Waktu dan Tempat Metode Pengambilan Data

32 BAB III METODE PENELITIAN

3.1 Waktu dan Tempat

Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Januari sampai dengan bulan Maret 2011. Adapun tempat penelitian dilakukan di Laboratorium Kimia Instrument dan Fisika Pusat Laboratorium Terpadu UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

3.2 Metode Pengambilan Data

Metode pengambilan data spektra ini meliputi penggunaan spektroskopi FTIR dan spektroskopi Uv-Visible.

3.2.1 Spektroskopi FTIR

• Alat : 1. Spektrofotometer FTIR Spectrum One Perkin Elmer 3.1a 3.1b Gambar 3.1 Penampang Spektroskopi FTIR a tampak depan b tampak atas 2. spatula 33 3. lumping agate vibrating ball mill Gambar 3.2 Penampang lumping agate dan spatula 4. Handy press Gambar 3.3 Penampang handy press 34 5. Kbr disc holder 3.4a 3.4b Gambar 3.4 Disc Holder apenampang disc holder b Tempat pemasangan disc holder pada spektroskopi FTIR • Bahan: Gambar 3.5 Botol serbuk Kbr dan sample darah setelah mengalami proses freeze draying 1. Serbuk Kbr 2. Sample darah manusia dengan kadar glukosa 99 mldl dalam darah telah melalui proses freeze draying 35 3. Sample darah manusia dengan kadar glukosa 108 mldl dalam darah telah melalui proses freeze draying 4. Sample darah manusia dengan kadar glukosa 136 mldl dalam darah telah melalui proses freeze draying • Freeze draying sebagian sample darah 3.6 a 3.6 b 3.6 c 3.6 d Gambar 3.6 Freeze draying aTabung freeze b Tutup tabung freeze c Vacum tube d screen control 36 1 Simpan sample darah dalam freeze dengan suhu -43º c 2 Masukkan sample darah kedalam vacum tube untuk proses drying menghilangkan kadungan air dalam sample • Menentukan nilai absorbansi 1 Siapkan sample darah yang telah melalui proses freeze drying 2 Siapkan serbuk Kbr 3 Gerus dan campur 0,5-1 mgram tiap sample dengan serbuk kbr kering dengan menggunakan lumping agate vibrating ball mill hingga benar- benar tercampur homogeny. 4 Masukkan campuran tersebut kedalam pencetak khusus menggunkan spatula 5 Hubungkan pencetak dengan handy press 6 Lepaskan tongkang handy press lalu keluarkan cakram Kbr 7 Masukkan cakram kedalam Kbr disc holder, kemudian rekam spectrum absorbansi tiap sample darah

3.2.2 Spektroskopi UV-Visible

• Alat : 1. Spektrofotometer UV-Vis Lambda 25 Perkin Elmer 37 3.7a 3.7b Gambar 3.7 Spektoskopi UV-Vis a penampang spektoskopi UV-Vis b Tempat kuvet dalam spektroskopi Uv-Vis 2. Tabung reaksi 3. Pipet tetes volume 4. Rak tabung reaksi 5. Labu ukur 6. Kuvet quartz • Bahan: 3.8a 3.8b 38 3.8c 3.8d Gambar 3.8 Bahan uji spektoskopi UV-VisaSample darah dengan berbagai konsentrasi bMemasukkan sample darah ke dalam kuvet cSample darah dalam kuvet dMeletakkan kuvet berisi sample darah kedalam spektroskopi Uv-vis 1. Aquadest 2. Sample darah manusia dengan kadar glukosa 99 mldl dalam darah 3. Sample darah manusia dengan kadar glukosa 108 mldl dalam darah 4. Sample darah manusia dengan kadar glukosa 136 mldl dalam darah • Kalibrasi Alat Spektrofotometer UV-Vis 1 Nyalakan alat Spektrofotometer selama ± 15 menit untuk menstabilakan sumber cahaya dan fotodetektor. 2 Siapkan aquades, masukkan kedalam kuvet yang telah diberihkan sebelumnya dengan tissue. 3 Pilih menu aplikasi wavelength scan. Lakukan kalibrasi dengan menggunakan larutan Aquades minimal 2 kali menekan tombol autozerro. 39 setting nilai absorbansi = 0 setting nilai transmitansi = 100 larutan sample tidak mengabsorpsi cahaya yang diberikan • Menentukan panjang gelombang yang memiliki nili absorbansi maximum λ max . 19 1 Pertama-tama tentukan range panjang gelombang yang akan digunakan untuk sample yang tidak berwarna, gunakan range panjang gelombang sinar UV: 180-400nm 2 Masukan sample 1 glukosa 99 mldl dalam darah ke dalam kuvet yang kering dan bersih. 3 Lakukan scanning panjang gelombang maksimum untuk sample 1 hingga dihasilkan nilai λ max. 4 Buatlah grafik hubungan antara nilai absorbansi sebagai fungsi panjang gelombang 5 Tentukan panjang gelombang maksimum untuk sample yang lain glukosa 108 mldl dan 136 mldl dalam darah. Tiap sample telah melalui pengenceran 16 kali setiap 0.05 ml 19 Buku petunjuk spektroskopi Parkin Elmer lambda 25 40 Gambar 3.9 Tahapan penelitian Proses pengambilan sampel darah Uji kadar glukosa sampel darah sample darah dengan kadar glukosa 99 mgdl sample darah dengan kadar glukosa 108 mgdl sample darah dengan kadar glukosa 136 mgdl Uji sampel darah dengan alat Spektroskopi FTIR Spektroskopi UV-Visible 41 Gambar 3.10 Flowcart pengambilan data Spektroskopi UV-Vis Spektroskopi UV-Visible Sample darah siap uji ? Tidak Ya Lakukan pengenceran terhadap sampel darah Masukkan sample siap uji kedalam spektroskopi UV-Vis Proses Scaning Hasil rekam grafik spectra pada layar komputer Hasil spectra bagus ? Ya FINISH Tidak Start 42 Gambar 3.11 Flowcart pengambilan data Spektroskopi FTIR Spektroskopi FTIR Sample darah siap uji ? Tidak Ya Lakukan proses Freeze drying pada tiap sampel darah Masukkan sample darah siap uji darah+serbuk Kbr tercampur homogen kedalam pencetak cakram Proses Scaning Cakram sampel uji tercipta Masukkan cakram ke dalam Kbr Disc holder Ya FINISH Buat cakram Kbr dengan cara gerus sampel darah kering dengan serbuk Kbr Sampel darah+serbuk Kbr sudah tercampur homogen ? Tidak Hasil spectra FTIR pada layar komputer Start 43 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Spektroskopi FITR