Pada proses karakterisasi enzim ini dilakukan agar dapat diaplikasikan pada kebutuhan industri terhadap enzim yang semakin meningkat dan bervariasi yang menuntut adanya
upaya peningkatan produksi jumlah enzim.
1. Suhu Optimum Enzim Amilase
Aktivitas tertinggi UmL enzim hasil pemurnian dari actinomycetes dapat dilihat pada
Gambar 14. Suhu optimum enzim amilase berdasarkan Gambar 14 adalah 50 C dari data
tabel 7, Lampiran 2 .
0.5 1
1.5 2
2.5 3
20 30
40 50
60 70
80 90
Suhu
o
C
A k
ti vi
tas U
n it
U m
L
Gambar 14. Penentuan suhu optimum enzim amilase
Pada Gambar di atas, aktivitas enzim semakin meningkat seiring dengan kenaikan suhu
sampai pada suhu optimum. Setelah mencapai aktivitas maksimum pada suhu optimum, aktivitas enzim akan menurun seiring dengan kenaikan suhu. Pada suhu kurang dari 50
o
C kestabilan enzim cukup tinggi namun kemampuan hidrolisis pati oleh enzim tidak berjalan
secara maksimal. Dengan meningkatnya temperatur suhu akan menyebabkan meningkatnya energi kinetik yang akan mempercepat gerak vibrasi, translasi, serta gerak
rotasi dari enzim sehingga peluang enzim dan substrat untuk bertumbukan dan bereaksi meningkat, dan produk yang dihasilkan akan semakin bertambah pula.
Akan tetapi diatas temperatur optimum, aktivitas enzim menurun tajam. Hal ini terjadi karena enzim mulai mengalami perubahan konformasi yang menyebabkan sisi aktifnya
tidak sesuai lagi dengan substrat. Hal ini dikarenakan gugus reaktifnya mengalami hambatan untuk memasuki sisi aktif enzim sehingga struktur enzim akan mengalami
kerusakan dan aktivitas enzim semakin menurun Suhartono, 1989.
2. pH Optimum Enzim Amilase
Aktivitas optimum amilase dicapai pada pH 7, hal ini disebabkan karena pada kondisi pH 7, gugus pemberi atau penerima proton yang penting pada sisi katalitik enzim berada pada
tingkat yang diinginkan sehingga aktivitas katalitiknya tinggi dan karena terjadinya perubahan ionisasi pada gugus ionik sisi enzim tersebut yang
mempengaruhi sisi aktifnya, maka hal ini menyebabkan enzim dapat mengikat substrat
lebih efektif dan mengubahnya menjadi produk. Dibawah pH optimum, ion H
+
akan berikatan dengan gugus NH
2 -
bebas membentuk NH
3 +
, sehingga ikatan hidrogen dari amina NH
2
dengan gugus karbonil dalam molekul protein enzim akan putus dan menyebabkan perubahan konformasi pada pusat aktif enzim.
Sedangkan diatas pH optimum , ion OH
-
akan berikatan dengan atom hidrogen dari molekul enzim membentuk H
2
O, sehingga ikatan hidrogen yang ada dalam molekul protein enzim akan putus. Jika pH semakin jauh dari pH optimum, akan menyebabkan enzim
mengalami penurunan aktivitas hingga laju reaksi mencapai nol. Laju reaksi akan menurun dikarenakan perubahan gugus yang bermuatan akan menyebabkan perubahan konformasi
lipatan pada enzim sehingga konformasi sisi aktif enzim ikut terpengaruh akibatnya aktivitas enzim akan menurun dengan adanya perubahan konformasi dari sisi aktif enzim.
Hal ini juga disebabkan karena telah berkurangnya komponen didalam medium yang menjadi penginduksi sintesis enzim atau substrat Abianto, 1989.
0.5 1
1.5 2
2.5 3
5.5 6
6.5 7
7.5 8
8.5
pH
A k
ti vi
tas U
n it
U m
L
Gambar 15. Penentuan pH optimum enzim amilase
Aktivitas unit amilase UmL optimum hasil pemurnian dari actinomycetes adalah pada pH 7 Tabel 8, lampiran 2 dapat dilihat pada Gambar 15.
3. Waktu Optimum Enzim Amilase
