Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak n-Heksana Dan Etilasetat Serta Etanol Alga Merah (Galaxaura oblongata)

Lampiran 1. Identifikasi tumbuhan

Lampiran 2. Gambar simplisia alga Galaxaura oblongata (Ellis et Solander)

Lamouroux

Lampiran 3. Gambar serbuk simplisia alga Galaxaura oblongata (Ellis et

Solander) Lamouroux

Lampiran 4. Gambar mikroskopik serbuk simplisia alga Galaxaura oblongata

(Ellis et Solander) Lamouroux pada pembesaran 10x40

3 Keterangan : 1. Sel parenkim

2. Sel parenkim berisi pigmen merah

3. Sel propagule

Lampiran 5. Bagan pembuatan serbuk simplisia talus alga merah (Galaxaura oblongata )

Talus alga merah Dibersihkan dari pengotor Dicuci hingga bersih Ditiriskan Ditimbang sebagai berat basah Dikeringkan di lemari pengering

Simplisia Dilakukan pemeriksaan makroskopik

Dihaluskan Serbuk Simplisia

Dilakukan pemeriksaan karakteristik simplisia Mikroskopik Kadar abu Kadar abu Kadar sari Kadar sari Kadar tidak larut total larut air larut etanol air asam

Lampiran 6. Bagan pembuatan ekstrak alga merah dengan cara perkolasi bertahap

Evaporatory

Ampas Ekstrak etilasetat kental

Ampas Ekstrak etanol

Ekstrak n-heksana kental Ekstrak etilasetat

Serbuk simplisia 200 g Ekstrak n-heksana Ampas

freeze dryer

Dikeringbekukan dengan

Dipekatkan dengan rotary

Diperkolasi dengan n-heksana Dipekatkan dengan rotary Dikeringkan dengan

freeze dryer etanol

Dikeringbekukan dengan Diperkolasi dengan

Evaporatory cara diangin-anginkan

Dipekatkan dengan rotary Dikeringkan dengan

freeze dryer etilasetat

Dikeringbekukan dengan Diperkolasi dengan

Evaporatory cara diangin-anginkan

Ekstrak etanol kental

Lampiran 7. Bagan pengujian aktivitas antibakteri

Biakan murni bakteri Diambil dengan jarum ose steril Ditanam pada media NA miring

Diinkubasi pada suhu 37 C selama 24 jam Stok kultur bakteri

Diambil 1 ose Disuspensikan ke dalam 10 ml nutrient broth Diukur kekeruhan pada panjang gelombang 580 nm sampai diperoleh transmitan 25%

Inokulum bakteri Dimasukkan 0,1 ml inokulum ke dalam cawan petri Dituang 20 ml media MHA steril cair ke dalam cawan petri Dihomogenkan dan dibiarkan hingga memadat

Media padat Dilubangi dengan punch hole Dimasukkan 0,1 ml ekstrak dengan berbagai konsentrasi dan pelarut DMSO-etanol 96% (1:1) sebagai blanko

Diinkubasi pada suhu 36-37 C selama 18-24 jam Diukur diameter zona hambat di sekitar larutan penguji

Hasil

Lampiran 8. Tabel hasil pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia alga

merah (Galaxaura oblongata) No Penetapan

Kadar (%)

1 Kadar air 7,99

2 Kadar sari larut air 2,95

3 Kadar sari larut etanol 0,49

4 Kadar abu total 68,85

5 Kadar abu tidak larut asam 16,93

Lampiran 9. Perhitungan penetapan kadar air simplisia alga merah

(Galaxaura oblongata)

( )

% Kadar air = × 100%

( )

1. Berat sampel : 5,000 g Volume air : 0,4 ml

% Kadar air = × 100% = 8,00%

2. Berat sampel : 5,001 g Volume air : 0,4 ml

% Kadar air = × 100% = 7,99%

3. Berat sampel : 5,003 g Volume air : 0,4 ml

% Kadar air = × 100% = 7,99%

, , % , % , %

% Kadar air rata-rata = = 7,99%

Lampiran 10. Perhitungan penetapan kadar sari larut air simplisia alga merah

(Galaxaura oblongata)

1. Berat sampel : 5,001 g Berat sari : 0,027 g % Kadar sari larut air =

, , × × 100% = 2,69%

2. Berat sampel : 5,002 g Berat sari : 0,032 g % Kadar sari larut air =

, , × × 100% = 3,19%

3. Berat sampel : 5,002 g Berat sari : 0,030 g % Kadar sari larut air =

, , × × 100% = 2,99%

% Kadar sari larut air rata-rata =

, % , % , % = 2,95%

% Kadar sari larut air =

( ) ( ) × × 100%

Lampiran 11. Perhitungan penetapan kadar sari larut etanol simplisia alga

merah (Galaxaura oblongata)

1. Berat sampel : 5,011 g Berat sari : 0,005 g % Kadar sari larut etanol =

, , × × 100% = 0,49%

2. Berat sampel : 5,010 g Berat sari : 0,005 g % Kadar sari larut etanol =

, , × × 100% = 0,49%

3. Berat sampel : 5,015 g Berat sari : 0,005 g % Kadar sari larut etanol =

, ,

× ×

100% = 0,49% % Kadar sari larut etanol rata-rata =

, % , % , % =

0,49% % Kadar sari larut etanol =

( ) ( ) × × 100%

Lampiran 12. Perhitungan penetapan kadar abu total simplisia alga merah

(Galaxaura oblongata)

1. Berat sampel : 2,0032 g Berat abu : 1,3763 g % Kadar abu total =

, , × 100%

68,77%

2. Berat sampel : 2,0016 g Berat abu : 1,3803 g % Kadar abu total =

, ,

× 100% = 68,93%

3. Berat sampel : 2,0022 g Berat abu : 1,3785 g % Kadar abu total =

, , × 100%

68,86% % Kadar abu total rata-rata =

, % , % , % = 68,85%

% Kadar abu total =

( ) ( ) ×

100%

Lampiran 13. Perhitungan penetapan kadar abu tidak larut asam simplisia alga

merah (Galaxaura oblongata)

1. Berat sampel : 2,0032 g Berat abu : 0,3405 g % Kadar abu tidak larut asam =

, , × 100% = 16,99%

2. Berat sampel : 2,0016 g Berat abu : 0,3395 g % Kadar abu tidak larut asam =

, , × 100% = 16,94%

3. Berat sampel : 2,0022 g Berat abu : 0,3380 g % Kadar abu tidak larut asam =

, , × 100% = 16,88%

% Kadar abu tidak larut asam rata-rata =

, % , % , % = 16,93%

% Kadar abu tidak larut asam

= ( ) ( )

× 100%

Lampiran 14. Hasil pengukuran diameter daerah hambatan pertumbuhan

bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa oleh ekstrak n-heksana Konsentrasi

(mg/ml) Diameter daerah hambatan (mm)

Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa

D1 D2 D3 D* D1 D2 D3 D* 500 - - - - - - - - 400 - - - - - - - - 300 - - - - - - - - 200 - - - - - - - - 100 - - - - - - - -

Blanko - - - - - - - - Keterangan: (*) = Hasil rata-rata tiga kali pengukuran (-) = Tidak ada hambatan Blanko = DMSO-etanol 96% (1:1)

Lampiran 15. Hasil pengukuran diameter daerah hambatan pertumbuhan

bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa oleh ekstrak etilasetat Konsentrasi

(mg/ml) Diameter daerah hambatan (mm)

Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa

D1 D2 D3 D* D1 D2 D3 D* 500 16,2 15,75 15,8 15,91 15,1 14,7 14,85 14,88 400 15,3 14,9 15,05 15,08 14,85 14,6 14,75 14,73 300 15 14,45 14,7 14,71 14,65 14,4 14,45 14,5 200 14,45 13,9 14,2 14,18 14,15 13,85

14 100 14,2 13,65 13,85 13,9 13,55 13,25 13,4 13,4 90 12,4 12,1 12,15 12,21 13,2 12,9 13 13,03

80 11 10,55 10,8 10,78 10,9 10,5 10,6 10,66 70 10,7 10,2 10,35 10,41 10,7 10,4 10,4 10,5 60 10,4 9,85 10 10,08 10,3 9,9 10,15 10,11 50 9,8 9,55 9,75 9,7 9,85 9,7 9,8 9,78 40 - - - - - - - - 30 - - - - - - - -

Blanko - - - - - - - - Keterangan: (*) = Hasil rata-rata tiga kali pengukuran (-) = Tidak ada hambatan Blanko = DMSO-etanol 96% (1:1)

Lampiran 16. Hasil pengukuran diameter daerah hambatan pertumbuhan

bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa oleh ekstrak etanol Konsentrasi

(mg/ml) Diameter daerah hambatan (mm)

Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa

D1 D2 D3 D* D1 D2 D3 D* 500 11,95 12,4 11,7 12,01 11,6 11,9 11,35 11,61 400 11,2 11,6 11,1 11,3 11,2 11,55 11,1 11,28 300 11 11,3 10,6 10,96 10,5 10,9 10,4 10,6 200 10 10,6 9,55 10,05 9,75 9,9 9,3 9,65 100 9,4 9,9 9,2 9,5 9,4 9,6 8,9 9,3

90 - - - - - - - - Blanko - - - - - - - -

Keterangan: (*) = Hasil rata-rata tiga kali pengukuran (-) = Tidak ada hambatan Blanko = DMSO-etanol 96% (1:1)

Lampiran 17. Gambar uji aktivitas antibakteri ekstrak n-heksana alga merah

(Galaxaura oblongata) terhadap bakteri Staphylococcus

aureus

Keterangan: Konsentrasi ekstrak dalam satuan mg/ml Keterangan: Blanko = DMSO-etanol 96% (1:1)

Lampiran 18. Gambar uji aktivitas antibakteri ekstrak n-heksana alga merah

(Galaxaura oblongata) terhadap bakteri Pseudomonas

aeruginosa

Keterangan: Konsentrasi ekstrak dalam satuan mg/ml Keterangan: Blanko = DMSO-etanol 96% (1:1)

Lampiran 19. Gambar uji aktivitas antibakteri ekstrak etilasetat alga merah

(Galaxaura oblongata) terhadap bakteri Staphylococcus

aureus