xxii
BAB III METODE PENELITIAN
3.1 Rancangan Penelitian
Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap RAL dengan 5 jenis perlakuan dan dengan 5 kali ulangan, dimana sebanyak 25 ekor tikus secara acak dibagi
menjadi 5 kelompok. Perlakuan EM4
®
per oral dengan dosis bertingkat disajikan pada skema rancangan penelitian Tabel 3.1. Perlakuan dengan menggunakan bantuan sonde,
diberikan satu kali setiap hari selama 28 hari. Tabel 3.1. Tabel Rancangan Penelitian
Perlakuan Dosis Pemberian per
ekor Jumlah Ulangan
ekor
Kontrol 1 ml aquadest
5 EM4A
0,25 ml EM4® 5
EM4B 0,50 ml EM4®
5 EM4C
1,00 ml EM4® 5
EM4D 2,00 ml EM4®
5 Total
25
3.2 Variabel Penelitian
Variabel bebas pada penelitian ini adalah dosis EM4
®
. Variabel yang dikendalikan yaitu hewan coba, umur, strain, berat badan, pakan dan minum, kandang,
peralatan yang digunakan serta lama perlakuan. Variabel tergantung yang diamati pada penelitian ini yaitu gambaran histopatologi usus, hati dan ginjal.
11
xxiii
3.3 Bahan Penelitian
Bahan yang dipergunakan dalam penelitian ini yaitu Effective Microorganisme-4 EM4
®
produksi PT. Songgolangit Persada. Hewan coba yang digunakan adalah tikus putih Rattus novergicus umur 3 bulan dengan berat badan rerata 200 gram. Pakan
yang diberikan produksi PT. Charoen Pokphand Indonesia dengan kode pakan 551 yang memiliki komposisi air max 13, protein kasar 19,5, lemak kasar 4, serat kasar
max 6, abu max 8, kalsium 0,9 dan fosfor 0,7. Minuman diberikan air bersih secara ad libitum. Berbagai bahan dan alat yang digunakan sebelum pemeriksaan
sampel meliputi kandang tikus, sonde dengan desain khusus, timbangan, pot plastik, box plastik, spuite 3 ml, gunting bedah, pinset, sarung tangan, aquades, tissue, kapas,
alkohol 70 dan ether.
3.4 Instrumen Penelitian
Instrumen yang dipergunakan pada penelitian yaitu seperangkat alat nekropsi yaitu pisau bedah, gunting bedah dan pinset. Seperangkat alat untuk pemeriksaan
histopatologi usus, hati dan ginjal. Pembuatan preparat histopatologi tissue processing sesuai metode Humason 1972.
3.5 Prosedur Penelitian