AKTIVITAS ANTIPIGMENTASI EKSTRAK METANOL DAN ETIL ASETAT Sargassum crassifolium DAN Gracilaria etil asetat.
(2)
Lampiran 1. Preparasi Larutan Uji
1. Preparasi Larutan Uji Aktivitas Tirosinase
2. Persiapan larutan Uji Inhibisi Tirosinase Larutan Buffer Fosfat 0,05 M
Larutan L-tirosin
2,655 g Na2HPO4 + 1,33 g NaH2PO4 dilarutkan dengan aquades sampai 500 ml
0,128 g L-tirosin dilarutkan dengan aquades sampai 100 ml
Larutan Buffer Fosfat 0,1 M Larutan A
31,2g NaH2PO4 dilarutkan dalam air suling sampai 1000mL
Larutan B
28,4 g NaH2PO4 dilarutkan dalam air suling sampai 1000mL Buffer Fosfat 0,1 M
pH 7 (200 ml)
39 ml
(3)
Lampiran 2. Foto Pengambilan dan Preparasi Sampel
Lokasi Pengambilan Sampel
Pengambilan Sampel
(4)
Lampiran 3. Foto Ekstraksi Enzim Tirosinase
Jamur Tiram Penimbangan Bahan
(5)
Lampiran 4. Nilai Absorbansi Ekstrak Enzim Tirosinase
Nilai Absorbansi Jamur Kuping Nilai Absorbansi Jamur Kancing
(6)
Lampiran 5. Penghitungan Kurva Standar Mushroom Tyrosinase
L-tirosin = 0,128 gram L-tirosin dalam 100 mL aquades Berat Molekul = 181.19 g/mol (C9H11NO3)
Berat Jenis = 1,46 g/cm3
Molaritas larutan L-tirosin dalam 100 mL air =
= 15,885 mol/mL *Jamur Kancing (Konsentrasi 0,25 mL sampel)
=
=
=
= 0,0013 U/mL
*Jamur Kancing (Konsentrasi 0,5 mL sampel)
=
=
=
= 0,0026 U/mL
*Jamur Kancing (Konsentrasi 1 mL sampel)
=
=
=
(7)
Lampiran 5. Penghitungan Kurva Standar Mushroom Tyrosinase
*Jamur Kancing (Konsentrasi 2 mL sampel)
=
=
=
= 0,0019 U/mL
*Jamur Tiram (Konsentrasi 0,25 mL sampel) =
=
=
= 0,0062 U/mL
*Jamur Tiram (Konsentrasi 0,5 mL sampel)
=
=
=
(8)
Lampiran 5. Penghitungan Kurva Standar Mushroom Tyrosinase
*Jamur Tiram (Konsentrasi 1 mL sampel)
=
=
=
= 0,0051 U/mL
*Jamur Tiram (Konsentrasi 2 mL sampel)
=
=
=
= 0,0047 U/mL
*Jamur Kuping (Konsentrasi 0,25 mL sampel) =
=
=
= 0,0026 U/mL
*Jamur Kuping (Konsentrasi 0,5 mL sampel)
=
(9)
=
=
= 0,0029 U/mL
Lampiran 5. Penghitungan Kurva Standar Mushroom Tyrosinase
*Jamur Kuping (Konsentrasi 1 mL sampel)
=
=
=
= 0,0031 U/mL
*Jamur Kuping (Konsentrasi 2 mL sampel)
=
=
=
(10)
(11)
Lampiran 7. Penghitungan Nilai Aktivitas Unit Mushroom Tyrosinase
Penghitungan nilai aktivitas unit didapat dari persamaan kurva standar Mushroom Tyrosinase (Lampiran 6) dengan nilai x adalah nilai absorbansi jamur (Lampiran 3) yang digunakan untuk melakukan uji inhibisi enzim tirosinase.
*Jamur Kancing
y = 0.00015x + 0.00165
y = (0,00015 x 0,037) + 0,0025 y = 0,0025 U/mL
*Jamur Tiram
y = -0.00056x + 0.00695
y = (-0,00006 x 0,646) + 0,0076 y = 0,0066 U/mL
*Jamur Kuping
y = -0.00007x + 0.00290
y = (-0,00034 x 0,126) + 0,00395 y = 0,0039 U/mL
(12)
Lampiran 8. Hasil Uji Inhibisi dengan Waktu Inkubasi ± 1,5 jam
Sargassum Crassifolium metanol Konsentrasi
Nilai
Absorbansi % Inhibisi
Blanko 0.112
250 0.076 32.14285714
500 0.085 24.10714286
1000 0.079 29.46428571
2000 0.091 18.75
Sargassum crassifolium etil asetat Konsentrasi
Nilai
Absorbansi % Inhibisi
Blanko 0.112
250 0.076 32.14285714
500 0.085 24.10714286
1000 0.079 29.46428571
2000 0.091 18.75
Gracilaria coronopifolia metanol Konsentrasi
Nilai
Absorbansi % Inhibisi
Blanko 0.109
250 0.089 18.34862385
500 0.085 22.01834862
1000 0.085 22.01834862
2000 0.085 22.01834862
Gracilaria coronopifolia etil asetat Konsentrasi
Nilai
Absorbansi % Inhibisi
Blanko 0.112
250 0.081 27.67857143
500 0.092 17.85714286
1000 0.088 21.42857143
2000 0.101 9.821428571
Daun Carica papaya metanol Konsentrasi
Nilai
Absorbansi % Inhibisi
Blanko 0.112
250 0.081 27.67857143
500 0.084 25
1000 0.099 11.60714286
(13)
Konsentrasi
Nilai
Absorbansi % Inhibisi
Blanko 0.111
250 0.075 32.43243243
1000 0.094 15.31531532
2000 0.131 -18.01801802
Hidroquinon
Konsentrasi
Nilai
Absorbansi % Inhibisi
Blanko 0.111
250 0.115 -3.60360360
500 0.105 5.405405405
1000 0.095 14.41441441
2000 0.127 -14.4144144
Lampiran 9. Hasil Uji Inhibisi dengan Waktu Inkubasi ± 24 jam
S.crassifolium Metanol
Konsentrasi (µg/mL)
Blanko 10 25 50 100 200 250 500 1000 P 1 1.84 1.784 1.795 1.809 1.635 1.391 1.623 1.190 1.585 P2 1.837 1.764 1.78 1.767 1.694 1.433 1.615 1.83 1.628 Rata-rata 1.8385 1.774 1.787 1.788 1.664 1.412 1.619 1.5101 1.6065 % Inhibisi 3.508 2.774 2.746 9.464 23.198 11.939 17.862 12.618 S.crassifolium Etil Asetat
Konsentrasi (µg/mL)
Blanko 10 25 50 100 200 250 500 1000 P1 0.684 0.148 0.139 0.287 0.111 0.302 0.131 0.186 0.114 P2 0.689 0.132 0.222 0.247 0.151 0.137 0.121 0.111 0.46 Rata-rata 0.686 0.14 0.180 0.267 0.131 0.2195 0.126 0.148 0.287 %Inhibisi 79.606 73.707 61.107 80.917 68.026 81.646 78.368 58.193 G.coronopifolia Metanol
Konsentrasi (µg/mL)
Blanko 10 25 50 100 200 250 500 1000 P1 0.704 1.754 1.817 1.77 1.752 1.457 1.534 1.278 P2 0.708 1.818 1.815 1.798 1.708 1.134 1.372 1.521 1.771 Rata-rata 0.706 1.786 1.816 1.784 1.73 1.2955 1.453 1.3995 1.771
(14)
%Inhibisi -152.9 -157.2 -152.6 -145.0 -83.4 -105.8 -98.2 -150.8 G.coronopifolia Etil Asetat
Konsentrasi (µg/mL)
Blanko 10 25 50 100 200 250 500 1000 P1 0.687 0.256 0.246 0.245 0.262 0.361 0.331 0.366 0.421 P2 0.689 0.234 0.264 0.258 0.283 0.342 0.362 0.401 0.411 Rata-rata 0.688 0.245 0.255 0.2515 0.2725 0.3515 0.3465 0.3835 0.416 %Inhibisi 64.389 62.936 63.444 60.392 48.909 49.636 44.258 39.534
Lampiran 9. Hasil Uji Inhibisi dengan Waktu Inkubasi ± 24 jam
Daun Carica papaya Metanol
Konsentrasi (µg/mL)
Blanko 10 25 50 100 200 250 500 1000 P1 1.368 1.225 1.496 1.535 1.323 1.413 1.334 1.477 1.356 P2 1.368 1.306 1.438 1.461 1.329 1.378 1.436 1.493 1.35 Rata-rata 1.368 1.265 1.467 1.498 1.326 1.3955 1.385 1.485 1.353 %Inhibisi 7.492 -7.236 -9.50 3.070 -2.010 -1.242 -8.552 1.096
Daun Carica papaya Etil Asetat
Konsentrasi (µg/mL)
A 10 25 50 100 200 250 500 1000 P1 0.693 0.11 0.083 0.081 1.334 1.583 1.408 1.55 1.217 P2 0.689 0.113 0.109 0.074 0.086 1.234 1.356 1.246 1.345 Rata-rata 0.691 0.111 0.096 0.077 0.71 1.4085 1.382 1.398 1.281 %Inhibisi 83.863 86.10 88.78 -2.74 -103.8 -100 -102.3 -85.38
Hidroquinon
Konsentrasi (µg/mL)
(15)
P1 0.651 0.207 0.174 0.13 0.135 0.156 0.157 0.206 0.319 P2 0.652 0.221 0.176 0.134 0.134 0.149 0.168 0.224 0.345 Rata-rata 0.6515 0.214 0.175 0.132 0.1345 0.1525 0.1625 0.215 0.332 %Inhibisi 67.15 73.13 79.73 79.35 76.59 75.05 66.99 49.04
Lampiran 10. Tabel Nutrisi pada Jamur
Nutritional properties (g/100g dw) of culinary mushroom
Mushroom Protein Fat
Poly-unsaturated fat Total unsturated fat Saturated fat Carbohydrate A.bisporus
portobello 33,44 3,10 1,43 1,46 0,30 47,38
A.bisporus
Crimnii 33,48 2,39 0,41 0,44 0,26 24,27
Lentinus Edoles Shittake
32,93 3,73 1,30 1,36 0,22 31,80
Pleorotus ostreatus Pearl oyster
27,25 2,75 1,16 1,32 0,20 35,31
Pleoratus pulmonarius Phoenix oyster
19,23 2,70 0,53 0,62 0,11 51,60
Sumber : Stamets (2005) dalan Rai dan Arumugunathan (2008)
Nutritional properties of culinary mushroom
Mushroom Sugar (g/ Calori es Calcium (mg/ Iron (mg/ Potassi um Copper (mg/100 Sodium (mg/100 Seleniu m (mg/
(16)
100g) 100g) 100g) (mg/ 100g)
g) g) 100 g)
A.bisporus
portobello 22,70 355 23 2,1 4500 4,33 52 0,415
A.bisporus
Crimnii 21,90 340 9 4,8 4800 20,80 3 0,066
Lentinus Edoles Shittake
15,80 356 23 5,5 2700 1,23 18 0,076
Pleorotus ostreatus Pearl oyster
22,30 360 20 9,1 2700 1,69 48 0,035
P.pulmon arius Phoenix oyster
11,80 355 9 6,5 2600 1,03 16 0,09
Sumber : Stamets (2005) dalan Rai dan Arumugunathan (2008)
Lampiran 11. Pembuatan Larutan Stok dan Pengenceran untuk Waktu Inkubasi ± 1, 5 jam
= 20 mg = 0.02 g
= ekstrak 0.02 g dilarutkan hingga 10 mL
*Konsentrasi 1000 µg/mL (1000 µg/mL = 1 ppm) V1 x M1 = V2 x M2
5 mL x 1 = V2 x 2 V2 = 2,5 mL
2,5 mL dari larutan stok 2000 µg/mL ditambah aquades hingga volume 5 mL
*Konsentrasi 500 µg/mL V1 x M1 = V2 x M2 5 mL x 0.5 = V2 x 2 V2 = 1,25 mL
(17)
*Konsentrasi 250 µg/mL V1 x M1 = V2 x M2 5 mL x 0.25 = V2 x 2 V2 = 0,625 mL
0,525 mL dari larutan stok 2000 µg/mL ditambah aquades hingga volume 5 mL
Lampiran 11. Pembuatan Larutan Stok dan Pengenceran untuk Waktu Inkubasi ± 1, 5 jam
= 20 mg = 0.002 g
= ekstrak 0.002 g dilarutkan hingga 20 mL
*Konsentrasi 50 µg/mL V1 x M1 = V2 x M2 5 mL x 0.05 = V2 x 0,1 V2 = 2,5 mL
(18)
Lampiran 12. Pembuatan Larutan Stok dan Pengenceran untuk Waktu Inkubasi ± 24 jam
= 10 mg = 0.001 g
= ekstrak 0.001 g dilarutkan hingga 10 mL
*Konsentrasi 500 µg/mL V1 x M1 = V2 x M2 5 mL x 0.5 = V2 x 1 V2 = 2,5 mL
2,5 mL dari larutan stok 1000 µg/mL ditambah aquades hingga volume 5 mL
*Konsentrasi 250 µg/mL V1 x M1 = V2 x M2 5 mL x 0.25 = V2 x 1 V2 = 1,25 mL
(19)
*Konsentrasi 200 µg/mL V1 x M1 = V2 x M2 5 mL x 0.2 = V2 x 1 V2 = 1 mL
1 mL dari larutan stok 1000 µg/mL ditambah aquades hingga volume 5 mL
*Konsentrasi 100 µg/mL V1 x M1 = V2 x M2 5 mL x 0.1 = V2 x 1 V2 = 0,5 mL
0,5 mL dari larutan stok 1000 µg/mL ditambah aquades hingga volume 5 mL
Lampiran 12. Pembuatan Larutan Stok dan Pengenceran untuk Waktu Inkubasi ± 24 jam
*Konsentrasi 50 µg/mL V1 x M1 = V2 x M2 5 mL x 0.05 = V2 x 1 V2 = 0,25 mL
0,25 mL dari larutan stok 1000 µg/mL ditambah aquades hingga volume 5 mL
*Konsentrasi 25 µg/mL V1 x M1 = V2 x M2 5 mL x 0.025= V2 x 1 V2 = 0,125 mL
1,25 mL dari larutan stok 1000 µg/mL ditambah aquades hingga volume 5 mL
*Konsentrasi 10 µg/mL V1 x M1 = V2 x M2
(20)
5 mL x 0.001= V2 x 1 V2 = 0,05 mL
0,05 mL dari larutan stok 1000 µg/mL ditambah aquades hingga volume 5 mL
Lampiran 13. Nilai Inhibisi Sampel dan Kontrol Positif
Waktu Inkubasi ± 1,5 jam Konsentrasi
Sampel 50 100 250 500 1000 2000
S. Metanol 24.96185065 46.15384615 32.14286 24.10714 29.46429 18.75 S. Etil asetat 0 2.978491071 32.14286 24.10714 29.46429 18.75 G. Metanol 23.01918265 34.49028036 18.34862 22.01835 22.01835 22.01835 G. Etil asetat 0 0 27.67857 17.85714 21.42857 9.821429 P. Metanol 26.13636364 18.18181818 27.67857 25 11.60714 0 P. Etil asetat 0 14.61916462 32.43243 0 15.31532 0 Hidroquinon 1.221319221 3.256851257 0 5.405405 14.41441 0 Waktu Inkubasi ± 24 jam
Konsentrasi (µg/mL)
Sampel 10 25 50 100 200 250 500 1000
Hidroquinon 67.1527 73.1389 79.7390 79.3553 76.5924 75.05756 66.9992 49.0406 SE 79.6067 73.7072 61.1070 80.9177 68.0262 81.64603 78.3685 58.1937 SM 3.50829 2.77400 2.74680 9.46423 23.1982 11.93908 17.8623 12.6189
(21)
CM 7.49269 0 0 3.0701 0 0 0 1.0964 GE 64.3895 62.9360 63.4447 60.3924 48.9098 49.63663 44.2587 39.5348
GM 0 0 0 0 0 0 0 0
Lampiran 14. Grafik Linier dan Perhitungan IC50
Sampel : Ekstrak Metanol S.crassifolium
Absorbansi Rata-rata
Konsentrasi Sampel (µg/mL)
% Inhibisi
0 0 0
1.774 10 3.508
1.7875 25 2.774
1.788 50 2.746
1.6645 100 9.464
1.412 200 23.198
1.619 250 11.939
1.5101 500 17.862
1.6065 1000 12.618
y = 2,20527x + 1,68089 50 – 1,68089 = 2,14908 x 48,31911 / 2,14908 = x x = 22,484 µg/mL
(22)
Sampel : Ekstrak Etil asetat S.crassifolium Absorbansi Rata-rata Konsentrasi Sampel (µg/mL) % Inhibisi
0 0 0
0.14 10 79.607
0.1805 25 73.707
0.267 50 61.107
0.131 100 80.918 0.2195 200 68.026 0.126 250 81.646 0.1485 500 78.369 0.287 1000 58.194 y = 4,19765x + 43,63108
50 – 43,63108 = 4,19765 6,36892 / 4,19765 = x x = 1,517 µg/mL
Lampiran 14. Grafik Linier dan Perhitungan IC50
Sampel : Ekstrak Metanol G.coronopifolia
Absorbansi Rata-rata Konsentrasi Sampel (µg/mL) % Inhibisi
0 0 0
1.786 10 -152.975
1.816 25 -157.224
1.784 50 -152.691
1.73 100 -145.043
1.2955 200 -83.499
1.453 250 -105.807
1.3995 500 -98.23
1.771 1000 -150.85
y = -4,45232x – 93,99608 50 + 93,99608 = -4,45232x 143,99608 / -4,45232 = x x = -32,342 µg/mL
(23)
Sampel : Ekstrak Etil Asetat G.coronopifolia Absorbansi Rata-rata Konsentrasi Sampel (µg/mL) % Inhibisi
0 0 0
0.245 10 64.39
0.255 25 62.936
0.2515 50 63.445
0.2725 100 60.392
0.3515 200 48.91
0.3465 250 49.637
0.3835 500 44.259
0.416 1000 39.535
y = 0,94357x + 43,44928 50 – 43,44928 = 0,94357x 6,55072 / 0,94357 = x x = 6,942 µg/mL
Lampiran 14. Grafik Linier dan Perhitungan IC50
Kontrol Positif : Ekstrak Metanol Daun Carica papaya
Absorbansi Rata-rata Konsentrasi Sampel (µg/mL) % Inhibisi
0 0 0
1.786 10 -152.975
1.816 25 -157.224
1.784 50 -152.691
1.73 100 -145.042
1.2955 200 -83.499
1.453 250 -105.807
1.3995 500 -98.23
1.771 1000 -150.85
y = -4,45232x – 93,99597 50 + 93,99597 = -4,45232x 143,9957 / -4,45232 = x x = -32,342 µg/mL
(24)
Kontrol Positif : Ekstrak Etil Asetat Daun Carica papaya Absorbansi Rata-rata Konsentrasi Sampel (µg/mL) % Inhibisi
0 0 0
0.1115 10 83.864
0.096 25 86.107
0.0775 50 88.784
0.71 100 -2.75
1.4085 200 -103.835
1.382 250 -100
1.398 500 -102.315
1.281 1000 -85.384
y = -24,41510x + 107,01672 50 – 107,01672 = -24,41510x -57,01672 / -24,41510 = x x = 2,335 µg/mL
Lampiran 14. Grafik Linier dan Perhitungan IC50
Kontrol Positif : Hidroquinon Absorbansi Rata-rata Konsentrasi Sampel (µg/mL) % Inhibisi
0 0 0
0.214 10 67.153
0.175 25 73.139
0.132 50 79.739
0.1345 100 79.355
0.1525 200 76.592
0.1625 250 75.058
0.215 500 66.999
0.332 1000 49.041
y = 3,27322x + 46,64236 50 – 46,64236 = 3,27322x 3,35764 / 3,27322 = x x = 1,026 µg/mL
(1)
*Konsentrasi 200 µg/mL V1 x M1 = V2 x M2 5 mL x 0.2 = V2 x 1
V2 = 1 mL
1 mL dari larutan stok 1000 µg/mL ditambah aquades hingga volume 5 mL
*Konsentrasi 100 µg/mL V1 x M1 = V2 x M2 5 mL x 0.1 = V2 x 1 V2 = 0,5 mL
0,5 mL dari larutan stok 1000 µg/mL ditambah aquades hingga volume 5 mL
Lampiran 12. Pembuatan Larutan Stok dan Pengenceran untuk Waktu Inkubasi ± 24 jam
*Konsentrasi 50 µg/mL V1 x M1 = V2 x M2 5 mL x 0.05 = V2 x 1 V2 = 0,25 mL
0,25 mL dari larutan stok 1000 µg/mL ditambah aquades hingga volume 5 mL
*Konsentrasi 25 µg/mL V1 x M1 = V2 x M2 5 mL x 0.025= V2 x 1 V2 = 0,125 mL
1,25 mL dari larutan stok 1000 µg/mL ditambah aquades hingga volume 5 mL
*Konsentrasi 10 µg/mL V1 x M1 = V2 x M2
(2)
5 mL x 0.001= V2 x 1 V2 = 0,05 mL
0,05 mL dari larutan stok 1000 µg/mL ditambah aquades hingga volume 5 mL
Lampiran 13. Nilai Inhibisi Sampel dan Kontrol Positif
Waktu Inkubasi ± 1,5 jam
Konsentrasi
Sampel 50 100 250 500 1000 2000
S. Metanol 24.96185065 46.15384615 32.14286 24.10714 29.46429 18.75 S. Etil asetat 0 2.978491071 32.14286 24.10714 29.46429 18.75 G. Metanol 23.01918265 34.49028036 18.34862 22.01835 22.01835 22.01835
G. Etil asetat 0 0 27.67857 17.85714 21.42857 9.821429
P. Metanol 26.13636364 18.18181818 27.67857 25 11.60714 0
P. Etil asetat 0 14.61916462 32.43243 0 15.31532 0
Hidroquinon 1.221319221 3.256851257 0 5.405405 14.41441 0
Waktu Inkubasi ± 24 jam
Konsentrasi (µg/mL)
Sampel 10 25 50 100 200 250 500 1000
Hidroquinon 67.1527 73.1389 79.7390 79.3553 76.5924 75.05756 66.9992 49.0406 SE 79.6067 73.7072 61.1070 80.9177 68.0262 81.64603 78.3685 58.1937 SM 3.50829 2.77400 2.74680 9.46423 23.1982 11.93908 17.8623 12.6189
(3)
CM 7.49269 0 0 3.0701 0 0 0 1.0964 GE 64.3895 62.9360 63.4447 60.3924 48.9098 49.63663 44.2587 39.5348
GM 0 0 0 0 0 0 0 0
Lampiran 14. Grafik Linier dan Perhitungan IC50
Sampel : Ekstrak Metanol S.crassifolium Absorbansi
Rata-rata
Konsentrasi Sampel (µg/mL)
% Inhibisi
0 0 0
1.774 10 3.508
1.7875 25 2.774
1.788 50 2.746
1.6645 100 9.464
1.412 200 23.198
1.619 250 11.939
1.5101 500 17.862
1.6065 1000 12.618
y = 2,20527x + 1,68089 50 – 1,68089 = 2,14908 x 48,31911 / 2,14908 = x x = 22,484 µg/mL
(4)
Sampel : Ekstrak Etil asetat S.crassifolium Absorbansi
Rata-rata
Konsentrasi Sampel (µg/mL)
% Inhibisi
0 0 0
0.14 10 79.607
0.1805 25 73.707
0.267 50 61.107
0.131 100 80.918
0.2195 200 68.026
0.126 250 81.646
0.1485 500 78.369
0.287 1000 58.194
y = 4,19765x + 43,63108 50 – 43,63108 = 4,19765 6,36892 / 4,19765 = x x = 1,517 µg/mL
Lampiran 14. Grafik Linier dan Perhitungan IC50
Sampel : Ekstrak Metanol G.coronopifolia Absorbansi
Rata-rata
Konsentrasi Sampel (µg/mL)
% Inhibisi
0 0 0
1.786 10 -152.975
1.816 25 -157.224
1.784 50 -152.691
1.73 100 -145.043
1.2955 200 -83.499
1.453 250 -105.807
1.3995 500 -98.23
1.771 1000 -150.85
y = -4,45232x – 93,99608 50 + 93,99608 = -4,45232x 143,99608 / -4,45232 = x x = -32,342 µg/mL
(5)
Sampel : Ekstrak Etil Asetat G.coronopifolia Absorbansi
Rata-rata
Konsentrasi Sampel (µg/mL)
% Inhibisi
0 0 0
0.245 10 64.39
0.255 25 62.936
0.2515 50 63.445
0.2725 100 60.392
0.3515 200 48.91
0.3465 250 49.637
0.3835 500 44.259
0.416 1000 39.535
y = 0,94357x + 43,44928 50 – 43,44928 = 0,94357x 6,55072 / 0,94357 = x x = 6,942 µg/mL
Lampiran 14. Grafik Linier dan Perhitungan IC50
Kontrol Positif : Ekstrak Metanol Daun Carica papaya Absorbansi
Rata-rata
Konsentrasi Sampel (µg/mL)
% Inhibisi
0 0 0
1.786 10 -152.975
1.816 25 -157.224
1.784 50 -152.691
1.73 100 -145.042
1.2955 200 -83.499
1.453 250 -105.807
1.3995 500 -98.23
1.771 1000 -150.85
y = -4,45232x – 93,99597 50 + 93,99597 = -4,45232x 143,9957 / -4,45232 = x x = -32,342 µg/mL
(6)
Kontrol Positif : Ekstrak Etil Asetat Daun Carica papaya Absorbansi
Rata-rata
Konsentrasi Sampel (µg/mL)
% Inhibisi
0 0 0
0.1115 10 83.864
0.096 25 86.107
0.0775 50 88.784
0.71 100 -2.75
1.4085 200 -103.835
1.382 250 -100
1.398 500 -102.315
1.281 1000 -85.384
y = -24,41510x + 107,01672 50 – 107,01672 = -24,41510x -57,01672 / -24,41510 = x x = 2,335 µg/mL
Lampiran 14. Grafik Linier dan Perhitungan IC50
Kontrol Positif : Hidroquinon Absorbansi
Rata-rata
Konsentrasi Sampel (µg/mL)
% Inhibisi
0 0 0
0.214 10 67.153
0.175 25 73.139
0.132 50 79.739
0.1345 100 79.355
0.1525 200 76.592
0.1625 250 75.058
0.215 500 66.999
0.332 1000 49.041
y = 3,27322x + 46,64236 50 – 46,64236 = 3,27322x 3,35764 / 3,27322 = x x = 1,026 µg/mL