AKTIVITAS PENANGKAP RADIKAL BEBAS EKSTRAK ETIL ASETAT HERBA PURWOCENG (Pimpinella alpina Molk) DAN FRAKSINYA
AKTIVITAS PENANGKAP RADIKAL BEBAS EKSTRAK
ETIL ASETAT HERBA PURWOCENG (Pimpinella alpina Molk)
DAN FRAKSINYA
SKRIPSI
Untuk memenuhi sebagian persyaratan Mencapai Derajat Sarjana S-1
Diajukan Oleh
MALIHAH KUMALASARI
0908010081
Kepada
Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Purwokerto
Purwokerto
2013
i
AKTIVITAS PENANGKAP RADIKAL BEBAS EKSTRAK
ETIL ASETAT HERBA PURWOCENG (Pimpinella alpina Molk)
DAN FRAKSINYA
Skripsi
sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi
MALIHAH KUMALASARI
0908010081
Kepada
Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Purwokerto
Purwokerto
2013
ii
PERNYATAAN
Yang bertanda tangan di bawah ini, saya: Nama : Malihah Kumalasari NIM : 0908010081 Program Studi : Farmasi Fakultas/Universitas : Farmasi / Universitas Muhammadiyah Purwokerto
Menyatakan dengan sebenar-benarnya bahwa skripsi ini adalah hasil dari proses penelitian saya yang telah dilakukan sesuai dengan prosedur penelitian yang benar dengan arahan dari dosen pembimbing dan bukan hasil penjiplakan dari hasil karya orang lain atau terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan disuatu perguruan tinggi, dan sepanjang pengetahuan penulis juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan orang lain kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Demikian pernyataan ini, dan apabila kelak dikemudian hari terbukti ada unsur penjiplakan, maka saya bersedia mempertanggungjawabkan sesuai dengan ketentuan yang berlaku
Purwokerto, Juli 2013 Yang menyatakan,
MALIHAH KUMALASARI v
INTISARI MALIHAH KUMALASARI. Aktivitas Penangkap Radikal Bebas Ekstrak Etil Asetat Herba Purwoceng (Pimpinella alpina Molk) Dan Fraksinya.
Di Bimbingan oleh RETNO WAHYUNINGRUM dan WIRANTI SRI RAHAYU.
Latar Belakang : Flavonoid, tanin, dan polifenol merupakan beberapa senyawa
yang berpotensi sebagai penangkap radikal bebas, karena ketiganya merupakan senyawa fenol dan senyawa-senyawa tersebut terstabilkan secara resonansi sehingga tidak reaktif. Purwoceng (Pimpinella alpina Molk) telah dilaporkan mengandung steroid, alkaloid, flavonoid, glikosida, saponin, tanin, dan fenolik. Berdasarkan kandungan metabolik sekunder dalam purwoceng, maka perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui potensi daya penangkap radikal bebas ekstrak etil asetat herba purwoceng dan fraksinya.
Tujuan Penelitian : Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui aktivitas
penangkap radikal bebas secara in vitro menggunakan radikal DPPH (1,1 diphenyl-2-picryl-hydrazil) dan radikal NO• (Oksida Nitrit).
Metode Penelitian : Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi, fraksinasi
dilakukan dengan kromatografi kolom, uji penangkap radikal bebas dilakukan menggunakan radikal DPPH dan radikal NO•.
Hasil : Hasil penelitian menunjukkan bahwa nilai IC 40 untuk ekstrak etil asetat
herba purwoceng dan fraksinya (F3, F4, F5, F6, F10 dan Fgab) menggunakan radikal DPPH berurutan 42,54 ppm, 126,85 ppm, 96,29 ppm, 34,69 ppm, 12,78 ppm, 75,31 ppm, 30,73 ppm, BHT 4,68 ppm dan Quercetin 0,71 ppm. Sedangkan hasil IC menggunakan radikal Oksida Nitrit secara berurutan untuk ekstrak etil
40
asetat herba purwoceng dan fraksinya (F3, F4, F5, F6, F10 dan Fgab) adalah 34,81 ppm, 55,84 ppm, 49,42 ppm, 13,52 ppm, 7,33 ppm, 23,34 ppm, 14,50 ppm, BHT 2,22 ppm, Quercetin 0,80 ppm.
Kesimpulan : Daya penangkapan radikal bebas ekstrak etil asetat herba purwoceng dan fraksinya lebih lemah daripada BHT dan Quercetin. Kata Kunci : Purwoceng, DPPH, Oksida Nitrit.
vi
ABSTRACT MALIHAH KUMALASARI. Free Radicals Scavenger Activity of Ethyl Acetate Extract of Purwoceng Herbs (Pimpinella alpina Molk) and its fractions.
Supervised by RETNO WAHYUNINGRUM and WIRANTI SRI RAHAYU.
Background : Flavonoids, tannins and polyphenols are some compounds the
potential as free radicals scavenger, because they are phenol compounds and it’s stable of resonansi so, it’s unreactive. Purwoceng (Pimpinella alpina Molk) have reported contain steroid, flavonoids, glikoside, saponin, tannins, and phenolic Based on secondary methabolic compounds of purwoceng Herbs, so research need be done to know the power potential free radicals scavenger ethyl acetate extract of herbs purwoceng and its fractions.
Research objectives : The goal of this research are to know the free radicals
scavenger activity of in vitro using DPPH (1,1 diphenyl-2-picryl-hydrazil) radicals and NO• (Nitric Oxide) radicals.
Research methods : The extraction are done by maceration method, fractionation
is performed with column chromatography, free radicals scavenger test performed using DPPH radicals and NO • radicals.
Results : The results showed that the IC 40 values of ethyl acetate extract of
purwoceng herbs and its fractions (F3, F4, F5, F6, F10 and Fgab) using DPPH radicals are 42,54 ppm, 126,85 ppm, 96,29 ppm, 34,69 ppm, 12,78 ppm, 75,31 ppm, 30,73 ppm, BHT 4,68 ppm and Quercetin 0,71 ppm, respectively. Whereas the IC using Nitric Oxide radicals for ethyl acetate extract of purwoceng herbs
40
and its fractions (F3, F4, F5, F6, F10 and Fgab) are 34,81 ppm, 55,84 ppm, 49,42 ppm, 13,52 ppm, 7,33 ppm, 23,34 ppm, 14,50 ppm, BHT 2,22 ppm, Quercetin 0,80 ppm respectively.
Conclusion : The power of free radicals scavenging of ethyl acetate extract herbs purwoceng and its fractions lower than BHT and Quercetin. Key words : Purwoceng, DPPH, nitric oxide.
vii
PERSEMBAHAN
Dengan segala rasa syukur kehadirat ALLAH SWT atas rahmat, nikmat, hidayah dan inayah-Nya, maka: Kupersembahkan skripsi ini untuk :
Ibunda dan ayahanda tersayang yang tak pernah berhenti mencurahkan kasih sayang, doa dan selalu memberikan nasihat dan semangat setiap harinya, tanpa batas yang dan tak mungkin akan terbalaskan. Saudara-saudaraku (yayu siti,kang Yadi,yayu Asih dan yayu Uti) serta semua ponakanku tercinta khususnya Ayu,Bagus,indung dan Rahma terima kasih atas segala dukungannya dan doa,you are my inspiration. Sobatku “TIRTA MUTIARA”:Easty, Dian, Ibah, Yuni,Desi,Depi, dan semuanya yg tak bisa ku sebutkan satu-satu terima kasih atas keceriaan yang kalian berikan. Terima kasih khususnya pada teman seperjuangan : Ayu septia,Balqis,Maretha,Agung,yang selama ini telah setia mendengar keluh kesalku sehingga skripsi ini tersusun.serta semua teman ASSASAINS dan FKK angkatan 2009 yang tak bisa aku sebutkan namanya satu persatu, terima kasih atas supportnya. viii
PRA KATA
Alhamdulillah, segala puji bagi Allah SWT yang telah memberikan rahmat, anugerah, serta hidayahnya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi. Skripsi ini disusun guna memenuhi persyaratan untuk mencapai derajat Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
Dalam kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada Ibu Retno Wahyuningrum, M.Si., Apt dan Wiranti Sri Rahayu, M.Si., Apt yang telah berkenan membimbing dan mengarahkan penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.
Ucapan terima kasih dan penghargaan juga penulis sampaikan kepada :
1. Bapak Drs. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H., M.H selaku Rektor Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
2. Dr. Nunuk Aries Nurulita., M.Si., Apt sebagai dekan dari Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
3. Semua dosen dan karyawan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto yang telah memberikan bekal bagi kehidupan.
4. Teman-teman ASSASAINS dan FKK yang saling berbagi ilmu yang didapatkan.
5. Semua pihak yang telah mambantu penulis dalam menulis skripsi ini.
Besar harapan penulis, penulisan skripsi ini dapat bermanfaat. Penulis sadar sepenuhnya bahwa skripsi ini masih terdapat kesalahan, untuk itu diperlukan saran dan kritik dari semua pihak untuk kesempurnaan skripsi ini. Semoga skripsi ini dapat berguna untuk setiap orang yang membacanya. Amin.
Purwokerto, Juli 2013 Penulis ix
RIWAYAT HIDUP Nama : Malihah Kumalasari NIM / Angkatan : 0908010081 / 2009 Tempat / Tanggal Lahir : Kebumen, 18 Juli 1991 Agama : Islam Nama Orang tua : Tachjat Muksodah Alamat : Redisari, RT 05 / 05 Kecamatan Rowokele, Kabupaten Kebumen, Provinsi Jawa Tengah Riwayat Pendidikan :
1. Perguruan Tinggi : Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto ( Angkatan 2009)
2. SMA / Tahun Lulus : SMAN 1 Rowokele / 2009
3. SMP / Tahun Lulus : MTsN 1 Rowokele / 2006
4. SD / Tahun Lulus : MWI Purwosari / 2003
5. TK / Tahun Lulus : RA Nurul Jannah Purwosari / 1997
Organisasi :1. BEM (Badan Ekslusif Mahasiswa)
2. DEMA ( Dewan Mahasiswa ) Prestasi :
1. Juara III PKM penelitian se Universitas Muhammadiyah Purwokerto
x
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ...................................................................................... ii HALAMAN PERSETUJUAN ...................................................................... iii HALAMAN PENGESAHAN........................................................................ iv HALAMAN PERNYATAAN........................................................................ v
INTISARI ....................................................................................................... vi ABSTRACT ..................................................................................................... vii HALAMAN PERSEMBAHAN .................................................................... viii PRAKATA ...................................................................................................... ix RIWAYAT HIDUP ........................................................................................ x DAFTAR ISI................................................................................................... xi
xiii DAFTAR GAMBAR ......................................................................................
DAFTAR TABEL .......................................................................................... xiv DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xv
BAB I PENDAHULUAN............................................................................ 1 A. Latar Belakang Permasalahan ..................................................... 1 B. Perumusan Masalah .................................................................... 2 C. Tujuan Penelitian ........................................................................ 2 D. Manfaat Penelitian ...................................................................... 3 BAB II TINJAUAN PUSTAKA .................................................................. 4 A. Radikal Bebas.............................................................................. 4 B. Uji Aktivitas Radikal DPPH (1,1 diphenyl-2-picryl-hydrazil) ... 6
- C. Uji Aktivitas Radikal Oksida Nitrit (NO ).................................. 8
D. Kromatografi kolom ................................................................. 8
E. Purwoceng (Pimpinella alpina Molk) ........................................ 9
BAB III METODE PENELITIAN ............................................................... 11 A. Jenis dan Rancangan penelitian ................................................. 11 B. Variabel Penelitian...................................................................... 11 C. Definisi Variabel Operasional .................................................... 11
xi
D. Waktu dan Tempat Penelitian..................................................... 12
E. Bahan dan Alat............................................................................ 12
F. Cara Penelitian ............................................................................ 13
1. Perlakuan Herba Purwoceng (Pimpinella alpina Molk)........ 13
2. Uji Penangkap Radikal DPPH ............................................... 14
3. Uji Penangkap Radikal Oksida Nitrit .................................... 16
G. Analisis Data............................................................................... 18
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ....................................................... 19 A. Determinasi Tanaman ................................................................. 19 B. Perlakuan Herba Purwoceng....................................................... 19 C. Uji Penangkap Radikal DPPH .................................................... 22 D. Uji Penangkap Radikal Oksida Nitrit ......................................... 27 E. Perbandingan Penentuan Aktivitas Penangkap Radikal DPPH dan Radikal Oksida Nitrit................................... 31 BAB V KESIMPULAN ................................................................................. 33 A. Kesimpulan ................................................................................. 33 B. Saran ........................................................................................... 33 DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... 34 LAMPIRAN .................................................................................................. 37
xii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1 Terminasi Senyawa Antiradikal dengan Radikal ....................... 5 Gambar 2 Struktur DPPH............................................................................ 7 Gambar 3 Donasi Elektron atau Radikal Hidrogen dari Antioksidan ke
Radikal DPPH ............................................................................ 7 Gambar 4 Reaksi Antara Ion Nitrit dengan Sulfanilamida di gabung dengan
Naphtylethylendiamine............................................................... 8
Gambar 5 Tanaman Purwoceng ................................................................. 10 Gambar 6 KLT dari Ekstrak Etil Asetat...................................................... 20 Gambar 7 KLT dari Fraksi hasil Kromatografi Kolom .............................. 21 Gambar 8 Scanning (λ maks) Laruta DPPH ............................................... 22 Gambar 9 Struktur Butyl hydroxytoluene.................................................... 24 Gambar 10 Struktur Quercetin...................................................................... 24 Gambar 11 Hasil IC
40 Ekstrak EA, fraksi 3,4,5,6,10, gab dan Kontrol Positif Menggunakan Radikal DPPH .........................................
25 Gambar 12 Scanning (λ maks) Larutan Sodium Nitroprusid ...................... 28 Gambar 13 Hasil IC
40 Ekstrak EA, fraksi 3,4,5,6,10 gab dan Kontrol
- Positif Menggunakan Radikal NO ............................................ 29
Gambar 14 Hasil IC
40 Ekstrak EA,Fraksi 3,4, 5, 6, 10, gab, dan Kontrol
Positif Menggunakan Radikal DPPH dan Radikal Oksida Nitrit ........................................................................................... 31 xiii
DAFTAR TABEL
Tabel 1 Hasil Pemeriksaan Organoleptik, Bobot, dan Rendemen Ekstrak PE, EA, Etanol ................................................................... 20
Tabel 2 Nilai IC
40 Ekstrak Etil Asetat Herba purwoceng dan fraksinya
serta Kontrol Positif Menggunakan Radikal DPPH ........................ 25 Tabel 3 Nilai IC Ekstrak Etil Asetat Herba purwoceng dan fraksinya
40
- serta Kontrol Positif Menggunakan Radikal NO ........................... 29
xiv