Efek hepatoprotektif jangka panjang ekstrak metanol-air biji persea americana mill. terhadap aktivitas alt-ast serum pada tikus jantan wistar terinduksi karbon tetraklorida - USD Repository

  

EFEK HEPATOPROTEKTIF JANGKA PANJANG EKSTRAK

METANOL-AIR BIJI Persea americana Mill. TERHADAP AKTIVITAS

ALT-AST SERUM PADA TIKUS JANTAN WISTAR TERINDUKSI

KARBON TETRAKLORIDA

  

Skripsi

  Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.)

  Program Studi Farmasi Diajukan Oleh:

  Robert Dwijantara Putra NIM : 108114069

  

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

HALAMAN PERSEMBAHAN

  

Cukuplah kasih karunia-Ku bagimu, sebab justru dalam kelemahanlah kuasa-Ku

menjadi sempurna (2 Korintus 12:9 ).

  BERKAT...tidak selalu berupa emas, intan permata atau uang yang banyak, bukan pula saat kita tinggal di rumah mewah dan pergi bermobil.. Namun BERKAT adalah saat kita kuat dalam keadaan putus asa dan tetap BERSYUKUR saat tak punya apa-apa...

  

KEBAIKAN yg kita lakukan mungkin saja sudah DILUPAKAN orang,tapi

bagaimanapun BERBUAT BAIKlah,bagaimanapun BERIKAN yg TERBAIK dr diri kita.

Pada akhirnya kita tahu bahwa ini adalah urusan antara kita dengan TUHAN kita

dan ini bukan urusan antara kita dan mereka (MOTHER THERESA)

  Kupersembahkan karyaku ini untuk : Tuhan Yesusku, Bapa yang selalu menopangku saat ku tak mampu dan mengangkatku saat kuterjatuh yang senantiasa memberiku kekuatan.

  Papa, mama, kakak dan adik-adikku untuk doa dan perhatiannya.

  Teman-teman yang telah hadir dan memberi semangat.

  PRAKATA Puji syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas segala berkat kasih karunia dan atas segala perlindungan yang telah diberikan sehingga skripsi berjudul “EFEK HEPATOPROTEKTIF JANGKA PANJANG

  

EKSTRAK METANOL-AIR BIJI Persea Americana MILL. TERHADAP

AKTIVITAS ALT-AST SERUM PADA TIKUS JANTAN WISTAR

TERINDUKSI KARBON TETRAKLORIDA

  ” yang disusun untuk memenuhi persyaratan memperoleh gelar Sarjana Strata Satu Program Studi Farmasi (S.

  Farm) dapat dikerjakan dengan baik dan lancar.

  Penulis menyadari bahwa dalam pelaksanaan dan penyusunan skripsi ini tidak terlepas dari bantuan dan campur tangan berbagai pihak. Oleh karena itu pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada :

  1. Ibu Phebe Hendra, M.Si., Ph. D., Apt. Selaku Dosen Pembimbing skripsi atas segala kesabaran dalam membimbing, memberikan masukan dan motivasi kepada penulis selama penelitian dan penyusunan skripsi ini.

2. Bapak Ipang Djunarko, M.Sc., Apt. selaku Dosen Penguji skripsi atas bantuan dan masukkan selama penyusunan skripsi.

  3. Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si., selaku Dosen Penguji skripsi atas bantuan dan masukkan selama penyusunan skripsi dan yang telah memberikan bantuan dalam determinasi serbuk tanaman biji Persea americana Mill.

  4. Ibu Rini Dwiastuti, M.Si., Apt. selaku Kepala Laboratorium Fakultas Farmasi yang telah memberikan ijin dalam penggunaan semua fasilitas laboratorium untuk kepentingan penelitian ini.

  5. Pak Heru, Pak Suparjiman, Pak Kayatno, Dokter Ari, Pak Ratijo, dan Pak Wagiran selaku Staff Laboratorium Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang telah membantu penulis dalam pengerjaan penelitian di laboratorium.

  6. Segenap dosen dan karyawan atas ilmu yang diberikan.

  7. Keluargaku terkasih, Bapak Budi Kasno, Mama Nastiti Handayani, Henry Budi Saputra, Rio Bryantara Putra dan Nina Fiona Putri yang memberikan doa, kasih sayang dan semangat kepada penulis.

  8. Teman- teman “tim Persea americana Mill.”, Cilla, Dian, Lidya, Ike Kum, Ike Kiting, Dion, Yudhita, Iren, Angel, Dara, Ita, Ote, dan Ayu atas kerja sama, bantuan, suka duka, semangat, dan perjuangan dalam menyelesaikan skripsi sampai akhir.

  9. Liana Risha Gunawan yang selalu mendukung penulis dalam suka dan duka dalam pembuatan skripsi ini.

  10. Teman-teman FST dan FKK 2010 yang selalu mengisi hari-hari dan memberikan semangat kepada penulis dalam pembuatan skripsi ini.

  11. Seluruh teman, baik di Fakultas Farmasi maupun teman-teman lain atas dukungannya dan semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu sehingga penulis dapat menyelesaikan tugas akhir ini dengan baik.

  Penulis menyadari bahwa tugas akhir ini belum sempurna dan masih banyak kekurangan sehingga penulis mengharapkan kritik dan saran yang membangun dari semua pihak demi kemajuan di masa yang akan datang.

  Akhir kata, penulis berharap semoga tugas akhir ini dapat bermanfaat bagi semua pihak serta memberikan sumbangan kecil bagi perkembangan ilmu pengetahuan khususnya di bidang ilmu kefarmasian.

  Yogyakarta, November 2013 Penulis

  

DAFTAR ISI

  HALAMAN JUDUL ..................................................................................... i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ............................................ ii HALAMAN PENGESAHAN ....................................................................... iii HALAMAN PERSEMBAHAN ................................................................... iv PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ....................................................... v LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA

  ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS .................................. vi PRAKATA ................................................................................................... vii DAFTAR ISI ................................................................................................ x DAFTAR TABEL ........................................................................................ xv DAFTAR GAMBAR ................................................................................... xvii DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................ xviii

  INTISARI .................................................................................................... xx .................................................................................................. xxi

  ABSTRACT

  BAB I. PENGANTAR ................................................................................ 1 A. Latar Belakang ...................................................................................... 1

  2. Keaslian penelitian ............................................................................ 4

  D. Karbon Tetraklorida ............................................................................... 13

  I. Landasan Teori ....................................................................................... 24 J. Hipotesis ................................................................................................. 26 B. Tujuan Penelitian ...................................................................................

  H. Ekstrak ................................................................................................... 22

  Plus .................................................................................. 20

  ®

  G. Sirup Curliv

  F. Kandungan Fitokimia Biji Persea americana Mill................................. 18

  E. Pemeriksaan Biokimiawi Hati ................................................................ 17

  2. Hepatotoksin tak teramalkan ............................................................ 12

  3. Manfaat penelitian ............................................................................. 5

  1. Hepatotoksin teramalkan ................................................................... 11

  C. Hepatotoksin .......................................................................................... 11

  4. Sirosis hati.......................................................................................... 11

  3. Kolestasis............................................................................................ 10

  2. Nekrosis hati....................................................................................... 10

  1. Perlemakan hati ................................................................................. 9

  BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA .......................................................... 7 A. Anatomi Dan Fisiologi Hati.................................................................... 7 B. Kerusakan Pada Hati............................................................................... 9

  2. Tujuan khusus ................................................................................... 6

  1. Tujuan umum ....................................................................................

  BAB III. METODE PENELITIAN ................................................................ 27 A. Jenis Dan Rancangan Penelitian .............................................................. 27 B. Variabel Dan Definisi Operasional ......................................................... 27

  1. Variabel utama ................................................................................... 27

  2. Variabel pengacau terkendali ............................................................. 27

  3. Variabel pengacau tak terkendali ........................................................ 28

  4. Definisi operasional ............................................................................ 28

  C. Subyek Dan Bahan Penelitian .................................................................. 29

  1. Subyek penelitian ................................................................................ 29

  2. Bahan penelitian .................................................................................. 29

  D. Alat Dan Instrumen Penelitian ................................................................. 30

  E. Tata Cara Penelitian ................................................................................. 31

  1. Determinasi serbuk tanaman Persea americana Mill.......................... 31

  2. Pengumpulan bahan ............................................................................. 31

  3. Pembuatan serbuk ................................................................................ 31

  4. Pembuatan ekstrak metanol biji Persea americana Mill...................... 32

  5. Pembuatan larutan Natrium - Carboxy Methyl Cellulos a (CMC-Na) 1% ......................................................................................................... 32

  6. Pembuatan suspensi ekstrak metanol – air Persea americana Mill. dalam CMC-Na 1 % ............................................................................. 33

  7. Pembuatan larutan karbon tetraklorida (CCl

  4 ) konsentrasi 50% .......... 33

  8. Penetapan kadar air serbuk biji Persea americana Mill. ...................... 33

  10. Uji pendahuluan ................................................................................ 34

  11. Pengelompokan dan perlakuan hewan uji ........................................ 35

  12. Pembuatan serum .............................................................................. 36

  13. Penetapan aktivitas serum ALT dan serum AST .............................. 36

  F. Tata Cara Analisis Hasil ........................................................................ 37

  BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ....................................................... 38 A. Penyiapan Bahan ..................................................................................... 38

  1. Determinasi serbuk ............................................................................. 38

  2. Penetapan kadar air serbuk biji Persea americana Mill..................... 39

  3. Hasil penimbangan bobot ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill....................................................................................................... 39

  B. Uji Pendahuluan ....................................................................................... 40

  1. Penentuan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida .............................. 40

  2. Penentuan waktu pencuplikan darah hewan uji .................................. 41

  3. Penetapan lama pemejanan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. ...................................................................................................... 44

  4. Penetapan dosis ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill.......... 45

  C. Hasil Uji Efek Hepatoprotektif Pemberian Ekstrak Metanol-Air Biji

  Persea americana Mill. ............................................................................ 45

  1. Kontrol negatif olive oil dosis 2 ml/kgBB ........................................... 50

  2. Kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB ................ 53

  3. Kontrol ekstrak metanol - air biji Persea americana Mill. dosis

  4. Kontrol positif curliv® dosis 4,05 ml/kgBB ........................................ 55 5. Kelompok perlakuan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dosis 350; 700 dan 1400 mg/kgBB pada tikus jantan galur wistar terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB .................................. 56

  D. Rangkuman Pembahasan .......................................................................... 61

  BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ......................................................... 64 A. Kesimpulan ............................................................................................... 64 B. Saran ......................................................................................................... 64 DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 65 LAMPIRAN .................................................................................................... 69 BIOGRAFI PENULIS .................................................................................... 132

  DAFTAR TABEL Tabel I. Peningkatan aktivitas enzim serum akibat induksi senyawa toksik ....................................................................................... 17 Tabel II. Kandungan fitokimia dari Persea americana pada daun, buah dan biji ....................................................................... ................ 19 Tabel III. Rata-rata aktivitas serum ALT tikus setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu pencuplikan darah jam ke-0, jam ke-24, dan jam ke-48 ............................... 41

  Tabel IV. Hasil uji Scheffe aktivitas serum ALT tikus setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kg BB pada pencuplikan darah jam ke-0, jam ke-24, dan jam ke-48 ....................................... 42

  Tabel V. Rata-rata aktivitas serum AST tikus setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu pencuplikan darah jam ke-0, jam ke-24, dan jam ke-48 .............................. 43

  Tabel VI. Hasil uji Scheffe aktivitas serum AST tikus setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kg BB pada pencuplikan darah jam ke-0, jam ke-24, dan jam ke-48 ....................................... 44

  Tabel VII. Purata ± SE aktivitas ALT dan AST tikus praperlakuan ekstrak metanol

• – air biji Persea americana Mill. terinduksi

  karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB ..................................... 46 Tabel VIII. Hasil uji statistik uji Man Whitney aktivitas ALT tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada kelompok perlakuan .................................................... 47

  Tabel IX. Hasil uji statistik uji Scheffe aktivitas AST tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada kelompok perlakuan ............................................................. 49

  Tabel X. Perbandingan kontrol olive oil jam ke-0 dan jam ke-24 pada serum ALT dan serum AST tikus ............................... 51 Tabel XI. Hasil penetapan kadar air serbuk biji Persea americana

  Mill. ...................................................................................... 129 Tabel XII. Hasil rendemen ekstrak metanol-air biji Persea americana

  Mill. ..................................................................................... 129 Tabel XIII. Bobot pengeringan ekstrak metanol - air biji Persea

  americana Mill. .................................................................. 130

  Tabel XIV. Hasil validitas dan reabilitas pengukuran ALT .................. 130 Tabel XV. Hasil validitas dan reabilitas pengukuran AST .................. 131

  DAFTAR GAMBAR Gambar 1. Mekanisme biotransformasi dan oksidasi karbon tetraklorida 15 Gambar 2. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kg BB pada pencuplikan darah jam ke-0, jam ke-24, dan jam ke-48 ... 41

  Gambar 3. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kg BB pada pencuplikan darah jam ke-0, jam ke-24, dan jam ke-48 ... 43

  Gambar 4. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus pra- perlakuan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill 1 x sehari selama 6 hari terinduksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB ............................................................................. 48

  Gambar 5. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus pra- perlakuan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill 1 x sehari selama 6 hari terinduksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB ............................................................................ 50

  Gambar 6. Diagram batang rata-rata perbandingan serum ALT kontrol

  olive oil jam ke-0 dan kontrol olive oil jam ke-24 .............. 51

  Gambar 7. Diagram batang rata-rata perbandingan serum AST kontrol

  olive oil jam ke-0 dan kontrol olive oil jam ke-24 ................ 52

  DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Foto serbuk biji Persea americana Mill. ................................. 70 Lampiran 2. Foto ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. ............. 70 Lampiran 3. Foto suspensi ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dalam CMC-Na 1% .................................................................. 70

  Lampiran 4. Sirup Curliv Plus

  ®

  .................................................................... 71 Lampiran 5. Surat pengesahan determinasi serbuk biji Persea americana

  Mill. .......................................................................................... 72 Lampiran 6. Surat pengesahan Medical and Health Research Ethics

  Committee (MHREC) .............................................................. 73 Lampiran 7. Analisis statistik aktivitas serum ALT dan AST pada uji pendahuluan penentuan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB ....................................................................... 74

  Lampiran 8. Analisis statistik aktivitas serum ALT perlakuan ekstrak metanol-air biji Persea americana setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB ................................................... 83

  Lampiran 9. Analisis statistik serum AST perlakuan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB ...................................................................... 102

  Lampiran 10. Analisis statistik aktivitas serum ALT dan serum AST

  Lampiran 11. Perhitungan efek hepatoprotektif ........................................... 126 Lampiran 12. Perhitungan daya hepatoprotektif ekstrak metanol biji

  Persea americana Mill. dibandingkan dengan kontrol ®

  positif Curliv ....................................................................... 126 Lampiran 13. Perhitungan penetapan peringkat dosis ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. kelompok perlakuan ................. 127 Lampiran 14. Perhitungan konversi dosis untuk manusia ........................... 128 Lampiran 15. Perhitungan konversi hari untuk manusia ............................. 128 Lampiran 16. Penetapan kadar air serbuk biji Persea americana Mill. ....... 129 Lampiran 17. Hasil rendemen ekstrak metanol-air biji Persea americana

  Mill. ....................................................................................... 129 Lampiran 18. Bobot pengeringan ekstrak metanol-air biji Persea americana

  Mill. ......................................................................................... 130 Lampiran 19. Hasil pengukuran validitas dan reabilitas ............................... 130

  

INTISARI

  Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek hepatoprotektif ekstrak metanol biji alpukat (Persea americana Mill.) pada tikus jantan terinduksi CCl

  4

  dengan cara menurunkan aktivitas serum Alanine Aminotransferase (ALT) dan Aspartate Aminotransferase (AST) dan untuk mengetahui berapa dosis optimum ekstrak metanol biji alpukat untuk menimbulkan efek hepatoprotektif pada tikus jantan terinduksi CCl 4 .

  Penelitian ini bersifat eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola searah. Penelitian ini menggunakan tikus jantan galur Wistar, umur 2-3 bulan dan berat ± 150-250 gram dibagi secara acak ke dalam tujuh kelompok perlakuan. Kelompok 1 (kontrol hepatotoksin) diberi CCl

  4 2 ml/kgBB. Kelompok II (kontrol

  negatif) diberi Olive Oil. Kelompok III (kontrol ekstrak) diberi esktrak metanol

  ®

  biji alpukat dosis 1.400 mg/kgBB, Kelompok IV (kontrol positif) diberi Curliv 4,05 ml/kgBB, Kelompok V-VII (perlakuan) ekstrak metanol biji alpukat dosis 1400; 700; dan 350 mg/kgBB sekali sehari selama 6 hari berturut-turut kemudian pada hari ke tujuh semua kelompok perlakuan diberi larutan CCl

  4 dosis 2

  ml/kgBB. Pada jam ke 24 sesudahnya darah diambil dari sinus orbitalis mata untuk ditetapkan aktivitas ALT-AST serum. Data ALT-AST serum yang didapat dianalisis untuk mengetahui perbedaan aktivitas ALT-AST serum antar kelompok.

  Hasil penelitian menunjukkan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. memberikan efek hepatoprotektif dengan menurunkan aktivitas serum ALT dan AST pada tikus yang terinduksi karbon tetraklorida. Ada kekerabatan dosis dengan respon yang muncul terlihat dari semakin besar dosis praperlakuan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. yang diberikan, maka semakin besar efek hepatoprotektif. Jadi ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dosis 1400; 700; dan 350 mg/kgBB memiliki efek hepatoprotektif berturut-turut 96,6; 87,2; dan 78,6%. Nilai dosis optimum hepatoprotektif ekstrak metanol-air biji Persea

  americana Mill. sebesar 1400 mg/kgBB.

  

Kata kunci : hepatoprotektif, ekstrak metanol biji buah alpukat (Persea

americana Mill.), CCl

  4 ABSTRACT This study aims to determine the hepatoprotective effect of methanol extract of avocado

  4

  ’s seed ( Persea americana Mill . ) in male rats induced CCl by decreasing the alanine aminotransferase (ALT ) and aspartate aminotransferase ( AST ) serum activity and to determine the optimum dose of methanol extract of avocado

  4 .

  ’s seed to give hepatoprotective effects in male rats induced CCl This research was experimentally pure with direct sampling design. This research used male Wistar rats, age 2-3 months and weight ± 150-250 g. The rats were divided into seven treatment groups randomly. Group 1 (hepatotoxins control) was given CCl

  4 2 ml/kgBW . Group II (negative control) was given Olive Oil . Group III (extracts control) was given methanol extract of avocado

  ’s seed at dose 1400 mg/kgBW, Group IV (positive control) was given Curliv ® at dose 4.05 ml/kgBW , group V - VII ( treatment ) were given methanol extract of avocado

  ’s seed at dose 1400 ; 700 , and 350 mg/kgBW. The extract was given once daily for 6 days and then on the seventh day, all treatment groups were given CCl

  4 at dose of 2 ml/kgBW. Twenty-four hours later, the blood was collected

  from the orbital sinus eye to be measured AST and ALT serum activity. ALT - AST data were analyzed statistically.

  Based of the results of the measurement, methanol - water extract of the seeds of Persea americana Mill. has hepatoprotective effect by decreasing the activity of ALT and AST serum in rats induced carbon tetrachloride . There was a relation between dose and response which was seen from higher dose of methanol

• – water extract of the seeds of Persea americana Mill. given in pretreatment, will give higher hepatoprotective effect. Thus the methanol - water extract of seeds of

  

Persea americana Mill. at dose 1400 ; 700 ; and 350 mg/kgBW have

  hepatoprotective effects respectively 96.6 ; 87.2 , and 78.6 % and the optimum dose of methanol - water extract as hepatoprotector was 1400 mg/kgBW.

  Keyword : hepatoprotective, methanol- water extract of avocado’s seeds (Persea americana Mill.), CCl

  4

BAB I PENGANTAR A. Latar Belakang Hati merupakan organ yang berperan penting dalam banyak proses

  metabolisme. Darah yang mengandung nutrisi dari saluran gastrointestinal terlebih dahulu melewati vena portal di hati, dimana nutrisi seperti karbohidrat, lemak dan vitamin dapat dipindahkan dan disimpan dalam jangka waktu tertentu hingga nutrisi tersebut dibutuhkan. Sel-sel hati mampu memetabolisme karbohidrat, lemak, dan protein. Hati mampu mensintesis dan mensekresi empedu, yang mengandung air, ion-ion, lemak-lemak (turunan kolesterol yang dikenal sebagai garam empedu) dan pigmen empedu seperti bilirubin (Stine dan Brown, 1996).

  Aneka penyakit pada hati termasuk penyakit yang paling serius yang dapat dikelompokkan menjadi hepatitis (penyakit radang pada hati) akut dan kronis, hepatosis (penyakit hati tanpa peradangan) dan sirosis (penyakit degeneratif menyebabkan fibrosa pada hati). Faktor-faktor penyebab kerusakan pada hati karena induksi oleh obat atau racun seperti konsumsi alkohol yang berlebihan, antibiotik tertentu, kemoterapi, minyak terperoksidasi, aflatoksin, karbontetraklorida, hidrokarbon terklorinasi dan zat-zat toksik lainnya dan reaksi imunologi (Williamson, David, dan Fred, 1996). Keracunan hati pada pasien yang menderita penyakit kuning diperkirakan 2% disebabkan oleh induksi obat dan 3-

  1970 memberikan gambaran bahwa obat atau toksikan menyebabkan kira-kira 10% dari seluruh kasus hepatitis atau kira-kira 20-30% dari kasus penyakit hati akut. Beberapa penelitian terbaru melaporkan bahwa 15-40% kasus penyakit hati akut diperantarai oleh obat-obatan (Cadman, 2000).

  Salah satu senyawa yang dapat digunakan sebagai senyawa model yang dapat menimbulkan kerusakan pada hati adalah karbon tetraklorida (CCl

  4 ). CCl

  4

  merupakan xenobiotik yang lazim digunakan untuk menginduksi peroksidasi lipid dan keracunan. Dalam endoplasmik retikulum hati CCl

  4 dimetabolisme oleh

• sitokrom P450 2E1 (CYP2E1) menjadi radikal triklorometil (CCl 3 ).

  Triklorometil dengan oksigen membentuk radikal triklorometilperoxi yang menyerang lipid membran endoplasmik retikulum dan akhirnya menyebabkan kematian sel (Panjaitan, Handharyani, Chairul, Masriani, Zakiah dan Manalu, 2007).

  Obat-obatan untuk mengatasi kerusakan hati masih jarang ditemukan di Indonesia. Maka dari itu dalam penelitian ini akan dicari alternatif terapi pengobatan dari sumber daya alam. Salah satu tanaman yang dapat digunakan sebagai obat tradisional adalah alpukat. Alpukat merupakan tanaman yang dapat tumbuh subur di Indonesia dan merupakan salah satu jenis buah yang digemari banyak orang karena selain rasanya enak, buah alpukat juga kaya antioksidan dan zat gizi seperti lemak yaitu 9,8 g/100g daging buah (Afrianti, 2010). Sebagian besar masyarakat memanfaatkan alpukat pada buahnya saja sedangkan bagian lain seperti biji kurang dimanfaatkan. Biji alpukat dipercaya dapat mengobati sakit menurunkan kadar glukosa darah (Zuhrotun, 2007). Hasil skrining fitokimia yang dilakukan oleh Zuhrotun (2007) terhadap simplisia dan ekstrak etanol biji alpukat menunjukkan bahwa biji alpukat mengandung polifenol, flavonoid, triterpenoid, kuinon, saponin, tanin, monoterpenoid dan seskuiterpenoid.

  Biji alpukat (Persea americana Mill.) mengandung berbagai macam senyawa metabolit sekunder. Salah satunya adalah senyawa golongan fenolik.

  Senyawa fenolik dapat berfungsi sebagai antioksidan karena dapat mengalami reaksi redoks, yang menyebabkan senyawa tersebut dapat berfungsi sebagai agen pereduksi, donor hidrogen, penetral radikal bebas dan pengkhelat logam. Antioksidan dalam pengertian kimia merupakan senyawa pemberi elektron. Antioksidan bekerja dengan cara mendonorkan satu elektronnya kepada senyawa yang bersifat oksidan sehingga aktivitas senyawa oksidan tersebut bisa terhambat.

  Antioksidan menstabilkan radikal bebas dengan melengkapi kekurangan elektron yang dimiliki radikal bebas dan menghambat terjadinya reaksi berantai dari pemberian radikal bebas (Winarsi, 2007). Berdasarkan kemampuannya sebagai antioksidan dimungkinkan biji alpukat juga memiliki khasiat sebagai hepatoprotektor. Senyawa hepatoprotektor merupakan senyawa yang dapat melindungi sel-sel hati dari kerusakan. Sepanjang pengetahuan peneliti, penelitian mengenai aktivitas hepatoprotektif biji alpukat belum pernah dilakukan.

  Pada penelitian ini digunakan ekstrak metanol biji alpukat. Pemilihan ekstrak metanol berdasarkan penelitian sebelumnya. Pada penelitian efek antioksidan biji alpukat (Persea americana Mill.) telah diketahui bahwa senyawa

  

Persea americana Mill . dengan menggunakan pelarut metanol (Carpena,

  Morcuende, Andrade, Kylli dan Estevez, 2011). Pemberian ekstrak metanol biji alpukat secara jangka panjang pada hewan uji tikus jantan wistar yaitu selama 6 hari karena perlakuan selama 6 hari pada hewan uji tikus jika dikonversikan untuk manusia sama dengan 204 hari.

  1. Perumusan masalah

  a. Apakah ekstrak metanol biji alpukat mempunyai efek hepatoprotektif pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida dengan cara menurunkan aktivitas Alanine Aminotransferase (ALT) serum dan Aspartate Transaminase (AST) serum ?

  b. Berapa besar dosis optimum ekstrak metanol biji alpukat untuk menimbulkan efek hepatoprotektif pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida ?

  2. Keaslian penelitian

  Penelitian yang telah dilakukan berkaitan dengan biji Persea americana Mill. yaitu :

  a. Penelitian yang dilakukan oleh Arukwe, dkk (2012). Penelitian tersebut dilakukan untuk mengetahui kandungan dari biji, daun, dan buah Persea

  americana . Pada penelitian tersebut, meskipun dilakukan analisis

  kandungan biji Persea americana namun khasiat kandungan biji Persea americana tidak diteliti.

b. Penelitian yang dilakukan oleh Carpena, dkk (2011). Penelitian ini

  mikroba biji Persea americana Mill. Pada penelitian tersebut tidak dilakukan uji aktivitas Persea americana Mill. untuk digunakan sebagai hepatoprotektor.

  c. Penelitian yang dilakukan oleh Zuhrotun (2007). Penelitian tersebut menguji aktivitas antidiabetes dari ekstrak etanol biji Persea americana Mill. namun tidak dilakukan uji aktivitas hepatoprotektif. Pada penelitian yang akan dilakukan bertujuan untuk menguji aktivitas ekstrak metanol biji Persea americana Mill. sebagai hepatoprotektor secara jangka panjang dan untuk mengetahui dosis efektif dari ekstrak metanol biji Persea americana Mill. sebagai hepatoprotektor.

  Penelitian tentang efek hepatoprotektif ekstrak metanol biji Persea

  

americana Mill. pada tikus jantan wistar terinduksi karbon tetraklorida secara

jangka panjang belum pernah dilakukan sebelumnya.

  3. Manfaat penelitian

  1. Manfaat teoritis Hasil penelitian ini diharapkan mampu memberikan tambahan ilmu pengetahuan tentang tanaman yang memiliki khasiat hepatoprotektif.

  2. Manfaat praktis Hasil penelitian ini diharapkan dapat mengetahui dosis optimum jangka panjang penggunaan tanaman biji alpukat oleh masyarakat khususnya sebagai alternatif pengobatan bagi para penderita penyakit hati.

B. Tujuan Penelitian

  1. Tujuan umum

  Penelitian dilakukan untuk mendapatkan informasi mengenai efek hepatoprotektif ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. secara jamgka panjang untuk pengembangan ilmu kefarmasian.

  2. Tujuan khusus

  a. Untuk mengetahui efek hepatoprotektif ekstrak metanol biji alpukat pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida dengan cara menurunkan aktivitas ALT & AST serum.

  b. Untuk mengetahui besar dosis optimum ekstrak metanol biji alpukat untuk menimbulkan efek hepatoprotektif pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida.

BAB II PENELAAHAN PUSTAKA A. Anatomi dan Fisiologi Hati Hati merupakan organ yang berperan penting dalam banyak proses

  metabolisme. Darah yang mengandung nutrisi dari saluran gastrointestinal terlebih dahulu melewati vena portal di hati, di mana nutrisi seperti karbohidrat, lemak dan vitamin dapat dipindahkan dan disimpan dalam jangka waktu tertentu hingga nutrisi tersebut dibutuhkan. Sel-sel hati mampu memetabolisme karbohidrat, lemak, dan protein. Hati mampu mensintesis dan mensekresi empedu, yang mengandung air, ion-ion, lemak-lemak (turunan kolesterol yang dikenal sebagai garam empedu) dan pigmen empedu seperti bilirubin (Stine dan Brown, 1996).

  Hati adalah organ yang terbesar yang terletak di sebelah kanan atas rongga perut di bawah diafragma. Beratnya 1.500 g atau 2,5 % dari berat badan orang dewasa normal. Pada kondisi hidup berwarna merah tua karena kaya akan persediaan darah. Hati terbagi menjadi lobus kiri dan lobus kanan yang dipisahkan oleh ligamentum falciforme. Hati disuplai oleh dua pembuluh darah yaitu Vena porta hepatica yang berasal dari lambung dan usus, yang kaya akan nutrien seperti asam amino, monosakarida, vitamin yang larut dalam air, dan mineral dan Arteri hepatica, cabang dari arteri kuliaka yang kaya akan oksigen. Cabang-cabang pembuluh darah vena porta hepatica dan arteri hepatica mengalirkan darahnya ke Di dalam hematosit zat racun akan dinetralkan sedangkan nutrien akan ditimbun atau dibentuk zat baru, dimana zat tersebut akan disekresikan ke peredaran darah tubuh (Lingappa, 1995)

  Sel-sel hati tersusun dalam pola heksagonal khusus, dikenal sebagai lobulus (Stine dan Brown, 1996). Lobulus hati berbentuk silindris dengan panjang beberapa milimeter dan berdiameter 0,8 sampai 2 milimeter. Hati manusia berisi 50.000 sampai 100.000 lobulus (Guyton dan Hall, 1996). Sel-sel epitel disebut hepatosit tersusun menyebar di luar vena sentral (cabang vena hepatik). Di antara kolom-kolom hepatosit terdapat saluran yang disebut sinusoid. Pada sinusoid menempal sel-sel endotelial dengan permeabilitas tinggi. Sinusoid juga mengandung sel-sel fagosit disebut sel-sel Kupffer. Tiga pembuluh lainnya di setiap sudut luar heksagon (area portal): cabang vena portal, cabang dari arteri hepatik, dan saluran empedu. Darah mengalir ke dalam hati melalui cabang arteri hepatik dan vena portal, melalui sinusoid, dan mengalir keluar melalui vena sentral. Empedu dihasilkan di hepatosit dan mengalir keluar melalui kanalikuli empedu (terletak di antara perbatasan hepatosit) menuju saluran empedu.

  Lobulus-lobulus bukanlah unit fungsional yang berdiri sendiri-sendiri. Setiap pasang vena portal/ arteri hepatik mengalirkan darah tidak hanya ke satu lobulus, tetapi ke suatu area sel-sel yang meliputi 2 lobulus atau lebih. Area ini disebut asinus (Stine dan Brown, 1996).

  Hati mempunyai bermacam-macam fungsi dengan 3 fungsi utama dalam tubuh yaitu untuk sintesis, ekskresi dan metabolisme (Chandrasoma dan Taylor, saluran empedu mengangkut empedu sedangkan kandungan empedu menyimpan dan mengeluarkan empedu ke dalam usus halus sesuai kebutuhan (Price dan Wilson, 2005).

  Fungsi metabolisme hati yang lain adalah metabolisme lemak; penimbunan vitamin, besi dan tembaga; konjugasi dan ekskresi steroid adrenal dan gonad, serta detoksifikasi sejumlah zat endogen dan eksogen. Fungsi detoksifikasi sangat penting dan dilakukan oleh enzim hati melalui oksidasi, reduksi, hidrolisis, atau konjugasi zat-zat yang dapat berbahaya, dan mengubahnya menjadi zat yang secara fisiologis tidak aktif (Price dan Wilson, 2005). Untuk menjalankan fungsi tersebut, hati dilengkapi dengan sistem vaskuler hepatika (Guyton, 1983). Sistem vaskuler hepatika memungkinkan hati sebagai tempat utama metabolisme (biotransformasi) obat induk menjadi metabolitnya (Donatus, 1992).

  Hati yang normal mempunyai kapasitas cadangan yang besar untuk melakukan fungsinya. Dalam keadaan normal, 80% bagian dari hati dapat dihentikan aktivitasnya tanpa harus mengurangi fungsinya (Chandrasoma dan Taylor, 1995).

B. Kerusakan Pada Hati

  Kerusakan hati dapat berupa perlemakan hati, nekrosis, kolestatis dan sirosis hati (Price dan Wilson, 2005).

1. Perlemakan hati

  Perlemakan hati adalah penumpukan lemak lebih dari 5% pada organ berhubungan dengan peningkatan kadar asam lemak bebas dalam plasma yang terjadi akibat mobilisasi lemak dari jaringan adiposa atau dari hidrolisis triasilgliserol lipoprotein oleh lipase sensitif hormone di jaringan ekstrahepatik. Pembentukan Very Low Density Lipoprotein (VLDL) tidak dapat mengimbangi meningkatnya influx dan esterifikasi asam lemak bebas sehingga terjadi penumpukan triasilgliserol yang menyebabkan perlemakan hati. Kedua, karena adanya penghambatan metabolik dalam produksi lipoprotein plasma sehingga terjadi penimbunan triasilgliserol (Muray, Daryl, dan Victor, 2009).

  2. Nekrosis hati

  Nekrosis merupakan kematian sel hati yang ditandai dengan rusaknya struktur lobulus hati. Manifestasi dari toksikan yang berbahaya dapat menimbulkan nekrosis. Perubahan biokimia yang terjadi bersifat kompleks dan berbagai hepatotoksikan bekerja melalui berbagai mekanisme. Mekanisme terjadinya nekrosis diantaranya hepatotoksikan secara kovalen mengikat protein dan lipid tidak jenuh dan menyebabkan peroksidasi lipid (Price dan Wilson, 2005). Nekrosis biasanya didahului oleh perubahan morfoligik sel-sel hati, seperti rusaknya inti sel, homogenisasi sitoplasma, dan pecahnya membran plasma (Lu, 1995).

  3. Kolestasis

  Kolestatis merupakan kerusakan hati yang bersifat akut dan disebabkan karena aktifitas ekskresi empedu pada membran kanalikuli biliaris. Penyakit kolestatis lebih jarang ditemukan dibandingkan dengan perlemakan hati dan

4. Sirosis hati

  Sirosis yaitu suatu keadaan berupa penggantian hepatosit yang rusak secara permanen oleh jaringan ikat. Sirosis ditandai dengan adanya septa kolagen yang tersebar di sebagian besar hati. Peradangan hati yang berkepanjangan atau berulang umumnya berkaitan dengan alkoholisme kronik dapat menyebabkan sirosis. Hepatosit memiliki kemampuan untuk beregenerasi cukup cepat untuk menggantikan sel-sel yang rusak (Price dan Wilson, 2005).

  Ada banyak tipe sirosis, berkaitan dengan berbagai sebab : portal, nutrisional, dan sirosis alkoholis. Kerusakan hati ini disebabkan oleh salah gizi, kesenjangan protein makanan dan peminum berat pada periode yang panjang. Gejala permulaan tidak jelas, pada penderita sirosis biasanya mempunyai gangguan lambung, kehilangan nafsu makan, gangguan pencernaan, mual, muntah, sembelit atau diare dan sakit perut berkepanjangan (Cooper, 1996).

C. Hepatotoksin

  Kerusakan hati akut, subakut maupan kronis dapat ditimbulkan oleh hepatotoksin yaitu senyawa kimia yang memiliki efek toksik terhadap hati, dengan dosis berlebihan atau pemejanan dalam jangka waktu yang lama (Zimmerman, 1978).

  Obat atau senyawa kimia yang dapat menyebabkan kerusakan hati dapat dibedakan menjadi dua, yaitu :

1. Hepatotoksin teramalkan (intrinsik)

  Merupakan obat atau senyawa kimia yang pada dasarnya mempunyai menimbulkan kerusakan nekrosis hepatoseluler adalah racun jamur (Amanita

  

phalloides ), aflatoksin, karbontetraklorida, kloroform, parasetamol dan lain

  sebagainya (Chandrasoma dan Taylor, 1995). Prosesnya dikenal sebagai toksisitas-intrinsik, dan aksinya dapat terjadi secara langsung atau tidak langsung.

  Secara langsung maksudnya obat induk atau metabolitnya langsung berikatan dengan komponen membran sel dan merusak sel hati beserta seluruh organelnya, seperti ditunjukkan CCl

  4 dan parasetamol. Secara tidak langsung maksudnya obat

  induk atau obat bentuk metabolitnya dalam menimbulkan luka hepatik dengan cara mengganggu jalur metabolik-khas (misalnya tetrasiklin), atau menggangu jalur ekskresi hepatik (misalnya rifampisin) (Donatus, 1992). Kerusakan yang ditimbulkan bergantung dosis dan dapat dicobakan pada hewan uji dan menyebabkab lesi yang mirip manusia (Zimmerman, 1978).

2. Hepatotoksin tak teramalkan (idiosinkratik)

  Senyawa yang termasuk dalam golongan ini yaitu senyawa yang memiliki sifat tidak toksik pada hati, akan tetapi dapat menyebabkan penyakit hati pada individu yang hipersensitif terhadap senyawa tersebut yang diperantarai oleh mekanisme alergi (misalnya sulfonamid, halotan) atau karena keabnormalan metabolik menuju penumpukan metabolit toksik (misalnya iproniazid, isoniazid) (Zimmerman, 1978; Donatus, 1992). Kerusakan hati yang ditimbulkan oleh hepatotoksin golongan ini tidak dapat diperkirakan dan tidak tergantung pada dosis (Donatus, 1992).

D. Karbon tetraklorida

  Senyawa ini merupakan senyawa sintesis yang tidak terdapat dalam alam secara alami. Karbon tetraklorida berupa cairan bening, berbau manis yang dapat tercium pada jumlah rendah. Karbon tetraklorida juga disebut metanatetraklorida. Karbon tetraklorida paling sering dijumpai dalam bentuk gas tidak berwarna, tidak mudah terbakar, dan sukar larut dalam air. Karbon tetraklorida digunakan dalam produksi cairan untuk lemari es, bahan campuran propelan untuk kaleng aerosol, pestisida, cairan pembersih, minyak pelumas, bahan pemadam kebakaran, dan penghapus noda. Namun sekarang penggunaan karbon tetraklorida dilarang karena efeknya yang berbahaya. Karbon tetraklorida saat ini hanya digunakan untuk keperluan industri (Klassen, 1995).

  Pemberian CCl

  4 secara intragastrikal, subkutan, intraperitoneal dan