6
II. METODE PENELITIAN A.
Desain Penelitian
Penelitian ini termasuk dalam jenis penelitian eksperimental laboratorik dengan menggunakan metode modifikasi
kirby bauer
dengan analisa
post test control group design only
karena penulis memberikan perlakuan terhadap subjek dan menggunakan kontrol positif maupun
negatif kemudian mengevaluasi hasil akhir Notoatmodjo, 2010
.
B. Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian akan dilaksanakan pada bulan April 2012 di Laboratorium Biomedik II Sub Lab Mikrobiologi Fakultas Kedokteran
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
C. Subjek Penelitian
Subjek dalam penelitian ini adalah minyak atsiri dari bawang merah
Allium ascalonicum. L
dengan konsentrasi 5 vv, 10 vv, 20
vv, 40 vv, dan 80 vv. D.
Estimasi Besar Sampel
Rumus Federer Keterangan:
n = besar sampel t = banyaknya perlakuan
Andries, 2009 Dengan menggunakan perhitungan rumus Federer maka estimasi
besar sampel yang akan dicobakan adalah: 7 - 1 n -
1 ≥ 15 6 n -
1 ≥ 15 6n - 6
≥ 15 6n
≥ 21 n
≥ 3,5 Melalui perhitungan tersebut maka besar sampel minimal yang
diperlukan pada penelitian ini adalah 3,5 kali atau dibulatkan menjadi 4 kali replikasi.
E. Variabel Penelitian
1. Variabel bebas
Konsentrasi konsentrasi minyak atsiri dari bawang merah
Allium ascalonicum. L
dengan skala variabel rasio. 2.
Variabel terikat Zona hambat pertumbuhan
Candida albicans
dengan skala variabel rasio.
t - 1 n - 1 ≥ 15
7 3.
Variabel luar a.
Variabel luar terkendali 1
Suhu inkubasi 2
Lama inkubasi 3
Cara isolasi kuman 4
Media pembiakan 5
Umur biakan
Candida albicans
6 Jumlah koloni
Candida albicans
7 Pengekstraksian
8 Volume pengenceran ekstrak
9 Sterilitas alat dan bahan
10 Ketelitian pengukuran dan pengamatan
b. Variabel luar tidak terkendali
1 Kecepatan pertumbuhan
Candida albicans
2 Umur tanaman
3 Penjemuran
F. Definisi Operasional
1. Minyak atsiri dari bawang merah
Allium ascalonicum. L
Diambil dari umbi bawang merah yang diperoleh melalui metode destilasi
water destilation
. 2.
Zona hambat pertumbuhan
Candida albicans
Adalah daya antifungi minyak atsiri dari bawang merah
Allium ascalonicum. L
terhadap
Candida albicans
yang dilihat dari zona bening pada masing-masing media Sabouraud Dekstrosa Agar.
G. Alat dan Bahan Penelitian
1. Alat
a. Alat Destilasi
1 Destilator 1 Set
2 Pemanas Kompor
3 Beker Glass
4 Corong
5 Aquadest
b. Alat uji daya antifungi
1 Ohse kolong
2 Tabung reaksi
3 Cawan petri
4 Alat pembuat sumuran
5 Autoklaf
6 Inkubator
2. Bahan
a. Bahan utama berupa umbi bawang merah
Allium ascalonicum. L
b. Bahan uji daya antifungi
1 media Sabouraud Dekstrosa Agar
2 larutan nistatin
8 3
standar 0.5 Mc Farland 4
NaCl 0,9 c.
Biakan jamur berupa
Candida albicans
ATCC 10231 d.
Bahan mikromulsi berupa
Tween
18
H. Cara Kerja