Uji Potensi Fungi Pelapuk Putih Asal Batang Kayu Pinus (Pinus merkusii Jungh et de vriese) sebagai Pendegradasi Lignin

UJI POTENSI FUNGI PELAPUK PUTIH PADA BATANG KAYU PINUS (P.merkusii)Strain TapanuliSEBAGAI PENDEGRADASI LIGNIN
SKRIPSI Oleh :
PARLIN BASTIAN SIMANJUNTAK 111201099/BUDIDAYA HUTAN
PROGRAM STUDI KEHUTANAN FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA 2015

UJI POTENSI FUNGI PELAPUK PUTIH PADA BATANG KAYU PINUS (P.merkusii)Strain TapanuliSEBAGAI PENDEGRADASI LIGNIN
SKRIPSI Oleh :
PARLIN BASTIAN SIMANJUNTAK 111201099/BUDIDAYA HUTAN
Skripsi sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana di Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara
PROGRAM STUDI KEHUTANAN FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA 2015

ABSTRAK
PARLIN BASTIAN SIMANJUNTAK.Uji Potensi Fungi Pelapuk Putih Asal Batang Kayu Pinus (Pinus merkusii Jungh et de vriese) Sebagai Pendegradasi Lignin. Dibawah bimbingan EDY BATARA MULYA SIREGAR dan NELLY ANNA.
Lignin merupakan senyawa alami yang berfungsi sebagai penyusun dinding sel tumbuhan. Dalam proses pembuatan pulp, lignin merupakan senyawa yang susah didegradasi. Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan jamur pelapuk putih yang terdapat pada kayu pinus yang sudah lapuk, menentukan isolat jamur pelapuk putih yang paling berpotensi pada proses biolpulping yang didapat dengan mengukur aktivitas Enzim Lignin Peroksidase (LiP) pada jamur pelapuk putih yang diperoleh dari kayu pinus yang sudah lapuk.Sampel kayu pinus lapuk diambil dari Taman Hutan Raya (Tahura) Berastagi. Uji Bavendamm dan uji aktivitas enzim ligninolitik mengasilkan 3 genus jamur yaitu Trametes sp. 1, Trametes sp.2, dan Phanerochaete sp. Aktivitas enzim lignin peroksidase yang paling tinggi diperoleh pada isolat jamur Trametes sp. 1 sebesar 1,541 U/ml.
Kata kunci : Kayu pinus, Fungi Pelapuk putih, Uji Bavendamm, enzim lignin peroksidase.

ABSTRACT
PARLIN BASTIAN SIMANJUNTAK.Test of potential White Root Fungi at Rotten Pine Wood (Pinus merkusii jungh et de vriese ) as degrading lignin. Under supervised by EDY BATARA MULYA SIREGAR and NELLY ANNA.
Lignin is a natural compounds of plant that function for plant cell wall constituent. In pulp industries, lignin is compound which is hard to degradad. The purpose of this research is to get white rot fungi in the rotten pine wood, to determine potential of white rot fungi in biopulping process which obtained by measuring the activity of enzyme Lignin Peroxidase (LiP) at white rot fumgi which is obtain from the rotten pine wood. The sample of the rotten pine wood taken from Taman Hutan Raya (Tahura) Berastagi. Bavendamm and ligninolitic enzyme activities test have found three spesies fungi which are in genus Trametes sp.1, Trametes sp.2, and Phanerochaete sp. The highest activity of enzyme lignin peroxidase was produced by Trametes sp.1 fungi by the value is 1,541 U/ml.

Key word: Pine wood, White rot fungi, Bavendamm test, enzyme lignin peroxidase.

RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di Tarutung pada tanggal 6 Desember 1993 sebagai anak keempat dari empat bersaudara dari ayah Gomal L. Simanjuntak dan Ibu Kartini Simangunsong. Tahun 2011 penulis lulus dari SMA N 2 Balige. Tahun 2011 penulis lulus seleksi masuk Universitas Sumatera Utara (USU) melalui jalur Seleksi Nasional Masuk Perguruan Tinggi Negeri (SNMPTN). Pada semester VII penulis memilih minat Budidaya Hutan.
Selama mengikuti perkuliahan penulis aktif dalam organisasai Himpunan Mahasiswa Sylva (HIMAS).Penulis melaksanakan Praktik Pengenalan Ekosistem Hutan (P2EH) di Hutan Pendidikan USU, Tongkoh, Taman Hutan Raya Bukit Barisan, Kabupaten Karo.Penulis melakukan kegiatan Praktik Kerja Lapangan di Perusahaan Adindo Hutani Lestari (AHL) di Kalimantan Utara pada tanggal 28 Januari-28 Februari 2015.

KATA PENGANTAR
Puji dan syukur penulis ucapkan kepada Tuhan Yang Maha Esa, atas berkat dan rahmatNya penulis dapat menyelesaikan penelitian yang berjudul “Uji Potensi Fungi Pelapuk Putih Asal Batang Kayu Pinus (Pinus merkusii Jungh et de vriese) sebagai Pendegradasi Lignin.” Penelitian ini bertujuan mendapatkan jamur pelapuk putih yang terdapat pada kayu pinus yang sudah lapuk, menentukan isolat jamur pelapuk putih yang paling berpotensi pada proses biolpulping yang didapat dengan mengukur aktivitas Enzim Lignin Peroksidase (LiP) pada jamur pelapuk putih yang diperoleh dari kayu pinus yang sudah lapuk.
Pada kesempatan ini penulis menyampaikan terima kasih kepada Dr. Ir. Edy Batara Mulya Siregar, M.S. dan Nelly Anna, S.Hut., M.Si. selaku komisi pembimbing yang telah banyak membimbing dan memberikan saran kepada penulis dalam menyelesaikan penelitian ini. Terima kasih juga kepada semua pihak yang mendukung dan membantu dalam penulisan skripsi ini.
Penulis berharap semoga hasil penelitian ini dapat berguna untuk dasar penelitian-penelitian selanjutnya.Semoga penelitian ini dapat bermanfaat dan menyumbangkan pengetahuan bagi kemajuan dunia pendidikan.
Penulis

DAFTAR ISI
Halaman
ABSTRAK ............................................................................................................ i
ABSTRACT........................................................................................................... ii
RIWAYAT HIDUP................................................................................................ iii
KATA PENGANTAR .......................................................................................... iv
DAFTAR ISI.......................................................................................................... v
DAFTAR TABEL.................................................................................................. vii

DAFTAR GAMBAR ............................................................................................. viii
DAFTAR LAMPIRAN.......................................................................................... ix
PENDAHULUAN Latar Belakang ...................................................................................................... 1 Tujuan Penelitian .................................................................................................. 2 Manfaat Penelitian ................................................................................................ 2
TINJAUAN PUSTAKA Lignin .................................................................................................................... 3 Fungi ..................................................................................................................... 4 Fungi Pelapuk Putih .............................................................................................. 9 Lignin Peroksidase (LiP)....................................................................................... 10
METODE PENELITIAN Waktu dan Tempat ................................................................................................. 12 Alat dan Bahan...................................................................................................... 12 Pengambilan Sampel............................................................................................. 12 Isolasi Jamur Pendegradasi Lignin dari Kayu Pinus Lapuk ................................. 13 Skrining Aktivitas Enzim Lignolitik..................................................................... 13 Persiapan Sumber Enzim ...................................................................................... 13 Pengukuran Aktivitas Ligninolitik secara Kuantitatif........................................... 14
HASIL DAN PEMBAHASAN Isolasi Jamur Pelapuk Kayu ................................................................................... 16 Skrining Aktivitas Enzim Ligninolitik dengan Uji Bavendamm........................... 17 Identifikasi Fungi Pelapuk Putih............................................................................ 20
Trametes sp .................................................................................................. 20 Phanerochaete sp ................................................................................................... 21 Aktivitas Enzim Lignin Peroksidase (LiP) ............................................................ 22

KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan ............................................................................................................ 26 Saran....................................................................................................................... 26 DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................ 27
LAMPIRAN........................................................................................................... 30

DAFTAR TABEL
No. Halaman 1. Hasil Karakterisasi Makroskopik Jamur Pelapuk Kayu Pinus..................................... 16 2. Uji Bavendam Isolat Jamur dari Kayu Pinus Lapuk.................................................... 19 3. Hasil Karakterisasi Mikroskopis Jamur Pelapuk Kayu Pinus...................................... 20 4. Aktivitas Enzim Lignin Peroksidase (LiP) .................................................................. 22

DAFTAR GAMBAR
No. Halaman 1. Sampel Kayu Pinus Lapuk ........................................................................................... 13 2. Isolat Jamur Pelapuk Kayu Pinus................................................................................. 17 3. Hasil Uji Bavendamm Isolat Jamur Pelapuk Kayu Pinus .................................................. 18 4. Struktur Mikroskopis Trametes sp. ............................................................................. 21 5. Struktur Mikroskopis Phanerochaete sp...................................................................... 21 6. Aktivitas Enzim Lignin Peroksidase pada Jamur Pelapuk Kayu Pinus ....................... 23 7. Isolat Jamur pada media Ligninase Cair...................................................................................37

DAFTAR LAMPIRAN
No. Halaman 1. Komposisi Media Ligninase Cair ................................................................................ 30 2. Alur Kerja Isolasi Jamur Pendegradasi Lignin dari Kayu Pinus.................................. 31 3. Skrining Aktivitas Enzim Ligninolitik dengan Uji Bavendamm................................. 32 4. Persiapan Sumber Enzim ............................................................................................. 33 5. Pengukuran Aktivitas Lignin Peroksidase ................................................................... 34 6. Perhitungan Nilai Absorbansi per Satuan Waktu ........................................................ 35 7. Hasil Aktivitas Enzim Lignin Peroksidase (LiP) ......................................................... 36 8. Gambar Dokumentasi Penelitian.................................................................................. 37


ABSTRAK
PARLIN BASTIAN SIMANJUNTAK.Uji Potensi Fungi Pelapuk Putih Asal Batang Kayu Pinus (Pinus merkusii Jungh et de vriese) Sebagai Pendegradasi Lignin. Dibawah bimbingan EDY BATARA MULYA SIREGAR dan NELLY ANNA.
Lignin merupakan senyawa alami yang berfungsi sebagai penyusun dinding sel tumbuhan. Dalam proses pembuatan pulp, lignin merupakan senyawa yang susah didegradasi. Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan jamur pelapuk putih yang terdapat pada kayu pinus yang sudah lapuk, menentukan isolat jamur pelapuk putih yang paling berpotensi pada proses biolpulping yang didapat dengan mengukur aktivitas Enzim Lignin Peroksidase (LiP) pada jamur pelapuk putih yang diperoleh dari kayu pinus yang sudah lapuk.Sampel kayu pinus lapuk diambil dari Taman Hutan Raya (Tahura) Berastagi. Uji Bavendamm dan uji aktivitas enzim ligninolitik mengasilkan 3 genus jamur yaitu Trametes sp. 1, Trametes sp.2, dan Phanerochaete sp. Aktivitas enzim lignin peroksidase yang paling tinggi diperoleh pada isolat jamur Trametes sp. 1 sebesar 1,541 U/ml.
Kata kunci : Kayu pinus, Fungi Pelapuk putih, Uji Bavendamm, enzim lignin peroksidase.

ABSTRACT
PARLIN BASTIAN SIMANJUNTAK.Test of potential White Root Fungi at Rotten Pine Wood (Pinus merkusii jungh et de vriese ) as degrading lignin. Under supervised by EDY BATARA MULYA SIREGAR and NELLY ANNA.
Lignin is a natural compounds of plant that function for plant cell wall constituent. In pulp industries, lignin is compound which is hard to degradad. The purpose of this research is to get white rot fungi in the rotten pine wood, to determine potential of white rot fungi in biopulping process which obtained by measuring the activity of enzyme Lignin Peroxidase (LiP) at white rot fumgi which is obtain from the rotten pine wood. The sample of the rotten pine wood taken from Taman Hutan Raya (Tahura) Berastagi. Bavendamm and ligninolitic enzyme activities test have found three spesies fungi which are in genus Trametes sp.1, Trametes sp.2, and Phanerochaete sp. The highest activity of enzyme lignin peroxidase was produced by Trametes sp.1 fungi by the value is 1,541 U/ml.
Key word: Pine wood, White rot fungi, Bavendamm test, enzyme lignin peroxidase.

PENDAHULUAN
Latar Belakang Dinding sel kayu terdiri atas tiga komponen makromolekul utama yaitu
selulosa, hemiselulosa dan lignin.Lignin merupakan senyawa yang heterogen dengan berbagai tipe ikatan sehingga tidak dapat diuraikan oleh enzim hidrolisis.Lignin terbentuk dari gugus aromatik yang saling dihubungkan dengan rantai alifatik, yang terdiri atas 2-3 karbon.Lignin pada batang tanaman berfungsi sebagai bahan pengikat komponen penyusun lainnya, sehingga suatu pohon bersifat keras. Kayu keras normal mengandung 20-25% lignin, meskipun kayu keras tropika dapat mempunyai kandunan lignin lebih dari 30% .
Lignin merupakan polimer yang strukturnya heterogen dan kompleks yang terdiri dari koniferil alkohol, sinaphil alkohol, dan kumaril alkohol sehingga sulit untuk dirombak.Sekitar 30% material pohon adalah lignin yang berfungsi sebagai penyedia kekuatan fisik pohon, pelindung dari biodegradasi dan serangan mikroorganisme.Struktur yang kompleks dari lignin dengan berat molekul yang tinggi dan tidak larut dalm air membuat lignin sukar didegradasi.Oleh karena itu, degradasi lignin membutuhkan enzim ekstraseluler yang bekerja secara tidak spesifik.
Di alam terdapat tiga kelompok jamur yang dapat menguraikan komponen kayu (lognoselulosa) yaitu pelapuk cokelat (brown rot), pelapuk putih (white rot) dan pelapuk lunak (soft rot). Pengelompokkan jamur pelapuk ini didasarkan pada hasil proses pelapukan. Jamur pelapuk cokelat menghasilkan sisa hasil pelapukan yang berwarna cokelat sedangkan jamur pelapuk putih menghasilkan sisa pelapukan yang berwarna putih.Ketiga jenis jamur tersebut memiliki karakteristik

yang berbeda.Jamur pelapuk putih memiliki kemampuan mendegradasi lignin yang tinggi dengan sedikit mengakibatkan kehilangan selulosa.
Degradasi lignin oleh jamur pelapuk putih merupakan proses oksidatif. Enzim oksidatif merupakan enzim non-spesifik dan bekerja melalui mediator bukan protein yang berperan dalam degradasi lignin.Enzim pendegradasi lignin terdiri dari Lignin Peroksidase, Manganese Peroksidase dan Lakase. Adanya enzim ini akan mendegradasi lignin menjadi senyawa yang lebih sederhana .
Industri kertas di Indonesia pada umumnya menggunakan pengolahan pulp secara kimia. Dengan pengelolaan secara kimia pasti menghasilkan limbah-limbah hasil industri, hal ini pasti akan mengakibatkan bertambahnya biaya pengolahan pulp, karena sekitar 20% biaya investasi harus disediakan untuk mengelola limbah proses pengelolaan secara kimia. Tujuan Penelitian
Tujuan penelitian ini adalah : 1. Mendapatkan jamur pelapuk putih yang terdapat pada kayu pinus yang

sudah lapuk. 2. Menentukan isolat jamur pelapuk putih yang paling berpotensi pada proses
biolpulping yang didapat dengan mengukur aktivitas Enzim Lignin Peroksidase (LiP) pada jamur pelapuk putih yang diperoleh dari kayu pinus yang sudah lapuk. Manfaat Penelitian Penelitian ini berguna untuk memperoleh isolat jamur pelapuk putih yang dapat dimanfaatkan sebagai pendegradasi lignin serta berpotensi dalam proses biopulping.

TINJAUAN PUSTAKA
Lignin Lignin merupakan senyawa kimia yang umumnya diperoleh pada kayu dan
merupakan bagian integral dari dinding sel tumbuhan. Lignin adalah bahan polimer alam terbanyak kedua setelah selulosa. Lignin merupakan polimer yang sukar larut dalam asam dan basa kuat dan sulit terdegradasi secara kimiawi maupun secara enzimatis. Lignin pada kayu terdapat pada lamela tengah antara selulosa, hemiselulosa, dan pektin yang berfungsi sebagai perekat atau penguat dinding sel. Lignin berperan sangat penting bagi tumbuhan sebagai pengangkut air, nutrisi, dan metabolist dalam sel tumbuhan. Lignin sulitdidegradasi karena strukturnya yang kompleks danheterogen yang berikatan dengan selulosa danhemiselulosa dalam jaringan tanaman.Lebih dari 30persen tanaman tersusun atas lignin yang memberikanbentuk yang kokoh dan memberikan proteksi terhadapserangga dan patogen (Orth et al., 1993).Disampingmemberikan bentuk yang kokoh terhadap tanaman, ligninjuga membentuk ikatan yang kuat dengan polisakaridayang melindungi polisakarida dari degradasi mikroba danmembentuk struktur lignoselulosa.
Struktur lignin pada kayu daun lebar memiliki komposisi yang lebih kompleks dibandingkan kayu daun jarum.Jenis kayu daun lebar disusun oleh unit siringil dan guaiasil dengan perbandingan tertentu, sedangkan lignin kayu daun jarum didominasi oleh unit guaiasil dengan sedikit tambahan p-hidroksiphenil (Agustina, 2009).
Polimer alam kedua ini sangat melimpah dan membentuk 15sampai 30 persendinding sel kayu dari gymnospermae(softwood) dan angiospermae

(hardwood). Lignin yang terdapat pada dinding sel, mendukung bentuk struktural,

impermeabilitas, pertahanan terhadap mikroba dan oksidative stress.Secara

struktural, lignin memiliki bentuk heteropolimer yang amorf, tidak larut dalam air

danterdiri atas 3 jenis fenilpropana yaitu coniferyl alcohol (guaiacyl propanol),

coumaryl alcohol (p-hydroxyphenylpropanol), and sinapyl alcohol (syringyl

propanol).Coniferyl alcohol adalah komponen utama dari softwood lignin,


sementara, guaiacyl and syringyl alcohols konstituen utama dari hardwood lignin

(Perez et al., 2002).

Degradasiligninoleh

jamur

pelapuk

putihmelibatkanenzimsepertiligninperoksidase(LiP), manganperoksidase(MnP)

danlakase (Kerem & Hadar,1998). Degradasi lignin tergantung kepada kehadiran

metabolit ko-substrat seperti glukosa. Disamping itu, adanya peningkatan dari O2

di dalam kultur memiliki efek aktivasi yang kuat pada laju degradasi dari lignin.

Sebuah bukti juga menunjukkan bahwa mangan sangat penting dalam degradasi


lignin. Endapan MnO2 terakumulasi di dalam kayu setelah dibusukkan oleh beberapa jamur pelapuk putih, dan degradasi lignin oleh beberapa jamur pelapuk

putih sangat dipengaruhi oleh kehadiran dari Mangan (Gold dan Alic, 1993).

Fungi

Jamur (fungi) merupakan tumbuhan tingkat rendah yang tidak mempunyai

zat hijau (klorofil).Untuk dapat bertahan hidup jamur berperan sebagai parasit

atau saprofit pada mahluk hidup lainnya, jamur tidak dapat menghasilkan

makanannya sendiri (Tambunan dan Nandika, 1989).

Fungi merupakan tumbuhan yang tidak mempunyai klorofil sehingga

bersifat heterotrof, tipe sel eukariotik.Jamur ada yang uniseluler dan

multiseluler.Tubuhnya terdiri dari benang-benang yang disebut hifa yang dapat membentuk anyaman bercabang-cabang (miselium).Fungi pada umumnya multiseluler (bersel banyak). Ciri-ciri fungi berbeda dengan organisme lainnya dalam hal cara makan, struktur tubuh, pertumbuhan, dan reproduksinya (Gandjar et al., 1999).

Tiga karakteristik utama fungi adalah: (1) pembentukan struktur unit dasar yaitu hifa, (2) pembentukan propagul reproduksi yang sebagian besar adalah spora (biasanya bersel satu) dan (3) penyerapan makanan secara heterotrofik (fungi menghasilkan enzim yang dihasilkan untuk menguraikan bahan-bahan organic, sehingga dapat diserap dalam bentuk larutan (Widyastuti dkk, 2005).
Bagian vegetatif pada jamur umumnya berupa benang-benang halus memanjang, bersekat (septa) atau tidak, dinamakan dengan hifa.Kumpulankumpulan benang-benang hifa tersebut dinamakan miselium.Miselium dapat dibedakan menjadai dua tipe pokok.Pertama mempunyai hifa senositik (coenocytic), yaitu hifa yang mempunyai banyak inti dan tidak mempunyai sekat melintang, jadi hifa ini berbentuk tabung halus yang berbentuk protoplas dengan banyak inti.Pembelaan intinya tidak diikuti oleh pembelaan sel. Kedua mempunyai hifa seluler (celluler), hifa terdiri dari sel-sel, yang masing-masing mempunyai satu atau dua inti (Semangun, 1996).
Pada umumnya pertumbuhan fungi dipengaruh oleh beberapa faktor seperti substrat yang tersedia, suhu yang baik dan sesuai dengan pertumbuhan fungi, derajat keasaman substrat (pH), dan senyawa-senyawa kimia yang ada di lingkungan yang dapat mempengaruhi pertumbuhan fungi. Dengan terpenuhinya

semua faktor-faktor tersebut fungi akan mengalami pertumbuhan yang baik (Gandjar et al., 2006). Proses Pelapukan Kayu
Peristiwa pelapukan kayu pada umumnya dipengaruhi oleh reaksi biokimia antara komponen kimia kayu atau biomassa dengan enzim yang diproduksi oleh mikroorganisme.Kemampuan mikroorganisme untuk menguraikan komponen kimia bahan tersebut sangat dipengaruhi oleh genetik dan kondisi lingkungan. Fungi pelapuk umumnya berfungsi sebagai pembuka jalan pelapukan lain oleh mikroba yang lebih rendah tingkatannya seperti mikroba. Pada umumnya mikroba yang sangat berperan dalam pendegradasi kayu adalah fungi-fungi pelapuk putih (whiterotfungi) dan fungi pelapuk coklat (brownrotfungi), dan keduanya sebagian besar tergolong Basidiomycetes.Fungi pelapuk putih mempunyai peran utama dalam mendegradasi lignin, sedangkan fungi pelapuk coklat banyak mendegradasi selulosa dan hemiselulosa daripada lignin.Hemiselulosa merupakan komponen yang paling mudah didegradasi, sedangkan lignin dan selulosa lebih sulit didegradasi dan sangat bergantung pada jenis funginya (Prasetya, 2005).
Berdasarkan tingkat urutan-urutan penguraian komponen kimia biomassa, degradasi dapat dibagi kedalam tiga katagori.Pertama lignin yang didegradasi kemudian diikuti dengan selulosa dan hemiselulosa.Kedua, sebaliknya degrdasi diawali selulosa dan hemiselulosa kemudian degradasi lignin.Ketiga, degradasi lignin dan selulosa berjalan bersamaan. Proses degradasi pada umumnya berjalan bertahap dan pada umumnya terjasi pemotongan rantai panjang dari polimer selulosa menjadi lebih pendek (Prasetya, 2005).

Keterlibatan Mikroorganisme Dalam Pelapukan Kayu Dekomposisi kayu/tanaman adalah bagian terpenting dalam siklus karbon
di alam. Proses dekomposisi disebabkan oleh jamur, insektan yang menggunakan kayu sebagai makanan atau shelter. Kandungan lignin dalam kayu menjadi bahan utama untuk proses dekomposisi enzim dari selulosa dan hemiselulosa. Pada prinsipnya, kayu mengandung bahan organik tertinggi, dan kayu tidak dapat dipisahkan dari tanaman yang selalu mengikuti siklus dan proses fotosintesis alam. Ketika kayu sudah mati, maka jamur dan organisme pengurai lainnya berperan dalam penguraian bahan kayu tersebut melalui proses biosintetik dan biodekomposisi (Murtihapsari, 2008).
Pelapukan yang mengakibatkan terjadinya penurunan kekuatan kayu pada umumnya disebabkan oleh mikroorganisme (jamur) yang disebut sebagai jamur pelapuk kayu. Agen-agen biologis seperti fungi yang menyebabkan pembusukan atau pewarna kayu dan bahan-bahan selulosa yang lain adalah tumbuh-tumbuhan yang tidak mengandung klorofil. Karena tidak dapat memproduksi makanannya sendiri, fungi harus memperoleh energinya dari bahan-bahan organik lain (Haygreen dan Bowyer, 2000).
Menurut Khan (1954) jamur pelapuk kayu tidak dapat memproduksi makanannya sendiri dari substansi yang sederhana seperti karbondioksida, air dan mineral.Oleh karena itu, jamur pelapuk kayu hidup dari bahan organik yang terdapat pada kayu mati sebagai saprofit atau memperoleh makanan dari pohon hidup sebagai parasit.

Kumpulan hifa yang disebut miselium jamur pelapuk kayu menembus kedalam kayu, serta tumbuh dan merombak substansi dinding sel kayu yang secara utama terdiri atas hemiselulosa, selulosa serta lignin menjadi bahan yang sederhana. Jamur pelapuk kayu hidup dan memperoleh makanan utama dengan cara merombak bahan organik penyusun dinding sel kayu dengan pertolongan enzim yang dihasilkannya (Manion, 1991).
Terjadinya pelapukan pada pohon sangat dipengaruhi oleh adanya pelukaan pada pohon, kepekaan pohon terhadap serangan organisme pelapuk, interaksi antara mikroorganisme dengan pohon serta kondisi lingkungan yang mendukung untuk periode waktu yang lama (Manion, 1991).
Berdasarkan tipe pelapukan kayu akibat serangan jenis-jenis jamur, terdapat 3 (tiga) macam jamur perusak kayu antara lain :
1. Brown-rot Fungi Jamur tingkat tinggi dari kelas Basidiomycetes. Golongan jamur ini menyerang hemiselulosa dan selulosa kayu dan meninggalkan residu kecoklatan yang kaya akan lignin.
2. White-rot Fungi Spesies jamur dari kelas Basidiomycetes, juga mendegradasi hemiselulosa, selulosa dan lignin.Menyebabkan warna kayu lebih muda dari warna normal.
3. Soft-rot Fungi Jenis-jenis jamur dari kelas Ascomycetes atau fungiimperfectie, menyerang selulosa dan komponen dinding sel lainnya. Akibat serangan jamur ini yaitu permukaan kayu menjadi lebih lunak.


(Tambunan dan Nandika, 1989)
Pelapukan oleh fungi Pelapuk Putih Tahap awal dalam pelapukan kayu yang dilakukan oleh white rot
fungiakan menyebabkan perubahan warna dan pengerasan pada permukaan kayu. Hifa berkembang pada permukaan kayu atau bagian-bagian kayu yang retak kemudian miselium menghisap zat makanan. Sifat fisik kayu, warna kayu dan strukturnya akan berubah. Tahap ini disebut pelapukan tingkat lanjut (Advanced decay) yang ditandai dengan berkurangnya kekuatan kayu sehingga mudah hancur. Jamur pelapuk putih akan meninggalkan warna putih pada kayu (Hardjo et. al., 1989).
Fungi Pelapuk Putih (FPP) dari kelas Basidiomycetes merupakan organisme yang bekerja efisien dan efektif dalam proses biodelignifikasi. Ada jenis jamur lain yang juga mampu mendegradasi lignin, seperti fungi pelapuk coklat (brown-rotfungus) namun enzim yang dihasilkan oleh jenis jamur ini tidak bekerja se-efektif enzim yang dihasilkan FPP. Proses biodelignifikasi ini mulai saat FPP menembus dan membentuk koloni dalam sel kayu lalu mengeluarkan enzim yang berdifusi melalui lumen dan dinding sel. Hal ini menyebabkan terjadinya penurunan kekuatan fisik kayu dan pembengkakan jaringan kayu. Intinya fungi pelapuk putih (FPP), yang menggunakan selulosa sebagai sumber karbon, memiliki kemampuan yang unik untuk mendegradasi lignin secara keseluruhan membentuk karbon dioksida untuk memperoleh molekul selulosa (Munir, 2006).

Jamur yang paling efisien dalam mendegradasi lignin dalam tanah ialah Abortiporusbiennis, Bjerkanderaadusta, Dichomitussqualens, P.chrysosporium, Phanerochaetesordida, P. radiata, Pleurotusostreatus, Trameteshirsuta, danTrametesversicolor (Toumela, 2002).
Fungi pelapuk putih menyerang kayu lunak dan terutama kayu keras dengan pilihan pada lignin. Ada beberapa enzim-enzim pendegradasi lignin berkembang biak dan enzim-enzim pendegradasi pectin, poliosa dan bahkan selulosa. Hifa fungi masuk ke dalam jaringan kayu melalui selaput noktah dan melalui dinding-dinding sel dengan membentuk lubang-lubang pengeboran (Murtihapsari, 2008).
Fungi pelapuk putih diketahui memiliki kemampuan ligninolitik yang memiliki kemampuan dimana jamur mengeluarkan enzim yang dapat mendegradasi lignin.Pada jamur pelapuk putih, enzim yang dikeluarkan adalah enzim peroksidase (Johjima et al., 1999).
Berdasarkan tingkat urut-urutan penguraian komponen kimia biomassa, degradasi dapat dibagi dalam tiga kategori.Pertama, lignin yang didegradasi diikuti oleh degradasi selulosa dan hemiselulosa.Kedua, sebaliknya degradasi diawali pada selulosa dan hemiselulosa kemudian degradasi lignin.Ketiga, degradasi lignin dan selulosa berjalan secara bersamaan. Proses degradasi pada umumnya berjalan secara bertahap (Widjaya, 2004).
Terdapat tiga jenis enzim ligninolitik yang mampu mendegradasi lignin yaitu fenol oksidase (lakase), lignin peroksidase (LiP), dan mangan peroksidase (MnP).Lakase umumnya ditemukan pada tanaman tingkat tinggi dan berbagai

mikroorganisme.LiP tidak diproduksi oleh semua jenis fungi pelapuk putih

(Akhtar et al., 1997).

Lignin Peroksidase (LiP)

Lignin Peroksidase (LiP) merupakan enzim yang mengandung gugus

heme dengan potensial redoks yang tinggi dan disekresikan keluar sel. Lignin


Peroksidase mengoksidasi gugus metoksil pada cincin aromatik non fenolik

dengan menghasilkan radikal bebas.Enzim LiP memiliki pH optimum dibawah

3.0 tetapi enzim LiP menunjukkan ketidakstabilan apabila berada pada kondisi

yang asam, mendekati pH 4. LiP memerlukan dua jenis metabolit agar dapat

berfungsi dengan baik. Kedua jenis metabolit tersebut adalah hidrogen peroksida

yang juga diperlukan oleh MnP dan veratil alkohol (VA) yang digunakan sebagai

mediator dalam reaksi redoks(Sigit, 2009). Veratil alkohol merupakan substrat

dari enzim LiP dan dihasilkan untuk meningkatkan kerja enzim LiP dan

melindungi LiP dari inaktivasi akibat kelebihan H2O2 (Gadd, 2001).

LiP ditemukan pertama kalipada jamur P.


chrysosporium.P.chrysosporiummerupakan jamur pelapuk putih yang

palingbanyak dipelajari, merupakan perwakilan dari kelompok LiP-MnP. P.

chrysosporiummemiliki kemampuan mendegradasi paling efisien, dan beberapa

strain sering digunakan secara industrial, seperti pada degradasi lignin dan

biopulping

(Kerem &Hadar,1998). Seperti peroxidase lainnya, LiP

mampu dalam oksidasi dari berbagai jenis senyawa fenolik (guaicol, vanillyl

alcohol, cathecol, syringic acid, acetosyringone, dan lainnya) (Wong, 2008).

Beberapa jenis jamur yang dapat menghasilkan LiP ialah Panus sp., Pycnoporus

coccineus, Pycnoporussanguineusand Perenniporia medulla-panis (Dashtban et al., 2010).

METODE PENELITIAN
Waktu dan Tempat Penelitian ini dilaksanakan pada bulan April sampai dengan Juni 2015.
Pengambilan sampel batang pinus di Taman Hutan Raya (Tahura) Berastagi. Isolasi jamur di Laboratorium Bioteknologi, Program Studi Kehutanan, Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara, dan Pengukuran aktivitas LiP di Laboratorium Mikrobiologi Departemen Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sumatera Utara. Alat dan Bahan
Alat yang diperlukan pada penelitian ini antara lain neraca analitik, sentrifuse, spektrofotometer, vortex, pH meter, shaker, pipet serologi, cawan petri, inkubator jamur, sedangkan bahan yang diperlukan pada penelitian ini antara lain penyangga tartrat (pH 2.5), H2O2, guaiakol, MnSO4, penyangga sitrat fosfat (pH 5.5), penyangga sodium asetat (pH 5.5)veratryl alcohol,Potato Dextrose Agar (PDA),KH2PO4, MgSO4.7H2O, tanin, K2HPO4, Alkaline Lignin, NH4NO3, KCL, MgSO4.7H2O, FeSO4.7H2O, MnCL2.2H2O, CuSO4.5H2O.

Pengambilan Sampel Pengambilan sampel dilakukan di areal Taman Hutan Raya (Tahura)
Berastagi. Kriteria sampel yang digunakan adalahbatang kayu pinus yang sudah melapuk. Metode yang digunakan untuk pengambilan sampel yaitu menggunakan metode sensus dengan mengamati secara langsung kayu lapuk yang terinfeksi fungi, dan dilihat secara visual kayu lapuk lalu diambil sampelnya kemudian sampel dibersihkan dan dimasukkan kedalam kantung kertas dan disimpan didalam ruangan pada suhu kamar sampai proses isolasi.
Gambar 1. Sampel Kayu Pinus Lapuk Isolasi Jamur Pendegradasi Lignin dari Kayu Pinus Lapuk
Sampel kayu pinus diambil secara aseptik dari pangkal batang pinus dan selanjutnya dibawa ke dalam laboratorium. Sampel dipotong menjadi ukuran 0,5 cm x 0,5 cm kemudian disebarkan di atas media PDA dan diinkubasi pada suhu ruang selama 2 x 24 jam. Koloni jamur yang tumbuh dipindahkan pada media PDA yang baru dan dibuat biakan murninya. Skrining Aktivitas Enzim Ligninolitik
Skrining aktivitas enzimatik secara kualitatif dilakukan dengan uji Bavendamm. Isolat yang didapat ditumbuhkan pada media PDA yang

ditambahkan 0,1% asam tanin. Bila terbentuk endapan cokelat pada media, mengindikasikan adanya aktivitas fenol oksidase,maka fungi tersebut termasuk ke dalam kelompok fungi pelapuk putih (Nishida et al., 1988). Persiapan Sumber Enzim
Sumber enzim untuk uji kuantitatif dipersiapkan dengan membiakkan isolat jamur pada media ligninase cairpada suhu ruang selama 14 hari. Suspensi jamur disentrifugasi dengan kecepatan 10.000 rpm pada suhu 4 °C selama 15 menit. Suspensi berupa ekstrak enzim kasar digunakan untuk pengukuran aktivitas ligninolitik secara kuantitatif. Pengukuran aktivitas enzim ligninolitik dilakukan setiap 2 hari selama 14 hari dengan metode sebagai berikut : Pengukuran Aktivitas Lignin Peroksidase (LiP)
Pengukuran aktivitas enzim LiP dilakukan menurut metode Bonnen et al.,(1994).Ekstrak enzim sebanyak 0,2 ml ditambahkan ke dalam 2,8 ml larutan penyangga tartrat (pH 2.5). Campuran ini ditambahkan veratryl alcohol 2 mM dan H2O2 0.4 mM masing-masing sebanyak 1 ml. Campuran tersebut selanjutnya dihomogenkan dengan vortex dan diinkubasi selama 30 menit pada suhu kamar. Jumlah veratraldehida yang terbentuk diukur dengan menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang 310 nm. Untuk larutan blanko digunakan 1 ml veratryl alcohol 2 mM dan 1 ml H2O2 0.4 mM dan 0,2 ml akuades yang dipanaskan pada suhu 60 °C selama 5 menit.
Jumlah veratraldehida yang terbentuk dihitung berdasarkan rumus Lambert-Beer, yaitu : ΔC = (At – Ao)
(k x b) Dimana, ΔC = jumlah vetraldehida yang terbentuk selama t menit (mol/liter)

At = nilai absorbansi pada t menit Ao = nilai absorbansi pada awal reaksi b = diameter kuvet (1 cm) k = konstanta (veratraldehida = 9,300/M/cm) Aktivitas enzim dinyatakan dalam satuan unit yang setara dengan 1 nmol veratraldehida yang dihasilkan per menit dari perlakuan 1 ml enzim yang direaksikan dalam kondisi asam, sehingga aktivitas enzim yaitu :

Unit (U/ml) =

ΔC x Vtot (ml) x 109

ε maks x d x t (menit) x Venzim (ml)

Dimana, ε maks = absorptivitas molar veratril alcohol (9300M-1 cm-1)
d = tebal kuvet (cm) Vtot = jumlah keseluruhan larutan t = waktu (menit) V enzim = volume enzim

HASIL DAN PEMBAHASAN

Isolasi Jamur Pelapuk Kayu Sampel kayu yang sudah lapuk diambil dari tegakan pinus di Taman Hutan
Raya (Tahura) Berastagi.Kemudian diisolasi dengan menggunakan PDA (Potatoes Dextrose Agar) sebagai medianya. Kayu pinus yang telah lapuk dan sudah terinfeksi jamur kemudian dipotong menjadi bagian-bagian kecil berukuran 0,5 cm x 0,5 cm, yang kemudian akan ditanam dalam media PDA. Setelah didiamkan selama 3-5 hari dalam ruangan maka selanjutnya dilakukan pemurnian ulang pada jamur yang tumbuh.Dari hasil tersebut diperoleh 13 isolat jamur yang kemudian dikelompokkan menjadi beberapa bagian berdasarkan penampakan visualnya.Adapun yang menjadi penampakan perbedaan visualnya seperti warna jamur dan bentuk permukaan koloni pada media.Setelah dilakukan pemilihan berdasarkan pengamatan visual, ditemukan enam isolat.
Karakteristik ke enam isolat jamur diamati dengan pengamatan makroskopis.Hal ini dapat dilihat pada Gambar 2.

Tabel 1. Hasil Karakteristisasi Makroskopik Jamur Pelapuk Kayu Pinus

Isolat Jamur

Warna Koloni (3-5 hari)

Permukaan Koloni pada Petri (3-5 hari)

FPP A

Putih Kehijauan

Menggunung

FPP B

Putih

Rata Seperti tepung

FPP C FPP D FPP E FPP F
a

Cokelat muda Putih kehijauan Cokelat muda Putih kekuningan

Rata Seperti tepung Rata seperti tepung Hifa tipis merata Tidak merata

bc

d ef

Gambar 2. Isolat jamur Pelapuk Kayu Pinus (a) FPP A, (b) FPP B, (c) FPP C, (d) FPP D, (e) FPP E, (f) FPP F
Skrining Aktivitas Enzim Ligninolitik dengan Uji Bavendamm Setelah didapat isolat jamur yang penampakan visualnya berbeda dari
yang lainnya maka keenam isolat jamur yang telah ada dilakukan skrining aktivitas enzim ligninolitik dengan uji bavendamm.Isolat jamur ditumbuhkan di tempat yang gelap (kotak tertutup).Hasil skrining aktivitas enzim ligninolitik dengan uji bavendamm tersebut, diperoleh tiga isolat jamur yang menunjukkan reaksi positif.
Fungi dikatakan positif fungi pelapuk putih jika dalam cawan petri tempat fungi ditumbuhkan terdapat endapan coklat, seperti pernyataan Musa (2012) yang menyatakan jika pada media terbentuk endapan coklat maka uji Bavendammnya positif (+).Artinya jamur tersebut dapat mengoksidasi asam tannin sehingga jamur

ini dapat dikelompokkan ke dalam jamur pelapuk putih.Warna coklat yang terbentuk karena adanya reaksi fenol oksidasi seperti yang ditunjukkan pada Gambar 3.
Endapan coklat
a a1
Endapan Coklat
b b1
Endapan coklat
c c1 Gambar 3. Hasil Uji Bavendamm Isolat Jamur Pelapuk Kayu Pinus ; (a) Isolat FPP A, (b) Isolat FPP B dan (c) Isolat FPP D menunjukkan hasil positif pada uji Bavendamm terdapat endapan coklat selama 3-5 hari
Pada gambar isolat jamur yang positif uji bavendamm karena adanya endapan coklat.Endapan cokelat merupakan hasil sekresi enzim lignolitik oleh karena kemampuan isolat jamur dalam menggunakan asam tanat sebagai sumber karbon dan diasumsikan sebagai hasil dari aktifitas polifenol menjadi kuinon yang menghasilkan polimer yang berwarna gelap (Prayudyaningsih et al., 2007).

Hasil Uji Bavendamm menunjukkan terjadi degradasi lignin pada kayu

pinus yang lapuk.Degradasi dapat dibagi dalam tiga kategori.Degradasi diawali

pada selulosa, hemiselulosa kemudian degradasi lignin.Pertama, lignin yang

didegradasi kemudian diikuti degradasi selulosa dan hemiselulosa.Kedua,

sebaliknya degradasi diawali pada selulosa dan hemiselulosa kemudian degradasi

lignin.Ketiga, degradasi lignin dan selulosa berjalan secara bersamaan. Pada

umumnya proses degradasi berjalan secara bertahap dan pada umumnya terjadi

pemotongan rantai panjang dari polimer selulosa menjadi lebih pendek

(Prasetya, 2005).

Tabel.2 Uji Bavendam Isolat Jamur dari Kayu Pinus Lapuk

Isolat Jamur
FPP A FPP B FPP C FPP D FPP E FPP F Keterangan : +
-

Endapan Coklat
+ + + = Terbentuk endapan cokelat = Tidak terbentuk endapan cokelat

Uji positif ditandai dengan terbentuknya endapan cokelat pada media,

yang menunjukkan adanya aktivitas ligninolitik(Gambar 3). Tiga isolat jamur

yang menunjukkan hasil positif ditandai dengan adanya endapan coklat yang

terbentuk pada media disebabkan oleh adanya reaksi pengoksidasian fenol yang

terdapat pada media oleh fungi dengan bantuan enzim fenol oksidase. Fungi akan

mengeluarkan enzim-enzim tertentu pada saat menempel pada substrat. Hal ini

sesuai dengan pernyataan Prasetya (2005) yang menyatakan bahwa degradasi

lignin pada umumnya dimulai dari reaksi biotransformasi komponen kompleks

lignin yang umumnya dilakukan oleh enzim yang dikeluarkan oleh fungi pelapuk putih.

Identifikasi Fungi Pelapuk Putih

Setelah didapat hasil uji bavendamm yang positif dari ketiga isolat jamur

tersebut kemudian dilakukan identifikasi isolat jamur secara mikroskopis. Dari

identifikasi didapat 2 jenis jamur yaitu Trametes sp pada 2 fungi (Isolat jamur

FPP A dan FPP D) dan Phanerochete sp (Isolat jamur FPP B) . Jamur yang

didapat termasuk ke dalam divisi Basidiomycota dan masuk ke dalam keluarga

Polyporaceae dan Phanerochaetaceae.Karakterisasi isolat jamur secara

mikroskopis yang didapat dilihat berdasarkan hifa, spora aseksual dan bentuk.

Tabel 3 Hasil Karakterisasi Mikroskopis Jamur Pelapuk Kayu Pinus (Hutahean, 2011)

Isolat FPP A FPP B FPP D

Hifa Tidak Berseptat
Berseptat Tidak Berseptat

Spora Aseksual Konidiaspora Konidiospora Konidiaspora

Bentuk dan Pengaturan Spora Aseksual
Spora berwarna putih, licin, berukuran 4 hingga 5 x 1,5 hingga 3 mikron . Konidia berbentuk bulat, banyak sel, dan diproduksi tunggal Spora berwarna putih, licin, berukuran 4 hingga 5 x 1,5 hingga 3 mikron .

Trametes sp.

Berdasarkan identifikasi mikroskopis yang telah dilakukan pada isolat jamur FPP A dan FPP D dapat digolongkan kepada keluarga Polyporaceae dan genus Trametes. Klasifikasinya adalah Kingdom: Fungi, Division: Basidiomycota, Kelas: Hymenomycetes, Ordo: Aphyllophorales, Family: Polyporaceae, Genus: Trametes, Spesies: Trametes sp. Pada gambar dapat dilihat bahwa fungi Polyporaceae (Trametes sp.) memiliki hifa berdinding tebal, tidak memiliki sekat (septa) seperti pernyataan dari (Cody, 2011) sporanya berbentuk elips berwarna coklat dan hifa mempunyai clamp connection.
ab a
bc c A BC Gambar 4. (A) Mikroskopis Trametes sp. (B) Struktur Mikroskopis Isolat FPP A (C) Struktur Mikroskopis isolat FPP D ( Perbesaran 100x) ( a: clamp connection, b: spora, c:hifa ) (Cody,2011)
Phanerochaete sp. Klasifikasi Kingdom: Fungi, Division: Basidiomycota, Kelas:
Basidiomycetes, Ordo: Polyporales, Family: Phanerochaete, Genus: Phanerochaete, Spesies:Phanerochaete sp. Spora phanerochaete (basidiospora) berbentuk elips berdinding tipis, bening dan hifanya dengan lumen normal, berdinding tebal memanjang dan tidak menggembung sesuai dengan pernyataan dari ( Burdsall dan Eslyn, 1974 ).

a bc AB
Gambar 5. (A). Struktur mikroskopis Phanerochaete sp.(Burdsall, 1981) (B). Struktur Mikroskopis isolat FPP B (a: spora, b: septa, c:clamp connection)
Aktivitas Enzim Lignin Peroksidase (LiP) Pengukuran aktivitas enzim Lip yang dilakukan setiap 2 hari selama 14
hari pengukuran. Isolat yang dikultur dalam media ligninase cair memiliki hasil yang berbeda-beda.Aktivitas produksi enzim LiP ditentukan dengan mengukur perubahan veratryl alcohol menjadi veratraldehida pada panjang gelombang 310 nm. Aktivitas enzim LiP yang tertinggi didapatkan pada spesies Trametes sp. 1 pada hari ke-8 pengukuran ke-4 yaitu sebesar 1,541 (U/ml) kemudian mengalami penurunan pada pengukuran selanjutnya sampai akhir pengukuran di hari ke-14. Pada isolat jamur Phanerochete sp. , aktivitas enzim tertinggi di dapat pada hari ke-8 pengukuran ke-4 yaitu sebesar 0,77 (U/ml) dan pada hari ke-10 telah terjadi penurunan aktivitas enzim LiP, dan kemudian aktivitas berhenti pada hari ke-14 ,pengukuran ke- 7. Isolat jamur Trametes sp. 2 mengalami puncak aktivitas enzim pada hari ke-8, pengukuran ke-4 yakni sebesar 1,344 (U/ml) dan kemudian terjadi penurunan aktivitas enzim pada hari ke-10 dan berhenti pada hari ke 14 .
Dari ketiga isolat jamur yang telah diuji didapat bahwa isolat jamur yang memiliki aktivitas enzim LiP tertinggi adalah isolat jamur Trametes sp. 1 sebesar 1,541 (U/ml) dan kemudian diikuti isolat jamur Trametes sp. 2 yaitu 1,344 (U/ml) dan aktivitas enzim isolat jamur Phanerochaete sp. adalah yang terendah yakni sebesar 0,77 (U/ml). Tabel 4. Aktivitas Enzim Lignin Peroksidase (LiP) dari Isolat Jamur Pelapuk
Kayu Pinus (U/ml)

Waktu (Hari)

Trametes sp. 1

Isolat Phanerochaete sp.

Trametes sp. 2

2

0,000

0,000

0,000

4

0,577

0,095

0,095

6

0,866

0,192

0,577

8

1,541

0,770

1,344

10

1,059

0,385

0,770

12

0,481

0,095

0,385

14

0,000

0,000

0,000

Dari hasil pengukuran yang didapat terlihat jelas perbedaan aktivitas

enzim pada ketiga isolat jamur yang diukur.Hal ini mungkin dipengaruhi oleh

jenis jamur dan kemampuan jamur dalam mengubah substrat yang tersedia.

Gandjar et al., (2006) menyatakan bahwa substrat adalah sumber nutrien utama

bagi fungi, untuk bertahan hidup jamur mengeluarkan enzim ekstraseluler yang

berguna untuk mengubah senyawa-senyawa kompleks dari substrat menjadi

senyawa-senyawa yang lebih sederhana. Enzim yang dihasilkan jamur dalam

mengubah substrat menjadi senyawa yang lebih sederhana mempunyai

Aktivitas (U/ml)

kemampuan dan kecepatan berbeda-beda. Kurva Aktivitas Enzim LiP (Pinus sp.)
2
1,5
1
0,5
0 0 2 4 6 8 10 12
Masa Inkubasi Hari Ke-

14

FPP A FPP B FPP D
16

Gambar 6.Aktivitas Enzim Lignin Peroksidase (LiP) dari Isolat Jamur Pelapuk Kayu Pinus

Aktivitas enzim Lignin Peroksidase (LiP) pada ketiga isolat jamur pelapuk putih dimulai pada hari ke 4 (Gambar 6). Pada isolat jamur Trametes sp. 1 aktivitas enzim terlihat maksimum pada hari ke 8 yaitu 1,541 dan kemudian menurun di hari selanjutnya dan berhenti pada hari ke-14. Enzim LiP pada Isolat jamur Phanerochaete sp. mencapai aktivitas maksimumnya pada hari ke-8 yaitu 0,770 dan pada hari selanjutnya terus mengalami penurunan dan akhirnya pada hari ke-14 enzim berhenti bekerja.Tidak berbeda jauh dari kedua isolat jamur sebelumnya isolat jamur Trametes sp. 2 mengalami aktivitas enzim maksimum adalah pada hari ke-8 yaitu sebesar 1,344 dan berhenti pada hari ke-14.
Aktivitas enzim tertinggi isolat jamur pelapuk putih Trametes sp.1 yang didapat adalah sebesar 1,541 U/ml pada hari ke-8.Herliyana (2007) melaporkan isolat Pleorotus EA4 pada substrat kayu sengon mencapai aktivitas enzim LiP tertinggi pada hari ke-6 sebesar 0,430 U/ml.
Dari hasil aktivitas enzim yang telah diukur (Gambar 6) dilihat waktu pola aktivitas enzim LiP dari ketiga isolat jamur pelapuk putih yang didapat relatif sama, aktivitas dimulai pada hari ke-4 dan mengalami puncak aktivitas pada hari ke-8. Widjaja et al. (2004)melaporkan aktivitas maksimum enzim LiP pada P. chrysosporiumdicapai pada hari ke-4 sebesar 0,81 U/ml, danlangsung mengalami penurunan karena pertumbuhan jamur mulai menurun dan adanya kematian sel.
Penelitian yang dilaporkan oleh Sigit (2009), diperoleh aktivitas maksimum LiP pada jamur tiram Thailand lebih tinggi dari jamur tiram Bogor pada media Sludge yaitu sebesar 4,014 U/ml. Hal ini dapat dikaitkan dengan Supriyanto (2009) yang menyatakan bahwa jenis isolat jamur pelapuk putih yang

ditemukan dan juga media yang digunakan berpengaruh dalam produksi enzim lignin peroksidase.
Kurva aktivitas enzim LiP ketiga isolat jamur pelapuk putih (Gambar 6) menunjukkan hasil yang sama. Pada hari ke-2 sampai hari ke-4 terjadi fase lag yaitu fase penyesusaian sel-sel dengan lingkungannya dan pembentukan enzimenzim untuk mengurai substrat. Pada hari ke-4 sampai hari ke-6 terjadi fase akselerasi dimana mulainya sel-sel membelah dan fase lag menjadi fase aktif. Di hari ke-6 sampai ke-8 terjadi fase eksponensial yaitu fase perbanyakan jumlah sel yang sangat banyak, aktivitas sel sangat meningkat.Pada hari ke-8 sampai hari ke10 dinamakan fase deselerasi dimana sel-sel mulai kurang aktif membelah.Fase terakhir adalah fase kematian dipercepat yaitu pada hari ke-12 sampai hari ke-14 dimana jumlah sel yang sudah mati lebih banyak daripada yang masih hidup (Gandjar, 2006).
Pengukuran aktivitas enzim pada ketiga isolat jamur memiliki hasil yang berbeda-beda karena dipengaruhi beberapa faktor seperti jumlah substrat yang tersedia, kelembapan yang cocok , suhu, derajat keasaman (pH < 7) dan bahan kimia yang ada (Gandjar, 2006).
Dari ketiga isolat jamur yang diuji dapat dilihat bahwa isolat jamur Trametes sp. 1 mempunyai potensi yang tinggi untuk diaplikasikan dalam proses biopulping. Proses biopulping dengan menggunakan jamur pelapuk sebagai pendegradasi lignin kayu, akan menghasilkan limbah yang ramah lingkungan karena dalam prosesnya tidak melibatkan senyawa kimia. Proses biopulping dengan menggunakan jamur pelapuk juga dapat mengurangi biaya produksi, seperti pernyataan Fadillah (2008) yang menyatakan sekitar 20% dari biaya

investasi harus disediakan untuk mengelolah limbah proses pengolahan secara kimia.
KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan 1. Didapat tiga isolat jamur yang positif jamur pelapuk putih pada kayu pinus
lapuk yaitu Trametes sp. 1, Phanerochaete sp. , dan Trametes sp. 2 dan ketiga isolat jamur pelapuk putih yang didapat memiliki pola aktivitas enzim LiP yang sama . 2. Aktivitas enzim Lignin Peroksidase (LiP) tertinggi selama pengukuran secara berturut-turut adalah adalah Trametes sp. 1, Trametes sp. 2, dan Phanerochaete sp. 3. Jenis jamur yang memiliki potensi yang tinggi dalam proses biolpulping adalah jenis jamur Trametes sp. 1 karena memiliki nilai aktivitas enzim Lignin Peroksidase (LiP) yang paling tinggi. Saran

Perlu dilakukan penelitian lanjutan untuk mengetahui laju aktivitas pendegradasian lignin pada jenis enzim pendegradasi lignin lain seperti Manganase peroksidase (MnP) dan Lakase.
DAFTAR PUSTAKA
Agustina, D. 2009. Kadar Lignin dan Tipe Monomer Penyusun Lignin Pada Kayu Akasia.[Skripsi]. Bogor: Institut Pertanian Bogor.
Akhtar, M.R.A., Blachette dan T.K. Kirk. 1997. Fungal Delignification and Biomehanical Pulping Of wood. Advances in Biochhemical Engineering Biotechnology.
Bonnen, A. M., Anton. L. Hand Orth. A. B. 1994. Lignin-Degrading Enzymes of The Commercial Button Mushroom, Agaricus bisporus.Appl. Environ.Microbiol.60(3):960-965.
Burdsall, H.H. and Eslyn. 1974. The Taxonomy Of Sporotrichum Proinosum and Sporotrichum Pulverulentum/Phanerochaete Chrysosporium. Madison. U.S. Department Agriculture, Forest Service.
Cody, B. R. 2011. Trametes versicolor (L.) Lloyd. North Carolina. N. C. University.
Dashtban, M., Schraft. H., Syed. A and Qin, W. 2010.Fungal Biodegradatian and Enzymatic Modification of Lignin.Int J Biochem Mol Biol 1(1): 36-50.
Fadillah S, Distantina, E. Kriswiyati dan A. Jumari. 2008. Bioledignifikasi Batang Jagung Dengan Jamur Pelapuk Putih Phanerochaete chrysosporium. Ekuilibrium 7:7-11.
Gadd, M. G. 2001. Fungi in Bioremediation.Cambridge University Press. United Kingdom. Hlm. 16-35.

Gandjar,I., R.A. Samson, K.van den Tweel-Vermeulen, A, Oetari&I. Santoso. 1999. Pengenalan Kapang Tropik Umum. Yayasan Obor Indonesia, Jakarta.
Gandjar, I S. Wellyzar, dan Aryanti.2006. Mikologi Dasar dan Terapan.Yayasan Obor Indonesia. Jakarta.
Gold, M.Hand Alic. M. 1993. Molecular Biology of The Lignin-Degrading BasidiomycetesPhanerochaete chrysosporium. Microbiol.Rev. 57:605622.
Hardjo, S., N. S. Indrasti, dan T. Bantacut. 1989. Biokonversi : Pemanfaatan Limbah Industri Pertanian. PAU-Pangan dan Gizi.Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Haygreen, J dan Bo