Lampiran 5. Penimbangan uji kandungan fenolik total 1. Penimbangan asam galat
Replikasi 1g Replikasi 2g
Replikasi 3g Bobot kertas
0,1711 0,1785
0,1825 Bobot kertas +
asam galat 0,1964
0,2036 0,2080
Bobot kertas +sisa
0,1713 0,1786
0,1827
Bobot asam galat 0,0251
0,0250 0,0253
2. Data penimbangan fraksi air
Bobot R1
R2 R3
Cawan 13,3236 13,7463 13,0176
Cawan+fraksi 13,3487 13,7732 13,0439 Cawan +sisa
13,3235 13,7461 13,0176 Fraksi
0,0252 0,0262
0,0263
Lampiran 6.
Scanning
kontrol asam galat
Lampiran 7. Optimasi Penentuan kandungan fenolik total 1.
Penentuan
OT
asam galat Replikasi 1
Waktu menit
Absorbansi kon sentrasi replikasi 1 pada 750 nm
40 gml 80 gml
120 gml 5
0,271 0,509
0,766 10
0,276 0,519
0,778 15
0,276 0,519
0,788 20
0,276 0,519
0,779 25
0,276 0,519
0,778 30
0,276 0,520
0,80
OT
yang didapat 10 menit Replikasi 2
Waktu menit
Absorbans i konsentrasi replikasi 2 pada 750 nm
40 gml 80 gml
120 gml 5
0,262 0,490
0,762 10
0,266 0,495
0,772 15
0,266 0,495
0,772 20
0,266 0,495
0,773 25
0,267 0,496
0,773 30
0,267 0,495
0,774
OT
yang didapat 10 menit Replikasi 3
Waktu menit
Abso rbansi konsentrasi replikasi 3 pada 750 nm
40 gml 80 gml
120 gml 5
0,251 0,476
0,742 10
0,258 0,485
0,749 15
0,258 0,486
0,749 20
0,258 0,486
0,750 25
0,258 0,486
0,750 30
0,259 0,487
0,750
OT
yang didapat 10 menit 2. Penentuan maksimum
a . Spektra asam galat 40 gml
b. Spektra asam galat 80 gml
c. Spektra asam galat 120 gml
Lampiran 8. Penentuan kandungan fenolik total 1. Konsentrasi asam galat
Konsentrasi seri replikasi 1
Konsentrasi stok
25,1 mg 50 ml
= 502 gml Seri 1
V1.C1 = V2.C2 2 ml . 502 gml = 25 ml . C2
C2 = 40,16 gml Seri 2
V1.C1 = V2.C2 3 ml . 502 gml = 25 ml . C2
C2 = 60,24 gml Seri 3
V1.C1 = V2.C2 4 ml . 502 gml = 25 ml . C2
Seri 4 V1.C1 = V2.C2
5 ml . 502 gml = 25 ml . C2
C2 = 80,32 gml C2 = 100
,4 gml Seri 5
V1.C1 = V2.C2 6 ml . 502 gml = 25 ml . C2
C2 = 120,48 gml
Konsentrasi seri replikasi 2
Konsentrasi stok
250 mg 50
= 500 μgml
Seri 1 V1.C1 = V2.C2
2 ml . 500 gml = 25 ml . C2 C2 = 40 gml
Seri 2 V1.C1 = V2.C2
3 ml . 500 gml = 25 ml . C2 C2 = 60 gml
Seri 3 V1.C1 = V2.C2
4 ml . 500 gml = 25 ml . C2 C2 = 80 gml
Seri 4 V1.C1 = V2.C2
5 ml . 500 gml = 25 ml . C2 C2 = 100 gml
Seri 5 V1.C1 = V2.C2
5 ml . 500 gml = 25 ml . C2 C2 = 120 gml
Konsentrasi seri replikasi 3
Konsentrasi stok
25,3 mg 50
= 506 μgml
Seri 1 V1.C1 = V2.C2
2 ml . 506 gml = 25 ml . C2 C2 = 40,48 gml
Seri 2 V1.C1 = V2.C2
3 ml . 506 gml = 25 ml . C2 C2 = 60,72 gml
Seri 3 V1.C1 = V2.C2
4 ml . 506 gml = 25 ml . C2 C2 = 80,λ6 gml
Seri 4 V1.C1 = V2.C2
5 ml . 506 gml = 25 ml . C2 C2 = 101,2 gml
Seri 5 V1.C1 = V2.C2
6 ml . 506 gml = 25 ml . C2 C2 = 121,44 gml
Kurva baku asam galat replikasi 1
Konsentrasi gml Absorbansi
Persamaan 40,16
0,288 y = 0,006x + 0,055
r = 0,9994 60,24
0,399 80,32
0,511 100,4
0,619 120,48
0,751
Kurva baku asam galat replikasi 2
Konsentrasi gml Absorbansi
Persamaan 40
0,268 y = 0,006x + 0,013
r = 0,9997 60
0,393 80
0,506 100
0,626 120
0,758
Kurva baku asam galat replikasi 3
Konsentrasi Absorbansi
Persamaan 40,48
0,257 y = 0,006x + 0,003
r = 0,9996 60,72
0,394 80,96
0,517 101,2
0,655 121,44
0,771 Persamaan yang digunakan adalah Y=0,006x + 0,013
Sampel replikasi 1
Bobot sampel =
10 mg Absorbansi sampel
= 0,542
y = 0,006x + 0,013 0,542= 0,006x + 0,013
x =
.542 − 0,013
,006
= 88,17 µgmL Kandungan fenolik total =
x .
v m
= 0,8817 mgmL.
,5 mL ,010 g
= 44,09 mg ekivalensi asam galat per g fraksi
Sampel replikasi 2
Bobot sampel = 10,3 mg
Absorbansi sampel = 0,571
y = 0,006x + 0,013 0,571
= 0.006x + 0.013 x =
,571 − 0,013
,006
= 93,00 µgmL Kandungan fenolik total =
x .
v m
= 0,93 mgmL.
,5 mL ,0103 g
= 45,14 mg ekivalensi asam galat per g fraksi
Sampel replikasi 3
Bobot sampel = 10,2 mg
Absorbansi sampel =
0,561 y = 0,006x + 0,013
0,561= 0,006x + 0,013 x =
,561 − 0,013
,006
= 91,33 µgmL
Kandungan fenolik total = x .
v m
= 0,93 mgmL.
,5 mL ,0102 g
= 45,58 mg ekivalensi asam galat per g fraksi
Lampiran 9. Data penimbangan untuk pengujian aktivitas antioksidan DPPH a.
Penimbangan DPPH
Replikasi 1 g
Repilkasi 2 g
Replikasi 3 g
Bobot kertas 0,2126
0,2130 0,2129
Bobot kertas + DPPH
0.2283 0.2286
0.2289 Bobot kertas + sisa
0.2126 0.2130
0.2129 Bobot DPPH
0.0157 0.0156
0.016
b. Data penimbangan Rutin
Replikasi 1 g
Repilkasi 2 g
Replikasi 3 g
Bobot kertas 0,2340
0,2323 0,2434
Bobot kertas + rutin 0.2366
0.2349 0.2461
Bobot kertas + sisa 0.2341
0.2324 0.2435
Bobot zat 0.0025
0.0025 0.0026
c. Data penimbangan fraksi air
Bobot R1
R2 R3
Cawan 13,3236 13,7463 13,0176
Cawan+fraksi 13,3487 13,7732 13,0439 Cawan +sisa
13,3235 13,7461 13,0176 Fraksi
0,0252 0,0262
0,0263
Lampiran 10. Data Konstrasi bahan untuk pengujian aktivitas antioksidan
a. Konsentrasi DPPH
Replikasi 1
BM = 394,33 Mol =
massa BM
=
15,7 mg 394 ,33
= 0,0398 mmol M =
mol volume
=
0,0398 mmol 0,1 L
= 0,398 mM
Replikasi 2
BM = 394,33 Mol =
massa BM
=
15,6 mg 394 ,33
= 0,0395 mmol M =
mol volume
=
0,0395 mmol 0,1 L
= 0,395 mM
Replikasi 3
BM = 394,33 Mol =
massa BM
=
16 mg 394 ,33
= 0,0405 mmol M =
mol volume
=
0,0405 mmol 0,1 L
= 0,405 mM
b. Konsentrasi Rutin
Kosentrasi larutan induk Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3
2,5 mg 10 mL
= 250 µgmL
2,5 mg 10 mL
= 250 µgmL
2,6 mg 10 mL
= 260 µgmL
Konsentrasi seri larutan pembanding Rutin Seri larutan pembanding
Konsentrasi larutan pembanding Replikasi 1
Replikasi 2 Replikasi 3
Seri 1 5 µgml
5 µgml 5,2 µgml
Seri 2 10 µgml
10 µgml 10,6 µgml
Seri 3 15 µgml
15 µgml 15,4 µgml
Seri 4 20 µgml
20 µgml 20,5 µgml
Seri 5 25 µgml
25 µgml 25,1 µgml
Contoh perhitungan konsentrasi larutan pembanding Replikasi 1 Larutan induk
= 250 µgmL Konsentrasi larutan pembanding seri 1 =
C
1
x V
1
= C
2
x V
2
250 µgmL x 0,5 mL = C
2
x 25 mL C
2
= 5 µgmL C
1
x V
1
= C
2
x V
2
250 µgmL x 1 mL = C
2
x 25 mL C
2
= 10 µgmL C
1
x V
1
= C
2
x V
2
250 µgmL x 1,5 mL = C
2
x 25 mL C
2
=15 µgmL C
1
x V
1
= C
2
x V
2
250 µgmL x 2 mL = C
2
x 25 mL
C
2
= 20 µgmL C
1
x V
1
= C
2
x V
2
250 µgmL x 2,5 mL = C
2
x 25 mL C
2
= 25 µgmL
C. Konsentrasi fraksi air biji trembesi a.