ditampung dalam
cuvet. Supernatan
diambil dibaca
dengan spektofotometer dengan panjang gelombang 532 nm. Jawi, 2008
I. Rancangan Penelitian
Gambar 3.1 . Rancangan Penelitian
Keterangan: S
: jumlah sampel K
1
: kelompok I kontrol K
2
: kelompok II DM K
3
: kelompok III DM + metformin 9 mgtikus hari
K
4
: kelompok IV DM + ekstrak bayam anting 1000 mgkgBBhari
M
1
: kadar MDA plasma K
1
M
2
: kadar MDA plasma K
2
M
3
: kadar MDA plasma K
3
M
4
: kadar MDA plasma K
4
J. Instrumentasi Penelitian
1. Alat
a. Kandang hewan uji 30x20x10 cm
3
b. Timbangan elektrik Metler Toledo
c. Spuit injeksi tuberkulin 1 cc
d. Becker glass 100 ml
e. Labu ukur 5 ml
S K
1
K
2
K
3
K
4
M
1
M
2
M
3
M
4
Uji Anova dilanjutkan
dengan Post Hoc Test
commit to users
f. Sonde mencit 1 ml
g. Blood Glucose Test Meter GlucoDr
TM
h. Gunting
i. Sarung tangan
j. Tabung ependorf
2. Bahan
a. Streptozotocin
b. Mencit BalbC
c. Buffer sitrat 0,02 M
d. Ekstrak daun sendok
e. Aquadest
f. Metformin 500 mg
K. Penentuan Dosis
1. Ekstrak Daun Sendok
Dosis ekstrak yang digunakan pada penelitian ini adalah 1000 mgkgBB. Bila setiap tikus mempunyai berat 200 gram, maka:
Dosis 1 ekor tikus = gramBB
x gramBB
mg 30
1000 1000
= 30 mg Karena volume cairan maksimal yang dapat diberikan per oral pada
mencit adalah 1 ml20 g BB Ngatidjan, 1991, disarankan takaran pemberian tidak melebihi setengah kali volume maksimalnya. Oleh
karena itu dilakukan pengenceran ekstrak, dengan rincian 10 gram ekstrak dilarutkan dalam 10 ml aquades .
commit to users
Pengenceran ekstrak = = 200 mg ekstrak dalam 1 ml larutan
Dengan kata lain 1 ml larutan megandung 200 mg ekstrak. Bila dosis tiap tikus adalah 30 mg maka volume ekstrak yang diberikan
adalah 0,15 ml. 2. Metformin
Berdasarkan tabel konversi perhitungan dosis untuk berbagai hewan uji dari berbagai spesies dan manusia, maka konversi dosis
manusia dengan beratbadan 70 kg pada mencit dengan berat badan 20 g adalah 0,0026 Ngatidjan,1991. Dosis metformin yang digunakan
untuk orang dewasa adalah 500 mg, dengan demikian dosis untuk mencit 20 gram = 500mg x 0,0026 = 1,3 mgtikus hari. Karena
pemberian metformin dilakukan secara peroral, maka perlu dilakukan pelarutan dalam aquades dengan rincian 26 gram metformin
dilarutkan dalam 10 ml aquades sehingga didapatkan 9 mg metformin dalam 2 ml larutan. Bila dosis tiap tikus adalah 1,3 mg maka volume
metformin yang diberikan adalah 0,1 ml.
3. Streptozotocin STZ
Penelitian Arora et.al., tahun 2009, dosis tungal STZ 180mgKgBB dapat menginduksi DM tipe 1 dan dosis STZ 40
mgKgBB yang diberikan selama 5 hari berturut-turut dapat menyebabkan DM tipe II.
commit to users
Pada penelitian ini digunakan STZ sebanyak 500 mg yang dilarutkan dalam 50 ml buffer sitrat 0,02M, sehingga 1 ml larutan
mengandung 10 mg STZ. Dosis STZ yang diberikan tidak mengacu pada penelitian yang telah ada, namun peneliti menggunakan dosis 65
mgKg BB yang diberikan dua kali dengan selang waktu 5 hari. Jika berat mencit rata-rata adalah 30 gram maka dibutuhkan 1,95 STZ
untuk setiap ekor mencit. Jika 1 ml laturan mengandung 1 ml STZ, maka induksi memerlukan dosis 0,195 ml larutan.
L. Alur Penelitian
1. Kandang tikus disiapkan. Satu kandang 1 kelompok mencit.
2. Mencit diadaptasikan dengan lingkungan selama 7 hari.
3. Mencit sebanyak 32 ekor dikelompokkan secara acak menjadi 4
kelompok, masing-masing 8 ekor a.
Kelompok I hanya diberi diet standar, sebagai kontrol. b. Kelompok II diinduksi STZ selama penelitian berjalan sebagai
kelompok DM. c.
Kelompok III diinduksi STZ dan diberi Metformin dosis 1,3 mgtikus hari.
d. Kelompok IV diinduksi STZ dan diberi ekstrak daun sendok dosis
1000 mg KgBB peroral setiap hari.
commit to users
4. Pemeriksaan kadar MDA dilakukan setelah 2 minggu perlakuan.
Rancangan Penelitian:
Gambar 3.2.
Skema alur penelitian
M. Tehnik Analisis Statistik
Data yang
diperoleh dianalisis
secara statistik
dengan menggunakan uji ANOVA dan dilanjutkan dengan Post Hoc Test
menggunakan program SPSS for Windows Release 16.0 dan p 0,05 dipilih sebagai tingkat minimal signifikansinya.
Streptozotocin dosis 65 mgkgBB Mencit BalbC Jantan
Kadar glukosa darah sewaktu
200 mgdl Kadar glukosa darah
sewaktu 200 mgdl
Exclude
Kelompok DM
8 ekor Kelompok DM
dengan metformin dosis
1,3 mgmencit hari 8 ekor
Kelompok DM dengan daun
sendok dosis 1000mgkgBB
hari 8 ekor
Kadar MDA Kelompok
kontrol 8 ekor
ANALISIS STATISTIK
commit to users
31
BAB IV HASIL PENELITIAN
A. Kadar MDA Hasil Penelitian
Pada penelitian hubungan pemberian ekstrak Daun Sendok Plantago major L. terhadap kadar malondialdehyde mencit Balbc induksi
streptozotocin didapatkan kadar Gula Darah Sewaktu GDS untuk mencit kontrol 147,75 ± 14.21
mgdl Satriani, 2010 dengan kadar MDA 0,211 ± 0,145 µMolL. Pemberian STZ dosis 65 mgkgBB yang diberikan dua kali
dalam selang waktu 5 hari menunjukkan peningkatan kadar GDS menjadi 226,78 ± 49,28 mgdl Satriani, 2010 yang diikuti dengan peningkatan
kadar MDA mencit model diabetes menjadi 0,363 ± 0,208 µMolL. Pemberian ekstrak daun sendok pada hewan uji menunjukkan adanya
peningkatan kadar MDA menjadi 0,515 ± 0,111 µMolL. Hasil ini sama dengan pemberian metformin yaitu terjadi peningkatan kadar MDA
menjadi 0,389 ± 0,187 µMolL. Data selengkapnya dapat dilihat pada Tabel 4.1.
Tabel 4.1 . Rata
– rata kadar Malondialdehide pada Mencit Balbc Kelompok Perlakuan
Rata-Rata± SD µMolL Kontrol
0,211 ± 0,145 DM
0,363 ± 0,208 DM + Metformin
0,389 ± 0,187 DM + Ekstrak Daun Sendok
0,515 ± 0,111
commit to users
