LAPORAN PRAKTIKUM ANALITIK INSTRUMEN PRO

LAPORAN PRAKTIKUM ANALITIK INSTRUMEN

Spektrofotometri - UV

Disusun untuk memenuhi tugas mata kuliah Analitik Instrumen

Oleh

Daniel Wijaya

(141411035)

Driyarta Lumintu (141411037)

Eri Ismail (141411038)

Kelas 1B

PROGRAM DIPLOMA III TEKNIK KIMIA

JURUSAN TEKNIK KIMIA

POLITEKNIK NEGERI BANDUNG

2015

I.

TUJUAN

I.1 Menentukan kadar kafein menggunakan alat spektrofotometri uv I.2 Mengetahui penentuan panjang gelombang maksimum

I.3 Mengetahui absorbansi dari panjang gelombang yang diketahui I.4 Dapat menjalankan alat spektrofotometri uv

II.

DASAR TEORI

Spektrofotometri UV merupakan salah satu metode analisis yang dilakukan dengan panjang gelombang 100 - 400 nm menggunakan spektrofotometer. Prinsip dasar pada spektrofotometri UV adalah sampel harus jernih dan larut sempurna, tidak ada partikel koloid apalagi suspensi. Jika sampel keruh maka harus dibuat jernih dengan filtrasi atau sentrifugasi.

Mekanisme kerja dari spektrofotometer pada dasarnya adalah memencilkan cahaya monokromatik kemudian cahaya tersebut dilewatkan pada suatu sampel yang diukur kekuatan radiasinya dan mengukur absorbansi sampel karena adanya interaksi atom, molekul, dan ion pada sampel tersebut. Panjang gelombang yang diserap sampel dari sejumlah cahaya yang diberikan sebanding denngan konsentrasi sampel dan ketebalan larutan sampel, hubungan ini secara matematis menurut Hukum Lambert-Beer :

A = ebc

Ket : A = absorban

e = absorptivitas molar (Lcm-1_mol-1₎

b = ketebalan kuvet (cm) c = konsentrasi (molL-1₎

Panjang gelombang maksimal digunakan dalam analisis kuantitatif, karena :

1. Pada panjang gelombang maksimal, kepekaannnya juga maksimal karena pada panjang gelombang maksimal tersebut, perubahan absorbansi untuk setiap satuan konsentrasi adalah yang paling besar. 2. Di sekitar panjang gelombang maksimal, bentuk kurva absorbansi

datar dan pada kondisi tersebut hukum Lambert-Beer akan terpenuhi 3. Jika dilakukakan pengukuran ulang maka kesalahan yang disebabkan

oleh pemasangan ulang panjang gelombang akan kecil sekali, ketika digunakan panjang gelombang maksimal. (Rohman, Abdul, dalam Reza. No date)

Buat 100 mL larutan induk kafein (100ppm) dalam larutan HCl 0,1 NBuat Larutan Standar (2ppm;4ppm;8ppm;10ppm;12ppm)Tentukan λmaks, ukur absorban dari berbagai λUkur serapan dari berbagai konsentrasi larutan pada λ yang ditentukan

Kafein

Kafeina atau lebih populernya kafein, ialah senyawa alkaloid xantina (C8H10N4O2) berbentuk kristal dan berasa pahit yang bekerja sebagai

obat perangsang psikoaktif dan diuretik ringan. Kristal kafein dalam air merupakan jarum-jarum bercahaya. Kafein mudah larut dalam air panas dan kloroform. Di dalam kafein terdapat kromofor yang dapat menyerap atau mengabsorpsi radiasi elektromagnetik di daerah panjang gelombang ultraviolet dan daerah cahaya tampak.

III. ALAT DAN BAHAN

N

o Alat Bahan

1. Labu ukur 100 mL HCl 0,1 N

2. Labu ukur 25 mL Kafein 1000 ppm 3. Gelas kimia 50 mL Aquades

4. Gelas kimia 500 mL 5. Botol semprot 6. Pipet tetes

7. Pipet ukur 10 mL 8. Piprt ukur 5 mL 9. Bola hisap

1

0. Spatula 1

1. Corong 1

2. Batang pengaduk

IV.

CARA KERJA

Pembuatan Larutan Standard dan Penentuan Panjang Gelombang Maksimum

Keluarkan silica gel dari sample compartement Nyalakan alat

Buka monitor, bila tampabiru, putar tombol sebelah kananTunggu sampai proses inisialisasi selesai, kemudian muncul tampilan mode menu

Pilih menu spektrum

Tekan angka 2, atur parameter; setting meas mode; scanning range; rec range; speed no of scan; display mode

Masukkan kuvet berisi larutan blankoTekan tombol ‘Base Corr’ F1, tunggu sampai : 0,000 A

Ganti kuvet blanko dengan larutan standar Tekan tombol start, akan muncul spectrum antara Abs dan wave length

Mucul tampilan kurva A vs λ Tekan ‘data procc’ F2; peak(3) untuk λmaks dan absorbansi

Pilih menu photometricTekan 1, go to WL, isi λMasukkan dua kuvet berisi larutan blankoTekan tombol ‘auto zero’ sampai A : 0,000A

Ganti kuvet dengan larutan sampel Tekan tombol start

Ganti larutan sampel pada kuvet dengan larutan sampel lain Mucul table photometric

Pilih menu quantitativeAtur parameter meas, 1λ; isi λMethod; multi point; isi jumlah larutan standar Orde 1 enter; zero intept no enter

No of meas 1; unit ppm; data print no Masukkan kuvet larutan blanko pada kedua sisi

Tekan tombol auto zero, tunggu sampai 0,000A Tekan start, masukkan nilai konsentrasi larutan standar

Muncul tampilan : No| Con | ABSTekan meas, ganti larutan blanko dengan larutan standar ke 1Tekan start; akan keluar nilai ABSGanti kuvet dengan larutan standar berikutnya sampai pengukuran selesai

Tekan ‘cal. Curve’ F1 untuk melihat tampilan kurva IV.1 Menyalakan Alat

IV.2 Pengukuran Spektrum (untuk penentuan λmaks)

IV.3 Pengukuran Photometric Untuk Mengukur A atau %T, jika λmaks

Sudah Diketahui

Tekan ‘return’; kembali ke menu utama quantitativeGanti kurva larutan standar dengan larutan sampelTekan start; muncul tampilan konsentrasi sampel

Kosongkan compartement cellMasukkan kembali silica gelPutar tombol sebelah kanan hingga layar monitor tampak biru IV.5 Pengukuran Konsentrasi Sampel (setelah tahap pembuatan

kurva kalibrasi)

IV.6 Mematikan alat

V.

DATA PENGAMATAN

V.1 Pengukuran Spektrum

V.3 Pengukuran Quantitative

VI. PERHITUNGAN

Perhitungan pembuatan larutan induk kafein 100 ppm :

V1.N1 = V2.N2

V1.1000 ppm = 100 mL. 100 ppm V1 =

10000

1000

=

10

mL

Perhitungan pembuatan larutan standar kafein:

Larutan kefein 2 ppm V1. N1 = V2.N2

V1. 100 ppm = 25 mL.2 ppm V1 =

50

100

=

0,5

mL

Larutan kafein 4 ppm V1. N1 = V2.N2

V1. 100 ppm = 25 mL.4 ppm V1 =

100

100

=

1

mL

Larutan kafein 8 ppm V1. N1 = V2.N2

V1. 100 ppm = 25 mL.8 ppm V1 =

200

100

=

2

mL

Larutan kafein 10 ppm V1. N1 = V2.N2

V1 =

250

100

=

2,5

mL

Larutan kafein 12 ppm V1. N1 = V2.N2

V1. 100 ppm = 25 mL.12 ppm V1 =

300

100

=

3

mL

Pengukuran Konsentrasi SampelBredasarkan Perhitungan :

Y = 0,042X - 0,0078 (y = absorbansi; x = konsentrasi) R2 _{= (0,92)}2 _{= 0,855}

Sampel 1

0,186 = 0,042X - 0,0078 0,042 X = 0,186 + 0,0078 X = 4,6142 ppm

Sampel 2

0,188 = 0,042X - 0,0078 0,042X = 0,188 + 0,0078 X = 4,6619 ppm

Sampel 3

0,212 = 0,042X - 0,0078 0,042X =0,212 + 0,0078 X = 5,23 ppm

Sampel 4

0,247 = 0,042X - 0,0078 0,042X = 0,247 + 0,0078 X = 6,06

Konsentrasi sampel

Sampel Berdasarkan alat Berdasarkan perhitungan

1 4,7989 ppm 4,6142 ppm

2 4,8518 ppm 4,6619 ppm

3 5,4405 ppm 5,23 ppm

4 6,2705 ppm 6,06 ppm

VII. PEMBAHASAN

VIII. KESIMPULAN

1. Panjang gelombang maksimum berdasarkan praktikum 272,6 nm 2. Absorban yang didapat dari praktikum

Konsentrasi (ppm) ABS

4 0,188

8 0,165

10 0,437

12 0,541

Sampel 1 0,186

Sampel 2 0,188

Sampel 3 0,212

Sampel 4 0,247

3. Konsentrasi sampel yang di dapat dari praktikum Sampel Konsentrasi

1 4,6142 ppm

2 4,6619 ppm

3 5,23 ppm

4 6,06 ppm

4. Semakin besar nilai absorbansi maka semakin besar pula konsentrasi sampel yang

didapat.

5. Semakin pekat larutan maka semakin besar konsentrasi zat pada larutan tersbut.

IX. DAFTAR PUSTAKA

Anonim. 2015. “Kafeina”. http://id.wikipedia.org/wiki/Kafeina. [22 April 2015].

Seran, Emel. 2011. “Spektrofotometri UV”. https://wanibesak.wordpress.com/2011/07/07/spektrofotometri-uv-ultraviolet/. [22 April 2015].

Reza, Muhammad. No date. “Paper Spektro”. http://www.academia.edu/6807678/Paper_Spektro. [22 April 2015]. Yuvitasari, Yova. No date. “Penentuan Kadar Kafein Spektrofotometri

Shimadzu”. https://yovayuvitasari.wordpress.com/laporan-praktikum/penentuan-kadar-kafein-spektrofotometer-shimadzu/. [22 April 2015]

Keluarkan silica gel dari sample compartement Nyalakan alat

Buka monitor, bila tampabiru, putar tombol sebelah kananTunggu sampai proses inisialisasi selesai, kemudian muncul tampilan mode menu

Pilih menu spektrum

Tekan angka 2, atur parameter; setting meas mode; scanning range; rec range; speed no of scan; display mode

Masukkan kuvet berisi larutan blankoTekan tombol ‘Base Corr’ F1, tunggu sampai : 0,000 A

Ganti kuvet blanko dengan larutan standar Tekan tombol start, akan muncul spectrum antara Abs dan wave length

Mucul tampilan kurva A vs λ Tekan ‘data procc’ F2; peak(3) untuk λmaks dan absorbansi

Pilih menu photometricTekan 1, go to WL, isi λMasukkan dua kuvet berisi larutan blankoTekan tombol ‘auto zero’ sampai A : 0,000A

Ganti kuvet dengan larutan sampel Tekan tombol start

Ganti larutan sampel pada kuvet dengan larutan sampel lain Mucul table photometric

Pilih menu quantitativeAtur parameter meas, 1λ; isi λMethod; multi point; isi jumlah larutan standar Orde 1 enter; zero intept no enter

No of meas 1; unit ppm; data print no Masukkan kuvet larutan blanko pada kedua sisi

Tekan tombol auto zero, tunggu sampai 0,000A Tekan start, masukkan nilai konsentrasi larutan standar

Muncul tampilan : No| Con | ABSTekan meas, ganti larutan blanko dengan larutan standar ke 1Tekan start; akan keluar nilai ABSGanti kuvet dengan larutan standar berikutnya sampai pengukuran selesai

Tekan ‘cal. Curve’ F1 untuk melihat tampilan kurva IV.1 Menyalakan Alat

IV.2 Pengukuran Spektrum (untuk penentuan λmaks)

IV.3 Pengukuran Photometric Untuk Mengukur A atau %T, jika λmaks Sudah Diketahui

Tekan ‘return’; kembali ke menu utama quantitativeGanti kurva larutan standar dengan larutan sampelTekan start; muncul tampilan konsentrasi sampel

Kosongkan compartement cellMasukkan kembali silica gelPutar tombol sebelah kanan hingga layar monitor tampak biru IV.5 Pengukuran Konsentrasi Sampel (setelah tahap pembuatan

kurva kalibrasi)

IV.6 Mematikan alat

V.

DATA PENGAMATAN

V.1 Pengukuran Spektrum

V.3 Pengukuran Quantitative

VI. PERHITUNGAN

Perhitungan pembuatan larutan induk kafein 100 ppm :

V1.N1 = V2.N2

V1.1000 ppm = 100 mL. 100 ppm V1 =

10000

1000

=

10

mL

Perhitungan pembuatan larutan standar kafein:

Larutan kefein 2 ppm V1. N1 = V2.N2

V1. 100 ppm = 25 mL.2 ppm V1 =

50

100

=

0,5

mL

Larutan kafein 4 ppm V1. N1 = V2.N2

V1. 100 ppm = 25 mL.4 ppm V1 =

100

100

=

1

mL

Larutan kafein 8 ppm V1. N1 = V2.N2

V1. 100 ppm = 25 mL.8 ppm V1 =

200

100

=

2

mL

Larutan kafein 10 ppm V1. N1 = V2.N2

V1 =

250

100

=

2,5

mL

Larutan kafein 12 ppm V1. N1 = V2.N2

V1. 100 ppm = 25 mL.12 ppm V1 =

300

100

=

3

mL

Pengukuran Konsentrasi SampelBredasarkan Perhitungan :

Y = 0,042X - 0,0078 (y = absorbansi; x = konsentrasi) R2 _{= (0,92)}2 _{= 0,855}

Sampel 1

0,186 = 0,042X - 0,0078 0,042 X = 0,186 + 0,0078 X = 4,6142 ppm

Sampel 2

0,188 = 0,042X - 0,0078 0,042X = 0,188 + 0,0078 X = 4,6619 ppm

Sampel 3

0,212 = 0,042X - 0,0078 0,042X =0,212 + 0,0078 X = 5,23 ppm

Sampel 4

0,247 = 0,042X - 0,0078 0,042X = 0,247 + 0,0078 X = 6,06

Konsentrasi sampel

Sampel Berdasarkan alat Berdasarkan

perhitungan

1 4,7989 ppm 4,6142 ppm

2 4,8518 ppm 4,6619 ppm

3 5,4405 ppm 5,23 ppm

4 6,2705 ppm 6,06 ppm

VII. PEMBAHASAN

VIII. KESIMPULAN

1. Panjang gelombang maksimum berdasarkan praktikum 272,6 nm 2. Absorban yang didapat dari praktikum

Konsentrasi (ppm) ABS

4 0,188

8 0,165

10 0,437

12 0,541

Sampel 1 0,186

Sampel 2 0,188

Sampel 3 0,212

Sampel 4 0,247

3. Konsentrasi sampel yang di dapat dari praktikum

Sampel Konsentrasi

1 4,6142 ppm

2 4,6619 ppm

3 5,23 ppm

4 6,06 ppm

4. Semakin besar nilai absorbansi maka semakin besar pula konsentrasi sampel yang

didapat.

5. Semakin pekat larutan maka semakin besar konsentrasi zat pada larutan tersbut.

IX. DAFTAR PUSTAKA

Anonim. 2015. “Kafeina”. http://id.wikipedia.org/wiki/Kafeina. [22 April 2015].

Seran, Emel. 2011. “Spektrofotometri UV”.

https://wanibesak.wordpress.com/2011/07/07/spektrofotometri-uv-ultraviolet/. [22 April 2015].

Reza, Muhammad. No date. “Paper Spektro”.

http://www.academia.edu/6807678/Paper_Spektro. [22 April 2015]. Yuvitasari, Yova. No date. “Penentuan Kadar Kafein Spektrofotometri

Shimadzu”. https://yovayuvitasari.wordpress.com/laporan-praktikum/penentuan-kadar-kafein-spektrofotometer-shimadzu/. [22 April 2015]