Appendix Uji Potensi Fungi Pelapuk Putih Asal Batang Kayu Pinus (Pinus merkusii Jungh et de vriese) sebagai Pendegradasi Lignin

LAMPIRAN
Lampiran 1. Komposisi Media Ligninase Cair
Komposisi Media Ligninase
KH2PO4

2g

MgS04.7H2O

0,5 g

K2HPO4

1g

Alkaline Lignin

2g

NH4NO3

2g

KCL

0,5 g

MgSO4.7H2O

0,5 g

FeSO4.7H2O

10 mg

MnCL2.2H2O

5 mg

CuSO4.5H2O

1 mg

Kemudian semua komposisi ini dilarutkan dalam akuades sebanyak 1 liter dan
disterilkan dengan autoclave.

Lampiran 2.Alur Kerja Isolasi Jamur Pendegradasi Lignin dari Kayu Pinus
Lapuk

Kayu Pinus Lapuk
dimasukkan ke dalam plastik bersih
dipotong menjadi ukuran yang lebih kecil
disebarkan di atas media PDA
diinkubasi pada suhu pada suhu ruang selama 3-5
hari
dibuat biakan murni dari koloni jamur
Hasil

Lampiran 3.Skrining Aktivitas Enzim Ligninolitik dengan Uji Bavendamm

Isolat Jamur

ditumbuhkan pada media PDA + asam tanin 0,1 %
pada suhuh ruang
diinkubasi pada suhu ruang
diamati endapan cokelat yang terbentuk
Biakan Jamur

Lampiran 4.Persiapan Sumber Enzim
Biakan Jamur Yang Mampu
Membentuk Endapan Cokelat
dibiakkan pada 30 ml media ligninase cair
diinkubasi selama 14 hari pada suhu ruang
disentrifugasi dengan kecepatan 10000 rpm pada
suhu 4°C selama 15 menit
Supernatan Enzim

Lampiran 5. Pengukuran Aktivitas Lignin Peroksidase (LiP)

0,2 ml Supernatan Enzim
ditambahkan 2,8 ml larutan penyangga tartrat (pH
2,5)

ditambahkan 1 ml veratril alkohol 2 mM
ditambahkan 1 ml H2O2 0.4 mM
dihomogenkan
diinkubasi selama 30 menit pada suhu ruang

Hasil
diukurjumlah veratraldehida yang terbentuk dengan
spektrofotometer pada panjang gelombang 310 nm
dihitungjumlah veratraldehida yang terbentuk
berdasarkan rumus Lambert-Beer
dihitungaktivitas unit enzim
Aktivitas Unit Enzim LiP

Lampiran 6. Perhitungan Nilai Absorbansi per Satuan Waktu
Isolat PBA
Hari
2
4
6
8

10
12
14

A0
0,078
0,062
0,060
0,021
0,011
0,008
0,009

Δabs

At
0,078
0,068
0,069
0,037

0,022
0,013
0,009

Konsentrasi Enzim
U/ml

0
0,006
0,009
0,016
0,011
0,005
0

0,000
0,577
0,866
1,541
1,059

0,481
0,000

Isolat PBB
Hari
2
4
6
8
10
12
14

A0
0,068
0,002
0,005
0,001
0,004
0,005

0,001

Δabs

At
0,068
0,003
0,007
0,009
0,008
0,006
0,001

Konsentrasi Enzim
U/ml

0
0,001
0,002
0,008

0,004
0,001
0

0,000
0,095
0,192
0,770
0,385
0,095
0,000

Isolat PBD
Hari
2
4
6
8
10
12

14

A0
0,055
1,063
0,006
0,042
0,008
0,004
0,002

At
0,055
1,064
0,012
0,056
0,016
0,008
0,002

Δabs
0
0,001
0,006
0,014
0,008
0,004
0

Konsentrasi Enzim
U/ml
0,000
0,095
0,577
1,344
0,770
0,385
0,000

Lampiran 7. Aktivitas Enzim Lignin Peroksidase (LiP)
Waktu (Hari)

Isolat
Trametes sp 1

Phanerochaete sp

Trametes sp 2

2

0,000

0,000

0,000

4

0,577

0,095

0,095

6

0,866

0,192

0,577

8

1,541

0,770

1,344

10

1,059

0,385

0,770

12

0,481

0,095

0,385

14

0,000

0,000

0,000

Lampiran 8. Gambar Dokumentasi Penelitian

Gambar 7. Isolat Jamur pada media Ligninase Cair .

Gambar 8. Jamur yang di kultur dalam cawan petri .

Gambar 9. Lokasi Pengambilan Sampel