SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER SERVIKS: EFEK ANTIPROLIFERASI EKSTRAK DAUN KEMUNING (Murraya paniculata) TERHADAP KULTUR SEL HELA IN VITRO.
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER SERVIKS:
EFEK ANTIPROLIFERASI EKSTRAK DAUN KEMUNING (Murraya
paniculata ) TERHADAP KULTUR SEL HELA IN VITRO
SKRIPSI
Untuk Memenuhi Persyaratan
Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran
Erma Malindha
G.0010074
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS SEBELAS MARET
Surakarta
2013
commit to user
i
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
NASKAH JURNAL PUBLIKASI
SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER SERVIKS:
EFEK ANTIPROLIFERASI EKSTRAK DAUN KEMUNING (Murraya
paniculata ) TERHADAP KULTUR SEL HELA IN VITRO
Erma Malindha
G.0010074
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS SEBELAS MARET
Surakarta
2013
commit to user
i
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
PENGESAHAN SKRIPSI
Skripsi dengan judul : Skrining Tanaman Obat Berkhasiat Antikanker Serviks:
Efek Antiproliferasi Ekstrak Daun Kemuning (Murraya paniculata) terhadap
Kultur Sel Hela in Vitro
Erma Malindha, NIM : G0010074, Tahun : 2013
Telah diuji dan sudah disahkan di hadapan Dewan Penguji Skripsi
Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta
Pada Hari Jumat, Tanggal 20 Desember 2013
Pembimbing Utama
Nama : Ratih Puspita Febrinasari, dr., M.Sc
NIP : 19810208 200604 2 003
(…………………………….)
Pembimbing Pendamping
Nama : Brian Wasita, dr., Ph.D
NIP : 19790722 200501 1 003
(…………………………….)
Penguji Utama
Nama : Endang Sri Hardjanti, dr., M.Or
NIP : 19471007 197611 2 001
(…………………………….)
Penguji Pendamping
Nama : Nanang Wiyono, dr., M.Kes
NIP : 19760530 200212 1 002
(…………………………….)
Surakarta, ______________________
Ketua Tim Skripsi
Dekan FK UNS
Ari Natalia Probandari, dr., MPH., Ph.D Prof. Dr.
Muthmainah,
dr.,Adnan,
M.Kes.dr., Sp.PD-KR-FINASIM
Zainal Arifin
commit to user
NIP 19751221 200501 2 001
NIP 19510601 197903 1 002
ii
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
PERNYATAAN
Dengan ini menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah
diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi dan
sepanjang pengetahuan penulis juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah
ditulis atau diterbitkan oleh orang lain kecuali yang secara tertulis diacu dalam
naskah dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Surakarta, 20 Desember 2013
Erma Malindha
NIM. G0010074
commit to user
iii
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
ABSTRAK
Erma Malindha, G.0010074, 2013. Skrining Tanaman Obat Berkhasiat
Antikanker Serviks: Efek Antiproliferasi Ekstrak Daun Kemuning (Murraya
paniculata ) terhadap Kultur Sel Hela in Vitro. Skripsi. Fakultas Kedokteran
Universitas Sebelas Maret, Surakarta.
Latar Belakang: Kanker serviks merupakan penyakit keganasan akibat
pertumbuhan sel yang tidak normal pada daerah serviks. Di dunia, prevalensi
kanker serviks sebesar 74% dibandingkan kanker ginekologi lainnya Di Indonesia,
setiap tahun terdeteksi lebih dari 15.000 kasus kanker serviks. Sampai saat ini,
terapi kanker serviks belum memberikan hasil yang memuaskan, mahal, dan
memiliki banyak efek samping. Ekstrak daun kemuning mengandung sejumlah
senyawa aktif yang memiliki potensi sebagai antioksidan, antiinflamasi,
antimutagenik, dan antitumor. Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan dan
mengembangkan antikanker serviks dengan menggunakan ekstrak Daun Kemuning
(Murraya paniculata ) terhadap kultur sel Hela secara in vitro yang dilihat dari efek
antiproliferasi sel kanker.
Metode Penelitian: Penelitian ini bersifat eksperimental laboratorik dengan the
post test only controlled group design . Sampel menggunakan kultur sel Hela .
Masing-masing kultur sel Hela terdiri dari Kontrol Media (KM), Kontrol Sel (KS),
Kontrol Positif dengan doxorubicin (KP1), dan Kelompok Perlakuan dengan
ekstrak Daun Kemuning (KP2). Ekstrak Daun Kemuning yang digunakan adalah 8
serial dosis (0,625 µg/mL, 1.25 µg/mL; 2.5 µg/mL, 5 µg/mL, 10 µg/mL, 20 µg/mL;
40 µg/mL; 80 µg/mL). Senyawa aktif ekstrak diindentifikasi dengan metode
spektrofotometri dan kromatografi lapis tipis. Proliferasi sel dihitung berdasarkan
viabilitas sel menggunakan XTT assay dan dilihat absorbansinya dengan ELISA
reader . Data dianalisis statistik dengan Uji Kruskal Wallis dilanjutkan Uji Mann
Whitney menggunakan SPSS for Window Release 17.0. Untuk menghitung
hambatan proliferasi sel Hela data dianalisis menggunakan rumus IC50.
Hasil Penelitian: Ekstrak Daun Kemuning memiliki kandungan senyawa
aktif coumarin, alkaloid, flavonoid, tanin, dan steroid. Hasil Uji Kruskal
Wallis menunjukkan hasil yang signifikan (p = 0,000). Hasil analisis hambatan
sel (IC 50 ) pada kultur sel Hela dengan ekstrak Daun Kemuning adalah 2,13
µg/ml; dan kultur sel Hela dengan doxor ubicin adalah 11,1 µg/ml. Dosis
ekstrak 80µg/mL menunjukkan hasil yang paling baik.
Simpulan: Ekstrak Daun Kemuning (Murraya paniculata ) memiliki efek
antiproliferasi terhadap kultur sel Hela secara in vitro. Efek antiproliferasi ekstrak
Daun Kemuning pada kultur sel Hela lebih kuat dibandingkan kontrol positif
doxorubicin.
Kata kunci : Ekstrak daun Murraya
paniculata,
commit
to user Antiproliferasi, Sel Hela,
Kanker Serviks
iv
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
ABSTRACT
Erma Malindha, G.0010074, 2013. Screening of Anticancer Plants for Cervical
Cancer: Antiproliferative Effects Kemuning Leaves Extract (Murraya paniculata )
against Hela Cells Culture In Vitro. Mini Thesis. Faculty of Medicine, Sebelas
Maret University, Surakarta.
Background: Cervical cancer is a malignant disease due to abnormal cell growth
on cervix. In the world, the prevalence of cervical cancer was 74% compared to
other gynecologic cancers. In Indonesia, each year cases of cervical cancer was
detected more than 15,000. Until now, treatment of cervical cancer have not
provided satisfactory results, expensive, and many side effects. Kemuning leaves
(Murraya paniculata ) extract contains a number of active compounds that have
potential as an antioxidant, antiinflammatory, antimutagenic, and antitumor. This
study aims to investigate antiproliferative effect of Kemuning leaves extract
(Murraya paniculata ) against Hela cell cultures in vitro.
Methods: This research was an experimental laboratory with the post test only
controlled group design. Hela cell were used. Hela cells cultures groups were
consisted of Media Controls (KM), Control Cells (KS), Positive Control using
doxorubicin (KP1), and Treatment using Kemuning Leaves extract (KP2).
Kemuning Leaves extract were used 8 serial doses (0,625 µg/mL, 1.25 µg/mL; 2.5
µg/mL, 5 µg/mL, 10 µg/mL, 20µg/mL; 40µg/mL; 80µg/mL). Active compounds
extract were analyzed using spectrophotometry and thin layer chromatography
methods. Cells proliferation was calculated using XTT cell viability assay and
absorbance was measured using ELISA reader. Data were analyzed statistically
using Kruskal Wallis test (p < 0.05) followed by determined Mann Whitney test (p
< 0.05) Then, the potential of cell growth inhibition was also performed using IC50
formula.
Results: Kemuning Leaves extract contains active compounds coumarin, alkaloids,
flavonoids, tannins, and steroids. Results of Kruskal Wallis test between treatment
and controlled groups showed significant difference (p = 0.000). Significant results
are shown ranging doses of 1.25 µg/mL. The cell growth inhibition effect (IC50) of
Kemuning leaves extract was 2.13 µg/mL and 11.1 µg/mL for doxorubicin,
respectively. Extract dose of 80 µg/mL showed the most excellent effect.
Conclusions: Kemuning leaves (Murraya paniculata ) extract has antiproliferative
effects against Hela cell cultures in vitro. Antiproliferative effects of Kemuning
leaves extracts on Hela cell culture is stronger than doxorubicin which serve as
positive control.
Kata kunci : Murraya paniculata Leaves extract, Antiproliferative, Hela cell,
commit to user
cervical cancer
v
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
PRAKATA
Alhamdulillah, segala puji bagi Allah Subhanahu Wa Ta’ala yang telah
memberikan kekuatan, kesabaran, dan kelapangan yang tak terduga, sehingga
penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan laporan penelitian dengan
judul “Skrining Tanaman Obat Berkhasiat Antikanker Serviks: Efek Antiproliferasi
Ekstrak Daun Kemuning (Murraya paniculata ) terhadap Kultur Sel Hela in Vitro”.
Skripsi ini disusun sebagai salah satu syarat kelulusan tingkat sarjana di
Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta. Kendala dalam
penyusunan skripsi ini dapat teratasi atas pertolongan Allah SWT melalui
bimbingan dan dukungan banyak pihak. Untuk itu, perkenankan penulis
mengucapkan terima kasih kepada:
1. Prof. Dr. Zainal Arifin Adnan, dr., Sp.PD-KR-FINASIM., selaku Dekan Fakultas
Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta.
2. Ratih Puspita Febrinasari, dr., M.Sc., selaku Pembimbing Utama yang telah
banyak meluangkan waktu untuk memberikan motivasi dan bimbingan.
3. Brian Wasita, dr., Ph.D., selaku Pembimbing Pendamping yang telah banyak
meluangkan waktu untuk memberikan bimbingan dan solusi.
4. Endang Sri Hardjanti, dr., M.Or, selaku Penguji Utama yang telah
memberikan banyak masukan dalam penyusunan skripsi ini.
5. Nanang Wiyono, dr., M.Kes, selaku Anggota Penguji yang telah memberikan
banyak masukan dalam penyusunan skripsi ini.
6. Group Research Kanker FK UNS (Brian Wasita, dr., Ph.D, Nanang Wiyono,
dr., M.Kes, Ratih Puspita Febrinasari, dr., M.Sc) atas kesediaan, kerjasama, dan
bantuan dalam pelaksanaan peneitian ini.
7. Tim skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta, Ari
Natalia Probandari, dr., MPH., Ph.D.; Nur Hafidha Hikmayani, dr.,
MClinEpid.; Kusmadewi, dr; Ibu. Sri Eni Narbiatty, SH, MH; dan Bp. Sunardi
yang telah meluangkan waktu dan banyak membantu.
8. Ayah Agus Alip Mulyono, S.Pd. dan Ibu Sukarni, S.Pd., adik Wahyu Dwi
Nugroho, dan adik Dewi Arum Sari, keluarga yang luar biasa, terima kasih atas
doa yang tanpa jeda, motivasi yang tiada henti, kesabaran yang menenangkan,
dan kasih sayang yang tak pernah lekang.
9. Akhmad Miftahudin Fazri, teman seperjuangan skripsi yang luar biasa beserta
sahabat yang selalu menemani, membantu, dan memotivasi.
10. Hajar, Dina, Silvia, Adi, teman yang menemani, membantu, dan memotivasi.
11. Seluruh Keluarga Besar Kastrat de Geneeskunde dan BSMI Surakarta yang
senantiasa menjadi rumah pelepas lelah dan teman yang hangat.
12. Keluarga Besar Asisten Farmakologi FK UNS 2010, atas dukungan dan
bantuan selama ini.
13. Semua pihak yang telah membantu terselesainya skripsi ini, yang tidak dapat
penulis sebutkan satu-persatu.
Meskipun tulisan ini masih belum sempurna, penulis berharap skripsi ini bisa
bermanfaat untuk pengembangan ilmu pengetahuan. Penulis mengharapkan masukan,
kritik, dan saran dari pembaca untuk
kesempurnaan
commit
to user skripsi ini.
Surakarta, Desember 2013
Erma Malindha
vi
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR ISI
PRAKATA ............................................................................................................
vi
DAFTAR ISI ......................................................................................................... vii
DAFTAR TABEL .................................................................................................
ix
DAFTAR GRAFIK ...............................................................................................
x
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................
xi
DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xii
BAB I.
BAB II.
PENDAHULUAN .............................................................................
1
A. Latar Belakang Masalah................................................................
1
B. Perumusan Masalah .....................................................................
4
C. Tujuan Penelitian .........................................................................
4
D. Manfaat Penelitian .......................................................................
5
LANDASAN TEORI .........................................................................
6
A. Tinjauan Pustaka ..........................................................................
6
1. Kanker Serviks ..........................................................................
6
2. Doxorubicin .............................................................................. 17
3. Daun Kemuning (Murraya paniculata) .................................... 19
4. Kultur Sel Hela ......................................................................... 25
5. Uji Antiproliferasi Sel ............................................................... 30
B. Kerangka Pemikiran ..................................................................... 36
C. Hipotesis ...................................................................................... 37
commit
to user
BAB III. METODE PENELITIAN
....................................................................
38
vii
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
A. Jenis Penelitian............................................................................... 38
B. Lokasi Penelitian............................................................................ 38
C. Subjek Penelitian
...................................................... 38
D. Teknik Sampling ........................................................................... 38
E. Rancangan Penelitian .................................................................... 39
F. Identifikasi Variabel Penelitian..................................................... 40
G. Definisi Operasional Variabel Penelitian ...................................... 40
H. Alat dan Bahan Penelitian ............................................................. 43
I. Cara Kerja .................................................................................... 44
J. Teknik Analisis Data .................................................................... 53
BAB IV. HASIL PENELITIAN ........................................................................ 55
BAB V.
PEMBAHASAN ................................................................................ 60
BAB VI. SIMPULAN DAN SARAN ............................................................... 65
A. Simpulan ....................................................................................... 65
B. Saran ............................................................................................. 65
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 66
LAMPIRAN .......................................................................................................... 76
commit to user
viii
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR TABEL
Tabel 2.1. Stadium Kanker Serviks (Muttaqin, 2010) ....................................... 14
Tabel 4.1. Hasil Uji Ekstrak Murraya paniculata (Daun Kemuning)................ 55
Tabel 4.2. Hasil Nilai Signifikan (p) Uji Mann Whitney untuk MasingMasing Kelompok Perlakuan Ekstrak Daun Kemuning ................... 58
Tabel 4.3. Hasil Penghitungan IC50 pada Dua Kelompok Perlakuan................. 62
commit to user
ix
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR GRAFIK
Grafik 4.1. Presentase Viabilitas Sel Hela dengan Perlakuan Ekstrak Etanol
70% Daun Kemuning pada XTT Assay. Data Disajikan dalam
Bentuk Rata-Rata ± SD. ................................................................... 56
Grafik 4.2. Presentase Viabilitas Sel Hela dengan Perlakuan Doxorubicin
pada XTT Assay. Data Disajikan dalam Bentuk Rata-Rata ±
SD....................................................................................................... 57
commit to user
x
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1. Penampang Kanker Serviks (Boardman, 2012) ........................... 6
Gambar 2.2. Organisasi Genom HPV Tipe 16 dan 18 (Kurg, 2011) ................ 10
Gambar 2.3. Murraya paniculata (Rahman et al., 2010) .................................. 21
Gambar 2.4. Hela Cell Line (George, 2010) ..................................................... 26
Gambar 2.5. Ilustrasi Skematik Peran dari Cyclin, CDK dan CDK
Inhibitor pada Regulasi Siklus Sel (Kumar et al., 2007) .............. 30
Gambar 2.6. Defek Utama yang Terdapat pada Kanker (Malumbres et al.,
2009) ............................................................................................. 31
Gambar 2.7. Skema Kerangka Pemikiran ......................................................... 36
Gambar 3.1. Skema Rancangan Penelitian........................................................ 39
commit to user
xi
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Surat Izin Penelitian
Lampiran 2. Etichal Clearance
Lampiran 3. Hasil Uji Ekstrak Daun Kemuning (Murraya paniculata)
Lampiran 4. Foto Pembuatan Ekstrak Daun Kemuning (Murraya paniculata )
Lampiran 5. Foto Plate dan Foto Kegiatan XTT Assay Kultur Sel Hela
Lampiran 6. Perhitungan IC50
Lampiran 7. Hasil Analisis Viabilitas Sel Menggunakan SPSS
commit to user
xii
digilib.uns.ac.id
SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER SERVIKS:
EFEK ANTIPROLIFERASI EKSTRAK DAUN KEMUNING (Murraya
paniculata ) TERHADAP KULTUR SEL HELA IN VITRO
SKRIPSI
Untuk Memenuhi Persyaratan
Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran
Erma Malindha
G.0010074
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS SEBELAS MARET
Surakarta
2013
commit to user
i
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
NASKAH JURNAL PUBLIKASI
SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER SERVIKS:
EFEK ANTIPROLIFERASI EKSTRAK DAUN KEMUNING (Murraya
paniculata ) TERHADAP KULTUR SEL HELA IN VITRO
Erma Malindha
G.0010074
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS SEBELAS MARET
Surakarta
2013
commit to user
i
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
PENGESAHAN SKRIPSI
Skripsi dengan judul : Skrining Tanaman Obat Berkhasiat Antikanker Serviks:
Efek Antiproliferasi Ekstrak Daun Kemuning (Murraya paniculata) terhadap
Kultur Sel Hela in Vitro
Erma Malindha, NIM : G0010074, Tahun : 2013
Telah diuji dan sudah disahkan di hadapan Dewan Penguji Skripsi
Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta
Pada Hari Jumat, Tanggal 20 Desember 2013
Pembimbing Utama
Nama : Ratih Puspita Febrinasari, dr., M.Sc
NIP : 19810208 200604 2 003
(…………………………….)
Pembimbing Pendamping
Nama : Brian Wasita, dr., Ph.D
NIP : 19790722 200501 1 003
(…………………………….)
Penguji Utama
Nama : Endang Sri Hardjanti, dr., M.Or
NIP : 19471007 197611 2 001
(…………………………….)
Penguji Pendamping
Nama : Nanang Wiyono, dr., M.Kes
NIP : 19760530 200212 1 002
(…………………………….)
Surakarta, ______________________
Ketua Tim Skripsi
Dekan FK UNS
Ari Natalia Probandari, dr., MPH., Ph.D Prof. Dr.
Muthmainah,
dr.,Adnan,
M.Kes.dr., Sp.PD-KR-FINASIM
Zainal Arifin
commit to user
NIP 19751221 200501 2 001
NIP 19510601 197903 1 002
ii
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
PERNYATAAN
Dengan ini menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah
diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi dan
sepanjang pengetahuan penulis juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah
ditulis atau diterbitkan oleh orang lain kecuali yang secara tertulis diacu dalam
naskah dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Surakarta, 20 Desember 2013
Erma Malindha
NIM. G0010074
commit to user
iii
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
ABSTRAK
Erma Malindha, G.0010074, 2013. Skrining Tanaman Obat Berkhasiat
Antikanker Serviks: Efek Antiproliferasi Ekstrak Daun Kemuning (Murraya
paniculata ) terhadap Kultur Sel Hela in Vitro. Skripsi. Fakultas Kedokteran
Universitas Sebelas Maret, Surakarta.
Latar Belakang: Kanker serviks merupakan penyakit keganasan akibat
pertumbuhan sel yang tidak normal pada daerah serviks. Di dunia, prevalensi
kanker serviks sebesar 74% dibandingkan kanker ginekologi lainnya Di Indonesia,
setiap tahun terdeteksi lebih dari 15.000 kasus kanker serviks. Sampai saat ini,
terapi kanker serviks belum memberikan hasil yang memuaskan, mahal, dan
memiliki banyak efek samping. Ekstrak daun kemuning mengandung sejumlah
senyawa aktif yang memiliki potensi sebagai antioksidan, antiinflamasi,
antimutagenik, dan antitumor. Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan dan
mengembangkan antikanker serviks dengan menggunakan ekstrak Daun Kemuning
(Murraya paniculata ) terhadap kultur sel Hela secara in vitro yang dilihat dari efek
antiproliferasi sel kanker.
Metode Penelitian: Penelitian ini bersifat eksperimental laboratorik dengan the
post test only controlled group design . Sampel menggunakan kultur sel Hela .
Masing-masing kultur sel Hela terdiri dari Kontrol Media (KM), Kontrol Sel (KS),
Kontrol Positif dengan doxorubicin (KP1), dan Kelompok Perlakuan dengan
ekstrak Daun Kemuning (KP2). Ekstrak Daun Kemuning yang digunakan adalah 8
serial dosis (0,625 µg/mL, 1.25 µg/mL; 2.5 µg/mL, 5 µg/mL, 10 µg/mL, 20 µg/mL;
40 µg/mL; 80 µg/mL). Senyawa aktif ekstrak diindentifikasi dengan metode
spektrofotometri dan kromatografi lapis tipis. Proliferasi sel dihitung berdasarkan
viabilitas sel menggunakan XTT assay dan dilihat absorbansinya dengan ELISA
reader . Data dianalisis statistik dengan Uji Kruskal Wallis dilanjutkan Uji Mann
Whitney menggunakan SPSS for Window Release 17.0. Untuk menghitung
hambatan proliferasi sel Hela data dianalisis menggunakan rumus IC50.
Hasil Penelitian: Ekstrak Daun Kemuning memiliki kandungan senyawa
aktif coumarin, alkaloid, flavonoid, tanin, dan steroid. Hasil Uji Kruskal
Wallis menunjukkan hasil yang signifikan (p = 0,000). Hasil analisis hambatan
sel (IC 50 ) pada kultur sel Hela dengan ekstrak Daun Kemuning adalah 2,13
µg/ml; dan kultur sel Hela dengan doxor ubicin adalah 11,1 µg/ml. Dosis
ekstrak 80µg/mL menunjukkan hasil yang paling baik.
Simpulan: Ekstrak Daun Kemuning (Murraya paniculata ) memiliki efek
antiproliferasi terhadap kultur sel Hela secara in vitro. Efek antiproliferasi ekstrak
Daun Kemuning pada kultur sel Hela lebih kuat dibandingkan kontrol positif
doxorubicin.
Kata kunci : Ekstrak daun Murraya
paniculata,
commit
to user Antiproliferasi, Sel Hela,
Kanker Serviks
iv
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
ABSTRACT
Erma Malindha, G.0010074, 2013. Screening of Anticancer Plants for Cervical
Cancer: Antiproliferative Effects Kemuning Leaves Extract (Murraya paniculata )
against Hela Cells Culture In Vitro. Mini Thesis. Faculty of Medicine, Sebelas
Maret University, Surakarta.
Background: Cervical cancer is a malignant disease due to abnormal cell growth
on cervix. In the world, the prevalence of cervical cancer was 74% compared to
other gynecologic cancers. In Indonesia, each year cases of cervical cancer was
detected more than 15,000. Until now, treatment of cervical cancer have not
provided satisfactory results, expensive, and many side effects. Kemuning leaves
(Murraya paniculata ) extract contains a number of active compounds that have
potential as an antioxidant, antiinflammatory, antimutagenic, and antitumor. This
study aims to investigate antiproliferative effect of Kemuning leaves extract
(Murraya paniculata ) against Hela cell cultures in vitro.
Methods: This research was an experimental laboratory with the post test only
controlled group design. Hela cell were used. Hela cells cultures groups were
consisted of Media Controls (KM), Control Cells (KS), Positive Control using
doxorubicin (KP1), and Treatment using Kemuning Leaves extract (KP2).
Kemuning Leaves extract were used 8 serial doses (0,625 µg/mL, 1.25 µg/mL; 2.5
µg/mL, 5 µg/mL, 10 µg/mL, 20µg/mL; 40µg/mL; 80µg/mL). Active compounds
extract were analyzed using spectrophotometry and thin layer chromatography
methods. Cells proliferation was calculated using XTT cell viability assay and
absorbance was measured using ELISA reader. Data were analyzed statistically
using Kruskal Wallis test (p < 0.05) followed by determined Mann Whitney test (p
< 0.05) Then, the potential of cell growth inhibition was also performed using IC50
formula.
Results: Kemuning Leaves extract contains active compounds coumarin, alkaloids,
flavonoids, tannins, and steroids. Results of Kruskal Wallis test between treatment
and controlled groups showed significant difference (p = 0.000). Significant results
are shown ranging doses of 1.25 µg/mL. The cell growth inhibition effect (IC50) of
Kemuning leaves extract was 2.13 µg/mL and 11.1 µg/mL for doxorubicin,
respectively. Extract dose of 80 µg/mL showed the most excellent effect.
Conclusions: Kemuning leaves (Murraya paniculata ) extract has antiproliferative
effects against Hela cell cultures in vitro. Antiproliferative effects of Kemuning
leaves extracts on Hela cell culture is stronger than doxorubicin which serve as
positive control.
Kata kunci : Murraya paniculata Leaves extract, Antiproliferative, Hela cell,
commit to user
cervical cancer
v
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
PRAKATA
Alhamdulillah, segala puji bagi Allah Subhanahu Wa Ta’ala yang telah
memberikan kekuatan, kesabaran, dan kelapangan yang tak terduga, sehingga
penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan laporan penelitian dengan
judul “Skrining Tanaman Obat Berkhasiat Antikanker Serviks: Efek Antiproliferasi
Ekstrak Daun Kemuning (Murraya paniculata ) terhadap Kultur Sel Hela in Vitro”.
Skripsi ini disusun sebagai salah satu syarat kelulusan tingkat sarjana di
Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta. Kendala dalam
penyusunan skripsi ini dapat teratasi atas pertolongan Allah SWT melalui
bimbingan dan dukungan banyak pihak. Untuk itu, perkenankan penulis
mengucapkan terima kasih kepada:
1. Prof. Dr. Zainal Arifin Adnan, dr., Sp.PD-KR-FINASIM., selaku Dekan Fakultas
Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta.
2. Ratih Puspita Febrinasari, dr., M.Sc., selaku Pembimbing Utama yang telah
banyak meluangkan waktu untuk memberikan motivasi dan bimbingan.
3. Brian Wasita, dr., Ph.D., selaku Pembimbing Pendamping yang telah banyak
meluangkan waktu untuk memberikan bimbingan dan solusi.
4. Endang Sri Hardjanti, dr., M.Or, selaku Penguji Utama yang telah
memberikan banyak masukan dalam penyusunan skripsi ini.
5. Nanang Wiyono, dr., M.Kes, selaku Anggota Penguji yang telah memberikan
banyak masukan dalam penyusunan skripsi ini.
6. Group Research Kanker FK UNS (Brian Wasita, dr., Ph.D, Nanang Wiyono,
dr., M.Kes, Ratih Puspita Febrinasari, dr., M.Sc) atas kesediaan, kerjasama, dan
bantuan dalam pelaksanaan peneitian ini.
7. Tim skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta, Ari
Natalia Probandari, dr., MPH., Ph.D.; Nur Hafidha Hikmayani, dr.,
MClinEpid.; Kusmadewi, dr; Ibu. Sri Eni Narbiatty, SH, MH; dan Bp. Sunardi
yang telah meluangkan waktu dan banyak membantu.
8. Ayah Agus Alip Mulyono, S.Pd. dan Ibu Sukarni, S.Pd., adik Wahyu Dwi
Nugroho, dan adik Dewi Arum Sari, keluarga yang luar biasa, terima kasih atas
doa yang tanpa jeda, motivasi yang tiada henti, kesabaran yang menenangkan,
dan kasih sayang yang tak pernah lekang.
9. Akhmad Miftahudin Fazri, teman seperjuangan skripsi yang luar biasa beserta
sahabat yang selalu menemani, membantu, dan memotivasi.
10. Hajar, Dina, Silvia, Adi, teman yang menemani, membantu, dan memotivasi.
11. Seluruh Keluarga Besar Kastrat de Geneeskunde dan BSMI Surakarta yang
senantiasa menjadi rumah pelepas lelah dan teman yang hangat.
12. Keluarga Besar Asisten Farmakologi FK UNS 2010, atas dukungan dan
bantuan selama ini.
13. Semua pihak yang telah membantu terselesainya skripsi ini, yang tidak dapat
penulis sebutkan satu-persatu.
Meskipun tulisan ini masih belum sempurna, penulis berharap skripsi ini bisa
bermanfaat untuk pengembangan ilmu pengetahuan. Penulis mengharapkan masukan,
kritik, dan saran dari pembaca untuk
kesempurnaan
commit
to user skripsi ini.
Surakarta, Desember 2013
Erma Malindha
vi
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR ISI
PRAKATA ............................................................................................................
vi
DAFTAR ISI ......................................................................................................... vii
DAFTAR TABEL .................................................................................................
ix
DAFTAR GRAFIK ...............................................................................................
x
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................
xi
DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xii
BAB I.
BAB II.
PENDAHULUAN .............................................................................
1
A. Latar Belakang Masalah................................................................
1
B. Perumusan Masalah .....................................................................
4
C. Tujuan Penelitian .........................................................................
4
D. Manfaat Penelitian .......................................................................
5
LANDASAN TEORI .........................................................................
6
A. Tinjauan Pustaka ..........................................................................
6
1. Kanker Serviks ..........................................................................
6
2. Doxorubicin .............................................................................. 17
3. Daun Kemuning (Murraya paniculata) .................................... 19
4. Kultur Sel Hela ......................................................................... 25
5. Uji Antiproliferasi Sel ............................................................... 30
B. Kerangka Pemikiran ..................................................................... 36
C. Hipotesis ...................................................................................... 37
commit
to user
BAB III. METODE PENELITIAN
....................................................................
38
vii
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
A. Jenis Penelitian............................................................................... 38
B. Lokasi Penelitian............................................................................ 38
C. Subjek Penelitian
...................................................... 38
D. Teknik Sampling ........................................................................... 38
E. Rancangan Penelitian .................................................................... 39
F. Identifikasi Variabel Penelitian..................................................... 40
G. Definisi Operasional Variabel Penelitian ...................................... 40
H. Alat dan Bahan Penelitian ............................................................. 43
I. Cara Kerja .................................................................................... 44
J. Teknik Analisis Data .................................................................... 53
BAB IV. HASIL PENELITIAN ........................................................................ 55
BAB V.
PEMBAHASAN ................................................................................ 60
BAB VI. SIMPULAN DAN SARAN ............................................................... 65
A. Simpulan ....................................................................................... 65
B. Saran ............................................................................................. 65
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 66
LAMPIRAN .......................................................................................................... 76
commit to user
viii
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR TABEL
Tabel 2.1. Stadium Kanker Serviks (Muttaqin, 2010) ....................................... 14
Tabel 4.1. Hasil Uji Ekstrak Murraya paniculata (Daun Kemuning)................ 55
Tabel 4.2. Hasil Nilai Signifikan (p) Uji Mann Whitney untuk MasingMasing Kelompok Perlakuan Ekstrak Daun Kemuning ................... 58
Tabel 4.3. Hasil Penghitungan IC50 pada Dua Kelompok Perlakuan................. 62
commit to user
ix
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR GRAFIK
Grafik 4.1. Presentase Viabilitas Sel Hela dengan Perlakuan Ekstrak Etanol
70% Daun Kemuning pada XTT Assay. Data Disajikan dalam
Bentuk Rata-Rata ± SD. ................................................................... 56
Grafik 4.2. Presentase Viabilitas Sel Hela dengan Perlakuan Doxorubicin
pada XTT Assay. Data Disajikan dalam Bentuk Rata-Rata ±
SD....................................................................................................... 57
commit to user
x
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1. Penampang Kanker Serviks (Boardman, 2012) ........................... 6
Gambar 2.2. Organisasi Genom HPV Tipe 16 dan 18 (Kurg, 2011) ................ 10
Gambar 2.3. Murraya paniculata (Rahman et al., 2010) .................................. 21
Gambar 2.4. Hela Cell Line (George, 2010) ..................................................... 26
Gambar 2.5. Ilustrasi Skematik Peran dari Cyclin, CDK dan CDK
Inhibitor pada Regulasi Siklus Sel (Kumar et al., 2007) .............. 30
Gambar 2.6. Defek Utama yang Terdapat pada Kanker (Malumbres et al.,
2009) ............................................................................................. 31
Gambar 2.7. Skema Kerangka Pemikiran ......................................................... 36
Gambar 3.1. Skema Rancangan Penelitian........................................................ 39
commit to user
xi
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Surat Izin Penelitian
Lampiran 2. Etichal Clearance
Lampiran 3. Hasil Uji Ekstrak Daun Kemuning (Murraya paniculata)
Lampiran 4. Foto Pembuatan Ekstrak Daun Kemuning (Murraya paniculata )
Lampiran 5. Foto Plate dan Foto Kegiatan XTT Assay Kultur Sel Hela
Lampiran 6. Perhitungan IC50
Lampiran 7. Hasil Analisis Viabilitas Sel Menggunakan SPSS
commit to user
xii