7
B. Metode Penelitian
1. Rancangan percobaan
Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode eksperimental menggunakan Rancangan Acak Lengkap RAL pola faktorial. Faktor pertama
yaitu lama inkubasi soyghurt yang diberi penambahan Bifidobacterium sp. pada suhu 37
o
C dan faktor kedua adalah perbandingan konsentrasi Bifidobacterium sp. pada soyghurt. Setiap perlakuan diulang sebanyak 3 kali.
a. Lama inkubasi soyghurt pada suhu 37
o
C: T
= 0 jam T
1
= 4 jam T
2
= 8 jam T
3
= 12 jam T
4
= 16 jam T
5
= 20 jam T
6
= 24 jam b.
Konsentrasi Bifidobacterium sp. pada soyghurt : K
= S. thermophillus : L. bulgaricus : Bifidobacterium sp. 1:1:0 K
1
= S. thermophillus : L. bulgaricus : Bifidobacterium sp. 1:1:1 K
2
= S. thermophillus : L. bulgaricus : Bifidobacterium sp. 1:1:2 sehingga diperoleh 21 kombinasi sebagai berikut:
Tabel 3.1. Dua puluh satu Kombinasi Rancangan Percobaan
Konsentrasi Bifidobacterium sp.
pada soyghurt Lama inkubasi soyghurt pada suhu 37
o
C T
T
1
T
2
T
3
T
4
T
5
T
6
0 jam 4 jam
8 jam 12
jam 16
jam 18
jam 24
jam K0
T0K0 T1K0
T2K0 T3K0
T4K0 T5K0
T6K0 K1
T0K1 T1K1
T2K1 T3K1
T4K1 T5K1
T6K1 K2
T0K2 T1K2
T2K2 T3K2
T4K2 T5K2
T6K2
2. Variabel dan parameter penelitian
Variabel bebas yang digunakan adalah lama inkubasi soyghurt dengan penambahan Bifidobacterium sp. dan konsentrasi Bifidobacterium sp. pada
soyghurt, ada pun variabel tergantung adalah aktivitas antimikroba soyghurt dengan penambahan Bifidobacterium sp. terhadap B. cereus. Parameter utama
yang diamati adalah: daya hambat soyghurt dengan tambahan Bifidobacterium sp. terhadap B. cereus Uji difusi dengan parameter pendukung yaitu kadar asam
laktat dan uji organoleptik.
bio.unsoed.ac.id
8
3. Bagan Alir Penelitian
Pembuatan Media
Pembuatan suspensi biakan S. thermophillus, L. bulgaricus, dan Bifidobacterium sp.
Peremajaan S. thermophillus, L. bulgaricus, dan Bifidobacterium sp. Kusnawati, 2004 dalam Akmar, 2006.
Peremajaan B. cereus
Produksi kultur starter
Pembuatan starter S. thermophillus Koroleva, 1991.
Pembuatan starter L. bulgaricus dan Bifidobacterium sp. Koroleva, 1991.
Produksi Soyghurt
Soyghurt standar S. thermophillus : L. bulgaricus 1:1 modifikasi Bagiastra, 1984
Soyghurt dengan penambahan Bifidobacterium sp. dengan berbagai konsentrasi
Penambahan 3 mL total starter S. thermophillus : L. bulgaricus :
Bidifobacterium sp. 1:1:2 K
2
Penambahan 3 mL total starter S. thermophillus : L. bulgaricus :
Bifidobacterium sp. 1:1:1 K
1
Daya hambat soyghurt Bifidobacterium sp terhadap
B. cereus Uji Difusi Pengukuran kadar
asam laktat AOAC, 1995.
Uji Organoleptik Soekarto, 1985.
Lama inkubasi suhu 37
o
C
16 jam 12 jam
8 jam 4 jam
0 jam
20 jam 24 jam
Pengamatan Parameter yang diamati
Rasa asam pada lama inkubasi 24 jam
Aroma agak tajam pada lama inkubasi 24 jam
Disukai pada lama inkubasi 0 jam
Warna putih kekuningan pada lama
inkubasi 20 jam Kadar asam laktat tertinggi
pada lama inkubasi 24 jam dengan konsentrasi
L. bulgaricus : S. thermophillus : Bifidobacterium sp. 1:1:2
yaitu 0,786 Zona jernih yang terbentuk
paling luas yaitu pada lama inkubasi 24 jam dengan
perbandingan L. bulgaricus : S. thermophillus :
Bifidobacterium sp. 1:1:1 sebesar 9,17 mm.
Data dianalisis menggunakan analisis ragam Uji F dan dilanjutkan uji Beda Nyata Jujur BNJ.
bio.unsoed.ac.id
9
4. Cara kerja
Kategori