Pengaruh Mengunyah Permen Karet Probiotik Yang Mengandung Lactobacillus reuteri Terhadap Jumlah Koloni Bakteri Kariogenik Streptococcus mutans Dalam Saliva.

iv ABSTRAK

Streptococcus mutans merupakan bakteri yang mengawali terjadinya karies gigi. Salah satu pilihan untuk mencegah terjadinya karies ialah dengan mengunyah permen karet probiotik. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh mengunyah permen karet probiotik yang mengandung Lactobacillus reuteri terhadap jumlah koloni bakteri kariogenik Streptococcus mutans dalam saliva.

Penelitian ini menggunakan metode eksperimen semu laboratorik secara in vitro terhadap 8 mahasiswa Program Studi Kedokteran Gigi Fakultas Kedokteran Universitas Kristen Maranatha, sampelnya berupa saliva yang diambil sebelum dan sesudah mengunyah permen karet probotik dan ditanam pada tiga lempeng TYCSB sebagai pengulangan. Jumlah koloni yang tumbuh dihitung, selanjutnya dianalisis secara statistik dengan menggunakan uji t berpasangan (α = 0.05).

Hasil penelitian menunjukan perbedaan jumlah koloni bakteri kariogenik Streptococcus mutans dalam saliva yang signifikan (p=.000), yaitu terjadi penurunan sebesar 57,95% sesudah mengunyah permen karet probiotik yang mengandung bakteriLactobacillus reuteriselama 7 hari.

Disarankan untuk melakukan penelitian lebih lanjut untuk memperjelas peranan bakteriLactobacillus reuteridi dalam rongga mulut.

v ABSTRACT

Streptococcus mutans is the main bacterial initiating dental caries. Chewing probiotic gum is one option to prevent dental caries. The purpose of this study was to analyze the colonies-count of cariogenic bacteria Streptococcus mutans in saliva before and after chewing probiotic chewing gum containing Lactobacillus reuteri.

This study was a quasy-experiment by in vitro of 8 dentist students of Medical Faculty of Maranatha Christian University. Saliva were taken for sampling and inoculated into three plates of TYCSB as a repetition before and after chewing probiotic gum. Colonies that grown were counted then the data were analyzed statistically with paired t test( α = 0.05).

The results indicate that the colony-count of cariogenic bacteria Streptococcus mutans in saliva was significantly decreased (p=.000), as much as 57,95% after chewing probiotic chewing gums containing Lactobacillus reuteri for 7 days.

More studies are needed to clarify the role of Lactobacillus reuteri in oral cavity

ix DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL ... i

LEMBAR PERSETUJUAN PEMBIMBING ... ii

LEMBAR PERNYATAAN MAHASISWA ... iii

ABSTRAK ... iv

ABSTRACT... v

PRAKATA ... vi

DAFTAR ISI ... ix

DAFTAR TABEL ... xiii

DAFTAR GAMBAR ... xiv

DAFTAR DIAGRAM ... xv

DAFTAR LAMPIRAN ... xvi

BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang ... 1

1.2 Identifikasi Masalah ... 3

1.3 Tujuan Penelitian ... 4

1.4 Manfaat Penelitian ... 4

1.5 Kerangka Pemikiran dan Hipotesis Penelitian ... 4

1.6 Metode Penelitian ... 7

x

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Karies Gigi ... 8

2.1.1 Etiologi Karies ... 9

2.2Streptococcus mutans ... 15

2.2.1 Peranan BakteriStreptococcus mutansdalam Terjadinya Karies ... 17

2.2.2 Penanganan dan Pencegahan Karies ... 19

2.3 Probiotik ...23

2.3.1 Mekanisme Kerja Probiotik ... 25

2.3.2 Probiotik dan Kesehatan Rongga Mulut ...26

2.4 Pengunyahan ...28

2.4.1 Keuntungan Mengunyah Permen Karet Probiotik ...30

2.5 Saliva ...34

2.5.1 Anatomi Kelenjar Saliva ...34

2.5.2 Komposisi dan Fungsi Saliva ...36

BAB III BAHAN DAN METODE PENELITIAN 3.1 Bahan, Alat, dan Subjek Penelitian ... 40

3.1.1 Bahan dan Alat Penelitian ... 40

3.1.2 Subjek Penelitian ... 42

3.2 Metode Penelitian ... 43

3.2.1 Desain Penelitian ... 43

3.2.2 Variabel Penelitian ... 43

xi

3.2.2.2 Definisi Operasional ... 44

3.2.3 Perhitungan Besar Sampel ... 44

3.2.4 Prosedur Kerja ... 45

3.2.5 Metode Analisis ... 51

3.2.5.1 Hipotesis Statistik ... 51

3.2.5.2 Kriteria Uji ... 51

3.2.6 Aspek Etik Penelitian ... 52

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil Penelitian ... 53

4.2 Pembahasan... 56

4.3 Pengujian Hipotesis Penelitian ... 59

4.3.1 Hipotesis Penelitian ... 59

4.3.2 Hal-Hal yang Mendukung ... 59

4.3.3 Hal-Hal yang Tidak Mendukung ... 59

4.3.4 Simpulan ... 59

BAB V SIMPULAN DAN SARAN 5.1 Simpulan ... 60

5.2 Saran ... 60

DAFTAR PUSTAKA _{... 61}

xii

xiii

DAFTAR TABEL

No Tabel Teks Halaman

Tabel 2.1 Uji yang MembedakanStreptococcus mutans

denganStreptococcus oral Lain ... 17 Tabel 4.1 Jumlah koloni bakteriStreptococcus mutanssebelum dan sesudah

mengunyah permen karet probiotik (3 kali pengulangan)...54 Tabel 4.2 Hasil Uji Beda Rata-Rata ... 56

xiv

DAFTAR GAMBAR

No Gambar Teks Halaman

Gambar 2.1 Faktor yang Mempengaruhi Insidensi Karies ... .9

Gambar 2.2 Mekanisme Kerja Probiotik di Dalam Rongga Mulut ...31

Gambar 2.3 Morfologi bakteriLactobacillus reuteridi bawah mikroskop elektron dengan perbesaran 10000 kali...32

Gambar 2.4 Kelenjar Saliva Mayor ...36

Gambar 2.5 Komposisi dan Fungsi Saliva secara Umum ...38

Gambar 3.1 Alat dan Bahan... 41

Gambar 3.2 Oven steril, Inkubator,Autoclave... 42

Gambar 3.3 Pengenceran Bahan Pemeriksaan... 46

Gambar 3.4 Penanaman Bahan Pemeriksaan pada Medium TYCSB...47

Gambar 3.5 Kerangka Langkah Kerja Penelitian...50

Gambar 4.1 Perbandingan Jumlah KoloniStreptococcus mutansantara Sebelum (Kiri) dan Sesudah (Kanan) Mengonsumsi Permen Karet Probiotik...53

xv

DAFTAR DIAGRAM

No Diagram Teks Halaman

Diagram 4.1 Jumlah Koloni BakteriStreptococcus mutansSebelum dan Sesudah Mengunyah Permen Karet Probiotik

xvi

DAFTAR LAMPIRAN

No Lampiran Teks Halaman

Lampiran 1 Lembar Persetujuan Komisi Etik Penelitian ... 67 Lampiran 2 Informed Consent ... 68 Lampiran 3 Lampiran Perhitungan Statistik ... 69

67 Lampiran 1

Lembar Persetujuan Komisi Etik Penelitian

67 Lampiran 1

Lembar Persetujuan Komisi Etik Penelitian

67 Lampiran 1

68 Lampiran 2

Informed Consent

68 Lampiran 2

Informed Consent

68 Lampiran 2

69 Lampiran 3 Perhitungan SPSS Descriptives NPar Tests T-Test Descriptive Statistics

24 98.00 265.00 194.9167 49.59130 24 21.00 155.00 81.6250 33.76107 24

Pre_Test Post_Test Valid N (listwise)

N Minimum Maximum Mean Std. Deviation

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

24 24 194.9167 81.6250 49.59130 33.76107 .112 .127 .093 .127 -.112 -.086 .549 .621 .924 .836 N Mean Std. Deviation Normal Parametersa,b

Absolute Positive Negative Most Extreme Differences Kolmogorov-Smirnov Z Asymp. Sig. (2-tailed)

Pre_Test Post_Test

Test distribution is Normal. a.

Calculated from data. b.

Paired Samples Statistics

194.9167 24 49.59130 10.12278 81.6250 24 33.76107 6.89145 Pre_Test

Post_Test Pair

1

Mean N Std. Deviation

Std. Error Mean

Paired Samples Correlations

24 -.158 .461

Pre_Test & Post_Test Pair 1

70

Paired Samples Test

113.29167 64.25119 13.11522 8.638 23 .000 Pre_Test - Post_Test

Pair 1

Mean Std. Deviation

Std. Error Mean Paired Differences

71

RIWAYAT HIDUP

Nama : Atria Indahsari

NRP : 0812014

Tempat dan tanggal lahir : Lhokseumawe, 6 September 1990 Alamat : Jl. Cipaku Indah II no 26, Bandung Riwayat Pendidikan :

 TK Taman Indria, Lhokseumawe - Aceh (1996)  SD Taman Siswa 1, Lhokseumawe - Aceh (2002)  SMPN 15 Bandung (2005)

 SMAN 1 Bandung (2008)

1

BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang Masalah

Tubuh secara alami merupakan tempat berkoloninya kompleks mikroorganisme, terutama bakteri. Bakteri-bakteri ini secara umum tidak berbahaya dan ditemukan di seluruh permukaan luar tubuh, saluran pencernaan, saluran pernafasan, dan saluran kemih.1

Mulut memiliki lebih dari 700 spesies bakteri yang hidup di dalamnya dan hampir seluruhnya merupakan flora normal atau komensal.2 Kolonisasi flora normal memberikan keuntungan bagi inangnya, terutama dalam mekanisme yang disebut dengan resistensi kolonisasi dimana bakteri patogen tidak dapat mengakses daerah yang ditempati oleh flora normal. Namun pada keadaan tertentu flora normal di dalam mulut dapat menjadi patogen oportunistik dan menyebabkan penyakit seperti karies, gingivitis, stomatitis, glossitis, dan periodontitis.1

Karies gigi adalah penyakit yang disebabkan oleh bakteri dan ditandai dengan demineralisasi permukaan gigi oleh asam.3 Karies gigi merupakan penyakit yang paling sering terjadi di dunia, dimana pada daerah yang kurang berkembang karies cenderung menjadi suatu masalah yang kurang ditangani dengan baik sehingga pada akhirnya akan menyebabkan infeksi lanjutan, kehilangan gigi secara dini, ataupun diperlukannya tindakan ekstraksi dari gigi tersebut, sehingga penanganan yang tepat sangat diperlukan untuk mencegah terjadinya karies.4,5

2

Terdapat berbagai upaya untuk mencegah terjadinya karies, yaitu dengan modifikasi diet, mengeliminasi plak secara mekanis, aplikasi fluor, pit and fissure sealant, sampai dengan penggunaan produk antimikroba. Pada dasarnya penggunaan produk ini bertujuan untuk mengurangi atau menghilangkan penyebab utama karies gigi.6 Meskipun karies gigi merupakan penyakit yang dipengaruhi oleh banyak faktor namun dapat dikatakan bahwa penyebab utama terjadinya karies adalah bakteri kariogenik yaituStreptococcus mutans.1,7,8

Streptococcus mutans adalah mikroorganisme asidogenik dan asidurik yang berkolonisasi di rongga mulut dan dianggap sebagai pemicu terjadinya karies.9,10 JumlahStreptococcus mutans yang tinggi dalam saliva merupakan indikator yang paling baik dalam memprediksi terjadinya karies.11 Kemampuan Streptococcus mutans untuk melekat pada permukaan gigi ketika terpapar sukrosa dan menghasilkan asam dengan memfermentasi berbagai macam gula telah dihubungkan dengan potensinya dalam menginduksi karies. Oleh karena itu, salah satu cara untuk mencegah karies gigi adalah dengan mengganggu proses adhesi dan kolonisasiStreptococcus mutanske permukaan gigi.12

Mengunyah permen karet merupakan salah satu pilihan dalam mengurangi jumlah koloni bakteri yang ada di dalam rongga mulut. Mengunyah akan meningkatkan sekresi saliva yang salah satu fungsinya adalah melindungi rongga mulut dari bakteri patogen termasuk bakteri kariogenik seperti Streptococcus mutans.13 Jenis bahan yang ditambahkan ke dalam permen karet juga dapat mempengaruhi jumlah mikroorganisme di dalam mulut. Seperti halnya permen karet probiotik yang kini telah beredar di masyarakat dan mendapat sambutan

3

yang cukup baik karena kemampuan bakteri Lactobacillus reuteri yang terkandung di dalamnya dapat mencegah kolonisasi mikroorganisme patogen.14,15 Bakteri ini dapat memproduksi reuterin yang merupakan senyawa anti-patogenik poten yang dapat membatasi kehidupan mikroorganisme dengan spektrum luas termasuk bakteri Gram positif, bakteri Gram negatif, fungi, dan protozoa.16,17

Berdasarkan latar belakang tersebut, peneliti tertarik untuk meneliti pengaruh produk probiotik dengan sediaan permen karet yang mengandung bakteri Lactobacillus reuteri terhadap koloni bakteri kariogenik Streptococcus mutans dalam saliva. Diharapkan, bakteri Lactobacillus reuteri yang terkandung dalam permen karet probiotik ini dapat membantu mengurangi jumlah koloni bakteri Streptococcus mutans dalam saliva yang merupakan penyebab utama karies sehingga dapat mengurangi tingkat karies secara signifikan.

1.2 Identifikasi Masalah

Berdasarkan latar belakang penelitian yang telah diuraikan di atas, maka dapat dirumuskan identifikasi masalah sebagai berikut :

Apakah mengunyah permen karet probiotik yang mengandung Lactobacillus reuteridapat menurunkan jumlah koloni bakteri kariogenik Streptococcus mutans dalam saliva.

4

1.3 Tujuan Penelitian

Tujuan penelitian ini adalah untuk mengukur pengaruh permen karet probiotik yang mengandung Lactobacillus reuteri terhadap jumlah koloni bakteri kariogenikStreptococcus mutans dalam saliva.

1.4 Manfaat Penelitian

Hasil penelitian diharapkan memiliki beberapa manfaat, yaitu : 1. Manfaat akademis

Menjelaskan secara ilmiah efek mengunyah permen karet probiotik yang mengandung Lactobacillus reuteri terhadap koloni bakteri kariogenik Streptococcus mutans dalam saliva dan dapat dijadikan landasan untuk penilitian lain sehingga berguna bagi perkembangan ilmu pengetahuan.

2. Manfaat praktis

Memberikan informasi kepada masyarakat serta kepada pelaksana pelayanan kesehatan gigi dan mulut masyarakat mengenai pengaruh permen karet probiotik dalam hal kesehatan gigi dan mulut khususnya dalam pencegahan karies.

1.5 Kerangka Pemikiran dan Hipotesis

Setiap hari, manusia menelan mikroorganisme hidup terutama bakteri dalam jumlah yang besar. Walaupun bakteri ini secara alami terdapat di dalam makanan dan minuman, namun dapat juga dengan sengaja ditambahkan ke dalam makanan yang diolah seperti keju, yogurt, dan produk-produk susu fermentasi lainnya

5

untuk mendapatkan efek tertentu. Bakteri yang ditambahkan ke dalam makanan dengan tujuan kesehatan ini disebut dengan probiotik.18

Probiotik adalah mikroorganisme hidup, terutama bakteri yang aman untuk dikonsumsi dan apabila diberikan dalam jumlah yang adekuat (melalui makanan atau pun sebagai suplemen) dapat memberikan keuntungan bagi kesehatan inangnya.3,16,19,20

Saat ini produk probiotik yang beredar di pasaran jumlahnya meningkat. Hal ini dihubungkan dengan manfaatnya dalam menjaga kesehatan saluran pencernaan yang telah banyak diteliti dan dibuktikan oleh para ahli. Namun peran probiotik tidak hanya untuk kesehatan saluran pencernaan saja, kini probiotik juga diyakini dapat digunakan untuk meningkatkan kesehatan rongga mulut. Bakteri yang sering dihubungkan dan digunakan untuk meningkatkan kesehatan rongga mulut adalah bakteriLactobacillus reuteriyang berasal dari genusLactobacilli.21,22,23

Lactobacillus reuteri adalah bakteri komensal yang terdapat pada saluran cerna manusia dan diketahui memproduksi reuterin. Reuterin adalah molekul ringan turunan gliserol yang disekresi pada keadaan fisiologis, bersifat netral, larut dalam air, efektif pada rentang pH yang luas, dan resisten terhadap enzim-enzim proteolitik dan lipolitik. Senyawa ini diketahui dapat menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif dan Gram negatif serta memiliki efek antibakteri, anti jamur, dan anti protozoa.16

Kemampuan dalam mensekresikan reuterin inilah yang banyak dihubungkan dengan penurunan jumlah bakteri kariogenik Streptococcus mutans di dalam rongga mulut. Lactobacillus reuteri adalah salah satu spesies yang telah diuji

6

mampu menghambat pembiakan Streptococcus mutans dan tidak memiliki efek yang merugikan pada gigi.14,16,20

Hasil maksimal dari penggunaan Lactobacillus reuterisebagai probiotik yang dapat meningkatkan kesehatan rongga mulut, dapat dicapai apabila bakteri berkontak selama mungkin dengan permukaan gigi. Hal ini bertujuan agar Lactobacillus reuteri dapat melekat dan berintegrasi dengan komunitas bakteri lainya untuk membentuk lapisan biofilm yang memproteksi permukaan gigi dari bakteri patogen. Pengunyahan permen karet probiotik selama 10 menit diharapkan dapat membentuk lapisan biofilm oleh bakteri.15

Selain kandungan Lactobacillus reuteri pada permen karet probiotik, pengunyahan permen karet juga dapat menstimulasi aliran saliva yang secara tidak langsung dapat melindungi gigi dari karies. Peningkatan aliran saliva dapat membantu mengurangi bakteri dan partikel makanan yang berperan dalam proses metabolisme bakteri. Saliva juga mengandung beberapa faktor yang dapat menghancurkan bakteri, seperti ion tiosianat, enzim proteolitik, dan protein yang terkandung dalam saliva seperti laktoferin, immunoglobulin, serta faktor agregasi bakteri yang dapat menurunkan bakteri di rongga mulut ataupun dalam fase statis.13

Berdasarkan kerangka pemikiran di atas maka dapat disusun hipotesis penelitian ini, yaitu dengan mengunyah permen karet probiotik yang mengandung Lactobacillus reuteri dapat menurunkan jumlah koloni bakteri kariogenik Streptococcus mutansdalam saliva.

7

1.6 Metode Penelitian

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental semu laboratorik. Populasi dan sampel penelitian diambil secara acak dengan jumlah orang percobaan sebanyak 8 orang.

Analisis data diuji dengan metode uji t berpasangan dengan α = 0,05. Kemaknaan ditentukan berdasarkan nilai p < 0,05. Analisis data menggunakan perangkat lunak komputer.

1.7 Lokasi dan Waktu Penelitian

Penelitian dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Kristen Maranatha pada bulan Mei – Juli 2012.

60

BAB V

SIMPULAN DAN SARAN

5.1 Simpulan

Mengunyah permen karet probiotik yang mengandung Lactobacillus reuteri dapat menurunkan jumlah koloni bakteri kariogenik Streptococcus mutansdalam saliva.

5.2 Saran

1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai perbandingan jumlah koloni Streptococcus mutans antara sebelum dan sesudah mengunyah permen karet probiotik yang mengandung bakteri dengan jenis ataustrain yang berbeda.

2. Perlu dilakukan penelitian mengenai efek penggunaan permen karet probiotik dalam jangka waktu yang panjang.

3. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai kolonisasi bakteri Lactobacillus reuteridi rongga mulut.

4. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai pengaruh bakteri probiotikLactobacillus reuteriterhadap pH rongga mulut.

61

DAFTAR PUSTAKA

1. Bagg J, MacFarlane TW, Poxton IR, Smith AJ.Essentials of Microbiology for Dental Student.Oxford University Press: 2006: 237-258

2. Aas JA, Paster BJ, Stokes LN, Olsen I, Dewhirst FE. Defining the Normal Bacterial Flora of the Oral Cavity. Journal of Clinical Microbiology. [serial online] 2005 [dikutip 2011 May 28]; 43(11): 572--5732. Tersedia dari: URL: http://jcm.asm.org/cgi/reprint/43/11/5721

3. Bonifait L, Chandad F, & Grenier D. Probiotics for Oral Health: Myth or Reality?. Journal of the Canadian Dental Association. [serial online] 2009 [dikutip 2011 Okt 14]; 75(8): 585-590. Tersedia dari : URL: http://www.cda-adc.ca/JCDA/vol-75/issue-8/585.pdf

4. Mahanna NSH, Zaazou MH, Ahmed BS, El-Yazeed MA. Effect of some Probiotic Strains and Meswak Plant on Certain Oral Pathogenic Strains. International Journal of Academic Research. [serial online] 2009 [dikutip 2011 Sept 6]; 1(2): 128-132. Tersedia dari: URL: http://www.ijar.lit.az/pdf/2/2009%282-20%29.pdf

5. Choudhari S, Mopgar V, Sakhare S, Patil N. Probiotic Way of Dental Caries Prevention. International Journal of Contemporary Dentistry. [serial online] 2009 [dikutip 2011 Oct 14]; 2(1): 59-64. Tersedia dari: URL: http://edentj.com/index.php/ijcd/article/view/166/95

6. Welbury RR, Dugal SM, Hossey TM. Paediatric Dentistry.3th ed. Oxford; 2005: 117-129.

7. Lang, et.al. Specific Lactobacillus Mutans Streptococcus Coaggregation. Journal of Dental Research. [serial online] 2010 [dikutip 2011 Sep 9]; 89(2):175-179. Tersedia dari: URL:http://jdr.sagepub.com/content/89/2/175 8. Flichy-Fernández AJ, Alegre-Domingo T, Oltra D,

Peñarrocha-Diago M. Probiotic treatment in the oral cavity: An update. Journal section: Oral Medicine and Pathology. [serial online] 2010 [dikutip 2011 Mar 2]; 15 (5):e677-80 Tersedia dari : URL: http://www.medicinaoral.com/medoralfree01/v15i5/medoralv15i5p677.pdf 9. Loesche WJ. Role of Streptococcus mutans in Human Dental Decay.

American Society for Microbiology. [serial online] 1986 [dikutip 2011 Oct 14]; 50(4): 353-380. Tersedia dari : URL : http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC373078/pdf/microrev00055-0005.pdf

62

10. Gamboa F, Estupinan M & Galindo A. Presence of Streptococcus mutans in Saliva and its Relationship with Dental Caries. Universitas Scientiarum. [serial online] 2004 [dikutip 2011 Jul 14]; 9: 23-27. Tersedia dari: URL : http://redalyc.uaemex.mx/pdf/499/49909603.pdf

11. Kohler B, Bratthall D. Practical Method to Facilitate Estimation of Streptococcus mutans Levels in Saliva. Journal of Clinical Microbiology. [serial online] 1979 [dikutip 2011 Jul 14]; 9(5): 584-588. Tersedia dari: URL:

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC275352/pdf/jcm00190-0050.pdf

12.Hamada S, Koga T, & Ooshima T.Virulence Factors of Streptococcus mutans and Dental Caries Prevention. Journal of Dental Research. [serial online] 1984 [dikutip 2011 Jul 21]; 63(3): 407-411. Tersedia dari: URL: http://jdr.sagepub.com/content/63/3/407.long

13. Amerongen VN. Ludah dan Kelenjar Ludah: Arti Bagi Kesehatan Gigi. Terj. R. Abyono dan S.Suryo. Yogyakarta : Gadjah Mada University Press; 1991: 43-70.

14. Nikawa, H, Aimi R, et al. Lactobacillus reuteri in bovine milk fermented decreases the oral carriage of mutans streptococci. International Journal Food Microbiology. [serial online] 2004 [dikutip 2011 Des 5]; 52: 219-223. Tersedia dari: URL: http://www.reladent.fi/pdf/Nikawa_H_et_al_2004.pdf 15. Sheikh S, Pallagatti S, Kalucha A, Kaur H. Probiotics. Going on the Natural

Way.J Clin Exp Dent. [serial online] 2011 [dikutip 2011 Sept 6]; 3(2): e150-4.

Tersedia dari: URL:

http://www.medicinaoral.com/odo/volumenes/v3i2/jcedv3i2p150.pdf

16. Jones SE, Versalovic J. Probiotic Lactobacillus reuteri Biofilms Produce Antimicrobial and Anti-inflammatory Factors. BMC Microbiology. [serial online] 2009 [dikutip 2011 May 27]; 9(35): 1-9. Tersedia dari: URL: http://www.biomedcentral.com/content/pdf/1471-2180-9-35.pdf

17. Talarico TL, Dorogosz WJ. Chemical Characterization of an Antimicrobial Substance Produced by Lactobacillus reuteri. American Society for Microbiology. [serial online] 1989 [dikutip 2011 Des 16]; 33(5): 674-679.

Tersedia dari: URL:

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC172512/pdf/aac00073-0098.pdf

18. Devine DA, Marsh PD. Prospects for the Development of Probiotics and Prebiotics for oral applications. Journal Oral Microbiology. [serial online] 2009 [dikutip 2011 May 28]; 1:1, doi:10.3402/jom.v1i0.1949. Tersedia dari:

63

URL: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3077007/pdf/JOM-1-1949.pdf

19. Stamatova I, Meurman JH. Probiotics: Health Benefits in the Mouth. American Journal of Dentistry. [serial online] 2009 [dikutip 2011 Sep 6]; 22(6): 329-338. Tersedia dari: URL:

http://www.amjdent.com/Archive/2009/Stamatova%20-%20December%202009.pdf

20. Brshan J, Chachra S. Probiotic Their Role in Prevention of Dental Caries. Journal Oral Health Comm Dent.[serial online] 2010 [dikutip 2011 Des 14]; 24(3): 78-82. Tersdia dari: URL: http://www.johcd.org/pdf/JOHCD%20-%20Probiotics%20Their%20Role%20in%20Prevention%20of%20Dental%20 Caries%20%2828-9-10%29.pdf

21. Haukioja A. Probiotics and Oral Health. European Journal of Dentistry. [serial online] 2010 [dikutip 2011 Oct 9]; 4: 348-355. Tersedia dari: URL: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2897872/pdf/dent04_p0348.pd f

22. He Xuesong, Lux Renate, Kuramitsu HK, Anderson MH, Shi W. Achieving Probiotic Effects via Modulating Oral Microbial Ecology. Advanced Journal Research. [serial online] 2009 [dikutip 2011 May 6]; 21(1): 53-56. Tersedia

dari: URL:

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2777612/pdf/nihms145397.pd f

23. Robertsson S, Mohlin B, Thilander B. Influence of Dietary Supplementation with Lactobacillus reuteri in the Oral Flora of Healthy Subjects. Swedish Dental Journal. [serial online] 2008 [dikutip 2011 Des 16]; 34(4/10):

177-252. Tersedia dari: URL:

http://www.tandlakarforbundet.se/media/111115/sdj_4_2010.pdf

24. Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan Kementrian Kesehatan Republik Indonesia. Riset Kesehatan Dasar (RISKESDAS). Jakarta: 2007 25. Fejerskov O, Kidd EAM.Dental Caries. UK : Blackwell Munksgaard; 2003 26. Garg N, Garg A.Textbook of Operative Dentistry. New Delhi: JAYPEE; 2010 27. Guyton. A. C & Hall. J. E. Textbook of Medical Physiology. 11th ed.

Philadelphia: Elsevier Saunders; 2006.

28. Van Rensburg BGJ. Oral Biology. Berlin: Quintessence Publishing Co Inc; 1995

64

29. Moynihan JP.The role of diet and nutrution in the etiology and prevention of oral disease. Bulletin of the World of Organization. [serial online] 2005 [dikutip 2011 des 16]; 93(9). Tersedia dari. URL: http://who.int/bulletin/volumes/83/9/694.pdf

30. McDonald RE, Avery DR, Dean JE.Dentistry for the chid and Adolescent.8th ed. St.Louis: Mosby; 2004: 239-251

31. Lamont RJ, Burne RA, Lantz MZ, LeBlanc DJ. Oral Microbiology and Immunology.Washington DC: ASM Press: 233-250

32. Samaranayake L.Essential Microbiology for Dentistry. 3rd ed. USA: Elsevier; 2006.

33. Wan AK, Seow WK, Walsh LJ, Bird PS. Comparison of five selective media fo the growth and enumeration of Streptococcus mutans. Aust Dent J. [serial online] 2002 [dikutip 2012 jan 1]; 47: 21-26. Tersedia dari; URL: http://ada.org.au/App_CmLib/Media/Lib/0610/M28769_v1_63297379122544 1250.pdf

34.Whitman WB. Bergey's Manual of Systematic Bacteriology. 2nd ed. USA: Bergey's Manual Trust; 2009.

35. Willet NP, White RR, Rosen S. Essential Dental Microbiology. Singapore: Prentice-Hall International Inc; 1991: 319, 347.

36. Addy M. Plaque Control as a Scientific Basic for the Prevention of Oral Caries. Journal of the Royal Society of Medicine Supplement. [serial online] 1986 [dikutip 2012 jan 22]; 79(14): 6-10. Tersedia dari : URL: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1290094/

37. Mrray JJ, Nunn JH, Steele JG. The prevetion of Oral Disease. 4th ed. New York: Oxford University Press: 2003: 136-138

38. Roberson TM, Heymann HO, Swift EJ.Sturdevant's Art and Science of Operative Dentistry. 4th ed. USA: Mosby; 2002: 63-130.

39. Parvez S, Malik KA , Kang AH. Probiotics and their fermented food product are benficial for healt. Journal of Applied Microbiology ISSN 1364-5072. [serial online] 2006 [dikutip 2011 Sep 3]; 100 (2006): 1171-1185. Tersedia

dari: URL:

http://probioticsincanada.com/en/pdfs/Probiotics%20and%20their%20ferment ed%20food%20product%20are%20benefecial.pdf

65

40. World Health Organization (WHO). Health and Nutritional Properties of Probiotics in Food including Powder Milk with Live Lactic Acid Bacteria.[serial online] 2001 [dikutip 2011 des 21]. Tersedia dari: URL: http://www.who.int/foodsafety/publications/fs_management/en/probiotics.pdf 41. Ganong WF.Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi 20. Jakarta: EGC; 2002. 42. Berkovitz BKB, Holland GR, Moxham BJ. Oral Anatomy, Histology and

Embryology. 3rd ed. St. Louis; Mosby; 2005

43. Lauralee S. Human Physiology from Cells to System. West Virginia: West A Division of International Thomson Publishing Inc.: 1996; 547-548.

44. Soboleva U, Laurina L & Slaidina A.The Masticatory System – an Overview. Stomatologija, Baltic Dental and Maxillofacial Journal. [serial online] 2005 [cited 2012 Jan 21]; 7: 77-80. Available from: URL: http://www.sbdmj.com/053/053-03.pdf

45. Henry G. Anatomy of the Human Body. 20th ed. Philadelphia: Lea & Febiger; 1918.

46. Ly KA, Milgrom P, Rothen M, The Potential of Dental-Protective chewing Gum in Oral Health Interventions. The journal of the American Dental Association. [serial online] 2008 [dikutip 2011 Apr 2]; 139: 553-63. Tersedia dari: URL : http://jada.ada.org/content/139/5/553.full.pdf+html?sid=aa2d4efa-afa-47d7-96ed-1e1f60c093ab

47. Soesilo D, Santoso RE, Diyatri I. Peranan sorbitol dalam mempertahankan kestabilan pH saliva pada proses pencegahan karies. Med. Ked. Gigi (Dent. J). [serial online] 2008 [dikutip 2012 Jan 2]; 38(1): 25-28. Tersedia dari: URL: http://journal.unair.ac.id/filerPDF/DENTJ-38-1-07.pdf

48. Sinkiewicz G.Lactobacillus in Health and Disease.Malmö University Health and Society Doctoral Dissertation. [serial online] 2010 [dikutip 2011 Jul 14].

Tersedia dari: URL :

http://dspace.mah.se/bitstream/handle/2043/10570/GS_dissertation.pdf?seque nce=2

49. Sanders, ME.Probiotics. Food Technology J. 1999; 53: 67-76.

50. Twetman S, Derawi B, Keller M, Ekstrand K, Lindberg TY, Blicks CS. Short-term effect of chewing gums containing probiotic Lactobacillus reuteri on the levels of inflammatory mediators in gingival crevicular fluid. Acta Odontol Scand. [serial online] 2008 [dikutip 2012 Jan 2]; 67: 19-24. Tersedia dari: URL:http://www.reladent.fi/pdf/OHLBRTwetman08.pdf

66

51. Martini FH. Fundamentals of Anatomy and Physiology. 7th ed. USA: Benjamin Cummings; 2006

52. Norton NS. Netter’s Head and Neck Anatomy for Dentistry. Philadelphia: Elsevier; 2007.

53. Nanci, A. Ten Cate's Oral Histology-Development, Structure and Function. 6th ed. Mosby; 2003

54. Wong DT.Salivary Diagnostic. USA: Wiley-Blackwell; 2008.

55. W.B. Sanders Company.Kamus Kedokteran Dorland. Edisi 29. Jakarta: EGC; 2000.

56. Dahlan MS. Besar Sampel dan Cara Pengambilan Sampel dalam Penelitian Kedokteran dan Kesehatan. Edisi 2. Jakarta: Salemba Medika; 2009.

61

2. Aas JA, Paster BJ, Stokes LN, Olsen I, Dewhirst FE. Defining the Normal Bacterial Flora of the Oral Cavity. Journal of Clinical Microbiology. [serial online] 2005 [dikutip 2011 May 28]; 43(11): 572--5732. Tersedia dari: URL: http://jcm.asm.org/cgi/reprint/43/11/5721

3. Bonifait L, Chandad F, & Grenier D. Probiotics for Oral Health: Myth or Reality?. Journal of the Canadian Dental Association. [serial online] 2009 [dikutip 2011 Okt 14]; 75(8): 585-590. Tersedia dari : URL: http://www.cda-adc.ca/JCDA/vol-75/issue-8/585.pdf

4. Mahanna NSH, Zaazou MH, Ahmed BS, El-Yazeed MA. Effect of some Probiotic Strains and Meswak Plant on Certain Oral Pathogenic Strains. International Journal of Academic Research. [serial online] 2009 [dikutip 2011 Sept 6]; 1(2): 128-132. Tersedia dari: URL: http://www.ijar.lit.az/pdf/2/2009%282-20%29.pdf

5. Choudhari S, Mopgar V, Sakhare S, Patil N. Probiotic Way of Dental Caries Prevention. International Journal of Contemporary Dentistry. [serial online] 2009 [dikutip 2011 Oct 14]; 2(1): 59-64. Tersedia dari: URL: http://edentj.com/index.php/ijcd/article/view/166/95

6. Welbury RR, Dugal SM, Hossey TM. Paediatric Dentistry.3th ed. Oxford; 2005: 117-129.

7. Lang, et.al. Specific Lactobacillus Mutans Streptococcus Coaggregation. Journal of Dental Research. [serial online] 2010 [dikutip 2011 Sep 9]; 89(2):175-179. Tersedia dari: URL:http://jdr.sagepub.com/content/89/2/175 8. Flichy-Fernández AJ, Alegre-Domingo T, Oltra D,

Peñarrocha-Diago M. Probiotic treatment in the oral cavity: An update. Journal section: Oral Medicine and Pathology. [serial online] 2010 [dikutip 2011 Mar 2]; 15

(5):e677-80 Tersedia dari : URL:

http://www.medicinaoral.com/medoralfree01/v15i5/medoralv15i5p677.pdf 9. Loesche WJ. Role of Streptococcus mutans in Human Dental Decay.

American Society for Microbiology. [serial online] 1986 [dikutip 2011 Oct

14]; 50(4): 353-380. Tersedia dari : URL :

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC373078/pdf/microrev00055-0005.pdf

10. Gamboa F, Estupinan M & Galindo A. Presence of Streptococcus mutans in Saliva and its Relationship with Dental Caries. Universitas Scientiarum. [serial online] 2004 [dikutip 2011 Jul 14]; 9: 23-27. Tersedia dari: URL : http://redalyc.uaemex.mx/pdf/499/49909603.pdf

11. Kohler B, Bratthall D. Practical Method to Facilitate Estimation of Streptococcus mutans Levels in Saliva. Journal of Clinical Microbiology. [serial online] 1979 [dikutip 2011 Jul 14]; 9(5): 584-588. Tersedia dari: URL:

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC275352/pdf/jcm00190-0050.pdf

12.Hamada S, Koga T, & Ooshima T.Virulence Factors of Streptococcus mutans and Dental Caries Prevention. Journal of Dental Research. [serial online] 1984 [dikutip 2011 Jul 21]; 63(3): 407-411. Tersedia dari: URL: http://jdr.sagepub.com/content/63/3/407.long

13. Amerongen VN. Ludah dan Kelenjar Ludah: Arti Bagi Kesehatan Gigi. Terj. R. Abyono dan S.Suryo. Yogyakarta : Gadjah Mada University Press; 1991: 43-70.

14. Nikawa, H, Aimi R, et al. Lactobacillus reuteri in bovine milk fermented decreases the oral carriage of mutans streptococci. International Journal Food Microbiology. [serial online] 2004 [dikutip 2011 Des 5]; 52: 219-223. Tersedia dari: URL: http://www.reladent.fi/pdf/Nikawa_H_et_al_2004.pdf 15. Sheikh S, Pallagatti S, Kalucha A, Kaur H. Probiotics. Going on the Natural

Way.J Clin Exp Dent. [serial online] 2011 [dikutip 2011 Sept 6]; 3(2): e150-4.

Tersedia dari: URL:

http://www.medicinaoral.com/odo/volumenes/v3i2/jcedv3i2p150.pdf

16. Jones SE, Versalovic J. Probiotic Lactobacillus reuteri Biofilms Produce Antimicrobial and Anti-inflammatory Factors. BMC Microbiology. [serial online] 2009 [dikutip 2011 May 27]; 9(35): 1-9. Tersedia dari: URL: http://www.biomedcentral.com/content/pdf/1471-2180-9-35.pdf

17. Talarico TL, Dorogosz WJ. Chemical Characterization of an Antimicrobial Substance Produced by Lactobacillus reuteri. American Society for Microbiology. [serial online] 1989 [dikutip 2011 Des 16]; 33(5): 674-679.

Tersedia dari: URL:

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC172512/pdf/aac00073-0098.pdf

18. Devine DA, Marsh PD. Prospects for the Development of Probiotics and Prebiotics for oral applications. Journal Oral Microbiology. [serial online] 2009 [dikutip 2011 May 28]; 1:1, doi:10.3402/jom.v1i0.1949. Tersedia dari:

URL: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3077007/pdf/JOM-1-1949.pdf

19. Stamatova I, Meurman JH. Probiotics: Health Benefits in the Mouth. American Journal of Dentistry. [serial online] 2009 [dikutip 2011 Sep 6];

22(6): 329-338. Tersedia dari: URL:

http://www.amjdent.com/Archive/2009/Stamatova%20-%20December%202009.pdf

20. Brshan J, Chachra S. Probiotic Their Role in Prevention of Dental Caries. Journal Oral Health Comm Dent.[serial online] 2010 [dikutip 2011 Des 14]; 24(3): 78-82. Tersdia dari: URL: http://www.johcd.org/pdf/JOHCD%20-%20Probiotics%20Their%20Role%20in%20Prevention%20of%20Dental%20 Caries%20%2828-9-10%29.pdf

21. Haukioja A. Probiotics and Oral Health. European Journal of Dentistry. [serial online] 2010 [dikutip 2011 Oct 9]; 4: 348-355. Tersedia dari: URL: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2897872/pdf/dent04_p0348.pd f

22. He Xuesong, Lux Renate, Kuramitsu HK, Anderson MH, Shi W. Achieving Probiotic Effects via Modulating Oral Microbial Ecology. Advanced Journal Research. [serial online] 2009 [dikutip 2011 May 6]; 21(1): 53-56. Tersedia

dari: URL:

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2777612/pdf/nihms145397.pd f

23. Robertsson S, Mohlin B, Thilander B. Influence of Dietary Supplementation with Lactobacillus reuteri in the Oral Flora of Healthy Subjects. Swedish Dental Journal. [serial online] 2008 [dikutip 2011 Des 16]; 34(4/10):

177-252. Tersedia dari: URL:

http://www.tandlakarforbundet.se/media/111115/sdj_4_2010.pdf

24. Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan Kementrian Kesehatan Republik Indonesia. Riset Kesehatan Dasar (RISKESDAS). Jakarta: 2007 25. Fejerskov O, Kidd EAM.Dental Caries. UK : Blackwell Munksgaard; 2003 26. Garg N, Garg A.Textbook of Operative Dentistry. New Delhi: JAYPEE; 2010 27. Guyton. A. C & Hall. J. E. Textbook of Medical Physiology. 11th ed.

Philadelphia: Elsevier Saunders; 2006.

28. Van Rensburg BGJ. Oral Biology. Berlin: Quintessence Publishing Co Inc; 1995

29. Moynihan JP.The role of diet and nutrution in the etiology and prevention of oral disease. Bulletin of the World of Organization. [serial online] 2005 [dikutip 2011 des 16]; 93(9). Tersedia dari. URL: http://who.int/bulletin/volumes/83/9/694.pdf

30. McDonald RE, Avery DR, Dean JE.Dentistry for the chid and Adolescent.8th ed. St.Louis: Mosby; 2004: 239-251

31. Lamont RJ, Burne RA, Lantz MZ, LeBlanc DJ. Oral Microbiology and Immunology.Washington DC: ASM Press: 233-250

32. Samaranayake L.Essential Microbiology for Dentistry. 3rd ed. USA: Elsevier; 2006.

33. Wan AK, Seow WK, Walsh LJ, Bird PS. Comparison of five selective media fo the growth and enumeration of Streptococcus mutans. Aust Dent J. [serial online] 2002 [dikutip 2012 jan 1]; 47: 21-26. Tersedia dari; URL: http://ada.org.au/App_CmLib/Media/Lib/0610/M28769_v1_63297379122544 1250.pdf

34.Whitman WB. Bergey's Manual of Systematic Bacteriology. 2nd ed. USA: Bergey's Manual Trust; 2009.

35. Willet NP, White RR, Rosen S. Essential Dental Microbiology. Singapore: Prentice-Hall International Inc; 1991: 319, 347.

36. Addy M. Plaque Control as a Scientific Basic for the Prevention of Oral Caries. Journal of the Royal Society of Medicine Supplement. [serial online] 1986 [dikutip 2012 jan 22]; 79(14): 6-10. Tersedia dari : URL: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1290094/

37. Mrray JJ, Nunn JH, Steele JG. The prevetion of Oral Disease. 4th ed. New York: Oxford University Press: 2003: 136-138

38. Roberson TM, Heymann HO, Swift EJ.Sturdevant's Art and Science of Operative Dentistry. 4th ed. USA: Mosby; 2002: 63-130.

39. Parvez S, Malik KA , Kang AH. Probiotics and their fermented food product are benficial for healt. Journal of Applied Microbiology ISSN 1364-5072. [serial online] 2006 [dikutip 2011 Sep 3]; 100 (2006): 1171-1185. Tersedia

dari: URL:

http://probioticsincanada.com/en/pdfs/Probiotics%20and%20their%20ferment ed%20food%20product%20are%20benefecial.pdf

40. World Health Organization (WHO). Health and Nutritional Properties of Probiotics in Food including Powder Milk with Live Lactic Acid Bacteria.[serial online] 2001 [dikutip 2011 des 21]. Tersedia dari: URL: http://www.who.int/foodsafety/publications/fs_management/en/probiotics.pdf 41. Ganong WF.Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi 20. Jakarta: EGC; 2002. 42. Berkovitz BKB, Holland GR, Moxham BJ. Oral Anatomy, Histology and

Embryology. 3rd ed. St. Louis; Mosby; 2005

43. Lauralee S. Human Physiology from Cells to System. West Virginia: West A Division of International Thomson Publishing Inc.: 1996; 547-548.

44. Soboleva U, Laurina L & Slaidina A.The Masticatory System – an Overview. Stomatologija, Baltic Dental and Maxillofacial Journal. [serial online] 2005 [cited 2012 Jan 21]; 7: 77-80. Available from: URL: http://www.sbdmj.com/053/053-03.pdf

45. Henry G. Anatomy of the Human Body. 20th ed. Philadelphia: Lea & Febiger; 1918.

46. Ly KA, Milgrom P, Rothen M, The Potential of Dental-Protective chewing Gum in Oral Health Interventions. The journal of the American Dental Association. [serial online] 2008 [dikutip 2011 Apr 2]; 139: 553-63. Tersedia dari: URL : http://jada.ada.org/content/139/5/553.full.pdf+html?sid=aa2d4efa-afa-47d7-96ed-1e1f60c093ab

47. Soesilo D, Santoso RE, Diyatri I. Peranan sorbitol dalam mempertahankan kestabilan pH saliva pada proses pencegahan karies. Med. Ked. Gigi (Dent. J). [serial online] 2008 [dikutip 2012 Jan 2]; 38(1): 25-28. Tersedia dari: URL: http://journal.unair.ac.id/filerPDF/DENTJ-38-1-07.pdf

48. Sinkiewicz G.Lactobacillus in Health and Disease.Malmö University Health and Society Doctoral Dissertation. [serial online] 2010 [dikutip 2011 Jul 14].

Tersedia dari: URL :

http://dspace.mah.se/bitstream/handle/2043/10570/GS_dissertation.pdf?seque nce=2

49. Sanders, ME.Probiotics. Food Technology J. 1999; 53: 67-76.

50. Twetman S, Derawi B, Keller M, Ekstrand K, Lindberg TY, Blicks CS. Short-term effect of chewing gums containing probiotic Lactobacillus reuteri on the levels of inflammatory mediators in gingival crevicular fluid. Acta Odontol Scand. [serial online] 2008 [dikutip 2012 Jan 2]; 67: 19-24. Tersedia dari: URL:http://www.reladent.fi/pdf/OHLBRTwetman08.pdf

51. Martini FH. Fundamentals of Anatomy and Physiology. 7th ed. USA: Benjamin Cummings; 2006

52. Norton NS. Netter’s Head and Neck Anatomy for Dentistry. Philadelphia: Elsevier; 2007.

53. Nanci, A. Ten Cate's Oral Histology-Development, Structure and Function. 6th ed. Mosby; 2003

54. Wong DT.Salivary Diagnostic. USA: Wiley-Blackwell; 2008.

55. W.B. Sanders Company.Kamus Kedokteran Dorland. Edisi 29. Jakarta: EGC; 2000.

56. Dahlan MS. Besar Sampel dan Cara Pengambilan Sampel dalam Penelitian Kedokteran dan Kesehatan. Edisi 2. Jakarta: Salemba Medika; 2009.