ANLd-2b-3 1,7
2,6 1,529
ANL-12 1,4
2,0 1,428
ANL-4 1,6
1,8 1,128
B. Kondisi waktu dan pH optimum pertumbuhan Actinomycetes.
Penentuan kondisi optimum pertumbuhan actinomycetes perlu dilakukan untuk mengetahui
lingkungan optimum pertumbuhan actinomycetes dan mendapatkan kondisi terbaik dalam memproduksi enzim. Diharapkan enzim yang diproduksi akan lebih maksimal atau
mempunyai aktivitas enzim yang tinggi. Proses ini dilakukan sebelum proses isolasi enzim.
Pada proses penentuan kondisi optimum pertumbuhan actinomycetes isolat ANLd-2b-3 didapatkan pH optimum dan waktu optimumnya yaitu pada pH 7 dan waktu 120 jam.
Sedangkan dari hasil penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh Bruhlmann, et al didapatkan pH dan waktu inkubasi optimum actinomycetes yaitu pada pH 7,3 dan waktu 4
hari 96 jam. Berikut merupakan kurva pertumbuhan actinomycetes dapat dilihat pada Gambar 11 dari
data pada Tabel 3 dan 4, Lampiran 1.
0.06 0.12
0.18
72 144
216
Waktu Jam O
D S
e l
0.5 1
1.5
A k
ti vi
tas U
n it
U m
L
OD Sel Aktivitas Unit UmL
Gambar 11. Hubungan antara jumlah sel OD
600
dan aktivitas unit amilase dengan lama waktu fermentasi
Dari Gambar 11 dapat dilihat fase eksponensial pertumbuhan actinomycetes tercapai pada
waktu inkubasi 96 jam. Produksi enzim amilase dengan aktivitas tertinggi pada waktu inkubasi 120 jam, atau pada awal fase stasioner pertumbuhan actinomycetes.
Setelah didapatkan waktu pertumbuhan optimum actinomycetes dalam menghasilkan enzim amilase dengan aktivitas tertinggi, kemudian ditentukan pH optimum pertumbuhan
actinomycetes.
Hasil pengukuran absorbansi pada panjang gelombang 600nm menggunakan metode densitas optikal OD
600
didapatkan pH optimum pada pH 7 dengan absorbansi sebesar OD
600
= 0,165. Kurva kondisi optimum actinomycetes pada variasi pH dapat dilihat pada Gambar 12
dari data Tabel 5, Lampiran 1.
0.05 0.1
0.15 0.2
5.5 6
6.5 7
7.5 8
8.5
pH O
D S
e l
Gambar 12. Hubungan antara jumlah sel OD
600
dengan pH pada saat fermentasi
C. Inokulum dan Enzim Amilase Hasil Produksi
Penyiapan inokulum atau media starter ini dilakukan dengan tujuan untuk mendapatkan
enzim yang diproduksi lebih banyak dan maksimal. Media starter atau inokulum diinkubasi selama waktu inkubasi pertumbuhan optimum dan pH optimum, yaitu waktu inkubasi
selama 120 jam dengan pH 7.
D. Aktivitas Enzim Amilase Hasil Isolasi
Kategori