Uji Aktivitas Hepatoprotektor Ekstrak Etanol Kulit Bawang Merah (Allium cepa L. Corium) terhadap Mencit Jantan yang Diinduksi Parasetamol
UJI AKTIVITAS HEPATOPROTEKTOR EKSTRAK ETANOL
KULIT BAWANG MERAH (Allium cepa L. Corium)
TERHADAP MENCIT JANTAN YANG DIINDUKSI
PARASETAMOL
SKRIPSI
OLEH:
JANET BARDOS H.
NIM 111501087
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
Universitas Sumatera Utara
UJI AKTIVITAS HEPATOPROTEKTOR EKSTRAK ETANOL
KULIT BAWANG MERAH (Allium cepa L. Corium)
TERHADAP MENCIT JANTAN YANG DIINDUKSI
PARASETAMOL
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
JANET BARDOS H.
NIM 111501087
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
Universitas Sumatera Utara
PENGESAHAN SKRIPSI
UJI AKTIVITAS HEPATOPROTEKTOR EKSTRAK ETANOL
KULIT BAWANG MERAH (Allium cepa L. Corium)
TERHADAP MENCIT JANTAN YANG DIINDUKSI
PARASETAMOL
OLEH:
JANET BARDOS H.
NIM 111501087
Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 13 Mei 2016
Disetujui Oleh:
Pembimbing I,
Panitia Penguji,
Aminah Dalimunthe, S.Si., M.Si., Apt.
NIP 197806032005012004
Dr. Edy Suwarso, S.U., Apt.
NIP 195209271981031007
Pembimbing II,
Aminah Dalimunthe, S.Si., M.Si., Apt.
NIP 197806032005012004
Prof. Dr. Urip Harahap, Apt.
NIP 195301011983031004
Dr. Poppy Anjelisa Z. Hsb, S.Si., M.Si., Apt.
NIP 197506102005012003
Hari Ronaldo Tanjung, S.Si., M.Sc., Apt.
NIP 195109081985031002
Medan, 23 Juli 2016
Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
Dekan,
Dr. Masfria, M.S., Apt
NIP 195707231986012001
Universitas Sumatera Utara
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis ucapkan kepada Tuhan Yang Maha Esa yang telah
memberikan karunia yang berlimpah sehingga penulis dapat menyelesaikan
skripsi ini dengan judul “Uji Aktivitas Hepatoprotektor Ekstrak Etanol Kulit
Bawang Merah (Allium cepa L. Corium) terhadap Mencit Jantan yang Diinduksi
Parasetamol”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh
gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan
terima kasih kepada Ibu Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi
USU Medan, Ibu Dr. Poppy Anjelisa Z. Hsb, S.Si., M.Si., Apt., selaku Pembantu
Dekan I Fakultas Farmasi USU Medan serta jajarannya, yang telah menyediakan
fasilitas kepada penulis selama perkuliahan di Fakultas Farmasi. Penulis juga
mengucapkan terima kasih kepada Ibu Aminah Dalimunthe, S.Si., M.Si., Apt.,
dan Bapak
Prof. Dr. Urip Harahap, Apt., yang telah membimbing dan
memberikan petunjuk serta saran-saran selama penelitian hingga selesainya
skripsi ini. Bapak Dr. Edy Suwarso, S.U., Apt., Ibu Dr. Poppy Anjelisa Z. Hsb,
S.Si., M.Si., Apt., dan Bapak Hari Ronaldo Tanjung, S.Si., M.Sc., Apt., selaku
dosen penguji yang telah memberikan kritik, saran dan arahan kepada penulis
dalam menyempurnakan skripsi ini. Ibu Dra. Juanita Tanuwijaya M.Si., Apt.,
selaku penasehat akademik yang selalu memberikan bimbingan kepada penulis
selama masa perkuliahan serta Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU
Medan yang telah mendidik selama perkuliahan.
iv
Universitas Sumatera Utara
Penulis juga mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada
Ayahanda Tangkahan H., dan Ibunda Sarintan Kurnia P., dan kakak serta adikku,
yang telah memberikan kasih sayang, perhatian, dan semangat yang tak terhingga
kepada penulis, dan senior yang membimbingku Bang Denny Satria, Bang Yosua
Maranatha Sihotang dan Kak Loura, serta sahabat-sahabatku Kak Grace, Kak
Astri, Agnes, Amel, Maria Atrina, Novri, Margareth, Naomi, Maria Triana,
Sandeep, Sandhy, Andin, Dewi Novita Sari dan seluruh teman-teman Farmasi
Klinis 2011, terima kasih untuk perhatian, semangat, doa, dan kebersamaannya
selama ini.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam penulisan skripsi ini masih
jauh dari kesempurnaan, oleh karena itu dengan segala kerendahan hati, penulis
menerima kritik dan saran demi kesempurnaan skripsi ini. Akhirnya, penulis
berharap semoga skripsi ini dapat memberi manfaat bagi kita semua.
Medan,
Penulis
Juli 2016
Janet Bardos H.
NIM 111501087
v
Universitas Sumatera Utara
SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT
Saya yang bertanda tangan dibawah ini:
Nama
: Janet Bardos H.
Nomor Induk Mahasiswa
: 111501087
Program Studi
: S-1 Reguler
Judul Skripsi
: Uji Aktivitas Hepatoprotektor Ekstrak Etanol
Kulit Bawang Merah (Allium cepa L. Corium)
Terhadap Mencit Jantan yang Diinduksi
Parasetamol
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dan hasil
pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah diajukan orang lain untuk
memperoleh gelar kesarjanaan di perguruan tinggi lain, dan bukan plagiat karena
kutipan yang ditulis setelah disebutkan sumbernya di dalam daftar pustaka.
Apabila di kemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena di dalam skripsi
ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia
menerima sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara, dan bukan menjadi tanggung jawab pembimbing.
Demikian surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk dapat
digunakan jika diperlukan sebagai mana mestinya.
Medan,
Juli 2016
Yang Membuat Pernyataan
Janet Bardos H.
NIM 111501087
vi
Universitas Sumatera Utara
UJI AKTIVITAS HEPATOPROTEKTOR EKSTRAK ETANOL KULIT
BAWANG MERAH (Allium cepa L. Corium) TERHADAP MENCIT
JANTAN YANG DIINDUKSI PARASETAMOL
ABSTRAK
Hati merupakan organ detoksifikasi dan pusat metabolisme yang utama di
dalam tubuh manusia. Pemberian parasetamol dosis tinggi akan melepaskan
radikal bebas dan metabolit reaktif N-acetyl-para-benzoquinoneimine (NAPQI)
yang dapat merusak hati. Oleh sebab itu, diperlukan senyawa antioksidan dari luar
tubuh yang dapat menghambat pembentukan metabolit NAPQI tersebut. Salah
satu tumbuhan yang berpotensi melindungi hati adalah bawang merah (Allium
cepa L.). Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui aktivitas hepatoprotektor
ekstrak etanol kulit bawang merah (EEKBM) dengan mengukur alanin
aminotransferase (ALT), aspartat aminotransferase (AST) dan gambaran
histopatologi organ hati.
Pada penelitian ini dilakukan uji aktivitas EEKBM terhadap mencit jantan
yang diinduksi parasetamol. Perlakuan dibagi enam kelompok masing-masing
dengan jumlah mencit sebanyak 4 ekor. EEKBM dosis 300, 450, dan 600 mg/kg
bb, kontrol positif (rutin 20 mg/kg bb) dan kontrol negatif (Na CMC 0,5%)
diberikan per oral selama 14 hari dan diikuti pemberian parasetamol dosis 1 g/kg
bb 6 jam setelah pemberian EEKBM pada hari ke-14. Pengambilan darah untuk
pengukuran ALT dan AST dan pengambilan organ hati untuk pemeriksaan
makroskopik dan mikroskopik dilakukan setelah mencit didislokasi di leher 24
jam setelah pemberian parasetamol. Kelompok yang tidak mendapat perlakuan
digunakan sebagai pembanding.
Berdasarkan hasil pengujian, pemberian parasetamol
menyebabkan
kerusakan hati ditandai dengan peningkatan ALT dan AST serta gambaran
kerusakan hasil histopatologi. Berdasarkan hasil analisis statisik, pemberian
EEKBM dosis 300, 450, dan 600 mg/kg bb mampu menghambat peningkatan
AST, ALT dan berbeda signifikan dengan kontrol negatif (p < 0,05) yang juga
menunjukkan perbaikan gambaran histopatologi sel hati. Dapat disimpulkan
bahwa EEKBM dosis 600mg/kg bb menunjukkan aktivitas hepatoprotektor
terbaik dengan ALT 313,70 IU/L dan AST 472,95 IU/L dengan perbedaan yang
tidak signifikan terhadap normal (p > 0,05).
Kata kunci : hepatoprotektor, kulit bawang merah (Allium cepa L. Corium)
vii
Universitas Sumatera Utara
HEPATOPROTECTOR ACTIVITY OF ENDOSPERM LAYER OF
ONION SKIN ETHANOL EXTRACT (Allium cepa L. Corium) AGAINST
PARACETAMOL-INDUCED LIVER INJURY IN MALE MICE
ABSTRACT
Liver is an organ of major centers for detoxification and metabolism in the
human body. Administration of high doses of paracetamol will enhance formation
of N-acetyl-para-benzoquinoneimine (NAPQI) metabollite and damage the liver.
Therefore, the essential antioxidant compounds is one of some treatments needed
to help inhibit NAPQI formation. One of the plants that has potential activity is
onion (Allium cepa L.). This research was aimed to determine hepatoprotective
activity of outer layer of onion skin ethanol extract (EEKBM) on alanine
transferase (ALT) and aspartate transferase (AST) and liver histopathology.
Hepatoprotector activity test of EEKBM in male mice was performed.
Treatment was divided into 6 groups of 4 mice each. EEKBM at doses of 300,
450 and 600 mg/kg bw, positive control (rutin 20 mg/kg bw) and negative control
(CMC Na 0.5%) were given orally for 14 days and 1 g/kg bw of paracetamol was
given 6 hours following the last of extract administration in 14th day. Thereafter
blood drawing for ALT and AST assays and liver removing for macroscopic and
microscopic observation were perfomed from dislocated mice 24 hours after
paracetamol administration. Normal group was used for comparation.
According to the results, administration of paracetamol causes liver
damage determined by increase of ALT and AST as well as liver microscopic
observation. EEKBM administration at doses of 300, 450 and 600 mg/kg bw
were able to inhibit the increase of AST, ALT and significantly were different
with negative control (p < 0.05), in addition were showed by better results of
microscopic observation. The conclusion has been achieved that EEKBM at
doses of 600 mg/kg bw showed most hepatoprotective activity with ALT 313.70
IU/L and AST 472.95 IU/L and non significantly were different with normal
(p > 0.05).
Key words : hepatoprotector, onion skin (Allium cepa L. Corium.)
.
viii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL .......................................................................................................
i
HALAMAN PENGESAHAN ....................................................................
iii
KATA PENGANTAR ...............................................................................
iv
SURAT PERNYATAAN ...........................................................................
vi
ABSTRAK .................................................................................................
vii
ABSTRACT ...............................................................................................
viii
DAFTAR ISI ..............................................................................................
ix
DAFTAR TABEL ......................................................................................
xiv
DAFTAR GAMBAR .................................................................................
xv
DAFTAR LAMPIRAN ..............................................................................
xvi
BAB I PENDAHULUAN ..........................................................................
1
1.1 Latar Belakang .........................................................................
1
1.2 Perumusan Masalah ..................................................................
4
1.3 Hipotesis ...................................................................................
4
1.4 Tujuan Penelitian ......................................................................
5
1.5 Manfaat Penelitian ....................................................................
5
1.6 Kerangka Pikir Penelitian .........................................................
5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ................................................................
7
2.1 Uraian Tumbuhan .....................................................................
7
2.1.1 Sistematika Tumbuhan ...................................................
7
2.1.2 Nama Daerah ..................................................................
7
2.1.3 Sejarah, habitat dan penyebaran .....................................
7
ix
Universitas Sumatera Utara
2.1.4 Morfologi tumbuhan ......................................................
8
2.1.5 Khasiat ............................................................................
9
2.2 Parasetamol ..............................................................................
10
2.2.1 Uraian kimia ...................................................................
10
2.2.2 Farmakokinetik ...............................................................
10
2.2.3 Farmakodinamik .............................................................
11
2.3 Kuersetin ..................................................................................
11
2.4 Rutin .........................................................................................
14
2.5 Hati ...........................................................................................
15
2.5.1 Anatomi hati ...................................................................
15
2.5.2 Fungsi hati ......................................................................
18
2.5.3 Hepatotoksisitas .............................................................
18
2.5.4 Mekanisme hepatotoksisitas yang diinduksi parasetamol
19
2.5.5 Mekanisme hepatotoksisitas yang diinduksi oleh karbon
tetraklorida .....................................................................
22
2.5.6 Biomarker hepatotoksisitas ............................................
23
BAB III METODE PENELITIAN .............................................................
27
3.1 Alat-alat ....................................................................................
27
3.2 Bahan-bahan .............................................................................
28
3.3 Hewan Percobaan .....................................................................
28
3.4 Pengumpulan dan Pembuatan Simplisia Kulit Bawang Merah
28
3.4.1 Pengumpulan kulit bawang merah ..................................
28
3.4.2 Identifikasi bawang merah ...............................................
29
3.4.3 Pembuatan simplisia ........................................................
29
3.5 Pembuatan Pereaksi ..................................................................
29
x
Universitas Sumatera Utara
3.5.1 Pereaksi Mayer ...............................................................
29
3.5.2 Pereaksi Dragendorff ......................................................
29
3.5.3 Pereaksi Bouchardat .......................................................
30
3.5.4 Pereaksi asam klorida 2 N ..............................................
30
3.5.6 Pereaksi Molish ..............................................................
30
3.5.5 Pereaksi Liebermann-Burchard ......................................
30
3.5.6 Pereaksi Molish ..............................................................
30
3.5.7 Larutan air kloroform .....................................................
30
3.5.8 Larutan kloral hidrat .......................................................
30
3.5.9 Pereaksi timbal (II) asetat 0,4 N .....................................
30
3.6 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia ........................................
31
3.6.1 Pemeriksaan makroskopik ..............................................
31
3.6.2 Pemeriksaan mikroskopik ..............................................
31
3.6.3 Penetapan kadar air ........................................................
31
3.6.4 Penetapan kadar sari larut air .........................................
32
3.6.5 Penetapan kadar sari larut etanol ....................................
32
3.6.6 Penetapan kadar abu total ...............................................
32
3.6.7 Penetapan kadar abu tidak larut asam ............................
33
3.7 Skrining Fitokimia ....................................................................
33
3.7.1 Pemeriksaan alkaloida ....................................................
33
3.7.2 Pemeriksaan flavonoida .................................................
34
3.7.3 Pemeriksaan saponin ......................................................
34
3.7.4 Pemeriksaan glikosida ....................................................
35
3.7.5 Pemeriksaan tanin ..........................................................
35
xi
Universitas Sumatera Utara
3.7.6 Penetapan steroida/triterpenoida ....................................
35
3.8 Pembuatan Ekstrak Etanol Kulit Bawang Merah .....................
36
3.9 Pemeriksaan Karakterisasi Ekstrak ..........................................
36
3.10 Skrining Fitokimia Ekstrak ....................................................
36
3.11 Uji Aktivitas Hepatoprotektor ................................................
37
3.11.1 Pembuatan suspensi Na CMC 0,5% .............................
37
3.11.2 Pembuatan suspensi EEKBM ......................................
37
3.11.3 Pembuatan suspensi parasetamol .................................
37
3.11.4 Pembuatan suspensi rutin .............................................
37
3.11.5 Pembuatan larutan buffer formalin 10% ......................
38
3.11.6 Pengujian ke hewan uji ................................................
38
3.11.7 Pengukuran parameter biokimia ALT dan AST ..........
39
3.11.8 Pemeriksaan kerusakan organ hati mencit ...................
40
3.11.8.1 Pemeriksaan makroskopik ............................
40
3.11.8.2Pembuatan preparat histologi organ hati
processing)
dan
pemeriksaan
mikroskopik ................................................
40
3.11.9 Analisis data .................................................................
42
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ...................................................
43
4.1 Karakterisasi Simplisia dan Ekstrak Kulit Bawang Merah ......
43
4.1.1Pemeriksaan makroskopik dan karakteristik simplisia
dan ekstrak ...............................................................................
43
4.1.2 Skrining fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak ...........
45
4.2 Hasil Uji Aktivitas Hepatoprotektor ........................................
46
4.2.1 Hasil pengukuran ALT dan AST ..................................
46
4.2.2 Gambaran kerusakan organ hepar .................................
49
(tissue
xii
Universitas Sumatera Utara
4.2.2.1 Gambaran makroskopik organ hati ....................
49
4.2.2.2 Gambaran mikroskopik organ hati ....................
50
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .....................................................
58
5.1 Kesimpulan ...............................................................................
58
5.2 Saran .........................................................................................
58
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................
59
LAMPIRAN ...............................................................................................
63
xiii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
4.1 Hasil karakterisasi serbuk simplisia dan EEKBM ............................
42
4.2 Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia dan EEKBM ..................
44
4.3 ALT dan AST mencit dengan perbedaan perlakuan di setiap
kelompok (Mean ± SE) hasil analisis secara statistik SPSS metode
One Way ANOVA .......................................................................................
45
4.4 Evaluasi histopatologi hati mencit akibat induksi parasetamol pada
tiap kelompok perlakuan ............................................................................
54
xiv
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
1.1 Kerangka pikir penelitian ...................................................................
6
2.1 Struktur Kuersetin .............................................................................
12
2.2 Skema jalur metabolisme parasetamol ..............................................
20
4.1 Grafik ALT mencit jantan ..................................................................
26
4.2 Grafik AST mencit jantan ...................................................................
26
4.3 Pemeriksaan makroskopik organ hati mencit jantan ..........................
29
4.4 Histopatologi jaringan hati mencit perbesaran 10 x 10 .....................
50
4.5 Histopatologi jaringan hati mencit perbesaran 10 x 40 .....................
51
xv
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1 Hasil identifikasi sampel penelitian ...................................................
62
2 Gambar simplisia kulit bawang merah ................................................
63
3 Gambar serbuk simplisia kulit bawang merah ....................................
64
4 Bagan alur penelitian ..........................................................................
65
5Gambar mikroskopik serbuk simplisia kulit bawang merah pada
perbesaran 10 x 40 .....................................................................................
67
6 Perhitungan karakterisasi simplisia kulit bawang merah dan EEKBM
68
7 Rekomendasi persetujuan etik penelitian kesehatan ..........................
73
8 Gambar mencit jantan dan proses pengambilan darahdarijantung
dan organ hati mencit jantan .......................................................................
74
9 Volume maksimum sesuai jalur pemberian dan konversi dosis .........
75
10 Perhitungan dosis .............................................................................
76
11 Hasil pemeriksaan ALT dan AST ....................................................
78
12 Data analisis ALT secara statistik SPSS One WayANOVA ..............
79
13 Data analisis AST secara statistik SPSS One WayANOVA ...............
83
xvi
Universitas Sumatera Utara
KULIT BAWANG MERAH (Allium cepa L. Corium)
TERHADAP MENCIT JANTAN YANG DIINDUKSI
PARASETAMOL
SKRIPSI
OLEH:
JANET BARDOS H.
NIM 111501087
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
Universitas Sumatera Utara
UJI AKTIVITAS HEPATOPROTEKTOR EKSTRAK ETANOL
KULIT BAWANG MERAH (Allium cepa L. Corium)
TERHADAP MENCIT JANTAN YANG DIINDUKSI
PARASETAMOL
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
JANET BARDOS H.
NIM 111501087
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
Universitas Sumatera Utara
PENGESAHAN SKRIPSI
UJI AKTIVITAS HEPATOPROTEKTOR EKSTRAK ETANOL
KULIT BAWANG MERAH (Allium cepa L. Corium)
TERHADAP MENCIT JANTAN YANG DIINDUKSI
PARASETAMOL
OLEH:
JANET BARDOS H.
NIM 111501087
Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 13 Mei 2016
Disetujui Oleh:
Pembimbing I,
Panitia Penguji,
Aminah Dalimunthe, S.Si., M.Si., Apt.
NIP 197806032005012004
Dr. Edy Suwarso, S.U., Apt.
NIP 195209271981031007
Pembimbing II,
Aminah Dalimunthe, S.Si., M.Si., Apt.
NIP 197806032005012004
Prof. Dr. Urip Harahap, Apt.
NIP 195301011983031004
Dr. Poppy Anjelisa Z. Hsb, S.Si., M.Si., Apt.
NIP 197506102005012003
Hari Ronaldo Tanjung, S.Si., M.Sc., Apt.
NIP 195109081985031002
Medan, 23 Juli 2016
Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
Dekan,
Dr. Masfria, M.S., Apt
NIP 195707231986012001
Universitas Sumatera Utara
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis ucapkan kepada Tuhan Yang Maha Esa yang telah
memberikan karunia yang berlimpah sehingga penulis dapat menyelesaikan
skripsi ini dengan judul “Uji Aktivitas Hepatoprotektor Ekstrak Etanol Kulit
Bawang Merah (Allium cepa L. Corium) terhadap Mencit Jantan yang Diinduksi
Parasetamol”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh
gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan
terima kasih kepada Ibu Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi
USU Medan, Ibu Dr. Poppy Anjelisa Z. Hsb, S.Si., M.Si., Apt., selaku Pembantu
Dekan I Fakultas Farmasi USU Medan serta jajarannya, yang telah menyediakan
fasilitas kepada penulis selama perkuliahan di Fakultas Farmasi. Penulis juga
mengucapkan terima kasih kepada Ibu Aminah Dalimunthe, S.Si., M.Si., Apt.,
dan Bapak
Prof. Dr. Urip Harahap, Apt., yang telah membimbing dan
memberikan petunjuk serta saran-saran selama penelitian hingga selesainya
skripsi ini. Bapak Dr. Edy Suwarso, S.U., Apt., Ibu Dr. Poppy Anjelisa Z. Hsb,
S.Si., M.Si., Apt., dan Bapak Hari Ronaldo Tanjung, S.Si., M.Sc., Apt., selaku
dosen penguji yang telah memberikan kritik, saran dan arahan kepada penulis
dalam menyempurnakan skripsi ini. Ibu Dra. Juanita Tanuwijaya M.Si., Apt.,
selaku penasehat akademik yang selalu memberikan bimbingan kepada penulis
selama masa perkuliahan serta Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU
Medan yang telah mendidik selama perkuliahan.
iv
Universitas Sumatera Utara
Penulis juga mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada
Ayahanda Tangkahan H., dan Ibunda Sarintan Kurnia P., dan kakak serta adikku,
yang telah memberikan kasih sayang, perhatian, dan semangat yang tak terhingga
kepada penulis, dan senior yang membimbingku Bang Denny Satria, Bang Yosua
Maranatha Sihotang dan Kak Loura, serta sahabat-sahabatku Kak Grace, Kak
Astri, Agnes, Amel, Maria Atrina, Novri, Margareth, Naomi, Maria Triana,
Sandeep, Sandhy, Andin, Dewi Novita Sari dan seluruh teman-teman Farmasi
Klinis 2011, terima kasih untuk perhatian, semangat, doa, dan kebersamaannya
selama ini.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam penulisan skripsi ini masih
jauh dari kesempurnaan, oleh karena itu dengan segala kerendahan hati, penulis
menerima kritik dan saran demi kesempurnaan skripsi ini. Akhirnya, penulis
berharap semoga skripsi ini dapat memberi manfaat bagi kita semua.
Medan,
Penulis
Juli 2016
Janet Bardos H.
NIM 111501087
v
Universitas Sumatera Utara
SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT
Saya yang bertanda tangan dibawah ini:
Nama
: Janet Bardos H.
Nomor Induk Mahasiswa
: 111501087
Program Studi
: S-1 Reguler
Judul Skripsi
: Uji Aktivitas Hepatoprotektor Ekstrak Etanol
Kulit Bawang Merah (Allium cepa L. Corium)
Terhadap Mencit Jantan yang Diinduksi
Parasetamol
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dan hasil
pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah diajukan orang lain untuk
memperoleh gelar kesarjanaan di perguruan tinggi lain, dan bukan plagiat karena
kutipan yang ditulis setelah disebutkan sumbernya di dalam daftar pustaka.
Apabila di kemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena di dalam skripsi
ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia
menerima sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara, dan bukan menjadi tanggung jawab pembimbing.
Demikian surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk dapat
digunakan jika diperlukan sebagai mana mestinya.
Medan,
Juli 2016
Yang Membuat Pernyataan
Janet Bardos H.
NIM 111501087
vi
Universitas Sumatera Utara
UJI AKTIVITAS HEPATOPROTEKTOR EKSTRAK ETANOL KULIT
BAWANG MERAH (Allium cepa L. Corium) TERHADAP MENCIT
JANTAN YANG DIINDUKSI PARASETAMOL
ABSTRAK
Hati merupakan organ detoksifikasi dan pusat metabolisme yang utama di
dalam tubuh manusia. Pemberian parasetamol dosis tinggi akan melepaskan
radikal bebas dan metabolit reaktif N-acetyl-para-benzoquinoneimine (NAPQI)
yang dapat merusak hati. Oleh sebab itu, diperlukan senyawa antioksidan dari luar
tubuh yang dapat menghambat pembentukan metabolit NAPQI tersebut. Salah
satu tumbuhan yang berpotensi melindungi hati adalah bawang merah (Allium
cepa L.). Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui aktivitas hepatoprotektor
ekstrak etanol kulit bawang merah (EEKBM) dengan mengukur alanin
aminotransferase (ALT), aspartat aminotransferase (AST) dan gambaran
histopatologi organ hati.
Pada penelitian ini dilakukan uji aktivitas EEKBM terhadap mencit jantan
yang diinduksi parasetamol. Perlakuan dibagi enam kelompok masing-masing
dengan jumlah mencit sebanyak 4 ekor. EEKBM dosis 300, 450, dan 600 mg/kg
bb, kontrol positif (rutin 20 mg/kg bb) dan kontrol negatif (Na CMC 0,5%)
diberikan per oral selama 14 hari dan diikuti pemberian parasetamol dosis 1 g/kg
bb 6 jam setelah pemberian EEKBM pada hari ke-14. Pengambilan darah untuk
pengukuran ALT dan AST dan pengambilan organ hati untuk pemeriksaan
makroskopik dan mikroskopik dilakukan setelah mencit didislokasi di leher 24
jam setelah pemberian parasetamol. Kelompok yang tidak mendapat perlakuan
digunakan sebagai pembanding.
Berdasarkan hasil pengujian, pemberian parasetamol
menyebabkan
kerusakan hati ditandai dengan peningkatan ALT dan AST serta gambaran
kerusakan hasil histopatologi. Berdasarkan hasil analisis statisik, pemberian
EEKBM dosis 300, 450, dan 600 mg/kg bb mampu menghambat peningkatan
AST, ALT dan berbeda signifikan dengan kontrol negatif (p < 0,05) yang juga
menunjukkan perbaikan gambaran histopatologi sel hati. Dapat disimpulkan
bahwa EEKBM dosis 600mg/kg bb menunjukkan aktivitas hepatoprotektor
terbaik dengan ALT 313,70 IU/L dan AST 472,95 IU/L dengan perbedaan yang
tidak signifikan terhadap normal (p > 0,05).
Kata kunci : hepatoprotektor, kulit bawang merah (Allium cepa L. Corium)
vii
Universitas Sumatera Utara
HEPATOPROTECTOR ACTIVITY OF ENDOSPERM LAYER OF
ONION SKIN ETHANOL EXTRACT (Allium cepa L. Corium) AGAINST
PARACETAMOL-INDUCED LIVER INJURY IN MALE MICE
ABSTRACT
Liver is an organ of major centers for detoxification and metabolism in the
human body. Administration of high doses of paracetamol will enhance formation
of N-acetyl-para-benzoquinoneimine (NAPQI) metabollite and damage the liver.
Therefore, the essential antioxidant compounds is one of some treatments needed
to help inhibit NAPQI formation. One of the plants that has potential activity is
onion (Allium cepa L.). This research was aimed to determine hepatoprotective
activity of outer layer of onion skin ethanol extract (EEKBM) on alanine
transferase (ALT) and aspartate transferase (AST) and liver histopathology.
Hepatoprotector activity test of EEKBM in male mice was performed.
Treatment was divided into 6 groups of 4 mice each. EEKBM at doses of 300,
450 and 600 mg/kg bw, positive control (rutin 20 mg/kg bw) and negative control
(CMC Na 0.5%) were given orally for 14 days and 1 g/kg bw of paracetamol was
given 6 hours following the last of extract administration in 14th day. Thereafter
blood drawing for ALT and AST assays and liver removing for macroscopic and
microscopic observation were perfomed from dislocated mice 24 hours after
paracetamol administration. Normal group was used for comparation.
According to the results, administration of paracetamol causes liver
damage determined by increase of ALT and AST as well as liver microscopic
observation. EEKBM administration at doses of 300, 450 and 600 mg/kg bw
were able to inhibit the increase of AST, ALT and significantly were different
with negative control (p < 0.05), in addition were showed by better results of
microscopic observation. The conclusion has been achieved that EEKBM at
doses of 600 mg/kg bw showed most hepatoprotective activity with ALT 313.70
IU/L and AST 472.95 IU/L and non significantly were different with normal
(p > 0.05).
Key words : hepatoprotector, onion skin (Allium cepa L. Corium.)
.
viii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL .......................................................................................................
i
HALAMAN PENGESAHAN ....................................................................
iii
KATA PENGANTAR ...............................................................................
iv
SURAT PERNYATAAN ...........................................................................
vi
ABSTRAK .................................................................................................
vii
ABSTRACT ...............................................................................................
viii
DAFTAR ISI ..............................................................................................
ix
DAFTAR TABEL ......................................................................................
xiv
DAFTAR GAMBAR .................................................................................
xv
DAFTAR LAMPIRAN ..............................................................................
xvi
BAB I PENDAHULUAN ..........................................................................
1
1.1 Latar Belakang .........................................................................
1
1.2 Perumusan Masalah ..................................................................
4
1.3 Hipotesis ...................................................................................
4
1.4 Tujuan Penelitian ......................................................................
5
1.5 Manfaat Penelitian ....................................................................
5
1.6 Kerangka Pikir Penelitian .........................................................
5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ................................................................
7
2.1 Uraian Tumbuhan .....................................................................
7
2.1.1 Sistematika Tumbuhan ...................................................
7
2.1.2 Nama Daerah ..................................................................
7
2.1.3 Sejarah, habitat dan penyebaran .....................................
7
ix
Universitas Sumatera Utara
2.1.4 Morfologi tumbuhan ......................................................
8
2.1.5 Khasiat ............................................................................
9
2.2 Parasetamol ..............................................................................
10
2.2.1 Uraian kimia ...................................................................
10
2.2.2 Farmakokinetik ...............................................................
10
2.2.3 Farmakodinamik .............................................................
11
2.3 Kuersetin ..................................................................................
11
2.4 Rutin .........................................................................................
14
2.5 Hati ...........................................................................................
15
2.5.1 Anatomi hati ...................................................................
15
2.5.2 Fungsi hati ......................................................................
18
2.5.3 Hepatotoksisitas .............................................................
18
2.5.4 Mekanisme hepatotoksisitas yang diinduksi parasetamol
19
2.5.5 Mekanisme hepatotoksisitas yang diinduksi oleh karbon
tetraklorida .....................................................................
22
2.5.6 Biomarker hepatotoksisitas ............................................
23
BAB III METODE PENELITIAN .............................................................
27
3.1 Alat-alat ....................................................................................
27
3.2 Bahan-bahan .............................................................................
28
3.3 Hewan Percobaan .....................................................................
28
3.4 Pengumpulan dan Pembuatan Simplisia Kulit Bawang Merah
28
3.4.1 Pengumpulan kulit bawang merah ..................................
28
3.4.2 Identifikasi bawang merah ...............................................
29
3.4.3 Pembuatan simplisia ........................................................
29
3.5 Pembuatan Pereaksi ..................................................................
29
x
Universitas Sumatera Utara
3.5.1 Pereaksi Mayer ...............................................................
29
3.5.2 Pereaksi Dragendorff ......................................................
29
3.5.3 Pereaksi Bouchardat .......................................................
30
3.5.4 Pereaksi asam klorida 2 N ..............................................
30
3.5.6 Pereaksi Molish ..............................................................
30
3.5.5 Pereaksi Liebermann-Burchard ......................................
30
3.5.6 Pereaksi Molish ..............................................................
30
3.5.7 Larutan air kloroform .....................................................
30
3.5.8 Larutan kloral hidrat .......................................................
30
3.5.9 Pereaksi timbal (II) asetat 0,4 N .....................................
30
3.6 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia ........................................
31
3.6.1 Pemeriksaan makroskopik ..............................................
31
3.6.2 Pemeriksaan mikroskopik ..............................................
31
3.6.3 Penetapan kadar air ........................................................
31
3.6.4 Penetapan kadar sari larut air .........................................
32
3.6.5 Penetapan kadar sari larut etanol ....................................
32
3.6.6 Penetapan kadar abu total ...............................................
32
3.6.7 Penetapan kadar abu tidak larut asam ............................
33
3.7 Skrining Fitokimia ....................................................................
33
3.7.1 Pemeriksaan alkaloida ....................................................
33
3.7.2 Pemeriksaan flavonoida .................................................
34
3.7.3 Pemeriksaan saponin ......................................................
34
3.7.4 Pemeriksaan glikosida ....................................................
35
3.7.5 Pemeriksaan tanin ..........................................................
35
xi
Universitas Sumatera Utara
3.7.6 Penetapan steroida/triterpenoida ....................................
35
3.8 Pembuatan Ekstrak Etanol Kulit Bawang Merah .....................
36
3.9 Pemeriksaan Karakterisasi Ekstrak ..........................................
36
3.10 Skrining Fitokimia Ekstrak ....................................................
36
3.11 Uji Aktivitas Hepatoprotektor ................................................
37
3.11.1 Pembuatan suspensi Na CMC 0,5% .............................
37
3.11.2 Pembuatan suspensi EEKBM ......................................
37
3.11.3 Pembuatan suspensi parasetamol .................................
37
3.11.4 Pembuatan suspensi rutin .............................................
37
3.11.5 Pembuatan larutan buffer formalin 10% ......................
38
3.11.6 Pengujian ke hewan uji ................................................
38
3.11.7 Pengukuran parameter biokimia ALT dan AST ..........
39
3.11.8 Pemeriksaan kerusakan organ hati mencit ...................
40
3.11.8.1 Pemeriksaan makroskopik ............................
40
3.11.8.2Pembuatan preparat histologi organ hati
processing)
dan
pemeriksaan
mikroskopik ................................................
40
3.11.9 Analisis data .................................................................
42
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ...................................................
43
4.1 Karakterisasi Simplisia dan Ekstrak Kulit Bawang Merah ......
43
4.1.1Pemeriksaan makroskopik dan karakteristik simplisia
dan ekstrak ...............................................................................
43
4.1.2 Skrining fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak ...........
45
4.2 Hasil Uji Aktivitas Hepatoprotektor ........................................
46
4.2.1 Hasil pengukuran ALT dan AST ..................................
46
4.2.2 Gambaran kerusakan organ hepar .................................
49
(tissue
xii
Universitas Sumatera Utara
4.2.2.1 Gambaran makroskopik organ hati ....................
49
4.2.2.2 Gambaran mikroskopik organ hati ....................
50
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .....................................................
58
5.1 Kesimpulan ...............................................................................
58
5.2 Saran .........................................................................................
58
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................
59
LAMPIRAN ...............................................................................................
63
xiii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
4.1 Hasil karakterisasi serbuk simplisia dan EEKBM ............................
42
4.2 Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia dan EEKBM ..................
44
4.3 ALT dan AST mencit dengan perbedaan perlakuan di setiap
kelompok (Mean ± SE) hasil analisis secara statistik SPSS metode
One Way ANOVA .......................................................................................
45
4.4 Evaluasi histopatologi hati mencit akibat induksi parasetamol pada
tiap kelompok perlakuan ............................................................................
54
xiv
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
1.1 Kerangka pikir penelitian ...................................................................
6
2.1 Struktur Kuersetin .............................................................................
12
2.2 Skema jalur metabolisme parasetamol ..............................................
20
4.1 Grafik ALT mencit jantan ..................................................................
26
4.2 Grafik AST mencit jantan ...................................................................
26
4.3 Pemeriksaan makroskopik organ hati mencit jantan ..........................
29
4.4 Histopatologi jaringan hati mencit perbesaran 10 x 10 .....................
50
4.5 Histopatologi jaringan hati mencit perbesaran 10 x 40 .....................
51
xv
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1 Hasil identifikasi sampel penelitian ...................................................
62
2 Gambar simplisia kulit bawang merah ................................................
63
3 Gambar serbuk simplisia kulit bawang merah ....................................
64
4 Bagan alur penelitian ..........................................................................
65
5Gambar mikroskopik serbuk simplisia kulit bawang merah pada
perbesaran 10 x 40 .....................................................................................
67
6 Perhitungan karakterisasi simplisia kulit bawang merah dan EEKBM
68
7 Rekomendasi persetujuan etik penelitian kesehatan ..........................
73
8 Gambar mencit jantan dan proses pengambilan darahdarijantung
dan organ hati mencit jantan .......................................................................
74
9 Volume maksimum sesuai jalur pemberian dan konversi dosis .........
75
10 Perhitungan dosis .............................................................................
76
11 Hasil pemeriksaan ALT dan AST ....................................................
78
12 Data analisis ALT secara statistik SPSS One WayANOVA ..............
79
13 Data analisis AST secara statistik SPSS One WayANOVA ...............
83
xvi
Universitas Sumatera Utara