Uji Potensi Fungi Pelapuk Putih Pada Batang Kayu Eukaliptus (Eucalyptus grandis) Sebagai Pendegradasi Lignin

LAMPIRAN
Lampiran 1. Komposisi Media Ligninase Cair
Komposisi Media Ligninase
KH2PO4

2g

MgS04.7H2O

0,5 g

K2HPO4

1g

Alkaline Lignin

2g

NH4NO3

2g

KCL

0,5 g

MgSO4.7H2O

0,5 g

FeSO4.7H2O

10 mg

MnCL2.2H2O

5 mg

CuSO4.5H2O

1 mg

Kemudian semua komposisi ini dilarutkan dalam akuades sebanyak 1
liter dan disterilkan dengan autoclave.

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 2. Isolasi dan Pemurnian Fungi Pendegradasi Lignin dari Batang
Kayu Eukaliptus Lapuk

KayuPinusL

Dimasukkan ke dalam plastik

Dipotong menjadi ukuran yang

Disebarkan di atas media

Diinkubasi pada suhu ruang selama

Dibuat

biakan

murni

dari

Hasil

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 3. Skrining Aktivitas Enzim Ligninolitik dengan Uji Bavendamm

Isolat

BiakanJam

Ditumbuhkan pada media
PDA+asam tanin 0,1% pada suhu

ruang

Diinkubasi pada suhu

Diamati endapan coklat yang
terbentuk

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4. Persiapan Sumber Enzim

Biakan Jamur Yang
Mampu
M b
kE d

Dibiakkan pada 30 ml
media ligninase cair

Diinkubasi selama 14

hari pada suhu ruang

Disentrifugasi dengan kecepatan 10000
rpm
P d
h 40 C l
15
it

Supernatan

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. Pengukuran Aktivitas Lignin Peroksidase (LiP)
0,2 ml Supernatan

Ditambahkan 2,8 ml larutan penyangga tartrat(pH

Ditambahkan 1 ml veratril alkohol 2

Ditambahkan 1 ml H2O2 0.4

Dihomogenkan

Diinkubasi selama 30 menit pada suhu

Hasil

Diukur jumlah veratraldehida yang
terbentuk dengan spektrofotometer pada
panjang gelombang 310 nm

Dihitung jumlah veratraldehida yang
terbentuk berdasarkan rumus Lambert-Beer

Universitas Sumatera Utara

Dihitung aktivitas unit

Aktivitas Unit

Lampiran 6. Perhitungan Nilai Absorbansi per Satuan Waktu
Isolat FPP A
A
ari

0

t
0.
736
1.
332
1.
086
1.
402
1.
265
0.
789

0.
749

0
2
4

Δ

A
abs
0.
736
1.
342
1.
324
1.
442
1.

315
0.
815
0.
758

0
0.
001075
0.
025591
0.
004301
0.
005376
0.
002796
0.
000968

Konsentras
i Enzim
U/ml
0.000
0.001
0.021
0.004
0.004
0.002
0.001

Isolat FPP B
A
ari

0
2
4

0

t
0.
748
1.
318
1.
005
1.
251
1.
304
0.
93
0.
851

Δ

A
abs
0.
748
1.
35
1.
32
1.
415
1.
345
0.
97
0.
86

0
0.
003441
0.
033871
0.
017634
0.
004409
0.
004301
0.
000968

Konsentras
i Enzim
U/ml
0.000
0.003
0.028
0.015
0.004
0.004
0.001

Isolat FPP C

Universitas Sumatera Utara

A
ari

0
2
4

0

t
0.
754
1.
309
1.
123
1.
107
1.
315
1.
094
0.
426

Δ

A
abs
0.
754
1.
333
1.
315
1.
523
1.
456
1.
115
0.
435

0
0.
002581
0.
020645
0.
044731
0.
015161
0.
002258
0.
000968

Konsentras
i Enzim
U/ml
0.000
0.002
0.017
0.037
0.013
0.002
0.001

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 7. Aktivitas Enzim Lignin Peroksidase (LiP)
Waktu
(Hari)

Isolat
Exidia
sp

Phaneroch
aete sp 1

Phanerocha
ete sp. 2

2

0.000

0.000

0.000

4

0.001

0.003

0.002

6

0.021

0.028

0.017

8

0.004

0.015

0.037

10

0.004

0.004

0.013

12

0.002

0.004

0.002

14

0.001

0.001

0.001

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 8. Gambar Dokumentasi Penelitian

Isolat jamur pada media Ligninase cair

Universitas Sumatera Utara