- Oksaloasetat, NADH direduksi dengan malat dehidrogenase MDH menjadi
L-malat. Pada reaksi ini NADH dioksidasi menjadi NAD. Oksaloasetat + NADH + H
+
MDH L-malat + NAD
+
- Penambahan laktat dehidrogenase LDH pada reagen ditujukan untuk
mempercepat reaksi reduksi dari pirufat, agar tidak mempengaruhi analisis. Sampel pirufat+ NADH + H
+
LDH L-laktat + NAD
+
Penentuan hasil analisis dilakukan otomatis oleh alat tersebut. Hasil Pembacaan absorbansi dilakukan setelah 90 detik initial absorbance dan dibaca
lagi setelah 30, 60, dan 90 detik setelah initial absorbance. Hasil analisis akhir adalah rata-rata perubahan absorbansi tersebut per menit, yang dihitung dengan
rumus, sebagai berikut:
SGOT UL = 1746 x delta
A
340 nmmenit
3.3.3.6 SGPT
Metode analisis SGPT yang digunakan adalah metode kinetik berdasarkan International Federation of Clinical Chemistry
IFCC. Reagen yang digunakan adalah ALTGPT Spectrum ditambahkan pada plasma darah, lalu diinjeksi pada
alat RD-60 Semi Auto Biochemistry Analyzer Reiged Diagnostic dan dibaca pada panjang gelombang 340 nm. Prinsip analisis adalah sebagai berikut:
- Grup amino secara enzimatis ditransfer oleh ALT dalam sampel dari L-alanin
menjadi 2-oksoglutarat menghasilkan pirufat dan L-glutamat L-aspartat + 2-oksaloglutarat ALT pirufat dan + L-glutamat
- Pirufat direduksi dengan Laktat dehidrogenase LDH menjadi NAD. Pada
reaksi ini NADH dioksidasi menjadi NAD. Pirufat + NADH + H
+
MDH L-malat + NAD
+
- Penambahan laktat dehidrogenase LDH pada reagen ditujukan untuk
mempercepat reaksi reduksi dari pirufat, agar tidak mempengaruhi analisis. Sampel pirufat+ NADH + H
+
LDH L-laktat + NAD
+
Penentuan hasil analisis dilakukan otomatis oleh alat tersebut. Hasil Pembacaan absorbansi dilakukan setelah 90 detik initial absorbance dan dibaca
lagi setelah 30, 60, dan 90 detik setelah initial absorbance. Hasil analisis akhir adalah rata-rata perubahan absorbansi tersebut per menit, yang dihitung dengan
rumus, sebagai berikut:
SGPT UL = 1746 x delta
A
340 nmmenit
3.3.3.7 Glukosa Darah Puasa
Metode analisis Gula Darah Puasa GDP yang digunakan adalah kolorimetri GOD-PAP-enzimatis. Reagen
Glucose–Liquizyme GOD-PAP
Spectrum ditambahkan pada plasma darah kemudian diinkubasi selama 20 menit pada suhu 15-25
o
C, lalu diinjeksi pada alat Microlab 300 Vital Scientific dan dibaca pada panjang gelombang 546 nm. Prinsip analisis adalah kadar glukosa
ditentukan setelah oksidasi enzimatis oleh enzim glukosa oksidase GOD. Hidrogen peroksida H
2
O
2
yang terbentuk kemudian dikatalisis oleh peroksidase
PAP dengan fenol dan 4-aminoantifirin AAP untuk membentuk warna merah ungu quinoneimine, dengan reaksi sebagai berikut:
Glukosa + 2H
2
O +O
2
GOD Asam glukonat + H
2
O
2
2H
2
O
2
+ fenol + 4 AAP PAP Quinoneimine dye + 4 H
2
O Penghitungan hasil glukosa darah puasa dilakukan secara otomatis oleh
alat tersebut dengan prinsip, sebagai berikut: Konsentrasi glukosamgdL =
A
spesimen
A
standar x 100
3.3.4 Uji Performa Saat Berolahraga dan Pengukuran SpO
