhitungan Koefisien Korelasi ( )
=
= 0,9969
Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan rifampisin pada panjang gelombang
250,00 nm adalah 0,9969.
64
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 24. Data Kalibrasi Replikasi VI dari Rifampisin baku ARS, Persamaan
Regresi dan Koefisien Korelasi
Kalibrasi Serapan Rifampisin Pada Panjang Gelombang 267,00 nm
No.
Konsentrasi (μg/mL) (X)
Absorbansi (Y)
1.
0,00000
0,00000
2.
5,00000
0,14562
3.
7,50000
0,20129
4.
10,00000
0,29032
5.
12,50000
0,39637
6.
15,00000
0,44996
Perhitungan Persamaan Garis Regresi
No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
X
0,00000
5,00000
7,500000
10,00000
12,50000
15,00000
ΣX = 60
Y
0
0,14562
0,20129
0,29032
0,39637
0,44996
ΣY = 1,48356
= 10
= 0,2473
XY
0,0000
0,87372
1,81161
3,48384
5,94555
8,09928
ΣXY =
20,2140
X2
0,0000
36,0000
81,0000
144,0000
225,0000
324,0000
ΣX2 =
810,0000
Y2
0
0,02120518
0,04051766
0,0842857
0,15710918
0,202464
ΣY2 =
0,50558173
)
Maka persamaan garis regresinya adalah
65
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 25. (Lanjutan)
Perhitungan Koefisien Korelasi ( )
=
= 0,9964
Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan rifampisin pada panjang gelombang
267,00 nm adalah 0,9964.
66
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 26. Data Kalibrasi Isoniazid, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi
Kalibrasi Serapan Isoniazid pada Panjang Gelombang 215,00 nm
No.
Konsentrasi (μg/mL) (X)
Absorbansi (Y)
1.
0,0000
0,00000
2.
5,0000
0,24441
3.
7,5000
0,3685
4.
10,0000
0,50411
5.
12,5000
0,60127
6.
15,0000
0,73853
Perhitungan Persamaan Garis Regresi
No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
X
0
5
7,5
10
12,5
15
ΣX = 50
=
8,333333
Y
0
0,24441
0,3685
0,50411
0,60127
0,73853
ΣY = 2,45682
= 0,4095
XY
0,0000
1,22205
2,76375
5,0411
7,515875
11,07795
ΣXY =
27,6207
X2`
0,0000
25,0000
56,2500
100,0000
156,2500
225,0000
ΣX2 =
562,5000
Y2
0
0,05973625
0,13579225
0,25412689
0,36152561
0,54542656
Σ Y2 =
1,35660756
0,04901
0,0011
)
Maka, persamaan garis regresinya adalah
67
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 27. (Lanjutan)
Perhitungan Koefisien Korelasi ( )
=
= 0,9995
Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan isoniazid pada panjang gelombang
215,00 nm adalah 0,9995.
68
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 28. Data Kalibrasi Isoniazid, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi
Kalibrasi Serapan Isoniazid pada Panjang Gelombang 225,00 nm
No.
Konsentrasi (μg/mL) (X)
Absorbansi (Y)
1.
0
0,00000
2.
5,0
0,15952
3.
7,5
0,23969
4.
10,0
0,32890
5.
12,5
0,38758
6.
15,0
0,47607
Perhitungan Persamaan Garis Regresi
No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
X
0
5,0
7,5
10,0
12,5
15,0
ΣX = 50
=
8,333333
Y
0
0,15952
0,23969
0,3289
0,38758
0,47607
ΣY = 1,59176
= 0,2653
XY
0,0000
0,7976
1,797675
3,289
4,84475
7,14105
ΣXY =
17,8701
X2`
0,0000
25,0000
56,2500
100,0000
156,2500
225,0000
Y2
0
0,02544663
0,0574513
0,10817521
0,15021826
0,22664264
Σ Y2 =
0,56793404
ΣX2 =
562,5000
0,03158
0,0021
)
Maka, persamaan garis regresinya adalah
69
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 29. (Lanjutan)
Perhitungan Koefisien Korelasi ( )
=
= 0,9993
Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan isoniazid pada panjang gelombang
225,00 nm adalah 0,9993.
70
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 30. Data Kalibrasi Isoniazid, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi
Kalibrasi Serapan Isoniazid pada Panjang Gelombang 232,00 nm
No.
Konsentrasi (μg/mL) (X)
Absorbansi (Y)
1.
0,0000
0,00000
2.
5,0000
0,11219
3.
7,5000
0,16707
4.
10,0000
0,23027
5.
12,5000
0,27069
6.
15,0000
0,33221
Perhitungan Persamaan Garis Regresi
No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
X
0
5
7,5
10
12,5
15
ΣX = 50
=
8,333333
Y
0
0,11219
0,16707
0,23027
0,27069
0,33221
ΣY = 1,11243
= 0,1854
XY
0,0000
0,56095
1,253025
2,3027
3,383625
4,98315
ΣXY =
12,4835
X2`
0,0000
25,0000
56,2500
100,0000
156,2500
225,0000
ΣX2 =
562,5000
Y2
0
0,0125866
0,02791238
0,05302427
0,07327308
0,11036348
Σ Y2 =
0,27715981
0,02203
0,0018
)
Maka, persamaan garis regresinya adalah
71
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 31. (Lanjutan)
Perhitungan Koefisien Korelasi ( )
=
= 0,9992
Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan isoniazid pada panjang gelombang
232,00 nm adalah 0,9992.
72
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 32. Data Kalibrasi Isoniazid, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi
Kalibrasi Serapan Isoniazid pada Panjang Gelombang 250,00 nm
No.
Konsentrasi (μg/mL) (X)
Absorbansi (Y)
1.
0
0,00000
2.
5,0
0,14694
3.
7,5
0,21873
4.
10,0
0,30012
5.
12,5
0,35790
6.
15,0
0,43916
Perhitungan Persamaan Garis Regresi
No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
X
0
5,0
7,5
10,0
12,5
15,0
ΣX = 50
=
8,333333
Y
0
0,14694
0,21873
0,30012
0,3579
0,43916
ΣY = 1,46285
= 0,2438
XY
0,0000
0,7347
1,640475
3,0012
4,47375
6,5874
ΣXY =
16,4375
X2`
0,0000
25,0000
56,2500
100,0000
156,2500
225,0000
ΣX2 =
562,5000
Y2
0
0,02159136
0,04784281
0,09007201
0,12809241
0,19286151
Σ Y2 =
0,48046011
0,02912
0,0011
Maka, persamaan garis regresinya adalah
73
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 33. (Lanjutan)
Perhitungan Koefisien Korelasi ( )
=
= 0,9995
Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan isoniazid pada panjang gelombang
250,00 nm adalah 0,9995.
74
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 34. Data Kalibrasi Isoniazid, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi
Kalibrasi Serapan Isoniazid pada Panjang Gelombang 267,00 nm
No.
Konsentrasi (μg/mL) (X)
Absorbansi (Y)
1.
0
0,00000
2.
5,0
0,22101
3.
7,5
0,33251
4.
10,0
0,45386
5.
12,5
0,54596
6.
15,0
0,67052
Perhitungan Persamaan Garis Regresi
No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
X
0
5,0
7,5
10,0
12,5
15,0
ΣX = 50
=
8,333333
Y
0
0,22101
0,33251
0,45386
0,54596
0,67052
ΣY = 2,22386
= 0,3706
XY
0,0000
1,10505
2,493825
4,5386
6,8245
10,0578
ΣXY =
25,0198
X2`
0,0000
25,0000
56,2500
100,0000
156,2500
225,0000
ΣX2 =
562,5000
Y2
0
0,04884542
0,1105629
0,2059889
0,29807232
0,44959707
Σ Y2 =
1,11306661
0,04449
-0,00011
Maka, persamaan garis regresinya adalah
75
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 35. (Lanjutan)
Perhitungan Koefisien Korelasi ( )
=
= 0,9997
Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan isoniazid pada panjang gelombang
267,00 nm adalah 0,9997.
76
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 36. Data penimbangan dan serapan dari Tablet Rimactacid®
No
Keterangan
Bobot
(gram)
Rifampisin Bobot
(gram)
1
Replikasi I
0,1103
0,3352
2
Replikasi II
0,1099
0,3346
3
Replikasi III
0,11
0,3343
4
Replikasi IV
0,1097
0,3334
5
Replikasi V
0,1107
0,3364
6
Replikasi VI
0,1098
0,3337
Isoniazid
77
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 37. Data serapan larutan sampel 7,5 ppm : 5,0 ppm
No
Serapan
pada λ
Keterangan
215
225
232
250
267
1
Replikasi I
0,40197
0,34361
0,3073
0,31409
0,37708
2
Replikasi II
0,40821
0,35019
0,31481
0,32102
0,38568
3
Replikasi III
0,38505
0,33034
0,29519
0,29787
0,35617
4
Replikasi IV
0,40219
0,34966
0,31451
0,31971
0,38179
5
Replikasi V
0,40517
0,35447
0,31903
0,32303
0,38544
6
Replikasi VI
0,38149
0,33221
0,29894
0,30425
0,36253
78
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 38. Data serapan campuran baku rifampisin 7,5 ppm : 5,0 ppm
No
Serapan
pada λ
Keterangan
215
225
232
250
267
1
Replikasi I
0,43123
0,36763
0,32648
0,34244
0,41310
2
Replikasi II
0,45973
0,38947
0,34435
0,36523
0,44736
3
Replikasi III
0,42984
0,36949
0,33020
0,34659
0,41907
4
Replikasi IV
0,47713
0,40317
0,35748
0,37488
0,45644
5
Replikasi V
0,43123
0,36763
0,32648
0,34244
0,41310
6
Replikasi VI
0,42982
0,37041
0,32999
0,34518
0,41708
79
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 39. Perhitungan Akurasi dari perhitungan matriks dan % KV Rifampisin dan
Isoniazid
Replikasi I
Replikasi II
Replikasi III
Replikasi IV
Replikasi V
Replikasi VI
Rifampisin
=
x
100.21% = 97,58 %
Isoniazid
=
x
101.85% = 97,85%
Rifampisin
=
x
100.21% = 97,78%
Isoniazid
=
x
101.85% = 98,54%
Rifampisin
=
x
100.21% = 97,54%
Isoniazid
=
x
101.85% = 97,72%
Rifampisin
=
x
100.21% = 97,18%
Isoniazid
=
x
101.85% = 97,92%
Rifampisin
=
x
100,21% = 97,07%
Isoniazid
=
x
101,85% = 98,17%
Rifampisin
=
x
100,21% = 97,31%
Isoniazid
=
x
101,85% = 97,85%
Rata – rata akurasi dari perhitungan matriks Rifampisin = 97,41 %
Rata – rata akurasi dari perhitungan matriks Isoniazid
= 98,00 %
80
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 40.
Perhitungan Statistik Kadar Rifampisin dan Isoniazid pada
Sediaan Tablet Rimactazid ®
1. Kadar Rifampisin
X
No.
X-
Kadar (%)
1.
2.
3.
4.
5.
6.
97,58
97,78
97,54
97,18
97,07
97,31
0,17
0,37
0,13
-0,23
-0,34
-0,1
= 97,41
SD
=
=
=
(X - )2
0,0289
0,1369
0,0169
0,0529
0,1156
0,01
(X - )2= 0,3612
= 0,2687
Pada interval kepercayaan 95% dengan nilai α = 0,05; dk = 6-1= 5,
Diperoleh ttabel= (1 – ½ α); dk
= (1 – 0,025); 5
= 0,975; 5
= 2,57
t hitung =
t hitung 1
=
= 1,5496
(diterima)
t hitung 2
=
= 3,3728
(ditolak)
t hitung 3
=
= 1,1850
(diterima)
t hitung 4
=
= 2,0966
(diterima)
t hitung 5
=
= 3,0993
(ditolak)
t hitung 6
=
= 0,9115
(diterima)
81
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 41. (lanjutan)
Dasar penerimaan data jika t hitung ≤ t tabel dan t hitung ≥ -t tabel.
Dari data di atas t hitung 2 tidak diterima karena t hitung ≤ t tabel dan t hitung ≥ -t tabel , maka t
hitung yang digunakan adalah:
X
No.
1.
2.
3.
4.
SD
97,58
97,54
97,18
97,31
= 97,40
=
(X - )2
X-
Kadar (%)
0,18
0,14
-0,22
-0,09
=
0,0324
0,0196
0,0484
0,0081
(X - )2 = 0,1085
=
= 0,1901
Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = n-1 = 4-1 = 3
Diperoleh ttabel= (1 – ½ α); dk
= (1 – 0,025); 3
= 0,975; 3
= 3,18
Dasar penerimaan data jika t hitung ≤ t tabel dan t hitung ≥ -t tabel.
t hitung =
t hitung 1
=
=
(diterima)
t hitung 2
=
=
(diterima)
t hitung 3
=
=
(diterima)
t hitung 4
=
=
(diterima)
Semua data diterima, maka kadar c sebenarnya untuk α = 0,05; n =4 adalah:
82
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 42. (Lanjutan)
μ=
± ttabel x
= ( 97,40± 3,18 x
)
= (97,40± 0,30) µg/mL
83
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 43. (Lanjutan)
2. Kadar Isoniazid
X
No.
X-
(X - )2
-0,15
0,54
-0,28
-0,08
0,17
-0,15
0,0225
0,2916
0,0784
0,0064
0,0289
0,0225
Kadar (%)
97,85
98,54
97,72
97,92
98,17
97,85
1.
2.
3.
4.
5.
6.
(X - )2 = 0,4503
= 98,00
SD
=
=
=
= 0,3
Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = n-1 = 6-1 = 5
Diperoleh ttabel= (1 – ½ α); dk
= (1 – 0,025); 5
= 0,975; 5
= 2,57
Dasar penerimaan data jika t hitung ≤ t tabel dan t hitung ≥ -t tabel.
t hitung =
t hitung 1
=
=
(diterima)
t hitung 2
=
=
(ditolak)
t hitung 3
=
=
(diterima)
t hitung 4
=
=
(diterima)
t hitung 5
=
=
(diterima)
t hitung 6
=
=
(diterima)
84
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 44. (Lanjutan)
Dari data di atas t hitung 2 tidak diterima karena t hitung ≤ t tabel dan t hitung ≥ -t tabel , maka t
hitung yang digunakan adalah:
X
No.
Kadar (%)
1.
2.
3.
4.
5.
97,85
97,72
97,92
98,17
97,85
X-
(X - )2
-0,05
-0,18
0,02
0,27
-0,05
0,0025
0,0324
0,0004
0,0729
0,0025
(X - )2 = 0,1107
= 97,90
SD
=
=
=
= 0,1663
Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = n-1 = 5-1 = 4
Diperoleh ttabel= (1 – ½ α); dk
= (1 – 0,025); 4
= 0,975; 4
= 2,78
Dasar penerimaan data jika t hitung ≤ t tabel dan t hitung ≥ -t tabel.
t hitung =
t hitung 1
=
=
(diterima)
t hitung 2
=
=
(diterima)
t hitung 3
=
=
(diterima)
t hitung 4
=
=
(ditolak)
t hitung 5
=
=
(diterima)
Dari data di atas t hitung 4 tidak diterima karena t hitung ≤ t tabel dan t hitung ≥ -t tabel , maka t
hitung yang digunakan adalah:
85
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 45. (Lanjutan)
X
No.
Kadar (%)
1.
2.
3.
4.
97,85
97,72
97,92
97,85
X-
(X - )2
0,02
-0,11
0,07
-0,02
0,0004
0,0121
0,0049
0,0004
(X - )2 = 0,0178
= 97,83
SD
=
=
=
= 0,077
Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = n-1 = 4-1 = 3
Diperoleh ttabel= (1 – ½ α); dk
= (1 – 0,025); 3
= 0,975; 3
= 3,18
Dasar penerimaan data jika t hitung ≤ t tabel dan t hitung ≥ -t tabel.
t hitung =
t hitung 1
=
=
(diterima)
t hitung 2
=
=
(diterima)
t hitung 3
=
=
(diterima)
t hitung 4
=
=
(diterima)
Semua data diterima, maka kadar c sebenarnya untuk α = 0,05; n =4 adalah:
μ=
± ttabel x
= ( 97,83± 3,18 x
)
= (97,83± 0,12) µg/mL
86
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 46. Perhitungan % KV (koefisien variasi) rifampisin dan isoniazid
NO
Kadar Terukur Rifampisin
(µg/mL)
Kadar Terukur Isoniazid
(µg/mL)
97,58
97,54
97,18
97,31
97,85
97,72
97,92
97,85
= 97,40
= 97,83
1
2
3
4
5
6
SD
= 0,1901
SD
%KV Rifampisin
=
X 100%
= 0,1951%
%KV Isoniazid
=
X 100%
= 0,0787%
% KV =
= 0,077
x 100%
87
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 47. Contoh Perhitungan Kadar Rifampisin dan Isoniazid dalam Sediaan
Tablet
(i) Perhitungan Volume Analisis untuk Rifampisin dan Isoniazid
Berat 20 tablet = 19,741 g
Ditimbang serbuk sampel setara dengan 50 mg rifampisin, maka jumlah sampel yang
ditimbang adalah :
x1
x 19,741 g
=
0,10967 g
Kemudian dihitung kesetaraan isoniazid yang terkandung dalam 0,10967 g sampel ini.
x2
x (20 x 300 mg)
= 33,36 mg
Dilarutkan serbuk sampel dengan HCl 0,l N dalam labu tentukur 50 mL sampai garis
tanda. Larutan kemudian dibantu pelarutannya dengan pengaduk ultrasonik selama 20
menit. Larutan tersebut kemudian disaring, lebih kurang 10 mL filtrat pertama dibuang.
Filtrat selanjutnya ditampung.
Konsentrasi rifampisin
x 1000 μg = 1000 μg/mL
x 1000 μg = 667,2 μg/mL
Konsentrasi isoniazid
Kemudian dari larutan filtrat ini, dipipet 0,15 mL, dimasukkan kedalam labu tentukur 10
mL lalu dicukupkan dengan HCl 0,1 N hingga garis tanda.
= 15,0 μg/mL
Konsentrasi rifampisin sampel =
= 10,008 μg/mL
Konsentrasi isoniazid sampel =
88
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 48. (Lanjutan)
Kemudian dari larutan filtrat ini, dipipet 5,0 mL, dimasukkan kedalam labu tentukur 10
mL lalu dicukupkan dengan HCl 0,1 N hingga garis tanda.
= 7,5μg/mL
Konsentrasi rifampisin sampel =
= 5,004 μg/mL
Konsentrasi isoniazid sampel =
89
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 49. Spectrum serapan dari larutan standar rifampisin sebanyak 6 replikasi
0.81995
Abs.
0.60000
0.40000
0.20000
0.00000
-0.07472
205.00
250.00
300.00
nm.
350.00
400.00
90
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 50. Spectrum serapan dari larutan standar rifampisin sebanyak 6 replikasi
(lanjutan)
0.81995
Abs.
0.60000
0.40000
0.20000
0.00000
-0.07472
205.00
250.00
300.00
nm.
350.00
400.00
91
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 51. Spectrum serapan dari larutan standar rifampisin sebanyak 6 replikasi
(lanjutan)
0.81995
Abs.
0.60000
0.40000
0.20000
0.00000
-0.07472
205.00
250.00
300.00
nm.
350.00
400.00
92
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 52. Spectrum serapan dari larutan standar isoniazid sebanyak 6 replikasi
0.68712
0.60000
Abs.
0.40000
0.20000
0.00000
-0.06365
205.00
250.00
300.00
nm.
350.00
400.00
93
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 53. Spectrum serapan dari larutan standar isoniazid sebanyak 6 replikasi
(lanjutan)
0.68712
0.60000
Abs.
0.40000
0.20000
0.00000
-0.06365
205.00
250.00
300.00
nm.
350.00
400.00
94
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 54. Spectrum serapan dari larutan standar isoniazid sebanyak 6 replikasi
(lanjutan)
0.68712
0.60000
Abs.
0.40000
0.20000
0.00000
-0.06365
205.00
250.00
300.00
nm.
350.00
400.00
95
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 55. Daftar Nilai Distribusi r
96
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 56. Daftar Nilai Distribusi t
97
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 57. Sertifikat Pengujian Rifampisin
98
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 58. Sertifikat Pengujian Isoniazid
99
Universitas Sumatera Utara
Gambar 1.1 Tablet Rimactazid®
42
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 2. Komposisi Tablet Rimactazid®
Daftar Spesifikasi Sampel
No. Reg
: DKL1031608509A1
Expired Date : Juli 2017
Komposisi
: Rifampisin .…………................... 450 mg
Isoniazid .…………...................... 300 mg
43
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3. Gambar Alat
Gambar 3.1 Spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu 1800)
Gambar 3.2 Neraca analitik (Mettler Toledo)
Gambar 3.3 Sonikator (Branson 1510)
44
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 4. Perhitungan Pembuatan HCl 0,1N
HCl pekat
=
37% setara dengan 12 N
V1 x N1
=
V2 x N2
V1 x 12 N
=
1000 mL x 0,1 N
V1
=
1000 mL
x 12 N
0,1 N
=
8,3 mL
45
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 5. Bagan Alir Prosedur Penelitian
Rifampisin baku ARS
ditimbang 10 mg
dimasukkan ke dalam labu tentukur 10
mL
Larutan rifampisin 1000 μg/mL (LIB I)
diambil 5 mL
dimasukkan ke dalam labu tentukur
100 mL
Larutan rifampisin 50 μg/mL (LIB II)
diambil 1,2 mL
diambil 2,4 mL
diambil 3 mL
diambil
3,6 mL
dilarutkan dan
dicukupkan dengan
HCl
dilarutkan dan
dicukupkan
dengan HCl
dilarutkan dan
dicukupkan
dengan HCl
12 μg/mL
6 μg/mL
15 μg/mL
diambil 1,8 mL
dilarutkan
dan
dicukupkan
dengan HCl
diambil 2,7 mL
18 μg/mL
dilarutkan dan
dicukupkan
dengan HCl
9 μg/mL
13,5 μg/mL
dilarutkan dan
dicukupkan
dengan HCl
diukur serapan
maksimum
pada λ 200-400
nm
Serapan
Maksimum
46
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 6. (Lanjutan)
Isoniazid baku BPFI
ditimbang 10 mg
dimasukkan ke dalam labu tentukur 10
mL
Larutan isoniazid 1000 μg/mL (LIB I)
diambil 5 mL
dimasukkan ke dalam labu tentukur
100 mL
Larutan isoniazid 50 μg/mL (LIB II)
diambil 1 mL
diambil 2 mL
diambil 2,5 mL
diambil
3 mL
dilarutkan dan
dicukupkan dengan
HCl
dilarutkan dan
dicukupkan
dengan HCl
10 μg/mL
5 μg/mL
diambil 1,5 mL
dilarutkan dan
dicukupkan
dengan HCl
12,5 μg/mL
d l
dilarutkan
dan
dicukupkan
dengan HCl
diambil 2,2 mL
15 μg/mL
dilarutkan dan
dicukupkan
dengan HCl
7,5 μg/mL
dilarutkan dan
dicukupkan
dengan HCl
diukur serapan
11 μg/mL
maksimum
pada λ 200-400
nm
Serapan
Maksimum
47
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 7. (Lanjutan)
5. Penentuan Panjang Gelombang Analisis Rifampisin dan Isoniazid
Rifampisin 7,5 μg/mL
Isoniazid 5,0μg/mL
diukur serapan dari masing-masing rifampisin
dan isoniazid panjang gelombang 200 - 400 nm
ditumpang tindihkan
ditentukan 5 titik panjang panjang gelombang
analisis
diambil panjang gelombang dari spektrum
serapan komponen mulai memberikan
serapan sampai hamper tidak memberikan
serapan.
215 nm
225 nm
250 nm
232 nm
267 nm
48
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 8. (Lanjutan)
6. Pembuatan Larutan Baku Campuran Rifampisin dan Isoniazid
Rifampisin 10 mg
Isoniazid 10 mg
Dimasukkan ke dalam labu
tentukur 10 mL
Dimasukkan ke dalam labu
tentukur 10 mL
Dilarutkan dan dicukupkan
dengan HCL 0,1 N
Dilarutkan dan dicukupkan
dengan HCL 0,1 N
Larutan Rifampisin
Larutan Isoniazid
1000 µg/mL
1000 µg/mL
Diambil 1,5 mL
Diambil 1 mL
kedua larutan dicampurkan ke dalam labu tentukur 10 mL dicukupkan dengan HCL 0,1
N. Diambil dari larutan tersebut 0,5 mL dimasukkan ke dalam labu tentukur 10 mL
dicukupkan dengan HCL 0,1 N
Larutan diukur pada lima panjang gelombang yang telah ditentukan
Lakukan replikasi sebanyak 6 kali
49
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 9. (Lanjutan)
20 tablet
ditimbang
digerus dalam lumpang sampai halus dan homogen
Serbuk
ditimbang setara 50 mg rifampisin
dihitung kesetaraan isoniazid yang terkandung
didalamnya (penimbangan dilakukan sebanyak 6
kali pengulangan)
dimasukkan kedalam labu tentukur 50 mL
dicukupkan dengan HCl 0,1N sampai garis tanda
dibantu pelarutannya dengan sonikator selama 20
menit
disaring
dibuang ± 10 mL filtrat pertama
filtrat selanjutnya ditampung
dipipet 1,5 mL
dimasukkan kedalam labu tentukur 10 mL
dicukupkan dengan HCl 0,1 N sampai garis tanda
dipipet 0,5 mL
dimasukkan kedalam labu tentukur 10 mL
dicukupkan dengan HCl 0,1 N sampai garis tanda
diukur pada 5 titik λ
Nilai Absorbansi
dihitung
Kadar
50
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 10. Data perhitungan kadar Rifampisin dan Isoniazid
-
x
=
-
x
-
x
-
x
-
x
=
=
=
=
-
x
=
Keterangan :
C1 = kadar Rifampisin
C2 = kadar Isoniazid
51
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 11. Data perhitungan kadar teoritis baku Rifampisin dan Isoniazid
Replikasi I
Kadar Rifampisin
: V1 x C1 = V2 x C2
1,5 x 1000 = 10 x C2
X
= 150 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 150 = 10 x C3
X
= 7,50 µg/mL (kadar akhir)
Kadar Isoniazid
: V1 x C1 = V2 x C2
1,0 x 1060 = 10 x C2
X
= 106 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 106 = 10 x C3
X
= 5,30 µg/mL (kadar akhir)
Keterangan:
V = mL
C = µg/mL
Replikasi II
Kadar Rifampisin
: V1 x C1 =
V2 x C2
1,5 x 1062 = 10 x C2
X
= 159,3 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 159,3 = 10 x C3
X
= 7,97 µg/mL (kadar akhir)
Kadar Isoniazid
: V1 x C1 =
V2 x C2
1,0 x 1052 = 10 x C2
X = 105,2 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 105,2 = 10 x C3
X
= 5,26 µg/mL (kadar akhir)
52
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 12. (Lanjutan)
Keterangan:
V = mL
C = µg/mL
Replikasi III
Kadar Rifampisin
: V1 x C1 = V2 x C2
1,5 x 1065 = 10 x C2
X
= 159,7 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 159,7 = 10 x C3
X
= 7,99 µg/mL (kadar akhir)
Kadar Isoniazid
: V1 x C1 = V2 x C2
1,0 x 1010 = 10 x C2
X
= 101,0 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 101,0 = 10 x C3
X
= 5,05 µg/mL (kadar akhir)
Keterangan:
V = mL
C = µg/mL
Replikasi IV
Kadar Rifampisin
: V1 x C1 = V2 x C2
1,5 x 1056 = 10 x C2
X = 158,4 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 158,4 = 10 x C3
X
= 7,92 µg/mL (kadar akhir)
Kadar Isoniazid
: V1 x C1 =
V2 x C2
1,0 x 1008 = 10 x C2
X = 100,8 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 100,8 = 10 x C3
X
= 5,04 µg/mL (kadar akhir)
53
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 13. (Lanjutan)
Keterangan:
V = mL
C = µg/mL
Replikasi V
Kadar Rifampisin
: V1 x C1 = V2 x C2
1,5 x 1142 = 10 x C2
X
= 171,3 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 171,3 = 10 x C3
X
= 8,57 µg/mL (kadar akhir)
Kadar Isoniazid
: V1 x C1 =
V2 x C2
1,0 x 1030 = 10 x C2
X
= 103,0 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 103,0 = 10 x C3
X
= 5,15 µg/mL (kadar akhir)
Keterangan:
V = mL
C = µg/mL
Replikasi VI
Kadar Rifampisin
: V1 x C1 = V2 x C2
1,5 x 1029 = 10 x C2
X
= 154,3 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 154,3 = 10 x C3
X
= 7,72 µg/mL (kadar akhir)
Kadar Isoniazid
: V1 x C1 = V2 x C2
1,0 x 1012 = 10 x C2
X
= 101,2 µg/mL (kadar awal)
V2 x C2
= V3 x C3
0,5 x 101,2 = 10 x C3
X
= 5,06 µg/mL (kadar akhir)
54
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 14. (Lanjutan)
Keterangan:
V = mL
C = µg/mL
55
Universitas Sumatera Utara
Lampiran
15.
Data penimbangan baku rifampsin
teoritis dari rifampsin dan isoniazid
dan
isoniazid,
serta
kadar
Penimbangan
rifampisin
(mg)
Penimbangan
isoniazid
kadar teoritis
rifampsin
(mg)
(µg/mL)
Kadar teoritis
isoniazid
(µg/mL)
1
10,0
10,60
7,50
5,30
2
10,62
10,52
7,97
5,26
3
10,65
10,10
7,99
5,05
4
10,56
10,08
7,92
5,04
5
11,42
10,30
6
10,29
10,12
Pengulangan
5,15
7,72
5,06
56
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 16. Data Kalibrasi Replikasi VI dari Rifampisin baku ARS, Persamaan
Regresi dan Koefisien Korelasi
Kalibrasi Serapan Rifampisin pada Panjang Gelombang 215,00 nm
No.
Konsentrasi (μg/mL) (X)
Absorbansi (Y)
1.
0,0000
0,00000
2.
6,0000
0,14207
3.
9,0000
0,21659
4.
12,0000
0,30078
5.
15,0000
0,39561
6.
18,0000
0,44356
Perhitungan Persamaan Garis Regresi
No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
X
0,00000
6,00000
9,00000
12,00000
15,00000
18,00000
ΣX = 60
= 10
Y
0,00000
0,14207
0,21659
0,30078
0,39561
0,44356
ΣY = 1,49861
= 0,2498
XY
0,0000
0,85242
1,94931
3,60936
5,93415
7,98408
ΣXY =
20,3293
X2`
0,0000
36,0000
81,0000
144,0000
225,0000
324,0000
ΣX2 =
810,0000
Y2
0
0,02018388
0,04691123
0,09046861
0,15650727
0,19674547
Σ Y2 =
0,51081647
0,02544
-0,0047
Maka, persamaan garis regresinya adalah
57
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 17. (Lanjutan)
Perhitungan Koefisien Korelasi ( )
=
= 0,9980
Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan rifampisin pada panjang gelombang
215,00 nm adalah 0,9980.
58
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 18. Data Kalibrasi Replikasi VI dari Rifampisin baku ARS, Persamaan
Regresi dan Koefisien Korelasi
Kalibrasi Serapan Rifampisin pada Panjang Gelombang 225,00 nm
No.
Konsentrasi (μg/mL) (X)
Absorbansi (Y)
1.
0,0000
0,00000
2.
6,0000
0,16347
3.
9,0000
0,23586
4.
12,0000
0,33188
5.
15,0000
0,44412
6.
18,0000
0,49872
Perhitungan Persamaan Garis Regresi
No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
X
0,00000
6,00000
9,00000
12,00000
15,00000
18,00000
ΣX = 60
= 10
Y
0,00000
0,16347
0,23586
0,33188
0,44412
0,49872
ΣY = 1,67405
= 0,2790
XY
0,0000
0,98082
2,12274
3,98256
6,6618
8,97696
ΣXY =
22,7249
X2`
0,0000
36,0000
81,0000
144,0000
225,0000
324,0000
Y2
0
0,02672244
0,05562994
0,11014433
0,19724257
0,24872164
Σ Y2 =
0,63846093
ΣX2 =
810,0000
0,02850
-0,0060
)
Maka, persamaan garis regresinya adalah
59
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 19. (Lanjutan)
Perhitungan Koefisien Korelasi ( )
=
= 0,9975
Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan rifampisin pada panjang gelombang
225,00 nm adalah 0,9975.
60
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 20. Data Kalibrasi Replikasi VI dari Rifampisin baku ARS, Persamaan
Regresi dan Koefisien Korelasi
Kalibrasi Serapan Rifampisin pada Panjang Gelombang 232,00 nm
No.
Konsentrasi (μg/mL) (X)
Absorbansi (Y)
1.
0,0000
0,00000
2.
6,0000
0,16655
3.
9,0000
0,23371
4.
12,0000
0,33019
5.
15,0000
0,4449
6.
18,0000
0,49858
Perhitungan Persamaan Garis Regresi
No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
X
0,00000
6,00000
9,00000
12,00000
15,00000
18,00000
ΣX = 60
= 10
Y
0,00000
0,16655
0,23371
0,33019
0,4449
0,49858
ΣY = 1,67393
= 0,2790
XY
0,0000
0,9993
2,10339
3,96228
6,6735
8,97444
ΣXY =
22,7129
X2`
0,0000
36,0000
81,0000
144,0000
225,0000
324,0000
ΣX2 =
810,0000
Y2
0
0,0277389
0,05462036
0,10902544
0,19793601
0,24858202
Σ Y2 =
0,63790273
0,02845
-0,0055
Maka, persamaan garis regresinya adalah
61
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 21. (Lanjutan)
Perhitungan Koefisien Korelasi ( )
=
= 0,9972
Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan rifampisin pada panjang gelombang
232,00 nm adalah 0,9972.
62
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 22. Data Kalibrasi Replikasi VI dari Rifampisin baku ARS, Persamaan
Regresi dan Koefisien Korelasi
Kalibrasi Serapan Rifampisin pada Panjang Gelombang 250,00 nm
No.
Konsentrasi (μg/mL) (X)
Absorbansi (Y)
1.
0,0000
0,00000
2.
6,0000
0,14554
3.
9,0000
0,20213
4.
12,0000
0,28771
5.
15,0000
0,38926
6.
18,0000
0,43784
Perhitungan Persamaan Garis Regresi
No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
X
0,00000
6,00000
9,00000
12,00000
15,00000
18,00000
ΣX = 60
= 10
Y
0
0,14554
0,20213
0,28771
0,38926
0,43784
ΣY = 1,46248
= 0,2437
XY
0,0000
0,87324
1,81917
3,45252
5,8389
7,88112
ΣXY =
19,8650
X2`
0,0000
36,0000
81,0000
144,0000
225,0000
324,0000
ΣX2 =
810,0000
Y2
0
0,02118189
0,04085654
0,08277704
0,15152335
0,19170387
Σ Y2 =
0,48804269
0,02850
-0,0058
Maka, persamaan garis regresinya adalah
63
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 23. (Lanjutan)
Perhitungan Koefisien Korelasi ( )
=
= 0,9969
Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan rifampisin pada panjang gelombang
250,00 nm adalah 0,9969.
64
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 24. Data Kalibrasi Replikasi VI dari Rifampisin baku ARS, Persamaan
Regresi dan Koefisien Korelasi
Kalibrasi Serapan Rifampisin Pada Panjang Gelombang 267,00 nm
No.
Konsentrasi (μg/mL) (X)
Absorbansi (Y)
1.
0,00000
0,00000
2.
5,00000
0,14562
3.
7,50000
0,20129
4.
10,00000
0,29032
5.
12,50000
0,39637
6.
15,00000
0,44996
Perhitungan Persamaan Garis Regresi
No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
X
0,00000
5,00000
7,500000
10,00000
12,50000
15,00000
ΣX = 60
Y
0
0,14562
0,20129
0,29032
0,39637
0,44996
ΣY = 1,48356
= 10
= 0,2473
XY
0,0000
0,87372
1,81161
3,48384
5,94555
8,09928
ΣXY =
20,2140
X2
0,0000
36,0000
81,0000
144,0000
225,0000
324,0000
ΣX2 =
810,0000
Y2
0
0,02120518
0,04051766
0,0842857
0,15710918
0,202464
ΣY2 =
0,50558173
)
Maka persamaan garis regresinya adalah
65
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 25. (Lanjutan)
Perhitungan Koefisien Korelasi ( )
=
= 0,9964
Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan rifampisin pada panjang gelombang
267,00 nm adalah 0,9964.
66
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 26. Data Kalibrasi Isoniazid, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi
Kalibrasi Serapan Isoniazid pada Panjang Gelombang 215,00 nm
No.
Konsentrasi (μg/mL) (X)
Absorbansi (Y)
1.
0,0000
0,00000
2.
5,0000
0,24441
3.
7,5000
0,3685
4.
10,0000
0,50411
5.
12,5000
0,60127
6.
15,0000
0,73853
Perhitungan Persamaan Garis Regresi
No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
X
0
5
7,5
10
12,5
15
ΣX = 50
=
8,333333
Y
0
0,24441
0,3685
0,50411
0,60127
0,73853
ΣY = 2,45682
= 0,4095
XY
0,0000
1,22205
2,76375
5,0411
7,515875
11,07795
ΣXY =
27,6207
X2`
0,0000
25,0000
56,2500
100,0000
156,2500
225,0000
ΣX2 =
562,5000
Y2
0
0,05973625
0,13579225
0,25412689
0,36152561
0,54542656
Σ Y2 =
1,35660756
0,04901
0,0011
)
Maka, persamaan garis regresinya adalah
67
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 27. (Lanjutan)
Perhitungan Koefisien Korelasi ( )
=
= 0,9995
Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan isoniazid pada panjang gelombang
215,00 nm adalah 0,9995.
68
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 28. Data Kalibrasi Isoniazid, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi
Kalibrasi Serapan Isoniazid pada Panjang Gelombang 225,00 nm
No.
Konsentrasi (μg/mL) (X)
Absorbansi (Y)
1.
0
0,00000
2.
5,0
0,15952
3.
7,5
0,23969
4.
10,0
0,32890
5.
12,5
0,38758
6.
15,0
0,47607
Perhitungan Persamaan Garis Regresi
No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
X
0
5,0
7,5
10,0
12,5
15,0
ΣX = 50
=
8,333333
Y
0
0,15952
0,23969
0,3289
0,38758
0,47607
ΣY = 1,59176
= 0,2653
XY
0,0000
0,7976
1,797675
3,289
4,84475
7,14105
ΣXY =
17,8701
X2`
0,0000
25,0000
56,2500
100,0000
156,2500
225,0000
Y2
0
0,02544663
0,0574513
0,10817521
0,15021826
0,22664264
Σ Y2 =
0,56793404
ΣX2 =
562,5000
0,03158
0,0021
)
Maka, persamaan garis regresinya adalah
69
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 29. (Lanjutan)
Perhitungan Koefisien Korelasi ( )
=
= 0,9993
Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan isoniazid pada panjang gelombang
225,00 nm adalah 0,9993.
70
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 30. Data Kalibrasi Isoniazid, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi
Kalibrasi Serapan Isoniazid pada Panjang Gelombang 232,00 nm
No.
Konsentrasi (μg/mL) (X)
Absorbansi (Y)
1.
0,0000
0,00000
2.
5,0000
0,11219
3.
7,5000
0,16707
4.
10,0000
0,23027
5.
12,5000
0,27069
6.
15,0000
0,33221
Perhitungan Persamaan Garis Regresi
No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
X
0
5
7,5
10
12,5
15
ΣX = 50
=
8,333333
Y
0
0,11219
0,16707
0,23027
0,27069
0,33221
ΣY = 1,11243
= 0,1854
XY
0,0000
0,56095
1,253025
2,3027
3,383625
4,98315
ΣXY =
12,4835
X2`
0,0000
25,0000
56,2500
100,0000
156,2500
225,0000
ΣX2 =
562,5000
Y2
0
0,0125866
0,02791238
0,05302427
0,07327308
0,11036348
Σ Y2 =
0,27715981
0,02203
0,0018
)
Maka, persamaan garis regresinya adalah
71
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 31. (Lanjutan)
Perhitungan Koefisien Korelasi ( )
=
= 0,9992
Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan isoniazid pada panjang gelombang
232,00 nm adalah 0,9992.
72
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 32. Data Kalibrasi Isoniazid, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi
Kalibrasi Serapan Isoniazid pada Panjang Gelombang 250,00 nm
No.
Konsentrasi (μg/mL) (X)
Absorbansi (Y)
1.
0
0,00000
2.
5,0
0,14694
3.
7,5
0,21873
4.
10,0
0,30012
5.
12,5
0,35790
6.
15,0
0,43916
Perhitungan Persamaan Garis Regresi
No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
X
0
5,0
7,5
10,0
12,5
15,0
ΣX = 50
=
8,333333
Y
0
0,14694
0,21873
0,30012
0,3579
0,43916
ΣY = 1,46285
= 0,2438
XY
0,0000
0,7347
1,640475
3,0012
4,47375
6,5874
ΣXY =
16,4375
X2`
0,0000
25,0000
56,2500
100,0000
156,2500
225,0000
ΣX2 =
562,5000
Y2
0
0,02159136
0,04784281
0,09007201
0,12809241
0,19286151
Σ Y2 =
0,48046011
0,02912
0,0011
Maka, persamaan garis regresinya adalah
73
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 33. (Lanjutan)
Perhitungan Koefisien Korelasi ( )
=
= 0,9995
Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan isoniazid pada panjang gelombang
250,00 nm adalah 0,9995.
74
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 34. Data Kalibrasi Isoniazid, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi
Kalibrasi Serapan Isoniazid pada Panjang Gelombang 267,00 nm
No.
Konsentrasi (μg/mL) (X)
Absorbansi (Y)
1.
0
0,00000
2.
5,0
0,22101
3.
7,5
0,33251
4.
10,0
0,45386
5.
12,5
0,54596
6.
15,0
0,67052
Perhitungan Persamaan Garis Regresi
No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
X
0
5,0
7,5
10,0
12,5
15,0
ΣX = 50
=
8,333333
Y
0
0,22101
0,33251
0,45386
0,54596
0,67052
ΣY = 2,22386
= 0,3706
XY
0,0000
1,10505
2,493825
4,5386
6,8245
10,0578
ΣXY =
25,0198
X2`
0,0000
25,0000
56,2500
100,0000
156,2500
225,0000
ΣX2 =
562,5000
Y2
0
0,04884542
0,1105629
0,2059889
0,29807232
0,44959707
Σ Y2 =
1,11306661
0,04449
-0,00011
Maka, persamaan garis regresinya adalah
75
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 35. (Lanjutan)
Perhitungan Koefisien Korelasi ( )
=
= 0,9997
Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan isoniazid pada panjang gelombang
267,00 nm adalah 0,9997.
76
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 36. Data penimbangan dan serapan dari Tablet Rimactacid®
No
Keterangan
Bobot
(gram)
Rifampisin Bobot
(gram)
1
Replikasi I
0,1103
0,3352
2
Replikasi II
0,1099
0,3346
3
Replikasi III
0,11
0,3343
4
Replikasi IV
0,1097
0,3334
5
Replikasi V
0,1107
0,3364
6
Replikasi VI
0,1098
0,3337
Isoniazid
77
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 37. Data serapan larutan sampel 7,5 ppm : 5,0 ppm
No
Serapan
pada λ
Keterangan
215
225
232
250
267
1
Replikasi I
0,40197
0,34361
0,3073
0,31409
0,37708
2
Replikasi II
0,40821
0,35019
0,31481
0,32102
0,38568
3
Replikasi III
0,38505
0,33034
0,29519
0,29787
0,35617
4
Replikasi IV
0,40219
0,34966
0,31451
0,31971
0,38179
5
Replikasi V
0,40517
0,35447
0,31903
0,32303
0,38544
6
Replikasi VI
0,38149
0,33221
0,29894
0,30425
0,36253
78
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 38. Data serapan campuran baku rifampisin 7,5 ppm : 5,0 ppm
No
Serapan
pada λ
Keterangan
215
225
232
250
267
1
Replikasi I
0,43123
0,36763
0,32648
0,34244
0,41310
2
Replikasi II
0,45973
0,38947
0,34435
0,36523
0,44736
3
Replikasi III
0,42984
0,36949
0,33020
0,34659
0,41907
4
Replikasi IV
0,47713
0,40317
0,35748
0,37488
0,45644
5
Replikasi V
0,43123
0,36763
0,32648
0,34244
0,41310
6
Replikasi VI
0,42982
0,37041
0,32999
0,34518
0,41708
79
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 39. Perhitungan Akurasi dari perhitungan matriks dan % KV Rifampisin dan
Isoniazid
Replikasi I
Replikasi II
Replikasi III
Replikasi IV
Replikasi V
Replikasi VI
Rifampisin
=
x
100.21% = 97,58 %
Isoniazid
=
x
101.85% = 97,85%
Rifampisin
=
x
100.21% = 97,78%
Isoniazid
=
x
101.85% = 98,54%
Rifampisin
=
x
100.21% = 97,54%
Isoniazid
=
x
101.85% = 97,72%
Rifampisin
=
x
100.21% = 97,18%
Isoniazid
=
x
101.85% = 97,92%
Rifampisin
=
x
100,21% = 97,07%
Isoniazid
=
x
101,85% = 98,17%
Rifampisin
=
x
100,21% = 97,31%
Isoniazid
=
x
101,85% = 97,85%
Rata – rata akurasi dari perhitungan matriks Rifampisin = 97,41 %
Rata – rata akurasi dari perhitungan matriks Isoniazid
= 98,00 %
80
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 40.
Perhitungan Statistik Kadar Rifampisin dan Isoniazid pada
Sediaan Tablet Rimactazid ®
1. Kadar Rifampisin
X
No.
X-
Kadar (%)
1.
2.
3.
4.
5.
6.
97,58
97,78
97,54
97,18
97,07
97,31
0,17
0,37
0,13
-0,23
-0,34
-0,1
= 97,41
SD
=
=
=
(X - )2
0,0289
0,1369
0,0169
0,0529
0,1156
0,01
(X - )2= 0,3612
= 0,2687
Pada interval kepercayaan 95% dengan nilai α = 0,05; dk = 6-1= 5,
Diperoleh ttabel= (1 – ½ α); dk
= (1 – 0,025); 5
= 0,975; 5
= 2,57
t hitung =
t hitung 1
=
= 1,5496
(diterima)
t hitung 2
=
= 3,3728
(ditolak)
t hitung 3
=
= 1,1850
(diterima)
t hitung 4
=
= 2,0966
(diterima)
t hitung 5
=
= 3,0993
(ditolak)
t hitung 6
=
= 0,9115
(diterima)
81
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 41. (lanjutan)
Dasar penerimaan data jika t hitung ≤ t tabel dan t hitung ≥ -t tabel.
Dari data di atas t hitung 2 tidak diterima karena t hitung ≤ t tabel dan t hitung ≥ -t tabel , maka t
hitung yang digunakan adalah:
X
No.
1.
2.
3.
4.
SD
97,58
97,54
97,18
97,31
= 97,40
=
(X - )2
X-
Kadar (%)
0,18
0,14
-0,22
-0,09
=
0,0324
0,0196
0,0484
0,0081
(X - )2 = 0,1085
=
= 0,1901
Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = n-1 = 4-1 = 3
Diperoleh ttabel= (1 – ½ α); dk
= (1 – 0,025); 3
= 0,975; 3
= 3,18
Dasar penerimaan data jika t hitung ≤ t tabel dan t hitung ≥ -t tabel.
t hitung =
t hitung 1
=
=
(diterima)
t hitung 2
=
=
(diterima)
t hitung 3
=
=
(diterima)
t hitung 4
=
=
(diterima)
Semua data diterima, maka kadar c sebenarnya untuk α = 0,05; n =4 adalah:
82
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 42. (Lanjutan)
μ=
± ttabel x
= ( 97,40± 3,18 x
)
= (97,40± 0,30) µg/mL
83
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 43. (Lanjutan)
2. Kadar Isoniazid
X
No.
X-
(X - )2
-0,15
0,54
-0,28
-0,08
0,17
-0,15
0,0225
0,2916
0,0784
0,0064
0,0289
0,0225
Kadar (%)
97,85
98,54
97,72
97,92
98,17
97,85
1.
2.
3.
4.
5.
6.
(X - )2 = 0,4503
= 98,00
SD
=
=
=
= 0,3
Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = n-1 = 6-1 = 5
Diperoleh ttabel= (1 – ½ α); dk
= (1 – 0,025); 5
= 0,975; 5
= 2,57
Dasar penerimaan data jika t hitung ≤ t tabel dan t hitung ≥ -t tabel.
t hitung =
t hitung 1
=
=
(diterima)
t hitung 2
=
=
(ditolak)
t hitung 3
=
=
(diterima)
t hitung 4
=
=
(diterima)
t hitung 5
=
=
(diterima)
t hitung 6
=
=
(diterima)
84
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 44. (Lanjutan)
Dari data di atas t hitung 2 tidak diterima karena t hitung ≤ t tabel dan t hitung ≥ -t tabel , maka t
hitung yang digunakan adalah:
X
No.
Kadar (%)
1.
2.
3.
4.
5.
97,85
97,72
97,92
98,17
97,85
X-
(X - )2
-0,05
-0,18
0,02
0,27
-0,05
0,0025
0,0324
0,0004
0,0729
0,0025
(X - )2 = 0,1107
= 97,90
SD
=
=
=
= 0,1663
Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = n-1 = 5-1 = 4
Diperoleh ttabel= (1 – ½ α); dk
= (1 – 0,025); 4
= 0,975; 4
= 2,78
Dasar penerimaan data jika t hitung ≤ t tabel dan t hitung ≥ -t tabel.
t hitung =
t hitung 1
=
=
(diterima)
t hitung 2
=
=
(diterima)
t hitung 3
=
=
(diterima)
t hitung 4
=
=
(ditolak)
t hitung 5
=
=
(diterima)
Dari data di atas t hitung 4 tidak diterima karena t hitung ≤ t tabel dan t hitung ≥ -t tabel , maka t
hitung yang digunakan adalah:
85
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 45. (Lanjutan)
X
No.
Kadar (%)
1.
2.
3.
4.
97,85
97,72
97,92
97,85
X-
(X - )2
0,02
-0,11
0,07
-0,02
0,0004
0,0121
0,0049
0,0004
(X - )2 = 0,0178
= 97,83
SD
=
=
=
= 0,077
Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = n-1 = 4-1 = 3
Diperoleh ttabel= (1 – ½ α); dk
= (1 – 0,025); 3
= 0,975; 3
= 3,18
Dasar penerimaan data jika t hitung ≤ t tabel dan t hitung ≥ -t tabel.
t hitung =
t hitung 1
=
=
(diterima)
t hitung 2
=
=
(diterima)
t hitung 3
=
=
(diterima)
t hitung 4
=
=
(diterima)
Semua data diterima, maka kadar c sebenarnya untuk α = 0,05; n =4 adalah:
μ=
± ttabel x
= ( 97,83± 3,18 x
)
= (97,83± 0,12) µg/mL
86
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 46. Perhitungan % KV (koefisien variasi) rifampisin dan isoniazid
NO
Kadar Terukur Rifampisin
(µg/mL)
Kadar Terukur Isoniazid
(µg/mL)
97,58
97,54
97,18
97,31
97,85
97,72
97,92
97,85
= 97,40
= 97,83
1
2
3
4
5
6
SD
= 0,1901
SD
%KV Rifampisin
=
X 100%
= 0,1951%
%KV Isoniazid
=
X 100%
= 0,0787%
% KV =
= 0,077
x 100%
87
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 47. Contoh Perhitungan Kadar Rifampisin dan Isoniazid dalam Sediaan
Tablet
(i) Perhitungan Volume Analisis untuk Rifampisin dan Isoniazid
Berat 20 tablet = 19,741 g
Ditimbang serbuk sampel setara dengan 50 mg rifampisin, maka jumlah sampel yang
ditimbang adalah :
x1
x 19,741 g
=
0,10967 g
Kemudian dihitung kesetaraan isoniazid yang terkandung dalam 0,10967 g sampel ini.
x2
x (20 x 300 mg)
= 33,36 mg
Dilarutkan serbuk sampel dengan HCl 0,l N dalam labu tentukur 50 mL sampai garis
tanda. Larutan kemudian dibantu pelarutannya dengan pengaduk ultrasonik selama 20
menit. Larutan tersebut kemudian disaring, lebih kurang 10 mL filtrat pertama dibuang.
Filtrat selanjutnya ditampung.
Konsentrasi rifampisin
x 1000 μg = 1000 μg/mL
x 1000 μg = 667,2 μg/mL
Konsentrasi isoniazid
Kemudian dari larutan filtrat ini, dipipet 0,15 mL, dimasukkan kedalam labu tentukur 10
mL lalu dicukupkan dengan HCl 0,1 N hingga garis tanda.
= 15,0 μg/mL
Konsentrasi rifampisin sampel =
= 10,008 μg/mL
Konsentrasi isoniazid sampel =
88
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 48. (Lanjutan)
Kemudian dari larutan filtrat ini, dipipet 5,0 mL, dimasukkan kedalam labu tentukur 10
mL lalu dicukupkan dengan HCl 0,1 N hingga garis tanda.
= 7,5μg/mL
Konsentrasi rifampisin sampel =
= 5,004 μg/mL
Konsentrasi isoniazid sampel =
89
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 49. Spectrum serapan dari larutan standar rifampisin sebanyak 6 replikasi
0.81995
Abs.
0.60000
0.40000
0.20000
0.00000
-0.07472
205.00
250.00
300.00
nm.
350.00
400.00
90
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 50. Spectrum serapan dari larutan standar rifampisin sebanyak 6 replikasi
(lanjutan)
0.81995
Abs.
0.60000
0.40000
0.20000
0.00000
-0.07472
205.00
250.00
300.00
nm.
350.00
400.00
91
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 51. Spectrum serapan dari larutan standar rifampisin sebanyak 6 replikasi
(lanjutan)
0.81995
Abs.
0.60000
0.40000
0.20000
0.00000
-0.07472
205.00
250.00
300.00
nm.
350.00
400.00
92
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 52. Spectrum serapan dari larutan standar isoniazid sebanyak 6 replikasi
0.68712
0.60000
Abs.
0.40000
0.20000
0.00000
-0.06365
205.00
250.00
300.00
nm.
350.00
400.00
93
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 53. Spectrum serapan dari larutan standar isoniazid sebanyak 6 replikasi
(lanjutan)
0.68712
0.60000
Abs.
0.40000
0.20000
0.00000
-0.06365
205.00
250.00
300.00
nm.
350.00
400.00
94
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 54. Spectrum serapan dari larutan standar isoniazid sebanyak 6 replikasi
(lanjutan)
0.68712
0.60000
Abs.
0.40000
0.20000
0.00000
-0.06365
205.00
250.00
300.00
nm.
350.00
400.00
95
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 55. Daftar Nilai Distribusi r
96
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 56. Daftar Nilai Distribusi t
97
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 57. Sertifikat Pengujian Rifampisin
98
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 58. Sertifikat Pengujian Isoniazid
99
Universitas Sumatera Utara