Penetapan Kadar Simvastatin Dalam Sediaan Tablet Secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi Dengan Fase Gerak Metanol–Air

  Lampiran 1. Kromatogram Penyuntikan Simvastatin Baku pada Pembuatan Kurva kalibrasi

  Kromatogram Simvastatin (5 µg/ml), fase diam TC-C18 (4,6 x 150 mm), fase gerak metanol-air (80:20) v/v, laju alir 1,5 ml/menit.

  Kromatogram Simvastatin (10 µg/ml), fase diam TC-C18 (4,6 x 150 mm), fase gerak metanol-air (80:20) v/v, laju alir 1,5 ml/menit.

  Kromatogram Simvastatin (20 µg/ml), fase diam TC-C18 (4,6 x 150 mm), fase gerak metanol-air (80:20) v/v, laju alir 1,5 ml/menit.

  Kromatogram Simvastatin (30 µg/ml), fase diam TC-C18 (4,6 x 150 mm), fase gerak metanol-air (80:20) v/v, laju alir 1,5 ml/menit.

  Kromatogram Simvastatin (50 µg/ml), fase diam TC-C18 (4,6 x 150 mm), fase gerak metanol-air (80:20) v/v, laju alir 1,5 ml/menit.

  No Konsentrasi (µg/ml)

  Retention time (menit)

  Area Height USP Tailing 1 5 4,623 201,1 11,82 1,3333 2 10 4,584 408,8 23,87 1,5240 3 20 4,595 893,1 50,92 1,5202 4 30 4,558 1356,1 76,87 1,5915 5 50 4,613 2043,2 121,27 1,5453

  Catatan: Luas area merupakan rata-rata dari 3 × replikasi. Lampiran 2. Perhitungan Persamaan Regresi Simvastatin

  No Konsentrasi

  (µg/ml) Luas Area

  X

  

2

Y

  2 XY

  X Y 1 0 2 5 203,1868 25 41284,8797 1015,9340 3 10 417,6224 100 174408,4773 4176,2241 4 20 843,7825 400 711968,9579 16875,6506 5 30 1271,3642 900 1616367,082 38140,9278 6 50 2254,2307 2500 5081556,094 112711,5355

  ∑ 115 4990,1867 3925 7625585,491 172920,2721 23 998,0373 785 1525117,098 34584,0544

  Y  aX  b

  XY

  X Y n

      /

       a

  

  2

  2 X X n

     /

     

  172920 , 2721  115 4990 , 1867 /

  6

       a 

  2

  3925  115 /

  6

      58145 , 9775 

  1280  45 , 4265 b  Y  aX

   998 , 0373  45 , 4265

  23

     46 , 7731  

  Maka persamaan regresinya adalah : Y 

  45 , 4265 X  46 , 7731

  

  XY   X  Y / n      r  _{2 2}

₂

₂

  

  X  

X / n  Y   Y / n

   

         

  172920 , 2721  115 4990 , 1867 /

  6

  

    

r  _{2 2}

  3925  115 / 6 7625585 , 491  4990 , 1867 /

  6

  

       

   

  58145 , 9775

  r 

  58188 , 0294

  r  , 99927

  Lampiran 3. Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) Simvastatin

  

  6 ) 655 , 6009 ( ²

  2

  5597 , 2  µg/ml

  45 7609 , 38 3 x 

  4265 ,

  3 

  /

  Slope Sy x x BatasDetek si

  SimpanganB aku 7609 , 38 

   n Yi Y

   

  Persamaan regresi 7731 ,

  2 ) ( ²

  6009,655

  2

  ∑(Y-Yi)

  1 0 0 -46,7731 46,7731 2187,7228 2 5 203,1868 180,3594 22,8274 521,0906 3 10 417,6224 407,4919 10,1305 102,6272 4 20 843,7825 861,7569 -17,9743 323,0779 5 30 1271,3642 1316,0219 -44,6576 1994,3048 6 50 2254,2307 2224,5519 29,6788 880,8317

  2 X Y Yi

  Luas area Luas area regresi Y-Yi (Y-Yi)

  No Konsentrasi (µg/ml)

  X Y

  45  

  , 46 4265

   

  Slope Sy x x Bataskuant itasi

  /

  10 

  4265 ,

  45 7609 , 38 10 x 

  5326 , 8  µg/ml Lampiran 4. Kromatogram Hasil Penyuntikan Simvastatin Generik (PT. Hexpharm Jaya)

  No Retention time Area Height USP Tailing 1 4,595 856,34387 52,02876 1,33186 2 4,605 857,08301 54,74155 1,32150 3 4,550 860,04279 53,00026 1,31218 4 4,605 853,08301 50,37900 1,33392 5 4,585 855,49912 52,19956 1,31481 6 4,608 857,22903 52,44268 1,33857

  Lampiran 5. Perhitungan Kadar Simvastatin Generik (PT. Hexpharm Jaya) Y = aX + b Y = 45,4265X – 46,7731 Y  b

  X  a

  Y = luas area, X = konsentrasi (µg/ml)

  856,34387 = 45,4265X – 46,7731 856,3438 g/ml  46,7731

   X =

  45,4265 = 19,8808 µg/ml

  

  19,8808 g/ml x 99,76%

  % Kadar = = 99,16 %

  20  g/ml

  No Berat (mg) Area (Y) % Kadar Sampel 1 169,1 856,34387 99,16 2 169,2 857,08301 99,24 3 169,3 860,04279 99,57 4 169,0 853,08301 98,80 5 169,1 855,49912 99,07 6 169,2 857,22903 99,26

  Analisis data statistik untuk mencari kadar sebenarnya dari penyuntikan larutan simvastatin secara KCKT ₂ No % Kadar (X) 

  

X

X  

  X 

  X  

  1 99,16 -0,0222 0,0004 2 99,24 0,0591 0,0034 3 99,57 0,3838 0,1473 4 98,80 -0,3804 0,1447 5 99,07 -0,115 0,0132 6 99,26 0,075 0,0056 ₂

   X = 595,12

  X 

  X

  ∑   = 0,3146

  X

  = 99,18 ₂

  ( X  X ) 0,3146 

  SD   = 0,2508

  1 n 

5 Pada tingkat kepercayaan 99% dengan nilai

  α = 0,01, dk = n – 1 = 6 – 1 = 5 Diperoleh t tabel = 4,0321. Data ditolak jika t hitung tabel.

  ≥ t

  X 

  X

  t =

  hitung SD / n

• 0,0222

  t (1) = = 0,2170

  hitung 0,2508 /

  6 0,0591

  t (2) = = 0,5777

  hitung 0,2508 /

  6 0,3838

  t (3) = = 3,7517

  hitung 0,2508 /

  6

• 0,115

  t hitung (5) = = 1,1241

  0,2508 /

  6 0,075

  t hitung (6) = = 0,7331

  0,2508 /

6 Semua data diterima, maka kadar sebenarnya terletak antara

  1

  µ =

  X (t – /

  2

  α) dk × 0,2508

  µ = 99,18 4,0321 ×

  6 µ = (99,18 0,41)% Lampiran 6. Kromatogram Hasil Penyuntikan Simvastatin Generik (PT.

   Kimia Farma)

  3 4,608 911,20186 57,61439 1,23754 4 4,605 909,53292 55,72168 1,20394 5 4,585 912,77539 58,49834 1,22290 6 4,608 907,23153 57,83221 1,22340

  Lampiran 7. Perhitungan Kadar Simvastatin Generik (PT. Kimia Farma) Y = aX + b Y = 45,4265X – 46,7731 Y  b

  X  a

  Y = luas area, X = konsentrasi (µg/ml)

  917,64648 = 45,4265X – 46,7731 917,6464  g/ml 46,7731 -

  X = 45,4265

  = 21,2303 µg/ml

  21,2303  g/ml x 99,76%

  % Kadar = = 105,89 %

  20  g/ml

  No Berat Area % Kadar Sampel 1 99,5 917,64648 105,89 2 99,4 913,17506 105,40 3 99,3 911,20186 105,18 4 99,2 909,53292 105,00 5 99,3 912,77539 105,36 6 99,2 907,23153 104,75

  Analisis data statistik untuk mencari kadar sebenarnya dari penyuntikan larutan simvastatin secara KCKT ₂ No % Kadar (X) 

  

X

X  

  X 

  X  

  1 105,89 0,6282 0,3946 2 105,40 0,1369 0,0187 3 105,18 -0,0796 0,0063 4 105,00 -0,2627 0,0690 5 105,36 0,093 0,0086 6 104,75 -0,5156 0,2658 ₂

   X = 631,61

  X 

  X

  ∑   = 0,763

  X

  = 105,26 ₂

  ( X  X )

  0,763

   SD  = 0,3906

   n 

  1

5 Pada tingkat kepercayaan 99% dengan nilai

  α = 0,01, dk = n – 1 = 6 – 1 = 5 Diperoleh t tabel = 4,0321. Data ditolak jika t hitung tabel.

  ≥ t

  X 

  X

  t =

  hitung SD / n

  0,6282

  t (1) = = 3,9410

  hitung 0,3906 /

  6 0,1369

  t (2) = = 0,8588

  hitung 0,3906 /

  6 0,0796 -

  t (3) = = 0,4993

  hitung 0,3906 /

  6

• 0,2627

  t (4) = = 1,6480

  hitung 0,3906 /

  6

  0,093

  t hitung (5) = = 0,5834

  0,3906 /

  6

• 0,5156

  t hitung (6) = = 3,2346

  0,3906 /

  6 Semua data diterima, maka kadar sebenarnya terletak antara

  1 SD

  µ =

  X ±(t – /

  2

  α) dk ×

  n 0,3906

  µ = 105,26±4,0321 ×

  6

  µ = (105,26±0,64)%

Lampiran 8. Kromatogram Hasil Penyuntikan Simvastatin Generik (PT.

  Novell) No Retention Area Heigh USP Tailing time 1 4,595 806,34387 59,16194 1,51571 2 4,598 805,19116 58,43068 1,50629 3 4,522 804,99255 56,40141 1,51896 4 4,525 809,11310 56,38760 1,51032 5 4,525 806,11719 52,77653 1,52642 6 4,568 808,29275 53,57017 1,50783

  Lampiran 9. Perhitungan Kadar Simvastatin Generik (PT. Novell) Y = aX + b Y = 45,4265X – 46,7731 Y  b

  X  a

  Y = luas area, X = konsentrasi (µg/ml)

  806,34387 = 45,4265X – 46,7731 806,3438  g/ml - 46,7731

  X = 45,4265

  = 18,7801 µg/ml

  18,7801  g/ml x 99,76%

  % Kadar = = 93,67% 

  20 g/ml

  No Berat (mg) Area % Kadar Sampel 1 134,1 806,34387 93,67 2 134,2 805,19116 93,54 3 134,1 804,99255 93,52 4 134,3 809,11310 93,97 5 134,1 806,11719 93,65 6 134,2 808,29275 93,88

  Analisis data statistik untuk mencari kadar sebenarnya dari penyuntikan larutan simvastatin secara KCKT ₂ No % Kadar (X) 

  

X

X  

  X 

  X  

  1 93,67 -0,0364 0,0013 2 93,54 -0,1631 0,0266 3 93,52 -0,1846 0,0340 4 93,97 0,2679 0,0717 5 93,65 -0,0614 0,0037 6 93,88 0,1776 0,0315 ₂

   X = 562,26

  X 

  X

  ∑

   

  = 0,1688

  X

  = 93,71 ₂

  ( X  X )

  0,1688

  

   = 0,1837

  SD  n 

  1

5 Pada tingkat kepercayaan 99% dengan nilai

  α = 0,01, dk = n – 1 = 6 – 1 = 5 Diperoleh t tabel = 4,0321. Data ditolak jika t hitung tabel.

  ≥ t

  X 

  X

  t =

  hitung SD / n

  0,0364 -

  t (1) = = 0,4859

  hitung 0,1837 /

  6

• 0,1631

  t hitung (2) = = 2,1775

  0,1837 /

  6

• 0,1846

  t hitung (3) = = 2,4646

  0,1837 /

  6 0,2679

  t hitung (4) = = 3,5767

  0,1837 /

  6

  0,1776

  t hitung (6) = = 2,3711

  0,1837 /

6 Semua data diterima, maka kadar sebenarnya terletak antara

  1

  µ =

  X (t – /

  2

  α) dk × 0,1837

  µ = 93,71 4,0321 ×

  6 µ = (93,71 0,30)% Lampiran 10. Kromatogram Hasil Penyuntikan Simvastatin Generik (PT.

   Bernofarm)

  1 4,560 908,89191 106,27146 1,30612 2 4,612 906,30054 101,00679 1,29439 3 4,601 905,26172 110,32944 1,30021 4 4,612 910,14039 107,91985 1,28571 5 4,569 910,19152 106,33011 1,29645 6 4,560 908,35376 112,25930 1,30714

  Lampiran 11. Perhitungan Kadar Simvastatin Generik (PT. Bernofarm) Y = aX + b Y = 45,4265X – 46,7731 Y  b

  X  a

  Y = luas area, X = konsentrasi (µg/ml)

  908,89191 = 45,4265X – 46,7731 908,8919  g/ml - 46,7731

  X = 45,4265

  = 21,0376 µg/ml

  21,0376  g/ml x 99,76%

  % Kadar = = 104,93% 

  20 g/ml

  No Berat (mg) Area % Kadar Sampel 1 128,3 908,89191 104,93 2 128,4 906,30054 104,65 3 128,3 905,26172 104,53 4 128,5 910,14039 105,07 5 128,7 910,19152 105,07 6 128,5 908,35376 104,87

  Analisis data statistik untuk mencari kadar sebenarnya dari penyuntikan larutan simvastatin secara KCKT ₂ No % Kadar (X) 

  

X

X  

  X 

  X  

  1 104,93 0,0773 0,0059 2 104,65 -0,2075 0,0430 3 104,53 -0,3217 0,1034 4 105,07 0,214 0,0457 5 105,07 0,22 0,0484 6 104,87 0,0179 0,0003 ₂

   X = 629,14

  X 

  X

  ∑

   

  = 0,2467

  X

  = 104,85 ₂

  ( X  X )

  0,2467

  

   = 0,2221

  SD  n 

  1

5 Pada tingkat kepercayaan 99% dengan nilai

  α = 0,01, dk = n – 1 = 6 – 1 = 5 Diperoleh t tabel = 4,0321. Data ditolak jika t hitung tabel.

  ≥ t

  X 

  X

  t =

  hitung SD / n

  0,0773

  t (1) = = 0,8532

  hitung 0,2221 /

  6

• 0,2075

  t hitung (2) = = 2,2902

  0,2221 /

  6

• 0,3217

  t hitung (3) = = 3,5507

  0,2221 /

  6 0,2614

  t hitung (4) = = 2,3620

  0,2221 /

  6

  0,0179

  t hitung (6) = = 0,1975

  0,2221 /

6 Semua data diterima, maka kadar sebenarnya terletak antara

  1

  µ =

  X (t – /

  2

  α) dk × 0,2221

  µ = 104,85 4,0321 ×

  6 µ = (104,85 0,36)%

  

Lampiran 12. Kromatogram Hasil Penyuntikan Simvastatin Merek Zocor

(PT. Merck Sharp & Dohme)

  No Retention Area Heigh USP Tailing time 1 4,630 856,72052 95,65537 1,33500 2 4,584 854,64795 94,51862 1,36306 3 4,584 857,39044 99,30569 1,36791 4 4,569 855,38354 89,64847 1,33594 5 4,623 855,48657 98,21785 1,35473 6 4,630 853,05634 95,05634 1,35977

  Lampiran 13. Perhitungan Kadar Simvastatin Merek Zocor (PT. Merck Sharp & Dohme) Y = aX + b Y = 45,4265X – 46,7731 Y b

   

  X a

  Y = luas area, X = konsentrasi (µg/ml)

  856,7205 = 45,4265X – 46,7731 856,7205  g/ml - 46,7731

  X = 45,4265

  = 19,8891 µg/ml

  19,8891  g/ml x 99,76%

  % Kadar = = 99,20%

  20  g/ml

  No Berat (mg) Area % Kadar Sampel 1 103,8 856,72052 99,20 2 103,8 854,64795 98,97 3 103,9 857,39044 99,28 4 103,8 855,38354 99,05 5 103,8 855,48657 99,07 6 103,6 853,05634 98,80

  Analisis data statistik untuk mencari kadar sebenarnya dari penyuntikan larutan simvastatin secara KCKT ₂ No % Kadar (X) 

  

X

X  

  X 

  X  

  1 99,20 0,14 0,0196 2 98,97 -0,0875 0,0076 3 99,28 0,2133 0,0454 4 99,05 -0,0072 0,00005 5 99,07 0,0043 0,00002 6 98,80 -0,2626 0,0689 ₂

   X = 594,40

  X 

  X

  ∑

   

  = 0,1415

  X

  = 99,06 ₂

  ( X  X )

  0,1415

  

   = 0,1682

  SD  n 

  1

5 Pada tingkat kepercayaan 99% dengan nilai

  α = 0,01, dk = n – 1 = 6 – 1 = 5 Diperoleh t tabel = 4,0321. Data ditolak jika t hitung tabel.

  ≥ t

  X 

  X

  t =

  hitung SD / n

  0,14

  t (1) = = 2,0408

  hitung 0,1682 /

  6

• 0,0875

  t hitung (2) = = 1,2755

  0,1682 /

  6 0,2133

  t hitung (3) = = 3,1093

  0,1682 /

  6

• 0,0072

  t hitung (4) = = 0,1049

  0,1682 /

  6

• 0,2626

  t hitung (6) = = 3,8279

  0,1682 /

6 Semua data diterima, maka kadar sebenarnya terletak antara

  1

  µ =

  X (t – /

  2

  α) dk × 0,1682

  µ = 99,06 4,0321 ×

  6 µ = (99,06 0,276%

  

Lampiran 14. Kromatogram Hasil Penyuntikan Simvastatin Merek

Normofat (PT. Soho)

  No Retention Area Heigh USP Tailing time 1 4,591 905,66431 104,88181 1,00238 2 4,560 903,91968 104,44879 1,00943 3 4,574 906,67816 106,94794 1,00831 4 4,568 905,12695 101,28696 1,00871 5 4,577 903,79537 100,67209 1,00645 6 4,574 907,21806 108,98114 1,00714

  Lampiran 15. Perhitungan Kadar Simvastatin Merek Normofat (PT.Soho) Y = aX + b Y = 45,4265X – 46,7731 Y  b

  X  a

  Y = luas area, X = konsentrasi (µg/ml)

  905,6643 = 45,4265X – 46,7731 905,6643  g/ml - 46,7731

  X = 45,4265

  = 20,9665 µg/ml

  20,9665  g/ml x 99,76%

  % Kadar = = 104,58%

  20  g/ml

  No Berat (mg) Area % Kadar Sampel 1 119,5 905,66431 104,58 2 119,5 903,91968 104,38 3 119,3 906,67816 104,69 4 119,5 905,12695 104,52 5 119,4 903,79537 104,37 6 119,7 907,21806 104,75

  Analisis data statistik untuk mencari kadar sebenarnya dari penyuntikan larutan simvastatin secara KCKT ₂ No % Kadar (X) 

  

X

X  

  X 

  X  

  1 104,58 0,029 0,0008 2 104,38 -0,1626 0,0264 3 104,69 0,1402 0,0196 4 104,52 -0,0299 0,0008 5 104,37 -0,1761 0,0310 6 104,75 0,1995 0,0398 ₂

   X = 627,31

  X 

  X

  ∑

   

  = 0,1184

  X

  = 104,55 ₂

  ( X  X )

  0,1184

  

   = 0,1538

  SD  n 

  1

5 Pada tingkat kepercayaan 99% dengan nilai

  α = 0,01, dk = n – 1 = 6 – 1 = 5 Diperoleh t tabel = 4,0321. Data ditolak jika t hitung tabel.

  ≥ t

  X 

  X

  t =

  hitung SD / n

  0,029

  t (1) = = 0,4625

  hitung 0,1538 /

  6

• 0,1626

  t hitung (2) = = 2,5933

  0,1538 /

  6 0,1402

  t hitung (3) = = 2,2360

  0,1538 /

  6 0,0299 -

  t hitung (4) = = 0,4768

  0,1538 /

  6

  0,1995

  t hitung (6) = = 3,1818

  0,1538 /

6 Semua data diterima, maka kadar sebenarnya terletak antara

  1

  µ =

  X (t – /

  2

  α) dk × 0,1538

  µ = 104,55 4,0321 ×

  6 µ = (104,55 0,25)%

  

Lampiran 16. Kromatogram Hasil Penyuntikan Simvastatin Merek

Simbado (PT. Lapi)

  No Retention Area Heigh USP Tailing time 1 4,595 916,66724 127,70652 1,33500 2 4,569 915,68188 120,32990 1,29439 3 4,584 912,10852 120,27592 1,30021 4 4,550 913,25626 110,47364 1,28571 5 4,595 913,10815 107,30705 1,29645 6 4,605 917,89172 106,91313 1,30714

  Lampiran 17. Perhitungan Kadar Simvastatin Merek Simbado (PT. Lapi) Y = aX + b Y = 45,4265X – 46,7731 Y  b

  X  a

  Y = luas area, X = konsentrasi (µg/ml)

  916,6672 = 45,4265X – 46,7731 916,6672  g/ml - 46,7731

  X = 45,4265

  = 21,2087 µg/ml

  21,2087  g/ml x 99,76%

  % Kadar = = 105,78%

  20  g/ml

  No Berat (mg) Area % Kadar Sampel 1 158,9 916,66724 105,78 2 158,8 915,68188 105,68 3 158,7 912,10852 105,28 4 158,8 913,25626 105,41 5 158,8 913,10815 105,39 6 158,9 917,89172 105,92

  Analisis data statistik untuk mencari kadar sebenarnya dari penyuntikan larutan simvastatin secara KCKT ₂ No % Kadar (X) 

  

X

X  

  X 

  X  

  1 105,78 0,2065 0,0426 2 105,68 0,0983 0,0096 3 105,28 -0,2938 0,0863 4 105,41 -0,1681 0,0282 5 105,39 -0,184 0,0338 6 105,92 0,3412 0,1164 ₂

   X = 633,49

  X 

  X

  ∑

   

  = 0,3169

  X

  = 105,58

  2 ( X  X ) 0,3169

   SD   = 0,2517 n

5 Pada tingkat kepercayaan 99% dengan nilai

  1 

  α = 0,01, dk = n – 1 = 6 – 1 = 5 Diperoleh t = 4,0321. Data ditolak jika t tabel hitung tabel.

  ≥ t

  X 

  X

  t hitung = /

  SD n 0,2065

  t hitung (1) = = 2,0107

  0,2517 /

  6 0,0983

  t hitung (2) = = 0,9571

  0,2517 /

  6 0,2938 -

  t hitung (3) = = 2,8607

  0,2517 /

  6

• 0,184

  t hitung (5) = = 1,7916

  0,2517 /

  6 0,3412

  t hitung (6) = = 3,3222

  0,2517 /

6 Semua data diterima, maka kadar sebenarnya terletak antara

  1

  µ =

  X (t – /

  2

  α) dk × 0,2517

  µ = 105,58 4,0321 ×

  6 µ = (105,58 0,36)%

  

Lampiran 18. Kromatogram Hasil Penyuntikan Simvastatin Merek

Lesvatin (PT. Gracia Pharmindo)

  No Retention Area Heigh USP Tailing time 1 4,611 905,98230 108,61310 0,80556 2 4,613 904,13354 112,63884 0,87426 3 4,613 906,88025 104,78570 0,82045 4 4,622 906,03528 101,33552 0,82185 5 4,614 904,42523 104,54813 0,91041 6 4,611 905,01801 101,41685 0,73366

  Lampiran 19. Perhitungan Kadar Simvastatin Merek Lesvatin (PT. Gracia Pharmindo) Y = aX + b Y = 45,4265X – 46,7731 Y  b

  X  a

  Y = luas area, X = konsentrasi (µg/ml)

  905,9823 = 45,4265X – 46,7731 905,9823 g/ml - 46,7731

   X =

  45,4265 = 20,9735 µg/ml

  

  20,9735 g/ml x 99,76%

  % Kadar = = 104,61% 

  20 g/ml

  No Berat (mg) Area % Kadar Sampel 1 212,4 905,98230 104,61 2 212,5 904,13354 104,41 3 212,4 906,88025 104,71 4 212,4 906,03528 104,62 5 212,3 904,42523 104,44

  Analisis data statistik untuk mencari kadar sebenarnya dari penyuntikan larutan simvastatin secara KCKT ₂ No % Kadar (X)

X 

  X  

  X 

  X  

  1 104,61 0,0626 0,0039 2 104,41 -0,1404 0,0197 3 104,71 0,1613 0,0260 4 104,62 0,0686 0,0047 5 104,44 -0,1085 0,0117 6 104,51 -0,0432 0,0018 ₂

   X = 627,31

  X 

  X

  ∑

   

  = 0,0678

  X

  = 104,55 ₂

  ( X  X ) 0,0678 

  

  SD  = 0,1164 n 

  1

5 Pada tingkat kepercayaan 99% dengan nilai

  α = 0,01, dk = n – 1 = 6 – 1 = 5 Diperoleh t tabel = 4,0321. Data ditolak jika t hitung tabel.

  ≥ t

  X 

  X

  t hitung =

  SD / n 0,0626

  t hitung (1) = = 1,3178

  0,1164 /

  6

• 0,1404

  t hitung (2) = = 2,9557

  0,1164 /

  6 0,1613

  t hitung (3) = = 3,3957

  0,1164 /

  6

• 0,1085

  t hitung (5) = = 2,2842

  0,1164 /

  6 0,0432 -

  t hitung (6) = = 0,9094

  0,1164 /

6 Semua data diterima, maka kadar sebenarnya terletak antara

  1

  µ =

  X (t – /

  2

  α) dk × 0,1164

  µ = 104,55 4,0321 ×

  6 µ = (104,55 0,19)%

  Lampiran 20 Contoh perhitungan penimbangan sampel

  Berat 20 tablet = 3382 mg Kandungan Simvastatin = 10 mg Dibuat larutan uji dengan konsentrasi Simvastatin 20 µg/ml Ditimbang serbuk sampel setara dengan simvastatin 10 mg Berat penimbangan sampel = =

  = 169,1 mg Sebanyak 169,1 mg sampel dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml dilarutkan dan dicukupkan dengan metanol sampai garis tanda.

  Kadar larutan uji = = 200 µg/ml

  Lalu dipipet 5 ml dari larutan uji dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml, dilarutkan dan dicukupkan dengan metanol sampai garis tanda. Sehingga didapat konsentrasi 20 µg/ml. Konsentrasi = = 20 µg/ml

  

Lampiran 21 Contoh perhitungan untuk mencari kadar tablet simvastatin

  Generik (PT Hexpham Jaya) Perhitungan kadar sampel Y = 45,4265X – 46,7731 Luas Area = 856,34387

  856,3438 g/ml 46,7731  

  Konsentrasi perolehan (X) = 45,4265

  = 19,8808 µg/ml Berat 20 tablet = 3382 mg Penimbangan serbuk = 169,1 mg Kandungan simvastatin dalam tablet = 10 mg Kesetaraan serbuk = penimbanga n serbuk (mg) x (jumlah ta blet x kandungan zat berkhasiat ) mg berat 20 tablet (mg)

  169,1 mg x (20 x 10) mg 3382 mg Kesetaraan serbuk =

  = 10 mg Ditimbang setara 10 mg serbuk tablet simvastatin dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml, dilarutkan dan dicukupkan dengan metanol hingga garis tanda, dikocok 5 menit, kemudian disaring dengan kertas saring, 5 ml filtrat pertama Konsentrasi teoritis = µg/ml 200 1000 ml 50 mg

  10  x

  Penimbangan ( mg )

  ( % ) 169,1 10,0 856,34387 20,0 19,8808 99,16 169,2 10,0059 857,08301 20,0118 19,8971 99,18 169,3 10,0118 860,04279 20,0236 19,9622 99,45 169,0 9,9940 853,08301 19,988 19,8090 98,86 169,1 10,0 855,49912 20,0 19,8622 99,07 169,2 10,0059 857,22903 20,0118 19,9003 99,20

  ( µg/ ml ) Kadar

  Konsentrasi Perolehan

  Teoritis ( µg/ml )

  Luas Area Konsentrasi

  Berat Setara ( mg )

  Hasil analisa kadar tablet simvastatin Generik (PT Hexpharm Jaya) Berat

  = µg/ml 20 200 ml 50 ml

  Lampiran 22. Hasil Pengolahan Data Penetapan Kadar Simvastatin Tablet 1.

  = 99,1654 %

   

  99,76% x g/ml 20 19,8808 g/ml

  Kadar baku simvastatin yang tertera dalam sertifikat = 99,76 % Kadar = % Kadar =

  5  x

  = 99,15

2. Hasil analisa kadar tablet simvastatin Generik (PT Kimia Farma)

  Berat Berat Konsentrasi Konsentrasi Kadar

  Penimbangan Setara Luas Area Teoritis Perolehan ( % )

  ( mg ) ( mg ) ( µg/ml ) ( µg/ ml ) 99,5 9,9969 917,64648 19,9938 21,2303 105,92 99,4 9,9869 913,17506 19,9738 21,1318 105,54 99,3 9,9768 911,20186 19,9536 21,0884 105,43 99,2 9,9668 909,53292 19,9336 21,0517 105,35 99,3 9,9768 912,77539 19,9536 21,1230 105,60 99,2 9,9668 907,23153 19,9336 21,0010 105,10

  = 105,49 3. Hasil analisa kadar tablet simvastatin Generik (PT Novell)

  Berat Berat Konsentra Konsentrasi Kadar

  Penimbangan Setara Luas Area si Teoritis Perolehan ( % )

  ( mg ) ( mg ) ( µg/ml ) ( µg/ ml ) 134,1 9,9951 806,34387 19,9902 18,7801 93,72 134,2 10,0026 805,19116 20,0052 18,7547 93,52 134,1 9,9951 804,99255 19,9902 18,7504 93,57 134,3 10,0100 809,11310 20,02 18,8411 93,88 134,1 9,9951 806,11719 19,9902 18,7751 93,69 134,2 10,0026 808,29275 20,0052 18,8230 93,86

  = 93,71 4. Hasil analisa kadar tablet simvastatin Generik (PT Bernofarm)

  Berat Berat Konsentra Konsentrasi Kadar

  Penimbangan Setara Luas Area si Teoritis Perolehan ( % )

  ( mg ) ( mg ) ( µg/ml ) ( µg/ ml ) 128,3 9,9914 908,89191 19,9828 21,0376 105,02 128,4 9,9992 906,30054 19,9984 20,9805 104,65 128,3 9,9914 905,26172 19,9828 20,9576 104,62 128,5 10,0070 910,14039 20,014 21,0650 104,99 128,7 10,0225 910,19152 20,045 21,0662 104,84 128,5 10,0070 908,35376 20,014 21,0257 104,80

  = 104,82

5. Hasil analisa kadar tablet Zocor (PT Merck Sharp & Dohme)

  ( µg/ ml ) Kadar

  = 105,62

  ( % ) 158,9 10,0012 916,66724 20,0042 21,2087 105,76 158,8 9,9949 915,68188 19,9898 21,1870 105,73 158,7 9,9886 912,10852 19,9772 21,1084 105,40 158,8 9,9949 913,25626 19,9898 21,1336 105,46 158,8 9,9949 913,10815 19,9898 21,1304 105,45 158,9 10,0012 917,89172 20,0042 21,2357 105,90

  ( µg/ ml ) Kadar

  Konsentrasi Perolehan

  Teoritis ( µg/ml )

  Luas Area Konsentrasi

  Setara ( mg )

  ( mg ) Berat

  Berat Penimbangan

  = 104,63 7. Hasil analisa kadar tablet Simbado (PT Lapi)

  ( % ) 119,5 9,9933 905,66431 19,9866 20,9665 104,65 119,5 9,9933 903,91968 19,9866 20,9281 104,45 119,3 9,9765 906,67816 19,953 20,9888 104,93 119,5 9,9933 905,12695 19,9866 20,9547 104,59 119,4 9,9849 903,79537 19,9698 20,9254 104,53 119,7 10,0100 907,21806 20,02 21,0007 104,64

  Berat Penimbangan

  ( mg ) Berat

  Teoritis ( µg/ml )

  Luas Area Konsentrasi

  Setara ( mg )

  ( mg ) Berat

  Berat Penimbangan

  = 99,12 6. Hasil analisa kadar tablet Normofat (PT Soho)

  ( % ) 103,8 9,9961 856,72052 19,9922 19,8891 99,24 103,8 9,9961 854,64795 19,9922 19,8435 99,01 103,9 10,0057 857,39044 20,0114 19,9038 99,22 103,8 9,9961 855,38354 19,9922 19,8596 99,09 103,8 9,9961 855,48657 19,9922 19,8619 99,10 103,6 9,9768 853,05634 19,9536 19,8084 99,03

  ( µg/ ml ) Kadar

  Konsentrasi Perolehan

  Teoritis ( µg/ml )

  Luas Area Konsentrasi

  Setara ( mg )

  Konsentrasi Perolehan

8. Hasil analisa kadar tablet Lesvatin (PT Gracia Pharmindo)

  Berat Penimbangan

  ( mg ) Berat

  Setara ( mg )

  Luas Area Konsentra si Teoritis

  ( µg/ml ) Konsentrasi

  Perolehan ( µg/ ml )

  Kadar ( % )

  212,4 9,9981 905,98230 19,9962 20,9735 104,63 212,5 10,0028 904,13354 20,0056 20,9328 104,38 212,4 9,9981 906,88025 19,9962 20,9933 104,73 212,4 9,9981 906,03528 19,9962 20,9747 104,64 212,3 9,9934 904,42523 19,9868 20,9392 104,51 212,5 10,0028 905,01801 20,0056 20,9523 104,48

  = 104,56

  Lampiran 23. Kromatogram Hasil Penyuntikan dari Simvastatin Tablet dan Bahan Baku pada Persen Perolehan Kembali pada Rentang 80%, 100%, dan 120%.

  Kromatogram Recovery pada Rentang 80% (1.

   Sebelum penambahan baku) (2. Sesudah penambahan baku)

  (1. Sebelum penambahan baku) (2. Sesudah penambahan baku)

  No Retention time Area Height USP Tailing 1 4,562 527,98914 29,99521 1,55357 2 4,546 745,85767 43,26153 1,46430

  (1. Sebelum penambahan baku) (2. Sesudah penambahan baku)

  No Retention time Area Height USP Tailing 1 4,568 526,11719 30,59895 1,55682 2 4,611 743,24493 41,20400 1,58209 Kromatogram Recovery pada rentang 100% (1.

   Sebelum penambahan baku)

(2. Sesudah penambahan baku)

  No Retention time Area Height USP Tailing 1 4,576 638,71716 35,84156 1,50000 2 4,600 914,79626 41,58961 1,50521

   (1.Sebelum penambahan baku) (2. Sesudah penambahan baku)

  No Retention time Area Height USP Tailing 1 4,364 747,54785 63,37837 1,50881 2 4,412 1022,02344 62,22498 1,51119

   (1.Sebelum penambahan baku) (2. Sesudah penambahan baku)

  No Retention time Area Height USP Tailing 1 4,639 642,87134 36,07687 1,52857 2 4,533 915,99792 42,73877 1,44286 Kromatogram Recovery pada Rentang 120%

   (1. Sebelum penambahan baku) (2. Sesudah penambahan baku)

  No Retention time Area Height USP Tailing 1 4,612 870,49738 51,01946 1,50000 2 4,624 1202,04724 81,15847 1,53147

  (1. Sebelum penambahan baku) (2. Sesudah penambahan baku)

  No Retention time Area Height USP Tailing 1 4,418 867,62549 47,50910 1,50380 2 4,214 1200,67981 80,77776 1,51579

  (1. Sebelum penambahan baku) (2. Sesudah penambahan baku)

  No Retention time Area Height USP Tailing 1 4,627 870,67517 46,96140 1,52208 2 4,763 1201,52576 84,32273 1,56751

  Lampiran 24. Perhitungan Recovery dengan Metode Adisi Standar Berat 1 tablet simvastatin mengandung 10 mg simvastatin.

  Berat 20 tablet : 2734,2 mg Rentang spesifik : 80%, 100% 120% dan setiap rentang mengandung 70% analit dan 30% baku pembanding.

  Rentang 80% : Simvastatin =

  10 mg = 8 mg 80  100

  Analit 70% = 70 

  8 mg = 5,6 mg 100 5,6 mg

  Serbuk sampel yang ditimbang setara =

   2734,2 mg 20  10 mg

  = 76,5576 mg = 0,0765 gr

  Baku 30% =

  8 mg = 2,4 mg 30  100

  Cara Pembuatan Larutan Sampel Ditimbang serbuk sampel 76,5 mg setara dengan 5,6 mg simvastatin lalu dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml, dilarutkan dan dicukupkan dengan metanol hingga garis tanda sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 112 µg/ml, dikocok 5 menit, kemudian disaring dengan kertas saring, 5 ml filtrat pertama dibuang. Dipipet 5 ml filtrat, dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml, dan dicukupkan hingga garis tanda sehingga diperoleh dan dideteksi pada panjang gelombang 238 nm dengan perbandingan fase gerak metanol-air (80:20), laju alir 1,5 ml/menit. Dilakukan sebanyak 3 kali perlakuan. Cara Pembuatan Larutan Sampel ditambahkan dengan baku Ditimbang 2,4 mg bahan baku dan 76,5 mg sampel kemudian dimasukkan ke dalam labu 50 ml, larutkan dan cukupkan dengan methanol hingga garis tanda lalu disaring dengan kertas saring, 5 ml filtrat pertama dibuang. Dipipet 5 ml, dimasukkan ke dalam labu 50 ml dan dicukupkan hingga garis tanda sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 4,8 µg/ml. Dikocok 5 menit lalu disaring dengan membran filter PTFE 0,2 µm. Diinjeksikan sebanyak 20 µl ke sistem KCKT dan dideteksi pada panjang gelombang 238 nm dengan perbandingan fase gerak metanol-air (80:20), laju alir 1,5 ml/menit. Dilakukan sebanyak 3 kali perlakuan. Rentang 100% : Simvastatin =

  10 mg = 10 mg 100  100 10 mg

  Analit 70% = 70  = 7 mg

  100 7 mg

  Serbuk sampel yang ditimbang setara = 2734,2 mg = 95,697 mg

   20  10 mg

  = 0,0956 gr Baku 30% =

  10 mg = 3 mg 30  100 Cara Pembuatan Larutan Sampel Ditimbang serbuk sampel 95,6 mg setara dengan 7 mg simvastatin lalu dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml, dilarutkan dan dicukupkan dengan metanol hingga garis tanda sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 140 µg/ml, dikocok 5 menit, kemudian disaring dengan kertas saring, 5 ml filtrat pertama dibuang. Dipipet 5 ml filtrat, dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml, dan dicukupkan hingga garis tanda sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 14 µg/ml. Dikocok 5 menit lalu disaring dengan membran filter PTFE 0,2 µm. Diinjeksikan sebanyak 20 µl ke sistem KCKT dan dideteksi pada panjang gelombang 238 nm dengan perbandingan fase gerak metanol-air (80:20), laju alir 1,5 ml/menit. Dilakukan sebanyak 3 kali perlakuan. Cara Pembuatan Larutan Sampel ditambahkan dengan baku Ditimbang 3 mg bahan baku dan 95,6 mg sampel kemudian dimasukkan ke dalam labu 50 ml, larutkan dan cukupkan sampai garis tanda lalu disaring dengan kertas saring, 5 ml filtrat pertama dibuang. Dipipet 5 ml, dimasukkan ke dalam labu 50 ml dan dicukupkan hingga garis tanda sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 6 µg/ml. Dikocok 5 menit lalu disaring dengan membran filter PTFE 0,2 µm. Diinjeksikan sebanyak 20 µl ke sistem KCKT dan dideteksi pada panjang gelombang 238 nm dengan perbandingan fase gerak metanol-air (80:20), laju alir 1,5 ml/menit. Dilakukan sebanyak 3 kali perlakuan.

  12 mg

  Analit 70% = 70  = 8,4 mg

  100 8,4 mg

  Serbuk sampel yang ditimbang setara = 2734,2 mg

   20  10 mg

  = 114,8364 mg = 0,1148 gr

  Baku 30% = 30 

  12 mg = 3,6 mg 100

  Cara Pembuatan Larutan Sampel Ditimbang serbuk sampel 114,8 mg setara dengan 8,4 mg simvastatin lalu dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml, dilarutkan dan dicukupkan dengan metanol hingga garis tanda sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 168 µg/ml, dikocok 5 menit, kemudian disaring dengan kertas saring, 5 ml filtrat pertama dibuang. Dipipet 5 ml filtrat, dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml, dan dicukupkan hingga garis tanda sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 16,8 µg/ml. Dikocok 5 menit lalu disaring dengan membran filter PTFE 0,2 µm. Diinjeksikan sebanyak 20 µl ke sistem KCKT dan dideteksi pada panjang gelombang 238 nm dengan perbandingan fase gerak metanol-air (80:20), laju alir 1,5 ml/menit. Dilakukan sebanyak 3 kali perlakuan. Cara Pembuatan Larutan Sampel ditambahkan dengan baku Ditimbang 3,6 mg bahan baku dan 114,8 mg sampel kemudian dimasukkan ke dalam labu 50 ml, larutkan dan cukupkan sampai garis tanda dimasukkan ke dalam labu 50 ml dan dicukupkan hingga garis tanda sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 7,2 µg/ml. Dikocok 5 menit lalu disaring dengan membran filter PTFE 0,2 µm. Diinjeksikan sebanyak 20 µl ke sistem KCKT dan dideteksi pada panjang gelombang 238 nm dengan perbandingan fase gerak metanol-air (80:20), laju alir 1,5 ml/menit. Dilakukan sebanyak 3 kali perlakuan.

  Tabel 5. Data hasil penyuntikan simvastatin tablet sebelum dan sesudah

  20,1924 27,4910 7,1827 2 20,1732 27,4609 7,1827 3 20,1963 27,4795 7,1827

  = konsentrasi analit sebelum penambahan bahan baku (µg/ml) C*A = konsentrasi bahan baku yang ditambahkan ke dalam sampel

  A

  C F = konsentrasi analit yang diperoleh setelah penambahan bahan baku (µg/ml) C

  x 100 % Keterangan:

  C C 

  A * C ^{A F}

  Contoh Perhitungan % Recovery dengan Metode Adisi Standar % Perolehan kembali =

  1 120%

  penambahan Analit.

  15,0900 21,1675 5,9856 2 17,4858 23,5280 5,9856 3 15,1815 21,1940 5,9856

  1 100%

  12,5065 17,3544 4,7884 2 12,6525 17,4486 4,7884 3 12,6113 17,3911 4,7884

  1 80%

  (µg/ml) Sesudah penambahan analit (µg/ml)

  (µg/ml) Sebelum penambahan analit

  (%) Konsentrasi Analit yang ditambahkan

  No Konsentrasi

  (µg/ml)

  80%

   

  17,3544 g/ml - 12,5065 g/ml

  % Recovery = x 100% = 101,24%

  4,7884  g/ml 17,4486  g/ml  - 12,6525 g/ml

  % Recovery = = 100,16%

  x 100% 4,7884  g/ml 17,3911  g/ml 12,6113  - g/ml

  % Recovery = x 100% = 99,82% 

  4,7884 g/ml 100%

  21,1675  g/ml 15,0900  - g/ml

  % Recovery = x 100% = 101,53% 

  5,9856 g/ml

   

  23,5280 g/ml 17,4858 - g/ml

  % Recovery = = 100,94%

  x 100% 5,9856  g/ml 21,1940  - g/ml 15,1815  g/ml

  % Recovery = x 100% = 100,44%

  5,9856  g/ml 120%

  27,4910  g/ml 20,1924  - g/ml

  % Recovery = x 100% = 101,61%

  7,1827  g/ml

   

• 27,4609 g/ml 20,1732 g/ml

  % Recovery = x 100% = 101,46% 

  7,1827 g/ml 27,4795  g/ml 20,1963  - g/ml

  Tabel 6. Analisis Data Statistik Persen Perolehan Kembali Simvastatin pada

  Sediaan Tablet.

  No X

  1 101,24 0,2838 0,0805 2 100,16 -0,7979 0,6366 3 99,82 -1,1384 1,2959 4 101,53 0,5766 0,3324 5 100,94 -0,0131 0,0001 6 100,44 -0,5093 0,2593 7 101,61 0,6548 0,4287 8 101,46 0,5031 0,2531 9 101,39 0,4404 0,1939

  ∑ 908,62 ∑

  2

  = 3,4805 100,95

  = = = 0,6595 = x 100% = x 100% = 0,65 %

  Lampiran 25 Sertifikat Analisis Simvastatin BPFI

  Lampiran 26. Tabel Nilai Distribusi t

  Lampiran 27. Gambar alat KCKT, wadah fase gerak, vial autosampler,

  degasser dan timbangan analitik

  

Gambar 13. Alat KCKT (Agilent) Gambar 14. Wadah Fase Gerak