Mempelajari Pemurnian Kitin Diasetilase dari Bacillus sp. 13.26 Asal Tompaso,Manado
�
t,
·Tf6
ZOO�
SKRIPSI
O�I
MEMPELAJAR! PEMURNIAN KITIN DEASETILASE
DAR! Bacllus s. 13.26 ASAL TOMPASO, MANADO
Oleb:
DWI RIANTI
F02498071
2003
JURUSAN TEKNOLOGI PANGAN DAN GIZI
FAKULTAS TEKNOLOGIPERTANIAN
NS TITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
[)wi
Rianti.
F02498071.
MEMPELAJARI
PEMURNIAN
KITIN
OEASETILASE OARI RadI". sp. 13.26 ASAL TOM PASO, MANAOO. Oi
h:tw�,h billlbingan Maggy Then:twidjaja Suhatono.
RI;CKAS\;
Kitin merupakan salah satu olimer karbohidrat yang dapat diperoleh dari
berbagai serangga, jamur, ganggang, dan organisme invetebrata lainnya yang
terdapat di laut. Kitosan merupakan biopolimer karbohidrat hasil deasetilase kitin
yang bersifat polikation pada gugus amin yang dapat digunakan sebagai flokulan
pada pengolahan limbah dan sebagai komponen pembangun pada produk perawatan
kuht dan ram but, sebagai anti tumor dan hipokolesterolemik, berkarakteristik dapat
didegradasi secara biologis, tidak beraun, ramah lingkungan, larut dalam asam,
mudah dibentuk. Enzim pemodifikasi kiti" adalah kitin deasetilase (CDA)yang
merupakan
enzim yang mengkatalisa
hidrolisis
kitin menjadi kitosan dengan
mendeasetilasi N-asetilkitooligosakarida. Enzim pendegradasi dan pemodiikasi kitin
dapat dihasilkan dari mikroba yang meniliki kemampuan menderadasi dan
menodifikasi kitin dengan enzim yang dihasiJkannya. Penelitian ini dilakukan untuk
nempelajari tahapan pemumian enzim pemodiikasi kitin, yaitu kitin deasetitase
yang dihasilkan dari Bacllus sp. 13.26, yang berasal dari daerah geotermal di
Tompaso, Manado.
Pada tahap awal penelitian dilakukan pengujian media produksi yang bagus,
yaitu antara media Termus tanpa tepung kulit udang dan mdia Termus yang diberi
tepung kulit udang sebanyak 1% (b/v). Setelah itu dilakukan produksi dan pemunian
enzin kitin deasetilase yang terdiri dari tahap produksi, pengendapan dengan
amonium suifat, dialisis, pemanasan, pengeringan beku, dan kemudian kromatoi
kolom. Pengukuran aktivitas kitin deasetltase dilakukan dengan mereaksikan enzim
dengan glikol kitin sebagai substrat.
Dari hasil penelitian didapatkan bahwa aktivitas kitin deasetilase yang tinggi
didapat dengan melakukan produksi pada mdia Termus dengan penambahan tepung
kuHt udang yaitu pada hari ke tiga sebesar 7.5 x 10-3 Vlml atau 0.142 Vlm� protein.
Pada saat panen enzim ini memiliki aktivitas sebesar 8.2 U/g protein, setelah
dilakukan pengendapan dengan amonium sulfat 80% ativitas spesiiknya menjadi
14 Vlg protein, setelah didialisis enzim ini memiliki aktivitas sebesar 42 V/g protein,
dan setelah inkubasi pada 60°C selama 1 jam aktivitasnya menjadi 77 V/g protein.
Enzim yang telah didialisis dan dan dipanaskan ini dikeringbekukan, namun
aktivitasnya menurun menjadi 38 U/g protein. Pemurnian lebih lanjut dilakukan
dengan melakukan iltrasi gel dengan nenggunakan matriks Sephadex G-IOO dengan
bufer fosfat 0.05 M;pH 7.0. Dari hasil kolom didapatkan dua tabung reaksi dengan
aktivitas yang tinggi, yaitu tabung ke4 (0.048 Vlml atau 979 U/g protein) dan
tabung ke-8 (0.08 Vlml atau 11580 V/g protein). Untuk karakterisasi dilakukan
penggabungan beberapa tabung reaksi menjadi dua fraksi. yaitu fraksi A (tabung ke
2-5) dan fraksi B (tabung ke 6-9). i basil karakteristik fraksi basil kolom
diketahui bahwa fraksi A memiliki suhu 50QC dan 70QC dengan kecenderungan pada
suhu 50QC, pH optimum pada pH 8.0. Sdangkan fraksi B memiliki suhu optimum
pada suhu 50°C dan 70QC dengan kcenderungan pada suhu 70°C, pH optimum
fraksi B berada pada rentang pH antara pH 2 sampai pH 12.
MEMPELAJARI PEMURNIAN KITIN DEASETILASE
DARI Bacilus s. 13.26 ASAL TOMPASO, MANADO
OIeb:
DWIRIANTI
F02498071
SKRPSI
sebaiao
lh satn syarat nhtnk memperolej ielar
sARINA tEKNOLOGI PERT�AN
Pada Juusah Tekholoii Pahian dah Gizr
Faknltas teknoloii Perlahiah
Ihstitnt Pertahian Boior
2003
JURUSAN TEKNOWGI PANGAN DAN GIZI
FAKULTAS TEKNOWGI PERTANIAN
NSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
EPELAJAI PEMURNAN N DEASETLASE
DAIaillu••. 13.26 ASAL TOPASO, MANADO
Oleh:
DWlANTI
F02498071
SKRPSI
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
SARJANA TEKNOLOGI PERTNIAN
Pada Juusan Teknoloi Pangan n ii
Fakultas Tenologi Pertanian
Institut Pertanian Bogor
Dilahirkan pada taggal 30 Mei 1980
Di Bogor
Tanggailulus: 15 Januari 2003
Akademik
lai ..mem6eani seseoral �cui sesuai elan
�satlJupannya, a merapat pa ari �6apn yal
fia.uignnya an mepat Ja fai .jahatan al fia.uignnya
(,Sl. j3aqarai : 286)
'los �ta seamo fi fua hanai meCurusign nat fan
menyempuaign iitiar, ituai reze� �ta
(I6duai qymnastia)
Kupersem6aiign igya �.u untu.
a-i aan oran-oraJ yang a.u cintai
aJo, 18 Januai 2003
WAYAT HDUP
---:, Pehnlis
dilihirkih di Boior pidi lihiiit 30 Meo 1980
sebiiii inik. kedni diri tiii bersindiri diri pisihiin Ali
sntrishiwili snwihdi dih A. Amri sn Pennlis memiliki siln
orihi kikik yini bernimi Rihi lhdroihi, din siln orihi
idiik yihi bernimi Reli trieslinihdi siro.
Pe~didokih
sekolih Disir ditempnh diri lihnn 1986 hiniii 1992 di
---' sDN
Polisi 1 Boior,
kemndiih melinjnlkin sekolih
Menehiih Pertimi di sPN I Boior hihiii tibn 1995. Pidi lihnn 1998
pehnlos lial daro sMUN 5 Boiar.
Pehnlis dilerimi sebiiii mihisiwi Instotut Periniin Boior pidi lihnh
1998 melilni jilnr Undiniih seleksi Masnk PB (UsI) pidi Jnrnsin Teknoloii
Piniih dih Gizi, Fiknltis Tekholoii Pertihiih. Pennlis mehyelesiokin sirjihi
pidi tihiiil lS Jinniri 2003.
KATA PENGANTAR
Alhamdu/iJ/ahirabbj'alamin, puji dan syukur penulis panjatkan pada Allah
SWT atas ridho-Nya sehingga skripsi ini dapat terselesaikap. Skripsi deilgan judu)
MempeJajari Pemunian Kitin Deasetilase Dari Bacillus sp. 13n26 Asai Tampaso,
Manado. disusun berdasarkan penelitian yang telah dilaksanakan pada bulan April
2002
�
Desemer 2002 di Jurusan Teknologi Pangan dan Giz� FATETA-IPB.
Pada kesempatan yang sangat baik ini, penulis ingin mengucapkan terima
kasih kepada :
1. Prof. Dr. Ir. Maggy T. Suhartono, sebagai dosen pemhimhing
yang telah
banyak memberikan bimbingan, dukungan, dan kasih ayang selama penulis
menjalani pendidikan dan selama melakukan tugas akhir sampai penulisan
skripsi ini.
2.
Dr. lr. Nurheni Sri Palupi, Msi., sebagai dasen penguji yang telah bersdia
menguji pada sidang sarjana peulis, mengkoreksi, dan memberikan banyak
masukan dalam penyusunan skripsi ini.
3. Didah Nur Faridah, STp., sebagai dosen penguji yang telah bersedia menguji
pada sidang sarjana penulis, mengkoreksi, dan memberikan banyak masuan
dalam penyusunan skripsi ini.
4. Proyek Korea dari BRC Yonsei University yang telah membiayai penelitian ini
S. Orang tua, kakakku, adikku
(ai lndriani -TIN 34 dan Rela Triestinanda Sari
- SMUN 5 Bogor) yang selalu memberikan bimbingan, cinta, kasih sayang,
kceriaan, suppot dan doa pada penulis selama menjalani pendidikan di IPB
dan awal hingga selesai. Specialy or my mother "thank you very much"
6. Keluarga Besar R Suwandi di Ciwaringin 77 Bogor atas segala bimbingan,
dukungan, kebaikan, kasih sayang, dan doanya.
7. My best friend forever, Diana Nur Afifah terimkasih atas kenagan indah yang
tak kan Uwie lupakan dan keluarga besar di Semarang, terimakasih atas oleh
olehnya.
8. Sahabat-sahabat terbaik (Nita, Tika, Lela, Chichl Yusi, Diin� Rini, Hertina,
Sondang, Mbak Ida, Mbak Resti, Mbak Yane, Inne, Yuli, Wita, dll). Penulis
meniucapkan terima kasih sebesar-besarnya alas seiala kebaikah, dukuhiah,
kesabaran, dan kasi h sayaninya.
9 . Tenmaksih kepada lemah-Iemahku Ayn, Anike, Debby, Chacha, A1mh, Ida,
Puhiko, lrwah, Dian N, Riyadh, alas duknnianhya walanpuh sdikil namuh
saniat berarto.
10. Tenah-tenah di TPG 35 (Diaha, Nila, Chichi, Wila, Dkan
, Berli, Febby,
Anila, Betly. Jibah, Abel, Jute, Elri, Tezar, Eli, Rikza, Oiioi, Rino, sima,
Taliek, Vania.
Teti, Tiha, Doah, Ira, Eh� soodani, Ahdi, Renhy, Ruh�
Roslahli, Ruslan, Mike, Eno, Nur, Alik, Helo, Rizal, Wida, Puoiki, Lila, Rudi,
Lonce, susi, Ocha, Evi, Yose, sahi, santi, Aslan, Fotri, Dyah 5, Onye, lwan,
Ade, Erik, Olem, Ahanda, Helmy, Aius, Budip, Aan, Malu� Innah, Nuiie,
Luknah, Pannan, Asep, Rachmal, Aiuni, Thori, Wibie, Yuliahlo, vn,
Gede, Zota, Yusuf, Tihlin, Helen, silvo, Riska, Enmy, Cahyo, Iwa, Mahdy,
Oase, Anha, Een, Emi, Yuli 5, Yuliawati, Inhe, Yanie, Wiwin, Nihirum,
Yuliasri,
Rana, Aia, Buy, Owi C, Owipa, Yaha, Diah N, Firzie, sulis,
sinpali, Jubel, Daus, Emihi,
Pehulis meniucapkan lerima kasih alas
duknhian, kasih sayani, dan kenahian iydah selama di FATETA IPB (19982003).
Teromaksih atas keramaiah dan keceriaan dihari-han praklikum,
pehelotian, dan di tab kompulemya.
11. Bapak, lu, dan Mbak (Pak Ari� Bu Ekowalo, Bu Non, Mbak Win-ku, Pak
Mardi, Bu Ika. Bu Eni, sondahi, Bu Nola, Mbak Yanli, sri, Paul, Aao) do Lab
B PAU yani lelah banyak membantu dalam membimbihi, berbaii, dah
menemani hari-hari yani manis lak lerlupakah di lab. ser1a Mbak Ida dan
Pudin yani sudah saniat membanlu.
12. Dosen IPB dan TPG-F ATET A peroode 1998-2003 alas seiala pehiajaran dah
pendidikah serla kasoh sayani yahi telah diberikan pada pehulis.
semoia skripso hasil pehelotoan akhir ioi dapal memberikan bahyak
mahfaat baii yani memerlukahhya. Akhixya krilik dan sarah sanial penulis
harapkan demi perbaokan lnlisan selahjulnyan Juia mohon ma'af alas seiala
kesalahah dah kekuranian dalam skripsi ini
Boior, Januari 2003
Penulos
11
DAIARISI
ln
KAtAPENGANTAR .
..
DFtAR wSI
.....
j. j
.
..
.............
n.
.
.....
.
........................
jn .
.
. j . . . ... . .
.....
..
..
.
.
.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . .
DFtAR GBAR j. .
.
.
......
.. n .
..
.
....
...........
...
j.
.
...
jn . ..
.
..
...
.
....
n . .. . ...
.
.
.
.
.
.
.
...
.
.
.
.........
1
iii
. . ...n n. . v
.
.
.
.
DFtAR tABEL .........j..n..................n...........................................n....jn.n........... vi
DFtAR LAPN ............................ .........j.....jn.................................j....... vii
I. PENDHULUAN n
........
.
.....
A. LAtAR BELANG
. j n . jn.. .
..
.....
B. tUJUANPENELItIAN .
.
II.
tINJAUANPUStAKA . jn
.
..
..
..
.
.
..
....
. . . . .
.
. .j.
...
.
.
...
.
.
...
......
..
.
j. . .
.......
.....
.
.
... . ...
.
.
...
.
. .
.
.....
j . . . . .. . . .
.
.
..
.
..
.
.
..
.
......
...
.
.
.
.
.
...
. . .n ..
.
III. EtODOLOGIPENELItIN
..
..
.
.
..
.
.
.
.
. .. . . .
.
.
.
A. BHAN DAN ALAt . . . . .jn . j.j.
.
n.
.
..
.
.
.....
...
.......
.
n
.
..
....
.....
n
. . ..... . .
.
..
. . .
.
.
.
.
....
.
.
..
.
.
.
....
.
...
... . .... I
.
.
.
.
.
.
.
.
...
.
.
.
.
.
jn .
.
.
..
...
.....
.
.
.... . . .n.n. 3
..
.
. ..... .
.
.
..
....
.
. .
.
3
. . ... . . . . . . j..... 4
.
....
.
.
...
.
.
. ..
.
.
...
.
.
.
..
.
n. . . . . . .. 7
.
.
.
.
.
.
..
..
..
.
.
.
.
.
..
j . ... . . . .n... n. .
..
.
.
.........
.
.
. .. .
.
.
.
...
..
.
.
.
.
.. . II
...
.
. . ..n...... .... 11
.
.
B. EtODE PENELItIAN .. . ...j .. ................................. ...... . ...........
.
...
. j . .. . ... .. . . . . . .. 9
...
.....
........
..
. ... . .
.
.
. . ... ... j ... .... n 2
...
.....
jn . ..
..
j. . .j
...
.
......
.
.
..
.
n . ..
jj
.
..
.
. .j .
.....
......
...
...
jn . . . j
.....
C. ENZIM tERMOStABIL DAN ISOLAt 13.26
D.PEMURNIAN ENZM . .
.
..... .. j . .. n... . .......n. .. .n. . 1
. .
....
...
....
......
A. KItIN DANPRODUK RNNYA
B. KItIN DEASEtLASE j
j
...
........
.
. II
.
1. tihipPehikiyiih dahPembnalih Slarler ....j......j......... . . ............... II
2 . Pembnilih Koloidil Kotih ...... ... .
.
.
j . .. . .. j. .... .. .. .... '" ............ 11
...
..
3. Pembnitih Glokol Kilih ... .... .. ... j . .
"
.
.
.
..
.
.
..
.....
.
..
.
.
.
.
. ..... 12
.. j. . . n
..
.
..
.
4. Pehiusoih MediiProdnksi ....j.......j......jn.....j.........
. ............ 12
.
5. Produkso Ehzom .................n.................................n. .
... 13
6. Pehiehdapih Proleoh Dehiah Ammohinm Snlfil ... .
. ............ 13
7.
Doilosis .
8j
Ihknbisi dah Freezed Dy ... . .
9.
Kromiloirai Kolom. n. . ... ..
.
...
. . . . . . . jn
.
.
.
.
.
.
..
....
jn .. .. . ..
..
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
...
n... . .
.
......
n
.
.
...
.
.
.
....
.....
. j . . ... .
.
.
.
.
....
. ..
.
..
.
..
....
.......... n.n. .... .. 13
..
.
.
.
.
..
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
..
.
11. Pehinknrah KohsehlrasoProleihj.....j......jn.......jn....j.n....
.
...
. . ... . . . j . . jn.. j. . .
.
.
..
j. . .j . . . . . . . .n . ... . .. . .....n.... ....... 14
.
.
......
.
j. ..... .. .. .n. . ... 14
10.Pehiukurah Aktivilis CDA.........................j.......n.....n. ...... .....
12. Kirakterisaso Ehim
.
.
.
.
.
..
.
.
..
.
.
...
.
...... 14
. .. . ...jn .... 16
.
. . . ... ..
.
.
.
.
.
.
......... ....... 16
iii
IV. HASIL DAN PEBAHASAN
A. un EDIA PRODUKSL
...........................
.
..................
....................... ...........
B. PEMURNIAN ENZM KITIN DEASETILASE
.
............
................
C. KARAKTERISASI ENZIM KITIN DEASETILASE
1 . Penentuan Suhu Optimum .
.
........
................
.
................
..
.
..............
......
.
.
.
17
.....
17
. . . . . . .
18
...............
................................
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . .
21
22
2 . Penentuan pH Optimum ........................................................................ 23
3. Kestabilan Enzim Terhadap Panas . .
.
V. KESIMPULAN DAN SARAN
A KESIMPULAN
...
. ., . . . . _,. . . . . . . . . . . . . . . . . .
....................
.......................
.
. . . .
...
.
.
. . . . . . . . . . . . . . . . .
.
. , ....................... ,,25
............
LAPRAN
. . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . .
.
..........
.................................
B. SARAN ................ ............................................... ... . ......
DAFTAR PUSTAKA
.
. . . . . . ...........
.
.............
.
..
.
.
. . . .
.
.
30
.........
30
............
... n.......j.30
.
..................
31
.......
34
........................................................................................................
iv
Maaf……………………………….
Halaman ini Pada Lembar Aslinya
Memang Tidak Ada.
t,
·Tf6
ZOO�
SKRIPSI
O�I
MEMPELAJAR! PEMURNIAN KITIN DEASETILASE
DAR! Bacllus s. 13.26 ASAL TOMPASO, MANADO
Oleb:
DWI RIANTI
F02498071
2003
JURUSAN TEKNOLOGI PANGAN DAN GIZI
FAKULTAS TEKNOLOGIPERTANIAN
NS TITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
[)wi
Rianti.
F02498071.
MEMPELAJARI
PEMURNIAN
KITIN
OEASETILASE OARI RadI". sp. 13.26 ASAL TOM PASO, MANAOO. Oi
h:tw�,h billlbingan Maggy Then:twidjaja Suhatono.
RI;CKAS\;
Kitin merupakan salah satu olimer karbohidrat yang dapat diperoleh dari
berbagai serangga, jamur, ganggang, dan organisme invetebrata lainnya yang
terdapat di laut. Kitosan merupakan biopolimer karbohidrat hasil deasetilase kitin
yang bersifat polikation pada gugus amin yang dapat digunakan sebagai flokulan
pada pengolahan limbah dan sebagai komponen pembangun pada produk perawatan
kuht dan ram but, sebagai anti tumor dan hipokolesterolemik, berkarakteristik dapat
didegradasi secara biologis, tidak beraun, ramah lingkungan, larut dalam asam,
mudah dibentuk. Enzim pemodifikasi kiti" adalah kitin deasetilase (CDA)yang
merupakan
enzim yang mengkatalisa
hidrolisis
kitin menjadi kitosan dengan
mendeasetilasi N-asetilkitooligosakarida. Enzim pendegradasi dan pemodiikasi kitin
dapat dihasilkan dari mikroba yang meniliki kemampuan menderadasi dan
menodifikasi kitin dengan enzim yang dihasiJkannya. Penelitian ini dilakukan untuk
nempelajari tahapan pemumian enzim pemodiikasi kitin, yaitu kitin deasetitase
yang dihasilkan dari Bacllus sp. 13.26, yang berasal dari daerah geotermal di
Tompaso, Manado.
Pada tahap awal penelitian dilakukan pengujian media produksi yang bagus,
yaitu antara media Termus tanpa tepung kulit udang dan mdia Termus yang diberi
tepung kulit udang sebanyak 1% (b/v). Setelah itu dilakukan produksi dan pemunian
enzin kitin deasetilase yang terdiri dari tahap produksi, pengendapan dengan
amonium suifat, dialisis, pemanasan, pengeringan beku, dan kemudian kromatoi
kolom. Pengukuran aktivitas kitin deasetltase dilakukan dengan mereaksikan enzim
dengan glikol kitin sebagai substrat.
Dari hasil penelitian didapatkan bahwa aktivitas kitin deasetilase yang tinggi
didapat dengan melakukan produksi pada mdia Termus dengan penambahan tepung
kuHt udang yaitu pada hari ke tiga sebesar 7.5 x 10-3 Vlml atau 0.142 Vlm� protein.
Pada saat panen enzim ini memiliki aktivitas sebesar 8.2 U/g protein, setelah
dilakukan pengendapan dengan amonium sulfat 80% ativitas spesiiknya menjadi
14 Vlg protein, setelah didialisis enzim ini memiliki aktivitas sebesar 42 V/g protein,
dan setelah inkubasi pada 60°C selama 1 jam aktivitasnya menjadi 77 V/g protein.
Enzim yang telah didialisis dan dan dipanaskan ini dikeringbekukan, namun
aktivitasnya menurun menjadi 38 U/g protein. Pemurnian lebih lanjut dilakukan
dengan melakukan iltrasi gel dengan nenggunakan matriks Sephadex G-IOO dengan
bufer fosfat 0.05 M;pH 7.0. Dari hasil kolom didapatkan dua tabung reaksi dengan
aktivitas yang tinggi, yaitu tabung ke4 (0.048 Vlml atau 979 U/g protein) dan
tabung ke-8 (0.08 Vlml atau 11580 V/g protein). Untuk karakterisasi dilakukan
penggabungan beberapa tabung reaksi menjadi dua fraksi. yaitu fraksi A (tabung ke
2-5) dan fraksi B (tabung ke 6-9). i basil karakteristik fraksi basil kolom
diketahui bahwa fraksi A memiliki suhu 50QC dan 70QC dengan kecenderungan pada
suhu 50QC, pH optimum pada pH 8.0. Sdangkan fraksi B memiliki suhu optimum
pada suhu 50°C dan 70QC dengan kcenderungan pada suhu 70°C, pH optimum
fraksi B berada pada rentang pH antara pH 2 sampai pH 12.
MEMPELAJARI PEMURNIAN KITIN DEASETILASE
DARI Bacilus s. 13.26 ASAL TOMPASO, MANADO
OIeb:
DWIRIANTI
F02498071
SKRPSI
sebaiao
lh satn syarat nhtnk memperolej ielar
sARINA tEKNOLOGI PERT�AN
Pada Juusah Tekholoii Pahian dah Gizr
Faknltas teknoloii Perlahiah
Ihstitnt Pertahian Boior
2003
JURUSAN TEKNOWGI PANGAN DAN GIZI
FAKULTAS TEKNOWGI PERTANIAN
NSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
EPELAJAI PEMURNAN N DEASETLASE
DAIaillu••. 13.26 ASAL TOPASO, MANADO
Oleh:
DWlANTI
F02498071
SKRPSI
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
SARJANA TEKNOLOGI PERTNIAN
Pada Juusan Teknoloi Pangan n ii
Fakultas Tenologi Pertanian
Institut Pertanian Bogor
Dilahirkan pada taggal 30 Mei 1980
Di Bogor
Tanggailulus: 15 Januari 2003
Akademik
lai ..mem6eani seseoral �cui sesuai elan
�satlJupannya, a merapat pa ari �6apn yal
fia.uignnya an mepat Ja fai .jahatan al fia.uignnya
(,Sl. j3aqarai : 286)
'los �ta seamo fi fua hanai meCurusign nat fan
menyempuaign iitiar, ituai reze� �ta
(I6duai qymnastia)
Kupersem6aiign igya �.u untu.
a-i aan oran-oraJ yang a.u cintai
aJo, 18 Januai 2003
WAYAT HDUP
---:, Pehnlis
dilihirkih di Boior pidi lihiiit 30 Meo 1980
sebiiii inik. kedni diri tiii bersindiri diri pisihiin Ali
sntrishiwili snwihdi dih A. Amri sn Pennlis memiliki siln
orihi kikik yini bernimi Rihi lhdroihi, din siln orihi
idiik yihi bernimi Reli trieslinihdi siro.
Pe~didokih
sekolih Disir ditempnh diri lihnn 1986 hiniii 1992 di
---' sDN
Polisi 1 Boior,
kemndiih melinjnlkin sekolih
Menehiih Pertimi di sPN I Boior hihiii tibn 1995. Pidi lihnn 1998
pehnlos lial daro sMUN 5 Boiar.
Pehnlis dilerimi sebiiii mihisiwi Instotut Periniin Boior pidi lihnh
1998 melilni jilnr Undiniih seleksi Masnk PB (UsI) pidi Jnrnsin Teknoloii
Piniih dih Gizi, Fiknltis Tekholoii Pertihiih. Pennlis mehyelesiokin sirjihi
pidi tihiiil lS Jinniri 2003.
KATA PENGANTAR
Alhamdu/iJ/ahirabbj'alamin, puji dan syukur penulis panjatkan pada Allah
SWT atas ridho-Nya sehingga skripsi ini dapat terselesaikap. Skripsi deilgan judu)
MempeJajari Pemunian Kitin Deasetilase Dari Bacillus sp. 13n26 Asai Tampaso,
Manado. disusun berdasarkan penelitian yang telah dilaksanakan pada bulan April
2002
�
Desemer 2002 di Jurusan Teknologi Pangan dan Giz� FATETA-IPB.
Pada kesempatan yang sangat baik ini, penulis ingin mengucapkan terima
kasih kepada :
1. Prof. Dr. Ir. Maggy T. Suhartono, sebagai dosen pemhimhing
yang telah
banyak memberikan bimbingan, dukungan, dan kasih ayang selama penulis
menjalani pendidikan dan selama melakukan tugas akhir sampai penulisan
skripsi ini.
2.
Dr. lr. Nurheni Sri Palupi, Msi., sebagai dasen penguji yang telah bersdia
menguji pada sidang sarjana peulis, mengkoreksi, dan memberikan banyak
masukan dalam penyusunan skripsi ini.
3. Didah Nur Faridah, STp., sebagai dosen penguji yang telah bersedia menguji
pada sidang sarjana penulis, mengkoreksi, dan memberikan banyak masuan
dalam penyusunan skripsi ini.
4. Proyek Korea dari BRC Yonsei University yang telah membiayai penelitian ini
S. Orang tua, kakakku, adikku
(ai lndriani -TIN 34 dan Rela Triestinanda Sari
- SMUN 5 Bogor) yang selalu memberikan bimbingan, cinta, kasih sayang,
kceriaan, suppot dan doa pada penulis selama menjalani pendidikan di IPB
dan awal hingga selesai. Specialy or my mother "thank you very much"
6. Keluarga Besar R Suwandi di Ciwaringin 77 Bogor atas segala bimbingan,
dukungan, kebaikan, kasih sayang, dan doanya.
7. My best friend forever, Diana Nur Afifah terimkasih atas kenagan indah yang
tak kan Uwie lupakan dan keluarga besar di Semarang, terimakasih atas oleh
olehnya.
8. Sahabat-sahabat terbaik (Nita, Tika, Lela, Chichl Yusi, Diin� Rini, Hertina,
Sondang, Mbak Ida, Mbak Resti, Mbak Yane, Inne, Yuli, Wita, dll). Penulis
meniucapkan terima kasih sebesar-besarnya alas seiala kebaikah, dukuhiah,
kesabaran, dan kasi h sayaninya.
9 . Tenmaksih kepada lemah-Iemahku Ayn, Anike, Debby, Chacha, A1mh, Ida,
Puhiko, lrwah, Dian N, Riyadh, alas duknnianhya walanpuh sdikil namuh
saniat berarto.
10. Tenah-tenah di TPG 35 (Diaha, Nila, Chichi, Wila, Dkan
, Berli, Febby,
Anila, Betly. Jibah, Abel, Jute, Elri, Tezar, Eli, Rikza, Oiioi, Rino, sima,
Taliek, Vania.
Teti, Tiha, Doah, Ira, Eh� soodani, Ahdi, Renhy, Ruh�
Roslahli, Ruslan, Mike, Eno, Nur, Alik, Helo, Rizal, Wida, Puoiki, Lila, Rudi,
Lonce, susi, Ocha, Evi, Yose, sahi, santi, Aslan, Fotri, Dyah 5, Onye, lwan,
Ade, Erik, Olem, Ahanda, Helmy, Aius, Budip, Aan, Malu� Innah, Nuiie,
Luknah, Pannan, Asep, Rachmal, Aiuni, Thori, Wibie, Yuliahlo, vn,
Gede, Zota, Yusuf, Tihlin, Helen, silvo, Riska, Enmy, Cahyo, Iwa, Mahdy,
Oase, Anha, Een, Emi, Yuli 5, Yuliawati, Inhe, Yanie, Wiwin, Nihirum,
Yuliasri,
Rana, Aia, Buy, Owi C, Owipa, Yaha, Diah N, Firzie, sulis,
sinpali, Jubel, Daus, Emihi,
Pehulis meniucapkan lerima kasih alas
duknhian, kasih sayani, dan kenahian iydah selama di FATETA IPB (19982003).
Teromaksih atas keramaiah dan keceriaan dihari-han praklikum,
pehelotian, dan di tab kompulemya.
11. Bapak, lu, dan Mbak (Pak Ari� Bu Ekowalo, Bu Non, Mbak Win-ku, Pak
Mardi, Bu Ika. Bu Eni, sondahi, Bu Nola, Mbak Yanli, sri, Paul, Aao) do Lab
B PAU yani lelah banyak membantu dalam membimbihi, berbaii, dah
menemani hari-hari yani manis lak lerlupakah di lab. ser1a Mbak Ida dan
Pudin yani sudah saniat membanlu.
12. Dosen IPB dan TPG-F ATET A peroode 1998-2003 alas seiala pehiajaran dah
pendidikah serla kasoh sayani yahi telah diberikan pada pehulis.
semoia skripso hasil pehelotoan akhir ioi dapal memberikan bahyak
mahfaat baii yani memerlukahhya. Akhixya krilik dan sarah sanial penulis
harapkan demi perbaokan lnlisan selahjulnyan Juia mohon ma'af alas seiala
kesalahah dah kekuranian dalam skripsi ini
Boior, Januari 2003
Penulos
11
DAIARISI
ln
KAtAPENGANTAR .
..
DFtAR wSI
.....
j. j
.
..
.............
n.
.
.....
.
........................
jn .
.
. j . . . ... . .
.....
..
..
.
.
.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . .
DFtAR GBAR j. .
.
.
......
.. n .
..
.
....
...........
...
j.
.
...
jn . ..
.
..
...
.
....
n . .. . ...
.
.
.
.
.
.
.
...
.
.
.
.........
1
iii
. . ...n n. . v
.
.
.
.
DFtAR tABEL .........j..n..................n...........................................n....jn.n........... vi
DFtAR LAPN ............................ .........j.....jn.................................j....... vii
I. PENDHULUAN n
........
.
.....
A. LAtAR BELANG
. j n . jn.. .
..
.....
B. tUJUANPENELItIAN .
.
II.
tINJAUANPUStAKA . jn
.
..
..
..
.
.
..
....
. . . . .
.
. .j.
...
.
.
...
.
.
...
......
..
.
j. . .
.......
.....
.
.
... . ...
.
.
...
.
. .
.
.....
j . . . . .. . . .
.
.
..
.
..
.
.
..
.
......
...
.
.
.
.
.
...
. . .n ..
.
III. EtODOLOGIPENELItIN
..
..
.
.
..
.
.
.
.
. .. . . .
.
.
.
A. BHAN DAN ALAt . . . . .jn . j.j.
.
n.
.
..
.
.
.....
...
.......
.
n
.
..
....
.....
n
. . ..... . .
.
..
. . .
.
.
.
.
....
.
.
..
.
.
.
....
.
...
... . .... I
.
.
.
.
.
.
.
.
...
.
.
.
.
.
jn .
.
.
..
...
.....
.
.
.... . . .n.n. 3
..
.
. ..... .
.
.
..
....
.
. .
.
3
. . ... . . . . . . j..... 4
.
....
.
.
...
.
.
. ..
.
.
...
.
.
.
..
.
n. . . . . . .. 7
.
.
.
.
.
.
..
..
..
.
.
.
.
.
..
j . ... . . . .n... n. .
..
.
.
.........
.
.
. .. .
.
.
.
...
..
.
.
.
.
.. . II
...
.
. . ..n...... .... 11
.
.
B. EtODE PENELItIAN .. . ...j .. ................................. ...... . ...........
.
...
. j . .. . ... .. . . . . . .. 9
...
.....
........
..
. ... . .
.
.
. . ... ... j ... .... n 2
...
.....
jn . ..
..
j. . .j
...
.
......
.
.
..
.
n . ..
jj
.
..
.
. .j .
.....
......
...
...
jn . . . j
.....
C. ENZIM tERMOStABIL DAN ISOLAt 13.26
D.PEMURNIAN ENZM . .
.
..... .. j . .. n... . .......n. .. .n. . 1
. .
....
...
....
......
A. KItIN DANPRODUK RNNYA
B. KItIN DEASEtLASE j
j
...
........
.
. II
.
1. tihipPehikiyiih dahPembnalih Slarler ....j......j......... . . ............... II
2 . Pembnilih Koloidil Kotih ...... ... .
.
.
j . .. . .. j. .... .. .. .... '" ............ 11
...
..
3. Pembnitih Glokol Kilih ... .... .. ... j . .
"
.
.
.
..
.
.
..
.....
.
..
.
.
.
.
. ..... 12
.. j. . . n
..
.
..
.
4. Pehiusoih MediiProdnksi ....j.......j......jn.....j.........
. ............ 12
.
5. Produkso Ehzom .................n.................................n. .
... 13
6. Pehiehdapih Proleoh Dehiah Ammohinm Snlfil ... .
. ............ 13
7.
Doilosis .
8j
Ihknbisi dah Freezed Dy ... . .
9.
Kromiloirai Kolom. n. . ... ..
.
...
. . . . . . . jn
.
.
.
.
.
.
..
....
jn .. .. . ..
..
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
...
n... . .
.
......
n
.
.
...
.
.
.
....
.....
. j . . ... .
.
.
.
.
....
. ..
.
..
.
..
....
.......... n.n. .... .. 13
..
.
.
.
.
..
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
..
.
11. Pehinknrah KohsehlrasoProleihj.....j......jn.......jn....j.n....
.
...
. . ... . . . j . . jn.. j. . .
.
.
..
j. . .j . . . . . . . .n . ... . .. . .....n.... ....... 14
.
.
......
.
j. ..... .. .. .n. . ... 14
10.Pehiukurah Aktivilis CDA.........................j.......n.....n. ...... .....
12. Kirakterisaso Ehim
.
.
.
.
.
..
.
.
..
.
.
...
.
...... 14
. .. . ...jn .... 16
.
. . . ... ..
.
.
.
.
.
.
......... ....... 16
iii
IV. HASIL DAN PEBAHASAN
A. un EDIA PRODUKSL
...........................
.
..................
....................... ...........
B. PEMURNIAN ENZM KITIN DEASETILASE
.
............
................
C. KARAKTERISASI ENZIM KITIN DEASETILASE
1 . Penentuan Suhu Optimum .
.
........
................
.
................
..
.
..............
......
.
.
.
17
.....
17
. . . . . . .
18
...............
................................
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . .
21
22
2 . Penentuan pH Optimum ........................................................................ 23
3. Kestabilan Enzim Terhadap Panas . .
.
V. KESIMPULAN DAN SARAN
A KESIMPULAN
...
. ., . . . . _,. . . . . . . . . . . . . . . . . .
....................
.......................
.
. . . .
...
.
.
. . . . . . . . . . . . . . . . .
.
. , ....................... ,,25
............
LAPRAN
. . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . .
.
..........
.................................
B. SARAN ................ ............................................... ... . ......
DAFTAR PUSTAKA
.
. . . . . . ...........
.
.............
.
..
.
.
. . . .
.
.
30
.........
30
............
... n.......j.30
.
..................
31
.......
34
........................................................................................................
iv
Maaf……………………………….
Halaman ini Pada Lembar Aslinya
Memang Tidak Ada.