Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim
5. Pembuatan Media Cair untuk Pembiakkan Kultur dan Pengukuran Kurva Pertumbuhan
1. Media dan bahan-bahan nutrien dimasukkan kedalam erlenmeyer dengan
komposisi sebagai berikut :
10 gL ekstrak ragi
100 gL glukosa
0,5 gL MgSO
4
.7H
2
O
1 gL NH
4 2
SO
4
1 gL KH
2
PO
4
2. Aduk bahan-bahan tersebut hingga bercampur.
3. Erlenmeyer berisi media yang telah dibuat ditutup dengan menggunakan
penutup kapas yang dilapisi dengan alumunium foil. 4.
Sterilkan media dalam autoklaf pada suhu 121
o
C selama 15 menit. 5.
Dinginkan media hingga suhu ruang.
Hak Cipta © milik UPN Veteran Jatim : Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.
Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim
Gambar 11. Diagram Alir Pembuatan Media Cair untuk Pembiakkan Kultur dan Pengukuran Kurva Pertumbuhan
Hak Cipta © milik UPN Veteran Jatim : Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.
Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim
6. Persiapan untuk Pengukuran Kurva Pertumbuhan Zymomonas mobilis.
1. Zymomonas mobilis ditumbuhkan pada media nutrien agar miring.
2. Media yang telah diinokulasi ini kemudian diinkubasi pada suhu 30
o
C selama 24 jam.
3. Ambil tiga ose sel Zymomonas mobilis dari agar miring kemudian
dimasukan ke dalam 25 ml larutan media cair. 4.
Inkubasikan selama 48 jam dengan dishaker pada kecepatan 120 rpm dan suhu 30
o
C. 5.
Ambil 25 ml media cair yang telah diinkubasi selanjutnya diinokulasikan kembali ke dalam 225 mL media cair dan dishaker 120 rpm selama 48
jam. 6.
Setiap 2 jam sekali diambil sample contoh untuk dianalisa sel keringnya sebentar – sebentar dikocok dishaker .
7. Analisa sel keringnya dengan cara sebagai berikut:
Ambil sample setiap 2 jam sekali sebanyak 10 ml, lalu disaring, kemudian dioven pada suhu 105
o
C – 110
o
C selama 30 menit, lalu dimasukkan ke eksikator. Setelah dingin ditimbang, kemudian dioven lagi
dan seterusnya sampai beratnya konstan. 8. Setelah selesai percobaan. Buat kurva pertumbuhannya. Kim dkk, 1991.
Hak Cipta © milik UPN Veteran Jatim : Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.
Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim
Gambar 12. Diagram Alir Persiapan untuk Pengukuran Kurva Pertumbuhan Zymomonas mobilis.
Hak Cipta © milik UPN Veteran Jatim : Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.
Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim
7. Pembuatan Starter Untuk Fermentasi
1. Zymomonas mobilis ditumbuhkan pada media nutrien agar miring.
2. Media yang telah diinokulasi ini kemudian diinkubasi pada suhu 30
o
C selama 24 jam.
3. Ambil satu ose sel Zymomonas mobilis dari agar miring kemudian
dimasukan ke dalam 1 liter larutan media cair. 4.
Inkubasi dengan dishaker pada kecepatan 120 rpm dan suhu 30
o
C, sampai awal exsponensial kemudian masukkan dalam media fermentasi.
Zymomonas mobilis
Penumbuhan pada media nutrien agar miring
Inkubasi 30
o
C , 24 jam.
Penanaman pada media cair 1 liter
Inkubasi dengan dishaker 120 rpm , 30
o
C sampai awal exsponensial
masukkan dalam media fermentasi
Gambar 13. Diagram Alir Pembuatan Starter untuk Fermentasi
Hak Cipta © milik UPN Veteran Jatim : Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.
Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim
8. Proses Fermentasi
1. Ambil filtrat dari proses hidrolisis sebanyak 500 ml dan tambahkan
NaOH 6 N hingga pH = 6. 2.
Sterilkan dalam autoklaf pada suhu 120
o
C selama 15 menit. 3.
Dinginkan hingga suhu ruang. 4.
Masukkan starter Zymomonas mobilis dengan variabel volume starter 9, 10, 11 vv
dan dikocok. 5.
Tutup botol fermentasi hingga rapat dan gas dialirkan kedalam botol lain yang berisi air.
6. Fermentasi sesuai dengan variabel waktu fermentasi yaitu 2, 3, 4, 5, 6, 7
dan 8 hari dengan suhu fermentasi 30
o
C.
7.
Saring dan ambil filtrat untuk proses destilasi.
Fermentasi 30
o
C
Filtrasi
Filtrat Endapan
Waktu 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 Hari
Zymomonas mobilis 9, 10, 11 vv
Filtrat dari Proses Hidrolisis 500 ml
Penyesuaian kondisi pH = 6
NaOH 6 N
Sterilisasi dengan Autoklaf 120
o
C, 15 menit
Pendinginan hingga suhu ruang
Analisa Kadar Etanol
Gambar 14. Diagram Alir Proses Fermentasi
Hak Cipta © milik UPN Veteran Jatim : Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.
Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim
9. Proses Destilasi
Kategori