Uji Aktivitas Ekstrak Etanol Daun Seri (Muntingia Calabura Linn.) dalam Menghambat Pertumbuhan Streptococcus Mutans, Escherichia Coli, dan Candida Albicans Secara In vitro
Dikeringanginkan
Diblender
Direndam dalam etanol selama 3 hari
Disaring
Maserat
Disaring
Diulang sebanyak 3 kali
Residu
Filtrat
Dirotarievaporator pada suhu didih etanol
Ekstrak Kental
Dibuat konsentrasi 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, dan 0% sebagai
kontrol
Dilarutkan dalam DMSO
Larutan Ekstrak
Dipipet sebanyak 10 µl
Diteteskan pada permukaan cakram kosong
Dibiarkan ± 1 jam hingga larutan ekstrak berdifusi ke dalam cakram
Cakram yang mengandung
ekstrak
LAMPIRAN 2. Penyiapan Isolat Mikroba Uji
Isolat S. mutans, E. coli, dan C. albicans
Universitas Sumatera Utara
Masing-masing disubkultur dengan
menggunakan media miring
Diinkubasi pada suhu 30oC selama
24-72 jam
Disuspensikan dalam larutan NaCl
0,9% steril sehingga diperoleh
kekeruhan standard McFarland 108
Dilakukan pengenceran 10-2
sehingga diperoleh suspensi 106
CFU/ml
Suspensi S. mutans, E. coli, dan C. albicans
LAMPIRAN 3. Uji Aktivitas Ekstrak Etanol Daun Seri (Muntingia calabura
Linn) terhadap Pertumbuhan S. mutans, E. coli, dan C.
albicans
Universitas Sumatera Utara
Media MHA dan SDA
Dituang ke dalam cawan petri steril
Dibiarkan memadat
Media Uji
Diusapkan suspensi biakan dengan
cotton bud
Diletakkan cakram yang
mengandung ekstrak tumbuhan
Diletakkan cakram pembanding
Diinkubasi selama 24-72 jam pada
suhu ruang
Diamati dan diukur zona bening di
sekitar cakram
Hasil
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 4. Pengamatan Zona Hambat (mm) Ekstrak Etanol Daun Seri terhadap Pertumbuhan S. mutans
Isolat
Waktu Pengamatan
Ulangan
S. mutans
Konsentrasi Zona Hambat
K(+)
Hari ke-1
(15 Agt’ 15)
Rata-rata
10%
15%
20%
25%
32 mm
32 mm
21 mm
28,3 mm
-
12 mm
11 mm
12 mm
11,6 mm
14 mm
14 mm
14 mm
14 mm
15 mm
13 mm
13 mm
13,6 mm
15 mm
15 mm
15 mm
15 mm
16 mm
16 mm
17 mm
16,3 mm
1
2
3
33 mm
32 mm
22 mm
29 mm
-
14 mm
12 mm
12 mm
12,6 mm
15 mm
15 mm
14 mm
14,6 mm
15 mm
14 mm
13 mm
14 mm
16 mm
15 mm
16 mm
15,6 mm
17 mm
16 mm
18 mm
17 mm
1
2
3
33 mm
32 mm
19 mm
28 mm
-
14 mm
11 mm
10 mm
11,6 mm
15 mm
16 mm
14 mm
15 mm
15 mm
13 mm
13 mm
13,6 mm
17 mm
14 mm
17 mm
16 mm
18 mm
18 mm
19 mm
18,3 mm
Rata-rata
Hari ke-3
(17 Agt’ 15)
5%
1
2
3
Rata-rata
Hari ke-2
(16 Agt’ 15)
K(-)
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 5. Pengamatan Zona Hambat (mm) Ekstrak Etanol Daun Seri terhadap Pertumbuhan E. coli
Isolat
Waktu Pengamatan
Ulangan
E. coli
Konsentrasi Zona Hambat
K(+)
Hari ke-1
(15 Agt’ 15)
Rata-rata
10%
15%
20%
25%
41 mm
31 mm
34 mm
35,3 mm
5 mm
5 mm
6 mm
8 mm
6 mm
6,6 mm
6 mm
9 mm
11 mm
8,6 mm
7 mm
10 mm
12 mm
9,6 mm
8 mm
11 mm
9 mm
9,3 mm
10 mm
12 mm
13 mm
11,6 mm
1
2
3
42 mm
32 mm
36 mm
36,6 mm
-
7 mm
8 mm
8 mm
7,6 mm
8 mm
10 mm
10 mm
9,3 mm
9 mm
11 mm
11 mm
10,3 mm
10 mm
12 mm
7 mm
9,6 mm
11 mm
13 mm
13 mm
12,3 mm
1
2
3
42 mm
32 mm
36 mm
36,6 mm
-
7 mm
8 mm
7,5 mm
8 mm
10 mm
10 mm
9,3 mm
9 mm
11 mm
9 mm
9,6 mm
10 mm
12 mm
7 mm
9,6 mm
11 mm
13 mm
13 mm
12,3 mm
Rata-rata
Hari ke-3
(17 Agt’ 15)
5%
1
2
3
Rata-rata
Hari ke-2
(16 Agt’ 15)
K(-)
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 6. Pengamatan Zona Hambat (mm) Ekstrak Etanol Daun Seri terhadap Pertumbuhan C. albicans
Isolat
Waktu Pengamatan
Ulangan
C.
albicans
Hari ke-1
(15 Agt’ 15)
K(+)
K(-)
1
2
3
5 mm
5 mm
-
1
2
3
5 mm
5 mm
1
2
3
5 mm
5 mm
Rata-rata
Hari ke-2
(16 Agt’ 15)
Rata-rata
Hari ke-3
(17 Agt’ 15)
Rata-rata
Konsentrasi Zona Hambat
5%
10%
15%
20%
25%
12 mm
12 mm
13 mm
11,6 mm
13 mm
13 mm
14 mm
13,6 mm
14 mm
14 mm
15 mm
14,3 mm
15 mm
15 mm
16 mm
15,3 mm
16 mm
16 mm
17 mm
16,3 mm
-
13 mm
15 mm
16 mm
7,6 mm
15 mm
16 mm
17 mm
14,6 mm
18 mm
17 mm
18 mm
16 mm
20 mm
18 mm
19 mm
17,6 mm
21 mm
19 mm
20 mm
19 mm
-
13 mm
15 mm
16 mm
14,6 mm
15 mm
16 mm
17 mm
16 mm
18 mm
17 mm
18 mm
17,6 mm
20 mm
18 mm
19 mm
19 mm
21 mm
19 mm
20 mm
20 mm
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 7. Hasil Analisa Statistik
1. Uji Duncan S. mutans
Zona_HambatS. mutans
Perlakuan
N
Subset for alpha = 0.05
1
a
Duncan
2
5%
3
11,6667
15%
3
13,6667
10%
3
15,0000
20%
3
16,0000
25%
3
18,3333
K(+)
3
28,0000
Sig.
,051
1,000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.
S. mutans
Perlakuan
K(+)
K(-)
5%
10%
15%
20%
25%
Zona Hambat (mm)
28b
11,67a
15a
13,67a
16a
18,3a
2, Uji Duncan E. coli
Zona_Hambat E. coli
Perlakuan
N
Subset for alpha = 0.05
1
a,b
Duncan
2
5%
2
7,5000
10%
3
9,3333
15%
3
9,6667
20%
3
9,6667
25%
3
12,3333
K(+)
3
Sig.
36,6667
,066
1,000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
Universitas Sumatera Utara
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 2,769.
b. The group sizes are unequal. The harmonic mean of the group
sizes is used. Type I error levels are not guaranteed.
E. coli
Perlakuan
K(+)
K(-)
5%
10%
15%
20%
25%
Zona Hambat (mm)
36,67b
7,5a
9,3a
9,67a
9,67a
12,3a
3. Uji Duncan C. albicans
Zona_Hambat C. albicans
Perlakuan
N
Subset for alpha = 0.05
1
a
2
5%
3
14,6667
10%
3
16,0000
15%
3
20%
3
25%
3
3
4
16,0000
17,6667
17,6667
Duncan
Sig.
19,0000
19,0000
20,0000
,156
,084
,156
,277
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.
C. albicans
Perlakuan
K(+)
K(-)
5%
10%
15%
20%
25%
Zona Hambat (mm)
5
14,67a
16ab
17,67bc
19cd
20d
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 8. Dokumentasi Zona Hambat
a. Pengamatan Hari 1:
S. mutans U1
E. coli U1
C. albicans U1
U3
S. mutans U2
E. coli U2
C. albicans U2
S. mutans U3
E. coli U3
C. albicans
Universitas Sumatera Utara
b. Pengamatan Hari 2:
S. mutans U1
E. coli U1
C. albicans U1
S. mutans U2
S. mutans U3
E. coli U2
E. coli U3
C. albicans U2 C. albicans U3
Universitas Sumatera Utara
c. Pengamatan Hari 3:
S. mutans U1
S. mutans U2
E. coli U1
E. coli U2
C. albicans U1
C. albicans U2
S. mutans U3
E. coli U3
C. albicans U3
Universitas Sumatera Utara
Diblender
Direndam dalam etanol selama 3 hari
Disaring
Maserat
Disaring
Diulang sebanyak 3 kali
Residu
Filtrat
Dirotarievaporator pada suhu didih etanol
Ekstrak Kental
Dibuat konsentrasi 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, dan 0% sebagai
kontrol
Dilarutkan dalam DMSO
Larutan Ekstrak
Dipipet sebanyak 10 µl
Diteteskan pada permukaan cakram kosong
Dibiarkan ± 1 jam hingga larutan ekstrak berdifusi ke dalam cakram
Cakram yang mengandung
ekstrak
LAMPIRAN 2. Penyiapan Isolat Mikroba Uji
Isolat S. mutans, E. coli, dan C. albicans
Universitas Sumatera Utara
Masing-masing disubkultur dengan
menggunakan media miring
Diinkubasi pada suhu 30oC selama
24-72 jam
Disuspensikan dalam larutan NaCl
0,9% steril sehingga diperoleh
kekeruhan standard McFarland 108
Dilakukan pengenceran 10-2
sehingga diperoleh suspensi 106
CFU/ml
Suspensi S. mutans, E. coli, dan C. albicans
LAMPIRAN 3. Uji Aktivitas Ekstrak Etanol Daun Seri (Muntingia calabura
Linn) terhadap Pertumbuhan S. mutans, E. coli, dan C.
albicans
Universitas Sumatera Utara
Media MHA dan SDA
Dituang ke dalam cawan petri steril
Dibiarkan memadat
Media Uji
Diusapkan suspensi biakan dengan
cotton bud
Diletakkan cakram yang
mengandung ekstrak tumbuhan
Diletakkan cakram pembanding
Diinkubasi selama 24-72 jam pada
suhu ruang
Diamati dan diukur zona bening di
sekitar cakram
Hasil
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 4. Pengamatan Zona Hambat (mm) Ekstrak Etanol Daun Seri terhadap Pertumbuhan S. mutans
Isolat
Waktu Pengamatan
Ulangan
S. mutans
Konsentrasi Zona Hambat
K(+)
Hari ke-1
(15 Agt’ 15)
Rata-rata
10%
15%
20%
25%
32 mm
32 mm
21 mm
28,3 mm
-
12 mm
11 mm
12 mm
11,6 mm
14 mm
14 mm
14 mm
14 mm
15 mm
13 mm
13 mm
13,6 mm
15 mm
15 mm
15 mm
15 mm
16 mm
16 mm
17 mm
16,3 mm
1
2
3
33 mm
32 mm
22 mm
29 mm
-
14 mm
12 mm
12 mm
12,6 mm
15 mm
15 mm
14 mm
14,6 mm
15 mm
14 mm
13 mm
14 mm
16 mm
15 mm
16 mm
15,6 mm
17 mm
16 mm
18 mm
17 mm
1
2
3
33 mm
32 mm
19 mm
28 mm
-
14 mm
11 mm
10 mm
11,6 mm
15 mm
16 mm
14 mm
15 mm
15 mm
13 mm
13 mm
13,6 mm
17 mm
14 mm
17 mm
16 mm
18 mm
18 mm
19 mm
18,3 mm
Rata-rata
Hari ke-3
(17 Agt’ 15)
5%
1
2
3
Rata-rata
Hari ke-2
(16 Agt’ 15)
K(-)
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 5. Pengamatan Zona Hambat (mm) Ekstrak Etanol Daun Seri terhadap Pertumbuhan E. coli
Isolat
Waktu Pengamatan
Ulangan
E. coli
Konsentrasi Zona Hambat
K(+)
Hari ke-1
(15 Agt’ 15)
Rata-rata
10%
15%
20%
25%
41 mm
31 mm
34 mm
35,3 mm
5 mm
5 mm
6 mm
8 mm
6 mm
6,6 mm
6 mm
9 mm
11 mm
8,6 mm
7 mm
10 mm
12 mm
9,6 mm
8 mm
11 mm
9 mm
9,3 mm
10 mm
12 mm
13 mm
11,6 mm
1
2
3
42 mm
32 mm
36 mm
36,6 mm
-
7 mm
8 mm
8 mm
7,6 mm
8 mm
10 mm
10 mm
9,3 mm
9 mm
11 mm
11 mm
10,3 mm
10 mm
12 mm
7 mm
9,6 mm
11 mm
13 mm
13 mm
12,3 mm
1
2
3
42 mm
32 mm
36 mm
36,6 mm
-
7 mm
8 mm
7,5 mm
8 mm
10 mm
10 mm
9,3 mm
9 mm
11 mm
9 mm
9,6 mm
10 mm
12 mm
7 mm
9,6 mm
11 mm
13 mm
13 mm
12,3 mm
Rata-rata
Hari ke-3
(17 Agt’ 15)
5%
1
2
3
Rata-rata
Hari ke-2
(16 Agt’ 15)
K(-)
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 6. Pengamatan Zona Hambat (mm) Ekstrak Etanol Daun Seri terhadap Pertumbuhan C. albicans
Isolat
Waktu Pengamatan
Ulangan
C.
albicans
Hari ke-1
(15 Agt’ 15)
K(+)
K(-)
1
2
3
5 mm
5 mm
-
1
2
3
5 mm
5 mm
1
2
3
5 mm
5 mm
Rata-rata
Hari ke-2
(16 Agt’ 15)
Rata-rata
Hari ke-3
(17 Agt’ 15)
Rata-rata
Konsentrasi Zona Hambat
5%
10%
15%
20%
25%
12 mm
12 mm
13 mm
11,6 mm
13 mm
13 mm
14 mm
13,6 mm
14 mm
14 mm
15 mm
14,3 mm
15 mm
15 mm
16 mm
15,3 mm
16 mm
16 mm
17 mm
16,3 mm
-
13 mm
15 mm
16 mm
7,6 mm
15 mm
16 mm
17 mm
14,6 mm
18 mm
17 mm
18 mm
16 mm
20 mm
18 mm
19 mm
17,6 mm
21 mm
19 mm
20 mm
19 mm
-
13 mm
15 mm
16 mm
14,6 mm
15 mm
16 mm
17 mm
16 mm
18 mm
17 mm
18 mm
17,6 mm
20 mm
18 mm
19 mm
19 mm
21 mm
19 mm
20 mm
20 mm
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 7. Hasil Analisa Statistik
1. Uji Duncan S. mutans
Zona_HambatS. mutans
Perlakuan
N
Subset for alpha = 0.05
1
a
Duncan
2
5%
3
11,6667
15%
3
13,6667
10%
3
15,0000
20%
3
16,0000
25%
3
18,3333
K(+)
3
28,0000
Sig.
,051
1,000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.
S. mutans
Perlakuan
K(+)
K(-)
5%
10%
15%
20%
25%
Zona Hambat (mm)
28b
11,67a
15a
13,67a
16a
18,3a
2, Uji Duncan E. coli
Zona_Hambat E. coli
Perlakuan
N
Subset for alpha = 0.05
1
a,b
Duncan
2
5%
2
7,5000
10%
3
9,3333
15%
3
9,6667
20%
3
9,6667
25%
3
12,3333
K(+)
3
Sig.
36,6667
,066
1,000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
Universitas Sumatera Utara
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 2,769.
b. The group sizes are unequal. The harmonic mean of the group
sizes is used. Type I error levels are not guaranteed.
E. coli
Perlakuan
K(+)
K(-)
5%
10%
15%
20%
25%
Zona Hambat (mm)
36,67b
7,5a
9,3a
9,67a
9,67a
12,3a
3. Uji Duncan C. albicans
Zona_Hambat C. albicans
Perlakuan
N
Subset for alpha = 0.05
1
a
2
5%
3
14,6667
10%
3
16,0000
15%
3
20%
3
25%
3
3
4
16,0000
17,6667
17,6667
Duncan
Sig.
19,0000
19,0000
20,0000
,156
,084
,156
,277
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.
C. albicans
Perlakuan
K(+)
K(-)
5%
10%
15%
20%
25%
Zona Hambat (mm)
5
14,67a
16ab
17,67bc
19cd
20d
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 8. Dokumentasi Zona Hambat
a. Pengamatan Hari 1:
S. mutans U1
E. coli U1
C. albicans U1
U3
S. mutans U2
E. coli U2
C. albicans U2
S. mutans U3
E. coli U3
C. albicans
Universitas Sumatera Utara
b. Pengamatan Hari 2:
S. mutans U1
E. coli U1
C. albicans U1
S. mutans U2
S. mutans U3
E. coli U2
E. coli U3
C. albicans U2 C. albicans U3
Universitas Sumatera Utara
c. Pengamatan Hari 3:
S. mutans U1
S. mutans U2
E. coli U1
E. coli U2
C. albicans U1
C. albicans U2
S. mutans U3
E. coli U3
C. albicans U3
Universitas Sumatera Utara