Optimasi komposisi fase gerak pada pemisahan campuran deksametason dan deksklorfeniramin maleat secara kromatografi lapis tipis densitometri - USD Repository

  

OPTIMASI KOMPOSISI FASE GERAK PADA PEMISAHAN CAMPURAN

DEKSAMETASON DAN DEKSKLORFENIRAMIN MALEAT SECARA

KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS DENSITOMETRI

SKRIPSI

  Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

  Program Studi Farmasi Diajukan oleh:

  Lucia Shinta Ratnaningtyas NIM : 098114113

  

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2013

  Halaman Persembahan

My Lovely Father and Mother

  yang selalu setia dan tulus ikhlas menemani penulis dalam keadaan apapun,baik suka maupun duka, atas doa dan restu dalam pencapain cita-cita penulis.

  

My Lovely Brother

  Yang menjadi partner dalam berbagi pengalaman dan pemacu semangat penulis untuk selalu berjuang dan berpikir positif dalam berkarya.

  " When a person really desires something, all the universe conspires to help that person to realize his dream" _{Paulo Coelho} “Bermimpi saja tidak akan pernah cukup. Sebuah impian memang seharusnya tidak perlu terlalu banyak dibicarakan, tetapi diperjuangkan.”

  

  

PRAKATA

  Puji dan syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa atas kasih, semangat, talenta, cinta dan berkat penyertaanNya yang begitu besar, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi berjudul “Optimasi Komposisi Fase Gerak Pada Pemisahan Campuran Deksametason Dan Deksklorfeniramin Maleat Secara Kromatografi Lapis Tipis Densitometri

  ” Penulis menyadari bahwa penelitian dan penyusunan skripsi ini dapat terselesaikan oleh karena kritikan, saran, diskusi, arahan, dan bimbingan dari berbagai pihak. Penulis mengucapkan terima kasih kepada : 1.

  Ipang Djunarko, M.Sc., Apt selaku dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang memberikan kesempatan kepada saya untuk menuntut ilmu di fakultas ini.

  2. Prof. Dr. Sudibyo Martono, M.S., Apt. selaku dosen pembimbing pertama atas kesabaran dan waktunya dalam memberikan arahan, kritik, saran, dan kesediaan beliau untuk memberikan pencerahan pemikiran saya.

3. Dra. M.M. Yetty Tjandrawati, M.Si. selaku dosen pembimbing kedua dan DPA

  Farmasi C 2009 atas pendampingannya dari awal sampai akhir kuliah, serta pendampingan dalam penelitian dan penyusunan penulisan skipsi.

  4. Jeffry Julianus, M.Si selaku dosen penguji atas masukan, kritik membangun dan bimbingannya.

  5. Lucia Wiwid Wijayanti, M.Si. selaku dosen penguji atas masukan, kritik membangun dan bimbingannya.

  6. Sisilia Mirsya Anastasia sebagai rekan kerja Metri Setyadhiani Karunawati dan dalam penelitian ini. Terima kasih atas kesabaran, kerjasama, persahabatan, canda, dan semangat selama ini.

  7. Rendy Putra Wijaya yang telah sabar dan tulus setia mendampingi penulis dalam suka maupun duka selama melakukan penelitian ini.

  8. Eric Antonius, Is Sumitro, Demas, Novia Sarwoningtyas, Victor Purnama Jati, Agnes Mutiara, Leonardus Nito Kristiyanto, Ina Juni Natasia, Topan Pamungkas, Kristina Nety, dan Johannes Dharma sebagai teman seperjuangan dalam satu lantai laboratorium Analisis Instrumental. Terima kasih atas diskusi, semangat, dan keceriaan selama kita bekerja bersama-sama.

  9. Konco Dolan FST 2009, FST suka-suka, dan Kepoers ( christine, devita galuh ajeng, inggrid silli, dan amalia) untuk penghiburannya di sela-sela pusingnya penelitian.

  10. Rekan praktikum (Wisnu, Nindi, Friska, Teti, Arvi, Haris, Ade, Saka, Novia) yang telah mengajari penulis untuk terus semangat pantang menyerah dan sabar dalam menyelsaikan tugas perkuliahan apapun yang terjadi.

  11. PT. Ifars dan PT. Konimex yang telah memberikan baku deksklorfenirami maleat dan deksametason kepada peneliti.

  12. dan

  Grup request paper ilmiah di google yang selalu membantu penulis dalam mendownload sumber ilmu dari paper-paper berkualitas dengan sukarela dan tulus ikhlas.

  13. Agnes Ardiyanti, Agatha Lena, Felicia Putri Hernat, Sanjayadi, Florentinus Dika Octa Riswanto, dan Kenny Ryan Limanto atas bantuannya akses artikel ilmiah dan diskusi membangun untuk kelancaran penelitian ini

  Bimo Adithya, Parlan, Kunto, Fransiskus Otok dan segenap staf laboran yang 14. senantiasa siap membantu dan meluangkan waktunya dalam penyediaan bahan dan alat selama penelitian

  15. Semua dosen dan karyawan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma atas ilmu, pengalaman, dan semangat berharga yang selalu dibagikan.

  16. Teman-teman Farmasi Angkatan 2009 atas suka, duka dan ceria selama 4 tahun bersama “Together We Can”. Keberuntungan yang sangat berlimpah dirasakan penulis atas kebersamaan selama ini.

  17. Semua pribadi yang tidak dapat disebutkan satu persatu, atas segala bantuan, semangat dan doa yang menyertai penulis dari awal penelitian sampai akhir terselesaikannya penulisan skripsi.

  Penulis membuka diri untuk menerima saran yang membangun dari semua pihak. Akhir kata, penulis mempersembahkan skripsi ini dengan demi majunya ilmu pengetahuan farmasi. Terima kasih.

  Penulis

  DAFTAR ISI

  HALAMAN JUDUL ................. ....................................................................... i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ................................................ii HALAMAN PENGESAHAN ............................. ........................................... iii HALAMAN PERSEMBAHAN ............................. ......................................... iv HALAMAN PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA

  ILMIAH ......................... ................................................................................ v PERNYATAAN KEASLIAN KARYA .......................... ................................ vi PRAKATA ...................................... .............................................................. vii DAFTAR ISI ...................... ............................................................................ xi DAFTAR TABEL ..................... ................................................................. xviii DAFTAR GAMBAR ..................... ................................................................ xx DAFTAR LAMPIRAN ................. .............................................................. xxii

  INTISARI ................................................................................................... xxiv

  

ABSTRACT ................. ................................................................................. xxv

  BAB I. PENGANTAR ...................... ............................................................... 1 A. Latar Belakang ....................... .................................................................... 1 1. Permasalahan.......................................... ............................................... 4 2. Keaslian penelitian ............................ ................................................... 4 3. Manfaat penelitian.............................. ................................................... 5 B. Tujuan Penelitian ......................... .............................................................. 6

  BAB II. PENELAHAAN PUSTAKA .................... .......................................... 7 A. Deksklorfeniramin maleat ................ ......................................................... 7 B. Deksametason ............................. .............................................................. 9 C. Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ...................... ..... ................................. 10 1. Tinjauan umum ............................................... ................................... 10 2. Sistem KLT........................ ............................................................... 12 a. Fase Diam ........................ ........................................................... 12 b. Fase Gerak ........................ .......................................................... 13 3. Aplikasi Penotolan Sampel .................. ............................................. 14 4. Penilaian Kromatogram.................. ................................................... 14 a. Faktor Retardasi.................. ......................................................... 14 b. Nilai Faktor Asimetris.................... .............................................. 15 1.)

  Difusi Eddy .................. ......................................................... 15 2.)

  Difusi Longitudinal.................. .............................................. 16 3.)

  Transfer Massa .................. ...................................................... 1 c. Resolusi.................. ..................................................................... 18 d.

  Presisi.................. ........................................................................ 19 D. Densitometri........................ .................................................................... 19 E. Keterangan Empiris.................. ............................................................... 22

  BAB III. METODE PENELITIAN ................... ............................................. 24 A. Jenis dan Rancangan Penelitian .................. .............................................. 24 B. Variabel Penelitian ................................................................................... 24

  1. Variabel bebas .................... ................................................................. 24

  Pembuatan larutan baku deksklorfeniramin maleat 5,0 mg/mL ..... 26 b. Pembuatan larutan baku deksklorfeniramin maleat 1,0 mg/mL ..... 26

  ®

  Pembuatan fase gerak ................................................................... 28 b. Optimasi pemilihan fase gerak pemisahan baku deksametason dan deklorfeniramin maleat dalam sediaan kaplet X

  6. Optimasi metode KLT densitometri .. ................................................. 28 a.

  5. Penentuan panjang gelombang pengamatan deksametason dan deksklorfeniramin maleat ........ ........................................................... 27

  4. Penentuan panjang elusi ..... ............................................................... 27

  3. Pembuatan larutan baku campuran deksametason dan deksklorfeniramin maleat.............. ..................................................... 27

  2. Pembuatan larutan baku deksklorfeniramin maleat ............ ..................26 a.

  2. Variabel tergantung ............... ............................................................. 24

  Pembuatan larutan baku deksametason 3,75 mg/mL.......................26 b. Pembuatan larutan baku deksametason 0,3 mg/mL.........................26

  1. Pembuatan larutan baku deksametason.............. .................................. 26 a.

  F. Tata Cara Penelitian .................................................................................. 26

  E. Alat Penelitian....................... ..................................................................... 25

  D. Bahan Penelitian ............ ........................................................................... 25

  C. Definisi Operasional ................................................................................. 25

  3. Variabel pengacau terkendali ............................................................. 24

  .......................... 28

  c.

  Pembuatan larutan sediaan kaplet X

  ®

  ............................................ 29 d. Reprodusibilitas dari fase gerak hasil optimasi .............................. 29 G.

  Analisis Hasil ........................................................................................... 30 1.

  Bentuk Puncak ................................................................................... 30 2. Faktor Retardasi ................................................................................. 30 3. Resolusi ............................................................................................. 31 4. % Koefisien Variasi ……………………….. ...................................... 31

  BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ................... .................................... 32 A. Penentuan Fase Gerak ............................................................................... 32 B. Penentuan Larutab Baku ............................................................................ 34 C. Pembuatan Panjang Jarak Elusi ................................................................ 35 D. Optimasi Metode Pemisahan Deksametason dan Deksklorfeniramin Maleat dalam sediaan tablet X

  ®

  dengan Kromatografi Lapis Tipis Densitometri .. 36 1. Penentuan panjang gelombang pengamatan deksametason dan deklorfeniramin maelat ............................................................ ...........36

  2. Optimasi fase gerak untuk pemisahan deksametason dan deksklorfeniramin maleat dalam sediaan tablet® dengan KLT densitometri...................................................................................39 a.

  Hasil elusi larutan blanko dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a : larutan amonia 25% p.a (25 :4 :1)...........................................42 b. Hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a:metanol p.a

  (25:4)................................................................................................43

  c.

  .Hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a : larutan amonia 25% p.a (8 :20 :2)...............................................................44 d.

  Hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a: metanol p.a : larutan amonia 25% p.a (20 : 8 : 2 ) ...........................................................46 e.

  Hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a : larutan amonia 25% p.a (25:4:2).................................................................47 f.

  Hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a : larutan amonia 25% p.a (25 : 6: 1) ..............................................................48 g.

  Hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a : larutan amonia 25% p.a (27 :4:1) ................................................................49 h.

  Hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a : larutan amonia 25% p.a (23 : 4 : 1)...............................................................50 i.

  Hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a : larutan amonia 25% p.a (25 : 2 : 1)...............................................................51 j.

  Hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a : larutan amonia 25% p.a (25 :4 :1).............................................................52

  BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ..........................................................57 A. Kesimpulan ...................................................................................................57 B. Saran .............................................................................................................57 Daftar pustaka ...................... .......................................................................... 58 Lampiran ................. ...................................................................................... 61 Biografi penulis ................. ............................................................................ 79

  

DAFTAR TABEL

  Tabel I. Sifat/karakteristik yang dimiliki deklorfeniramin maleat ..................................................................................................................7

  Tabel II. Sifat/karakteristik yang dimiliki deksametason.......................................9 Tabel III. Karakteristik lapisan fase diam yang digunakan untuk TLC................12 Tabel IV. Nilai sifat pelarut...................................................................................13 Tabel V. Komposisi Fase Gerak............................................................................28 Tabel VI. Nilai Rf, As, Rs, dan lama pengelusian larutan baku campuran deksametason dan deksklorfeniramin maleat...............35

  Tabel VII. Data pengukuran panjang gelombang pengamatan deksametason dan deksklorfeniramin maleat......................................................................38 Tabel VIII. Nilai Rf dan As larutan baku deksametason (D) dan deksklorfeniramin maleat (DM) pada berbagai komposisi fase gerak................................41 Tabel IX. Nilai Rf dan As larutan baku deksametason dan deksklorfeniramin maleat dengan fase gerak etil asetat : metanol (25:4).......................44

  Tabel X. Nilai Rf dan As larutan baku deksametason dan deksklorfeniramin maleat dengan fase gerak etil asetat : metanol: larutan amonia 25% p.a (8 :20 :2)..................................................................................................45

  Tabel XI. Nilai Rf dan As larutan baku deksametason dan deksklorfeniramin maleat dengan fase gerak etil asetat : metanol : larutan amonia 25% p.a (20 :8 :2)...................................................................................................46

  Tabel XII. Nilai Rf dan As larutan baku deksametason dan deksklorfeniramin maleat dengan fase gerak etil asetat : metanol: larutan amonia 25% p.a (25 :4 :2)...................................................................................................47

  Tabel XIII. Nilai Rf dan As larutan baku deksametason dan deksklorfeniramin maleat dengan fase gerak etil asetat : metanol: larutan amonia 25% p.a (25:6:1).....................................................................................................48

  Tabel XIV. Nilai Rf dan As larutan baku deksametason dan deksklorfeniramin maleat dengan fase gerak etil asetat : metanol: larutan amonia 25% p.a (27:4:1).....................................................................................................49

  Tabel XV. Nilai Rf dan As larutan baku deksametason dan deksklorfeniramin maleat dengan fase gerak etil asetat : metanol: larutan amonia 25% p.a (23:4:1).....................................................................................................50

  Tabel XVI. Nilai Rf dan As larutan baku deksametason dan deksklorfeniramin maleat dengan fase gerak etil asetat : metanol: larutan amonia 25% p.a (25:2:1).....................................................................................................51

  Tabel XVII. Nilai Rf, As, Rs dan AUC larutan baku campuran deksametason (D) dan deksklorfeniramin maleat (DM) serta sampel kaplet X® dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a : larutan amonia 25% p.a (25:4:1).....................................................................................................54

  DAFTAR GAMBAR

  Gambar 1. Struktur Deksklorfeniramin maleat .............. ................................... 7 Gambar 2. Spektra Deksklorfeniramin maleat................... ................................ 8 Gambar 3. Struktur Deksametason........ ........................................................... 9 Gambar 4. Spektra Deksametason ............................................................. ...... 10 Gambar 5. Struktur silika gel.............................................................................13 Gambar 6. Ilustrasi pengaruh difusi Eddy pada pelebaran puncak................... 16 Gambar 7. Ilustrasi pengaruh difusi longitudinal pada pelebaran puncak

  ....................... ..................................................................................... 17 Gambar 8. Ilustrasi pengaruh transfer massa pada pelebaran puncak. ............. 17 Gambar 9. Isoterm sorpsi dan profil puncak.....................................................18 Gambar 10. Pemisahan dua senyawa...... ........................................................ 19 Gambar 11. Ilustrasi skematis model deteksi .................................................. 21 Gambar 12. Menentukan puncak asimetriss dan faktor pengukuran ................ 30 Gambar 13. Gugus kromofor deksametason ................................................... 37 Gambar 14. Gugus kromofor dan auksokrom deksklorfeniramin maleat ......... 37 Gambar 15.Pola spektra absorbsi seri larutan rendah, sedang, dan tinggi senyawa campuran deksametason dan deksklorfeniramin maleat..38 Gambar 16. Puncak larutan blanko dengan fase gerak etil asetat : metanol : larutan amonia 25% (25 :4 :1)....................................................42 Gambar 17. Puncak baku deksametason dan deksklorfeniramin maleat dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a (25:4) .......................... 43

  Gambar 18. Puncak baku deksametason dan deksklorfeniramin maleat dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a : larutan amonia 25% p.a (8 :20 :2) ................................................................................. 44

  Gambar 19. Puncak baku deksametason dan deksklorfeniramin maleat dengan fase gerak etil asetat : metanol : larutan amonia 25% p.a (20 : 8 : 2) ............................................................................................ 46

  Gambar 20. Puncak baku deksametason dan deksklorfeniramin maleat dengan fase gerak etil asetat : metanol : larutan amonia 25% p.a (25 :4 :2) ........................................................................................... 47

  Gambar 21. Puncak baku deksametason dan deksklorfeniramin maleat dengan fase gerak etil asetat : metanol : larutan amonia 25% p.a (25 :6 :1) ........................................................................................... 48

  Gambar 22. Puncak baku deksametason dan deksklorfeniramin maleat dengan fase gerak etil asetat : metanol : larutan amonia 25% p.a (27 :4 :1) ........................................................................................... 49

  Gambar 23. Puncak baku deksametason dan deksklorfeniramin maleat dengan fase gerak etil asetat : metanol : larutan amonia 25% p.a (23 : 4 : 1) ............................................................................................ 50

  Gambar 24. Puncak baku deksametason dan deksklorfeniramin maleat dengan fase gerak etil asetat : metanol : larutan amonia 25% p.a (25 :2 :1) ........................................................................................... 51

  Gambar 25. Puncak baku deksametason dan deksklorfeniramin maleat dengan fase gerak etil asetat : metanol : larutan amonia 25% p.a (25 :4 :1) ...... ......................... ...............................................................52

  Gambar 26. Puncak sampel dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a : larutan amonia 25% p.a (25 :4 :1) ............................................ 54

  

DAFTAR LAMPIRAN

  Lampiran 1. Certificate of Analysis Baku Deksklorfeniramin maleat..................62 Lampiran 2. Certificate of Analysis Baku Deksametason.....................................63

  Lampiran 3. Data Penimbangan dan Pengambilan Baku dan Sampel serta Contoh

Perhitungan Konsentrasi Baku...................................................................64

Lampiran 4. Contoh perhitungan Indeks Polaritas Fase Gerak.......................................65

  Lampiran 5. Sistem KLT-Densitometri yang Digunakan......................................67 Lampiran 6. Contoh densitogram hasil elusi dengan panjang track 15 cm..........67 Lampiran 7. Contoh densitogram hasil elusi dengan panjang track 10 cm..........68 Lampiran 8. Densitogram hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a (25:4)...........................................................................................68

  Lampiran 9. Densitogram hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a : larutan amonia 25% p.a (8 :20 :2).............................................69

  Lampiran 10. Densitogram hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a: metanol p.a : larutan amonia 25% p.a (20 :8: 2) ..........................................69

  Lampiran 11. Densitogram hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a : larutan amonia 25% p.a (25:4:2)..............................................70

  Lampiran 12.Densitogram hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a: larutan amonia 25% p.a (25 : 6: 1) ...........................................70

  Lampiran 13. Densitogram hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a : larutan amonia 25% p.a (27 :4:1) ...........................................71

  Lampiran 14. Densitogram hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol

  p.a : larutan amonia 25% p.a (23 : 4 : 1)........................................71

  Lampiran 15. Densitogram hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol

  p.a : larutan amonia 25% p.a (25 : 2 : 1)........................................72

  Lampiran 16. Densitogram hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol

  p.a : larutan amonia 25% p.a (25 :4 :1)..........................................72

  Lampiran 17. Densitogram reprodusibilitas sampel..............................................75 Lampiran 18. Perhitungan Nilai % KV AUC Baku dan Sampel...........................76 Lampiran 19. Contoh Perhitungan Nilai Rs (Resolusi) Puncak

  Deksklorfeniramin maleat dan Deksametason ..............................77 Lampiran 20. Contoh Perhitungan Nilai Faktor Asimetris (As) Puncak

  Deksklorfeniramin maleat dan Deksametason.................................78

  

INTISARI

  Kombinasi deksametason dan deksklorfeniramin maleat terdapat dalam

  ®

  sediaan kaplet X . Penjaminan mutu menjadi hal yang penting untuk menjamin

  ®

  keamanan pemakaian sediaan kaplet X . Salah satu usaha penjaminan mutu adalah penetapan kadar zat aktif yang akan mempengaruhi efek farmakologi obat. Metode kromatografi lapis tipis (KLT) densitometri adalah metode alternatif yang digunakan untuk memisahkan dan juga analisis kualitatif dan kuantitatif deksametason dan deksklorfeniramin maleat dalam waktu yang bersamaan.

  Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui kondisi optimal fase gerak dari KLT densitometri sehingga dapat menghasilkan pemisahan optimal dan dapat menetapkan kadar deksametason dan deksklorfeniramin maleat dalam sediaan kaplet

  ®

  X .Penelitian ini merupakan jenis rancangan penelitian eksperimental yang pada subjek uji diberikan perlakuan yaitu jenis dan komposisi fase ferak. Sistem KLT yang digunakan fase normal menggunakan fase diam silika gel dan fase gerak optimal dari perbandingan etil asetat : metanol : larutan amonia 25%. Pembacaan dilakukan pada panjang gelombang 262 nm.

  Sistem optimal komposisi dan jenis fase gerak yang diperoleh adalah etil asetat : metanol : larutan amonia 25% p.a (25 : 4 : 1) dengan jarak elusi 5 cm. Sistem memberikan bentuk puncak simetris, sempit, dan runcing (nilai faktor asimetris berada dalam kisaran 0,95-1,10), Range nilai Rf untuk deksametason adalah 0,60- 0,68. Range Rf untuk deksklorfeniramin maleat adalah 0,40-0,48, dan %KV dari nilai AUC ≤ 2. Kata kunci : deksametason, deksklorfeniramin maleat, kromatografi lapis tipis, densitometri

  

ABSTRACT

  Combinations of dexamethasone and dexchlorpheniramine maleate exist in

  ®

  X tablet. Quality assurance becomes an essence since patient have to get the benefit of the safe medication. One kind of quality assurance involves the active substance quantifications related to the pharmalogical effect. Thin layer chromatography (TLC) densitometry is alternative method used for separation and also for qualitative and quantitative analysis of dexamethasone and dexchlorpheniramine maleate simultaneous.

  The aim of this study is to determine optimal condition to produce the optimal separation and determine between dexamethasone and dexchlorpheniramine maleate

  ®

  in X tablet. This study is an analytical experimental study that the test subjects are subjected by treatments consisted of different types and composition of mobile phase. The optimization of TLC-UV densitometric method was performed on ethyl acetate:methanol:larutan amonia 25% p.a with various compositions as the developing solvents. Detection was carried out at 262 nm.

  The optimum system was confirmed by ethyl acetate : methanol : larutan amonia 25% p.a (25 : 4 : 1) as developing solvent with 5 cm elution distance. The systems gives symmetry, narrow, and pointed shaped peak (As = 0,95-1,10), Range Rf for dexamethasone are 0,60-0,68, Range Rf for dexamethasone are 0,40-0,48, and %CV of AUC ≤ 2.

  Keywords : dexamethasone, dexchlorpheniramine maleate, thin layer chromatography, densitometric

  This study aimed to obtained information about the effects of short-term ad

BAB I PENGANTAR A. Latar Belakang

  ®

  Campuran deksametason dan deksklorfeniramin maleat (sediaan kaplet X ) merupakan salah satu obat yang biasa digunakan untuk mengobati gangguan alergi

  1

  dan supresi inflamasi (Anonim , 2009). Data World Allergy Organization (WAO) 2011 menyebutkan bahwa 22% penduduk dunia menderita alergi dan terus meningkat setiap tahunnya. Hal ini menyebabkan penggunaan campuran deksametason dan deksklorfeniramin maleat meningkat pula karena campuran deksametason dan deksklorfeniramin maleat merupakan salah satu obat anti alergi yang menjadi andalan.

  Campuran deksametason dan deksklorfeniramin maleat merupakan produk obat keras dan obat alergi andalan masyarakat. Oleh karena itu, penjaminan mutu obat menjadi perhatian penting dalam penggunaan campuran deksametason dan deksklorfeniramin maleat. Salah satu parameter obat dikatakan memenuhi standar apabila kadar zat aktif yang terkandung di dalamnya memenuhi persyaratan standar acuan. Deksametason dalam tablet mengandung tidak kurang dari 90,0 % dan tidak lebih dari 110,0 % C

22 H

  29 FO 5 dari jumlah yang tertera pada etiket, sedangkan

  deksklorfeniramin maleat dalam tablet mengandung tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% C

  20 H

  23 ClN

  2 O 4 dari jumlah yang tertera pada etiket (United State Pharmacopeia, 2007). Penjaminan mutu kadar zat aktif yang terkandung dalam suatu obat dapat diketahui melalui analisis kualitatif dan kuantitatif. Oleh karena itu, diperlukan pengembangan metode analisis untuk memberikan metode alternatif. Pengembangan metode alternatif penting karena variasi instrumen yang dimiliki laboratorium.

  Metode analisis deksametason dan deksklorfeniramin maleat telah dilakukan dengan menggunakan kromatografi cair (Maria dkk., 2005) dan spektrofluorometri (El-Yazbi dkk., 2006). Penelitian menggunakan kromatografi cair dan spektrofluorometri menghasilkan metode analisis yang akurat, simpel, dan reprodusibel. Penelitian dengan menggunakan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) densitometri belum dikembangkan.

  Peneliti ingin mengembangkan metode analisis alternatif obat yang mengandung deksametason dan deksklorfeniramin maleat. Metode analisis yang akan peneliti kembangkan adalah metode analisis campuran deksametason dan deksklorfeniramin maleat dengan KLT densitometri. Salah satu kelebihan metode KLT densitometri digunakan untuk analisis kualitatif dan kuantitatif dalam waktu yang bersamaan dan dapat mengukur beberapa senyawa tidak hanya senyawa tunggal (Martono, 1996).

  Pengembangan metode analisis terdiri dari tiga tahap, yaitu optimasi metode,

  

validasi metode dan aplikasi metode. Penelitian yang akan dilakukan oleh peneliti

  adalah bagian optimasi metode pemisahan campuran deksametason dan

  ® deksklorfeniramin maleat sebagai zat aktif dalam sediaan kaplet X . Optimasi metode perlu dilakukan dalam penelitian ini karena terdapat perbedaan zat aktif dan perbedaan instrumen analisis yang dilakukan dibandingkan penelitian terdahulu. Optimasi metode ini diperlukan supaya tercapai pemisahan yang optimal dari campuran deksametason dan deksklorfeniramin maleat.

  Metode analisis yang optimal ditunjukkan dengan kualitas pemisahan. Kualitas tersebut dapat dikontrol dengan melakukan serangkaian uji kesesuaian sistem meliputi bentuk puncak, faktor retardasi, resolusi dan %KV nilai AUC. Bentuk puncak yang baik yakni sempit dan simetris (nilai faktor asimetris (A s ) berada dalam kisaran 0,95-1,10). Nilai faktor retardasi (R f ) zat aktif yang terletak antara 0,2-0,8 akan memaksimalkan pemisahan. Parameter lain dalam pemisahan senyawa dengan metode kromatografi adalah nilai resolusi (Rs). Nilai resolusi harus bernilai lebih besar sama dengan 1,5 (Rohman, 2009).

  Penelitian ini merupakan dasar dalam rangkaian penelitian selanjutnya. Penelitian ini diharapkan dapat diterapkan dalam pengembangan metode alternatif analisis campuran deksametason dan deksklorfeniramin maleat.

1. Permasalahan

  Bagaimanakah komposisi fase gerak yang dapat memberikan pemisahan KLT yang baik dengan parameter-parameter bentuk puncak simetris dan sempit, nilai Rf antara 0,2-0,

  8, nilai Rs ≥ 1,5, dan %KV nilai AUC ≤ 2 dalam pemisahan campuran deksametason dan deksklorfeniramin maleat sebagai zat aktif dalam sediaan kaplet

  ®

  X menggunakan metode KLT densitometri dengan fase diam silika gel 60 F 254 ? 2.

   Keaslian Penelitian

  Penelitian mengenai identifikasi dan analisis kuantitatif deksametason dilakukan oleh Krzek dan Maslanka (2005) dalam penelitiannya “Identification and

  

Quantitation of polymyxin B, framycetin, and dexamethasone in a ointment by using

thin-layer chormatograpfy with densitometry

  ”. Plat dikembangkan dengan sikloheksana-etil asetat (2 : 3 v/v).

  Penelitian mengenai identifikasi dan kuantifikasi deksklorfeniramin maleat dilakukan oleh Subarmaniyan dan Das (2004) dalam penelitiannya

  “Rapid

Identification and Quantification of Chlorpeniramine Maleate or Pheniramine

Maleate in Pharmaceutical Preparations by Thin Layer Chromatography-

Densitometry“ dengan menggunakan fase gerak sikloheksana : kloroform : metanol :

  dietilamin (4,5 : 4 : 0,5 : 1 v/v).

  Penelitian mengenai analisis kuantitatif deksametason dan klorfeniramin maleat telah dilakukan Maria dkk.,(2005) dalam penelitiannya “Simultaneous

  

determination of chlorpheniramine maleate and dexamethasone in a tablet dosage

form by liquid chromatography

  ”. Penelitian El-Yazbi dkk.,2006) dalam penelitiannya yang berjudul “New

  

Spectrofluorometric Application For The Determination Of Ternary Mixtures Of

Drugs

  “memaparkan bahwa analisis campuran deksametason, deksklorfenirain maleat, dan dapat dilakukan dengan menggunakan spektrofluorometri.

  Penelitian yang akan dilakukan adalah optimasi komposisi fase gerak optimal sebagai metode alternatif pemisahan campuran baku deksametason dan deksklorfeniramin maleat dalam sediaan kaplet X

  ®

  dengan menggunakan metode KLT densitometri. Belum terdapat sistem KLT densitometri untuk pemisahan dan kuantifikasi deksametason dan deksklorfeniramin maleat yang tercantum dalam Farmakope Indonesia.

3. Manfaat Penelitian a.

  Manfaat metodologis: Hasil penelitian diharapkan memberikan sumbangan bagi pengembangan ilmu pengetahuan mengenai komposisi fase gerak yang optimal sebagai metode alternatif pemisahan deksametason dan deksklorfeniramin maleat dalam sediaan kaplet X

  ®

  menggunakan KLT densitometri.

  b.

  Manfaat praktis: Hasil penelitian diharapkan memberikan informasi kondisi pemisahan deksametason dan deksklorfeniramin maleat yang optimal untuk penetapan kadar zat aktif sehingga menjamin keamanan pemakaian sediaan kaplet X

  ® .

B. Tujuan

  Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui komposisi fase gerak yang dapat memberikan pemisahan KLT densitometri yang baik dengan parameter-parameter bentuk puncak simetris dan sempit, nilai Rf antara 0,2-0,8, nilai Rs ≥ 1,5 dan %KV nilai AUC ≤ 2 dalam pemisahan campuran deksametason dan deksklorfeniramin

  ®

  maleat sebagai zat aktif dalam sediaan kaplet X menggunakan metode KLT densitometri dengan fase diam silika gel 60 F .

  254

  

BAB II

PENELAAHAN PUSTAKA

A. Deksklorfeniramin Maleat

Gambar 1. Struktur Deksklorfeniramin maleat

Deksklorfeniramin maleat dalam tablet mengandung tidak kurang dari

  90,0% dan tidak lebih dari 110,0% C

  20 H

  23 ClN

  2 O 4 dari jumlah yang tertera pada

  etiket (United State Pharmacopeia, 2007). Deksklorfeniramin maleat (gambar 1.) merupakan garam yang terdiri dari komponen basa deksklorfeniramin dan asam maleat (Cox, 1979)

  

Tabel I. Sifat/ karakteristik yang dimiliki deksklorfeniramin maleat (Moffat, 2011)

  No. Sifat/Karakteristik Keterangan

  1 Titik didih 130 - 135 C

  2 Bobot molekul 390,9 3 pKa 9,13 (25°C)

  4 Log P 0,08 Tabel I. menunjukkan karakteristik yang dimiliki deksklorfeniramin maleat. Kelarutan deksklorfeniramin maleat yaitu mudah larut dalam air, larut dalam etanol, dan dalam kloroform, sukar larut dalam benzena dan dalam eter (United State Pharmacopeia, 2007). Deksklorfeniramin merupakan senyawa yang bersifat dibasic amine. Sifat

  

dibasic ini disebabkan adanya nitrogen pada gugus alifatik amin tersier dan

  nitrogen piridin. Nitrogen pada gugus alifatik amin tersier memiliki kebasaan yang lebih kuat dibandingkan dengan nitrogen piridin. Oleh karena itu, gugus alifatik amin tersier akan memiliki kecenderungan lebih mudah terprotonasi untuk membentuk garam.(Wilson dkk., 1966).

  Berdasarkan struktur molekul, nitrogen pada cincin piridin deksklorfeniramin memiliki pasangan elektron bebas. Pasangan elektron bebas ini memiliki potensi untuk terprotonasi dan membentuk ion piridinium (Badger, 1961). Deksklorfeniramin maleat memiliki gugus kromofor berupa cincin piridin, cincin benzena, dan ikatan

• –C=C- yang mengandung elektron pi (π) terkonjugasi. Sinar pada panjang gelombang tertentu di daerah UV dapat diabsorbsi oleh elektron pi (π) terkonjugasi sehingga dapat memberikan nilai serapan (Fessenden, R.J., and Fessenden, J.S.,1982).

  

Gambar 2. Spektra Deksklorfeniramin maleat (Moffat, 2011)

  Deksklorfeniramin maleat merupakan antihistamin yang memiliki mekanisme kerja dengan memblokir reseptor H1. Ikatan deksklorfeniramin maleat dengan reseptor akan menyaingi histamin sebagai agen alergi, sehingga reaksi alergi dapat terhindarkan (Tjay dan Rahardja, 2002).

B. Deksametason

  

Gambar 3. Struktur deksametason

  Tablet Deksametason mengandung deksametason, C H FO , tidak

  23

  20

  5 kurang dari 90% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang tertera di etiket.

  Deksametason (gambar 3.) memiliki berat molekul 392,47 g/mol. Pemerian hablur putih sampai praktis putih, tidak berbau, stabil di udara, melebur pada suhu lebih

  o

  kurang 250 C disertai peruraian. Tabel II. menunjukkan karakteristik yang dimiliki deksametason. Deksametason memiliki kelarutan yaitu praktis tidak larut di dalam air; larut dalam etanol dengan perbandingan 1: 42 dan larut dalam kloroform dengan perbandingan 1 : 165, larut dalam aseton, larut dalam metanol dan eter (Moffat, 2011).

  

Tabel II. Sifat/ karakteristik yang dimiliki deksametason (Moffat, 2005)

  No. Sifat/Karakteristik Keterangan

  1 Titik didih 268 - 271° C

  2 Bobot molekul 392,5

  4 Log P 1,8 Berdasarkan struktur molekul, deksametason memiliki gugus kromofor pada gugus sikloheksadienon. Gambar 4. menunjukkan bahwa deksametason merupakan senyawa yang memiliki panjang gelombang maksimum 240 nm pada pelarut metanol (Moffat, 2011).

  

Gambar 4. Spektra Deksametason (Moffat, 2011)

  Deksametason merupakan obat antiradang golongan glukokortikoid (Hayes, 1991). Kerja obat antiradang glukokortikoid menghambat enzim fosfolipase A2 secara tidak langsung dengan menginduksi sintesis protein G/lipokortin G (Campbell, 1991).

C. Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 1. Tinjuan umum

  Kromatografi merupakan teknik yang digunakan untuk memisahkan suatu campuran. Teknik ini ditemukan oleh Tsweet. Pada tahun 1983, Ismailoff dan Schraiber mengembangkan teknik kromatografi lapisan tipis (KLT) yang disebut juga sebagai kromatografi kolom terbuka (Khopkar, 1990). Metode kromatografi merupakan metode yang digunakan untuk menentukan jenis komponen terpisah (analisis kualitatif) dan metode penentuan jumlah komponen-komponen tersebut (analisis kuantitatif) (Harjadi, 1986).

  Metode KLT memiliki kelebihan antara lain sederhana, pemisahannya cepat dan sensitif. Analisis kuantitatif KLT dilakukan dengan menggunakan KLT- densitometri (Khopkar, 1990). Proses pengembangan kromatogram terjadi ketika fase gerak melewati lokasi bercak dan fase diam (permukaan partikel-partikel/di dalam pori-pori partikel maupun terbagi ke dalam sejumlah cairan yang terikat di permukaan atau dalam pori). Sampel melintasi plat dengan bantuan aksi kapilaritas fase gerak (Dean, 1995).

  Mekanisme pemisahan yang terjadi pada kromatografi lapis tipis dengan fase diam silika adalah mekanisme adsorpsi. Mekanisme tersebut merupakan mekanisme pemisahan dengan penyerapan analit pada permukaan yang melibatkan interaksi-interaksi elektrostatik seperti ikatan hidrogen, penarikan dipol-dipol, dan penarikan yang diinduksi oleh dipol (Rohman, 2009). Jika digunakan fase diam yang bersifat polar, fase gerak yang polar akan diadsorbsi lebih kuat dibanding yang kurang polar. Hal ini berlaku sebaliknya pada fase diam non polar. Kompetisi terjadi antara substansi yang dianalisis dan fase gerak pada permukaan adsorben. Semakin polar substansi yang dikromatografi dibanding fase gerak, maka substansi akan semakin kuat diadsorbsi dibanding fase gerak. Hal sebaliknya, jika fase gerak lebih kuat diadsorbsi maka fase gerak akan menggantikan molekul yang dikromatografi sehingga dapat dielusi bersama fase gerak (Gasparic, 1978).

  Kecepatan migrasi solut melalui fase diam ditentukan oleh perbandingan distribusinya (D) dan besarnya D ditentukan afinitas relatif solut pada kedua fase.

  Nilai D adalah perbandingan konsentrasi solut dalam fase diam (Cs) dan dalam fase gerak (Cm). Semakin besar nilai D maka migrasi solut semakin lambat dan sebaliknya. Jika perbedaan perbandingan distribusi solut cukup besar maka campuran-campuran solut akan mudah dan cepat dipisahkan (Rohman, 2009).

2. Sistem KLT

a. Fase Diam