31
Komposisi: RPMI sachet, spesifikasi: GIBCO Lot No. 921956, dengan L-glutamine tanpa NaHCO
3
, netto 10,4 gram Hepes 2 gram
NaHCO
3
2 gram Aquabidest steril ad 1 liter
Sebanyak 1 sachet RPMI, 2 gram Hepes, dan 2 gram NaHCO
3
dimasukkan kedalam erlenmeyer, ditambahkan 800 ml aquabidest steril, dihomogenkan dengan menggunakan magnetic stirer. Ukur pH 7,2 – 7,4
dengan pH meter, untuk menyesuaikan pH dapat digunakan HCl 1N bila larutan basa atau NaOH 1N bila larutan asam, kemudian ditambahkan
aquabidest steril sampai 1 L, sterilisasi dilakukan dengan filter vaccum di dalam LAF Laminar air Flow, dipasang filter aparatus steril pada botol
duran 1 L steril, proses penyaringan dilakukan dengan filter, aliquot media ditampung dalam botol duran 500 ml, diberi identitas pada botol media
nama media, tanggal pembuatan, expire date, dan nama pembuat, dan disimpan pada suhu 2-8
o
C Sambrook, et al., 1989.
3.7.2 Pembuatan Media Kultur Lengkap MK RPMI
Komposisi: Fetal Bovine Serum FBS 10
Penisilin-Streptomisin 2 Fungizone Amphotericin B 0,5
RPMI ad 100 ml Semua bahan di atas dicampur, dan dilakukan di dalam LAF Laminar Air
Flow, diberi identitas pada botol MK nama media, tanggal pembuatan, expire
32
date, dan nama pembuat, kemudian disimpan pada suhu 2-8 C Sambrook, et
al., 1989.
3.7.3 Pembuatan Media M199
Komposisi: M199 sachet, spesifikasi: GIBCO Lot No. 819942, dengan Earle’s salt, dengan L-glutamine tanpa NaHCO
3
, netto 9,5 gram Hepes 2 gram
NaHCO
3
2 gram Aquabidest steril ad 1 liter
Sebanyak 1 sachet M199, 2 gram Hepes, dan 2 gram NaHCO
3
dimasukkan kedalam erlenmeyer, ditambahkan 800 ml aquabidest steril, dihomogenkan dengan menggunakan magnetic stirer. Ukur pH 7,2 – 7,4
dengan pH meter, untuk menyesuaikan pH dapat digunakan HCl 1N bila larutan basa atau NaOH 1N bila larutan asam, kemudian ditambahkan
aquabidest steril sampai 1 L, sterilisasi dilakukan dengan filter vaccum di dalam LAF Laminar air Flow, dipasang filter aparatus steril pada botol
duran 1 L steril, proses penyaringan dilakukan dengan filter, aliquot media ditampung dalam botol duran 500 ml, diberi identitas pada botol media
nama media, tanggal pembuatan, expire date, dan nama pembuat, dan disimpan pada suhu 2-8
o
C Handayani, et al., 2001.
3.7.4 Pembuatan Media Kultur Lengkap MK M199
Komposisi: Fetal Bovine Serum FBS 10 Penisilin-Streptomisin 2
Fungizone Amphotericin B 0,5 M199 ad 100 ml
33
Semua bahan di atas dicampur, dan di lakukan di dalam LAF Laminar Air Flow, diberi identitas pada botol MK nama media, tanggal pembuatan, expire
date, dan nama pembuat, kemudian disimpan pada suhu 2-8 C Handayani, et
al., 2001.
3.8 Penumbuhan Sel 3.8.1 Penumbuhan Sel HeLa
