Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) Terhadap Penurunan Kadar Asam Urat Mencit (Mus musculus L.) Jantan Hiperurisemia

26

Lampiran 1. Dokumentasi Penelitian
1.1. Proses Pembuatan Ekstrak

1. Daun sirsak dikeringkan

2. Daun sirsak telah dipotong

3. Daun sirsak telah dihaluskan

4. Simplisa di shaker

5. Simplisa disaring

6. Simplisa dipekatkan

7. Diuapkan diatas water bath

8. Ekstrak kental daun sirsak

Universitas Sumatera Utara

27

1.2 Pembuatan Diet Otak Sapi

1. Otak sapi segar

2. Otak sapi yang
haluskan disaring

sudah

di

3. Otak sapi yang siap untuk dicekok

Universitas Sumatera Utara

28

Lampiran 2. Tahap Kerja Penelitian

2.1 Prosedur Percobaan
2.1.1. Tahap Persiapan Hewan Coba
Mencit
dibagi 5 kelompok dan 5 ulangan
diaklimatisasi dengan memberi makan pelet
dan diberi air minum
dipuasakan selama 24 jam setelah aklimatisasi
diberi perlakuan
Perlakuan

2.1.2. Pembuatan Diet Otak Sapi
100 gr otak sapi
dicuci bersih
dipotong kecil-kecil
dihaluskan dengan menambahkan 25 mL air
disaring dengankain kasa dan dimasukkan ke
dalam wadah.

otak sapi diberikan pada mencit 1 kali sehari secara oral.
Hasil

Universitas Sumatera Utara

29

2.1.3. Persiapan Ekstrak Daun Sirsak
Daun Sirsak
dibersihkan dari kotoran
ditimbang berat basah
di jemur dengan suhu ruang hingga
di haluskan dan ditimbang setelah menjadi bubuk
dimasukkan kedalam bejana tertutup lalu dibasahi
dengan etanol 70% hingga semua serbuk terendam
dibiarkan selama 5 hari sambil diaduk 3-4 kali
disaring dengan kertas saring
di pekatkan dengan rotari evaporator
di keringkan selama 24 jam di atas penangas air sampai
ekstrak kental

Hasil

2.1.4. Pemberian Perlakuan
2.1.4.1. Induksi Hiperurisemia
Mencit
Diberi makanan diet otak sapi dari hari pertama hingga hari ke
11
Di ukur kadar asam uratnya
Hasil

2.1.4.2. Pemberian Ekstrak Daun Sirsak
Mencit
Diberi ekstrak daun sirsak (EDS) dari hari ke 12 hingga hari ke
21
Di ukur kadar asam uratnya
Hasil

Universitas Sumatera Utara

30

2.2. Parameter Pengamatan
2.2.1. Uji fitokimia
2.2.1.1. Alkaloid
1g ekstrak daun sirsak
dilarutkan dalam 10 mL kloroform
ditambahkan 5 mL HCl 2 M
ditambahkan 0,5 g NaCl.
diaduk dan disaring
ditambah 3 tetes HCl 2
dipisah menjadi 4 bagian dan dimasukkan ke dalam
tabung pertama sebagai blanko (ditambah amonia 25%
hingga pH 8-9, ditambah 3 tetes kloroform, diuapkan,
ditambahkan 2mL HCl 2M, diaduk dan disaring)
tabung ke dua ditambah reagen wagner
tabung ke tiga ditambah reagen dragendroff
tabung ke empat ditambah reagen mayer
diamati endapan yang terbentuk
hasil

2.2.1.2 Flavonoid
0,1 g ekstrak daun sirsak

dilarutkan dalam 3 ml etanol 70 %
diambil larutan 1 ml
ditambahkan 10 tetes HCl 37 %
dipanaskan selama 10 menit
diamati perubahan warna

Hasil

Universitas Sumatera Utara

31

2.2.1.3 Saponin, Tanin dan Polifenol
0,1 gr ekstrak daun sirsak
dilarutkan dalam akuades panas kemudian dibagi
menjadi 2 bagian
bagian pertama dikocok selama 10 detik dan dibiarkan

hingga terbentuk buih stabil selama 10 menit
bagian kedua ditambah 5 tetes NaCl 10 % dan disaring. Filtrat
yang diperoleh dibagi menjadi tiga bagian
filtrat pertama senagai blanko
filtrat kedua ditambahkan 3 tetes FeCl3
Filtrat ke tiga ditambahkan 5 tetes gelatin
Diamati perubahan warna yang terjadi

Hasil

2.2.2. Pengukuran Berat Badan Mencit
Mencit
Ditimbang dengan timbangan analitik
Dilihat dan dicatat berat badan mencit yang muncul di
monitir timbangan analitik
Hasil

2.2.3. Pengukuran Kadar Asam Urat
Mencit
Diambil darah melalui ekor mencit

Diteteskan darah ke strip tes asam urat yang telah dipasang ke
alat Nesco® Multicheck Uric Acid.
Dilihat kadar asam urat pada layar monitor
Dicatat kadar asam uratnya
Hasil

Universitas Sumatera Utara

32

Lampiran 3.
3. Berat Badan Mencit
3.1. Data Mentah Berat Badan Mencit
Perlakuan

Berat Badan (g)

Ulangan
Aquadest

Diet Otak Sapi

Diet Otak Sapi +
0,1 mg EDS

Diet Otak Sapi +
0,2 mg EDS

Diet Otak Sapi +
0,3 mg EDS

0

7

14

21

1

25

26

28

25

2

25

28

26

29

3

26

24

25

25

4

25

28

26

26

5

27

27

29

26

1

29

32

30

28

2

28

29

27

28

3

27

29

27

26

4

26

26

25

26

5

25

26

26

25

1

25

26

26

25

2

30

28

27

28

3

26

27

26

27

4

25

28

26

27

5

26

29

27

28

1

28

30

29

28

2

25

26

27

26

3

30

31

28

27

4

26

32

28

27

5

26

24

27

25

1

26

24

26

25

2

27

28

25

26

3

27

28

26

28

4

26

29

27

25

5

27

26

26

26

3.2. Rata-rata Berat Badan
Perlakuan

Berat Badan (g)
hari ke 0

hari ke 7

hari ke 14

hari ke 21

P1

25,6

26,6

26,8

26,2

P2

27

28,4

27

26,6

P3

26,4

27,6

26,4

27

P4

27

28,6

27,8

26,6

P5

26,6

27

26

26

Universitas Sumatera Utara

33

3.3. Analisis Statistik Berat Badan

ANOVA
BB_0
Between Groups
Within Groups
Total

Sum of
Squares
6,640
47,600
54,240

df
4
20
24

Mean Square
1,660
2,380

F
,697

Sig.
,603

Mean Square
3,740
5,240

F
,714

Sig.
,592

Mean Square
2,300
1,540

F
1,494

Sig.
,242

Mean Square
,760
1,760

F

Sig.
,784

ANOVA
BB_7
Between Groups
Within Groups
Total

Sum of
Squares
14,960
104,800
119,760

df
4
20
24

ANOVA
BB_14
Between Groups
Within Groups
Total

Sum of
Squares
9,200
30,800
40,000

df
4
20
24

ANOVA
BB_21
Between Groups
Within Groups
Total

Sum of
Squares
3,040
35,200
38,240

df
4
20
24

,432

Universitas Sumatera Utara

34

Lampiran 4.
4. Kadar Asam Urat
4.1. Data Mentah Kadar Asam Urat
Perlakuan
aquadest

Diet Otak Sapi

Diet Otak Sapi + 1 mg
ekstrak

Diet Otak Sapi + 2 mg
ekstrak

Diet Otak Sapi + 3 mg
ekstrak

Kadar Asam Urat (mg/dl)

Ulangan
0

7

14

21

1

0,89

0,91

0,91

0,9

2

0,95

0,93

0,95

0,96

3

0,94

0,95

1,02

0,96

4

1,31

1,27

1,15

1,17

5

1,16

1,21

1,12

1,16

1

0,96

2,4

2,32

1,96

2

1,06

2,6

2,98

2,24

3

1,12

2,63

2,6

2,12

4

1,24

2,41

3,24

2,16

5

1,02

2,63

2,72

2,03

1

0,91

2,46

2,01

1,25

2

0,92

2

1,6

0,99

3

1,02

2,14

1,74

1,06

4

0,99

2,15

1,68

1,01

5

1,04

2,23

1,93

1,12

1

1,24

3,03

2,4

1,2

2

0,96

2,96

2,32

0,95

3

1,04

2,98

2,25

0,99

4

1,21

3,21

2,67

1,19

5

0,9

2,62

2,22

0,96

1

1,32

3,05

2,3

1,56

2

0,94

2,51

1,94

1,02

3

0,89

2,4

1,85

0,97

4

1,17

2,15

1,9

1,21

5

1,26

2,12

2,26

1,36

4.2. Rata-rata Kadar Asam Urat
Perlakuan

Kadar Asam Urat (mg/dl)
hari ke 0

hari ke 7

hari ke 14

hari ke 21

P1

1,05

1,05

1,03

1,03

P2

1,08

2,53

2,77

2,1

P3

0,98

2,2

1,76

1,08

P4

1,07

2,96

2,37

1,06

P5

1,12

2,45

2,05

1,22

Universitas Sumatera Utara

35

4.3. Analisis Statistik Kadar Asam Urat

ANOVA
hari_0
Sum of
Squares
1400,800
12247,200
13648,000

Between Groups
Within Groups
Total

df
4
20
24

Mean Square
350,200
612,360

F
,572

Sig.
,686

Mean Square
24089,540
7313,440

F
3,294

Sig.
,032

ANOVA
hari_7
Between Groups
Within Groups
Total

Sum of Squares
96358,160
146268,800
242626,960

df
4
20
24

Multiple Comparisons
Dependent Variable: hari_7
Bonferroni
(I)
perlakuan
u1

u2

u3

u4

u5

(J)
perlakuan
u2
u3
u4
u5
u1
u3
u4
u5
u1
u2
u4
u5
u1
u2
u3
u5
u1
u2
u3
u4

Mean
Difference (I-J)
-58,00000
-78,20000
-190,60000*
-96,00000
58,00000
-20,20000
-132,60000
-38,00000
78,20000
20,20000
-112,40000
-17,80000
190,60000*
132,60000
112,40000
94,60000
96,00000
38,00000
17,80000
-94,60000

Std.
Error
54,08675
54,08675
54,08675
54,08675
54,08675
54,08675
54,08675
54,08675
54,08675
54,08675
54,08675
54,08675
54,08675
54,08675
54,08675
54,08675
54,08675
54,08675
54,08675
54,08675

Sig.
1,000
1,000
,021
,911
1,000
1,000
,235
1,000
1,000
1,000
,508
1,000
,021
,235
,508
,956
,911
1,000
1,000
,956

95% Confidence Interval
Lower
Upper
Bound
Bound
-228,5572
112,5572
-248,7572
92,3572
-361,1572
-20,0428
-266,5572
74,5572
-112,5572
228,5572
-190,7572
150,3572
-303,1572
37,9572
-208,5572
132,5572
-92,3572
248,7572
-150,3572
190,7572
-282,9572
58,1572
-188,3572
152,7572
20,0428
361,1572
-37,9572
303,1572
-58,1572
282,9572
-75,9572
265,1572
-74,5572
266,5572
-132,5572
208,5572
-152,7572
188,3572
-265,1572
75,9572

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

Universitas Sumatera Utara

36

ANOVA
hari_14
Between Groups
Within Groups
Total

Sum of Squares
90373,360
84132,800
174506,160

df
4
20
24

Mean Square
22593,340
4206,640

F
5,371

Sig.
,004

Multiple Comparisons
Dependent Variable: hari_14
Bonferroni
(I)
perlakuan
u1

u2

u3

u4

u5

(J)
perlakuan
u2
u3
u4
u5
u1
u3
u4
u5
u1
u2
u4
u5
u1
u2
u3
u5
u1
u2
u3
u4

Mean
Difference (IJ)
-174,20000*
-76,20000
-91,00000
-26,40000
174,20000*
98,00000
83,20000
147,80000*
76,20000
-98,00000
-14,80000
49,80000
91,00000
-83,20000
14,80000
64,60000
26,40000
-147,80000*
-49,80000
-64,60000

Std.
Error
41,02019
41,02019
41,02019
41,02019
41,02019
41,02019
41,02019
41,02019
41,02019
41,02019
41,02019
41,02019
41,02019
41,02019
41,02019
41,02019
41,02019
41,02019
41,02019
41,02019

Sig.
,004
,780
,383
1,000
,004
,269
,561
,018
,780
,269
1,000
1,000
,383
,561
1,000
1,000
1,000
,018
1,000
1,000

95% Confidence Interval
Lower
Upper
Bound
Bound
-303,5531
-44,8469
-205,5531
53,1531
-220,3531
38,3531
-155,7531
102,9531
44,8469
303,5531
-31,3531
227,3531
-46,1531
212,5531
18,4469
277,1531
-53,1531
205,5531
-227,3531
31,3531
-144,1531
114,5531
-79,5531
179,1531
-38,3531
220,3531
-212,5531
46,1531
-114,5531
144,1531
-64,7531
193,9531
-102,9531
155,7531
-277,1531
-18,4469
-179,1531
79,5531
-193,9531
64,7531

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

Universitas Sumatera Utara

37

ANOVA
hari_21
Between Groups
Within Groups
Total

Sum of
Squares
48405,440
10826,000
59231,440

df
4
20
24

Mean Square
12101,360
541,300

F
22,356

Sig.
,000

Multiple Comparisons
Dependent Variable: hari_21
Bonferroni

95% Confidence Interval
(I)

(J)

perlakuan

perlakuan

u1

u2

u2

-107,20000

*

Error

Sig.

Upper

Bound

Bound

-153,6011

-60,7989

u3

-5,60000 14,71462

1,000

-52,0011

40,8011

u4

18,80000 14,71462

1,000

-27,6011

65,2011

u5

-19,40000 14,71462

1,000

-65,8011

27,0011

*

u1

107,20000

14,71462

,000

60,7989

153,6011

u3

101,60000* 14,71462

,000

55,1989

148,0011

u4

126,00000

*

14,71462

,000

79,5989

172,4011

87,80000

*

14,71462

,000

41,3989

134,2011

5,60000 14,71462

1,000

-40,8011

52,0011

14,71462

,000

-148,0011

-55,1989

u4

24,40000 14,71462

1,000

-22,0011

70,8011

u5

-13,80000 14,71462

1,000

-60,2011

32,6011

u1

-18,80000 14,71462

1,000

-65,2011

27,6011

14,71462

,000

-172,4011

-79,5989

u3

-24,40000 14,71462

1,000

-70,8011

22,0011

u5

-38,20000 14,71462

,173

-84,6011

8,2011

u1

19,40000 14,71462

1,000

-27,0011

65,8011

14,71462

,000

-134,2011

-41,3989

u3

13,80000 14,71462

1,000

-32,6011

60,2011

u4

38,20000 14,71462

,173

-8,2011

84,6011

u1

u2

u5

Difference (I-J)

Lower

,000

u2

u4

Std.

14,71462

u5
u3

Mean

u2

-101,60000

-126,00000

-87,80000

*

*

*

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

Universitas Sumatera Utara