Efek hepatoprotektif ekstrak metanol:air (50:50) daun macaranga tanarius L. terhadap kadar ALT-AST serum pada tikus terinduksi karbon tetraklorida - USD Repository
EFEK HEPATOPROTEKTIF EKSTRAK METANOL:AIR (50:50) DAUN
Macaranga tanarius L. TERHADAP KADAR ALT-AST SERUM
PADA TIKUS TERINDUKSI KARBON TETRAKLORIDA
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)
Program Studi Farmasi Oleh :
Theresia Garri Windrawati NIM : 098114085
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
HALAMAN PERSEMBAHAN
Bersukacitalah dalam pengharapan, sabarlah dalam kesesakan, dan bertekunlah dalam doa (Roma 12:12)
Hanya pada Allah saja kiranya aku tenang, sebab dari pada-Nyalah harapanku (Mazmur 62 : 6) “Setiap kamu punya mimpi atau keinginan atau cita-cita, kamu taruh di sini,
di depan kening kamu… jangan menempel. Biarkan “dia” menggantung… mengambang…
5 centimeter di depan kening kamu. Jadi “dia” nggak akan pernah lepas dari mata kamu.”(Donny Dhirgantoro dalam novel 5 cm.).
Ku persembahkan karya kecil ku ini untuk.. Yesus Kristus yang senantiasa melindungi ku, sumber kekuatan dan harapan ku
Bapak, Ibu, dan Mbak Putri tercinta atas segala kasih sayang, doa, nasihat, dan motivasi Sahabat-sahabatku tersayang
Almamaterku
PRAKATA
Puii syukur kepada Tuhan Yang Maha Kasih atas berkat yang tiada henti, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi berjudul
“EFEK
HEPATOPROTEKTIF EKSTRAK METANOL:AIR (50:50) DAUN
Macaranga tanarius L. TERHADAP KADAR ALT-AST SERUM PADA
TIKUS TERINDUKSI KARBON TETRAKLORIDA ” dengan baik.Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S.Farm) program studi Farmasi Universitas Sanata Dharma.
Penulis menyadari bahwa dalam pelaksanaan dan penyusunan skripsi ini tentunya tidak lepas dari bantuan dan campur tangan dari berbagai pihak. Oleh karena itu, pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada :
1. Ibu Phebe Hendra, M.Si., Ph.D., Apt. selaku Dosen Pembimbing skripsi atas segala kesabaran dalam membimbing, memberi masukan dan motivasi kepada penulis selama penelitian dan penyusunan skripsi ini.
2. Bapak Ipang Djunarko, M.Sc., Apt. selaku Dosen Penguji skripsi atas bantuan dan masukkan demi kemajuan skripsi ini.
3. Bapak Prof. Dr. C. J. Soegihardjo, Apt. selaku Dosen Penguji skripsi atas bantuan dan masukkan demi kemajuan skripsi ini.
4. Ibu Rini Dwiastuti, M.Si., Apt. selaku Kepala Penanggungjawab Laboratorium Fakultas Farmasi yang telah memberikan ijin dalam penggunaan semua fasilitas laboratorium untuk kepentingan penelitian ini.
5. Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si., yang telah memberikan bantuan dalam
6. Ibu drh. Ari selaku dokter hewan di laboratorium Imono yang telah membantu dengan sabar dalam menyediakan hewan uji untuk penelitian ini.
7. Pak Heru, Pak Parjiman, dan Pak Kayat selaku laboran bagian Farmakologi dan Toksikologi, Pak Wagiran selaku laboran Farmakognosi Fitokimia, Pak Otok selaku pengelola gudang kefarmasian, Ibu Hartini, dan Pak Asran atas segala bantuan selama pelaksanaan skripsi ini.
8. Teman- teman “Tim Macaranga 3” Nanda Chris Nurcahyanti, M.R. Biri Koni Tiala, Fransisca Devita Risti W, Christine Herdyana F, Bernadetta Amilia R, A.M. Inggrid Sili, dan Luluk Rahendra Martha atas kerja sama, bantuan, suka duka, dan perjuangan dalam menyelesaikan skripsi sampai akhir.
9. Kawan-kawan “Rempong” Veronika Dita Ayuningtyas, Novia Sarwoning
Tyas, dan Niken Ambar Sayekti atas kebersamaan, semangat, keceriaan, perhatian, dan motivasi dalam suka maupun duka selama ini.
10. Teman-teman FSM B 2009, FKK B 2009 dan seluruh angkatan 2009 atas kebersamaan kita.
11. Semua pihak yang penulis tidak dapat sebutkan satu per satu yang turut membantu selama penyusunan skripsi ini berlangsung.
Penulis menyadari bahwa setiap manusia tidak ada yang sempurna. Oleh karena itu, penulis mengharapkan adanya kritik dan saran yang membangun demi kemajuan di masa yang akan datang.
Akhir kata, penulis berharap bahwa skripsi ini dapat bermanfaat bagi semua pihak, bagi mahasiswa, lingkungan akademis, masyarakat serta
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL .................................................................................... i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ............................................. ii HALAMAN PENGESAHAN ....................................................................... iii HALAMAN PERSEMBAHAN .................................................................... iv PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ........................................................ v LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA
ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS ........................................ vi PRAKATA ................................................................................................... vii DAFTAR ISI ................................................................................................ x DAFTAR TABEL ........................................................................................ xv DAFTAR GAMBAR .................................................................................... xvii DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................. xix
INTISARI ..................................................................................................... xxi
ABSTRACT ................................................................................................... xxii
BAB I. PENGANTAR .................................................................................. 1 A. Latar Belakang ..................................................................................... 1
1. Perumusan masalah .................................................................... 3
2. Keaslian penelitian ..................................................................... 4
3. Manfaat penelitian ...................................................................... 5
B. Tujuan Penelitian ................................................................................. 5
A. Macaranga tanarius L. ........................................................................ 6
1. Taksonomi .................................................................................. 6
2. Sinonim ...................................................................................... 6
3. Nama daerah ............................................................................... 6
4. Morfologi ................................................................................... 7
5. Kandungan kimia ........................................................................ 7
6. Khasiat dan kegunaan ................................................................. 9
B. Anatomi dan Fisiologi Hati .................................................................. 9
C. Kerusakan Hati .................................................................................... 12
1. Perlemakan hati (Steatosis) ......................................................... 12
2. Kematian sel (Necrosis) .............................................................. 13
3. Kolestasis ................................................................................... 14
4. Sirosis ......................................................................................... 14
D. Hepatotoksin ........................................................................................ 15
1. Hepatotoksin teramalkan (tipe A) ............................................... 15
2. Hepatotoksin tak teramalkan (tipe B) .......................................... 15
E. Karbon tetraklorida .............................................................................. 16
F. Metode Uji Hepatotoksisitas ................................................................ 19
1. Tes enzim serum ......................................................................... 20
2. Tes ekskretori hepatik ................................................................. 20
3. Analisis histologi kerusakan hati ................................................. 20
G. ALT dan AST ...................................................................................... 21
I. Landasan Teori .................................................................................... 22 J. Hipotesis .............................................................................................. 23
BAB III. METODE PENELITIAN ............................................................... 24 A. Jenis dan Rancangan Penelitian............................................................ 24 B. Variabel dan Definisi Operasional........................................................ 24
1. Variabel utama ........................................................................... 24
2. Variabel pengacau ...................................................................... 24
3. Definisi operasional .................................................................... 25
C. Bahan Penelitian .................................................................................. 26
1. Bahan utama ............................................................................... 25
2. Bahan kimia................................................................................ 25
D. Alat dan Instrumen Penelitian .............................................................. 27
1. Alat ekstraksi .............................................................................. 27
2. Alat uji hepatoprotektif ............................................................... 28
E. Tata Cara Penelitian ............................................................................. 28
1. Determinasi tanaman M. tanarius ............................................... 28
2. Pengumpulan bahan .................................................................... 28
3. Pembuatan serbuk ....................................................................... 28
4. Penetapan kadar air serbuk daun M. tanarius .............................. 29
5. Pembuatan ekstrak metanol-air daun M. tanarius ........................ 29
6. Penetapan konsentrasi pekat ekstrak ........................................... 30
7. Penetapan dosis ekstrak metanol-air daun M. tanarius ................ 31
9. Pembuatan suspending agent CMC-Na 1% ................................. 32
10. Uji pendahuluan.......................................................................... 32
11. Pengelompokkan dan perlakuan hewan uji .................................. 33
12. Pembuatan serum ........................................................................ 34
13. Penetapan aktivitas serum kontrol, serum ALT, dan serum AST . 34
F. Tata Cara Analisis Hasil ...................................................................... 35
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ...................................................... 36 A. Penyiapan Bahan ................................................................................. 36
1. Hasil determinasi tanaman .......................................................... 36
2. Penetapan kadar air serbuk daun M. tanarius .............................. 36
3. Hasil penimbangan bobot ekstrak metanol-air daun M. tanarius . 37
B. Uji Pendahuluan .................................................................................. 38
1. Penentuan dosis hepatotoksik karbon tetraklorida ....................... 38
2. Penentuan waktu pencuplikan darah ........................................... 39
3. Penetapan lama pemejanan ekstrak metanol-air daun
M. tanarius ................................................................................. 42
4. Penetapan dosis ekstrak metanol-air daun M. tanarius ................ 42
C. Hasil Uji Efek Hepatoprotektif Ekstrak Metanol-air Daun M. tanarius . 43
1. Kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB ......... 48
2. Kontrol negatif olive oil dosis 2 ml/kgBB ................................... 49
3. Kontrol ekstrak metanol-air daun M. tanarius dosis 3,840 g/kgBB ............................................................................. 51
1. Kelompok perlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius dosis 0,426 g/kgBB, 1,280 g/kgBB, dan 3,840 g/kgBB pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB .................................................................................. 52
D. Rangkuman Pembahasan ..................................................................... 59
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................ 62 A. Kesimpulan.......................................................................................... 62 B. Saran ................................................................................................... 62 DAFTAR PUSTAKA ................................................................................... 63 LAMPIRAN ................................................................................................. 67 BIOGRAFI PENULIS .................................................................................. 99
DAFTAR TABEL
Tabel I. Peningkatan aktivitas enzim serum akibat induksi senyawa toksik
19 …………………………………………
Tabel II. Komposisi dan konsentrasi reagen serum ALT
27 Tabel III. Komposisi dan konsentrasi reagen serum AST
27 Tabel IV. Rata-rata aktivitas serum ALT tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam
39 ……………………………….. Tabel V. Hasil uji Scheffe aktivitas serum ALT tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada
40 selang waktu 0, 24, dan 48 jam…..…………………... Tabel VI. Rata-rata aktivitas serum AST tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada selang
41 waktu 0, 24, dan 48 jam…………………………........ Tabel VII. Hasil uji Mann Whitney aktivitas serum AST tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2
41 ml/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam………. Tabel VIII. Purata ± SE aktivitas serum ALT tikus praperlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius terinduksi karbon tetraklorida
44 dosis 2 ml/kgBB………………… Tabel IX. Hasil uji Scheffe aktivitas serum ALT tikus setelah kelompok p 45 erlakuan…………...……………………...
Tabel X. Purata ± SE aktivitas serum AST tikus praperlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius terinduksi karbon tetraklorida
46 dosis 2 ml/kgBB………………… Tabel XI. Hasil uji Tamhane’s-T2 aktivitas serum AST tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2
47 ml/kgBB pada kelompok perlakuan………………….. Tabel XII. Rata-rata aktivitas serum ALT dan serum AST tikus setelah pemberian olive oil dosis 2 ml/kgBB pada
50 selang waktu 0 dan 24 jam…………………………… Tabel XIII. Hasil uji Mann Whitney aktivitas serum ALT dan serum AST tikus setelah pemberian olive oil dosis 2
51 ml/kgBB pada selang waktu 0 dan 24 jam…………… Tabel XIV. Efektif Dosis Tengah (ED
50 ) Hepatoprotektif ekstrak
metanol-air daun M. tanarius
56 …………………………
Tabel XV. Dosis, log dosis, % efek hepatoprotektif dan ED
50
pada masing- 95 masing kelompok perlakuan……………
Tabel XVI. Hasil penetapan kadar air serbuk daun M. tanarius
96 ……
Tabel XVII. Hasil rendemen ekstrak metanol-air daun M. tanarius
97 … Tabel XVIII. Bobot pengeringan ekstrak metanol-air daun M.
tanarius
98 ……………………………………………….. Tabel XIX.
98 Hasil pengukuran validitas dan reabilitas……………..
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Struktur kandungan senyawa daun M. tanarius
8 ………
Gambar 2. Struktur mikroskopik hati
11 …………………………….. Gambar 3. Struktur mikroskopik hati yang mengalami steatosis …
13 Gambar 4.
13 Struktur mikroskopik hati yang mengalami nekrosis… Gambar 5.
16 Struktur molekul karbon tetraklorida…………………. Gambar 6. Mekanisme biotransformasi dan oksidasi karbon tetraklorida
17 ……………………………………………. Gambar 7. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam
39 ………. Gambar 8. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam
41 ………. Gambar 9. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus praperlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius 1 x sehari selama 6 hari terinduksi karbon tetraklorida 2 ml/kgB
44 B………………………………………………. Gambar 10. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus praperlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius 1 x sehari selama 6 hari terinduksi karbon tetraklorida 2 Gambar 11. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus setelah pemberian olive oil dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu 0 dan 24 jam
50 ……………………………. Gambar 12. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus setelah pemberian olive oil dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu 0 dan 24 jam
50 ……………………………. Gambar 13. Persamaan garis ED 50 ekstrak metanol-air daun M.
tanarius
56 ………………………………………………..
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Foto daun M. tanarius …………………………………..
68 Lampiran 2. Foto ekstrak metanol-air daun M. tanarius ……………..
68 Lampiran 3. Foto larutan ekstrak metanol-air daun M. tanarius ……..
68 Lampiran 4. Surat pengesahan determinasi tanaman M. tanarius ……
69 Lampiran 5. Surat pengesahan Medical and Health Research Ethics Committee (MHREC) …………………………………..
70 Lampiran 6. Analisis statistik aktivitas serum ALT pada uji pendahuluan penentuan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB….………………………...
71 Lampiran 7. Analisis statistik aktivitas serum AST pada uji pendahuluan penentuan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB….………………………...
74 Lampiran 8. Analisis statistik aktivitas serum ALT perlakuan ekstrak metanol air daun M. tanarius setelah induksi karbon tet raklorida dosis 2 ml/kgBB……………………………
78 Lampiran 9. Analisis statistik aktivitas serum AST perlakuan ekstrak metanol air daun M. tanarius setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB……………………………
83 Lampiran 10. Analisis statistik aktivitas serum ALT dan serum AST perlakuan kontrol negatif olive oil dosis 2 ml/kgBB……
88 Lampiran 12. Perhitungan penetapan peringkat dosis ekstrak metanol- air daun M. tanarius kelompok perlakuan……………...
93 Lampiran 13. Perhitungan konversi dosis untuk manusia……………..
94 Lampiran 14. Perhitungan efektif dosis tengah (ED50) hepatoprotektif ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius (L.) pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida ……………..
95 Lampiran 15. Penetapan kadar air serbuk daun M. tanarius …………..
96 Lampiran 16. Hasil rendemen ekstrak metanol-air daun M. tanarius …
97 Lampiran 17. Bobot pengeringan ekstrak metanol-air daun M.
tanarius ………………………………………………….
98 Lampiran 18. Hasil pengukuran validitas dan reabilitas ….....................
98
INTISARI
Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan informasi tentang pengaruh hepatoprotektif pemberian dari ekstrak metanol : air daun M. tanarius untuk menurunkan aktivitas serum ALT dan AST pada tikus terinduksi karbon tetraklorida, serta mendapatkan besar dosis efektifnya.
Penelitian ini bersifat eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola searah. Penelitian yang dilakukan menggunakan tikus jantan galur Wistar, umur 2-3 bulan, dan berat ± 150-200 gram. Tikus dibagi secara acak ke dalam enam kelompok perlakuan. Kelompok I (kontrol hepatotoksin) diberi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB secara ip. Kelompok II (kontrol negatif) diberi
olive oil 2 ml/kgBB. Kelompok III (kontrol ekstrak) diberi ekstrak metanol-air
daun M. tanarius 3,840 g/kgBB. Kelompok IV-VI (perlakuan) berturut-turut diberi ekstrak metanol : air daun M. tanarius dosis 0,426; 1,280; dan 3,840 g/kgBB secara oral sekali sehari selama enam hari berturut-turut kemudian pada hari ke tujuh semua perlakuan diberi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB secara i.p. Dua puluh empat jam sesudahnya, darah diambil dari sinus orbitalis mata untuk diukur aktivitas serum ALT dan AST. Data serum ALT dan AST yang didapat dianalisis secara statistik.
Berdasarkan hasil penelitian, ekstrak metanol-air M. tanarius memberikan efek hepatoprotektif dengan menurunkan aktivitas serum ALT dan ASTpada tikus yang terinduksi karbon tetraklorida. Ada kekerabatan dosis dengan respon yang muncul terlihat dari semakin besar dosis praperlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius yang diberikan, maka semakin besar efek hepatoprotektif. Jadi ekstrak metanol-air M. tanarius dosis 0,426; 1,280; dan 3,840 g/kgBB memiliki efek hepatoprotektif berturut-turut 29,5%, 43,6%, dan 62,4%. Nilai ED
50 hepatoprotektif ekstrak metanol-air daun M. tanarius adalah 1,776 g/kgBB.
Kata kunci : Macaranga tanarius, metanol, hepatoprotektif, karbon
tetraklorida
ABSTRACT
This research has purpose to get information about hepatoprotective effect of water-methanol extract M. tanarius leaf for reducing activity of ALT and AST serum in rats induced by carbon tetrachloride and get an effective dose.
This research was experimentally pure with direct sampling design. This research used Wistar male rats, age 2-3 months, and weight ± 150-200 g. The rats were divided into six treatment groups. The first group (hepatotoxin control) was given carbon tetrachloride 2 ml/kgBW i.p. Then, the second group (negative control) was given olive oil 2 ml/kgBW. Third group (extract control) was given water-methanol extract of M. tanarius leaf 3.840 g/kgBW. The fourth until sixth group (treatment) was given water-methanol extract of M. tanarius leaf dose 0.426; 1.280; and 3.840 g/kgBW orally once a days for six days successively a nd then in the seventh day all of the treatments group were given carbon tetrachloride 2 ml/kgBB by i.p. Twenty-four hours later, blood was collected from the orbital sinus eye to be measured ALT and AST serum activity. It was analyzed statistically.
Based of the result of the research, water-methanol extract M. tanarius leaf give hepatoprotective effects for reducing activity of ALT and AST serum in rats induced by carbon tetrachloride. There was a relation between dose and response which was seen from the greater pre-experimental dose methanol-water extract of M. tanarius leaf given, thus the hepatoprotective was bigger. Hepatoprotective effect with dose of 0.426; 1.280, and 3.840 g/kgBW successively were 29.5%, 43.6%, and 62.4%. The value of ED
50 hepatoprotective of water-methanol extract of M. tanarius leaf was 1.776 g / kgBW.
Keywords : Macaranga tanarius, methanol, hepatoprotective, carbon
tetrachlorideBAB I PENGANTAR A. Latar Belakang Hati merupakan organ atau kelenjar terbesar dari tubuh dan mempunyai
fungsi utama sebagai pusat metabolisme (Wibowo dan Paryana, 2009). Gangguan fungsi hati seringkali dihubungkan dengan beberapa penyakit hati tertentu.
Penyebab penyakit hati antara lain infeksi virus hepatitis, zat-zat toksik seperti alkohol dan obat-obatan tertentu (Direktorat Bina Farmasi Komunitas dan Klinik, 2007).
World Health Organization (WHO) mencatat sekitar 180 juta umat
manusia terinfeksi virus hepatitis C. Angka ini meliputi 3% dari seluruh populasi manusia di bumi. Bila memakai acuan angka kejadian rata-rata dunia yaitu 3% dan dikalikan penduduk Indonesia sebanyak 220 juta, maka ada sekitar tujuh juta penduduk Indonesia yang mengidap virus ini (WHO, 2009). Berdasarkan penelitian yang ada, prevalensi penyakit perlemakan hati di Indonesia adalah 30,6% (Sofia, Nurdjanah, dan Ratnasari, 2009). Menurut Hian (2009), diantara beberapa penyakit yang dapat disembuhkan melalui pengobatan herbal adalah penyakit hati. Oleh karena itu, dalam penelitian ini dicari alternatif terapi pengobatan dari sumber daya alam hayati untuk penyakit hati.
Salah satu tanaman asli Indonesia dan dapat dikembangkan di daerah tropis beberapa negara adalah Macaranga tanarius L. (M. tanarius) (Starr, Starr, dkk (2006) melaporkan kandungan ekstraksi metanol dari tanaman M. tanarius adalah macarangioside A-C, mallophenol A-B menunjukkan aktivitas penangkapan radikal terhadap DPPH. Phommart, Sutthivaiyakit, Chimnoi, Ruchirawat, dan Sutthivaiyakit (2005) melaporkan kandungan senyawa M.
tanarius
berupa tanarifuranolol, tanariflavanon B,C,D, dan nymphaeol A-C digunakan sebagai antiinflamasi, antioksidan, dan antitumor. Akar M. tanarius di daerah Malaysia dibuat dekok sebagai antitusif dan antipiretik. Di daerah Taiwan dan Cina, daun yang dikeringkan digunakan sebagai teh herbal (Lim, Lim, dan Yule, 2008).
Karbon tetraklorida merupakan senyawa model hepatotoksik yang akan mengalami reduksi oleh enzim sitokrom P-450 (CYP2E1) sehingga terbentuk
- • radikal bebas triklorometil ( CCl
3 ) dan radikal bebas triklorometilperoksida
- • ( OOCCl
3 ) yang lebih reaktif (Gregus dan Klaaseen, 2001). Radikal triklorometil
berikatan secara kovalen dengan lemak mikrosomal dan protein, dan akan bereaksi secara langsung dengan membran fosfolipid dan kolesterol yang bersifat toksik. Hasil lainnya adalah radikal lipid yang mengaktifkan senyawa oksigen reaktif selanjutnya mengakibatkan peroksidasi lipid (Timbrell, 2008).
Adanya kandungan M. tanarius sebagai senyawa antioksidan berpotensi mengurangi radikal bebas yang terbentuk dari reaksi tersebut. Ekstrak metanol-air daun M. tanarius dilaporkan dapat menurunkan enzim Alanin Transferase (ALT) dan Aspartat Transferase (AST) pada tikus terinduksi parasetamol dan memberikan efek antiinflamasi pada tikus terinduksi karagenin (Kurniawati,
Bentuk sediaan yang digunakan pada penelitian ini adalah ekstrak. Hal ini berdasarkan penelitian Matsunami, dkk (2006) bahwa senyawa antioksidan yang dapat diperoleh dari daun M. tanarius adalah hasil isolasi dengan pelarut yang bersifat polar. Selain itu, berdasarkan penelitian Kurniawati, dkk (2011), ekstrak metanol-air daun M. tanarius dapat memberi efek hepatoprotektif pada model hepatotoksin parasetamol. Dengan penggunaan pelarut yang sama, diharapkan dapat memperoleh efek hepatoprotektif dengan model hepatotoksin lain yaitu karbon tetraklorida. Tipe kerusakan hati akibat induksi karbon tetraklorida berbeda dengan parasetamol. Karbon tetraklorida dapat menyebabkan
steatosis , sedangkan parasetamol mengakibatkan necrosis. Eksplorasi tanaman M.
tanarius di Indonesia masih belum banyak dilakukan. Oleh karena itu, penelitian
tentang pengaruh pemberian ekstrak metanol-air daun M. tanarius terhadap kadar serum Alanin Transferase (ALT) dan Aspartat Transferase (AST) pada tikus terinduksi karbon tetraklorida menarik untuk diteliti.
1. Perumusan masalah
a. Apakah pemberian ekstrak metanol-air daun M. tanarius mempunyai pengaruh hepatoprotektif dengan menurunkan kadar ALT dan AST serum pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida ?
50
b. Berapa besar nilai dosis efektif tengah (ED ) hepatoprotektif ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida ?
2. Keaslian penelitian
Sejauh pengamatan penulis, penelitian terhadap M. tanarius pernah dilakukan oleh Matsunami, dkk (2006) yang melaporkan kandungan hasil ekstraksi dengan metanol dari tanaman M. tanarius adalah macarangioside A-C,
mallophenol A- B
. Senyawa tersebut menunjukkan aktivitas penangkapan radikal terhadap DPPH. Phommart, dkk (2005) melaporkan kandungan senyawa baru, yaitu tanarifuranolol, tanariflavanon C,D,B, nymphaeol A-C, blumenol A,
blumenol B , dan annuionone E yang antara lain dapat digunakan sebagai
antiinflamasi, antioksidan, dan antitumor. Penelitian Puteri dan Kawabata (2010) melaporkan lima senyawa baru sebagai antidiabetik yaitu asam mallotinic,
corilagin, asam chebulagic, macatannin A dan macatannin B. Selain itu, juga
dilakukan penelitian efek hepatoprotektif ekstrak metanol-air daun M. tanarius (Kurniawati, dkk., 2011) dan infusa daun M. tanarius pada tikus terinduksi parasetamol (Mahendra dan Hendra, 2011). Penelitian Handayani (2012) melaporkan bahwa ekstrak metanol-air daun M. tanarius dapat menurunkan kadar glukosa darah pada tikus yang terbebani glukosa. Penelitian Permadi (2012) melaporkan bahwa ekstrak metanol-air daun M. tanarius memiliki kemampuan meningkatkan efek penurunan kadar glukosa darah dari insulin pada tikus ketika digunakan secara bersamaan.
Penelitian ini berbeda dengan penelitian sebelumnya karena ingin melihat pengaruh ekstrak metanol-air daun M. tanarius terhadap serum ALT dan serum AST pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida.
3. Manfaat penelitian
a. Manfaat teoritis. Hasil penelitian ini diharapkan mampu memberikan sumbangan dan tambahan ilmu pengetahuan baik di bidang farmasi ataupun di bidang obat herbal.
b. Manfaat praktis. Hasil penelitian ini diharapkan dapat meningkatkan penggunaan tanaman M. tanarius bagi masyarakat khususnya sebagai alternatif pencegahan untuk penyakit hati.
B. Tujuan Penelitian
1. Pemberian ekstrak metanol-air daun M. tanarius mempunyai pengaruh hepatoprotektif dengan menurunkan kadar ALT dan AST serum pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida.
2. Mengetahui berapa besar nilai dosis efektif tengah (ED
50 ) hepatoprotektif
pemberian ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida.
BAB II PENELAAHAN PUSTAKA A. Macaranga tanarius L.
1. Taksonomi
Kingdom : Plantae Subkingdom : Tracheobionta (tumbuhan berpembuluh) Divisio : Spermatophyta (menghasilkan biji) Sub-Divisi : Magnoliophyta (tumbuhan berbunga) Classis : Magnoliopsida (berkeping dua/dikotil) Sub-classis : Rosidae Ordo : Euphorbiales Familia : Euphorbiaceae Genus : Macaranga Spesies : Macaranga tanarius L (Plantamor, 2008).
2. Sinonim Ricinus tanarius L., Macaranga molliuscula, Macaranga tomentosa Druce, Mappa tanarius Blume (Starr, dkk., 2003).
3. Nama daerah Tutup ancur (Jawa), mapu (Batak), mara (Sunda) (Proseanet, 2012).
4. Morfologi M. tanarius berupa pohon kecil sampai sedang dengan ketinggian 4-5
meter, berdaun hijau dengan dahan agak besar. Daun berseling, agak membundar, dengan stipula besar yang luruh. Perbungaan bermalai di ketiak, bunga ditutupi oleh daun gagang. Buah kapsul berkokus dua, ada kelenjar kekuningan di luarnya dan biji membulat (Proseanet, 2012).
5. Kandungan kimia
Penelitian tentang kandungan kimia daun M. tanarius dilaporkan senyawa megastigma glukosida yaitu macarangioside A, macarangioside B,
macarangioside C, macarangioside D, mallophenol B, lauroside E, methyl
brevifolin carboxylate, hyperin dan isoquercitrin (Matsunami, dkk., 2006).
Kandungan lain yang berhasil diidentifikasi adalah dua megastigman glukosida yaitu macarangioside E dan F, bersama 15 komponen lain (Matsunami, Otsuka, Kondo, Shinzato, Kawahata, Yamaguchi, dkk., 2009). Dari daun M. tanarius ditemukan 3 kandungan senyawa baru, yaitu tanarifuranonol, tanariflavanon C,
dan tanariflavanon D (Gambar 1) bersama dengan 7 kandungan, yaitu nymphaeol
A, nymphaeol B, nymphaeol C, tanariflavanone
B, blumenol A (vomifoliol),
blumenol B ( 7,8 dihydrovomifoliol), dan annuionone E (Phommart, dkk., 2005).
Penelitian Puteri dan Kawabata (2010) melaporkan terdapat lima senyawa baru, yaitu asam mallotinic, corilagin, asam chebulagic, macatannin A dan macatannin
B.
6. Khasiat dan kegunaan
Di Malaysia dan Thailand, dekok akar M. tanarius digunakan sebagai antipiretik dan antitusif. Akar keringnya digunakan untuk agen emetik dan daun segarnya untuk mencegah inflamasi (Phommart, dkk., 2005). Ekstrak metanol-air daun M. tanarius dapat digunakan sebagai hepatoprotektif karena adanya aktivitas antioksidan yang dapat menghambat oksidasi metabolit reaktif parasetamol (NAPQI) oleh sitokrom P-450. Hal ini didukung oleh penelitian uji antiinflamasi pada tikus terinduksi karagenin (Kurniawati, dkk., 2011). Penelitian Puteri dan Kawabata (2010) melaporkan terdapat lima senyawa baru, yaitu asam mallotinic,
corilagin, asam chebulagic, macatannin A
dan macatannin B. Senyawa tersebut berpotensi sebagai antidiabetik, yaitu sebagai senyawa penghambat enzim
α-
glucosidase . Penelitian Handayani (2012) melaporkan bahwa ekstrak metanol-air
daun M. tanarius dapat menurunkan kadar glukosa darah pada tikus yang terbebani glukosa.
B. Anatomi dan Fisiologi Hati
Hati merupakan organ atau kelenjar terbesar dari tubuh. Hati disebut kelenjar karena menghasilkan empedu dan juga mengeluarkan hasil produksi dari makanan (Wibowo dan Paryana, 2009). Hati memiliki berat sekitar 1400 g pada orang dewasa dan dibungkus oleh suatu fibrosa. Hati menerima hampir sekitar 1500 ml darah per menit melalui dua sumber, yaitu vena porta dan arteri hepatica (Ganong dan McPhee, 2011).
Hati mempunyai dua facies, yaitu facies diaphragmatica dan facies
visceralis . Facies diaphragmatica terletak di sebelah atas dengan bentuk sesuai
lengkung diafragma dan mempunyai permukaan yang halus. Permukaan ini terdiri dari bagian anterior dan posterior, sedangkan facies visceralis atau posteroinferior menghadap ke bawah dan ke belakang sehingga permukaannya ireguler. Pada
facies visceralis terdapat porta hepatis, yaitu suatu hilum dari hati yang
merupakan tempat masuk dan keluar pembuluh darah, saluran empedu, pembuluh getah bening, dan plexus nervorum (Wibowo dan Paryana, 2009).
Hati dibagi menjadi dua lobus, yaitu lobus kanan dan lobus kiri. Lobus kanan dibagi menjadi bagian superior dan posterior oleh fisura segmentalis.
Lobus kiri dibagi oleh ligamentum falsiformis menjadi segmen medial dan lateral. Setiap lobus pada hati dibagi menjadi struktur-stuktur yang disebut lobulus. Lobulus terdiri dari lempeng-lempeng sel hati yang berbentuk kubus dan tersusun mengelilingi vena sentralis. Di antara lempeng-lempeng sel hati terdapat kapiler- kapiler yang disebut sinusoid yang merupakan cabang vena porta dan arteri
hepatica . Sinusoid dibatasi oleh sel Kupffer (Gambar 2). Sel Kupffer (sel
fagositik) memiliki fungsi utama yaitu untuk menelan bakteri dan benda asing lain dalam darah (Price dan Wilson, 2005).
Gambar 2. Struktur mikroskopik hati (Ganong dan McPhee, 2011)
Hati menerima darah dari vena portae hepatis (70%) dan arteri hepatica (30%). Arteri hepatica membawa darah yang berisi oksigen yang berasal arteria
hepatica communis , di sebelah kiri ductus choledocus dan di depan vena porta
(Wibowo dan Paryana, 2009). Vena portae membawa darah vena dari usus halus yang kaya akan nutrient yang baru diserap, obat, dan racun langsung ke hati. Vena
portae membentuk jalinan khusus yang memungkinkan setiap hepatosit dibasuh
langsung oleh darah porta (Ganong dan McPhee, 2011).Hati mempunyai fungsi utama sebagai pusat metabolisme. Hati mempunyai struktur seragam yang terdiri dari kelompok sel-sel yang saling dipersatukan oleh sinusoid. Sel-sel hati mendapat suplai darah dari vena portae
hepatis yang kaya makanan, tidak mengandung oksigen, dan kadang-kadang sistem peredaran darah yang tidak biasa ini, sel hati mendapat darah yang relatif kurang oksigen. Hal inilah yang menyebabkan sel hati lebih rentan terhadap kerusakan dan penyakit (Wibowo dan Paryana, 2009).
C. Kerusakan Hati
Toksikan dapat mengakibatkan berbagai jenis kerusakan hati seperti :
1. Perlemakan hati (Steatosis)
Perlemakan hati terjadi bila penimbunan lemak melebihi 5% dari berat hati atau mengenai lebih dari separuh jaringan sel hati. Perlemakan hati ini sering berpotensi menjadi penyebab kerusakan hati dan sirosis hati. Steatosis adalah respon umum untuk banyak pemejanan akut tetapi tidak semua hepatotoksin.
Seringkali, toksin yang menginduksi steatosis (Gambar 3) adalah reversibel dan tidak menyebabkan kematian hepatosit. Hepatosit yang mengandung lemak berlebih tampaknya memiliki beberapa putaran, vakuola kosong yang menggantikan nukleus ke pinggiran sel. Perlemakan hati dapat berasal dari satu atau lebih peristiwa berikut: kelebihan pasokan asam lemak bebas ke hati, gangguan pada siklus trigliserida, penurunan oksidasi asam lemak, dan penurunan sintesis lipoprotein densitas sangat rendah (Gregus dan Klaaseen, 2001). Toksikan-toksikan yang menyebabkan penimbunan lipid dalam hati dengan mekanisme yang paling umum yaitu adanya kerusakan pelepasan trigliserida hati ke plasma. Karbon tetraklorida terutama bekerja melalui metabolit reaktifnya, radikal triklorometil yang secara kovalen mengikat protein dan lipid tidak jenuh
Gambar 3. Struktur mikroskopik hati yang mengalami steatosis
(Mercer University School of Medicine, 2012)
2. Kematian sel (Necrosis)
Nekrosis (Gambar 4) merupakan kematian sel-sel hati yang ditandai dengan pembengkakan sel, kebocoran, hancurnya inti dan masuknya sel-sel radang. Ketika nekrosis pada hepatosit terjadi, kebocoran plasma membran dapat dideteksi secara kimiawi dengan menguji kadar enzim yang berasal dari sitosol di plasma atau serum. Keterangan yang informatif adalah tingkat aktivitas ALT, sebagai enzim hepatosit yang paling utama (Treinen dan Moslen, 2001).
Gambar 4. Struktur mikroskopik hati yang mengalami nekrosis
(Mercer University School of Medicine, 2012)
3. Kolestasis
Kolestasis adalah jenis kerusakan hati yang bersifat akut, dan lebih jarang ditemukan dibandingkan dengan perlemakan hati dan nekrosis. Mekanisme utama terjadinya kolestasis adalah berkurangnya aktivitas ekskresi empedu pada membran kanalikulus (Lu, 1995). Ciri kolestasis yaitu meningkatnya level serum dari konsentrasi normal dalam empedu, khususnya garam empedu dan bilirubin. Bila ekskresi empedu dari pigmen bilirubin kekuningan terganggu, pigmen ini terakumulasi di kulit dan mata, menghasilkan penyakit kuning, dan tumpahan ke dalam urin, yang menjadi kuning coklat atau gelap terang. Toksin diinduksi kolestasis dapat bersifat sementara atau kronis, ketika besar, hal ini terkait dengan pembengkakan sel, kematian sel, dan peradangan. Banyak jenis bahan kimia termasuk logam, hormon dan obat-obatan menyebabkan kolestasis (Gregus dan Klaaseen, 2001).
4. Sirosis