Sifat Antibakteri Hasil Hidrolisis Minyak Kelapa Murni Terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli

  Lampiran 1. Minyak kelapa murni yang digunakan dalam penelitian

  Lampiran 2. Perhitungan bilangan penyabunan total minyak kelapa murni

  1. Pembakuan HCl untuk penentuan bilangan penyabunan total Perhitungan Pembakuan miligrek Na CO = miligrek HCl

  2

  3

  mg / BE N = ml

  Data Pembakuan HCl No. Berat Na CO (mg) Volume titrasi (ml)

  2

  3

  1. 254 9,2 2. 253 8,7 3. 252 9,0

  Normalitas rata-rata: N1 + N2

  =

  2 N1 + N2 Deviasi = x 100%

   N

  Normalitas rata-rata HCl No. Normalitas Normalitas rata-rata Deviasi

  (N) (N) (%) 1. 0,5210 0,5349 2,60 2. 0,5488 0,5247 0,70 3. 0,5284 0,5386 1,89

  Jadi Normalitas HCl adalah 0,5247 N

  2. Pembakuan NaOH metanol untuk penyabunan total miligrek NaOH = miligrek HCl

  V NaOH x N NaOH =

  V HCl x N HCl N NaOH =

  V HCl x N HCl

  V NaOH Data Pembakuan NaOH metanol Normalitas rata-rata:

  N1 + N2 =

  2 N1 + N2 Deviasi = x 100%

   N

  Normalitas rata-rata NaOH metanol No. Normalitas

  (N) Normalitas rata-rata

  (N) Deviasi

  (%) 1. 0,4932 0,4959 0,54 2. 0,4985 0,4959 0,52 3. 0,4985 0,4985 0,00

  Jadi normalitas NaOH metanol adalah 0,4985 N No. Volume

  NaOH metanol (ml) Volume

  HCl 0,5247 N (ml) 1. 10 9,4 2. 10 9,5 3. 10 9,5

  3. Perhitungan Bilangan Penyabunan Berat sampel (minyak kelapa murni) = 5,011 gram Volume HCl 0,5247 N = 3,3 ml Volume NaOH metanol 0,4985 N = 50 ml mili ekivalen NaOH awal = V x N NaOH

  = 50 ml x 0,4985 N = 24,925 mmol mili ekivalen NaOH yang bereaksi dengan HCl = V x N HCl

  = 3,3 ml x 0,5247 N = 1,7315 mmol mili ekivalen NaOH yang bereaksi dengan minyak kelapa murni

  = 24,925 mmol – 1,7315 mmol = 23,1935 mmol mg NaOH yang bereaksi = mili ekivalen x Mr

  = 23,1935 mmol x 40 gram/mol = 23,1935 mmol x 40 mg/mol = 927,74 mg

  1 Bilangan Penyabunan = x mg NaOH gram minyak

  1 = x 927,74 5,001 = 185,14 mg NaOH/gram minyak

  Lampiran 3. Perhitungan jumlah NaOH metanol yang digunakan dalam hidrolisis metode penyabunan

1. Penyabunan 25%

  Pembakuan NaOH metanol untuk penyabunan Perhitungan pembakuan: miligrek NaOH = miligrek HCl

  V NaOH x N NaOH = V HCl x N HCl N NaOH = V HCl x N HCl

  V NaOH Data Pembakuan NaOH metanol

  No. Volume Volume NaOH metanol (ml) HCl 0,5247 N (ml) 1. 10 9,7 2. 10 9,6 3. 10 9,8

  Normalitas rata-rata: N1 + N2

  =

  2 N1 + N2 Deviasi = x 100%

   N

  Data normalitas rata-rata NaOH metanol untuk penyabunan 25% No. Normalitas Normalitas rata-rata Deviasi

  (N) (N) (%) 1. 0,5089 0,5063 0,51 2. 0,5037 0,5115 0,53 3. 0,5142 0,5089 1,04

  Jadi Normalitas NaOH metanol adalah 0,5063 N

  Volume NaOH metanol yang ditambahkan untuk hidrolisis 25% Minyak kelapa murni yang disabunkan = 100,169 gram NaOH = 185,14 mg/gram minyak Jumlah NaOH metanol yang ditambahkan

  = 25% x 185,14 mg/gram minyak x 100,169 gram minyak

  25 = x 185,14 mg/gram minyak x 100,69 gram minyak 100 = 4636,32 mg NaOH mol NaOH = 4636,32 mg/ (40 gram/mol) = 4636,32 mg / (40 mg/mmol) = 115,908 mmol

  Volume NaOH = mol / N = 115,908 mmol / 0,5063 N = 228,93 ml ~ 229 ml

  HCl yang ditambahkan setelah penyabunan untuk melepaskan alkali dari asam lemak bebas = V NaOH x N NaOH / N HCl = 229 ml x 0,5063 N / 0,5247 N = 220,97 ml ~ 221 ml

2. Penyabunan 50%

  Pembakuan HCl untuk pembakuan NaOH metanol Perhitungan Pembakuan miligrek Na

  3

  = miligrek HCl mg / BE N = ml

2 CO

  Data Pembakuan HCl 0,5 N No. Berat Na

  3

  (mg) Volume titrasi 1. 221 8,6 2. 210 8,3 3. 215 8,4

2 CO

  2 N1 + N2 Deviasi = x 100%

  Normalitas rata-rata HCl No. Normalitas

  (N) Normalitas rata-rata

  (N) Deviasi

  (%) 1. 0,4850 0,4813 0,77% 2. 0,4775 0,4880 0,21% 3. 0,4830 0,4803 0,56%

  Jadi Normalitas HCl adalah 0,4880 N

  =

  Normalitas rata-rata: N1 + N2

   N Pembakuan NaOH metanol untuk penyabunan 50% Perhitungan pembakuan: miligrek NaOH = miligrek HCl

  V NaOH x N NaOH = V HCl x N HCl N NaOH =V HCl x N HCl

  V NaOH Data Pembakuan NaOH metanol untuk penyabunan 50% Normalitas rata-rata:

  N1 + N2 =

  2 N1 + N2 Deviasi = x 100%

   N

  Data normalitas rata-rata NaOH metanol untuk penyabunan 50% No. Normalitas

  (N) Normalitas rata-rata

  (N) Deviasi

  (%) 1. 0,4743 0,4815 1,50% 2. 0,4888 0,4880 2,00% 3. 0,4937 0,4913 0,49%

  Jadi Normalitas NaOH metanol adalah 0,4913 N No. Volume

  NaOH metanol (ml) Volume

  HCl 0,4840 N (ml) 1. 10 9,8 2. 10 10,1 3. 10 10,2 Volume NaOH metanol yang ditambahkan untuk hidrolisis 50% Minyak kelapa murni yang disabunkan = 100,43 gram NaOH = 185,14 mg/gram minyak Jumlah NaOH metanol yang ditambahkan

  = 50% x 185,14 mg/gram minyak x 100,43 gram minyak = x 185,14 mg/gram minyak x 100,43 gram minyak = 9296,81 mg NaOH mol NaOH = 9296,81 mg / (40 gram/mol) = 9296,81 mg / (40 mg/mmol) = 232,42 mmol

  Volume NaOH = mol / N = 232,42 mmol / 0,4913 N = 473,07 ml ~ 473 ml

  HCl yang ditambahkan setelah penyabunan untuk melepaskan alkali dari asam lemak bebas = V NaOH x N NaOH / N HCl = 473 ml x 0,4913 N / 0,4840 N = 480,13 ml ~ 480 ml

3. Penyabunan 75%

  Pembakuan NaOH metanol untuk penyabunan Perhitungan pembakuan: miligrek NaOH = miligrek HCl

  V NaOH x N NaOH = V HCl x N HCl N NaOH = V HCl x N HCl

  V NaOH Data Pembakuan NaOH methanol untuk penyabunan 75% No. Volume Volume

  NaOH metanol (ml) HCl 0,4880 N (ml) 1. 10 20,3 2. 10 20,25 3. 10 20,3 Normalitas rata-rata:

  N1 + N2 =

  2 N1 + N2 Deviasi = x 100%

   N

  Data normalitas rata-rata NaOH metanol untuk penyabunan 75% No. Normalitas Normalitas rata-rata Deviasi

  (N) (N) (%) 1. 0,9825 0,9813 0,12% 2. 0,9801 0,9825 0,00% 3. 0,9825 0,9813 0,12%

  Jadi Normalitas NaOH metanol adalah 0,9825 N Volume NaOH metanol yang ditambahkan untuk hidrolisis 75% Minyak kelapa murni yang disabunkan = 100,043 gram NaOH = 185,14 mg/gram minyak Jumlah NaOH yang ditambahkan

  = 75% x 185,14 mg/gram minyak x 100,043 gram minyak = x 185,14 mg/gram minyak x 100,043 gram minyak = 13891,47 mg NaOH mol NaOH = 13891,47 mg / (40 gram/mol) = 13891,47 mg / (40 mg/mmol = 347,29 mmol

  Volume NaOH = mol / N = 347,29 mmol / 0,9825 N = 353,47 ml ~ 353 ml

  HCl yang ditambahkan setelah penyabunan untuk melepaskan alkali dari asam lemak bebas = V NaOH x N NaOH / N HCl = 353 ml x 0,9825 N / 0,4840 N = 716,53 ml ~ 717 ml

4. Penyabunan 100%

  Pembakuan NaOH metanol untuk penyabunan Perhitungan pembakuan: miligrek NaOH = miligrek HCl

  V NaOH x N NaOH = V HCl x N HCl N NaOH = V HCl x N HCl

  V NaOH Data Pembakuan NaOH metanol untuk penyabunan 100%

  No. Volume Volume NaOH metanol (ml) HCl 0,4840 N (ml) 1. 10 20,1 2. 10 20,25 3. 10 20,15 Normalitas rata-rata: N1 + N2

  =

  2 N1 + N2 Deviasi = x 100%

   N

  Data normalitas rata-rata NaOH metanol untuk penyabunan 100% No. Normalitas

  (N) Normalitas rata-rata

  (N) Deviasi

  (%) 1. 0,9728 0,9765 0,38% 2. 0,9801 0,9726 0,03% 3. 0,9723 0,9762 0,40%

  Jadi Normalitas NaOH metanol = 0,9726 N Volume NaOH metanol yang ditambahkan untuk hidrolisis 100% Minyak kelapa murni yang disabunkan = 100,28 gram NaOH = 185,14 mg/gram minyak Jumlah NaOH yang ditambahkan

  = 100% x 185,14 mg/gram minyak x 100,28 gram minyak = x 185,14 mg/gram minyak x 100,28 gram minyak = 18565,84 mg NaOH mol NaOH = 18565,84 mg / (40 gram/mol) = 18565,84 mg / (40 mg/mmol) = 464,15 mmol

  Volume NaOH = mol / N = 464,15 mmol / 0,9726 N = 477,23 ml ~ 477ml

  HCl yang ditambahkan setelah penyabunan untuk melepaskan alkali dari asam lemak bebas = V NaOH x N NaOH / N HCl = 477 ml x 0,9726 N / 0,4840 N = 958,53 ml ~ 956 ml

  Jadi NaOH metanol dan HCl yang diperlukan adalah sebagai berikut: No Penambahan

  NaOH Normalitas

  NaOH metanol (N)

  NaOH metanol (ml)

  HCl 0,5 N (ml)

  1. 25% 0,5063 229 221 2. 50% 0,4913 473 480 3. 75% 0,9825 353 717 4. 100% 0,9726 477 959

  Lampiran 4. Perhitungan Bilangan Asam

   N

  A x N x BM KOH Bilangan Asam =

  Jadi Normalitas pembakuan KOH adalah 0,0988 N Perhitungan bilangan asam

  (%) 1. 0,0989 0,0988 0,10 2. 0,0986 0,0990 0,20 3. 0,0992 0,0989 0,30

  (N) Deviasi

  (N) Normalitas rata-rata

  Data normalitas rata-rata KOH NO Normalitas

  2 N1 + N2 Deviasi = x 100%

  1. Pembakuan KOH untuk penetapan bilangan asam miligrek K.Biftalat = miligrek KOH = V x N KOH

  =

  Normalitas rata-rata: N1 + N2

  (N) 1. 315 15,6 0,0989 2. 310 15,4 0,0986 3. 320 15,8 0,0992

  (ml) Normalitas

  (mg) Volume Titrasi (V)

  Data pembakuan KOH NO Massa K. Biftalat

  G Keterangan: ml = Volume titrasi N = NormalitasKOH BM KOH = 56,1 G = berat minyak yang diuji

  2. Perhitungan Bilangan Asam Minyak Kelapa Murni Data perhitungan bilangan asam minyak kelapa murni

  No Minyak kelapa murni (gram)

  Volume titrasi (ml)

  Bilangan Asam (mg KOH/g minyak)

  1. 5,027 0,6 0,66 2. 5,043 0,6 0,66 3. 5,012 0,5 0,55

  3. Perhitungan Bilangan Asam Hasil Hidrolisis Minyak Kelapa Murni Variasi

  NaOH metanol No. Minyak kelapa murni

  (gram) Volume titrasi

  (ml) Bilangan Asam

  (mg KOH/g minyak Normalitas KOH = 0,0988 N

  25% 1. 5,024 54,4 60,02 2. 5,051 55 60,35 3. 5,090 55 61,20

  50% 1. 5,057 129,4 141,82 2. 5,112 131,1 142,14 3. 5,008 128,2 141,89

  75% 1. 5,128 161,5 174,56 2. 5,207 162,2 172,66 3. 5,092 160,1 174,27

  100% 1. 5,097 232,4 252,72 2. 5,021 232,1 256,21 3. 5,087 232,9 253,76

  Lampiran 5. Gambar Angka Lempeng Total Bakteri Uji

  1. Bakteri Staphylococcus aureus A B D C F E

  Keterangan: (A) Blanko (B) Campuran whipped cream dengan minyak kelapa murni (C) Campuran whipped cream dengan hasil hidrolisis minyak kelapa murni 25% (D) Campuran whipped cream dengan hasil hidrolisis minyak kelapa murni 50% (E) Campuran whipped cream dengan hasil hidrolisis minyak kelapa murni 75% (F) Campuran whipped cream dengan hasil hidrolisis minyak kelapa murni 100%

2. Bakteri Escherichia coli

  B A C D E F Keterangan: (A) Blanko (B) Campuran whipped cream dengan minyak kelapa murni (C) Campuran whipped cream dengan hasil hidrolisis minyak kelapa murni 25% (D) Campuran whipped cream dengan hasil hidrolisis minyak kelapa murni 50% (E) Campuran whipped cream dengan hasil hidrolisis minyak kelapa murni 75% (F) Campuran whipped cream dengan hasil hidrolisis minyak kelapa murni 100%

  Lampiran 6. Sifat Antibakteri Minyak Kelapa Murni dan Hasil Hidrolisis Minyak Kelapa Murni dalam Whipped Cream

  1. Bakteri Staphylococcus aureus No Perlakuan Kosentrasi Jumlah koloni yang tumbuh Rata-rata hidrolisis (cfu) (cfu)

  I II

  III

  

5

  5

  5

  5

  1. Blanko 51x10 51x10 51x10 51x10

  

5

  5

  5

  5

  2. Minyak kelapa murni 32x10 32x10 30x10 31x10

  

5

  5

  5

  5

  3. Minyak kelapa murni 25x10 24x10 26x10 25x10 hidrolisis 25%

  

5

  5

  5

  5

  4. Minyak kelapa murni 20x10 20x10 18x10 19x10 hidrolisis 50%

  5. Minyak kelapa murni

• hidrolisis 75%

  6. Minyak kelapa murni

• hidrolisis 100%

  2. Bakteri Escherichia coli No Perlakuan Kosentrasi Jumlah koloni yang tumbuh Rata-rata hidrolisis (cfu) (cfu)

  I II

  III

  5

  5

  5

  5

  1. Blanko 60x10 55x10 59x10 58x10

  5

  5

  5

  5

  2. Minyak kelapa murni 55x10 55x10 56x10 55x10

  5

  5

  5

  5

  3. Minyak kelapa murni 50x10 52x10 48x10 50x10 hidrolisis 25%

  5

  5

  5

  5

  4. Minyak kelapa murni 39x10 39x10 40x10 39x10 hidrolisis 50%

  5

  5

  5

  5

  5. Minyak kelapa murni 28x10 31x10 28x10 29x10 hidrolisis 75%

  5

  5

  5

  5

  6. Minyak kelapa murni 25x10 27x10 27x10 26x10 hidrolisis 100%

  Lampiran 7. Grafik Sifat Antibakteri Minyak Kelapa Murni dan Hasil Hidrolisis Minyak Kelapa Murni dalam Whipped Cream

  1. Bakteri Staphylococcus aureus

  10

  20

  30

  40

  50

  60 Blanko M inyak kelapa m urni 25% 50% 75% 100% koloni bakt eri 10 ⁵ Konsent rasi hidrolisis

  2. Bakteri Escherichia coli

  10

  20

  30

  40

  50

  60

  70 Blanko M inyak kelapa mur ni 25% 50% 75% 100% ^{koloni bakteri 10 5} Konsentr asi hidrolisis