III. HASIL DAN PEMBAHASAN
3.1 Hasil
3.1.1 Disosiasi Sel Testikular Ikan Gurame
Berdasarkan kriteria ukuran sel spermatogonia ikan gurame 5- 15 µm
menurut Mauluddin 2009, jumlah dan persentase sel spermatogonia hasil disosiasi sel testikular Gambar 7 ikan gurame pada penelitian ini
memperlihatkan hasil yang berbeda antar individu Tabel 1. Jumlah spermatogonia pada donor 1 sebanyak 6.300.000 sel 4,45 sedangkan pada
donor 2 sebanyak 4.000.000 sel 14,98. Hal ini juga berpengaruh terhadap persentase spermatogonia pada setiap donor yaitu donor pertama dengan bobot
tubuh yang lebih tinggi memiliki persentase spermatogonia yang lebih rendah 4,54 dibandingkan dengan donor kedua 14,98.
Gambar 7. Sel testikular ikan donor hasil disosiasi menggunakan PBS yang mengandung tripsin 0,5. Spermatogonia
ditunjukkan oleh anak panah.
Tabel 1. Hasil disosiasi sel gonad ikan donor
Donor Bobot tubuh
g Bobot gonad
g ∑ sel testikular
sel Jumlah
spermatogonia sel
Persentase spermatogonia
1 827
0,1513 138.625.000
6.300.000 4,54
2 608
0,1169 26.704.000
4.000.000 14,98
3.1.2 Analisis PCR pada DNA Resipien 1 Hari Setelah Penyuntikan
Konfirmasi keberhasilan proses penyuntikan sel donor ke rongga peritoneal atau rongga perut larva ikan nila resipien dilakukan menggunakan teknik PCR.
11 Dengan menggunakan teknik ini dapat diketahui masuk atau tidaknya sel donor
yang telah disuntikkan pada resipien, yaitu dengan melihat visualisasi UV dari elektroforesis DNA sampel yang telah di PCR menggunakan primer spesifik yang
hanya mendeteksi adanya DNA gurame donor dalam sampel resipien Gambar 8.
Gambar 8. A Analisis PCR DNA larva 1 hari setelah penyuntikan sel donor menggunakan
marka molekular
spesifik GH-Gurame
konfirmasi keberhasilan penyuntikan. M, marker; 1-5, DNA sampel larva; G, DNA ikan gurame sebagai kontrol positif; N,
DNA ikan nila sebagai kontrol negatif; - Kontrol bahan pada proses PCR. B PCR menggunakan primer Ti β-actin sebagai
kontrol internal
Semua sampel yaitu 1-5 yang diperiksa dengan PCR menggunakan marka molekular spesifik GH-gurame memperlihatkan pita DNA di atas garis merah
yang sejajar dengan pita kontrol positif DNA ikan gurame G dengan target sekuen 340 bp. Hal ini menunjukkan bahwa proses penyuntikan sel donor ke ikan
resipien berhasil dilakukan.
3.1.3 Tingkat Kelangsungan Hidup Resipien
Kategori