Pengaruh Pasta Tomat (Solanum Lycopersicum) Terhadap Kecepatan Gerak, Jumlah, dan Viabilitas Spermatozoa Pada Mencit Galur Balb/c Yang Mengalami Spermiotoksisitas Akibat Induksi Sisplatin.

iv ABSTRAK

PENGARUH PASTA TOMAT (Solanum lycopersicum) TERHADAP KECEPATAN GERAK, JUMLAH, DAN VIABILITAS SPERMATOZOA

PADA MENCIT GALUR BALB/c YANG MENGALAMI SPERMIOTOKSISITAS AKIBAT INDUKSI SISPLATIN Susan, 2007, Pembimbing I : Sylvia Soeng, dr., M.Kes.

Pembimbing II : Sri Utami S., Dra., M.Kes.

Salah satu faktor yang signifikan dalam etiologi infertilitas pria adalah stres oksidatif karena dapat memperburuk fungsi sperma. Konsumsi antioksidan mungkin dapat memberi perlindungan melawan stres oksidatif. Likopen adalah suatu antioksidan kuat dengan konsentrasi tertinggi dalam produk-produk tomat. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh pasta tomat (Solanum lycopersicum) terhadap kecepatan gerak, jumlah dan viabilitas spermatozoa pada mencit galur BALB/c yang mengalami spermiotoksisitas akibat induksi sisplatin. Penelitian ini menggunakan metode prospektif eksperimental laboratorium sungguhan dengan Rancangan Acak Lengkap (RAL) yang komparatif. Dua puluh empat ekor mencit jantan galur BALB/c dibagi secara acak dalam 4 kelompok perlakuan (n=6). Pada hari pertama semua kelompok perlakuan diinjeksi dengan sisplatin dosis tunggal secara intraperitonial. Pada hari kedua sampai hari keenam, kelompok kontrol diberi akuades peroral. Kelompok lain diberi pasta tomat dengan dosis 0,269 g, 0,538 g, dan 1,076 g secara peroral. Pada hari ketujuh semua mencit dikorbankan dan dibuat suspensi spermatozoa dari kauda epididimisnya. Kecepatan gerak, jumlah, dan viabilitas spermatozoa dianalisis secara statistik dengan menggunakan uji ANAVA satu arah, dilanjutkan dengan uji beda rata-rata Tukey HSD dengan =0,05. Hasil penelitian menunjukkan kecepatan gerak spermatozoa berbeda sangat signifikan dengan kelompok kontrol hanya pada pasta tomat dengan dosis 1,076 g (p=0,000). Jumlah spermatozoa pada pasta tomat dosis 0,269 g dan 0,538 g berbeda signifikan dengan kelompok kontrol (p=0,024 dan p=0,017), sedangkan jumlah spermatozoa pada dosis 1,076 g berbeda sangat signifikan (p=0,000). Viabilitas spermatozoa berbeda sangat signifikan dengan kelompok kontrol hanya pada pasta tomat dosis 1,076 g (p=0,000). Kesimpulan penelitian adalah pasta tomat meningkatkan kecepatan gerak, jumlah, dan viabilitas spermatozoa mencit yang spermiotoksisitas akibat induksi oleh sisplatin.

Kata kunci: pasta tomat, sisplatin, spermiotoksisitas, kecepatan gerak spermatozoa, jumlah spermatozoa, viabilitas spermatozoa

ABSTRACT

THE EFFECT OF TOMATO PASTE (Solanum lycopersicum) ON SISPLATIN-INDUCED SPERMIOTOXICITY IN SPERM MOTILITY,

SPERM COUNT, AND SPERM VIABILITY OF BALB/c MICE

Susan, 2007, 1st Tutor : Sylvia Soeng, dr., M.Kes. 2nd Tutor : Sri Utami S., Dra., M.Kes.

One of a significant factor in the etiology of male infertility is oxidative stress which is detrimental to sperm function. Intake of antioxidant may have protective effect against oxidative stress. Lycopene is a potent antioxidant found in its highest concentration in tomato products. The objective of this study is to investigate the effect of tomato paste (Solanum lycopersicum) on cisplatin-induced spermiotoxicity in sperm motility, sperm count, and sperm viability of BALB/c mice. This experiment is based on the real experimental perspective method using Random Complete Design with comparative characteristic. Twenty four male mice of BALB/c strain were randomly divided into four groups (n=6). On the first day, all groups were injected intraperitoneally with cisplatin as a single dose. On the second to sixth day, the control group was administered with aquadest by oral gavage. The other groups were administered with 0.269 g, 0.538 g, and 1.076 g of tomato paste by oral gavage. On the seventh day the mice were sacrificed and sperm suspension was made from the cauda epididymis. Sperm motility, sperm count, and sperm viability were analyzed using oneway ANOVA, followed by Tukey HSD test with = 0.05. The results shows that sperm motility is very significantly different with the control group only at 1.076 g of tomato paste (p=0.000). Sperm count at 0.269 g and 0.538 g of tomato paste are significantly different with the control group (p=0.024 and p=0.017), whereas sperm count at 1.076 g is very significantly different (p=0.000). Sperm viability is very significantly different with the control group only at 1.076 g of tomato paste (p=0.000). It could be concluded that tomato paste may increase the sperm motility, sperm count, and sperm viability against cisplatin-induced spermiotoxicity.

Key words: tomato paste, cisplatin, spermiotoxicity, sperm motility, sperm count, sperm viability

viii DAFTAR ISI

Halaman

JUDUL ... i

LEMBAR PERSETUJUAN ... ii

SURAT PERNYATAAN ... iii

ABSTRAK ... iv

ABSTRACT ... v

PRAKATA ... vi

DAFTAR ISI ... viii

DAFTAR TABEL ... xi

DAFTAR GAMBAR ... xii

DAFTAR GRAFIK ... xiii

DAFTAR LAMPIRAN ... xiv

BAB I PENDAHULUAN 1.1Latar Belakang ... 1

1.2Identifikasi Masalah ... 3

1.3Maksud dan Tujuan ... 3

1.4Manfaat Karya Tulis Ilmiah ... 3

1.5Kerangka Pemikiran dan Hipotesis Penelitian ... 4

1.5.1 Kerangka Pemikiran ... 4

1.5.2Hipotesis Penelitian ... 5

1.6Metodologi Penelitian ... 5

1.7Lokasi dan Waktu Penelitian ... 6

BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1Sistem Reproduksi Pria ... 7

2.1.1 Anatomi ... 7

2.1.2.1 Tahap-tahap Spermatogenesis ... 10

2.1.2.2 Morfologi Spermatozoa ... 13

2.1.2.3 Sel Sertoli ... 15

2.1.2.4Sel Leydig ... 16

2.1.3Mekanisme Hormonal dalam Reproduksi ... 16

2.1.3.1Gonadotropin Releasing Hormone (GnRH) ... 17

2.1.3.2 Hormon Gonadotropin ... 18

2.1.3.3 Hormon Testosteron ... 19

2.2 Analisis Semen pada Manusia ... 20

2.3 Infertilitas pada Pria ... 22

2.3.1 Stres Oksidatif ... 23

2.3.2 Peranan ROS dalam Sistem Reproduksi Pria ... 25

2.3.3 Peranan Antioksidan ... 27

2.4 Tomat ... 29

2.4.1 Taksonomi ... 30

2.4.2 Karakteristik Tanaman ... 30

2.4.3 Komposisi ... 31

2.4.4 Mekanisme Kerja ... 32

2.5 Pengaruh Obat-obatan terhadap Fungsi Reproduksi Pria ... 34

2.5.1 Sisplatin ... 34

2.5.1.1 Mekanisme Kerja Sisplatin ... 35

2.5.1.2 Efek Samping ... 36

BAB III BAHAN DAN METODE PENELITIAN 3.1 Alat dan Bahan ... 39

3.1.1 Alat ... 39

3.1.2 Bahan ... 39

3.2 Persiapan Penelitian ... 40

3.2.1 Hewan Coba ... 40

3.2.2 Bahan Uji ... 40

x

3.3.1 Metode Penarikan Sampel ... 40

3.3.2 Variabel Penelitian ... 41

3.3.3 Prosedur Penelitian ... 41

3.3.3.1 Prosedur Pemeriksaan Kecepatan Spermatozoa ... 42

3.3.3.2 Prosedur Penghitungan Jumlah Spermatozoa ... 43

3.3.2.3Prosedur Penghitungan Viabilitas Spermatozoa ... 43

3.4Analisis Data ... 44

BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil ... 45

4.1.1 Kecepatan Gerak Spermatozoa ... 45

4.1.2 Jumlah Spermatozoa ... 48

4.1.3 Viabilitas Spermatozoa ... 52

4.2 Pengujian Hipotesis Penelitian ... 55

4.3 Pembahasan ... 57

BAB V KESIMPULAN 5.1 Kesimpulan ... 60

5.2 Saran ... 60

DAFTAR PUSTAKA ... 61

LAMPIRAN ... 67

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 2.1 Kontribusi Sistem Ekskretori dan Organ

Aksesoris dalam Produksi Sperma... 9

Tabel 2.2 Kriteria Semen Normal ... 21

Tabel 2.3 Nomenklatur untuk Variabel Semen ... 21

Tabel 2.4 Komposisi Nutrien Tomat dan Produk-Produk Tomat ... 31

Tabel 2.5 Kandungan Karotenoid Tomat dan Produk Tomat ... 32

Tabel 4.1 Kecepatan Gerak Spermatozoa Mencit (mm/detik) ... 45

Tabel 4.2 ANAVA Satu Arah Kecepatan Gerak Spermatozoa ... 46

Tabel 4.3 Uji Beda Rata-rata Tukey HSD Kecepatan Gerak Spermatozoa ... 47

Tabel 4.4 Jumlah Spermatozoa Mencit (ekor/mm3) ... 48

Tabel 4.5 ANAVA Satu Arah Jumlah Spermatozoa ... 49

Tabel 4.6 Uji Beda Rata-rata Tukey HSD Jumlah Spermatozoa ... 50

Tabel 4.7 Viabilitas Spermatozoa Mencit (%) ... 52

Tabel 4.8 ANAVA Satu Arah Viabilitas Spermatozoa ... 53

xii

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 2.1 Sistem Reproduksi Pria ... 10

Gambar 2.2 Spermatogenesis ... 11

Gambar 2.3 Spermiogenesis ... 12

Gambar 2.4 Morfologi Spermatozoa ... 14

Gambar 2.5 Aksis Hipotalamus-Hipofisis-Gonad... 17

Gambar 2.6 Etiologi dan Penanggulangan Stres Oksidatif ... 25

Gambar 2.7 Tomat ... 29

Gambar 2.8 Tomat ... 29

Gambar 2.9 Struktur 3 Dimensi Lycopene ... 33

Gambar 2.10 Struktur Molekul Sisplatin ... 36

DAFTAR GRAFIK

Halaman

Grafik 4.1 Perbandingan Rata-Rata Kecepatan Gerak Spermatozoa ... 48 Grafik 4.2 Perbandingan Rata-Rata Jumlah Spermatozoa ... 51 Grafik 4.3 Perbandingan Rata-Rata Viabilitas Spermatozoa ... 55

xiv

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

LAMPIRAN 1 Perhitungan Dosis ... 67 LAMPIRAN 2 Analisis Data ... 69 LAMPIRAN 3 Foto-Foto Penelitian ... 75

LAMPIRAN 1 PERHITUNGAN DOSIS

Sisplatin

Dosis sisplatin untuk tikus = 7 mg/kg

Dosis absolut pada tikut (BB ± 200 g)= 0.2 x 7 = 1.4 mg

Dosis mencit (BB ± 20 g) = 1.4 x 0.14 (faktor konversi dari tikus ke mencit) = 0.196 mg

Berat badan rata-rata mencit = 27.60 gram

Untuk mencit 27.60 g, sisplatin yang diperlukan = 27.60 0.196 0.27048

20 x = mg

Sediaan: Cisplatin DBL 25mg/50ml

Jadi, dalam 1 ml sediaan terdapat 0.5 mg sisplatin

Volume yang disuntikkan = 0.27048 1 0.541

0.5 x ml= ml

Pasta Tomat

Berdasarkan jurnal “Protective role of lycopene on cisplatin-induced changes in sperm characteristics, testicular damage and oxidative stress in rats”, disebutkan bahwa dosis 4 mg/kg likopen untuk tikus dewasa Sprague-Dawley mampu memberi efek protektif terhadap spermitoksisitas yang diinduksi oleh sisplatin (Atessahin et al, 2006).

Dosis likopen tikus = 4 mg/kg

Dosis absolut pada tikut (BB ± 200 g)= 0.2 x 4 = 0.8 mg

Dosis mencit (BB ± 20 g) = 0.8 x 0.14 (faktor konversi dari tikus ke mencit) = 0.112 mg

68

Berat badan rata-rata mencit = 27.60 gram

Untuk mencit 27.60 g, likopen yang diperlukan = 27.60 0.112

20 x =0.155 mg

(dijadikan dosis 2).

Sediaan likopen yang digunakan berupa pasta tomat Hunt’s. Menurut data USDA tahun 2006 dalam 100 gram pasta tomat terdapat 28.8 mg likopen.

Jadi, dalam 1 gram pasta tomat terdapat 0.288 mg likopen.

Pasta Tomat Dosis 1 : 0.0775

1 0.269 gram pasta tomat

0.288 x gram=

Pasta Tomat Dosis 2 : 0.155

1 0.538 gram pasta tomat

0.288x gram=

Pasta Tomat Dosis 3 : 0.31

1 1.076 gram pasta tomat

LAMPIRAN 2 ANALISIS DATA

KECEPATAN GERAK SPERMATOZOA

Oneway

Descriptives Hasil

Test of Homogeneity of Variances Hasil

Levene

Statistic df1 df2 Sig.

1.337 3 20 .290

ANOVA Hasil

95% Confidence Interval for Mean

N Mean

Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper

Bound Minimum Maximum Kontrol 6 .028034 .0097504 .0039806 .017801 .038266 .0194 .0460 PT 1 6 .040176 .0064936 .0026510 .033361 .046990 .0316 .0514 PT 2 6 .042980 .0131864 .0053833 .029141 .056818 .0313 .0639 PT 3 6 .060902 .0114011 .0046545 .048937 .072867 .0460 .0765 Total 24 .043023 .0154922 .0031623 .036481 .049564 .0194 .0765

Sum of

Squares df Mean Square F Sig. Between Groups .003 3 .001 10.019 .000 Within Groups .002 20 .000

70

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons Dependent Variable: Hasil

Tukey HSD

95% Confidence Interval

(I) Kelompok (J) Kelompok Mean

Difference (I-J) Std. Error Sig. _{Lower Bound Bound} Upper Kontrol PT 1 -.0121419 .0060629 .220 -.029112 .004828

PT 2 -.0149459 .0060629 .097 -.031915 .002024 PT 3 -.0328683(*) .0060629 .000 -.049838 -.015899 PT 1 PT 2 -.0028040 .0060629 .966 -.019774 .014166

PT 3 -.0207264(*) .0060629 .013 -.037696 -.003757 Kontrol .0121419 .0060629 .220 -.004828 .029112 PT 2 PT 1 .0028040 .0060629 .966 -.014166 .019774 PT 3 -.0179224(*) .0060629 .036 -.034892 -.000953 Kontrol .0149459 .0060629 .097 -.002024 .031915 PT 3 PT 1 .0207264(*) .0060629 .013 .003757 .037696 PT 2 .0179224(*) .0060629 .036 .000953 .034892 Kontrol .0328683(*) .0060629 .000 .015899 .049838 * The mean difference is significant at the .05 level.

Homogenous Subsets

Hasil Tukey HSD

N _{Subset for alpha = .05}

Kelompok _{1 2 1}

Kontrol _{6 .028034}

PT 1 6 .040176

PT 2 6 .042980

PT 3 _{6 .060902}

Sig. _{.097 1.000}

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 6.000.

71

JUMLAH SPERMATOZOA

One way

Descriptives Hasil

95% Confidence Interval for Mean

N Mean

Std.

Deviation Std. Error _Bound Lower _Bound Upper Minimum Maximum

Kontrol 6 1481250 654776.202 267311.26 794104.517 2168395.48 930000.0 2437500 PT 1 6 2788750 794425.500 324322.85 1955051.567 3622448.43 1702500 3840000 PT 2 6 2853750 249367.951 101804.04 2592054.385 3115445.62 2565000 3262500 PT 3 6 4030000 976114.747 398497.18 3005630.395 5054369.60 3262500 5910000 Total 24 2788437.5 1140195.162 232741.36 2306975.309 3269899.69 930000.0 5910000

Test of Homogeneity of Variances Hasil

Levene

Statistic df1 df2 Sig.

1.674 3 20 .204

ANOVA Hasil

Sum of

Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 2.0E+013 3 6.509E+012 12.548 .000 Within Groups 1.0E+0.13 20 5.187E+011

72

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons Dependent Variable: Hasil

Tukey HSD

95% Confidence Interval

(I) Kelompok (J) Kelompok

Mean Difference

(I-J) Std. Error Sig. _{Lower Bound Upper Bound}

Kontrol PT 1 -1307500.0(*) 415815.2 .024 -2471340.44 -143659.5636 PT 2 -1372500.00(*) 415815.2 .017 -2536340.44 -208659.5636 PT 3 -2548750.0(*) 415815.2 .000 -3712590.44 -1384909.5636 PT 1 Kontrol 1307500.00(*) 415815.2 .024 143659.564 2471340.4364 PT 2 -65000.000 415815.2 .999 -1228840.44 1098840.4364 PT 3 -1241250.0 (*) 415815.2 .034 -2405090.44 -77409.5636 PT 2 Kontrol 1372500.00(*) 415815.2 .017 208659.5636 2536340.4364 PT 1 65000.000 415815.2 .999 -1098840.44 1228840.4364 PT 3 -1176250.00(*) 415815.2 .047 -2340090.44 -12409.5636 PT 3 Kontrol 2548750.00(*) 415815.2 .000 1384909.5636 3712590.4364 PT 1 1241250.00(*) 415815.2 .034 77409.5636 2405090.4364 PT 2 1176250.00(*) 415815.2 .047 12409.5636 2340090.4364 * The mean difference is significant at the .05 level.

Homogeneous Subsets

Hasil Tukey HSD

Subset for alpha = .05

Kelompok N _{1 2 3}

Kontrol (-) 6 1481250

PT 1 6 2788750

PT 2 6 2853750

PT 3 6 4030000

Sig. 1.000 .999 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 6.000.

73

VIABILITAS SPERMATOZOA

One way

Descriptives Hasil

95% Confidence Interval for Mean

N Mean

Std. Deviation

Std.

Error _{Lower Bound Upper Bound} Minimum Maximum

Kontrol 6 4.2500 1.86414 .76103 2.2937 6.2063 2.50 7.50 PT 1 6 7.5000 2.07364 .84656 5.3238 9.6762 4.50 10.50 PT 2 6 7.6667 2.35938 .96321 5.1907 10.1427 3.50 10.00 PT 3 6 13.3333 2.69568 1.10050 10.5044 16.1623 10.00 17.50 Total 24 8.1875 3.95302 .80691 6.5183 9.8567 2.50 17.50

Test of Homogeneity of Variances Hasil

Levene

Statistic df1 df2 Sig.

.452 3 20 .719

ANOVA Hasil

Sum of

Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 256.365 3 85.455 16.586 .000 Within Groups 103.042 20 5.152

74

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons Dependent Variable: Hasil

Tukey HSD

95% Confidence Interval (I) Kelompok (J) Kelompok

Mean Difference

(I-J) Std. Error Sig. _Bound Lower _Bound Upper Kontrol PT 1 -3.25000 1.31048 .094 -6.9180 .4180

PT 2 -3.41667 1.31048 .073 -7.0846 .2513

PT 3 -9.08333(*) 1.31048 .000 -12.7513 -5.4154 PT 1 PT 2 -.16667 1.31048 .999 -3.8346 3.5013 PT 3 -5.83333(*) 1.31048 .001 -9.5013 -2.1654 Kontrol 3.25000 1.31048 .094 -.4180 6.9180

PT 2 PT 1 .16667 1.31048 .999 -3.5013 3.8346

PT 3 -5.66667(*) 1.31048 .002 -9.3346 -1.9987 Kontrol 3.41667 1.31048 .073 -.2513 7.0846 PT 3 PT 1 5.83333(*) 1.31048 .001 2.1654 9.5013

PT 2 5.66667(*) 1.31048 .002 1.9987 9.3346

Kontrol 9.08333(*) 1.31048 .000 5.4154 12.7513 * The mean difference is significant at the .05 level.

Homogeneous Subsets

Hasil Tukey HSD

Subset for alpha = .05

Kelompok N _{1 2}

Kontrol 6 4.2500 PT 1 6 7.5000 PT 2 6 7.6667

PT 3 6 13.3333

Sig. .073 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 6.000.

LAMPIRAN 3

FOTO-FOTO PENELITIAN

Bahan

1. Pasta Tomat 2. Cisplatin

Injeksi Cisplatin Intraperitonial pada Hewan Coba

76

Pengambilan Data

Kecepatan Gerak dan Jumlah Spermatozoa

77

Viabilitas Spermatozoa

78

RIWAYAT HIDUP

Nama : Susan

NRP : 0410100

Tempat dan Tanggal Lahir : Makassar, 29 Maret 1986

Alamat : Jln. Yos Sudarso no. 29 Sorong 98413

Riwayat Pendidikan :

TK Santa Theresia, Sorong 1992 SD Kristus Raja I, Sorong 1998 SLTP Don Bosco. Sorong 2001 SMU Santo Aloysius, Bandung 2004

Mahasiswa Fakultas Kedokteran Universitas Kristen Maranatha, Bandung angkatan 2004

BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Studi protokol penatalaksanaan dan efektivitas pengobatan infertilitas pria di Surabaya pada tahun 2000 menyatakan masalah infertilitas pria merupakan masalah yang menunjukkan peningkatan dalam dekade terakhir ini. Observasi di beberapa negara menunjukkan gejala penurunan jumlah dan kualitas sperma yang cukup menyolok di antara pria dewasa muda (Aucky Hinting, 2000).

Penelitian yang dilakukan Arsyad terhadap 246 pasangan infertil di Palembang menunjukkan infertilitas yang disebabkan faktor pria sebesar 48,4% (Hermawanto H. H. dan Hadiwidjaja, 2002). Data BKKBN pada tahun 2004 menunjukkan kasus infertilitas yang disebabkan oleh gangguan pihak pria persentasenya cukup besar, yakni sekitar 40-50 %, bahkan mencapai 60 %.

Banyak faktor yang menyebabkan infertilitas pada pria, termasuk kelainan hormonal dan gonad, kelainan genetik seperti cystic fibrosis dan sickle cell anemia, kelainan urogenital seperti varikokel, kanker testis, trauma, dan atau obstruksi saluran reproduksi. Keadaan-keadaan tersebut dapat meningkatkan terbentuknya oksigen reaktif yang menyebabkan oxidative stress (OS) dan mengakibatkan disfungsi spermatozoa dan infertilitas (Agarwal, Prabakaran, Sikka, 2007).

Sumber utama reactive oxygen species (ROS) dalam cairan semen yaitu leukosit dan spermatozoa imatur (Garrido et al., 2004). Peningkatan pembentukan ROS dapat disebabkan karena polusi, misalnya polusi lingkungan atau kebiasaan merokok. Selain itu infeksi dan kerusakan iatrogenik juga dapat meningkatkan ROS (Agarwal, Prabakaran, Said, 2005). Gupta dan Kumar pada tahun 2002 menyatakan bahwa pembentukan berlebih ROS yang mengandung oksigen radikal bebas telah diidentifikasi sebagai salah satu penyebab infertilitas pria.

2

Universitas Kristen Maranatha

Testis manusia dikenal sebagai organ target kerusakan akibat pemajanan agen terapeutik dan agen toksik dari lingkungan. Terdapat banyak kemungkinan mekanisme dan manifestasi kerusakan akibat bahan toksik pada spermatogenesis (misalnya defek spermatogenesis, retained spermatid, mengelupasnya epitel seminiferus), salah satu konsekuensi awal pajanan toksik, yaitu induksi apoptosis sel germinativum. Efek jangka panjang yang ditakutkan dari pajanan toksik adalah timbulnya atropi testis persisten, yang dalam keadaan berat, dapat mengakibatkan azoospermia berkepanjangan dan infertilitas (Boekelheide, 2005).

Sisplatin (cis-diamminedichloroplatinum-II) adalah obat anti kanker yang digunakan secara luas. Pasien pria yang menerima kemoterapi menggunakan sisplatin untuk kanker testis dan tumor padat lainnya mengalami kerusakan tubulus seminiferus yang berat dan kadang ireversibel. Karena kebanyakan pasien ini diterapi dengan obat kemoterapi sebelum dan selama masa reproduktif mereka, dan angka kesembuhan beberapa jenis kanker tinggi, maka sterilitas yang disebabkan oleh terapi sangat memrihatinkan(Sawhney et al., 2005).

Pemberian antioksidan seperti vitamin E, selenium, vitamin C, karotenoid dan lain-lain dapat memberikan proteksi terhadap kerusakan akibat induksi xenobiotic. Likopen (lycopene), suatu hidrokarbon alifatik, adalah satu dari 600 karotenoid alamiah. Belakangan ini likopen dalam tomat menarik perhatian karena komponen antioksidannya yang efisien dalam menghancurkan radikal bebas (Atessahin et al., 2006).

Tomat adalah salah satu sumber terbaik likopen (Agarwal and Rao, 2000). Likopen merupakan pigmen karotenoid yang membawa warna merah. Pigmen ini termasuk ke dalam golongan senyawa fitokimia yang mudah ditemui pada tomat dan buah-buahan lain yang berwarna merah. Selain itu, pigmen ini juga terdapat di dalam darah manusia, yaitu 0,5 mol per liter darah. Nama likopen diambil dari nama spesies tomat, yaitu Solanum lycopersicum (http://portal.cbn.net.id, 2007). Tomat dapat dengan mudah ditemukan pada berbagai menu makanan yang ditawarkan di berbagai restoran, yaitu dalam bentuk jus, sup, lalap, sambal, pasta dan lain-lain.

3

Riset yang dilakukan oleh Stahl dan Sies pada tahun 2003 menunjukkan bahwa likopen dalam jus tomat yang telah melalui proses pemanasan lebih banyak diserap dibandingkan dengan jus tomat yang tidak diolah. Narmada Gupta, kepala Departemen Urology di All India Institute of Medical Science New Delhi, India mengemukakan bahwa diet tinggi likopen dapat meningkatkan fertilitas pada pria infertil.

Likopen berperan dalam meningkatkan fertilitas seorang pria. Kadar likopen yang tinggi dalam tomat, mudahnya mendapatkan buah tomat, harganya yang murah, membuat penulis tertarik untuk mengetahui efek protektif tomat pada karakteristik sperma mencit jantan yang diinduksi dengan sisplatin.

1.2 Identifikasi Masalah

Apakah pemberian pasta tomat meningkatkan kecepatan gerak, jumlah, dan viabilitas spermatozoa pada mencit galur BALB/c yang diinduksi dengan sisplatin.

1.3 Maksud dan Tujuan

Maksud dari penyusunan Karya Tulis Ilmiah ini adalah untuk mengetahui pengaruh tomat terhadap infertilitas.

Tujuan dari penyusunan Karya Tulis Ilmiah ini adalah untuk mengetahui efek pasta tomat (Solanum lycopersicum) terhadap kecepatan gerak, jumlah, dan viabilitas spermatozoa pada mencit galur BALB/c yang mengalami spermiotoksisitas akibat induksi sisplatin.

1.4 Manfaat Karya Tulis Ilmiah

Manfaat akademis penyusunan Karya Tulis Ilmiah ini adalah memberikan informasi farmakologi tentang buah tomat (Solanum lycopersicum), terutama terhadap pengobatan infertilitas.

4

Universitas Kristen Maranatha

Manfaat praktis penyusunan Karya Tulis Ilmiah ini diharapkan dapat memberi masukan mengenai terapi adjuvan guna meningkatkan fertilitas kaum pria akibat kemoterapi.

1.5 Kerangka Pemikiran dan Hipotesis Penelitian

1.5.1 Kerangka Pemikiran

Reactive oxygen species (ROS) mempunyai peranan penting dalam sistem reproduksi pria. Secara fisiologis, ROS diperlukan oleh spermatozoa untuk mencapai maturasi fungsional. SenyawaROS dalam kadar rendah esensial untuk fertilisasi normal, kapasitasi, hiperaktivasi, motilitas, dan reaksi akrosom (de Lamirande et al., 1998; Aitken et al., 2004; Allamaneni et al., 2004). Sedangkan dari segi patologis, terbukti bahwa ROS dalam kadar tinggi memediasi kerusakan pada banyak elemen seluler pada testis termasuk DNA dari spermatozoa matur. Ketidakseimbangan antara pembentukan ROS dan kapasitas antioksidan menyebabkan stres oksidatif dan mengakibatkan disfungsi spermatozoa.

Senyawa ROS dan kerusakan oksidatif pada biomolekul sebagai mekanisme sitotoksisitas obat dapat menyebabkan infertilitas pria dengan mengurangi fungsi sperma. Sisplatin menyebabkan peroksidasi lipid dan penurunan aktivitas enzim proteksi terhadap kerusakan oksidatif. Sisplatin juga mempunyai efek toksik langsung terhadap sel Sertoli, sel Leydig, dan sel germinativum (Atessahin et al., 2006). Mekanisme kerja sisplatin mirip dengan alkilator, yaitu membentuk ikatan kovalen melalui alkilasi gugus nukleofilik seperti gugus fosfat, amino, sulfhidril, hidroksil, karboksil, dan imidazole. Efek kemoterapeutik dan sitotoksiknya berkaitan dengan alkilasi DNA (Goodman & Gilman, 2001). Tempat ikatan utama adalah N7 guanin, tetapi interaksi kovalen dengan adenin dan sitosin juga terjadi (Katzung, 1998).

Antioksidan adalah mekanisme pertahanan utama terhadap stres oksidatif yang diinduksi oleh radikal bebas. Antioksidan dapat diklasifikasikan menjadi

5

Beberapa sumber antioksidan pada produk makanan yang sangat baik yaitu likopen (pada produk-produk tomat), vitamin C (pada buah-buahan sitrus dan sayuran hijau) dan vitamin E (pada minyak nabati, kacang-kacangan dan biji-bijian) (Agarwal, Prabakaran, Sikka, 2007). Likopen ditemukan dalam konsentrasi tinggi pada testis dan plasma seminal, sedangkan pada pria infertil, kadar antioksidan ini menurun (Gupta and Kumar, 2003). Likopen yang banyak ditemukan pada tomat dapat menghancurkan ROS yang terbentuk dan mencegah reaksi berantai peroksidasi lipid. Penelitian yang dilakukan oleh Atessahin et al. membuktikan adanya efek protektif likopen terhadap kerusakan oksidatif yang diinduksi oleh sisplatin (Atessahin et al., 2006).

1.5.2 Hipotesis Penelitian

1. Pasta tomat meningkatkan kecepatan gerak spermatozoa mencit galur BALB/c yang diinduksi dengan sisplatin.

2. Pasta tomat meningkatkan jumlah spermatozoa mencit galur BALB/c yang diinduksi dengan sisplatin.

3. Pasta tomat meningkatkan viabilitas spermatozoa mencit galur BALB/c yang diinduksi dengan sisplatin.

1.5 Metodologi Penelitian

Penelitian ini bersifat prospektif eksperimental laboratorium sungguhan dengan Rancangan Acak Lengkap (RAL) yang bersifat komparatif. Data yang diamati adalah kecepatan gerak (mm/detik), jumlah spermatozoa (ekor/mm3), dan viabilitas spermatozoa (%).

Data yang diperoleh dianalisis secara statistik dengan menggunakan metode uji Analisis Varian (ANAVA) satu arah dengan =0,05 dan dilanjutkan dengan uji beda rata-rata Tukey HSD. Tingkat kemaknaan berdasarkan nilai p 0,05.

6

Universitas Kristen Maranatha 1.6Lokasi dan Waktu

Penelitian dilakukan di Laboratorium Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Kristen Maranatha Bandung, dilaksanakan dari bulan Maret 2007 sampai dengan Desember 2007.

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

1. Pasta tomat meningkatkan kecepatan gerak spermatozoa mencit galur

BALB/c yang diinduksi dengan sisplatin.

2. Pasta tomat meningkatkan jumlah spermatozoa mencit galur BALB/c yang

diinduksi dengan sisplatin.

3. Pasta tomat meningkatkan viabilitas spermatozoa mencit galur BALB/c

yang diinduksi dengan sisplatin.

5.2 Saran

1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai efek sisplatin terhadap fertilitas pada dosis jangka panjang sesuai pemakaiannya dalam terapi kanker dan efek proteksi likopen terhadap kerusakan yang terjadi.

2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai efek protektif likopen terhadap infertilitas yang diakibatkan oleh faktor-faktor lain.

3. Perlu dilakukan percobaan dengan produk tomat lainnya dan

membandingkan efektivitas masing-masing produk terhadap infertilitas.

4. Diharapkan antioksidan, terutama likopen dalam tomat dapat

dikembangkan menjadi terapi adjuvan untuk mengatasi infertilitas pria akibat efek samping obat kemoterapi.

5. Sampel yang digunakan harus lebih banyak untuk menghindari

kemungkinan kurangnya sampel karena kematian sampel akibat toksisitas sisplatin.

61 Universitas Kristen Maranatha DAFTAR PUSTAKA

Agarwal A. and Prabakaran S. A. 2005. Oxidative Stress and Antioxidants in Male Infertility: a Difficult Balance. Iranian Journal of Reproductive Medicine, 1(3): 1-8

______. 2005. Mechanism, Measurement, and Prevention of Oxidative Stress in Male Reproductive Physiology. Indian Journal of Experimental Biology, (43): 963-74

Agarwal A., Prabakaran S. A., Said T. M. 2005. Prevention of Oxidative Stress Minireview: Injury to Sperm. Journal of Andrology, 6(26): 654-60

Agarwal A., Prabakaran S. A., Sikka S. C. 2007. Clinical Relevance of Oxidative Stress in Patients with Male Factor Infertility: Evidence-Based Analysis. AUA Update Series. 1(26): 1-11

Agarwal S., Rao A. V. 2000. Tomato Lycopene and Its Role in Human Health and Chronic Diseases. Can Med Assoc J., 163:739–44

Aitken R. J., Ryan A. L., Baker M. A., McLaughlin E. A. 2004. Redox Activity Associated with the Maturation and Capacitation of Mammalian Spermatozoa.

Free Radic Biol Med., 36:994–1010

Allamaneni S. S., Naughton C. K., Sharma R. K., Thomas A. J. Jr., Agarwal A. 2004. Increased Seminal Reactive Oxygen Species Levels in Patients with Varicoceles Correlate with Varicocele Grade but Not with Testis Size. Fertil Steril,82: 1684–6

Alvarez J. G. 2003. Nurture vs Nature: How Can We Optimize Sperm Quality?

Journal of Andrology, 5(24): 640

Anonymous. 2001. Spermatogenesis.

www.faculty.sunydutchess.edu/scala/Bio102/pdf/Spermatogenesis.jpg, 20 Oktober 2007

Anonymous. 2003. Radikal Bebas, Penyebab Infertilitas Pria.

62

Anonymous. 2004. Male Reproductive System.

http://anatomy.iupui.edu/courses/histo.D502-D502f04-lecture.f04/Malef04/malerepro.jpg.htm, 15 Oktober 2007

Anonymous. 2007. Semen Analysis.

http://www.uhmc.sunysb.edu/urology/male_infertility/SEMEN_ANALYSIS.h tml, 20 Oktober 2007

Atessahin A., Karahan I., Turk G., Gur S., Yilmaz S., Ceribasi A.O. 2006. Protective Role of Lycopene on Cisplatin-induced Changes in Sperm Characteristics, Testicular Damage and Oxidative Stress. Reprod Toxicol., 21(1): 42-7

Aucky Hinting. 2001. Studi Protokol Penatalaksanaan dan Efektivitas

Pengobatan Infertilitas Pria.

http://www.pusdiknakes.or.id/news/iptek.php3?id=5, 2 Mei 2007

BKKBN. 2004. Berbagai Upaya Mengatasi Infertilitas Kaum Pria.

http://www.bkkbn.go.id, 19 April 2007

Boekelheide K. 2005. Mechanisms of Toxic Damage to Spermatogenesis. JNCI

Monograph, (34): 6-8

Canene-Adams K., Campbell J. K., Zaripheh S., Jeffery E. H., Erdman J. W. Jr. 2005. The Tomato As a Functional Food. J. Nutr. 135: 1226–1230

Carlsen E., Giwercman A., Keiding N et al. 1992. Evidence for Decreasing Quality of Semen During Past 50 Years. Bmj, 305: 609

de Lamirande E., Tsai C., Harakat A., Gagnon C.1998. Involvement of Reactive Oxygen Species in Human Sperm Arcosome Reaction Induced by A23187, Lysophosphatidylcholine, and Biological Fluid Ultrafiltrates. J Androl., 19: 585–94

Drake R. L., Vogl W., Mitchell. A. W. M. 2005. Pelvis and Perineum. In: Bill Schmitt Editor: Gray’s Anatomy for Students. 1st ed. Spain: Elsevier Inc. P. 440-441

Elvina Karyadi. 2007. Antioksidan Resep Sehat & Umur Panjang. http://www.depkes.go.id/index.php?option=articles&task=viewarticle&artid= 337&Itemid=3, 2 Mei 2007

63

Universitas Kristen Maranatha

Embryology.ch. 2007. Spermatogenesis.

http://www.embryology.ch/anglais/cgametogen/spermato03.html, 20 oktober 2007

Fritzgerald P. A. 2002. Hormon-hormon Hipotalamus dan Pituitari. Dalam B. G. Katzung ed.: Farmakologi Dasar dan Klinik. Edisi 1. Jilid 2. Jakarta : Salemba Medika. Hal. 524-5

Ganong W. F. 2003. The Male Reproductive System In: Review of Medical Physiology. 21st ed. USA: McGraw-Hill. P. 428-52

Garrido N., Meseguer M., Simon C., Pellicer A., Remohi J. 2004. Pro-oxidative and Anti-oxidative Imbalance in Human Semen and Its Relation with Male Fertility. Asian J Androl, 6:59–65

Giwercman A. Carlsen E, Keiding N et al. 1993. Evidence for Increasing Incidence of Abnormalities of the Human Testis: a Review. Environ Health Perspect, 101(2): 65

Goodman L. S., Gilman A., Hardman J. G., Limbird L. E., Gilman A. G. 2001. Antineoplastic Agents. In J. G. Hardman, L. E. Limbird, and A. G. Gilman eds. : Pharmacological Basis of Therapeutics. 10th edition. New York: McGraw-Hill. P. 1389-1390

Gupta N. 2003. Examining the Health Benefits of Lycopene from Tomatoes:

Emerging Role of Lycopene in Male Infertility.

http://72.14.235.104/search?q=cache:_49btjId2WsJ:www.lycopene.org/docum ents/doc/22923Lycopene%2520FinalIda%2520Laquatra.doc+lycopene+male+ infertile+mechanism&hl=en&ct=clnk&cd=15, 30 April 2007

Gupta N. P. and Kumar R. 2002. Lycopene Therapy in Idiopathic Male Infertility-a PreliminInfertility-ary Report. Int Urol Nephrol, 34(3): 369-72

Guyton A. C. and Hall J. E. 1997. Fisiologi Reproduksi dan Hormonal Pria (dan Kelenjar Pineal). Dalam A. C. Guyton and J. E. Hall eds.: Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi 9. Jakarta: EGC. Hal 1265-8, 1274-5

Hermawanto H. H., Hadiwidjaja D. B. 2002. Analisis sperma pada infertilitas pria. http://www.medika.co.id/arsip/102002/pus-3.htm, 9 Mei 2007.

IPTEKnet. 2005. Tomat.

64

Katzung B. G. 1998. Kemoterapi Kanker. Dalam: Farmakologi Dasar dan Klinik. Edisi 4. Hal 864-865

Martini F. H. 2004. The Reproductive System. In Martini F. H. Ed. :

Fundamentals of Anatomy & Physiology. 6th edition. San Fransisco: Pearson Education International. P. 1048-63

MDidea. 2007. Lycopene.

http://www.mdidea.com/products/herbextract/lycopene/data.html, 29 April 2007

Molina P. E. 2004. Male Reproductive System. In: Endocrine Physiology. USA: McGraw-Hill. P. 181-205

Nakazawa L. 2004. All About Supplement: Lycopene.

http://www.lef.org/magazine/mag2004/dec2004_aas_01.htm, 2 Mei 2007

Nukman Moeloek. 1983. Analisis Semen Manusia.

http://www.kalbe.co.id/files/cdk/files/16_AnalisisSemenManusia.pdf/16_Anal isisSemenManusia.htm, 20 Oktober 2007

Nurwitri. 2007. Kemandulan Belum Tentu Disebabkan oleh Isteri. http://hqweb01.bkkbn.go.id/hqweb/pria/artikel03-4I.html, 2 Mei 2007

Paget G. E. and Barnes J. M. 1964. Toxicity Test in Evaluation of Drug Activities Pharmacometrics. 1st ed. London and New York: Academic Press. P. 161-162

Rubenstein J. And Brannigan R. E. 2005. Male Infertility.

www.emedicine.com/male_ infertility, 23 Oktober 2007

Sawhney P., Giammona C. J., Meistrich M. L., Richburg J. H. 2005. Cisplatin-Induced Long-term Failure of Spermatogenesis in Adult C57/Bl/6J Mice.

Journal of Andrology, 1(26)

http://www.andrologyjournal.org/cgi/content/full/26/1/136

Shi J., Kakuda Y., Yeung D. 2004. Antioxidative Properties of Lycopene and Other Carotenoids from Tomatoes: Synergistic Effects. IOS Press. 1-4(21): 203-210

The Free Dictionary. 2007. Spermatozoon.

65

Universitas Kristen Maranatha

The George Mateljan Foundation. 2007. Tomatoes.

http://www.whfoods.com/genpage.php?tname=foodspice&dbid=44, 1 Mei 2007

Tonucci L., Holden J., Beecher G., Khackik F., Davis C. Mulokozi G. 1995. Carotenoid Content of Thermally Processed Tomato-based Food Products. J. Agric. Food Chem. 43: 579–586

USDA National Nutrient Database for Standard Reference. 2005. Tomato. http://www.nal.usda.gov, 1 Mei 2007

______. 2006. Tomato. http://www.nal.usda.gov, 1 Mei 2007

USDA Nutrient Data Bank. 2004. Tomato. http://www.nal.usda.gov, 1 Mei 2007 Vander A. J., Sherman J. H., Luciano D. S. 1990. Section A-Male Reproductive

Physiology. In: Human Physiology. 5th ed. Caledonia: York Graphic Services Inc. P. 604-14

Wagner E. 2005. LE Magazine: What’s Missing from Multi-Vitamin

Supplements?.

http://www.lef.org/magazine/mag2005/jan2005_report_multi_03.htm, 1 Mei 2007

Weisburger J. H. 2002. Lycopene and Tomato Products in Health Promotion. Exp Biol Med., 227: 924-27

WHO. 1988. Penuntun Laboratorium WHO untuk Pemeriksaan Semen Manusia dan Interaksi Sperma-Getah Serviks. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Hal. 3-17, 32, 36

______. 1992. WHO Laboratory Manual for the Examination of Human Semen

and Semen-Cervical Mucus Interaction. 3rd ed. Cambridge: Cambridge

University Press. P. 1-20

Wikipedia. 2007. Cisplatin. http://en.wikipedia.org/wiki/Cisplatin, 1 Mei 2007 ______. 2007. Tomato. http://en.wikipedia.org/wiki/tomato, 29 April 2007 ______. 2007. Lycopene. http://en.wikipedia.org/wiki/lycopene, 29 April 2007

66

Wildan Yatim. 1994. Reproduksi & Embriologi untuk Mahasiswa Biologi & Kedokteran. Edisi 3. Bandung: Penerbit Tarsito. Hal. 28-43

Zhang X., Yamamoto N., Soramoto S., Takenaka I. 2001. Cisplatin-induced Germ Cell Apoptosis in Mouse Testes. Archives of Andrology, 1(46): 43-49

Medicine, 1(3): 1-8

______. 2005. Mechanism, Measurement, and Prevention of Oxidative Stress in Male Reproductive Physiology. Indian Journal of Experimental Biology, (43): 963-74

Agarwal A., Prabakaran S. A., Said T. M. 2005. Prevention of Oxidative Stress Minireview: Injury to Sperm. Journal of Andrology, 6(26): 654-60

Agarwal A., Prabakaran S. A., Sikka S. C. 2007. Clinical Relevance of Oxidative Stress in Patients with Male Factor Infertility: Evidence-Based Analysis. AUA Update Series. 1(26): 1-11

Agarwal S., Rao A. V. 2000. Tomato Lycopene and Its Role in Human Health and Chronic Diseases. Can Med Assoc J., 163:739–44

Aitken R. J., Ryan A. L., Baker M. A., McLaughlin E. A. 2004. Redox Activity Associated with the Maturation and Capacitation of Mammalian Spermatozoa. Free Radic Biol Med., 36:994–1010

Allamaneni S. S., Naughton C. K., Sharma R. K., Thomas A. J. Jr., Agarwal A. 2004. Increased Seminal Reactive Oxygen Species Levels in Patients with Varicoceles Correlate with Varicocele Grade but Not with Testis Size. Fertil Steril,82: 1684–6

Alvarez J. G. 2003. Nurture vs Nature: How Can We Optimize Sperm Quality? Journal of Andrology, 5(24): 640

Anonymous. 2001. Spermatogenesis.

www.faculty.sunydutchess.edu/scala/Bio102/pdf/Spermatogenesis.jpg, 20 Oktober 2007

Anonymous. 2003. Radikal Bebas, Penyebab Infertilitas Pria. http://portal.cbn.net.id, 29 April 2007

Anonymous. 2004. Male Reproductive System.

http://anatomy.iupui.edu/courses/histo.D502-D502f04-lecture.f04/Malef04/malerepro.jpg.htm, 15 Oktober 2007

Anonymous. 2007. Semen Analysis.

http://www.uhmc.sunysb.edu/urology/male_infertility/SEMEN_ANALYSIS.h tml, 20 Oktober 2007

Atessahin A., Karahan I., Turk G., Gur S., Yilmaz S., Ceribasi A.O. 2006. Protective Role of Lycopene on Cisplatin-induced Changes in Sperm Characteristics, Testicular Damage and Oxidative Stress. Reprod Toxicol., 21(1): 42-7

Aucky Hinting. 2001. Studi Protokol Penatalaksanaan dan Efektivitas

Pengobatan Infertilitas Pria.

http://www.pusdiknakes.or.id/news/iptek.php3?id=5, 2 Mei 2007

BKKBN. 2004. Berbagai Upaya Mengatasi Infertilitas Kaum Pria. http://www.bkkbn.go.id, 19 April 2007

Boekelheide K. 2005. Mechanisms of Toxic Damage to Spermatogenesis. JNCI Monograph, (34): 6-8

Canene-Adams K., Campbell J. K., Zaripheh S., Jeffery E. H., Erdman J. W. Jr. 2005. The Tomato As a Functional Food. J. Nutr. 135: 1226–1230

Carlsen E., Giwercman A., Keiding N et al. 1992. Evidence for Decreasing Quality of Semen During Past 50 Years. Bmj, 305: 609

de Lamirande E., Tsai C., Harakat A., Gagnon C.1998. Involvement of Reactive Oxygen Species in Human Sperm Arcosome Reaction Induced by A23187, Lysophosphatidylcholine, and Biological Fluid Ultrafiltrates. J Androl., 19: 585–94

Drake R. L., Vogl W., Mitchell. A. W. M. 2005. Pelvis and Perineum. In: Bill Schmitt Editor: Gray’s Anatomy for Students. 1st ed. Spain: Elsevier Inc. P. 440-441

Elvina Karyadi. 2007. Antioksidan Resep Sehat & Umur Panjang. http://www.depkes.go.id/index.php?option=articles&task=viewarticle&artid= 337&Itemid=3, 2 Mei 2007

Embryology.ch. 2007. Spermatogenesis. http://www.embryology.ch/anglais/cgametogen/spermato03.html, 20 oktober 2007

Fritzgerald P. A. 2002. Hormon-hormon Hipotalamus dan Pituitari. Dalam B. G. Katzung ed.: Farmakologi Dasar dan Klinik. Edisi 1. Jilid 2. Jakarta : Salemba Medika. Hal. 524-5

Ganong W. F. 2003. The Male Reproductive System In: Review of Medical Physiology. 21st ed. USA: McGraw-Hill. P. 428-52

Garrido N., Meseguer M., Simon C., Pellicer A., Remohi J. 2004. Pro-oxidative and Anti-oxidative Imbalance in Human Semen and Its Relation with Male Fertility. Asian J Androl, 6:59–65

Giwercman A. Carlsen E, Keiding N et al. 1993. Evidence for Increasing Incidence of Abnormalities of the Human Testis: a Review. Environ Health Perspect, 101(2): 65

Goodman L. S., Gilman A., Hardman J. G., Limbird L. E., Gilman A. G. 2001. Antineoplastic Agents. In J. G. Hardman, L. E. Limbird, and A. G. Gilman eds. : Pharmacological Basis of Therapeutics. 10th edition. New York: McGraw-Hill. P. 1389-1390

Gupta N. 2003. Examining the Health Benefits of Lycopene from Tomatoes: Emerging Role of Lycopene in Male Infertility. http://72.14.235.104/search?q=cache:_49btjId2WsJ:www.lycopene.org/docum ents/doc/22923Lycopene%2520FinalIda%2520Laquatra.doc+lycopene+male+ infertile+mechanism&hl=en&ct=clnk&cd=15, 30 April 2007

Gupta N. P. and Kumar R. 2002. Lycopene Therapy in Idiopathic Male Infertility-a PreliminInfertility-ary Report. Int Urol Nephrol, 34(3): 369-72

Guyton A. C. and Hall J. E. 1997. Fisiologi Reproduksi dan Hormonal Pria (dan Kelenjar Pineal). Dalam A. C. Guyton and J. E. Hall eds.: Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi 9. Jakarta: EGC. Hal 1265-8, 1274-5

Hermawanto H. H., Hadiwidjaja D. B. 2002. Analisis sperma pada infertilitas pria. http://www.medika.co.id/arsip/102002/pus-3.htm, 9 Mei 2007.

IPTEKnet. 2005. Tomat.

Katzung B. G. 1998. Kemoterapi Kanker. Dalam: Farmakologi Dasar dan Klinik. Edisi 4. Hal 864-865

Martini F. H. 2004. The Reproductive System. In Martini F. H. Ed. : Fundamentals of Anatomy & Physiology. 6th edition. San Fransisco: Pearson Education International. P. 1048-63

MDidea. 2007. Lycopene.

http://www.mdidea.com/products/herbextract/lycopene/data.html, 29 April 2007

Molina P. E. 2004. Male Reproductive System. In: Endocrine Physiology. USA: McGraw-Hill. P. 181-205

Nakazawa L. 2004. All About Supplement: Lycopene. http://www.lef.org/magazine/mag2004/dec2004_aas_01.htm, 2 Mei 2007 Nukman Moeloek. 1983. Analisis Semen Manusia.

http://www.kalbe.co.id/files/cdk/files/16_AnalisisSemenManusia.pdf/16_Anal isisSemenManusia.htm, 20 Oktober 2007

Nurwitri. 2007. Kemandulan Belum Tentu Disebabkan oleh Isteri. http://hqweb01.bkkbn.go.id/hqweb/pria/artikel03-4I.html, 2 Mei 2007

Paget G. E. and Barnes J. M. 1964. Toxicity Test in Evaluation of Drug Activities Pharmacometrics. 1st ed. London and New York: Academic Press. P. 161-162 Rubenstein J. And Brannigan R. E. 2005. Male Infertility.

www.emedicine.com/male_ infertility, 23 Oktober 2007

Sawhney P., Giammona C. J., Meistrich M. L., Richburg J. H. 2005. Cisplatin-Induced Long-term Failure of Spermatogenesis in Adult C57/Bl/6J Mice. Journal of Andrology, 1(26)

http://www.andrologyjournal.org/cgi/content/full/26/1/136

Shi J., Kakuda Y., Yeung D. 2004. Antioxidative Properties of Lycopene and Other Carotenoids from Tomatoes: Synergistic Effects. IOS Press. 1-4(21): 203-210

The Free Dictionary. 2007. Spermatozoon.

The George Mateljan Foundation. 2007. Tomatoes. http://www.whfoods.com/genpage.php?tname=foodspice&dbid=44, 1 Mei 2007

Tonucci L., Holden J., Beecher G., Khackik F., Davis C. Mulokozi G. 1995. Carotenoid Content of Thermally Processed Tomato-based Food Products. J. Agric. Food Chem. 43: 579–586

USDA National Nutrient Database for Standard Reference. 2005. Tomato. http://www.nal.usda.gov, 1 Mei 2007

______. 2006. Tomato. http://www.nal.usda.gov, 1 Mei 2007

USDA Nutrient Data Bank. 2004. Tomato. http://www.nal.usda.gov, 1 Mei 2007 Vander A. J., Sherman J. H., Luciano D. S. 1990. Section A-Male Reproductive

Physiology. In: Human Physiology. 5th ed. Caledonia: York Graphic Services Inc. P. 604-14

Wagner E. 2005. LE Magazine: What’s Missing from Multi-Vitamin Supplements?.

http://www.lef.org/magazine/mag2005/jan2005_report_multi_03.htm, 1 Mei 2007

Weisburger J. H. 2002. Lycopene and Tomato Products in Health Promotion. Exp Biol Med., 227: 924-27

WHO. 1988. Penuntun Laboratorium WHO untuk Pemeriksaan Semen Manusia dan Interaksi Sperma-Getah Serviks. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Hal. 3-17, 32, 36

______. 1992. WHO Laboratory Manual for the Examination of Human Semen and Semen-Cervical Mucus Interaction. 3rd ed. Cambridge: Cambridge University Press. P. 1-20

Wikipedia. 2007. Cisplatin. http://en.wikipedia.org/wiki/Cisplatin, 1 Mei 2007 ______. 2007. Tomato. http://en.wikipedia.org/wiki/tomato, 29 April 2007 ______. 2007. Lycopene. http://en.wikipedia.org/wiki/lycopene, 29 April 2007

Wildan Yatim. 1994. Reproduksi & Embriologi untuk Mahasiswa Biologi & Kedokteran. Edisi 3. Bandung: Penerbit Tarsito. Hal. 28-43

Zhang X., Yamamoto N., Soramoto S., Takenaka I. 2001. Cisplatin-induced Germ Cell Apoptosis in Mouse Testes. Archives of Andrology, 1(46): 43-49