Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia Serta Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Kayu Siwak (Salvadora persica Wall.) Metode DPPH

\ Lampiran 1. Surat hasil identifikasi tumbuhan

49
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 2. Bagan kerja penelitian
Kayu siwak
Dicuci, ditiriskan, diiris-iris
ditimbang sebagai berat basah

dan

Dikeringkan dalam lemari pengering

Simplisia

Ditimbang berat kering
Dihaluskan
Serbuk simplisia

Karakterisasi simplisia


Skrining Fitokimia

Pemeriksaan
makroskopik

Pemeriksaan
alkaloid

Pemeriksaan
mikroskopik

Pemeriksaan
glikosida

Penetapan kadar air

Pemeriksaan
flavonoid


Penetapan kadar
sari yang larut
dalam air

Pemeriksaan
tanin

Penetapan kadar
sari yang larut
dalam etanol

Pemeriksaan
saponin

Penetapan kadar
abu total

Pemeriksaan
Steroid/
triterpenoid


Penetapan kadar
abu yang tidak
larut dalam asam

Ekstraksi
Diperkolasi
etanol 96%

dengan

Perkolat

Diuapkan
dengan
rotary evaporator
Ekstrak kental

Dilakukan uji aktivitas
antioksidansecara

spektrofotometri UVVisible

Hasil

50
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 3. Tumbuhan kayu siwak

Tumbuhan kayu siwak (Salvadora persica Wall.) http://www.google.com
Gambar 1. Kayu siwak

Gambar 2. Serbuk simplisia kayu siwak

51
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4.

Gambar 3. Simplisia kayu siwak


52
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. Hasil mikroskopik simplisia kayu siwak.

1

2
3

4

Keterangan : Perbesaran 10X40
1.
2.
3.
4.

Sel Parenkim

Serat-serat kayu
Serat kayu berisi ca-oksalat
Fragmen trakea

53
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 6. Gambar alat sepektrofotometer UV-visibel (Uv mini-1240
Shimadzu).

54
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 7. Perhitungan pemeriksaan karateristik serbuk simplisia kayu siwak
1. Perhitungan kadar air serbuk simplisia kayu siwak

% Kadar air simplisia =

No.
1.

2.
3.

Berat sampel (g)
5,017
5,032
5,014

1.

Kadar air =

2.

Kadar air =

3.

Kadar air =


1,25-0,9
5,017

Volume awal (ml)
0,9
1,25
2,05

5,032
2,35 – 2,05

% Rata-rata kadar air =

Volume akhir (ml)
1,25
2,05
2,35

× 100% = 6,97%


2,05 – 1,25

5,014

volume air (ml)
x 100%
berat sampel (g)

× 100% = 7,35%

× 100% = 5,98%

6,97%+7,35%+5,98%
3

= 6,77%

2. Perhitungan kadar sari larut dalam air

Berat sari (g) 100

x
100%
Bera sampel g) 20

% Kadar sari larut dalam air =
No.
1.
2.
3.

Berat sampel (g)
5,014
5,006
5,023

1.

Kadar sari larut dalam air =

2.


Kadar sari larut dalam air =

0,220
5,014
0,249
5,006

Berat sari (g)
0,220
0,249
0,219

×
×

100
20
100
20

× 100% = 21,93%
× 100% = 24,87%

55
Universitas Sumatera Utara

3.

0,219

Kadar sari larut dalam air =

% Rata-rata kadar sari larut air =

5,023

×

100

× 100% = 21,79%

20

21,93% + 24,87% + 21,79%
3

= 22,86%

3. Perhitungan kadar sari simplisia larut dalam etanol
% Kadar sari larut dalam etanol =
No.
1.
2.
3.

Berat sari (g)
100
x
x 100%
Berat simplisia (g) 20

Berat sampel (g)
5,002
5,016
5,010

Berat sari (g)
0,933
0,124
0,128

1.

Kadar sari larut dalam etanol =

2.

Kadar sari larut dalam etanol =

3.

Kadar sari larut dalam etanol =

% Rata-rata kadar sari larut etanol =

0,933
5,002
0,124
5,016
0,128
5,010

×
×
×

100
20
100
20
100
20

× 100%

= 93,26%

× 100%

= 12,36%

× 100%

= 12,77%

93,26% + 12,36% +12,77%
3

= 93,26%

4. Perhitungan kadar abu total simplisia
% Kadar abu total =

Berat abu (g)
x 100%
Berat simplisia (g)

No.

Berat sampel (g)

Berat abu (g)

1.

2,003

0,13

2.

2,007

0,16

3.

2,014

0,15

1.

Kadar abu total =

2.

Kadar abu total =

0,13
2,003
0,16
2,007

× 100% = 6,49%
× 100% = 2,97%

56
Universitas Sumatera Utara

3.

Kadar abu total =

0,15
2,014

% Rata-rata kadar abu total =

× 100% = 7,44%
6,49% + 2,97% + 7,44%
3

= 7,3%

5. Perhitungan kadar abu simplisia tidak larut dalam asam
% Kadar abu tidak larut dalam asam =

No.
1.
2.
3.

Berat abu (g)
x 100%
Berat simplisia (g)

Berat sampel (g)
2,003
2,007
2,014

Berat abu (g)
0,0086
0,0054
0,0062

1.

Kadar abu tidak larut dalam asam =

2.

Kadar abu tidak larut dalam asam =

3.

Kadar abu tidak larut dalam asam =

% Rata-rata kadar abu tidak larut asam =

0,0086
2,003
0,0054
2,007
0,0062
2,014

× 100%
× 100%
× 100%

= 0,42%

= 0,26%

= 0,30%

0,42% + 0,26% + 0,30%
3

= 0,32%

57
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 8. Data penentuan waktu kerja (operating time)
Data diperoleh dari pengukuran larutan sampel uji 50 ppm dengan penambahan
larutan DPPH 40 ppm dalam methanol.
No.

Menit ke-

Absorbansi

1

5

0,7218

2

10

0,7181

3

15

0,7162

4

20

0,7151

5

25

0,7135

6

30

0,7137

7

35

0,7144

8

40

0,7173

9

45

0,7196

10

50

0,7214

11

55

0,7237

12

60

0,7255

13

65

0,7255

14

70

0,7255

15

75

0,7259

16

80

0,7272

58
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 9. Hasil uji aktivitas antioksidan
1.Tabel hasil uji aktivitas antioksidan EEKS
Absorbansi
Larutan
uji

I

II

III

I

II

III

Ratarata

0

1,13896

1,46533

1,44861

0,00

0,00

0,00

0,00

0,42044

0,40233

0,40239

63,08

72,54

72,22

69,28

0,37622

0,36516

0,36501

66,96

75,08

74,80

72,04

0,27156

0,25499

0,25085

76,15

82,59

82,68

80,47

0,15739

0,15514

0,15552

86,18

89,41

89,26

88,28

50
EEKS

% Pemerangkapan

Konsentrasi
(ppm)

100
150
200

2. Tabel hasil uji aktivitas antioksidan vitamin C
Larutan
uji

Konsentras
i
(ppm)
0 (blanko)
2 ppm

Vitamin
C

4 ppm

Absorbansi
I
1,4665
5
0,3487
1
0,0807
5

% Pemerangkapan
I

II

III

Ratarata

0,00

0,00

0,00

0,00

0,33553 0,35196 76,22

69,55

71,59

72,45

0,08304 0,08182 94,49

69,49

93,39

85,79

II

III

1,10226 1,23923

6 ppm

0,0753
9

0,07179 0,07893 94,85

93,48

93,63

93,98

8 ppm

0,0686
8

0,06648 0,06476 95,31

93,96

94,77

94,68

59
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 10. Contoh perhitungan persen pemerangkapan dan nilai IC50
Contoh Perhitungan persen pemerangkapan
Tabel data absorbansi DPPH pengukuran I
No.

Konsentrasi Larutan Uji (ppm)

Absorbansi

1.

0

1,13896 (Akontrol)

2.

50

0,42044

3.

100

0,37622

4.

150

0,27156

5.

200

0,15739

Aktivitas pemerangkapan (%) =

A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol

Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
Asampel = Absorbansi sampel
Perhitungan % Pemerangkapan ektrak etanol kayu siwak
Konsentrasi 50 ppm pengukuran I

% Pemerangkapan =

A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol

% Pemerangkapan =

1,13896 − 0,42044
x 100%
1,13896

= 63,08%

60
Universitas Sumatera Utara

Konsentrasi 100 ppm

% Pemerangkapan =

A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol

% Pemerangkapan =

1,13896 − 0,37622
x 100%
1,13896

= 66,96%
Konsentrasi 150 ppm

% Pemerangkapan =

A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol

% Pemerangkapan =

1,13896 − 0,27156
x 100%
1,13896

= 76,15%
Konsentrasi 200 ppm
% Pemerangkapan =

A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol

% Pemerangkapan =

1,13896 − 0,15739
x 100% = 88,16%
1,13896

Perhitungan nilai IC50
Tabel IC50 dari EEKS
X

Y

XY

X2

0

0

0

0

50

69,28

3464

2500

100

72,28

7228

10000

150

80,47

12070,5

22500

200

88,28

17656

40000

ΣXY = 40418,5

ΣX2 = 75000

ΣX = 500
X = 100

ΣY = 310,31
Y

= 62,062

61
Universitas Sumatera Utara

Keterangan: X = Konsentrasi (ppm)
Y = % Pemerangkapan
a =

=

(∑ XY) - (∑ X)(∑ Y) / n
(∑ X 2 ) − (∑ X) 2 / n

(40418,5) − (500)(310,31) / 5 9387,5
=
= 0,3755
25000
(75000) − (500) 2 / 5

b = Y − aX
= 62,062 – (0,3755)(100) = 24,51
Jadi, persamaan garis regresi Y = 0,3755X + 24,51
Nilai IC50 = Y = 0,3755X + 24,51
50 = 0,3755X + 24,51
X

= 67,88 ppm

IC50 = 67,88 ppm

62
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 11. Contoh Perhitungan persen pemerangkapan dan nilai IC50
Tabel data absorbansi pemerangkapan aktivitas antioksidan vitamin C

No.

Konsentrasi Larutan Uji (ppm)

Absorbansi

1.

0

1,46655(Akontrol)

2.

2

0,34871

3.

4

0,08075

4.

6

0,07539

5.

8

0,06868

Aktivitas pemerangkapan (%) =

A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol

Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
Asampel = Absorbansi sampel
Perhitungan % pemerangkapan aktivitas antioksidan vitamin C
Konsentrasi 2 ppm
% Pemerangkapan =

A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol

% Pemerangkapan =

1,46655 − 0,34871
x 100%
1,46655

= 76,22%

Konsentrasi 4 ppm
% Pemerangkapan =

A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol

63
Universitas Sumatera Utara

% Pemerangkapan =

1,46655 − 0,08075
x 100% = 69,97%.
1,46655

Konsentrasi 6 ppm
% Pemerangkapan =

A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol

% Pemerangkapan =

1,46655 − 0,07539
x 100%
1,46655

= 94,85%
Konsentrasi 8 ppm
% Pemerangkapan =

A kontrol - A sampel
x 100%
A kontrol

% Pemerangkapan =

1,46655 − 0,06868
x 100%
1,46655

= 95,31%

Perhitungan nilai IC50
Tabel IC50 dari Vitamin C
X

Y

XY

X2

0

0

0

0

2

72,45

144,9

4

4

85,79

343,16

16

6

93,98

563,88

36

8

94,68

757,44

64

ΣXY = 1809,38

ΣX2 = 120

ΣX = 20
X =4

ΣY = 346,9
Y

= 69,38

Keterangan: X = Konsentrasi (ppm)
Y = % Pemerangkapan

64
Universitas Sumatera Utara

a =

=

(∑ XY) - (∑ X)(∑ Y) / n
(∑ X 2 ) − (∑ X) 2 / n
(1809,38) − (20)(346,9) / 5 421,78
=
= 10,5445
40
(120) − (20) 2 / 5

b = Y − aX
= 69,38– (10,5445)(4)
= 27,202
Jadi, persamaan garis regresi Y = 10,5445 X + 27,202
Nilai IC50 = Y = 10,5445X + 27,202
50 = 10,5445X + 27,202
X = 2,162
IC50 = 2,162 ppm

65
Universitas Sumatera Utara

Dokumen yang terkait

Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia Serta Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Kayu Siwak (Salvadora persica Wall.) Metode DPPH

4 23 83

Karakterisasi dan Skrining Fitokimia Simplisia serta Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Ekstrak Etanol Bunga Pisang Klutuk (Musa Balbisiana) BB Dengan Metode DPPH

4 25 76

Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia Serta Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Kayu Siwak (Salvadora persica Wall.) Metode DPPH

0 0 16

Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia Serta Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Kayu Siwak (Salvadora persica Wall.) Metode DPPH

0 0 2

Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia Serta Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Kayu Siwak (Salvadora persica Wall.) Metode DPPH

0 0 5

Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia Serta Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Kayu Siwak (Salvadora persica Wall.) Metode DPPH

0 0 15

Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia Serta Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Kayu Siwak (Salvadora persica Wall.) Metode DPPH

0 0 4

Karakterisasi dan Skrining Fitokimia Simplisia serta Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Ekstrak Etanol Bunga Pisang Klutuk (Musa Balbisiana) BB Dengan Metode DPPH

0 0 15

Karakterisasi dan Skrining Fitokimia Simplisia serta Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Ekstrak Etanol Bunga Pisang Klutuk (Musa Balbisiana) BB Dengan Metode DPPH

0 0 2

Karakterisasi dan Skrining Fitokimia Simplisia serta Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Ekstrak Etanol Bunga Pisang Klutuk (Musa Balbisiana) BB Dengan Metode DPPH

0 0 5