∑ij = Efek eror karena pengaruh perlakuan pada taraf ke-i dan peda ulangan
ke-j Apabila hasil analisa sidik ragam menunjukkan nilai berbeda nyata
dilanjutkan dengan Uji Jarak Duncan.
Persiapan Penelitian
a. Pembuatan Media Potato Dextrose Agar PDA
Media PDA digunakan untuk mengembangbiakkan jamur entomopatogen. Media ini dibuat dengan cara: kentang dikupas dan dicuci bersih lalu ditimbang
250 gr, dipotong dadu berukuran 1 – 2 cm, kemudian kentang dimasak dengan aquades 500 ml selama 30 menit, lalu disaring ekstraknya dengan kain muslin
sampai volume 500 ml. Kemudian dextrose dimasukkan sebanyak 20 gr dan agar sebanyak 20 gr ke dalam beaker glass, ditambahkan aquades kedalamnya
sebanyak 500 ml, aduk sampai merata. Masukkan ekstrak kentang yang telah disaring tadi 500 ml kedalam laruran dextrose + agar, aduk hingga homogen dan
dididihkan selama 30 menit. Setelah itu masukkan ke dalam Erlenmeyer masing – masing 200 ml. Selanjutnya Erlenmeyer ditutup dengan kapas steril dan
aluminium foil lalu balut dengan cling wrap atau isolasi. Selanjutnya masukkan ke dalam autoclave untuk disterilkan selama 30 menit dengan suhu 121
C pada tekanan 1,5 atm.
b. Pembuatan Media Jagung
Media jagung digunakan untuk perbanyakan jamur entomopatogen setelah terlebih dahulu dibiakkan pada media PDA. Media jagung digunakan untuk
Universitas Sumatera Utara
mempermudah aplikasi jamur entomopatogen yaitu dengan menaburkan media jagung yang telah ditumbuhi jamur entomopatogen, dimana dosis media jagung
yang digunakan sesuai dengan perlakuan masing-masing. Media jagung ini dibuat dengan cara: merendam jagung selama satu jam, kemudian membuang
jagung yang mengapung. Setelah itu jagung ditimbang dan dimasukkan ke dalam plastik. Jagung yang telah terbungkus sesuai dosis perlakuan tersebut kemudian
dimasukkan ke dalam autoclave untuk disterilkan selama 30 menit dengan suhu 121
C pada tekanan 1,5 atm.
c. Penyediaan Jamur Entomopatogen
Jamur yang digunakan dalam penelitian ini adalah M. anisopliae yang diisolasi dari larva O. rhinoceros yang terserang M. anisopliae. M. anisopliae
terlebih dahulu dibiakkan dalam media PDA sebagai biakan murni. Setelah tumbuh kemudian M. anisopliae dibiakkan kembali pada media jagung dengan
cara memasukkan sedikit jamur entomopatogen yang telah murni ke dalam jagung yang telah disterilkan.
Sebelum aplikasi terlebih dahulu dihitung kerapatan konidia per gram media jagung dengan menggunakan alat haemocytometer. Penghitungan konidia
dilakukan dengan cara: mengambil sedikit jamur yang telah tumbuh pada media jagung ± 1 gram jamur + 9 ml air steril, kemudian dishaker selama setengah
jam. Setelah itu cairan tersebut dimasukkan kedalam ruang-ruang haemocytometer dan kemudian ditutup dengan kaca penutup. Setelah itu konidia
telah dapat dihitung di bawah mikroskop dengan menggunakan rumus C=
6
10 25
. x
n txd
, dimana C = Kerapatan konidia, t = jumlah konidia pada seluruh
Universitas Sumatera Utara
kotak haemocytometer yang dihitung, d = faktor pengencer, n = jumlah kotak bujur sangkar yang diamati, 0.25 = konstanta. Setelah kerapatan konidia mencapai
10
7
per gram media jagung, maka jamur entomopatogen telah dapat diaplikasikan untuk mengendalikan larva O. rhinoceros. Konsentrasi konidia dalam biakan M.
anisopliae yang baik adalah mengandung 500 juta 5 x 10
8
konidia atau lebih dalam setiap gram jagung Mahmud, 1989.
Sedangkan jamur C.militaris yang digunakan diperoleh dari PPKS Lonsum. Dimana jamur tersebut telah tersedia dalam bentuk biakan murni, yang
kemudian akan dibiakkan lagi guna perbanyakan. Setelah itu diperlakuan sama dengan jamur M.anisopliae, seperti dibiakkan lagi pada media jagung dan
dihitung kerapatan konidianya sebelum aplikasi.
d. Persiapan Media Perlakuan
