1 2 3 4 5 6 7
Gambar 3. Analisis SDS-PAGE berbagai konsentrasi protein transforman kedelai cp-SMV Keterangan sumur nomor :
1. 5 uM protein dari 2 g sampel 5. 12 uM protein dari 5 g sampel
2. 10 uM protein dari 2 g sampel 6. 24 uM protein dari 5 g sampel
3. 15 uM protein dari 2 g sampel 7. 36 uM protein dari 5 g sampel
4. 3 uM coat protein SMV
Menurut Tang dan Tian 2003 untuk pengujian western blotting cukup digunakan sampel 1 gram dari kalus segar transgenik loblolly pine dengan konsentrasi 10 uM. Dari
Gambar 3 tampak bahwa pada transgenik kedelai cp-SMV diperlukan sampel seberat 2 gram kalus untuk mendapatkan pita-pita protein yang cukup untuk dianalisis secara SDS-
PAGE dengan jumlah protein 10 uM. Isolasi protein dari 6 transforman dengan berat sampel masing-masing 2 gram, hasilnya tersaji pada Tabel 2.
Tabel 2. Rerata konsentrasi dan jumlah total protein dari enam transforman kedelai cp-SMV
Transforman Konsentrasi protein
mgml Jumlah Total
Protein Non transforman
13,97 4,89
S11 13,04
5,22 S17
15,65 8,61
24 14,71
6,62 33
15,59 8,57
35 15,78
7,10 40
16,34 8,17
Hasil isolasi protein dari berat sampel yang sama ternyata menghasilkan jumlah protein yang berbeda. Hal tersebut selain dipengaruhi oleh kandungan protein dalam
masing-masing transforman, juga oleh sifat kalus yang mempengaruhi isolasi protein. Jumlah protein yang diperoleh dari enam transforman berkisar antara 4,89 – 8,61 mg
dengan konsentrasi sebesar 13,04 – 16, 34 mgml. Dari 2 gram kalus transforman S17, 33 dan 40 diperoleh protein dalam jumlah banyak dengan konsentrasi tinggi. Sementara dari
2 gram kalus non transforman diperoleh protein dalam jumlah yang cenderung lebih sedikit. Hasil analisis SDS-PAGE berbagai transforman kedelai cp-SMV tersaji pada
Gambar 4.
1 2 3 4 5 6 7 8
Gambar 4. Analisis SDS-PAGE berbagai konsentrasi protein transforman kedelai cp-SMV Keterangan sumur nomor :
1. 27,9 uM protein non transforman 5. 29,4 uM protein transforman 24 2. 10,0 uM coat protein SMV
