Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) Terhadap Penurunan Kadar Asam Urat Mencit (Mus musculus L.) Jantan Hiperurisemia

Lampiran 1. Dokumentasi Penelitian 1.1. Proses Pembuatan Ekstrak

1. Daun sirsak dikeringkan 2. Daun sirsak telah dipotong

3. Daun sirsak telah dihaluskan 4. Simplisa di shaker

5. Simplisa disaring 6. Simplisa dipekatkan

1.2 Pembuatan Diet Otak Sapi

1. Otak sapi segar 2. Otak sapi yang sudah di

haluskan disaring

Lampiran 2. Tahap Kerja Penelitian

2.1 Prosedur Percobaan

2.1.1. Tahap Persiapan Hewan Coba

2.1.2. Pembuatan Diet Otak Sapi

Mencit

Perlakuan

dibagi 5 kelompok dan 5 ulangan

diaklimatisasi dengan memberi makan pelet dan diberi air minum

dipuasakan selama 24 jam setelah aklimatisasi diberi perlakuan

100 gr otak sapi

otak sapi diberikan pada mencit 1 kali sehari secara oral. disaring dengankain kasa dan dimasukkan ke

dalam wadah.

dihaluskan dengan menambahkan 25 mL air dipotong kecil-kecil

dicuci bersih

2.1.3. Persiapan Ekstrak Daun Sirsak

2.1.4. Pemberian Perlakuan 2.1.4.1. Induksi Hiperurisemia

2.1.4.2. Pemberian Ekstrak Daun Sirsak

Daun Sirsak

Hasil

dibersihkan dari kotoran ditimbang berat basah

disaring dengan kertas saring di jemur dengan suhu ruang hingga

dibiarkan selama 5 hari sambil diaduk 3-4 kali

dimasukkan kedalam bejana tertutup lalu dibasahi dengan etanol 70% hingga semua serbuk terendam di haluskan dan ditimbang setelah menjadi bubuk

di keringkan selama 24 jam di atas penangas air sampai ekstrak kental

di pekatkan dengan rotari evaporator

Mencit

Di ukur kadar asam uratnya

Diberi makanan diet otak sapi dari hari pertama hingga hari ke 11

Hasil

Mencit

Di ukur kadar asam uratnya

Diberi ekstrak daun sirsak (EDS) dari hari ke 12 hingga hari ke 21

2.2. Parameter Pengamatan 2.2.1. Uji fitokimia

2.2.1.1. Alkaloid

2.2.1.2 Flavonoid

1g ekstrak daun sirsak

tabung pertama sebagai blanko (ditambah amonia 25% hingga pH 8-9, ditambah 3 tetes kloroform, diuapkan, ditambahkan 2mL HCl 2M, diaduk dan disaring)

dipisah menjadi 4 bagian dan dimasukkan ke dalam ditambah 3 tetes HCl 2

diaduk dan disaring ditambahkan 0,5 g NaCl. ditambahkan 5 mL HCl 2 M dilarutkan dalam 10 mL kloroform

hasil

diamati endapan yang terbentuk

tabung ke empat ditambah reagen mayer tabung ke tiga ditambah reagen dragendroff tabung ke dua ditambah reagen wagner

0,1 g ekstrak daun sirsak

Hasil

diamati perubahan warna dipanaskan selama 10 menit ditambahkan 10 tetes HCl 37 % diambil larutan 1 ml

2.2.1.3 Saponin, Tanin dan Polifenol

2.2.2. Pengukuran Berat Badan Mencit

2.2.3. Pengukuran Kadar Asam Urat

Mencit

Ditimbang dengan timbangan analitik

Dilihat dan dicatat berat badan mencit yang muncul di monitir timbangan analitik

Hasil

Mencit

Diambil darah melalui ekor mencit

Diteteskan darah ke strip tes asam urat yang telah dipasang ke alat Nesco® Multicheck Uric Acid.

Dilihat kadar asam urat pada layar monitor Dicatat kadar asam uratnya

Hasil

0,1 gr ekstrak daun sirsak

Diamati perubahan warna yang terjadi Filtrat ke tiga ditambahkan 5 tetes gelatin filtrat kedua ditambahkan 3 tetes FeCl3 filtrat pertama senagai blanko

bagian kedua ditambah 5 tetes NaCl 10 % dan disaring. Filtrat yang diperoleh dibagi menjadi tiga bagian

bagian pertama dikocok selama 10 detik dan dibiarkan hingga terbentuk buih stabil selama 10 menit

dilarutkan dalam akuades panas kemudian dibagi menjadi 2 bagian

Lampiran 3.

3. Berat Badan Mencit

3.1. Data Mentah Berat Badan Mencit Perlakuan

Ulangan Berat Badan (g)

0 7 14 21

Aquadest _{1 25 26 28 25}

2 25 28 26 29

3 26 24 25 25

4 25 28 26 26

5 27 27 29 26

Diet Otak Sapi _{1 29 32 30 28}

2 28 29 27 28

3 27 29 27 26

4 26 26 25 26

5 25 26 26 25

Diet Otak Sapi +

0,1 mg EDS 1 25 26 26 25

2 30 28 27 28

3 26 27 26 27

4 25 28 26 27

5 26 29 27 28

Diet Otak Sapi +

0,2 mg EDS 1 28 30 29 28

2 25 26 27 26

3 30 31 28 27

4 26 32 28 27

5 26 24 27 25

Diet Otak Sapi +

0,3 mg EDS 1 26 24 26 25

2 27 28 25 26

3 27 28 26 28

4 26 29 27 25

5 27 26 26 26

3.2. Rata-rata Berat Badan

Perlakuan Berat Badan (g)

hari ke 0 hari ke 7 hari ke 14 hari ke 21

P1 25,6 26,6 26,8 26,2

P2 27 28,4 27 26,6

P3 26,4 27,6 26,4 27

P4 27 28,6 27,8 26,6

3.3. Analisis Statistik Berat Badan

ANOVA

BB_0

Sum of

Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 6,640 4 1,660 ,697 ,603

Within Groups 47,600 20 2,380

Total 54,240 24

ANOVA

BB_7

Sum of

Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 14,960 4 3,740 ,714 ,592

Within Groups 104,800 20 5,240

Total 119,760 24

ANOVA

BB_14

Sum of

Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 9,200 4 2,300 1,494 ,242

Within Groups 30,800 20 1,540

Total 40,000 24

ANOVA

BB_21

Sum of

Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 3,040 4 ,760 ,432 ,784

Within Groups 35,200 20 1,760

Lampiran 4.

4. Kadar Asam Urat

4.1. Data Mentah Kadar Asam Urat

Perlakuan Ulangan Kadar Asam Urat (mg/dl)

0 7 14 21

aquadest _{1 0,89 0,91 0,91 0,9}

2 0,95 0,93 0,95 0,96

3 0,94 0,95 1,02 0,96

4 1,31 1,27 1,15 1,17

5 1,16 1,21 1,12 1,16

Diet Otak Sapi _{1 0,96 2,4 2,32 1,96}

2 1,06 2,6 2,98 2,24

3 1,12 2,63 2,6 2,12

4 1,24 2,41 3,24 2,16

5 1,02 2,63 2,72 2,03

Diet Otak Sapi + 1 mg

ekstrak 1 0,91 2,46 2,01 1,25

2 0,92 2 1,6 0,99

3 1,02 2,14 1,74 1,06

4 0,99 2,15 1,68 1,01

5 1,04 2,23 1,93 1,12

Diet Otak Sapi + 2 mg

ekstrak 1 1,24 3,03 2,4 1,2

2 0,96 2,96 2,32 0,95

3 1,04 2,98 2,25 0,99

4 1,21 3,21 2,67 1,19

5 0,9 2,62 2,22 0,96

Diet Otak Sapi + 3 mg

ekstrak 1 1,32 3,05 2,3 1,56

2 0,94 2,51 1,94 1,02

3 0,89 2,4 1,85 0,97

4 1,17 2,15 1,9 1,21

5 1,26 2,12 2,26 1,36

4.2. Rata-rata Kadar Asam Urat

Perlakuan Kadar Asam Urat (mg/dl)

hari ke 0 hari ke 7 hari ke 14 hari ke 21

P1 1,05 1,05 1,03 1,03

P2 1,08 2,53 2,77 2,1

P3 0,98 2,2 1,76 1,08

P4 1,07 2,96 2,37 1,06

4.3. Analisis Statistik Kadar Asam Urat

ANOVA

hari_0

Sum of

Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 1400,800 4 350,200 ,572 ,686 Within Groups 12247,200 20 612,360

Total 13648,000 24

ANOVA

hari_7

Sum of Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 96358,160 4 24089,540 3,294 ,032 Within Groups 146268,800 20 7313,440

Total 242626,960 24

Multiple Comparisons

Dependent Variable: hari_7 Bonferroni (I) perlakuan (J) perlakuan Mean Difference (I-J) Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval Lower

Bound

Upper Bound u1 u2 -58,00000 54,08675 1,000 -228,5572 112,5572

u3 -78,20000 54,08675 1,000 -248,7572 92,3572 u4 -190,60000* 54,08675 ,021 -361,1572 -20,0428 u5 -96,00000 54,08675 ,911 -266,5572 74,5572 u2 u1 58,00000 54,08675 1,000 -112,5572 228,5572 u3 -20,20000 54,08675 1,000 -190,7572 150,3572 u4 -132,60000 54,08675 ,235 -303,1572 37,9572 u5 -38,00000 54,08675 1,000 -208,5572 132,5572 u3 u1 78,20000 54,08675 1,000 -92,3572 248,7572 u2 20,20000 54,08675 1,000 -150,3572 190,7572 u4 -112,40000 54,08675 ,508 -282,9572 58,1572 u5 -17,80000 54,08675 1,000 -188,3572 152,7572 u4 u1 190,60000* 54,08675 ,021 20,0428 361,1572 u2 132,60000 54,08675 ,235 -37,9572 303,1572 u3 112,40000 54,08675 ,508 -58,1572 282,9572 u5 94,60000 54,08675 ,956 -75,9572 265,1572 u5 u1 96,00000 54,08675 ,911 -74,5572 266,5572 u2 38,00000 54,08675 1,000 -132,5572 208,5572 u3 17,80000 54,08675 1,000 -152,7572 188,3572 u4 -94,60000 54,08675 ,956 -265,1572 75,9572

ANOVA

hari_14

Sum of Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 90373,360 4 22593,340 5,371 ,004 Within Groups 84132,800 20 4206,640

Total 174506,160 24

Multiple Comparisons

Dependent Variable: hari_14 Bonferroni (I) perlakuan (J) perlakuan Mean Difference (I-J) Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval Lower

Bound

Upper Bound u1 u2 -174,20000* 41,02019 ,004 -303,5531 -44,8469

u3 -76,20000 41,02019 ,780 -205,5531 53,1531 u4 -91,00000 41,02019 ,383 -220,3531 38,3531 u5 -26,40000 41,02019 1,000 -155,7531 102,9531 u2 u1 174,20000* 41,02019 ,004 44,8469 303,5531 u3 98,00000 41,02019 ,269 -31,3531 227,3531 u4 83,20000 41,02019 ,561 -46,1531 212,5531 u5 147,80000* 41,02019 ,018 18,4469 277,1531 u3 u1 76,20000 41,02019 ,780 -53,1531 205,5531 u2 -98,00000 41,02019 ,269 -227,3531 31,3531 u4 -14,80000 41,02019 1,000 -144,1531 114,5531 u5 49,80000 41,02019 1,000 -79,5531 179,1531 u4 u1 91,00000 41,02019 ,383 -38,3531 220,3531 u2 -83,20000 41,02019 ,561 -212,5531 46,1531 u3 14,80000 41,02019 1,000 -114,5531 144,1531 u5 64,60000 41,02019 1,000 -64,7531 193,9531 u5 u1 26,40000 41,02019 1,000 -102,9531 155,7531 u2 -147,80000* 41,02019 ,018 -277,1531 -18,4469 u3 -49,80000 41,02019 1,000 -179,1531 79,5531 u4 -64,60000 41,02019 1,000 -193,9531 64,7531

ANOVA

hari_21

Sum of

Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 48405,440 4 12101,360 22,356 ,000 Within Groups 10826,000 20 541,300

Total 59231,440 24

Multiple Comparisons

Dependent Variable: hari_21 Bonferroni (I) perlakuan (J) perlakuan Mean Difference (I-J) Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval Lower

Bound

Upper Bound u1 u2 -107,20000* 14,71462 ,000 -153,6011 -60,7989

u3 -5,60000 14,71462 1,000 -52,0011 40,8011 u4 18,80000 14,71462 1,000 -27,6011 65,2011 u5 -19,40000 14,71462 1,000 -65,8011 27,0011 u2 u1 107,20000* 14,71462 ,000 60,7989 153,6011 u3 101,60000* 14,71462 ,000 55,1989 148,0011 u4 126,00000* 14,71462 ,000 79,5989 172,4011 u5 87,80000* 14,71462 ,000 41,3989 134,2011 u3 u1 5,60000 14,71462 1,000 -40,8011 52,0011 u2 -101,60000* 14,71462 ,000 -148,0011 -55,1989 u4 24,40000 14,71462 1,000 -22,0011 70,8011 u5 -13,80000 14,71462 1,000 -60,2011 32,6011 u4 u1 -18,80000 14,71462 1,000 -65,2011 27,6011 u2 -126,00000* 14,71462 ,000 -172,4011 -79,5989 u3 -24,40000 14,71462 1,000 -70,8011 22,0011 u5 -38,20000 14,71462 ,173 -84,6011 8,2011 u5 u1 19,40000 14,71462 1,000 -27,0011 65,8011 u2 -87,80000* 14,71462 ,000 -134,2011 -41,3989 u3 13,80000 14,71462 1,000 -32,6011 60,2011 u4 38,20000 14,71462 ,173 -8,2011 84,6011 *. The mean difference is significant at the 0.05 level.

DAFTAR PUSTAKA

Abdullahi, W., Hamzah, R.U., Jigam, A. A., Yahya, A., Kabiru, A. Y., Muhammad, A., Sakpe, S., Adefolalu, F. S., Isah, M. C. & Kolo, M. Z. 2012. Inhibitory activity of xanthine oxidase by fractions Crateva adansonii, J. of AcuteDisease, 126-129.

Adjie, S. 2011. Dahsyatnya Sirsak Tumpas Penyakit. Jakarta: Pustaka Bunda. Arsyiyanti, C. 2012. Pengaruh Pemberian Jus Biji Pepaya (Carica papaya L.)

Terhadap Kadar Asam Urat Tikus Sparague Dawley Dislipidemia. Semarang: Universitas Diponegoro.

Azmi, U. 2010. Efek Ekstrak Etanol Daging Buah Mahkota Dewa (Phaleria

macrocarpa (Scheff.) Boerl.) Terhadap Penurunan Kadar Asam Urat

Pada Mencit Putih Jantan yang Diinduksi Potasium Oxonate. Skripsi. Surakarta: Universitas Muhammadiyah Surkarta.

Azmi, S. M. N., Jamal, P. & Amid, A. 2012. Xanthine Oxidase Inhibitory Activity from Potential Malaysian Medicinal Plant as Remedie for Gout.

International Food Research Journal, 19 (1): 159-165.

Becker & Meenaskshi j. 2005. Clinical Gout and Phatogenesis of Hyperurisemia In Arthritis and Allied Conditions, A text book of Rheumathology, 13(2) Editor WJ Koopman, Baltimore: Williams &Wikins a Wavelry com: 2303-2339.

Boudiaf, K., Houcher, Z., Sobhi, W., and Benboubetra, M. 2010. Evaluation of Antioxidant and Anti-Xanthine Oxidoreductase Activities of Nigella sativa Linn seeds extracts. Journal of Applied Biological Sciences; 4(1): 7-16.

Cos, P., Ying, L., Calomme, M., Hu, J. P., Cimanga, K., Poel, B. V., Pieters, L., Vlietinck, A. J., and Berghe, D. V. 1998. Structure-Activity Relationship and Classification of Flavonoids as Inhibitors of Xanthine Oxidase and Superoxide Scavengers. Journal of natural product, 61 (1): 71-76.

Gillium, R. F. 1999. Risk factors for stroke in blacks: A critical review. Am J Epidemiol, 150 pp. 1266-74.

Harborne, J. B. 1987. Metode Fitokimia: Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Terjemahan Padmawinata, K dan Soediro, I. Edisi kedua. Bandung: ITB

Hawkins D. W, Daniel W. R. 2005. Pharmacoterahy; A Pathophysiological

Hidayat, R. 2009, Gout dan Hiperurisemia, Medicinus, Vol. 22, No.1.

Iswantini, D. & Darusman L. K. 2003. Effectof Sidaguri as an uric acid lowering agent on the acitivity of oxidase enzim. Proceeding of International

Symposium on Biomedicine. Biopharmacia Research Center. Bogor

Agriculture University.

Katzung, B. G., Masters, S. B. & Trevor, A. J. 2012. Basic & Clinical Pharmacology, 12 Ed. New York: McGraw-Hill.

Kelley W. N. & Wortman. D. 1997. Gout and Hyperuricemia. In Textbook of

Rheumatology, fifth edition, Editor W N kelley. Philadelpia: WB Saunder

Comp: 1314-1350.

Kim, S. Y., Guevara, J. P., Kim, K. M., Choi, H. K., Heitjan, D. F. & Albert, D.A. 2010. Hyperuricemia and Risk of Stroke: A Systematic Review

and Meta analysis. NIH Public Access. pp: 885–892.

Lamb, E., & Newman, D. J. 2006. Tietz Text Book of Clinical Chemistry and

Molecular Diagnostic. 4th Ed. USA: Elsevier Saunders.

Lelyana dan Rosa. 2008. Pengaruh Kopi terhadap Kadar Asam Urat Darah. Semarang: Universitas Diponegoro.

Mardiana, L dan Juwita, R. 2011. Ramuan dan Khasiat Sirsak Terbukti secara

Ilmiah Tumpas Penyakit Kanker. Depok: Penebar Swadaya.

Mazzali M., Kanellis J., Han L., Feng L., Yang X. L., Chen Q., Duk-hee., Katherine l., Gordon., Watanabe S., Nakagawa., and Richard J. 2001. Hyperuricemia Induces A Primary Renal Arteriolopathy in Rats By A Blood Pressure-independent Mechanism,Division of Nephrology, Baylor College of Medicine, Houston, Texas 77030.

Mudrikah F. 2006. Potensi Ekstrak Jahe Merah (Zingiber Officinale Rosc.) Dan Herba Suruhan Sebagai Antihiperurisemia Pada Tikus. (Skripsi). Bogor: FMIPA Institut Pertanian Bogor.

Murray K. R, Granner K. D, Rodwell W. V. 2006. Biokimia Harper. Edisi 27. Singapore: Mc Graw Hill. Halaman 301-309.

Noormindhawati L. 2013. Jus Sakti Tumpas Penyakit Asam Urat Edisi I. Jakarta: Pustaka Makmur.

Purwatiningsih & Arief, R. H. 2010. Antyhyperuricemia activity of kepel leaves extract and xanthine oxidase inhibitory study. International Journal of

Pharmaceutical Science. 2: 213-219.

Putra, T. R. 2006. Hiperurisemia. Dalam Aru W. Sudoyo. Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam. Jakarta: Pusat Penerbitan Departmen Ilmu Penyakit Dalam FKUI.

Rahmadani, T. 2004. Isolasi dan identifikasi senyawa bioaktif seledri dalam menghambat aktivitas enzim XO. (Skripsi). Bogor: FMIPA IPB.

Rahman, H., Arifin, H., Dewi, K. G., Rizal, Z. Pengaruh Pemberian Jus Buah Sirsak (Annona Muricata L.) Terhadap Kadar Asam Urat Darah Mencit Putih Jantan Hiperurisemia. Padang: Universitas Andalas Padang. 229-230.

Rodwell, V. W. 1995. Metabolisme Nukleotida Purin dan Pirimidin, Biokimia

Harper. Diterjemahkan oleh Andry Hartono. Jakarta: Penerbit Buku

Kedokteran EGC. Hal. 378 393.

Shamley. D., 2005. Pathophysiology An Essential Text for the Allied Health

Professions, Elsevier Limited, USA

Sjamsul A. A. 1986, Buku Materi Pokok Kimia Organik Bahan Alam. Jakarta: Universitas Terbuka.

Soeparman, Waspadji dan Sarwono. 1998. Ilmu Penyakit Dalam. Jakarta: Balai Penerbit Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia: 1422-1426

Sustrani, Lanny, Alam, S., dan Hadibroto, I. 2005. Asam Urat. Gramedia Pustaka Utama. Jakarta. hal 25-26

Syamsuhidayat, S. S dan Hutapea, J. R. 1991. Inventaris tanaman obat Indonesia (Edisi kedua). Jakarta: Departemen Kesehatan RI.

Terkeltaub R. 2001. Gout, Epidemology, Pathology dan Pathogenesis. In Primer On The Rheumatic Disease Ed 12. Georgia: Arthritis Foundation. Halaman 307-312.

Thomson, E. 1985. Drug bioscreming fundamental of drug evalution techniques

in pharmacology. New York: Grace Way PublishingCampany.

Tjitrosoepomo. G. 2005. Taksonomo Umum (Dasar-dasar Taksonomi Tumbuhan). Edisi ketiga. Gajah Mada University Press. Jogyakarta.

Utami, P. 2003, Tanaman Obat untuk Mengatasi Rematik dan Asam Urat, Agromedia Pustaka, Jakarta.

Wahjuni, S., Putra, M. I. B., Rahayu A. N. P., & Wahyu Dwijani, S. 2012. Uric Acid Inhibition Activity of Annona muricata L. Leave Extract in Hyperuricemia induced Wistar Rat. World Science Publisher, United States. 2(01):86-90.

Yenrina, R & Diah, K. 2002. Diet Sehat Untuk Penderita Asam Urat. Jakarta: Penebar Swadaya. Halaman 6-7.

Zhao, Y., Yang, X., Lu, W., Liao, H. & Liao F. 2009. Uricase Based Methods for Determination of Uric Acid in Serum. Microcim Acta, 164:1-6.

BAB 3

METODOLOGI PENELITIAN

3.1. Waktu dan Tempat

Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Juli 2015 s/d Desember 2015 di Laboratorium Fisiologi Hewan, Departemen Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sumatera Utara, Medan.

3.2. Alat dan Bahan

Alat dan bahan yang digunakan pada percobaan ini adalah

a. Untuk preparasi ekstrak daun sirsak (EDS) alat yang digunakan adalah gunting, blender, gelas beaker, gelas ukur, pisau, kertas saring, rotary evaporator, penangas air, spatula, shaker dan timbangan. Sedangkan bahan yang digunakan adalah daun sirsak, etanol 70% , aquadest dan kertas saring. b. Untuk preparasi penginduksi (diet otak sapi) alat yang digunakan adalah

wadah untuk otak sapi, blender, kain saring, dan timbangan digital. Sedangkan bahan yang digunakan adalah otak sapi, kain kasa dan air.

c. Untuk pemberian perlakuan alat yang digunakan kandang mencit 5 buah, spidol permanen, spit 1 ml dan jarum gavage. Sedangkan bahan yang digunakan adalah mencit jantan (Mus musculus L.) 25 ekor, makanan dan minuman mencit.

d. Untuk pengamatan alat yang digunakan adalah timbagan digital, tes asam urat (Nesco® Multicheck Uric Acid), kamera digital dan alat tulis. Sedangkan bahan yang digunakan adalah strip tes asam urat dan aquadest.

.

3.3. Rancangan penelitian

Percobaan ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 3 perlakuan ekstrak etanol daun sirsak (EDS), dan 2 kontrol yaitu kontrol blank (tanpa diberi perlakuan) dan kontrol perlakuan (pemberian makanan diet purin

tinggi (MDPT). Jumlah ulangan yang digunakan sebanyak 5 ekor dengan berat badan 20-25 g.

Kelompok perlakuan adalah:

a. P1 = kontrol negatif yang diberikan akuades 0,1 ml per oral selama 21 hari dari hari pertama hingga hari ke-21.

b. P2 = kontrol positif yang diberikan diet otak sapi 0,15 ml/ekor selama 11 hari dari hari pertama hingga hari ke-11. Pemberian dihentikan dari hari ke-12 hingga hari terakhir pengukuran.

c. P3= diberi diet otak sapi 0,15 ml/ekor selama 11 hari dari hari pertama hingga hari 11 dan EDS dengan dosis 0,1 mg selama 10 hari dimulai dari hari ke-12 hingga hari ke-21.

d. P4

=

diberi diet otak sapi 0,15 ml/ekor selama 11 hari dari hari pertama hingga hari 11 dan EDS dengan dosis 0,2 mg selama 10 hari dimulai dari hari ke-12 hingga hari ke-21.

e. P5= diberi diet otak sapi 0,15 ml/ekor selama 11 hari dari hari pertama hingga hari 11 dan EDS dengan dosis 0,3 mg selama 10 hari dimulai dari hari ke-12 hingga hari ke-21.

3.4. Prosedur Percobaan

3.4.1. Persiapan Hewan Penelitian

Pada tahap persiapan hewan coba terdiri dari lima kelompok dan lima ulangan, sebelum diberi perlakuan mencit diaklimatisasi selama 10 hari, mencit diberi makan pelet dan diberi air minum. Jumlah mencit yang digunakan setiap perlakuan sebanyak 5 ekor dengan berat badan rata-rata 25-30g.

Mencit yang akan digunakan adalah mencit yang sehat, tingkah laku normal, tidak menunjukkan kelainan yang berarti pada selisih berat badan selama aklimatisasi tidak lebih dari 10 % (Thomson, 1985).

3.4.2. Persiapan Diet Hiperurisemia

Diet otak sapi dibuat dari otak sapi segar 100 g dicuci bersih, dipotong kecil-kecil, dimasukkan ke dalam blender. Dihaluskan dengan menambahkan 25 ml air.

Kemudian disaring dengan kain kasa dan dimasukkan ke dalam wadah. Otak sapi diberikan pada mencit dan 1 kali sehari secara oral (Rahman, 2004).

3.4.3. Persiapan Ekstrak Daun Sirsak (Annona muricata L.).

Daun sirsak dibersihkan dari pengotor lalu dicuci hingga bersih, ditimbang dan diperoleh berat basah, selanjutnya daun sirsak tersebut dikering anginkan selama 3 hari. Daun sirsak yang telah kering di blender menjadi serbuk lalu dimasukkan ke dalam botol bertutup kemudian dibasahi dengan etanol 70% sampai semua serbuk terendam, lalu di biarkan selama dua hari. Serbuk disaring dengan menggunakan kertas penyaring. Hasil penyaringan yang diperoleh diuapkan diatas

water bath dan diperoleh ekstrak kental daun sirsak yang telah siap digunakan.

(Maulina, 2012).

3.4.4. Pemberian Perlakuan 3.4.4.1. Penghitungan Dosis

Volume perlakuan diet otak sapi diberikan sebanyak 0,15 ml/ekor sedangkan dosis untuk ekstrak daun sirsak (Annona muricata L.) digunakan tiga dosis yang berbeda yaitu:

a. Dosis I : 0.1mg/g BB ekstrak kental + 1 ml akuades b. Dosis II : 0,2 mg/g BB ekstrak kental + 1ml akuades c. Dosis III: 0,3 mg/g BB ekstrak kental + 1 ml akuades Volume pemberian pada tiap-tiap mencit 0,1 ml/ekor .

3.4.4.2. Induksi Hiperurisemia

Semua hewan percobaan diberi diet otak sapi 0,15 ml/ekor per oral selama 11 hari kecuali pada P1 (kontrol negatif).

3.5. Parameter Pengamatan 3.5.1.Uji Fitokimia

3.5.1.1. Alkaloid

Sebanyak 1 g ekstrak dilarutkan dalam 10 ml kloroform. Ditambahkan 5 ml HCl 2 M kemudian ditambahkan 0,5 g NaCl. Campuran diaduk dan disaring. Filtrat yang diperoleh ditambah 3 tetes HCl 2 M kemudian dipisah menjadi 4 bagian. Bagian pertama sebagai blanko, bagian kedua ditambah reagen wagner, bagian ketiga

ditambah reagen dragendorff, dan bagian keempat ditambah reagen mayer. untuk uji penegasan, bagian pertama ditambah amonia 25 % hingga mencapai pH 8-9. Kemudian ditambahkan 3 tetes kloroform selanjutnya diuapkan di atas penangas. Filtrat ditambahkan 2 mL HCl 2 M kemudian diaduk dan disaring. Filtrat dibagi menjadi 4 bagian seperti prosedur sebelumnya. Terbentuknya endapan menunjukkan adanya alkaloid.

3.5.1.2. Flavonoid

Sebanyak 0,1 g sampel dilarutkan dalam 3 mL etanol 70 %. Larutan diambil 1 ml dan ditambahkan 10 tetes HCl 37 % kemudian dipanaskan selama 10 menit. Hasil positif ditunjukkan oleh adanya perubahan warna menjadi kuning, jingga, atau merah.

3.5.1.3. Saponin, Tanin dan Polifenol

Sebanyak 0,1 g Sampel dilarutkan dalam akuades panas kemudian dibagi menjadi 2 bagian. Bagian pertama dikocok selama 10 detik dan dibiarkan hingga terbentuk buih stabil selama 10 menit. Bagian kedua ditambah 5 tetes NaCl 10 % dan disaring. Filtrat yang diperoleh dibagi menjadi tiga bagian. Filtrat pertama sebagai blanko, filtrat kedua ditambah 3 tetes FeCl3, dan filtrat ketiga ditambah 5 tetes gelatin. Hasil positif polifenol ditunjukkan oleh adanya perubahan warna mejadi hitam kehijauan. Sedangkan hasil positif tanin ditunjukkan oleh adanya endapan putih.

3.5.2. Pengukuran Berat Badan Mencit

Pengukuran berat badan mencit dilakukan sebanyak 4 kali yaitu pada hari pertama sebelum perlakuan, hari ke-7, hari ke-14, dan hari ke-21. Berat badan mencit di timbang dengan timbangan digital dengan cara menaikkan mencit ketimbagan digital, di catat berat badan mencit yang tertera dimonitor timbangan. Pengukuran dilakukan pada pagi hari sebelum pemberian diet otak sapi.

3.5.3. Pengukuran Kadar Asam Urat Darah Mencit

Pengukuran kadar asam urat mencit dilakukan sebanyak yaitu pada hari pertama sebelum perlakuan, hari ke-7, hari ke-14, dan hari ke-21. darah diambil

melalui ekor mencit dengan cara memotong ekor mencit, kemudian darah yang keluar diteteskan pada strip tes asam urat yang telah dipasangkan ke alat Nesco®

Multicheck Uric Acid untuk ditentukan kadar asam uratnya. Asam urat hewan

dalam mg/dl dapat dilihat pada monitor Multi chek (Nesco®) setelah 5 detik.

3.6. Analisis Data

Data yang didapat dari setiap parameter (variabel) pengamatan dicatat dan disusun di dalam bentuk tabel. Data kuantitatif (variabel dependen) yang didapatkan, diuji dengan bantuan program statistik komputer program SPSS release 22.

BAB 4

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1. Uji Fitokimia secara kualitatif

Hasil uji fitokimia secara kualitatif dari ekstrak etanol daun sirsak (Annona

muricata L.) dapat dilihat pada Tabel 4.1.

Tabel 4.1. Hasil Uji Fitokimia Secara Kualitatif Dari Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona Muricata L.)

No Penapisan Pereaksi Hasil

1 Flavonoid Mg/Hcl +++

2 Saponin Nacl -

3 Tanin Fecl3 -

4 Polifenol gelatin ++

5 Alkaloid Mayer -

Wagner ++

dragendrof -

Keterangan: (+++) = sangat banyak (++) = lumayan banyak (-) = tidak ada

Dari tabel hasil uji fitokimia di atas dapat dilihat bahwa ekstrak daun sirsak mengandung metabolit sekunder berupa flavonoid, polifenol, dan alkaloid pada uji wagner. Flavonoid merupakan kandungan terbanyak pada daun sirsak. Kandungan pada daun sirsak ini lah yang mampu menghambat kerja enzim

xanthine oxidase yang berperan dalam pembentukan asam urat. Flavonoid yang

terdapat dalam tumbuhan, dapat berbentuk aglikon bersifat kurang polar dan glikosida bersifat polar, sehingga dapat dimungkinkan senyawa-senyawa tersebut tersari dalam penyari yang kurang polar sampai dengan polar.

Salah satu kandungan kimia sirsak yang berperan penting untuk obat adalah flavonoid. Flavonoid banyak terdapat pada daun tanaman hal ini dipengaruhi oleh proses fotosintesis (Markham, 1998). Menurut Azmi (2010) flavonoid mempunyai gugus hidroksil dari atom C5 dan C7 serta ikatan rangkap antara C2 dan C3, esensial untuk aktivitas inhibisi yang tinggi dalam Xantin

Oksidase. Selain itu polifenol memiliki kemampuan sebagai inhibitor xantin oksidase yang mekanisme inhibisinya belum diketahui.

Berdasarkan pengujian yang dilakukan oleh wahjuni, ddk (2012) bahwa senyawa aktif pada ekstrak daun sirsak yang teridentifikasi adalah 2,3-dihidro-benzofuran; tetradekana; 1,4,4a,5,6,7,8,8a-oktahidroiso-kuinolin-3-etoksi; 4-hidroksi-3,5,6-trimetil-4-(3-oxo-1-butenil)-2-sikloheksena-1-on. Senyawa ini diduga berkontribusi dalam menurunkan kadar asam urat pada mencit, tetapi hingga saat ini belum ada penelitian lebih lanjut tentang peran utama dan mekanisme dari masing-masing senyawa ini terhadap penurunan kadar asam urat darah.

Menurut sjamsul (1986) golongan asam fenolat yang terdapat pada daun sirsak berupa asam kafeat, asam p-kumarat, asam p-hidroksibenzoat, asam ferulat dan asam vanilat sedangkan golongan flavonoid yang terdapat pada daun sirsak adalah flavon dan flavonol yang tersulih pada 3-0 yang memiliki gugus hidroksil pada posisi 4, 5 dan 7.

Polifenol juga ikut berperan dalam penurunan kadar asam urat karena polifenol dapat menghambat aktivitas xanthin oxidase dan superoksida sehingga kadar asam urat menurun. Senyawa polifenol merupakan bahan polimer penting dalam tumbuhan dan cenderung mudah larut dalam air karena berikatan dengan gula sebagai glikosida. Senyawa fenol meliputi aneka ragam senyawa yang berasal dari tumbuhan, yang mempunyai ciri-ciri sama yaitu adanya cincin aromatik yang mengandung satu atau dua gugus hidroksil. Senyawa fenol cenderung mudah larut dalam air karena pada umumnya sering kali berikatan dengan gula sebagai glikosida dan biasanya terdapat dalam vakuola sel (Harbone, 1987).

Menurut Cos et al., (1998) alkaloid memiliki gugus hidroksil yang berfungsi sebagai akseptor elektron dari xantin oksidase, alkaloid adalah golongan senyawa organik yang banyak ditemukan di alam. Sebagian besar alkaloid berasal dari tumbuhan dan tersebar luas dalam berbagai jenis tumbuhan. Semua alkaloid mengandung paling sedikit sebuah atom nitrogen yang biasanya bersifat basa. Sebagian besar atom nitrogen ini merupakan bagian dari cincin heterosiklik (Sjamsul, 1986).

4.2. Berat Badan Mencit (Mus musculus L.)

Pengaruh ekstrak daun sirsak (Annona muricata L.) terhadap berat badan mencit

(Mus musculus L.) jantan hiperurisemia yang diberikan diet otak sapi hari dan

ekstrak daun sirsak (EDS) diperoleh hasil sebagai berikut:

Tabel 4.2. Data berat badan mencit (Mus musculus L.) setelah pemberian diet otak sapi dan ekstrak daun sirsak (EDS).

Perlakuan

Berat Badan (g)

hari ke 0 hari ke 7 hari ke 14 hari ke 21

P1 26 27 27 26

P2 27 28 27 27

P3 26 27 26 27

P4 27 29 28 27

P5 27 27 26 26

Keterangan: P1= kontrol negatif P2= kontrol positif

P3= diet otak sapi + EDS 0,1 mg/g BB P4= diet otak sapi + EDS 0,2 mg/g BB P5= diet otak sapi + EDS 0,3 mg/g BB

Pada tabel di atas dapat dilihat bahwa rata-rata berat badan mencit setiap perlakuan pada hari ke 0, hari ke 7, hari ke 14 dan hari ke 21 mengalami perubahan berat badan. Hasil analisis statistik (ANOVA) menunjukkan bahwa perubahan berat badan mencit setelah pemberian diet otak sapi tidak signifikan atau tidak berbeda nyata (Lampiran 3) walaupun diet otak sapi yang diberikan memiliki kandungan lemak cukup tinggi yaitu 11 g/100 g yang berpotensi dalam menaikkan berat badan mencit. Terdapat hubugan antara berat badan dan kadar asam urat. Saat berat badan meningkat maka akan berpotensi dalam menaikkan kadar asam urat.

Menurut arsyiyanti (2012) lemak yang masuk ke dalam tubuh akan termetabolisme hingga menghasilkan keton. Kadar keton yang meningkat atau yang disebut dengan ketosis bersifat asam sehingga menyebabkan pH darah juga menjadi asam (adosis). Adosis terjadi karena kadar keton lebih besar daripada pembuangannya di ginjal. Ginjal yang berfungsi untuk mengeluarkan zat-zat yang tidak diperlukan oleh tubuh akan bekerja lebih berat untuk mengeluarkan keton sehingga proses pengeluaran zat-zat lain akan terhambat salah satunya adalah

asam urat. Asam urat akan terhambat pengeluarannya sehingga mengakibatkan kadar asam urat dalam darah meningkat.

Asam urat sebagai hasil sintesis purin pada kondisi hiperurisemia, merupakan faktor resiko dari kegemukan, kurangnya aktivitas, kenaikan kadar lipid, stroke selain hipertensi, diabetes melitus (DM). Selain itu faktor lingkungan juga berperan terhadap kejadian hiperurisemia (Gillium, 1999).

4.3.Kadar Asam Urat mencit (Mus musculus L.)

Pengamatan terhadap kadar asam urat mencit (Mus musculus L.) yang diberi ekstrak daun sirsak (Annona muricata L.) setelah diberi diet otak sapi dapat dilihat pada Gambar 4.1.

Gambar 4.1. Kadar Asam Urat Mencit (Mus Musculus L.) Jantan Hiperurisemia Yang Diberi Ekstrak Daun Sirsak (Annona Muricata L.) Dengan Dosis Yang Berbeda Setelah Diberi Diet Otak Sapi.

Keterangan P1= kontrol negatif, P2= kontrol positif, P3= diet otak sapi + EDS 0,1 mg/g BB, P4= diet otak sapi + EDS 0,2 mg/g BB, P5= diet otak sapi + EDS 0,3 mg/g BB.

Dari gambar diatas dapat dilihat bahwa kadar asam urat paling tinggi pada mencit jantan setelah diberi diet otak sapi terdapat pada P4 dengan kadar 2,96 mg/dl. Pada pengukuran kadar asam urat hari ke-0 setiap perlakuan berada pada kadar normal karena pengukuran kadar asam urat dilakukan satu hari sebelum

0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5

0 7 14 21

K ad ar A sam U rat ( m g/ d l) P1 P2 P3 P4 P5

pemberian diet otak sapi. Pengukuran dilakukan agar diketahui bahwa kadar asam urat pada setiap mencit yang akan diberi perlakuan berada pada kadar asam urat yang normal sehingga lebih efektif dalam melihat kenaikan kadar asam urat setelah diberi diet otak sapi.

Pada pengukuran kadar asam urat hari ke 7 terlihat bahwa kadar asam urat mencit pada P2, P3, P4 dan P5 mengalami kenaikan yang signifikan atau berbeda nyata (p<0,05) dan sudah mengalami hiperurisemia kecuali P1 sebagai kontrol negatif (akuades). Menurut Mazzali et al (2001) bahwa mencit dikatakan hiperurisemia bila kadar asam uratnya 1,7-3,0 mg/dl dengan kadar asam urat normal 0,5-1,4 mg/dl. Kenaikan kadar asam urat darah pada mencit terjadi karena pemberian diet otak sapi 0,15 ml/ ekor. Otak sapi mengandung kadar purin tinggi yang nantinya akan termetabolisme di dalam tubuh yang dibantu enzim xanthine

oksidase hingga terbentuk asam urat.

Menurut Noormindhawati (2013) yang menyebabkan kadar asam urat darah di dalam tubuh meningkat adalah produksi asam urat di dalam tubuh yang lebih banyak dari pada pembuangannya dan karena adanya asam urat yang terbentuk akibat metabolisme purin didalam tubuh. Purin berasal dari makanan yang mengandung protein seperti ikan kaleng, kerang, makarel, otak, jeroan, ginjal, jantung dan hati.

Di dalam bahan pangan, purin terdapat dalam asam nukleat berupa nukleoprotein. Di usus, asam nukleat dibebaskan dari nukleoprotein oleh enzim pencernaan (ribonuklease, deoksiribonuklease dan polinukleotidase). Asam nukleat ini akan dipecah lagi menjadi mononukleotida. Mononukleotida tersebut dihidrolisis menjadi nukleosida yang dapat secara langsung diserap oleh tubuh. Sebagian lagi mononukleotida dipecah lebih lanjut menjadi purin dan pirimidin. Purin kemudian teroksidasi setelah dikatabolisme dalam jaringan tubuh menjadi asam urat (Yenrina & Diah, 2002).

Pembentukan asam urat terjadi melalui jalur oksidasi hipoxanthin dan guanine menjadi xanthin yang dikatalisis oleh enzim xanthin oksidase dan

guanase xanthin. Kemudian xanthin akan teroksidasi menjadi asam urat dalam

reaksi selanjutnya yang dikatalisisasi oleh enzim xanthin oksidase (Murray et al., 1999).

Pengukuran kadar asam urat pada hari ke-14 menunjukkan bahwa kadar asam urat sudah mulai turun pada P3, P4 dan P5 tetapi pada P2 terjadi peningkatan kadar asam urat. Hal ini disebabkan karena P2 hanya diberikan diet otak sapi selama 11 hari tanpa pemberian ekstrak daun sirsak. Menurut Purwatiningsih & Arief (2010) kadar asam urat naik pada hewan percobaan setelah 11 hari pemberian makanan yang kaya purin. Pemasukan purin ke tubuh akan menyebabkan terbentuknya asam urat. Purin dalam bahan makanan terdapat dalam asam nukleat berupa nucleoprotein.

Demikian juga pada pemeriksaan hari ke-21 terjadi penurunan kadar asam urat yang signifikan atau bebeda nyata (p<0,05) pada semua kelompok perlakuan EDS. Pada P2 penurunan kadar asam urat tidak signifikan karena P2 merupakan kontrol positif (diet otak sapi). Kadar asam urat kembali normal kecuali P2 sedangkan pada P1 kadar asam urat tetap normal karena P1 merupakan kontrol negatif (akuades). Penurunan kadar asam urat terjadi setelah pemberian ekstrak daun sirsak yang memiliki senyawa antihiperurisemia yaitu flavonoid, alkaloid dan polifenol (Tabel 4.1). Senyawa flavonoid dan alkaloid dapat menghambat kerja enzim Xanthine Oxidase sehingga dapat menghambat pembentukan asam urat dalam tubuh (Cos et al., 1998).

Menurut Lelyana dan Rosa (2008) Apabila xanthine oxidase terhambat maka produksi xhantin berkurang sehingga produksi asam urat pun berkurang, maka hiperurisemia dan kristalisasi asam urat dapat diobati. Flavonoid diketahui dapat menurunkan asam urat dengan cara menghambat kerja xantin oksidase. Flavonoid mempunyai efek penghambat aktivitas xantin oksidase dengan daya inhibisi terkuat.

Menurut Azmi (2010) bahwa flavonoid juga bersifat antioksidan yang dapat menghambat kerja enzim xantin oksidase dan reaksi superoksida, sehingga proses pembentukan asam urat terlambat. Flavonoid golongan flavon dan flavonol memiliki daya inhibisi lebih tinggi daripada golongan flavonoid yang lainnya karena posisi gugus hidroksilnya lebih mudah menangkap elektron dari sisi aktif xantin oksidase. Senyawa lainnya seperti polifenol dan saponin juga berpotensi sebagai inhibitor xantin oksidase karena memiliki gugus hidroksil sebagai akseptor elektron dari xantin oksidase.

BAB 5

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Kesimpulan dari penelitian pengaruh ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L.) terhadap penurunan kadar asam urat mencit (Mus musculus L.) jantan hiperurisemia:

a. Pemberian diet otak sapi 0,15 ml/ekor dapat meningkatkan kadar asam urat dalam darah hingga mencapai rata-rata 2,96 mg/dl.

b. Pemberian ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L.) mempunyai aktivitas antihiperurisemia, aktivitas tersebut terdapat pada ketiga dosis yang digunakan (0,1 mg/g BB, 0,2 mg/g BB dan 0,3 mg/g BB). Penurunan optimal tedapat pada dosis 0,2 mg/g BB yaitu menurunkan kadar asam urat darah hingga mencapai rata-rata 1,06 mg/dl setelah pemberian ekstrak daun sirsak selama 10 hari.

5.2 Saran

Saran untuk penelitan selanjutnya adalah pemberian diet otak sapi dan ekstrak daun sirsak dilakukan sejalan (waktu bersamaan).

BAB 2

TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Tanaman Sirsak 2.1.1. Klasifikasi Tanaman

Menurut Tjitrosoepomo (2005) tanaman sirsak dapat diklasifikasikan sebagai berikut:

Kingdom : Plantae

Divisi : Spermatophyta Sub divisi : Angiospermae Kelas : Dicotyledoneae Ordo : Annonales Famili : Genus :

Spesies :Annona muricata L.

Di Indonesia nama sirsak memiliki banyak sebutan yaitu sirsak, nangka sabrang, nangka walanda, durian belanda (Melayu) sedangkan diluar negeri sirsak memiliki nama Soursop (Inggris), Mang Cau Xiem (Vietnam), Thurian Thet (Thailand), Guyabano (Pilipina).

2.1.2. Kandungan Kimia Dan Manfaat Daun Sirsak

Sirsak (Annona muricata L.) adalah tanaman yang mengandung senyawa flavonoid, tanin, fitosterol, kalsium oksalat dan alkaloid (Adjie, 2011). Antioksidan yang terkandung dalam buah sirsak antara lain adalah vitamin C. Hasil riset yang dilakukan oleh Adjie, 2011 menyatakan bahwa sirsak mengandung asetogenin yang mampu melawan sel kanker. Banyaknya manfaat sirsak membuat orang mulai beralih mengkonsumsi sirsak sebagai alternatif pencegahan dan pengobatan konvensional. Kandungan senyawa asetogenin pada daun sirsak berkhasiat sebagai antitumor.

Menurut Mardiana dan Juwita (2011) sejak dahulu masyarakat di daerah Kalimantan sering menggunakan daun sirsak untuk mengobati demam,

masyarakat di daerah Minahasa memanfaatkannya sebagai obat bisul dengan memanfaatkan daun mudanya, masyarakat di daerah Sunda (Jawa Barat) menggunakan daun sirsak sebagai obat penurun tekanan darah tinggi. Penggunaan daun sirsak sebagai salah satu obat herbal merupakan salah satu cara yang dapat dilakukan untuk mengurangi konsumsi obat kimia di masyarakat.

Beberapa senyawa flavonoid dan alkaloid dapat menghambat kerja enzim

Xanthine Oxidase sehingga dapat menghambat pembentukan asam urat dalam

tubuh (Cos dkk, 1998). Flavonoid golongan flavon dan flavonol memiliki daya inhibisi lebih tinggi dari pada golongan flavonoid yang lainnya karena posisi gugus hidroksilnya lebih mudah menangkap elektron dari sisi aktif xantin oksidase. Senyawa lainnya seperti polifenol dan saponin juga berpotensi sebagai inhibitor xantin oksidase karena memiliki gugus hidroksil sebagai akseptor elektron dari xantin oksidase.

2.2. Asam Urat

2.2.1. Definisi dan Struktur Asam Urat

Asam urat merupakan produk akhir hasil metabolisme purin yang terdiri dari komponen karbon, nitrogen, oksigen dan hidrogen dengan rumus molekul C5H4N4O3.

Gambar 2.1. Struktur Kimia Asam Urat (Zhao et al, 2009).

Penyakit asam urat adalah istilah yang sering digunakan untuk menyebut salah satu jenis penyakit rematik artikuler (Utami, 2003). Asam urat merupakan substansi hasil akhir nucleic acid atau metabolisme purin dalam tubuh. Asam urat yang berlebihan tidak akan tertampung dan termetabolisme seluruhnya oleh tubuh, maka akan terjadi peningkatan kadar asam urat dalam darah yang disebut sebagai hiperurisemia. Hiperurisemia yang lanjut dapat berkembang menjadi gout.

Kadar asam urat normal pada laki – laki 3,4 – 7,0 mg/dl dan pada wanita 2,4 – 6,0 mg/dl. Pada mencit normal, kadar asam uratnya 0,5 – 1,4 mg/dl dan mencit dikatakan hiperurisemia bila kadar asam uratnya 1,7 - 3,0 mg/dl (Mazzali

et al., 2001). Pada hiperurisemia akan dapat terjadi akumulasi kristal asam urat

pada persendian sehingga menimbulkan rasa sakit atau nyeri yang sering disebut pirai atau gout (Hidayat, 2009).

Pembentukan asam urat terjadi melalui jalur oksidasi hipoxanthin dan guanin menjadi xanthin yang dikatalisis oleh enzim xanthin oksidase dan

guanase. Kemudian xanthin akan teroksidasi menjadi asam urat dalam reaksi

selanjutnya yang dikatalisis oleh enzim xanthin oksidase. Dengan demikian enzim

xanthin oksidase merupakan faktor utama secara farmakologis dalam

pembentukan asam urat pada penderita hiperurisemia atau penyakit gout (Murray et al., 2006).

2.2.2. Metabolisme Nukleotida Purin

Purin adalah salah satu senyawa basa organik yang menyusun asam nukleat atau inti dari sel dan termasuk dalam kelompok asam amino unsur pembentuk protein. Asam nukleat yang dilepas di traktus intestinalis diurai menjadi mononukleotida oleh enzim ribonuklease, deoksiribonuklease dan polinukleotidase. Kemudian enzim nukleotidase dan fosfatase menghidrolis mononukleotida menjadi nukleotida yang kemudian bisa di serap atau diurai lebih lanjut oleh enzim fosforilase intestinal menjadi basa purin serta pirimidin. Proses pembentukan asam urat sebagian besar dari metabolisme nukleotida purin endogen, guanosine

monophosphate (GMP), inosine monophosphate (IMP) dan adenosine

monophosphate (AMP) (Murray et al., 2006).

Pada manusia nukleosida purin yang utama yaitu adenosin dan guanosin diubah menjadi asam urat sebagai produk akhir yang diekskresikan keluar tubuh. Adenosin dan guanosin pertama-tama mengalami deaminasi menjadi inosin oleh adenosin deaminase. Fosforilase ikatan N-glikosinat inosin dan guanosin, yang dikatalisasi oleh nukleosida purin fosforilase, akan melepas senyawa ribosa 1-fosfat dan basa purin. Hipoxantin dan guanin selanjutnya membentuk xantin dalam reaksi yang dikatalisasi oleh xantin oksidase dan guanase xantin kemudian

teroksidasi menjadi asam urat dalam reaksi kedua yang dikatalisasi oleh enzim yang sama (Rodwell, 1997). Di bawah ini dapat dilihat skema terbentuknya asam urat melalui purin:

Gambar 2.2. Skema terbentuknya asam urat

Menurut Hawkins (2005) purin dalam tubuh yang menghasilkan asam urat berasal dari 3 sumber yaitu purin dari makanan, konversi asam nukleat dari jaringan dan pembentukan purin dari dalam tubuh. Beberapa sistem enzim mengatur metabolisme purin. Bila terjadi sistem regulasi yang abnormal maka terjadilah produksi asam urat yang berlebihan. Produksi asam urat berlebihan ini dapat juga terjadi karena adanya peningkatan penguraian asam nukleat dari jaringan seperti pada myeloproliferative dan lymphoproliferative disorder. dua abnormalitas dari dua enzim yang menghasilkan produksi asam urat berlebih yaitu:

a. Peningkatan aktivitas phosphoribosylpyrophosphate (PRPP) sintetase yang menyebabkan peningkatan konsentrasi PRPP. PRPP adalah kunci sintesa purin, berarti juga kunci sintesa asam urat.

b. Defisiensi hypoxanthine guanine phosphoribosyl transferase (HGPRT). Defisiensi HGPRT meningkatkan metabolisme guanin dan hipoxantin menjadi asam urat (Hawkins, 2005).

2.2.3. Hiperurisemia

Hiperurisemia adalah keadaan dimana terjadi peningkatan kadar asam urat darah diatas batas normal (Kelley dan Wortmann, 1997). Ada beberapa hal yang dapat meningkatkan kadar asam urat dalam darah dan merupakan faktor resiko terjadinya hiperurisemia. Faktor-faktor resiko terjadinya hiperurisemia tersebut dapat dikelompokkan menjadi tiga mekanisme, yaitu:

a. Peningkatan produksi asam urat

Peningkatan produksi asam urat terjadi karena faktor idiopatik primer, mengkonsumsi makanan yang kaya purin (banyak mengandung protein), obesitas, alkohol, proses hemolitik dan penyakit kulit (prosiaris).

b. Penurunan ekskresi asam urat

Penurunan ekskresi asam urat merupakan sebagian besar penyebab hiperurisemia (hampir 90% kasus). Penyebabnya antara lain: idiopatik primer, insufesiensi ginjal, ginjal polikistik, diabetes insipidus, hipertensi, asidosis, toksik pada kehamilan, penggunaan obat-obatan seperti salisilat kurang dari 2 gram/hari, diuretik, alkohol, levodopa, ethambutol dan pirazinamid.

c. Kombinasi antara kedua mekanisme tersebut

Dapat terjadi pada defisiensi glukosa 6-fosfat, defisiensi fruktosa 1-fosfat, konsumsi alkohol dan syok (Kelley dan Wortmann, 1997). Jika pada hiperurisemia didapatkan hasil bentukan kristal asam urat maka hiperurisemia dapat berkembang menjadi gout.

Berdasarkan penyebab peningkatan asam urat dalam darah atau hiperurisemia dan gout dapat dibedakan menjadi:

a. Hiperurisemia dan gout primer adalah hiperurisemia dan gout tanpa disebabkan penyakit dan penyebab lain.

b. Hiperurisemia dan gout sekunder adalah hiperurisemia dan gout yang disebabkan penyakit dan meningkatnya produksi asam urat karena nutrisi, yaitu mengonsumsi makanan dengan kadar purin tinggi.

c. Hiperurisemia dan gout idiopatik adalah hiperurisemia dengan penyebab primer yang tidak jelas, kelainan genetik dan tidak ada kelainan fungsi fisiologis ataupun anatomi yang jelas (Schumacher Jr, 1992).

2.2.4. Gout

Gout atau pirai adalah penyakit akibat adanya penumpukan kristal mononatrium urat pada jaringan akibat peningkatan kadar asam urat (Terkeltaub, 2001; Becker & Meenaskshi, 2005). Gout disebabkan oleh deposit kristal asam urat didalam sendi. Penumpukan asam urat didalam darah dapat menyebabkan timbulnya kristal asam urat pada bagian tubuh, termasuk kulit dan ginjal, tetapi pada sendi yang paling mudah diserang. Saat kristal asam urat menumpuk dan jumlahnya banyak, maka kristal asam urat akan tersebar ke dalam rongga sendi (Kelley dan Wortmann, 1997).

Pada gout biasanya serangan terjadi secara mendadak (kebanyakan menyerang pada malam hari). Jika gout menyerang sendi maka sendi yang terserang tampak merah, mengkilat, bengkak, kulit diatasnya terasa panas disertai rasa nyeri yang hebat dan persendian sulit digerakan. Gejala lain adalah suhu badan menjadi demam, kepala terasa sakit, nafsu makan berkurang dan jantung berdebar.

Gambar 2.3 Peradangan pada pangkal ibu jari kaki (gout) akibat kadar asam urat darah yang tinggi.

Serangan pertama gout pada umumnya berupa serangan akut yang terjadi pada pangkal ibu jari kaki. Namun, gejala-gejala tersebut dapat juga terjadi pada sendi lain seperti tumit, lutut dan siku. Dalam kasus encok kronis, dapat timbul tofus (tophus), yaitu endapan seperti kapur pada kulit yang membentuk tonjolan yang menandai pengendapan kristal asam urat (Soeparman, 1998).

BAB 1 PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang

Asam urat merupakan senyawa kimia hasil akhir dari metabolisme asam nukleat atau metabolisme purin dalam tubuh. Berdasarkan penyelidikan bahwa 90% dari asam urat merupakan hasil katabolisme purin yang dibantu oleh enzim guanase dan ksantinoksidase (Shamley, 2005). Asam urat akan dibawa ke ginjal melalui aliran darah untuk dikeluarkan bersama urin. Ginjal akan mengatur kadar asam urat dalam darah agar selalu dalam keadaan normal. Namun, asam urat yang berlebihan tidak akan tertampung dan termetabolisme seluruhnya oleh tubuh, maka akan terjadi peningkatan kadar asam urat dalam darah (Katzung et al., 2012).

Secara alami, asam urat diproduksi dalam tubuh melalui jalur metabolisme yang menggunakan makanan dan minuman sebagai substrat. Mengkonsumsi makanan dengan kandungan purin tinggi seperti kacang-kacangan, melinjo atau emping, jeroan dan minuman yang mengandung kafein seperti kopi, teh serta minuman bersoda dapat menaikkan kadar asam urat dalam darah (Sustrani dkk, 2005).

Penyakit asam urat atau radang sendi sudah dikenal sejak zaman yunani kuno. Penyakit tersebut dikenal sebagai penyakit gout atau pirai. Kata gout berasal dari bahasa latin guttan yang berarti tetesan. Penyakit yang dikenal sebagai penyakit orang kaya pada saat itu diduga disebabkan oleh adanya racun yang jatuh setetes demi setetes pada persendian (Yenrina & Diah, 2002).

Pirai atau gout merupakan penyakit metabolik yang ditandai oleh episode artritis akut berulang karena adanya endapan kristal monosodium urat pada sendi-sendi dan jaringan sekitarnya. Penyakit ini terjadi biasanya karena adanya peningkatan kadar asam urat dalam darah hingga di atas normal (hiperurisemia). Hiperurisemia dapat terjadi karena produksi asam urat yang berlebih pada tubuh, pengeluaran asam urat yang berkurang atau gabungan keduanya (Putra, 2006).

Hiperurisemia adalah gangguan metabolisme yang ditandai oleh kelebihan asam urat dalam darah. Asam urat adalah produk akhir dari metabolisme purin pada manusia, konsentrasi serum asam urat yang normal tidak lebih dari 7 mg/dl pada laki-laki dan 6 mg/dl pada perempuan (Kim et al., 2010; Putra, 2006; Lamb et al., 2006).

Senyawa antihiperurisemia banyak terdapat dalam tanaman, namun pemanfaatannya masih sangat sedikit. Beberapa tanaman asli Indonesia memiliki kemampuan sebagai penurun konsentrasi asam urat seperti sidaguri (Iswantini & Darusman, 2003), seledri (Rahmadani, 2004) dan jahe merah (Mudrikah, 2006). Kemampuan ekstrak tanaman tersebut dalam menurunkan konsentrasi asam urat diduga karena kandungan senyawa flavonoidnya. Salah satu tanaman yang diduga mengandung flavonoid adalah Sirsak (Annona muricata L.) dan kandungan flavonoid terbanyak terdapat pada daunnya.

Pada penelitian ini digunakan otak sapi sebagai penginduksi asam urat karena otak merupakan makanan dengan kandungan purin tinggi yang dapat meningkatkan kadar asam urat darah. Selain itu cara mendapatkan otak sapi mudah, harganya murah dan tidak toksik seperti halnya kalium oksonat yang bersifat oksidator kuat, karsinogenik dan mutagenik. Menurut Wahyudiningsih (2013) bahwa otak termasuk kedalam kelompok pertama makanan dengan kandungan purin yang tinggi (100-1000 mg purin/100 gram bahan makanan).

1.2. Rumusan Permasalahan

Rumusan masalah dalam penelitian ini pemberian otak sapi diduga dapat menaikkan kadar asam urat pada mencit dan pemberian ekstrak etanol daun sirsak menurunkan kadar asam urat pada mencit.

1.3. Tujuan Penelitian

Tujuan dari penelitian ini ialah:

a. Untuk mengetahui peningkatan kadar asam urat mencit dengan pemberian otak sapi.

b. Untuk mengetahui penurunan kadar asam urat mencit dengan pemberian ekstrak etanol daun sirsak.

1.4. Hipotesis

Hipotesis dari penelitian ini ialah:

a. Diet otak sapi mampu menaikkan kadar asam urat.

b. Ekstrak etanol daun sirsak mampu menurunkan kadar asam urat mencit yang di induksi hiperurisemia dengan diet otak sapi.

1.5. Manfaat Penelitian

Manfaat yang dapat diambil dari penelitian ini ialah untuk memberikan informasi tentang pengaruh ekstrak etanol daun sirsak terhadap asam urat dalam keadaan normal pada mencit yang di induksi otak sapi.

MENCIT (Mus musculus L.) JANTAN HIPERURISEMIA

ABSTRAK

Asam urat merupakan produk akhir dari metabolisme purin. Kelebihan kadar asam urat dalam darah disebut dengan hiperurisemia. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak etanol daun sirsak (Annona

muricata L.) terhadap penurunan kadar asam urat darah mencit (Mus musculus L.)

jantan. Penelitian ini menggunakan rancangan acak lengkap (RAL) dengan 2 kontrol yang terdiri atas: kontrol negatif (akuades 0,1 ml), kontrol positif (otak sapi 0,15ml/ekor) selama 11 hari dan 3 perlakuan yang dibagi atas 3 konsentrasi ekstrak daun sirsak yaitu: 0,1 mg, 0,2 mg, 0,3 mg selama 10 hari. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian otak sapi dan ekstrak daun sirsak tidak berpengaruh terhadap berat badan mencit. Pada pemeriksaan kadar asam urat, pemberian otak sapi dapat menaikkan kadar asam urat mencit jantan secara signifikan dan pemberian ekstrak daun sirsak dapat menurunkan kadar asam urat mencit jantan secara signifikan. Pemberian ekstrak daun sirsak selama 10 hari pada konsentrasi 0,2 mg paling efektif menurunkan kadar asam urat pada mencit hiperurisemia.

OF URIC ACID IN HYPERURISEMIC MALE MICE (MUS

MUSCULUS L.)

ABSTRACT

Uric acid is a final product of purin metabolism. The aim of this study is to describe the effect of etanol extract of soursop (Annona Muricata L.) leaves on mouse blood uric acid level. This study was designed by Complete Randomized Design (CRD) with 2 cotrols: negative control (given aquadest), positive control (given cow’s brain 0,15ml/mouse) for eleven days and 3 treatmens. The treatments were: 0,1 mg, 0,2 mg, 0,3 mg respectively for ten days. Resent show the cow’s brain and soursop leaves no effect on body weight of mice. Given cow’s brain significant raise the uric acid level blood mice and soursop leaves significant lower the uric acid level blood’s mice. The giving of extract soursop leaves for ten days at concentration 0,2 mg significantly decrease uric acid level in mice hyperuricemia.

PENGARUH EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP PENURUNAN KADAR ASAM URAT MENCIT (Mus

musculus L.) JANTAN HIPERURISEMIA

SKRIPSI

DEDECK SRININGSIH SILALAHI 1108005025

DEPARTEMEN BIOLOGI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

MEDAN 2016

PENGARUH EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP PENURUNAN KADAR ASAM URAT MENCIT (Mus

musculus L.) JANTAN HIPERURISEMIA

SKRIPSI

Diajukan untuk melengkapi tugas dan memenuhi syarat mencapai gelar Sarjana Sains

DEDECK SRININGSIH SILALAHI 1108005025

DEPARTEMEN BIOLOGI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

MEDAN

Judul : Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona

muricata L.) Terhadap Penurunan Kadar Asam Urat

Mencit (Mus musculus L.) Jantan Hiperurisemia Kategori : Skripsi

Nama : Dedeck Sriningsih Silalahi Nomor Induk Mahasiswa : 110805025

Program Studi : Sarjana (S1) Biologi Departemen : Biologi

Fakultas : Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Universitas Sumatera Utara

Disetujui di Medan, April 2016

Komisi Pembimbing :

Pembimbing 2, Pembimbing 1,

Prof. Dr. Syafruddin Ilyas, M. Biomed Dr. Salomo Hutahaean, M. Si NIP. 196602091992031003 NIP. 196510111995011001

Disetujui Oleh

Departemen Biologi FMIPA USU Ketua,

Dr. Nursahara Pasaribu, M.Sc NIP. 19630123 199003 2 001

PENGARUH EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP PENURUNAN KADAR ASAM URAT MENCIT (Mus

musculus L.) JANTAN HIPERURISEMIA

SKRIPSI

Saya mengakui bahwa skripsi ini adalah hasil karya sendiri. Kecuali beberapa kutipan dan ringkasan yang masing-masing disebutkan sumbernya.

Medan, April 2016

DEDECK SRININGSIH SILALAHI 110805025

Puji dan Syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa atas segala berkat, anugerah dan rahmatNya sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penulisan skripsi yang berjudul Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Sirsak

(Annona Muricata L.) Terhadap Penurunan Kadar Asam Urat Mencit (Mus

Musculus L.) Jantan Hiperurisemiadibuat sebagai salah satu syarat untuk meraih

gelar Sarjana Sains pada Departemen Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sumatera Utara, Medan.

Penulis mengucapkan terima kasih kepada Bapak Dr. Salomo Hutahaean, M.Si selaku Dosen pembimbing I dan Bapak Prof. Dr. Syafruddin Ilyas, M.Biomed selaku Dosen Pembimbing II atas segala bimbingan, arahan, saran dan atas waktu yang telah disediakan bagi penulis dalam penyusunan laporan hasil penelitian ini. Terimakasih juga kepada ibu Masitta Tanjung, S.Si, M.Si selaku Dosen penguji I dan kepada Ibu Dra. Elimasni, M.Si selaku Dosen Penguji II atas segala bimbingan, arahan dan masukan yang telah diberikan sehingga penulisan skripsi ini dapat diselesaikan.

Penulis juga mengucapkan terimakasih kepada Ibu Dr. Nursahara Pasaribu, M.Sc selaku Ketua Departemen Biologi FMIPA USU, Ibu Dr. Saleha Hannum, M.Si selaku Sekretaris Departemen Biologi FMIPA USU dan selaku dosen pembimbing Akademik yang telah banyak memberikan arahan dan motivasi mulai dari awal perkuliahan hingga penulisan skripsi ini, Ibu Roslina ginting dan Bang Erwin selaku staf pegawai di Departemen Biologi, dan kepada seluruh dosen di Departemen Biologi atas segala ilmu pengetahuan dan perkuliahan yang diberikan yang sangat bermanfaat bagi penulis. Ucapan terimakasih juga penulis ucapkan kepada kedua orangtua tercinta: Robert Silalahi dan Eva Simajuntak atas dukungan, motivasi, semangat dan kasih sayang yang tiada henti kepada penulis. Terimakasih juga kepada kakak dan adik tersayang yang turut memberi semangat dan dukungan kepada penulis hingga penulisan skripsi ini dapat diselesaikan dan kepada sahabat stambuk 2011.

Penulis menyadari bahwa skripsi ini belum sempurna. Oleh karena itu, penulis mengharapkan saran dan kritik demi kesempurnaan skripsi ini. Penulis berharap skripsi ini bermanfaat bagi semua pihak dan para pembaca serta bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan. Akhir kata penulis mengucapkan terima kasih. Semoga Kasih-Nya Beserta kita, Amin.

Medan, April 2016

MENCIT (Mus musculus L.) JANTAN HIPERURISEMIA

ABSTRAK

Asam urat merupakan produk akhir dari metabolisme purin. Kelebihan kadar asam urat dalam darah disebut dengan hiperurisemia. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak etanol daun sirsak (Annona

muricata L.) terhadap penurunan kadar asam urat darah mencit (Mus musculus L.)

jantan. Penelitian ini menggunakan rancangan acak lengkap (RAL) dengan 2 kontrol yang terdiri atas: kontrol negatif (akuades 0,1 ml), kontrol positif (otak sapi 0,15ml/ekor) selama 11 hari dan 3 perlakuan yang dibagi atas 3 konsentrasi ekstrak daun sirsak yaitu: 0,1 mg, 0,2 mg, 0,3 mg selama 10 hari. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian otak sapi dan ekstrak daun sirsak tidak berpengaruh terhadap berat badan mencit. Pada pemeriksaan kadar asam urat, pemberian otak sapi dapat menaikkan kadar asam urat mencit jantan secara signifikan dan pemberian ekstrak daun sirsak dapat menurunkan kadar asam urat mencit jantan secara signifikan. Pemberian ekstrak daun sirsak selama 10 hari pada konsentrasi 0,2 mg paling efektif menurunkan kadar asam urat pada mencit hiperurisemia.

OF URIC ACID IN HYPERURISEMIC MALE MICE (MUS

MUSCULUS L.)

ABSTRACT

Uric acid is a final product of purin metabolism. The aim of this study is to describe the effect of etanol extract of soursop (Annona Muricata L.) leaves on mouse blood uric acid level. This study was designed by Complete Randomized Design (CRD) with 2 cotrols: negative control (given aquadest), positive control (given cow’s brain 0,15ml/mouse) for eleven days and 3 treatmens. The treatments were: 0,1 mg, 0,2 mg, 0,3 mg respectively for ten days. Resent show the cow’s brain and soursop leaves no effect on body weight of mice. Given cow’s brain significant raise the uric acid level blood mice and soursop leaves significant lower the uric acid level blood’s mice. The giving of extract soursop leaves for ten days at concentration 0,2 mg significantly decrease uric acid level in mice hyperuricemia.

PENGHARGAAN ABSTRAK ABSTRACT DAFTAR ISI DAFTAR TABEL DAFTAR GAMBAR DAFTAR LAMPIRAN BAB 1 PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

1.2 Rumusan Permasalahan

1.3 Tujuan Penelitian 1.4 Hipotesis

1.5 Manfaat Penelitian

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Tanaman Sirsak.

2.1.1 Klasifikasi Tnaman

2.1.2 Kandungan Kimia Dan Manfaat Daun Sirsak 2.2 Asam Urat

2.2.1 Definisi dan Struktur Asam Urat 2.2.2 Metabolisme Nukleotida Purin 2.2.3 Hiperurisemia

2.2.4 Gout

BAB 3 METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Waktu dan Tempat 3.2 Bahan dan Alat

3.3 Rancangan Penelitian 3.4 Prosedur Percobaan

3.4.1 Persiapan Hewan Coba 3.4.2 Persiapan Diet Hiperurisemia

3.4.3 Persiapan Ekstrak Daun Sirsak (Annona muricata L.) 3.4.4 Pemberian Perlakuan

3.4.4.1 Penghitungan Dosis 3.4.4.2 Induksi Hiperurisemia 3.5 Parameter Pengamatan 3.5.1 Uji Fitokimia

3.5.1.1 Alkaloid 3.5.1.2 Flavonoid

3.5.1.3 Saponin, Tanin dan Polifenol 3.5.2 Pengukuran Berat Badan Mencit

3.5.3 Pengukuran Kadar Asam Urat Darah Mencit 3.6 Analisis Data

iii iv v vi viii x xii 1 3 3 3 3 4 4 4 5 5 6 8 9 10 10 10 11 11 11 12 12 12 12 12 12 12 13 13 13 13 14

BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Uji Fitokimia Secara Kualitatif

4.2 Berat Badan Mencit (Mus musculus L.) 4.3 Kadar Asam Urat Mencit (Mus musculus L.)

Bab 5. KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan 5.2 Saran

DAFTAR PUSTAKA

15 17 18

19 19 20

Nomor Tabel

Judul Halaman

4.1 Uji Fitokimia Secara Kualitatif 15 4.2 Berat badan mencit (Mus musculus L.) 17

Nomor Gambar

Judul Halaman

2.1 Struktur Kimia Asam Urat 5

2.2 Skema Terbentuknya Asam Urat 7

2.3 Peradangan Pada Pangkal Ibu Jari Kaki (gout) Akibat Kadar Asam Urat Darah yang Tinggi

9 4.1 Kadar asam urat mencit (Mus musculus L.) 19

Nomor Lamp

Judul Halaman

1 Dokumentasi Penelitian 24

2 Tahap Kerja Penelitian 26

3 Berat Badan Mencit Jantan 30

vii DAFTAR ISI

viii PERSETUJUAN PERNYATAAN PENGHARGAAN ABSTRAK ABSTRACT DAFTAR ISI DAFTAR TABEL DAFTAR GAMBAR DAFTAR LAMPIRAN BAB 1 PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

1.2 Rumusan Permasalahan

1.3 Tujuan Penelitian 1.4 Hipotesis

1.5 Manfaat Penelitian

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Tanaman Sirsak.

2.1.1 Klasifikasi Tnaman

2.1.2 Kandungan Kimia Dan Manfaat Daun Sirsak 2.2 Asam Urat

2.2.1 Definisi dan Struktur Asam Urat 2.2.2 Metabolisme Nukleotida Purin 2.2.3 Hiperurisemia

2.2.4 Gout

BAB 3 METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Waktu dan Tempat 3.2 Bahan dan Alat

3.3 Rancangan Penelitian 3.4 Prosedur Percobaan

3.4.1 Persiapan Hewan Coba 3.4.2 Persiapan Diet Hiperurisemia

3.4.3 Persiapan Ekstrak Daun Sirsak (Annona muricata L.) 3.4.4 Pemberian Perlakuan

3.4.4.1 Penghitungan Dosis 3.4.4.2 Induksi Hiperurisemia 3.5 Parameter Pengamatan 3.5.1 Uji Fitokimia

3.5.1.1 Alkaloid 3.5.1.2 Flavonoid

3.5.1.3 Saponin, Tanin dan Polifenol 3.5.2 Pengukuran Berat Badan Mencit

3.5.3 Pengukuran Kadar Asam Urat Darah Mencit 3.6 Analisis Data

Halaman i ii iii iv v vi viii x xii 1 3 3 3 3 4 4 4 5 5 6 8 9 10 10 10 11 11 11 12 12 12 12 12 12 12 13 13 13 13 14

ix

BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Uji Fitokimia Secara Kualitatif

4.2 Berat Badan Mencit (Mus musculus L.) 4.3 Kadar Asam Urat Mencit (Mus musculus L.)

Bab 5. KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan 5.2 Saran

DAFTAR PUSTAKA

15 17 18

19 19 20

x

DAFTAR TABEL

Nomor Tabel

Judul Halaman

4.1 Uji Fitokimia Secara Kualitatif 15 4.2 Berat badan mencit (Mus musculus L.) 17

xi

DAFTAR GAMBAR

Nomor Gambar

Judul Halaman

2.1 Struktur Kimia Asam Urat 5

2.2 Skema Terbentuknya Asam Urat 7

2.3 Peradangan Pada Pangkal Ibu Jari Kaki (gout) Akibat Kadar Asam Urat Darah yang Tinggi

9 4.1 Kadar asam urat mencit (Mus musculus L.) 19

xii

DAFTAR LAMPIRAN

Nomor Lamp

Judul Halaman

1 Dokumentasi Penelitian 24

2 Tahap Kerja Penelitian 26

3 Berat Badan Mencit Jantan 30

4 Kadar Asam Urat Mencit Jantan 32