dan Gula Darah Puasa GDP. Prosedur analisis dari setiap parameter adalah, sebagai berikut :
3.3.3.1 Trigliserida
Metode analisis trigliserida yang digunakan adalah kolorimetri GPO-PAP- enzimatis. Reagen Triglycerides–Liquizyme GPO-PAP Spectrum ditambahkan
pada plasma darah kemudian diinkubasi selama 5 menit pada suhu 37
o
C, lalu diinjeksikan pada alat Microlab 300 Vital Scientific dan dibaca pada panjang
gelombang 546 nm. Prinsip analisis adalah sebagai berikut: -
Trigliserida dihemolisis oleh Lipoprotein Lipase LPL menjadi gliserol. Trigliserid LPL Gliserol + AsamLemak
- Gliserol yang bereaksi dengan ATP mengalami fosforilasi menjadi gliserol-3-
fosfat pada reaksi katalisis oleh enzim gliserol kinase GK. Gliserol + ATP GK Gliserol-3-fosfat + ADP
- Oksidasi gliserol-3-fosfat dikatalisis oleh gliserol fosfat oksidase membentuk
dihidroksi aseton fosfat dan hidrogen peroksida H
2
O
2
. Gliserol-3-fosfat + O
2
GPO dihidroksi aseton fosfat + H
2
O
2
- Adanya peroksidase POD mengkatalisis reaksi oksidasi berpasangan
Hidrogen Peroksidase dari 4-klorofenol dan 4-aminoantifirin 4 APP untuk membentuk warna merah quinoneimine dye yang terukur pada panjang
gelombang 546 nm.
2 H
2
O
2
+ 4 APP + 4 klorofenol POD Quinoneimine dye + 4 H
2
O Penghitungan hasil trigliserida dilakukan secara otomatis oleh alat tersebut
dengan prinsip, sebagai berikut: Konsentrasi trigliserida mgdL =
A
spesimen
A
standar x 200
3.3.3.2 Kolesterol
Metode analisis kolesterol yang digunakan adalah kolorimetri CHOD- PAP-enzimatis.
Reagen Cholesterol–Liquizyme
CHOD-PAP Spectrum
ditambahkan pada plasma darah kemudian diinkubasi selama 5 menit pada suhu 37
o
C, lalu diinjeksi pada alat Microlab 300 Vital Scientific dan dibaca pada panjang gelombang 546 nm. Prinsip analisis adalah sebagai berikut:
- Ester kolesterol dihidrolisis secara enzimatis oleh kolesterol esterase KE
menjadi kolesterol dan asam lemak Ester kolesterol KE Kolesterol + Asam lemak
- Kolesterol bebas kemudian dioksidasi oleh kolesterol oksidase KO menjadi
cholestenone dan hidrogen peroksida
Kolesterol bebas + O
2
KO Cholestenone + H
2
O
2
- Hidrogen peroksida, fenol dan 4 amino antifirin APP direaksikan dengan
peroksida POD membentuk kromofor quinoneimine dye yang dapat terbaca pada panjang gelombang 500-550 nm.
2H
2
O
2
+ fenol + 4 AAP POD Quinoneimine dye + 4 H
2
O Penghitungan hasil kolesterol dilakukan secara otomatis oleh alat tersebut
dengan prinsip, sebagai berikut: Konsentrasi kolesterol mgdL =
A
spesimen
A
standar x 200
3.3.3.3 High Density Lipoprotein HDL