Penetapan Kadar Pirasetam Tablet dengan Nama Generik dan Nama Dagang secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)
PENETAPAN KADAR PIRASETAM TABLET DENGAN
NAMA GENERIK DAN NAMA DAGANG SECARA
KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT)
SKRIPSI
OLEH:
SARI SELLYNI
NIM 131524085
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
Universitas Sumatera Utara
PENETAPAN KADAR PIRASETAM TABLET DENGAN
NAMA GENERIK DAN NAMA DAGANG SECARA
KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT)
SKRIPSI
Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh
Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
SARI SELLYNI
NIM 131524085
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
Universitas Sumatera Utara
PENGESAHAN SKRIPSI
PENETAPAN KADAR PIRASETAM TABLET DENGAN
NAMA GENERIK DAN NAMA DAGANG SECARA
KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT)
OLEH:
SARI SELLYNI
NIM 131524085
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal : 15 Desember 2015
Pembimbing I,
Panitia Penguji,
Prof. Dr. rer. nat. E. De Lux Putra, S.U., Apt.
NIP 195306191983031001
Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt.
NIP 195008281976032002
Pembimbing II,
Prof. Dr. rer. nat. E. De Lux Putra, S.U., Apt.
NIP 195306191983031001
Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt.
NIP 195201041980031002
Drs. Nahitma Ginting, M.Si., Apt
NIP 195406281983031002
Sri Yuliasmi, S.Farm., M.Si., Apt
NIP 198207032008122002
Medan,
Januari 2016
Pejabat Dekan,
Fakultas Farmasi,
Dr. Masfria, M.S., Apt.
NIP 195707231986012001
Universitas Sumatera Utara
KATA PENGANTAR
Bismillahirrahmanirrahiim,
Puji syukur penulis ucapkan kepada Allah SWT atas segala limpahan
rahmat dan karunia-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan
skripsi yang berjudul “Penetapan Kadar Pirasetam Tablet dengan Nama Generik
dan Nama Dagang secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)”. Skripsi ini
diajukan sebagai salah satu syarat guna memperoleh gelar Sarjana Farmasi dari
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini penulis hendak menyampaikan rasa hormat dan
terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Ibu Dr. Masfria, M.S.,Apt., selaku
Pejabat Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah
memberikan fasilitas dan masukan selama masa pendidikan dan penelitian,
kepada Bapak Prof. Dr. rer. nat. Effendy De Lux Putra, S.U., Apt., dan Bapak Drs.
Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing yang telah banyak
memberikan bimbingan, arahan, dan bantuan selama masa penelitian dan
penulisan skripsi ini berlangsung. Penulis juga menyampaikan ucapan terima
kasih kepada Ibu Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt.,Bapak Drs. Nahitma
Ginting, M.Si., Apt, dan Ibu Sri Yuliasmi, S. Farm., M.Si., Apt selaku dosen
penguji yang telah memberikan masukan dalam penyusunan skripsi ini serta
kepada Bapak Prof. Dr. Urip Harahap, Apt., selaku dosen pembimbing akademik
yang selalu membimbing selama masa pendidikan.
Penulis juga ingin menyampaikan rasa terima kasih serta penghargaan
yang tulus dan tak terhingga kepada orang tua tersayang Ayahanda Yusli, S.E dan
Ibunda Mariani serta adik Sarah Ade Sellyni dan Syafaat Mulya Bantaan atas doa
iv
Universitas Sumatera Utara
dan dukungan baik moril maupun materil, juga sahabat-sahabat di Fakultas
Farmasi USU semua atas motivasi dan segala bantuan dalam penyelesaian skripsi
ini.
Semoga Tuhan Yang Maha Kuasa memberikan balasan yang berlipat
ganda kepada semua pihak yang telah membantu dalam penulisan skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih banyak kekurangan. Oleh karena itu,
sangat diharapkan kritik dan saran yang bersifat membangun dari semua pihak
guna perbaikan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini
bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya bidang farmasi.
Medan,
Januari 2016
Penulis,
Sari Sellyni
NIM 131524085
v
Universitas Sumatera Utara
PENETAPAN KADAR PIRASETAM TABLET DENGAN NAMA
GENERIK DAN NAMA DAGANG SECARA
KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT)
ABSTRAK
Pirasetam adalah salah satu obat nootropika yang mempunyai bermacam–
macam efek fisiologis yang mungkin ditimbulkan oleh pemulihan ketidakstabilan
membran sel. Obat ini digunakan untuk mengobati pasien yang menderita
penyakit gangguan jiwa, vertigo, dan sindrom otak organik. Obat dengan nama
generik merupakan obat yang harganya murah dibandingkan obat merek dagang.
Masyarakat menganggap obat generik yang harganya murah tidak memiliki mutu
sebaik obat merek dagang. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui
kadar pirasetam dalam tablet generik dan dagang serta menguji validasi metode
secara kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT).
Sampel yang digunakan dalam penelitian adalah tablet pirasetam nama
generik dari dua perusahan obat yaitu dari PT. A dan PT. B, sedangkan untuk
tablet pirasetam dengan nama dagang diperoleh dari PT. C, PT. D, PT. E dan
PT. F. Penetapan kadar pirasetam dilakukan secara Kromatografi Cair Kinerja
Tinggi (KCKT) menggunakan kolom C-18 (4,6 mm × 25 cm), optimasi fasa gerak
asetonitril-buffer posfat pH 6 dengan berbagai perbandingan yaitu (90:10),
(80:20), (70:30) laju alir 1,0 ml/menit dan 1,5 ml/menit dengan detektor 205 nm.
Untuk menguji validitas metode ini, dilakukan uji akurasi, presisi, batas deteksi,
dan batas kuantitasi.
Hasil penelitian diperoleh kadar pirasetam tablet berturut-turut, untuk
sediaan generik PT. A (99,778 ± 1,72)%; PT. B (101,275 ± 2,67)%. Sedangkan
untuk tablet dengan nama dagang Latropil® (101,058 ± 1,17)%; Neurotam®
(101,756 ± 0,46)%; Resibron® (100,441 ± 2,97)%; Revolan® (101,323 ± 2,05)%.
Hasil uji validasi dari metode ini diperoleh persen perolehan kembali 100,39%
dengan simpangan baku relatif 1,65 %, ini menunjukkan bahwa metode ini
memiliki ketepatan dan ketelitian yang baik dengan limit deteksi 2,6945 µg/ml
dan limit kuantitasi 8,9818 µg/ml.
Kata Kunci: KCKT, Pirasetam, Nama Generik, Nama Dagang, Asetonitril, Buffer
posfat pH 6
vi
Universitas Sumatera Utara
DETERMINATION OF PIRACETAM TABLET IN GENERIC NAME
AND TRADING NAME BY
HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY (HPLC)
ABSTRACT
Piracetam is a nootropic psycho pharmacological agent having a variety of
physiological effects that may result from the restoration of cell membrane
fluidity. It is used for treatment of patient suffering from pathological,
neurosensitive and cognitive deficits, brain organic psychosyndrome, vertigo, and
myoclonus of cotrical origin. Drug with generic names is cheaper than drug with
trading names. So that, people consider that generic drug doesn’t have quality as
good as trading names drug. The purpose of this study was to know the rate of
piracetam in tablet with generic name and trading name and also to test the
validity of this method by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) .
Sampel that used in this study are piracetam tablets with generic names
from two drug firms, there are PT. A and PT. B. While for tablets with trading
names, there are PT.C, PT. D, PT. E and PT. F. Piracetam rate setting is done
using the High Performance Liquid Chromatography (HPLC) column C-18
(4.6 mm × 25 cm), optimation mobile phase acetonitrile - phosphate buffer pH 6
(90:10), (80:20), (70:30) flow rate of 1.0 ml / min and 1.5 ml/min with detector
λ 205 nm. To test the validity of this method, experiments performed with
parameter validation accuracy, precision, limit of detection, and the limit of
quantitation.
The research results obtained from the rate of piracetam tablets in a row,
for a generic name PT. A (99.778 ± 1.72)%; PT. B (101.275 ± 2.67)%. As for the
tablet with consecutive trading name for Latropil® (101.058 ± 1.17)%; Neurotam®
(101.756 ± 0.46)%; Resibron® (100.441 ± 2.97)% ; Revolan® (101.323 ± 2.05)%.
Validation test results obtained from this method percent recovery of 100.39%
with Relative Standar Deviation (RSD) 1.65%, indicating that this method has
good accuracy and precision in detection limit 2.6945 µg/ml and a quantitation
limit 8.9818 µg/ml.
Keywords: HPLC, Piracetam, Generic Name, Trading Name, Acetonitrile,
Phosphat Buffer pH 6.
vii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ...................................................................................................
i
HALAMAN JUDUL ..............................................................................
ii
HALAMAN PENGESAHAN ................................................................
iii
KATA PENGANTAR ............................................................................
iv
ABSTRAK .............................................................................................
vi
ABSTRACT ...........................................................................................
vii
DAFTAR ISI ..........................................................................................
viii
DAFTAR TABEL ..................................................................................
xii
DAFTAR GAMBAR .............................................................................
xiii
DAFTAR GAMBAR LAMPIRAN .......................................................
xiv
DAFTAR LAMPIRAN ..........................................................................
xvi
BAB I PENDAHULUAN ......................................................................
1
1.1 Latar Belakang ........................................................................
1
1.2 Perumusan Masalah ................................................................
3
1.3 Hipotesis ..................................................................................
3
1.4 Tujuan Penelitian ....................................................................
4
1.5 Manfaat Penelitian ..................................................................
4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA.............................................................
5
2.1 Pirasetam .................................................................................
5
2.1.1 Uraian Bahan ..............................................................
5
2.1.2 Farmakologi ................................................................
5
2.2 Kromatografi ...........................................................................
6
viii
Universitas Sumatera Utara
2.2.1 Klasifikasi Kromatografi ............................................
6
2.3 Kromatografi Cair Kinerja Tinggi ..........................................
7
2.4 Cara Kerja KCKT ...................................................................
8
2.5 Kriteria Optimasi KCKT ........................................................
8
2.6 Jenis Pemisahan KCKT ..........................................................
9
2.7 Komponen KCKT ...................................................................
9
2.7.1 Wadah Fase Gerak ......................................................
10
2.7.2 Pompa .........................................................................
10
2.7.3 Injektor .......................................................................
11
2.7.4 Kolom .........................................................................
12
2.7.5 Fase Diam ...................................................................
12
2.7.6 Detektor ......................................................................
13
2.7.7 Pengolah Data ............................................................
14
2.7.8 Fase Gerak ..................................................................
14
2.7.9 Elusi Gradien dan Elusi Isokratik ...............................
15
2.8 Validasi Metode ......................................................................
15
BAB III METODE PENELITIAN .........................................................
17
3.1 Waktu dan Tempat Penelitian .................................................
17
3.2 Alat-alat ..................................................................................
17
3.3 Bahan-bahan ...........................................................................
17
3.4 Pengambilan Sampel ..............................................................
18
3.5 Prosedur Penelitian .................................................................
18
3.5.1 Penyiapan Bahan .........................................................
18
3.5.1.1 Pembuatan Larutan KH2PO4...........................
18
ix
Universitas Sumatera Utara
3.5.1.2 Pembuatan Fase Gerak AsetonitrilBuffer Posfat pH 6............................
18
3.5.1.3 Pembuatan Larutan Induk Baku
Pirasetam..............................................
18
3.5.2 Prosedur Analisis .... .....................................................
19
3.5.2.1 Penyiapan Alat Kromatografi Cair Kinerja
Tinggi ..............................................................
19
3.5.2.2 Penentuan Perbandingan Fase Gerak yang
Optimum untuk Analisis .............................
19
3.5.3 Analisis Kualitatif Menggunakan KCKT.....................
20
3.5.3.1 Uji Identifikasi Pirasetam dalam Sampel
Menggunakan KCKT ..........................................
20
3.5.3.2 Pembuatan Kurva Kalibrasi Pirasetam
Baku .............................................................
20
3.5.3.3 Penetapan Kadar Sampel ...............................
21
3.5.3.4 Analisis Data secara Statistik .........................
21
3.5.4 Metode Validasi ..........................................................
22
3.5.4.1 Kecermatan (accuracy) ......................................
22
3.5.4.2 Keseksamaan (precision) ..................................
23
3.5.4.3 Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi
(LOQ) .................................................................
24
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ...............................................
25
4.1 Penentuan Kondisi Kromatografi untuk Mendapatkan Hasil
Analisis yang Optimum ...........................................................
25
4.2 Analisis Kualitatif Pirasetam Menggunakan KCKT ...............
28
4.3 Penentuan Linieritas Kurva Kalibrasi Pirasetam Baku ...........
29
4.4 Penetapan Kadar Pirasetam dalam Sediaan Tablet .................
30
4.5 Hasil Uji Validasi ....................................................................
31
x
Universitas Sumatera Utara
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .................................................
34
5.1 Kesimpulan ..............................................................................
34
5.2 Saran .........................................................................................
34
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................
35
LAMPIRAN ...........................................................................................
37
xi
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
4.1 Hasil Optimasi Perbandingan Fasa Gerak dan Laju Alir ...............
27
4.2 Perbandingan Retention time, Area, Height, dan Tailing
factor dari hasil Spiking ...............................................................
29
4.3 Kadar Rata-rata Pirasetam dalam Tablet ........................................
31
4.4 Data Hasil Uji Validasi Metode dari Tablet Generik
(PT. A) .........................................................................................
32
xii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
2.1 Struktur Pirasetam ......................................................................
5
2.2 Diagram Skematik Alat KCKT ..................................................
10
2.3 Tipe Injektor Katup Jalan-Kitar ..................................................
12
4.1 Kromatogram Pirasetam dengan Fasa Gerak Asetonitril-Buffer
posfat pH 6 (30:70) laju alir 1,0 ml/menit ..................................
25
4.2 Kromatogram Pirasetam dengan Fasa Gerak Asetonitril-Buffer
posfat pH 6 (20:80) laju alir 1,0 ml/menit ...................................
26
4.3 Kromatogram Pirasetam dengan Fasa Gerak Asetonitril-Buffer
posfat pH 6 (10:90) laju alir 1,0 ml/menit ...................................
26
4.4 Kromatogram Pirasetam dengan Fasa Gerak Asetonitril-Buffer
posfat pH 6 (30:70) laju alir 1,5 ml/menit ...................................
26
4.5 Kromatogram Pirasetam dengan Fasa Gerak Asetonitril-Buffer
posfat pH 6 (20:80) laju alir 1,5 ml/menit ...................................
27
4.6 Kromatogram Pirasetam dengan Fasa Gerak Asetonitril-Buffer
posfat pH 6 (10:90) laju alir 1,5 ml/menit ...................................
27
4.7 Kromatogram Pirasetam Sebelum Penambahan Baku Secara
KCKT ..........................................................................................
28
4.8 Kromatogram Pirasetam Setelah Penambahan Baku Secara
KCKT ..........................................................................................
29
4.9 Kurva Kalibrasi Pirasetam dalam Sediaan Tablet ......................
30
xiii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR LAMPIRAN
Gambar
1
Halaman
Kromatogram Pirasetam (5 µg/ml) C-18 asetonitril-buffer posfat
pH 6 (30:70) laju alir 1,0 ml/menit ..................................................
37
Kromatogram Pirasetam (10 µg/ml) C-18 asetonitril-buffer posfat
pH 6 (30:70) laju alir 1,0 ml/menit ..................................................
37
Kromatogram Pirasetam (20 µg/ml) C-18 asetonitril-buffer posfat
pH 6 (30:70) laju alir 1,0 ml/menit ..................................................
37
Kromatogram Pirasetam (30 µg/ml) C-18 asetonitril-buffer posfat
pH 6 (30:70) laju alir 1,0 ml/menit ..................................................
38
Kromatogram Pirasetam (50 µg/ml) C-18 asetonitril-buffer posfat
pH 6 (30:70) laju alir 1,0 ml/menit ..................................................
38
6
Kromatogram Pirasetam Generik PT. A .........................................
41
7
Kromatogram Pirasetam Generik PT. B .........................................
44
8
Kromatogram Pirasetam Merek Latropil PT. C ..............................
47
9
Kromatogram Pirasetam Merek Neurotam PT. D ..........................
50
10
Kromatogram Pirasetam Merek Resibron PT. E ............................
53
11
Kromatogram Pirasetam Merek Revolan PT. F ..............................
56
12
Kromatogram recovery Pada Rentang 80% Tanpa Penambahan
Baku ................................................................................................ 60
13
Kromatogram recovery Pada Rentang 80% Setelah Penambahan
Baku .................................................................................................
60
Kromatogram recovery Pada Rentang 100% Tanpa Penambahan
Baku .................................................................................................
61
Kromatogram recovery Pada Rentang 100% Setelah Penambahan
Baku .................................................................................................
61
Kromatogram recovery Pada Rentang 120% Tanpa Penambahan
Baku .................................................................................................
62
2
3
4
5
14
15
16
xiv
Universitas Sumatera Utara
Kromatogram recovery Pada Rentang 120% Setelah Penambahan
Baku .................................................................................................
62
18
Alat KCKT ......................................................................................
70
19
Sonikator .........................................................................................
70
20
Syringe KCKT .................................................................................
70
17
xv
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1.
Kromatogram Kurva Kalibrasi ..................................................
37
2.
Perhitungan Persamaan Regresi Pirasetam Baku ....................
39
3.
Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi
(LOQ) Pirasetam .....................................................................
40
4.
Kromatogram Hasil Penyuntikan Pirasetam Generik PT. A ....
41
5.
Kromatogram Hasil Penyuntikan Pirasetam GenerikPT. B .....
44
6.
Kromatogram Hasil Penyuntikan Pirasetam Merek Latropil
PT. C .........................................................................................
47
Kromatogram Hasil Penyuntikan Pirasetam Merek Neurotam
PT. D.........................................................................................
50
Kromatogram Hasil Penyuntikan Pirasetam Merek Resibron
PT. E ........................................................................................
53
Kromatogram Hasil Penyuntikan Pirasetam Merek Revolan
PT. F .........................................................................................
56
10.
Hasil Pengolahan Data Penetapan Kadar Pirasetam.................
59
11.
Kromatogram Hasil Penyuntikan dari Pirasetam Tablet dan
Bahan Baku pada Persen Perolehan Kembali pada Rentang
80%, 100%, dan 120% .............................................................
60
12.
Perhitungan Persen Perolehan kembali ....................................
63
13.
Hasil Pengolahan Data Persen Perolehan Kembali Pada
Rentang 80%, 100%, dan 120% ..............................................
68
14.
Tabel Distribusi t .....................................................................
69
15.
Alat yang Digunakan dalam Penelitian ....................................
70
16.
Setifikat Baku Pembanding Pirasetam ...................................
71
7.
8.
9.
xvi
Universitas Sumatera Utara
NAMA GENERIK DAN NAMA DAGANG SECARA
KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT)
SKRIPSI
OLEH:
SARI SELLYNI
NIM 131524085
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
Universitas Sumatera Utara
PENETAPAN KADAR PIRASETAM TABLET DENGAN
NAMA GENERIK DAN NAMA DAGANG SECARA
KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT)
SKRIPSI
Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh
Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
SARI SELLYNI
NIM 131524085
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
Universitas Sumatera Utara
PENGESAHAN SKRIPSI
PENETAPAN KADAR PIRASETAM TABLET DENGAN
NAMA GENERIK DAN NAMA DAGANG SECARA
KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT)
OLEH:
SARI SELLYNI
NIM 131524085
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal : 15 Desember 2015
Pembimbing I,
Panitia Penguji,
Prof. Dr. rer. nat. E. De Lux Putra, S.U., Apt.
NIP 195306191983031001
Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt.
NIP 195008281976032002
Pembimbing II,
Prof. Dr. rer. nat. E. De Lux Putra, S.U., Apt.
NIP 195306191983031001
Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt.
NIP 195201041980031002
Drs. Nahitma Ginting, M.Si., Apt
NIP 195406281983031002
Sri Yuliasmi, S.Farm., M.Si., Apt
NIP 198207032008122002
Medan,
Januari 2016
Pejabat Dekan,
Fakultas Farmasi,
Dr. Masfria, M.S., Apt.
NIP 195707231986012001
Universitas Sumatera Utara
KATA PENGANTAR
Bismillahirrahmanirrahiim,
Puji syukur penulis ucapkan kepada Allah SWT atas segala limpahan
rahmat dan karunia-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan
skripsi yang berjudul “Penetapan Kadar Pirasetam Tablet dengan Nama Generik
dan Nama Dagang secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)”. Skripsi ini
diajukan sebagai salah satu syarat guna memperoleh gelar Sarjana Farmasi dari
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini penulis hendak menyampaikan rasa hormat dan
terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Ibu Dr. Masfria, M.S.,Apt., selaku
Pejabat Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah
memberikan fasilitas dan masukan selama masa pendidikan dan penelitian,
kepada Bapak Prof. Dr. rer. nat. Effendy De Lux Putra, S.U., Apt., dan Bapak Drs.
Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing yang telah banyak
memberikan bimbingan, arahan, dan bantuan selama masa penelitian dan
penulisan skripsi ini berlangsung. Penulis juga menyampaikan ucapan terima
kasih kepada Ibu Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt.,Bapak Drs. Nahitma
Ginting, M.Si., Apt, dan Ibu Sri Yuliasmi, S. Farm., M.Si., Apt selaku dosen
penguji yang telah memberikan masukan dalam penyusunan skripsi ini serta
kepada Bapak Prof. Dr. Urip Harahap, Apt., selaku dosen pembimbing akademik
yang selalu membimbing selama masa pendidikan.
Penulis juga ingin menyampaikan rasa terima kasih serta penghargaan
yang tulus dan tak terhingga kepada orang tua tersayang Ayahanda Yusli, S.E dan
Ibunda Mariani serta adik Sarah Ade Sellyni dan Syafaat Mulya Bantaan atas doa
iv
Universitas Sumatera Utara
dan dukungan baik moril maupun materil, juga sahabat-sahabat di Fakultas
Farmasi USU semua atas motivasi dan segala bantuan dalam penyelesaian skripsi
ini.
Semoga Tuhan Yang Maha Kuasa memberikan balasan yang berlipat
ganda kepada semua pihak yang telah membantu dalam penulisan skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih banyak kekurangan. Oleh karena itu,
sangat diharapkan kritik dan saran yang bersifat membangun dari semua pihak
guna perbaikan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini
bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya bidang farmasi.
Medan,
Januari 2016
Penulis,
Sari Sellyni
NIM 131524085
v
Universitas Sumatera Utara
PENETAPAN KADAR PIRASETAM TABLET DENGAN NAMA
GENERIK DAN NAMA DAGANG SECARA
KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT)
ABSTRAK
Pirasetam adalah salah satu obat nootropika yang mempunyai bermacam–
macam efek fisiologis yang mungkin ditimbulkan oleh pemulihan ketidakstabilan
membran sel. Obat ini digunakan untuk mengobati pasien yang menderita
penyakit gangguan jiwa, vertigo, dan sindrom otak organik. Obat dengan nama
generik merupakan obat yang harganya murah dibandingkan obat merek dagang.
Masyarakat menganggap obat generik yang harganya murah tidak memiliki mutu
sebaik obat merek dagang. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui
kadar pirasetam dalam tablet generik dan dagang serta menguji validasi metode
secara kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT).
Sampel yang digunakan dalam penelitian adalah tablet pirasetam nama
generik dari dua perusahan obat yaitu dari PT. A dan PT. B, sedangkan untuk
tablet pirasetam dengan nama dagang diperoleh dari PT. C, PT. D, PT. E dan
PT. F. Penetapan kadar pirasetam dilakukan secara Kromatografi Cair Kinerja
Tinggi (KCKT) menggunakan kolom C-18 (4,6 mm × 25 cm), optimasi fasa gerak
asetonitril-buffer posfat pH 6 dengan berbagai perbandingan yaitu (90:10),
(80:20), (70:30) laju alir 1,0 ml/menit dan 1,5 ml/menit dengan detektor 205 nm.
Untuk menguji validitas metode ini, dilakukan uji akurasi, presisi, batas deteksi,
dan batas kuantitasi.
Hasil penelitian diperoleh kadar pirasetam tablet berturut-turut, untuk
sediaan generik PT. A (99,778 ± 1,72)%; PT. B (101,275 ± 2,67)%. Sedangkan
untuk tablet dengan nama dagang Latropil® (101,058 ± 1,17)%; Neurotam®
(101,756 ± 0,46)%; Resibron® (100,441 ± 2,97)%; Revolan® (101,323 ± 2,05)%.
Hasil uji validasi dari metode ini diperoleh persen perolehan kembali 100,39%
dengan simpangan baku relatif 1,65 %, ini menunjukkan bahwa metode ini
memiliki ketepatan dan ketelitian yang baik dengan limit deteksi 2,6945 µg/ml
dan limit kuantitasi 8,9818 µg/ml.
Kata Kunci: KCKT, Pirasetam, Nama Generik, Nama Dagang, Asetonitril, Buffer
posfat pH 6
vi
Universitas Sumatera Utara
DETERMINATION OF PIRACETAM TABLET IN GENERIC NAME
AND TRADING NAME BY
HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY (HPLC)
ABSTRACT
Piracetam is a nootropic psycho pharmacological agent having a variety of
physiological effects that may result from the restoration of cell membrane
fluidity. It is used for treatment of patient suffering from pathological,
neurosensitive and cognitive deficits, brain organic psychosyndrome, vertigo, and
myoclonus of cotrical origin. Drug with generic names is cheaper than drug with
trading names. So that, people consider that generic drug doesn’t have quality as
good as trading names drug. The purpose of this study was to know the rate of
piracetam in tablet with generic name and trading name and also to test the
validity of this method by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) .
Sampel that used in this study are piracetam tablets with generic names
from two drug firms, there are PT. A and PT. B. While for tablets with trading
names, there are PT.C, PT. D, PT. E and PT. F. Piracetam rate setting is done
using the High Performance Liquid Chromatography (HPLC) column C-18
(4.6 mm × 25 cm), optimation mobile phase acetonitrile - phosphate buffer pH 6
(90:10), (80:20), (70:30) flow rate of 1.0 ml / min and 1.5 ml/min with detector
λ 205 nm. To test the validity of this method, experiments performed with
parameter validation accuracy, precision, limit of detection, and the limit of
quantitation.
The research results obtained from the rate of piracetam tablets in a row,
for a generic name PT. A (99.778 ± 1.72)%; PT. B (101.275 ± 2.67)%. As for the
tablet with consecutive trading name for Latropil® (101.058 ± 1.17)%; Neurotam®
(101.756 ± 0.46)%; Resibron® (100.441 ± 2.97)% ; Revolan® (101.323 ± 2.05)%.
Validation test results obtained from this method percent recovery of 100.39%
with Relative Standar Deviation (RSD) 1.65%, indicating that this method has
good accuracy and precision in detection limit 2.6945 µg/ml and a quantitation
limit 8.9818 µg/ml.
Keywords: HPLC, Piracetam, Generic Name, Trading Name, Acetonitrile,
Phosphat Buffer pH 6.
vii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ...................................................................................................
i
HALAMAN JUDUL ..............................................................................
ii
HALAMAN PENGESAHAN ................................................................
iii
KATA PENGANTAR ............................................................................
iv
ABSTRAK .............................................................................................
vi
ABSTRACT ...........................................................................................
vii
DAFTAR ISI ..........................................................................................
viii
DAFTAR TABEL ..................................................................................
xii
DAFTAR GAMBAR .............................................................................
xiii
DAFTAR GAMBAR LAMPIRAN .......................................................
xiv
DAFTAR LAMPIRAN ..........................................................................
xvi
BAB I PENDAHULUAN ......................................................................
1
1.1 Latar Belakang ........................................................................
1
1.2 Perumusan Masalah ................................................................
3
1.3 Hipotesis ..................................................................................
3
1.4 Tujuan Penelitian ....................................................................
4
1.5 Manfaat Penelitian ..................................................................
4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA.............................................................
5
2.1 Pirasetam .................................................................................
5
2.1.1 Uraian Bahan ..............................................................
5
2.1.2 Farmakologi ................................................................
5
2.2 Kromatografi ...........................................................................
6
viii
Universitas Sumatera Utara
2.2.1 Klasifikasi Kromatografi ............................................
6
2.3 Kromatografi Cair Kinerja Tinggi ..........................................
7
2.4 Cara Kerja KCKT ...................................................................
8
2.5 Kriteria Optimasi KCKT ........................................................
8
2.6 Jenis Pemisahan KCKT ..........................................................
9
2.7 Komponen KCKT ...................................................................
9
2.7.1 Wadah Fase Gerak ......................................................
10
2.7.2 Pompa .........................................................................
10
2.7.3 Injektor .......................................................................
11
2.7.4 Kolom .........................................................................
12
2.7.5 Fase Diam ...................................................................
12
2.7.6 Detektor ......................................................................
13
2.7.7 Pengolah Data ............................................................
14
2.7.8 Fase Gerak ..................................................................
14
2.7.9 Elusi Gradien dan Elusi Isokratik ...............................
15
2.8 Validasi Metode ......................................................................
15
BAB III METODE PENELITIAN .........................................................
17
3.1 Waktu dan Tempat Penelitian .................................................
17
3.2 Alat-alat ..................................................................................
17
3.3 Bahan-bahan ...........................................................................
17
3.4 Pengambilan Sampel ..............................................................
18
3.5 Prosedur Penelitian .................................................................
18
3.5.1 Penyiapan Bahan .........................................................
18
3.5.1.1 Pembuatan Larutan KH2PO4...........................
18
ix
Universitas Sumatera Utara
3.5.1.2 Pembuatan Fase Gerak AsetonitrilBuffer Posfat pH 6............................
18
3.5.1.3 Pembuatan Larutan Induk Baku
Pirasetam..............................................
18
3.5.2 Prosedur Analisis .... .....................................................
19
3.5.2.1 Penyiapan Alat Kromatografi Cair Kinerja
Tinggi ..............................................................
19
3.5.2.2 Penentuan Perbandingan Fase Gerak yang
Optimum untuk Analisis .............................
19
3.5.3 Analisis Kualitatif Menggunakan KCKT.....................
20
3.5.3.1 Uji Identifikasi Pirasetam dalam Sampel
Menggunakan KCKT ..........................................
20
3.5.3.2 Pembuatan Kurva Kalibrasi Pirasetam
Baku .............................................................
20
3.5.3.3 Penetapan Kadar Sampel ...............................
21
3.5.3.4 Analisis Data secara Statistik .........................
21
3.5.4 Metode Validasi ..........................................................
22
3.5.4.1 Kecermatan (accuracy) ......................................
22
3.5.4.2 Keseksamaan (precision) ..................................
23
3.5.4.3 Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi
(LOQ) .................................................................
24
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ...............................................
25
4.1 Penentuan Kondisi Kromatografi untuk Mendapatkan Hasil
Analisis yang Optimum ...........................................................
25
4.2 Analisis Kualitatif Pirasetam Menggunakan KCKT ...............
28
4.3 Penentuan Linieritas Kurva Kalibrasi Pirasetam Baku ...........
29
4.4 Penetapan Kadar Pirasetam dalam Sediaan Tablet .................
30
4.5 Hasil Uji Validasi ....................................................................
31
x
Universitas Sumatera Utara
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .................................................
34
5.1 Kesimpulan ..............................................................................
34
5.2 Saran .........................................................................................
34
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................
35
LAMPIRAN ...........................................................................................
37
xi
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
4.1 Hasil Optimasi Perbandingan Fasa Gerak dan Laju Alir ...............
27
4.2 Perbandingan Retention time, Area, Height, dan Tailing
factor dari hasil Spiking ...............................................................
29
4.3 Kadar Rata-rata Pirasetam dalam Tablet ........................................
31
4.4 Data Hasil Uji Validasi Metode dari Tablet Generik
(PT. A) .........................................................................................
32
xii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
2.1 Struktur Pirasetam ......................................................................
5
2.2 Diagram Skematik Alat KCKT ..................................................
10
2.3 Tipe Injektor Katup Jalan-Kitar ..................................................
12
4.1 Kromatogram Pirasetam dengan Fasa Gerak Asetonitril-Buffer
posfat pH 6 (30:70) laju alir 1,0 ml/menit ..................................
25
4.2 Kromatogram Pirasetam dengan Fasa Gerak Asetonitril-Buffer
posfat pH 6 (20:80) laju alir 1,0 ml/menit ...................................
26
4.3 Kromatogram Pirasetam dengan Fasa Gerak Asetonitril-Buffer
posfat pH 6 (10:90) laju alir 1,0 ml/menit ...................................
26
4.4 Kromatogram Pirasetam dengan Fasa Gerak Asetonitril-Buffer
posfat pH 6 (30:70) laju alir 1,5 ml/menit ...................................
26
4.5 Kromatogram Pirasetam dengan Fasa Gerak Asetonitril-Buffer
posfat pH 6 (20:80) laju alir 1,5 ml/menit ...................................
27
4.6 Kromatogram Pirasetam dengan Fasa Gerak Asetonitril-Buffer
posfat pH 6 (10:90) laju alir 1,5 ml/menit ...................................
27
4.7 Kromatogram Pirasetam Sebelum Penambahan Baku Secara
KCKT ..........................................................................................
28
4.8 Kromatogram Pirasetam Setelah Penambahan Baku Secara
KCKT ..........................................................................................
29
4.9 Kurva Kalibrasi Pirasetam dalam Sediaan Tablet ......................
30
xiii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR LAMPIRAN
Gambar
1
Halaman
Kromatogram Pirasetam (5 µg/ml) C-18 asetonitril-buffer posfat
pH 6 (30:70) laju alir 1,0 ml/menit ..................................................
37
Kromatogram Pirasetam (10 µg/ml) C-18 asetonitril-buffer posfat
pH 6 (30:70) laju alir 1,0 ml/menit ..................................................
37
Kromatogram Pirasetam (20 µg/ml) C-18 asetonitril-buffer posfat
pH 6 (30:70) laju alir 1,0 ml/menit ..................................................
37
Kromatogram Pirasetam (30 µg/ml) C-18 asetonitril-buffer posfat
pH 6 (30:70) laju alir 1,0 ml/menit ..................................................
38
Kromatogram Pirasetam (50 µg/ml) C-18 asetonitril-buffer posfat
pH 6 (30:70) laju alir 1,0 ml/menit ..................................................
38
6
Kromatogram Pirasetam Generik PT. A .........................................
41
7
Kromatogram Pirasetam Generik PT. B .........................................
44
8
Kromatogram Pirasetam Merek Latropil PT. C ..............................
47
9
Kromatogram Pirasetam Merek Neurotam PT. D ..........................
50
10
Kromatogram Pirasetam Merek Resibron PT. E ............................
53
11
Kromatogram Pirasetam Merek Revolan PT. F ..............................
56
12
Kromatogram recovery Pada Rentang 80% Tanpa Penambahan
Baku ................................................................................................ 60
13
Kromatogram recovery Pada Rentang 80% Setelah Penambahan
Baku .................................................................................................
60
Kromatogram recovery Pada Rentang 100% Tanpa Penambahan
Baku .................................................................................................
61
Kromatogram recovery Pada Rentang 100% Setelah Penambahan
Baku .................................................................................................
61
Kromatogram recovery Pada Rentang 120% Tanpa Penambahan
Baku .................................................................................................
62
2
3
4
5
14
15
16
xiv
Universitas Sumatera Utara
Kromatogram recovery Pada Rentang 120% Setelah Penambahan
Baku .................................................................................................
62
18
Alat KCKT ......................................................................................
70
19
Sonikator .........................................................................................
70
20
Syringe KCKT .................................................................................
70
17
xv
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1.
Kromatogram Kurva Kalibrasi ..................................................
37
2.
Perhitungan Persamaan Regresi Pirasetam Baku ....................
39
3.
Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi
(LOQ) Pirasetam .....................................................................
40
4.
Kromatogram Hasil Penyuntikan Pirasetam Generik PT. A ....
41
5.
Kromatogram Hasil Penyuntikan Pirasetam GenerikPT. B .....
44
6.
Kromatogram Hasil Penyuntikan Pirasetam Merek Latropil
PT. C .........................................................................................
47
Kromatogram Hasil Penyuntikan Pirasetam Merek Neurotam
PT. D.........................................................................................
50
Kromatogram Hasil Penyuntikan Pirasetam Merek Resibron
PT. E ........................................................................................
53
Kromatogram Hasil Penyuntikan Pirasetam Merek Revolan
PT. F .........................................................................................
56
10.
Hasil Pengolahan Data Penetapan Kadar Pirasetam.................
59
11.
Kromatogram Hasil Penyuntikan dari Pirasetam Tablet dan
Bahan Baku pada Persen Perolehan Kembali pada Rentang
80%, 100%, dan 120% .............................................................
60
12.
Perhitungan Persen Perolehan kembali ....................................
63
13.
Hasil Pengolahan Data Persen Perolehan Kembali Pada
Rentang 80%, 100%, dan 120% ..............................................
68
14.
Tabel Distribusi t .....................................................................
69
15.
Alat yang Digunakan dalam Penelitian ....................................
70
16.
Setifikat Baku Pembanding Pirasetam ...................................
71
7.
8.
9.
xvi
Universitas Sumatera Utara