Rancangan Penelitian Variabel Penelitian

38

BAB 4 METODOLOGI PENELITIAN

4.1 Rancangan Penelitian

: Postest Only Control Group Design Jenis Penelitian : Eksperimental Laboratorium

4.2 Tempat dan Waktu Penelitian

4.2.1 Tempat Penelitian

: 1.Laboratorium Obat Tradisional Fakultas Farmasi USU 2.Laboratorium Pusat Penyakit Tropis UNAIR

4.2.2 Waktu Penelitian

: Februari 2011 – Maret 2011

4.3 Sampel dan Besar Sampel Penelitian

4.3.1 Sampel Penelitian

: Koloni F.nucleatum ATCC 25586 yang telah diisolasi dan dibiakkan dalam media Mueller Hinton Agar MHA.

4.3.2 Besar Sampel

Penelitian : Adapun penentuan besar sampel dilakukan berdasarkan standart Laboratorium Pusat Penyakit Tropis Universitas Airlangga: a. Penentuan nilai KHM  Kelompok I : ekstrak dengan konsentrasi 100 = 6 sampel  Kelompok II : ekstrak dengan konsentrasi 50 = 6 sampel  Kelompok III : ekstrak dengan konsentrasi 25 = 6 sampel  Kelompok IV : ekstrak dengan konsentrasi 12,5 = 6 sampel  Kelompok V : ekstrak dengan konsentrasi 6,25 = 6 sampel  Kelompok VI : kontrol Mac Farland = 1 sampel Universitas Sumatera Utara 39  Kelompok VII : kontrol negatif ekstrak buah mahkota dewa tanpa suspensi F.nucleatum = 1 sampel Jumlah sampel = 32 sampel Dari masing-masing konsentrasi dilakukan dilusi pengenceran untuk mendapatkan konsentrasi minimal yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri. b. Penentuan nilai KBM Dari hasil penentuan nilai KHM diperoleh beberapa kelompok yang dilanjutkan dengan perhitungan jumlah koloni bakteri dengan metode Drop Plate Mills Mesra.  Kelompok I : ekstrak dengan konsentrasi 100 = 6 sampel  Kelompok II : ekstrak dengan konsentrasi 50 = 6 sampel  Kelompok III : ekstrak dengan konsentrasi 25 = 6 sampel  Kelompok IV : ekstrak dengan konsentrasi 12,5 = 6 sampel  Kelompok V : ekstrak dengan konsentrasi 6,25 = 6 sampel  Kelompok VI : kontrol Mac Farland = 1 sampel  Kelompok VII : kontrol negatif ekstrak buah mahkota dewa tanpa suspensi F.nucleatum = 1 sampel Jumlah sampel = 32 sampel Universitas Sumatera Utara 40

4.4 Variabel Penelitian

Variabel Bebas : Ekstrak buah mahkota dewa dengan pelarut etanol dengan konsentrasi 100,50, 25, 12,5, 6,25 Variabel Tergantung: Pertumbuhan bakteri F.nucleatum pada media MHA dengan pengukuran nilai KHM dan KBM Variabel Terkendali:  Asal tumbuh buah mahkota dewa Kelurahan Karangsari, Kecamatan Medan Polonia, Medan  Keseragaman kondisi buah yang dipetik  Vaccum Rotary Evaporator dengan tekanan 1 ATM dan temperatur ≤60°C  Individu asal F.nucleatum diisolasi.  Suspensi Fusobacterium nucleatum ATCC 25586  Jumlah suspensi bakteri yang diteteskan tiap replikasi 1 ml  Media pertumbuhan MHA Mueller Hinton Agar  Suhu yang digunakan untuk menumbuhkan F.nucleatum 37°C  Waktu yang digunakan untuk mengamati pertumbuhan atau pembiakan F.nucleatum yaitu 24 jam  Jumlah bahan percobaan yang diteteskan ke media padat 50 μl Variabel Tak Terkendali:  Pola pemeliharaan tanaman mahkota dewa  Kondisi tanah tempat tanaman mahkota dewa ditanam  Lama penyimpanan buah mahkota dewa  Lama penyimpanan, lama pengiriman, suhu saat pengiriman bahan coba ekstrak etanol buah mahkota dewa ke laboratorium Universitas Sumatera Utara 41 Variabel Bebas  Ekstrak buah mahkota dewa dengan pelarut etanol dengan konsentrasi 100,50, 25, 12,5, 6,25 Variabel Tergantung  Pertumbuhan bakteri F.nucleatum pada media MHA dengan pengukuran nilai KHM dan KBM Variabel Terkendali  Asal tumbuh buah mahkota dewa Kelurahan Karangsari, Kecamatan Medan Polonia, Medan  Keseragaman kondisi buah yang dipetik  Vaccum Rotary Evaporator dengan tekanan 1 ATM dan temperatur ≤60°C  Individu asal F.nucleatum diisolasi  Suspensi Fusobacterium nucleatum ATCC 25586  Jumlah suspensi bakteri yang diteteskan tiap replikasi 1 ml  Media pertumbuhan MHA Mueller Hinton Agar  Suhu yang digunakan untuk menumbuhkan F.nucleatum 37°C  Waktu yang digunakan untuk mengamati pertumbuhan atau pembiakan F.nucleatum yaitu 24 jam  Jumlah bahan percobaan yang diteteskan ke media padat 50 μl Variabel Tak Terkendali  Pola pemeliharaan tanaman mahkota dewa  Kondisi tanah tempat tanaman mahkota dewa ditanam  Lama penyimpanan buah mahkota dewa Universitas Sumatera Utara 42  Lama penyimpanan, lama pengiriman, suhu saat pengiriman bahan coba ekstrak etanol buah mahkota dewa ke laboratorium.

4.5 Defenisi Operasional