Uji Aktivitas Hipoglikemik Nano partikel Daun Temuru dan Ekstrak Etanol Daun Temuru (Murraya koenigii (L) Spreng) Terhadap Tikus Putih yang Diinduksi Aloksan Serta Aktivitas Antioksidannya
Lampiran 1. Hasil Identifikasi Tumbuhan Temuru
112
Lampiran 2. Gambar Tumbuhan Temuru
Keterangan: A. Tumbuhan temuru; B. Daun temuru
113
Lampiran 3. Bahan uji nanopartikel daun temuru
114
Lampiran 4. Mikroskopis serbuk simplisia daun temuru
Hasil pemeriksaan mikroskopik serbuk simplisia daun temuru (perbesaran 10x40)
1
2
3
4
5
6
Keterangan :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Kristal kalsium oksalat bentuk druse
Kristal kalsium oksalat bentuk poligonal
Rambut penutup
Fragmen rongga minyal lisigen
Berkas pembuluh
Stomata tipe anomositik
115
Lampiran 5. Bagan ekstraksi serbuk simplisia daun temuru
Serbuk simplisia
-Maserasi dengan etanol 96%
Bejana maserasi
-Biarkan 5 hari
-Terlindung cahaya
-Sering diaduk
Serkai
ampas
Maserat 1
Bilas dengan etanol 96%
Maserat 2
Maserat 1+2
Cukupkan sampai 100 bagian
Bejana
- Tutup bejana
- Tempat terlindung cahaya
- Biarkan 2 hari
Saring dan enaptuangkan
116
Maserat
uapkan
Ekstrak
kental
Lampiran 6. Bagan pembuatan nano partikel daun temuru
Bola-bola
penghancur
JAR/ Vial
Serbuk simplisia
daun temuru
-Tutup rapat
-Pasang pada dudukan
HEM
-nyalakan tombol elektronik
Serbuk nanopartikel
daun temuru
117
Lampiran 7. Hasil analisis morfologi daun temuru menggunakan SEM (Scanning Electron
Microscopy)
118
Lampiran 8. Hasil analisis ukuran partikel serbuk daun temuru
119
120
Lampiran 9. Persetujuan etik penelitian kesehatan
121
Lampiran 10. Perhitungan pemeriksaan karakteristik nanopartikel
dan ekstrak daun temuru
a. Perhitungan pemeriksaan karakteristik nanopartikel daun temuru
1. Perhitungan kadar air
Kadar air %=
Volume air (ml)
x 100%
Berat sampel (g)
i. Berat sampel : 5,020 g
Volume air : 0,30 ml
% Kadar air =
0,30
x 100% = 5,98%
5,020
ii. Berat sampel : 5,120 g
Volume air : 0,30 ml
% Kadar air=
0,30
x 100%=5,86%
5,120
iii. Berat sampel : 5,050 g
Volume air : 0,35 ml
% Kadar air=
0,30
x 100%=5,94%
5,050
% Kadar air rata-rata=
5,98%+5,86%+5,94%
=5,93%
3
2. Perhitungan kadar sari yang larut dalam air
Kadar sari yang larut dalam air=
i. Berat simplisia
Berat sari
Berat sari (g)
100
x
x 100%
Berat simplisia (g) 20
= 5,010 g
= 0,080 g
122
Lampiran 10. (lanjutan)
% Kadar sari larut dalam air=
ii. Berat simplisia
Berat sari
= 5,030 g
= 0,100 g
% Kadar sari larut dalam air=
iii. Berat simplisia
Berat sari
0,080 g 100
x
x 100%=7,98%
5,010 g
20
0,100 g 100
x
x 100%=9,94%
5,030 g
20
= 5,040 g
= 0,110 g
% Kadar sari larut dalam air=
0,110 g 100
x
x 100%=10,91%
5,040 g
20
% Kadar sari larut dalam air rata-rata =
7,98%+9,94%+10,91%
3
= 28,83 %
3. Perhitungan kadar sari yang larut dalam etanol
Kadar sari yang larut dalam etanol=
i. Berat simplisia
Berat sari
= 5,020 g
= 0,280 g
% Kadar sari larut dalam etanol=
ii. Berat simplisia
Berat sari
100
Berat sari (g)
x
x 100%
Berat simplisia (g) 20
= 5,050 g
= 0,290 g
123
0,280 g 100
x
x 100%=27,88%
20
5,020 g
% Kadar sari larut dalam etanol=
iii. Berat simplisia
Berat sari
0,290 g 100
x
x 100%=28,71%
5,050 g
20
= 5,000 g
= 0,260 g
Lampiran 10. (lanjutan)
% Kadar sari larut dalam etanol=
0,260 g 100
x
x 100%=26,00%
5,000 g
20
% Kadar sari larut dalam etanol rata-rata =
27,88%+28,71%+26,00%
3
=
4. Perhitungan kadar abu total
Kadar abu total=
Berat abu (g)
x 100%
Berat simplisia (g)
i. Berat simplisia
Berat abu
= 2,080 g
= 0,140 g
% Kadar abu total=
ii. Berat simplisia
Berat abu
= 2,030 g
= 0,120 g
% Kadar abu total=
iii. Berat simplisia
Berat abu
0,140 g
x 100%=6,73%
2,080 g
0,120 g
x 100%=5,91%
2,030 g
= 2,060 g
= 0,140 g
% Kadar abu total=
0,140 g
x 100%=6,79%
2,060 g
124
27,53%
% Kadar abu total rata-rata=
6,73%+5,91%+6,79%
3
= 6,48 %
Lampiran 10. (lanjutan)
5. Perhitungan kadar abu yang tidak larut dalam asam
Kadar abu idak larut dalam asam=
i. Berat simplisia
Berat abu
Berat abu (g)
x 100%
Berat simplisia (g)
= 2,027 g
= 0,020 g
% Kadar abu idak larut dalam asam=
ii. Berat simplisia
Berat abu
= 2,030 g
= 0,021 g
% Kadar abu idak larut dalam asam=
iii. Berat simplisia
Berat abu
0,020 g
x 100%=1,33%
2,027 g
0,021 g
x 100%=1,03%
2,030 g
= 2,015 g
= 0,018 g
% Kadar abu idak larut dalam asam=
0,018 g
x 100%=0,89%
2,015 g
% Kadar abu idak larut asam rata-rata=
1,33%+1,03%+0,89%
3
= 1,10 %
b. Perhitungan pemeriksaan karakteristik ekstrak etanol daun temuru
125
1. Perhitungan kadar air
Volume air (ml)
x 100%
Berat sampel (g)
Kadar air %=
i. Berat sampel : 5,120 g
Volume air : 0,35 ml
Lampiran 10. (lanjutan)
% Kadar air=
0,35
x 100%=6,84%
5,120
ii. Berat sampel : 5,100 g
Volume air : 0,35 ml
% Kadar air=
0,35
x 100%=6,86%
5,100
iii. Berat sampel : 5,120 g
Volume air : 0,35 ml
% Kadar air=
0,35
x 100%=6,84%
5,120
% Kadar air rata-rata=
6,84%+6,86%+6,84%
=6,85%
3
2. Perhitungan kadar sari yang larut dalam air
Kadar sari yang larut dalam air=
i. Berat simplisia
Berat sari
Berat sari (g)
100
x
x 100%
Berat simplisia (g) 20
= 5,050 g
= 0,320 g
% Kadar sari larut dalam air=
ii. Berat simplisia
= 5,060 g
126
0,320 g 100
x
x 100%=31,68%
20
5,050 g
Berat sari
= 0,350 g
% ����� ���� ����� ����� ��� =
= 34,58%
iii. Berat simplisia
Berat sari
0,350 � 100
�
� 100%
5,060 �
20
= 5,080 g
= 0,400 g
% Kadar sari larut dalam air=
0,400 g 100
x
x 100%=39,37%
20
5,080 g
Lampiran 10. (lanjutan)
% Kadar sari larut dalam air rata-rata =
31,68%+34,58%+39,37%
3
= 35,20 %
3. Perhitungan kadar sari yang larut dalam etanol
Kadar sari yang larut dalam etanol=
i. Berat simplisia
Berat sari
= 5,020 g
= 0,300 g
% Kadar sari larut dalam etanol=
ii. Berat simplisia
Berat sari
Berat sari
0,300 g 100
x
x 100%=29,88%
5,020 g
20
= 5,050 g
= 0,400 g
% Kadar sari larut dalam etanol=
iii. Berat simplisia
100
Berat sari (g)
x
x 100%
Berat simplisia (g) 20
0,400g 100
x
x 100%=39,60%
5,050 g
20
= 5,010 g
= 0,200 g
% Kadar sari larut dalam etanol=
0,200 g 100
x
x 100%=19,96%
20
5,010 g
127
% Kadar sari larut dalam etanol rata-rata =
29,88%+39,60%+19,96%
3
=
29,81 %
4. Perhitungan kadar abu total
Kadar abu total=
Berat abu (g)
x 100%
Berat simplisia (g)
Lampiran 10. (lanjutan)
i. Berat simplisia
Berat abu
= 2,000 g
= 0,130 g
% Kadar abu total=
ii. Berat simplisia
Berat abu
= 2,020 g
= 0,150 g
% Kadar abu total=
iii. Berat simplisia
Berat abu
0,130 g
x 100%=6,50%
2,000 g
0,150 g
x 100%=7,43%
2,020 g
= 2,000 g
= 0,150 g
% Kadar abu total=
0,150 g
x 100%=7,50%
2,000 g
% Kadar abu total rata-rata=
6,50%+7,43%+7,50%
3
= 7,14%
5. Perhitungan kadar abu yang tidak larut dalam asam
Kadar abu tidak larut dalam asam=
128
Berat abu (g)
x 100%
Berat simplisia (g)
i. Berat simplisia
Berat abu
= 2,080 g
= 0,030 g
% Kadar abu idak larut dalam asam=
ii. Berat simplisia
Berat abu
0,030 g
x 100%=1,44%
2,080 g
= 2,010 g
= 0,020 g
Lampiran 10. (lanjutan)
% Kadar abu idak larut dalam asam=
iii. Berat simplisia
Berat abu
0,020 g
x 100%=0,99%
2,010 g
= 2,060 g
= 0,030 g
% Kadar abu idak larut dalam asam=
0,030 g
x 100%=1,46%
2,060 g
% Kadar abu idak larut asam rata-rata=
1,44%+0,99%+1,46%
3
= 1,30 %
129
Lampiran 11. Contoh perhitungan dosis pada tikus
1. Perhitungan dosis aloksan 150 mg/kg bb
Aloksan selalu dibuat baru sebanyak 0,150 g dalam 15 mL NaCl 0,9%
Untuk bb tikus 200 g, maka aloksan yang disuntikkan secara intraperitoneal
adalah:
200 g = 0,2 kg 0,2 kg x 150 mg/kg bb = 30 mg
30 mg/150 mg x 15 mL = 3 mL
2. Perhitungan pemberian glukosa 50% dosis 5 g/kg bb
Glukosa 50 g dilarutkan dalam 100 mL aquadest
Untuk bb tikus 200 g, maka glukosa yang diberikan secara peroral adalah:
Untuk bb tikus 200 g = 0,2 kg 0,2 kg x 5 g/kg bb = 1 g
1 g/50 g x 100 mL = 2 mL
3. Perhitungan pemberian ekstrak etanol dan nanopartikel dosis 50 mg/kg bb
Ekstrak etanol dan nanopartikel sebanyak 0,4 g disuspensikan dalam 25 mL
suspensi Na.CMC 50%
Ekstrak etanol dan nanopartikel dosis 50 mg/kg bb
Untuk bb tikus 200 g, maka ekstrak etanol dan nanopartikel yang diberikan
adalah:
200 g = 0,2 kg 0,2 kg x 50 mg/kg bb = 10 mg/400 mg x 25 mL = 0,625 mL
4. Perhitungan pemberian akarbose 50 mg
Akarbose dibuat dengan cara mensuspensikan 200 mg akarbose dalam 50 ml
suspensi Na.CMC 0,5%.
Faktor konversi dosis manusia menjadi dosis tikus adalah 0,018
Untuk bb tikus 200 g, maka akarbose yang harus diberikan adalah
50 mg x 0,018 = 0,9 mg (untuk bb tikus 200 g)
130
0,9 mg/200 mg x 50 mL = 0,2 mL
Lampiran 11, (lanjutan)
5. Perhitungan pemberian suspensi Na.CMC 0,5%
Suspensi Na.CMC 0,5% diberikan sebanyak 1% bb.
Untuk bb tikus 200 g, maka Na.CMC 0,5% yang diberikan secara peroral
adalah:
200 g x 1% bb = 2 mL
131
Lampiran 12. Hasil uji aktivitas antioksidan
1. Nanopartikel daun temuru
Tabel data absorbansi nanopartikel daun temuru
Pengukuran
Persen Peredaman (%)
Rata-rata
Persen
Peredaman(
%)
Konsentra
si Larutan
Uji (ppm)
1
2
3
1
2
3
0
0.9673
9
0.9566
1
0.9608
1
0
0
0
0.00000
10
0.9474
0
0.9460
9
0.9257
0
2.06638
1.09972
3.65421
2.27344
50
0.7270
4
0.8722
7
0.7392
1
24.8452
0
8.81505
23.0638
7
18.90804
100
0.6951
4
0.7006
2
0.7644
8
28.1427
3
26.7743
4
22.4820
7
25.79971
200
0.5760
2
0.4730
1
0.4432
4
40.4562
8
50.5535
2
53.8680
9
48.29263
% Peredaman=
A kontrol-A sampel
x 100%
A kontrol
Keterangan : A kontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
A sampel = Absorbansi mengandung sampel
Perhitungan % peredaman nanopartikel daun temuru (Pengukuran ke-1)
- Konsentrasi 10 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0,96739-0,94740
x 100 %
0,96739
= 2.06638 %
- Konsentrasi 50 ppm
% Peredaman =
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
132
=
0.96739-0.72704
x 100 %
0.96739
= 24.84520 %
Lampiran 12. (lanjutan)
- Konsentrasi 100 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.96739-0.69514
x 100 %
0.96739
= 28.14273%
- Konsentrasi 200 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.96739-0.57602
x 100 %
0.96739
= 40.45628%
Perhitungan % peredaman nanopartikel daun temuru (Pengukuran ke-2)
- Konsentrasi 10 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.95661-0.94609
x 100 %
0.95661
= 1.09972%
- Konsentrasi 50 ppm
133
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.95661-0.87227
x 100 %
0.95661
= 8.81505%
Lampiran 12. (lanjutan)
- Konsentrasi 100 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.95661-0.70062
x 100 %
0.95661
= 26.77434%
- Konsentrasi 200 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.95661-0.47301
x 100 %
0.95661
= 50.55352%
Perhitungan % peredaman nanopartikel daun temuru (Pengukuran ke-3)
- Konsentrasi 10 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.96081-0.92570
x 100 %
0.96081
= 3.65421 %
134
- Konsentrasi 50 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.96081-0.73921
x 100 %
0.96081
= 23.06387 %
Lampiran 12. (lanjutan)
- Konsentrasi 100 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.96081-0.76448
x 100 %
0.96081
= 22.48207%
- Konsentrasi 200 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.96081-0.44324
x 100 %
0.96081
= 53.86809%
2. Ekstrak etanol daun temuru
Tabel data absorbansi ekstrak etanol daun temuru
Konsentra
si Larutan
Uji (ppm)
Pengukuran
1
2
Persen Peredaman (%)
3
1
135
2
3
Rata-rata
Persen
Peredaman(
%)
0.9500
4
0.9343
4
0.9400
2
10
0.8614
0.7992
6
0.7288
8
20
0.6576
1
0.6903
2
30
0.5796
3
40
0.4049
2
0
0
0
0
0
9.33013
14.4572 22.4612
6
2
15.41620
0.5744
3
30.7808
1
26.1168 38.8917
3
3
31.92979
0.6265
1
0.5778
8
38.9888
8
32.9462 38.5332
5
2
36.82278
0.3367
9
0.3932
2
57.3786
4
63.9542 65.7454
3
1
62.35943
% Peredaman =
A kontrol-A sampel
x 100%
A kontrol
Keterangan : A kontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
A sampel = Absorbansi mengandung sampel
Lampiran 12. (lanjutan)
Perhitungan % peredaman ekstrak etanol daun temuru (Pengukuran ke-1)
- Konsentrasi 10 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.95004-0.8614
x 100 %
0.95004
= 9.33013%
- Konsentrasi 20 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.95004-0.65761
x 100 %
0.95004
136
= 30.78081%
- Konsentrasi 30 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.95004-0.57963
x 100 %
0.95004
= 38.98888%
- Konsentrasi 40 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.95004-0.40492
x 100 %
0.95004
= 57.37864%
Lampiran 12. (lanjutan)
Perhitungan % peredaman ekstrak etanol daun temuru (Pengukuran ke-2)
- Konsentrasi 10 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.93434-0.79926
x 100 %
0.93434
= 14.45726%
- Konsentrasi 20 ppm
% Peredaman =
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
137
=
0.93434-0.69032
x 100 %
0.93434
= 26.11683%
- Konsentrasi 30 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.93434-0.62651
x 100 %
0.93434
= 32.94625%
- Konsentrasi 40 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.93434-0.33679
x 100 %
0.93434
= 63.95423%
Lampiran 12. (lanjutan)
Perhitungan % peredaman ekstrak etanol daun temuru (Pengukuran ke-3)
- Konsentrasi 10 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.94002-0.72888
x 100 %
0.94002
= 22.46122%
- Konsentrasi 20 ppm
138
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.94002-0.57443
x 100 %
0.94002
= 38.89173%
- Konsentrasi 30 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.94002-0.57788
x 100 %
0.94002
= 38.53322%
- Konsentrasi 40 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.94002-0.39322
x 100 %
0.94002
= 65.74541%
Lampiran 13. Perhitungan nilai IC50
a. Perhitungan nilai IC50 nanopartikel
X
Y
XY
X2
0
0
0
0
10
2.27
22.70
100
50
18.91
945.50
2500
100
25.80
2579.97
10000
200
48.29
9658.53
40000
139
ΣX= 360
X = 72
ΣXY= 13206,70
ΣY= 95,27
Y = 19,05
ΣX2= 52600
X = Konsentrasi (ppm)
Y = % Peredaman
a=
=
(ΣXY) - (ΣX)(ΣY)/n
(Σx2 ) - (ΣX)2 /n
(13206,70) - (360)(95,27)/5
(52600) - (360)2 /5
=
6347,26
=0,1207
52574,08
Y =
aX +b
b =
Y-aX
=
(19,05) - (0,1207)(72) = 10,36
Jadi, persamaan garis regresi Y = 0,1207X + 10,36
Nilai IC50 : Y
=
0,1207X + 10,36
50
=
0,1207X + 10,36
X
=
328,42
IC50
=
328,42 ppm
Lampiran. 13 (lanjutan)
b. Perhitungan nilai IC50 ekstrak etanol daun temuru
X
Y
XY
X2
0
0
0
0
10
15.42
154.16
100
20
31.93
638.60
400
140
30
36.82
1104.68
900
40
62.36
2494.38
1600
ΣX= 100
X = 20
ΣY= 146,53
Y = 29,31
ΣXY= 4391,82
ΣX2= 3000
X = Konsentrasi (ppm)
Y = % Peredaman
a=
=
=
(ΣXY) - (ΣX)(ΣY)/n
(Σx2 ) - (ΣX)2 /n
(4391,82) - (100)(146,53)/5
(3000) - (100)2 /5
1461,22
= 1,4612
1000
Y =
aX +b
b =
Y-aX
=
(29,31) - (1,4612)(20) = 0,086
Jadi, persamaan garis regresi Y = 1,4612X + 0,086
Nilai IC50 : Y
=
1,4612X + 0,086
50
=
1,4612X + 0,086
X
=
34,16
IC50
=
34,16 ppm
141
Lampiran 14. Hasil pengukuran kolesterol total darah tikus diabetes mellitus
142
Lampiran 14. (lanjutan)
143
Lampiran 15. Hasil analisis Tukey HSD
Lampiran 15. (lanjutan)
144
Lampiran 15. (lanjutan)
145
Lampiran 15. (lanjutan)
146
Lampiran 15. (lanjutan)
147
Lampiran 15. (lanjutan)
148
Lampiran 15. (lanjutan)
149
Lampiran 15. (lanjutan)
150
Lampiran 15. (lanjutan)
151
Lampiran 15. (lanjutan)
152
Lampiran 15. (lanjutan)
153
Lampiran 16. Uji Anaova pengaruh KGD terhadap kolesterol tikus diabetes
mellitus
154
Lampiran 17. Analisis Paired Samples Statistic
155
Lampiran 17. (lanjutan)
156
157
112
Lampiran 2. Gambar Tumbuhan Temuru
Keterangan: A. Tumbuhan temuru; B. Daun temuru
113
Lampiran 3. Bahan uji nanopartikel daun temuru
114
Lampiran 4. Mikroskopis serbuk simplisia daun temuru
Hasil pemeriksaan mikroskopik serbuk simplisia daun temuru (perbesaran 10x40)
1
2
3
4
5
6
Keterangan :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Kristal kalsium oksalat bentuk druse
Kristal kalsium oksalat bentuk poligonal
Rambut penutup
Fragmen rongga minyal lisigen
Berkas pembuluh
Stomata tipe anomositik
115
Lampiran 5. Bagan ekstraksi serbuk simplisia daun temuru
Serbuk simplisia
-Maserasi dengan etanol 96%
Bejana maserasi
-Biarkan 5 hari
-Terlindung cahaya
-Sering diaduk
Serkai
ampas
Maserat 1
Bilas dengan etanol 96%
Maserat 2
Maserat 1+2
Cukupkan sampai 100 bagian
Bejana
- Tutup bejana
- Tempat terlindung cahaya
- Biarkan 2 hari
Saring dan enaptuangkan
116
Maserat
uapkan
Ekstrak
kental
Lampiran 6. Bagan pembuatan nano partikel daun temuru
Bola-bola
penghancur
JAR/ Vial
Serbuk simplisia
daun temuru
-Tutup rapat
-Pasang pada dudukan
HEM
-nyalakan tombol elektronik
Serbuk nanopartikel
daun temuru
117
Lampiran 7. Hasil analisis morfologi daun temuru menggunakan SEM (Scanning Electron
Microscopy)
118
Lampiran 8. Hasil analisis ukuran partikel serbuk daun temuru
119
120
Lampiran 9. Persetujuan etik penelitian kesehatan
121
Lampiran 10. Perhitungan pemeriksaan karakteristik nanopartikel
dan ekstrak daun temuru
a. Perhitungan pemeriksaan karakteristik nanopartikel daun temuru
1. Perhitungan kadar air
Kadar air %=
Volume air (ml)
x 100%
Berat sampel (g)
i. Berat sampel : 5,020 g
Volume air : 0,30 ml
% Kadar air =
0,30
x 100% = 5,98%
5,020
ii. Berat sampel : 5,120 g
Volume air : 0,30 ml
% Kadar air=
0,30
x 100%=5,86%
5,120
iii. Berat sampel : 5,050 g
Volume air : 0,35 ml
% Kadar air=
0,30
x 100%=5,94%
5,050
% Kadar air rata-rata=
5,98%+5,86%+5,94%
=5,93%
3
2. Perhitungan kadar sari yang larut dalam air
Kadar sari yang larut dalam air=
i. Berat simplisia
Berat sari
Berat sari (g)
100
x
x 100%
Berat simplisia (g) 20
= 5,010 g
= 0,080 g
122
Lampiran 10. (lanjutan)
% Kadar sari larut dalam air=
ii. Berat simplisia
Berat sari
= 5,030 g
= 0,100 g
% Kadar sari larut dalam air=
iii. Berat simplisia
Berat sari
0,080 g 100
x
x 100%=7,98%
5,010 g
20
0,100 g 100
x
x 100%=9,94%
5,030 g
20
= 5,040 g
= 0,110 g
% Kadar sari larut dalam air=
0,110 g 100
x
x 100%=10,91%
5,040 g
20
% Kadar sari larut dalam air rata-rata =
7,98%+9,94%+10,91%
3
= 28,83 %
3. Perhitungan kadar sari yang larut dalam etanol
Kadar sari yang larut dalam etanol=
i. Berat simplisia
Berat sari
= 5,020 g
= 0,280 g
% Kadar sari larut dalam etanol=
ii. Berat simplisia
Berat sari
100
Berat sari (g)
x
x 100%
Berat simplisia (g) 20
= 5,050 g
= 0,290 g
123
0,280 g 100
x
x 100%=27,88%
20
5,020 g
% Kadar sari larut dalam etanol=
iii. Berat simplisia
Berat sari
0,290 g 100
x
x 100%=28,71%
5,050 g
20
= 5,000 g
= 0,260 g
Lampiran 10. (lanjutan)
% Kadar sari larut dalam etanol=
0,260 g 100
x
x 100%=26,00%
5,000 g
20
% Kadar sari larut dalam etanol rata-rata =
27,88%+28,71%+26,00%
3
=
4. Perhitungan kadar abu total
Kadar abu total=
Berat abu (g)
x 100%
Berat simplisia (g)
i. Berat simplisia
Berat abu
= 2,080 g
= 0,140 g
% Kadar abu total=
ii. Berat simplisia
Berat abu
= 2,030 g
= 0,120 g
% Kadar abu total=
iii. Berat simplisia
Berat abu
0,140 g
x 100%=6,73%
2,080 g
0,120 g
x 100%=5,91%
2,030 g
= 2,060 g
= 0,140 g
% Kadar abu total=
0,140 g
x 100%=6,79%
2,060 g
124
27,53%
% Kadar abu total rata-rata=
6,73%+5,91%+6,79%
3
= 6,48 %
Lampiran 10. (lanjutan)
5. Perhitungan kadar abu yang tidak larut dalam asam
Kadar abu idak larut dalam asam=
i. Berat simplisia
Berat abu
Berat abu (g)
x 100%
Berat simplisia (g)
= 2,027 g
= 0,020 g
% Kadar abu idak larut dalam asam=
ii. Berat simplisia
Berat abu
= 2,030 g
= 0,021 g
% Kadar abu idak larut dalam asam=
iii. Berat simplisia
Berat abu
0,020 g
x 100%=1,33%
2,027 g
0,021 g
x 100%=1,03%
2,030 g
= 2,015 g
= 0,018 g
% Kadar abu idak larut dalam asam=
0,018 g
x 100%=0,89%
2,015 g
% Kadar abu idak larut asam rata-rata=
1,33%+1,03%+0,89%
3
= 1,10 %
b. Perhitungan pemeriksaan karakteristik ekstrak etanol daun temuru
125
1. Perhitungan kadar air
Volume air (ml)
x 100%
Berat sampel (g)
Kadar air %=
i. Berat sampel : 5,120 g
Volume air : 0,35 ml
Lampiran 10. (lanjutan)
% Kadar air=
0,35
x 100%=6,84%
5,120
ii. Berat sampel : 5,100 g
Volume air : 0,35 ml
% Kadar air=
0,35
x 100%=6,86%
5,100
iii. Berat sampel : 5,120 g
Volume air : 0,35 ml
% Kadar air=
0,35
x 100%=6,84%
5,120
% Kadar air rata-rata=
6,84%+6,86%+6,84%
=6,85%
3
2. Perhitungan kadar sari yang larut dalam air
Kadar sari yang larut dalam air=
i. Berat simplisia
Berat sari
Berat sari (g)
100
x
x 100%
Berat simplisia (g) 20
= 5,050 g
= 0,320 g
% Kadar sari larut dalam air=
ii. Berat simplisia
= 5,060 g
126
0,320 g 100
x
x 100%=31,68%
20
5,050 g
Berat sari
= 0,350 g
% ����� ���� ����� ����� ��� =
= 34,58%
iii. Berat simplisia
Berat sari
0,350 � 100
�
� 100%
5,060 �
20
= 5,080 g
= 0,400 g
% Kadar sari larut dalam air=
0,400 g 100
x
x 100%=39,37%
20
5,080 g
Lampiran 10. (lanjutan)
% Kadar sari larut dalam air rata-rata =
31,68%+34,58%+39,37%
3
= 35,20 %
3. Perhitungan kadar sari yang larut dalam etanol
Kadar sari yang larut dalam etanol=
i. Berat simplisia
Berat sari
= 5,020 g
= 0,300 g
% Kadar sari larut dalam etanol=
ii. Berat simplisia
Berat sari
Berat sari
0,300 g 100
x
x 100%=29,88%
5,020 g
20
= 5,050 g
= 0,400 g
% Kadar sari larut dalam etanol=
iii. Berat simplisia
100
Berat sari (g)
x
x 100%
Berat simplisia (g) 20
0,400g 100
x
x 100%=39,60%
5,050 g
20
= 5,010 g
= 0,200 g
% Kadar sari larut dalam etanol=
0,200 g 100
x
x 100%=19,96%
20
5,010 g
127
% Kadar sari larut dalam etanol rata-rata =
29,88%+39,60%+19,96%
3
=
29,81 %
4. Perhitungan kadar abu total
Kadar abu total=
Berat abu (g)
x 100%
Berat simplisia (g)
Lampiran 10. (lanjutan)
i. Berat simplisia
Berat abu
= 2,000 g
= 0,130 g
% Kadar abu total=
ii. Berat simplisia
Berat abu
= 2,020 g
= 0,150 g
% Kadar abu total=
iii. Berat simplisia
Berat abu
0,130 g
x 100%=6,50%
2,000 g
0,150 g
x 100%=7,43%
2,020 g
= 2,000 g
= 0,150 g
% Kadar abu total=
0,150 g
x 100%=7,50%
2,000 g
% Kadar abu total rata-rata=
6,50%+7,43%+7,50%
3
= 7,14%
5. Perhitungan kadar abu yang tidak larut dalam asam
Kadar abu tidak larut dalam asam=
128
Berat abu (g)
x 100%
Berat simplisia (g)
i. Berat simplisia
Berat abu
= 2,080 g
= 0,030 g
% Kadar abu idak larut dalam asam=
ii. Berat simplisia
Berat abu
0,030 g
x 100%=1,44%
2,080 g
= 2,010 g
= 0,020 g
Lampiran 10. (lanjutan)
% Kadar abu idak larut dalam asam=
iii. Berat simplisia
Berat abu
0,020 g
x 100%=0,99%
2,010 g
= 2,060 g
= 0,030 g
% Kadar abu idak larut dalam asam=
0,030 g
x 100%=1,46%
2,060 g
% Kadar abu idak larut asam rata-rata=
1,44%+0,99%+1,46%
3
= 1,30 %
129
Lampiran 11. Contoh perhitungan dosis pada tikus
1. Perhitungan dosis aloksan 150 mg/kg bb
Aloksan selalu dibuat baru sebanyak 0,150 g dalam 15 mL NaCl 0,9%
Untuk bb tikus 200 g, maka aloksan yang disuntikkan secara intraperitoneal
adalah:
200 g = 0,2 kg 0,2 kg x 150 mg/kg bb = 30 mg
30 mg/150 mg x 15 mL = 3 mL
2. Perhitungan pemberian glukosa 50% dosis 5 g/kg bb
Glukosa 50 g dilarutkan dalam 100 mL aquadest
Untuk bb tikus 200 g, maka glukosa yang diberikan secara peroral adalah:
Untuk bb tikus 200 g = 0,2 kg 0,2 kg x 5 g/kg bb = 1 g
1 g/50 g x 100 mL = 2 mL
3. Perhitungan pemberian ekstrak etanol dan nanopartikel dosis 50 mg/kg bb
Ekstrak etanol dan nanopartikel sebanyak 0,4 g disuspensikan dalam 25 mL
suspensi Na.CMC 50%
Ekstrak etanol dan nanopartikel dosis 50 mg/kg bb
Untuk bb tikus 200 g, maka ekstrak etanol dan nanopartikel yang diberikan
adalah:
200 g = 0,2 kg 0,2 kg x 50 mg/kg bb = 10 mg/400 mg x 25 mL = 0,625 mL
4. Perhitungan pemberian akarbose 50 mg
Akarbose dibuat dengan cara mensuspensikan 200 mg akarbose dalam 50 ml
suspensi Na.CMC 0,5%.
Faktor konversi dosis manusia menjadi dosis tikus adalah 0,018
Untuk bb tikus 200 g, maka akarbose yang harus diberikan adalah
50 mg x 0,018 = 0,9 mg (untuk bb tikus 200 g)
130
0,9 mg/200 mg x 50 mL = 0,2 mL
Lampiran 11, (lanjutan)
5. Perhitungan pemberian suspensi Na.CMC 0,5%
Suspensi Na.CMC 0,5% diberikan sebanyak 1% bb.
Untuk bb tikus 200 g, maka Na.CMC 0,5% yang diberikan secara peroral
adalah:
200 g x 1% bb = 2 mL
131
Lampiran 12. Hasil uji aktivitas antioksidan
1. Nanopartikel daun temuru
Tabel data absorbansi nanopartikel daun temuru
Pengukuran
Persen Peredaman (%)
Rata-rata
Persen
Peredaman(
%)
Konsentra
si Larutan
Uji (ppm)
1
2
3
1
2
3
0
0.9673
9
0.9566
1
0.9608
1
0
0
0
0.00000
10
0.9474
0
0.9460
9
0.9257
0
2.06638
1.09972
3.65421
2.27344
50
0.7270
4
0.8722
7
0.7392
1
24.8452
0
8.81505
23.0638
7
18.90804
100
0.6951
4
0.7006
2
0.7644
8
28.1427
3
26.7743
4
22.4820
7
25.79971
200
0.5760
2
0.4730
1
0.4432
4
40.4562
8
50.5535
2
53.8680
9
48.29263
% Peredaman=
A kontrol-A sampel
x 100%
A kontrol
Keterangan : A kontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
A sampel = Absorbansi mengandung sampel
Perhitungan % peredaman nanopartikel daun temuru (Pengukuran ke-1)
- Konsentrasi 10 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0,96739-0,94740
x 100 %
0,96739
= 2.06638 %
- Konsentrasi 50 ppm
% Peredaman =
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
132
=
0.96739-0.72704
x 100 %
0.96739
= 24.84520 %
Lampiran 12. (lanjutan)
- Konsentrasi 100 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.96739-0.69514
x 100 %
0.96739
= 28.14273%
- Konsentrasi 200 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.96739-0.57602
x 100 %
0.96739
= 40.45628%
Perhitungan % peredaman nanopartikel daun temuru (Pengukuran ke-2)
- Konsentrasi 10 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.95661-0.94609
x 100 %
0.95661
= 1.09972%
- Konsentrasi 50 ppm
133
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.95661-0.87227
x 100 %
0.95661
= 8.81505%
Lampiran 12. (lanjutan)
- Konsentrasi 100 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.95661-0.70062
x 100 %
0.95661
= 26.77434%
- Konsentrasi 200 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.95661-0.47301
x 100 %
0.95661
= 50.55352%
Perhitungan % peredaman nanopartikel daun temuru (Pengukuran ke-3)
- Konsentrasi 10 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.96081-0.92570
x 100 %
0.96081
= 3.65421 %
134
- Konsentrasi 50 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.96081-0.73921
x 100 %
0.96081
= 23.06387 %
Lampiran 12. (lanjutan)
- Konsentrasi 100 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.96081-0.76448
x 100 %
0.96081
= 22.48207%
- Konsentrasi 200 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.96081-0.44324
x 100 %
0.96081
= 53.86809%
2. Ekstrak etanol daun temuru
Tabel data absorbansi ekstrak etanol daun temuru
Konsentra
si Larutan
Uji (ppm)
Pengukuran
1
2
Persen Peredaman (%)
3
1
135
2
3
Rata-rata
Persen
Peredaman(
%)
0.9500
4
0.9343
4
0.9400
2
10
0.8614
0.7992
6
0.7288
8
20
0.6576
1
0.6903
2
30
0.5796
3
40
0.4049
2
0
0
0
0
0
9.33013
14.4572 22.4612
6
2
15.41620
0.5744
3
30.7808
1
26.1168 38.8917
3
3
31.92979
0.6265
1
0.5778
8
38.9888
8
32.9462 38.5332
5
2
36.82278
0.3367
9
0.3932
2
57.3786
4
63.9542 65.7454
3
1
62.35943
% Peredaman =
A kontrol-A sampel
x 100%
A kontrol
Keterangan : A kontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
A sampel = Absorbansi mengandung sampel
Lampiran 12. (lanjutan)
Perhitungan % peredaman ekstrak etanol daun temuru (Pengukuran ke-1)
- Konsentrasi 10 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.95004-0.8614
x 100 %
0.95004
= 9.33013%
- Konsentrasi 20 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.95004-0.65761
x 100 %
0.95004
136
= 30.78081%
- Konsentrasi 30 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.95004-0.57963
x 100 %
0.95004
= 38.98888%
- Konsentrasi 40 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.95004-0.40492
x 100 %
0.95004
= 57.37864%
Lampiran 12. (lanjutan)
Perhitungan % peredaman ekstrak etanol daun temuru (Pengukuran ke-2)
- Konsentrasi 10 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.93434-0.79926
x 100 %
0.93434
= 14.45726%
- Konsentrasi 20 ppm
% Peredaman =
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
137
=
0.93434-0.69032
x 100 %
0.93434
= 26.11683%
- Konsentrasi 30 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.93434-0.62651
x 100 %
0.93434
= 32.94625%
- Konsentrasi 40 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.93434-0.33679
x 100 %
0.93434
= 63.95423%
Lampiran 12. (lanjutan)
Perhitungan % peredaman ekstrak etanol daun temuru (Pengukuran ke-3)
- Konsentrasi 10 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.94002-0.72888
x 100 %
0.94002
= 22.46122%
- Konsentrasi 20 ppm
138
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.94002-0.57443
x 100 %
0.94002
= 38.89173%
- Konsentrasi 30 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.94002-0.57788
x 100 %
0.94002
= 38.53322%
- Konsentrasi 40 ppm
% Peredaman =
=
A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol
0.94002-0.39322
x 100 %
0.94002
= 65.74541%
Lampiran 13. Perhitungan nilai IC50
a. Perhitungan nilai IC50 nanopartikel
X
Y
XY
X2
0
0
0
0
10
2.27
22.70
100
50
18.91
945.50
2500
100
25.80
2579.97
10000
200
48.29
9658.53
40000
139
ΣX= 360
X = 72
ΣXY= 13206,70
ΣY= 95,27
Y = 19,05
ΣX2= 52600
X = Konsentrasi (ppm)
Y = % Peredaman
a=
=
(ΣXY) - (ΣX)(ΣY)/n
(Σx2 ) - (ΣX)2 /n
(13206,70) - (360)(95,27)/5
(52600) - (360)2 /5
=
6347,26
=0,1207
52574,08
Y =
aX +b
b =
Y-aX
=
(19,05) - (0,1207)(72) = 10,36
Jadi, persamaan garis regresi Y = 0,1207X + 10,36
Nilai IC50 : Y
=
0,1207X + 10,36
50
=
0,1207X + 10,36
X
=
328,42
IC50
=
328,42 ppm
Lampiran. 13 (lanjutan)
b. Perhitungan nilai IC50 ekstrak etanol daun temuru
X
Y
XY
X2
0
0
0
0
10
15.42
154.16
100
20
31.93
638.60
400
140
30
36.82
1104.68
900
40
62.36
2494.38
1600
ΣX= 100
X = 20
ΣY= 146,53
Y = 29,31
ΣXY= 4391,82
ΣX2= 3000
X = Konsentrasi (ppm)
Y = % Peredaman
a=
=
=
(ΣXY) - (ΣX)(ΣY)/n
(Σx2 ) - (ΣX)2 /n
(4391,82) - (100)(146,53)/5
(3000) - (100)2 /5
1461,22
= 1,4612
1000
Y =
aX +b
b =
Y-aX
=
(29,31) - (1,4612)(20) = 0,086
Jadi, persamaan garis regresi Y = 1,4612X + 0,086
Nilai IC50 : Y
=
1,4612X + 0,086
50
=
1,4612X + 0,086
X
=
34,16
IC50
=
34,16 ppm
141
Lampiran 14. Hasil pengukuran kolesterol total darah tikus diabetes mellitus
142
Lampiran 14. (lanjutan)
143
Lampiran 15. Hasil analisis Tukey HSD
Lampiran 15. (lanjutan)
144
Lampiran 15. (lanjutan)
145
Lampiran 15. (lanjutan)
146
Lampiran 15. (lanjutan)
147
Lampiran 15. (lanjutan)
148
Lampiran 15. (lanjutan)
149
Lampiran 15. (lanjutan)
150
Lampiran 15. (lanjutan)
151
Lampiran 15. (lanjutan)
152
Lampiran 15. (lanjutan)
153
Lampiran 16. Uji Anaova pengaruh KGD terhadap kolesterol tikus diabetes
mellitus
154
Lampiran 17. Analisis Paired Samples Statistic
155
Lampiran 17. (lanjutan)
156
157