Pengaruh konsentrasi tween 80 sebagai penetration enhancer pada formulasi mikroemulsi ekstrak tempe dengan metode Franz Diffusion Cell - USD Repository

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI

PENGARUH KONSENTRASI TWEEN 80 SEBAGAI PENETRATION
ENHANCER PADA FORMULASI MIKROEMULSI EKSTRAK TEMPE
DENGAN METODE FRANZ DIFFUSION CELL

SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)
Program Studi Farmasi

Oleh:
Chrisilia Cahyani
NIM : 108114136

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2014

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI

PENGARUH KONSENTRASI TWEEN 80 SEBAGAI PENETRATION
ENHANCER PADA FORMULASI MIKROEMULSI EKSTRAK TEMPE
DENGAN METODE FRANZ DIFFUSION CELL

SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)
Program Studi Farmasi

Oleh:
Chrisilia Cahyani
NIM : 108114136

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2014

i

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI

ii

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI

iii

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI

HALAMAN PERSEMBAHAN

Aku bersyukur kepada-Mu, sebab Engkau telah menjawab aku dan telah menjadi
keselamatanku (Mazmur 118:21)

Serahkanlah segala kekuatiranmu kepada-Nya, sebab Ia yang memelihara kamu
( 1 Petrus 5 :7)

Sebab segala sesuatu adalah dari Dia, dan oleh Dia, dan kepada Dia : Bagi Dialah
kemuliaan sampai selama-lamanya! ( Roma 11:36)

Kupersembahkan untuk :
Tuhan Yesus, Papa, Mama , Mbak Tika, Dek Putri,
Sahabat-sahabatku,
dan semua orang yang membutuhkan karya ini

iv

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI

PRAKATA
Puji syukur kepada Tuhan Yesus atas berkat dan kasih karunia-Nya yang
melimpah sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitan serta penyusunan skripsi
yang berjudul “Pengaruh Konsentrasi Tween 80 Sebagai Penetration Enhancer
Pada Formulasi Mikroemulsi Ekstrak Tempe Dengan Metode Franz Diffusion Cell
“ yang disusun sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi
(S.Farm.) Progam Studi Farmasi, Universitas Sanata Dharma , Yogyakarta.Dalam
pelaksanan penelitian, penyusunan skripsi hingga penyelesaian skripsi ini, penulis
mendapatkan bantuan dan dukungan dari banyak pihak, skripsi ini dapat
diseleseikan dengan baik, untuk itu penuli ingin mengucapkan terima kasih kepada
1. Fx. Sutopo Broto dan Juli Indrajani, Attrika Windaresti Cahyani dan Maria
Florence Cahya Putri atas dukungan dan semangat kepada penulis selama
proses penelitian hingga penyusunan naskah skripsi.
2. Aris Widayati,M.Si.,Ph.D, Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Sanata Dharma Yogyakarta
3. Dr. Sri Hartati Yuliani, M.Sc., Apt., selaku dosen pembimbing dan Kepala
laboratorium, atas masukan, bimbingan, kritik, saran, dan bahan penelitian
yang diberikan kepada penulis.
4. C. M. Ratna Rini Nastiti, M. Pharm., Apt. selaku dosen penguji dan juga

atas saran serta dukungan yang membangun.
5. Yohanes Dwiatmaka, M.Si. selaku dosen penguji dan juga atas saran serta
dukungan yang membangun.

v

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI

6. Seluruh dosen dan karyawan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma
yang telah membagikan ilmu serta pengalaman selama perkuliahan.
7. Djanuar Davidzon Pah yang selalu setia memberi perhatian, kritik maupun
saran serta dukungan dan semangat kepada penulis selama proses
penelitian hingga penyusunan naskah skripsi.
8. Pak Wagiran, Pak Musrifin, Pak Heru, Pak Parlan, Mas Bimo, Mas Kunto,
Mas Agung, serta laboran lain atas segala bantuan yang telah diberikan

kepada penulis.
9. Kelvin, Bakti, Eliza, Nessya, Sefi, Cindy, Tere, Jessi, Mega, teman-teman
satu kelompok praktikum dan kelompok presentasi, teman-teman FSM C
2010, FST B 2010 dan seluruh angkatan 2010 atas kebersamaan yang indah
dan keceriaannya selama ini.
10. Serta semua pihak yang telah membantu penulis dan tidak dapat disebutkan
satu per satu.
Tidak ada hal yang sempurna di dalam hidup ini maka dari itu penulis
menyadari masih terdapat kekurangan dalam penulisan skripsi ini. Penulis
mengharapkan kritik dan saran dari pembaca yang membangun dan menjadi
pembelajaran bagi penulis untuk menjadi lebih baik. Penulis berharap skripsi ini
dapat bermanfaat dan menjadi sumbangan bagi ilmu pengetahuan.
Yogyakarta, 3 Juni 2014

Penulis

vi

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN

MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI

vii

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI

viii

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK

TIDAKTERPUJI
TERPUJI

DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL.................................................................................

i

HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING........................................

ii

HALAMAN PENGESAHAN...................................................................

iii

HALAMAN PERSEMBAHAN................................................................

iv

PRAKATA................................................................................................

v

PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI......................................

vii

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA....................................................

viii

DAFTAR ISI.............................................................................................

ix

DAFTAR TABEL.....................................................................................

xiii

DAFTAR GAMBAR.................................................................................

xiv

DAFTAR LAMPIRAN.............................................................................

xv

INTISARI..................................................................................................

xvi

ABSTRACT................................................................................................

xvii

BAB I PENGANTAR...............................................................................

1

A. Latar Belakang.............................................................................

1

1.

Perumusan Masalah..............................................................

3

2.

Keaslian Penelitian................................................................

3

3.

Manfaat Penelitian................................................................

5

B. Tujuan Penelitian...........................................................................

5

BAB II PENELAAHAN PUSTAKA.........................................................

6

A. Kulit ............................................................................................

6

ix

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI

B. Aging .............................................................................................

8

C. Isoflavon dan Tempe ..................................................................

9

D. Enhancer .......................................................................................

11

E. Mikroemulsi...................................................................................

13

F. Absorpsi Perkutan..........................................................................

14

G. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi.................................................

18

H. Virgin Coconut Oil........................................................................

22

I. Tween 80.......................................................................................

23

J. Nipagin..........................................................................................

24

K. Nipasol...........................................................................................

24

L. Landasan Teori..............................................................................

25

M. Hipotesis........................................................................................

26

BAB III METODOLOGI PENELITIAN..................................................

27

A. Jenis dan Rancangan Penelitian.....................................................

27

B. Variabel Penelitian.........................................................................

27

1. Variabel Utama......................................................................

27

2. Variabel Pengacau..................................................................

27

C. Definisi Operasional.......................................................................

27

D. Bahan penelitian ............................................................................

28

E. Alat penelitian ...............................................................................

28

F. Tata Cara Penelitian.......................................................................

29

1. Ekstraksi Tempe ...................................................................

29

2. Standarisasi Ekstrak Tempe ......................................................

30

x

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI

a. Pembuatan fase gerak.......................................................

30

b. Pembuatan larutan baku genistein....................................

30

c. Penetapan panjang gelombang maksimum......................

31

d. Penetapan kurva ekstrak tempe .......................................

31

3. Orientasi dan Formulasi Mikroemulsi ..................................

31

a. Formula............................................................................

32

b. Pembuatan Mikroemulsi Ekstrak Tempe ........................

32

4. Uji Stabilitas Fisik..................................................................

33

a. Uji Organoleptis dan pH..................................................

33

b. Uji Viskositas...................................................................

33

c. Uji Pengukuran Droplet Size............................................

33

d. Cycling test.......................................................................

33

5. Uji Permeasi Franz Diffusion Cell.........................................

34

a. Pembuatan PBS pH 7,4 konsentrasi 0,15 M ( sebagai
medium kompartemen aseptor).......................................

34

b. Pembuatan NaCl 9 % Fisiologis.....................................

34

c. Preparasi sel difusi dengan membran kulit mencit.........

34

d. Uji

in-vitro

dengan

menggunakan

Franz-cell

modifikasi.......................................................................
6.

Analisis

statistik

nilai

fluks

genistein

35

yang

terpenetrasi............................................................................

35

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN...................................................

36

A. Ekstraksi Tempe.............................................................................

36

xi

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI

B. Standarisasi Ekstrak Tempe...........................................................

38

1. Pembuatan Fase Gerak...........................................................

38

2. Pembuatan Kurva Baku.........................................................

40

3. Penetapan Panjang Gelombang Maksimum Genistein..........

41

4. Penetapan

Kadar

dengan

High

Perfomance

Liquid

Chromatograpy (HPLC)........................................................

42

a. Analisis Kualitatif............................................................

42

b. Analisis Kuantitatif..........................................................

43

C. Orientasi dan Formulasi Komposisi Mikroemulsi Ekstrak
Tempe.............................................................................................

46

D. Uji Sifat Fisik dan Stabilitas Fisik Mikroemulsi............................

49

1. Uji Organoleptis dan pH........................................................

49

2. Uji Viskositas.........................................................................

50

3. Uji Pengukuran Droplet Mikroemulsi...................................

51

4. Cycling Test............................................................................

52

E. Uji Penetrasi Genistein dengan Franz Diffusion Cell Modifikasi..

53

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN....................................................

58

A. Kesimpulan.....................................................................................

58

B. Saran...............................................................................................

58

DAFTAR PUSTAKA................................................................................

59

LAMPIRAN...............................................................................................

64

BIOGRAFI PENULIS...............................................................................

89

xii

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI

DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel I.

Fase Diam pada Sistem Kromatografi....................................

20

Tabel II.

Fase Gerak pada Sistem Kromatografi....................................

21

Tabel III.

Komponen VCO......................................................................

23

Tabel IV.

Formula Mikroemulsi Ekstrak Tempe....................................

32

Tabel V.

Data Kurva Baku Genistein..................................................

40

Tabel VI.

Kadar Genistein Dalam Ekstrak Etanolik Tempe Yang
Sudah Mengalami Fraksinasi Bertingkat................................

Tabel VII.

Data Uji Sifat Fisik dan Stabilitas Mikroemulsi Ekstrak
Tempe Formula I hingga Formula III.....................................

Tabel VIII.

45

49

Nilai Fluks, Koefisien Difusifitas Dan Jumlah Kumulatif
Genistein Dari Sediaan Mikroemulsi Yang Mengandung
Tween 80 Dengan Berbagai Konsentrasi................................

xiii

55

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI

DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1.

Komponen dan Fungsi Kulit...................................................

6

Gambar 2.

Jalur Umum Senyawa Dalam Menembus Kulit .....................

8

Gambar 3.

Struktur Isoflavon Aglikon......................................................

10

Gambar 4.

Struktur Tween 80...................................................................

23

Gambar 5.

Struktur Nipagin .....................................................................

24

Gambar 6.

Struktur Nipasol......................................................................

24

Gambar 7.

Bagan Rancangan Penelitian...................................................

29

Gambar 8.

Struktur Genistein...................................................................

39

Gambar 9.

Spektra Panjang Gelombang Maksimum Di 261 nm
Menggunakan Spektrofotometer.............................................

42

Gambar 10.

Kromatogram Sampel Hasil Fraksinasi...................................

44

Gambar 11.

Kromatogram Sampel Tanpa Fraksinasi.................................

45

Gambar 12.

Grafik Hubungan antara Profil Jumlah Kumulatif Genistein
yang terpenetrasi dari Formula I – III.....................................

Gambar 13.

56

Grafik hubungan Fluks rata-rata Genistein yang
Terpenetrasi dari Formula I – III.............................................

xiv

56

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI

DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1.

Ekstraksi Tempe..........................................................................

Lampiran 2.

Skema Pembuatan Seri Larutan Baku..................................... 66

Lampiran 3.

Perhitungan Seri Baku Kadar Genistein.................................. 66

Lampiran 4.

Fraksinasi Genistein Dari Tempe............................................

Lampiran 5.

Data

Kromatogram

Standarisasi

Genistein

65

67

Dari

Tempe...................................................................................... 68
Lampiran 6.

Gambar Kurva Baku Genistein...............................................

Lampiran 7.

Uji Komposisi Mikroemulsi.................................................... 73

Lampiran 8.

Uji Organoleptis dan pH.........................................................

75

Lampiran 9.

Hasil Uji Ukuran Droplet........................................................

77

72

Lampiran 10. Cycling Test............................................................................. 80
Lampiran 11. Uji Sentrifugasi.......................................................................

81

Lampiran 12. Uji Absorpsi Perkutan.............................................................

82

Lampiran 13. Contoh Perhitungan Jumlah Genistein yang Terpenetrasi
Dari Sediaan Mikroemulsi Pada Menit ke-60.........................

85

Lampiran 14. Contoh Perhitungan Jumlah Genistein yang Terpenetrasi
Dari Sediaan Mikroemulsi Pada Menit ke-120.......................

85

Lampiran 15. Contoh Perhitungan Fluks Tiap Waktu Genistein dari
Sediaan Mikroemulsi............................................................... 86
Lampiran 16. Uji Statistik.............................................................................. 87

xv

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI

INTISARI
Fenomena aging atau penuaan dini tidak dapat terhindarkan. Salah satu
penyebab aging adalah terpaparnya kulit oleh sinar ultraviolet (UV). Genistein
merupakan senyawa yang dapat mencegah penuaan dini dengan mekanisme
antioksidan. Genistein adalah isoflavon dalam bentuk aglikon dimana bentuk
aglikon ini dapat dijumpai di produk fermentasi kedelai yakni tempe. Genistein
memiliki kelarutan yang rendah dalam minyak. Sediaan mikroemulsi untuk
penggunaan topikal dapat meningkatkan kelarutan genistein sehingga dapat
terabsorpsi ke dalam kulit dengan baik. Penelitian ini bertujuan untuk formulasi
mikroemulsi dari ekstrak tempe dan melihat pengaruh konsentrasi tween 80 sebagai
penetration enhancer dengan metode Franz Diffusion Cell.
Uji difusi dilakukan dengan membandingkan 3 formula dimana Formula I
memiliki konsentrasi tween 80 : PEG 400 (1:1), Formula II memiliki konsentrasi
tween 80 : PEG 400 (2:1), Formula III memiliki konsentrasi tween 80 : PEG 400
(3:1). Uji difusi menggunakan Franz Diffusion Cell, kadar kemudian diukur
menggunakan HPLC. Kadar genistein yang terpenetrasi tiap jam dinyatakan
sebagai nilai fluks. Nilai-nilai fluks tiap formula diuji statistik menggunakan
ANOVA. Hasil dari uji absorpsi perkutan menunjukkan tidak ada perbedaan antar
formula.
Kata kunci : genistein, mikroemulsi, Franz Diffusion Cell , HPLC, nilai fluks

xvi

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI

ABSTRACT
The aging phenomenon can not be avoided. Skin aging is caused by
exposured to ultraviolet light (UV). Genistein is a compound that can prevent aging
by antioxidant mechanisms. Genistein which is in the aglycone form can be found
in fermented soy product like tempeh. Genistein has a low solubility in oil.
Microemulsion for topical use can increase the solubility of genistein that can be
well absorbed into the stratum corneum. This study aimed to formulate
microemulsion of tempeh extract and analyze the effect of tween 80 concentration
as penetration enhancers by Franz Diffusion Cell.
There were three formulas which were used in diffusion test ; 1st Formula
was consist of tween 80 : PEG 400 (1:1), 2nd Formula was consist of tween 80 :
PEG 400 tween 80 : PEG 400 (2:1), 3rd Formula was consist of tween 80 : PEG 400
(3:1). The percutaneuous absorption test using Franz Diffusion Cell , the genistein
level that permeate into the stratum corneum was measured using HPLC. The
penetrated-genistein solute level was considered as flux time. Flux time values were
statistically tested using ANOVA. The percutaneuos absorption test results showed
there are no differences in each formula.
Keywords : genistein, microemulsion, Franz Diffusion Cel , HPLC, Flux time value

xvii

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI

BAB I
PENGANTAR

A. Latar Belakang
Aging didefinisikan sebagai suatu penurunan fungsi biologik pada
organisme. Aging tidak terhindarkan dan berjalan dengan kecepatan yang berbeda,
tergantung dari susunan genetik, lingkungan dan gaya hidup, sehingga aging dapat
terjadi lebih dini atau lambat tergantung kesehatan masing-masing individu
(Salavkar, Tamanekar,and Athawale, 2011). Penuaan dini dapat dilihat dari kulit
kering dan kasar, kulit berkerut, muncul noda-noda hitam pada kulit, kulit kusam,
dan tidak bercahaya.
Proses penuaan kulit dapat disebabkan oleh dua faktor yakni penuaan
intrinsik dan penuaan ekstrinsik. Proses penuaan intrinsik dapat disebabkan secara
fisiologis seperti faktor ras, hormonal, dan genetik. Proses penuaan pada kulit yang
disebabkan oleh faktor ekstrinsik dapat disebabkan oleh sinar ultraviolet (UVR),
merokok, infeksi, polusi udara, kelembaban udara dan faktor ekstrinsik lainnya
(Chuarienthong, Lourith, and Leelapornpisid, 2010). UVR dapat menyebabkan
perubahan pada kulit yakni sunburn, kanker kulit, dan photoaging (Jing-Yi,
Tournas, Burch, Monteire, and Zielinsk, 2007). Pemaparan UVR dapat
menghasilkan ROS (Reactive Oxygen Spesies) atau radikal bebas sehingga sel akan
diserang. Sel yang diserang ROS kemudian akan merusak membran lipid, protein
dan DNA selular dalam tubuh sehingga akan berakibat penuaan pada kulit yang jika
diamati secara visual akan terlihat kerutan pada epidermis dan mengalami
penipisan. Sediaan topikal dengan aktivitas antioksidan telah diketahui dapat

1

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI
2

memproteksi kulit dari kerusakan oksidatif yang disebabkan pemaparan UVR
dalam jangka waktu yang panjang (Chuarienthong, Lourith, and Leelapornpisid,
2010). Kerusakan yang disebabkan oleh pemaparan UVR dapat diproteksi oleh
senyawa antioksidan. Menurut Cornwell et al.(cit., Chaiyavat, Kumar, Tipduangta,
and Rungseevijitprapa, 2010) Isoflavon adalah senyawa alami yang mempunyai
aktivitas antioksidan. Menurut Murphy et al. (cit., Lee, Renita, Fioritto, Martin,
Schwartz, and Vodovotz, 2004), Isoflavon yang ditemukan pada kedelai memiliki
beberapa bentuk yakni aglikon, β-glukosida, 6-O”-malonil-β-glukosida , 6-O”asetil- β-glukosida. Bentuk glikosida terdapat pada kedelai yang tidak difermentasi
sedangkan bentuk aglikon terdapat pada kedelai yang sudah difermentasi, misalnya
tempe (Astuti, 2012). Dalam perkembangan sediaan kosmetik, isoflavon digunakan
dalam bentuk aglikon karena dalam kulit tidak terdapat enzim penghidrolisis
sehingga tidak dapat terpenetrasi hingga lapisan kulit yang lebih dalam misalnya
lapisan epidermis (Schmid and Zulli, 2002).
Menurut Berghofer et al. (cit., Chaiyavat, Kumar, Tipduangta, and
Rungseevijitprapa, 2010) Studi menunjukkan bahwa produk kedelai hasil
fermentasi tidak kehilangan aktivitas antioksidannya. Daya antioksidan meningkat
dibandingkan pada produk kedelai yang tidak difermentasi. Genistein memiliki
kelarutan yang rendah dalam minyak (Daniel and Zulli, 2002). Sediaan
mikroemulsi untuk penggunaan topikal dapat meningkatkan kelarutan genistein
yang rendah dalam minyak sehingga dapat terabsorpsi ke dalam kulit dengan baik.
Kelebihan mikroemulsi adalah mempunyai kestabilan dalam jangka waktu yang
lama secara termodinamika, jernih, dapat disterilkan dengan cara filtrasi, biaya

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI
3

pembuatan murah, daya kelarutan tinggi, serta mempunyai kemampuan
berpenetrasi yang baik (Agoes, 2009). Karakteristik tersebut membuat mikroemulsi
mempunyai peranan penting dalam formula untuk zat aktif yang tidak larut.
Salah satu komponen penyusun mikroemulsi adalah surfaktan, surfaktan
biasanya digunakan sebagai suspending agent, wetting agent,dan emulsifier.
Surfaktan juga memiliki efek terhadap permeabilitas membran biologis seperti kulit
sehingga dapat juga berfungsi sebagai penetration enhancer. Penggunaan
penetration enhancer dapat meningkatkan kelarutan suatu senyawa, surfaktan dapat
berfungsi juga sebagai penetration enhancer dengan mekanisme menembus ke
daerah diantara stratum korneum kemudian meningkatkan fluiditas dan melarutkan
komponen lipid atau masuk melalui jalur interseluler dan berikatan dengan filamen
keratin. Tween 80 merupakan surfaktan non-ionik polysorbate yang umumnya
digunakan sebagai penetration enhancer (Som, Bhatia, and Yasir, 2012). Pengaruh
penetration enhancer terhadap permeasi kulit dapat dievalusi secara in-vitro yakni
dengan uji difusi franz-cell.
1.

Permasalahan
Apakah peningkatan konsentrasi tween 80 sebagai penetration enhancer

dapat berpengaruh pada proses absorpsi perkutan mikroemulsi ekstrak tempe
dengan metode Franz Diffusion Cell ?
2.

Keaslian penelitian
Penelitian yang telah dilaksanakan dan terkait dengan penelitian ini sejauh

penelusuran penulis antara lain:

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI
4

a. Akhtar (2011) meneliti efek dari penetration enhancer dari polysorbate 20
dan polysorbate 80 terhadap pengaruh absorpsi perkutan pada asam askorbat. Dari
penelitian tersebut didapat hasil semakin tinggi konsentrasi penetration enhancer
maka semakin tinggi pula permeabilitas dari asam askorbat.
b. Chadha (2009) meneliti genistein yang diformulasikan dalam bentuk gel
dengan berbagai penetration enhancer golongan terpene seperti menthol, limonene,
cineole, carvone, Lauroglycol® 90, Labrasol® ,dan Transcutol®P . Hasil penelitian
menunjukkan bahwa penetration enhancer seperti menthol, Lauroglycol® 90,
Labrasol® , Transcutol®P merupakan enhancer

yang paling efisien dalam

meningkatkan permeasi kulit.
c. Georgetti, Casagrande, Verri, Lopez, and Fonseca (2008) melakukan
penelitian dengan menggunakan soybean extract sebagai senyawa aktif dalam
pembuatan emulsi yang digunakan secara topikal untuk mengurangi efek oksidatif
pada kulit. Formulasi kemudian ditindaklanjuti dengan studi absorpsi perkutan
dengan menggunakan KCKT. Hasil penelitian menunjukkan bahwa genistein tidak
terdeteksi dalam kompartemen reseptor sehingga aktivitas antiosidannya juga tidak
dapat diketahui, hal ini dikarenakan jumlah yang menembus kulit dibawah LOD
yakni (0,1 µg/mL).
Perbedaan penelitian ini dengan penelitian yang pernah dilakukan tersebut
terletak pada sumber senyawa aktif yang digunakan, membran kulit yang
digunakan, dan penetration enhancer yang digunakan. Sejauh penelusuran pustaka
yang dilakukan penulis, penelitian tentang pengaruh konsentrasi tween 80 sebagai

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI
5

penetration enhancer pada formulasi mikroemulsi ekstrak tempe dengan metode
Franz Diffusion Cell.
3.

Manfaat Penelitian
a. Manfaat Teoretis
Menambah pengetahuan tentang pengaruh penetration enhancer pada absorpsi
perkutan mikroemulsi ekstrak tempe.
b. Manfaat Praktis
Menghasilkan formulasi mikroemulsi ekstrak tempe yang memiliki sifat fisik
dan stabilitas fisik yang baik.

B.

Tujuan Penelitian

Mengetahui apakah peningkatan konsentrasi tween 80 sebagai penetration
enhancer berpengaruh pada absorpsi perkutan mikroemulsi ekstrak tempe dengan
metode Franz Diffusion Cell.

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI

BAB II
PENELAAHAN PUSTAKA

A. Kulit
Kulit adalah organ terbesar pada tubuh yang menutupi sekitar 1,7 m2 tubuh
dan berisi kira-kira 10 % dari total berat badan orang berukuran sedang. Fungsi
utama dari kulit adalah untuk menyediakan barrier perlindungan antara tubuh
dengan lingkungan luar (Benson, 2012). Struktur serta fungsi dari kulit manusia
yang terdiri dari empat bagian utama yakni : stratum korneum, viable epidermis,
dermis, dan jaringan subkutan . (Gambar 1)

Gambar 1. Komponen Dan Fungsi Kulit (Walter, 2008).

6

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI
7

Struktur kulit meliputi bagian-bagian di bawah ini :
a) Stratum korneum yang disebut juga non-viabel epidermis merupakan
lapisan kulit paling luar yang merupakan penghalang utama masuknya
senyawa asing. Rata-rata ketebalan stratum korneum adalah 10-20 µm
dengan struktur terdiri dari brick dan mortar yang merupakan barrier
pengontrol kecepatan dalam absorbsi transdermal. Stratum korneum
sebagian besar terdiri dari protein dan keratin sehingga punya daya
absorbsi yang besar terhadap air dan bahan-bahan yang bersifat polar
lainnya (Walter, 2008).
b) Epidermis merupakan bagian dari kulit yang berlapis-lapis dengan
ketebalan 0,06 mm pada kelopak mata dan sekitar 0,08 mm pada telapak
tangan dan telapak kaki. Pembuluh darah tidak terdapat dalam epidermis.
(Benson, 2012).
c) Dermis mempunyai

ketebalan sekitar 2-5 mm dan terdiri atas fibril

kolagen sebagai penyangga, dan elastic connective tissue

yang

menyediakan elastisitas dan fleksibilitas yang melekat dalam matriks
mucopolysaccharide. Dermis menyediakan perlindungan saat terjadi
permeasi oleh obat tetapi dapat mengurangi permeasi ke dalam jaringan
yang lebih dalam saat obat yang sangat lipofilik masuk (Benson, 2012).
d) Jaringan Subkutan terdiri dari lapisan sel lemak yang tersusun sebagai
lobula dengan adanya kolagen yang saling berhubungan dan elastin fibers.
Fungsi utama di jaringan subkutan yakni menyekat panas dan melindungi
kulit dari physical shock (Benson, 2012).

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI
8

Gambar 2. Jalur Umum Senyawa Aktif Dalam Menembus Kulit (Lane, 2013)

Jalur umum yang dilewati senyawa aktif untuk menembus kulit yakni
melalui lapisan stratum korneum, jalur interseluler, dan jaringan tambahan.
(Gambar 2)
a) Melalui lapisan stratum korneum
Jalur transeluler, jalur dimana obat menyeberangi kulit secara langsung
dengan melewati kedua fosfolipid membran dan sitoplasma keratinosit mati
yang merupakan stratum korneum (Benson, 2012).
b) Jalur interseluler, jalur dimana obat melintasi kulit dengan melewati ruangruang kecil di antara sel-sel kulit (Benson, 2012).
c) Jaringan tambahan pada kulit yakni folikel dan kelenjar (Benson, 2012).

B. Aging
Kulit manusia akan berubah seiring dengan bertambahnya usia. Proses skin
aging tidak dapat dihindari, maka pemahaman tentang proses yang terjadi di kulit
sangatlah penting. Adanya paparan sinar matahari dipercaya akan mempercepat
proses skin aging. Skin aging juga dapat dipercepat lagi oleh radikal bebas yang

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI
9

berada di sekitar kita (Yaar and Gilchrest, 2007).
Skin aging dapat disebabkan oleh berbagai macam faktor internal
maupun eksternal, salah satu faktor eksternal tersebut adalah paparan sinar
matahari yang sering disebut photo aging. Mekanisme penuaan yang dipicu oleh
faktor eksternal paparan sinar matahari adalah adanya penurunan jumlah ceramide
akibat reaksi dengan Reactive Oxygen Species yang dapat dihambat dengan adanya
antioksidan sebagai salah satu mekanisme anti aging (Schimd and Zulli, 2002).

C. Isoflavon dan Tempe
Isoflavon merupakan salah satu anggota utama dalam phytoestrogens,
sebuah senyawa polifenol non-steroid yang berasal dari tanaman (Jing-Yi, Tournas,
Burch, Monteire, and Zielinsk, 2007). Menurut Cornwell et al.(cit., Chaiyavat,
Kumar, Tipduangta, and Rungseevijitprapa, 2010) Isoflavon adalah senyawa alami
yang mempunyai aktivitas antioksidan. Isoflavon banyak terdapat pada buahbuahan, sayuran dan biji-bijian seperti kacang kedelai yang digunakan sebagai
pangan fungsional dengan berbagai kegunaan untuk pengatasan masalah
osteoporosis dan masalah kesehatan jantung. Menurut Murphy et al. (cit., Lee,
Renita, Fioritto, Martin, Schwartz, and Vodovotz, 2004), Isoflavon yang ditemukan
pada kedelai memiliki beberapa bentuk yakni aglikon, β-glukosida, 6-O”-malonilβ-glukosida , 6-O”-asetil- β-glukosida.
Kedelai yang tidak mengalami proses fermentasi banyak mengandung
isoflavon dalam bentuk glukosida dan bentuk aglikonnya hanya dalam persentase
jumlah kecil. Bentuk glikosida terdapat pada kedelai yang tidak difermentasi

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI
10

sedangkan bentuk aglikon terdapat pada kedelai yang sudah difermentasi, misalnya
tempe (Astuti, 2012). Bentuk glikosida yang terdegradasi menjadi bentuk aglikon
akan lebih mudah diserap oleh tubuh (Astuti, 2012). Isoflavon dalam bentuk
aglikon mempunyai struktur molekul sebagai berikut :

Gambar 3. Struktur Isoflavon Aglikon (Wu and Lai, 2007).

Daidzein, glycitein, dan genistein adalah senyawa isoflavon dalam bentuk
aglikon dengan kandungan terbesar terdapat pada daidzein dan genistein yakni 2632 mg dan 28-39 mg dalam 100 g tempe (Haron, Ismail, Azlan, Shahar, and Peng,
2010). Selama proses fermentasi kedelai enzim β-glukosidase akan aktif dan
mengubah glisitin, genistin,dan daidzin yang ada menjadi glisitein, genistein, dan
daidzein dimana ikatan –O glikosida pada isoflavon akan terhidrolisis sehingga
terbentuk senyawa gula dan aglikon bebas dari isoflavon (Pawiroharsono, 2009).
Senyawa aglikon ini dapat mengalami transformasi membentuk senyawa baru
yakni Faktor-II (6,7,4'trihidroksi isoflavon) dimana senyawa ini merupakan
senyawa yang sangat prospektif sebagai antioksidan dan memiliki aktivitas 10 kali

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI
11

lebih besar dari senyawa antioksidan biasa dan hanya terdapat pada tempe karena
terbentuk selama proses fermentasi (Pawiroharsono, 2009).
Dalam perkembangan sediaan kosmetik isoflavon digunakan dalam
bentuk aglikon karena dalam kulit tidak terdapat enzim penghidrolisis sehingga
dapat terpenetrasi hingga lapisan kulit yang lebih dalam misalnya lapisan
epidermis karena lapisan lemak yang dibentuk oleh epidermis akan membiarkan
senyawa yang dapat lewat adalah aglikon yang dapat larut dalam air (Schimd and
Zulli, 2002).
Mekanisme isoflavon dalam mencegah penuaan dini yakni dengan efek
phytoestrogen, isoflavon akan berpasangan dengan reseptor estrogen dalam inti sel
sehingga memiliki potensi yang sama untuk menghambat penipisan kulit, dan
mekanisme antioksidan, atom hidrogen pada isoflavon akan bertindak sebagai agen
antioksidan yang akan mengikat elektron dari ROS sehingga tidak terjadi aktivasi
MMPs dan tidak terjadi reaksi photoaging (Chiang, Wu, Fang, Chen, Kao, Chen, et
al., 2007).
D. Enhancer
Enhancer kimia adalah senyawa yang dapat meningkatkan penetrasi
perkutan obat dengan berpartisi pada stratum korneum dan mengubah susunan
lipid-protein di kulit. Perubahan ini menyebabkan perubahan sifat stratum korneum
dan terjadi penurunan pertahanan pada stratum korneum. Enhancer kimia dapat
meningkatkan permeabilitas stratum korneum melalui beberapa mekanisme yaitu
1) meningkatkan fluiditas lipid di kulit;
2) melalui hidrasi jalur polar;

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI
12

3) melalui aksi keratolitik;
4) meningkatkan kelarutan obat;
5) meningkatkan partisi stratum korneum (Kumar and Philip, 2007).
Penambahan surfaktan ke dalam suatu formula berfungsi untuk melarutkan
senyawa aktif yang bersifat lipofilik. Surfaktan juga mempunyai potensi untuk
melarutkan lipid pada lapisan stratum korneum. Surfaktan biasanya terdiri dari alkil
lipofilik atau aril rantai lemak dengan gugus hidrofilik pada bagian kepala.
Surfaktan anionik seperti sodium lauryl sulphate (SLS) dan surfaktan kationik
seperti cetyltrimethyl ammonium bromide berbahaya bagi kulit manusia (Williams
and Barry, 2004). Menurut Tupker, Pinnagoda, and Nater (cit., Williams and Barry,
2004) SLS merupakan iritan kuat dan dapat meningkatkan trans epidermal water
loss

saat dilakukan pengujian secara in-vivo pada manusia. Surfaktan anionik

maupun kationik dapat mengembangkan lapisan stratum korneum dan berinteraksi
dengan lapisan interselular pada keratin sehingga dalam jumlah besar dapat
menyebabkan iritasi.
Surfaktan non-ionik merupakan surfaktan yang aman digunakan, memiliki
toksisitas kronis rendah dan banyak studi menunjukkan bahwa surfaktan non-ionik
dapat menaikkan nilai fluks dari materi untuk berpermeasi melalui membran
biologis. Banyak studi mengevaluasi aktivitas peningkatan permeabilitas pada
penggunaan surfaktan anionik dan non-ionik. Surfaktan anionik cenderung
memiliki permeasi yang rendah melalui lapisan stratum korneum manusia dalam
jangka waktu pendek. Menurut Williams and Barry (2004), daya peningkatan

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI
13

permeabilitas surfaktan non-ionik pada kulit manusia lebih kecil dibandingkan
surfaktan anionik.
Surfaktan non-ionik yang biasanya digunakan adalah polyoxyethylene alkyl
ether (Brij) dan polyoxythylene sorbitan fatty acid ester (Tween). Studi DSC pada
surfaktan non-ionik mengindikasikan bahwa surfaktan akan berinteraksi dengan
kulit dan mengubah struktur lipid dan meningkatkan permeabilitas dimana
kemampuan surfaktan mempengaruhi permeasi kulit tergantung dari sifat fisika
kimianya (Lane, 2013).

E. Mikroemulsi
Mikroemulsi adalah suatu sistem yang terdiri dari minyak, air dan
surfaktan, dan dikombinasikan dengan penambahan ko-surfaktan yang bersifat
isotropik, stabil secara termodinamika, transparan (Talegaonkar, Azeem, Ahmad,
Khar, Pathan, and Khan, 2008). Mikroemulsi mempunyai ukuran droplet dengan
rentang 10-100 nm. Sistem homogen mikroemulsi dipersiapkan dengan adanya
konsentrasi surfaktan, minyak dan air yang sesuai (Singh, Bushetti, Raju, Ahmad,
Singh, and Bisht, 2011).
Mikroemulsi terbentuk spontan tanpa pengadukan dengan kecepatan
tinggi karena tegangan antar muka yang sangat rendah yakni mendekati nol antara
fase air dan fase minyak sehingga energi bebas menjadi negatif. Pembentukan
mikroemulsi membutuhkan konsentrasi surfaktan yang lebih tinggi daripada emulsi
biasa. Pembentukan mikroemulsi tergantung dari struktur dan tipe surfaktan. Pada
umumnya fenomena mikroemulsifikasi diatur oleh beberapa faktor yaitu

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI
14

1) sifat dasar dan konsentrasi minyak, surfaktan, kosurfaktan dan fase air;
2) perbandingan minyak/surfaktan dan surfaktan/kosurfaktan;
3) temperatur dan pH lingkungan;
4) sifat fisikokimia dari obat seperti hidrofilisitas/lipofilisitas, pKa dan
polaritas (Date, Abjhijit, and Nagarsengker, 2008).
Tipe mikroemulsi dibagi menjadi empat tipe yaitu tipe I, tipe II, tipe III,
dan tipe IV. Mikroemulsi tipe I dengan tipe m/a yakni surfaktan yang digunakan
lebih larut dalam air dan jumlah fase air lebih banyak dibandingkan fase minyak.
Mikroemulsi tipe II terbentuk mikroemulsi dengan tipe a/m karena surfaktan yang
digunakan akan lebih larut dalam fase minyak dan jumlah fase minyak lebih banyak
daripada fase air. Mikroemulsi tipe III terbentuk sistem tiga fase karena surfaktan
akan larut dalam fase minyak dan fase air. Mikroemulsi tipe IV terbentuk
mikroemulsi satu fase (isotropik) karena surfaktan dan alkohol dalam formula
(Singh, Bushetti, Raju, Ahmad, Singh, and Bisht, 2011).

F. Absorpsi Perkutan
Absorpsi perkutan melibatkan bagian dari molekul obat berdifusi dari
permukaan kulit ke dalam stratum korneum dibawah pengaruh gradien konsentrasi
dan juga berdifusi melalui stratum korneum, epidermis, melalui dermis, dan ke
dalam sirkulasi darah. Kulit merupakan bagian yang sangat efektif sebagai tempat
suatu zat untuk berpenetrasi dan berperan sebagai penghalang yang bersifat pasif
pada senyawa penetration enhancer. Kulit terdiri atas beberapa bagian salah
satunya yakni stratum korneum yang memberikan perlawanan terbesar terhadap

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI
15

penetrasi (Sinha and Kaur, 2000). Absorpsi perkutan suatu senyawa diketahui
dengan melakukan uji difusi in-vitro dengan melibatkan sel difusi yang terdiri dari
dua kompartemen yaitu kompartemen donor dan kompartemen akseptor yang
dipisahkan oleh membran. Membran yang dapat digunakan untuk uji transpor yaitu
kulit tikus, babi, marmut, kelinci, ular, manusia atau membran kulit sintetik. Kulit
manusia adalah pilihan utama untuk uji absorpsi perkutan tetapi sulit untuk
didapatkan, sehingga banyak digunakan kulit tikus sebagai penggantinya (Nair and
Panchagula, 2004). Studi permeasi in-vitro menggunakan kulit tikus dapat
memberikan informasi yang berguna untuk memanipulasi desain pemberian obat
secara transdermal, sehingga dapat dicapai permeasi obat yang menembus kulit
(Al-Saidan, Krishnaiah, Chandrasekhar, Lalla, Rama, Jayaram, et al., 2004).
Studi permeasi in-vitro menggunakan sel difusi karena dapat menguji obat
dalam bentuk larutan, sediaan semi padat ataupun patch transdermal (Roberts and
Walters, 1998). Senyawa uji diletakkan pada kompartemen donor dalam bentuk
larutan, formula tertentu, atau patch transdermal. Evaluasi yang dilakukan berupa
transfer massa menembus kulit dengan mengukur kadar obat dalam aseptor
(Roberts and Walters, 1998). Uji permeasi in-vitro yang menggunakan sel difusi
franz-cell harus memperhatikan kondisi penghantaran obat yang dikontrol karena
permeasi obat dapat tergantung pada kulit atau membran yang digunakan. Faktorfaktor yang perlu diperhatikan dalam uji permeasi in-vitro yaitu
1) Pemilihan membran
Penggunaan kulit manusia sebagai membran uji mempunyai beberapa
kesulitan yaitu untuk mendapatkan kulit manusia tersebut, kesulitan dalam

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI
16

mengontrol jenis kelamin, ras, umur, dan kondisi kulit, sehingga untuk uji in-vitro
ini biasa digunakan kulit binatang seperti kulit tikus, babi, marmut, kelinci,dan ular.
2) Larutan donor
Senyawa yang dilarutkan atau didispersikan dalam pembawa (enhancer)
akan berdifusi melalui pembawa menuju ke permukaan kulit sebelum obat
diabsorpsi. Pembawa dapat mempengaruhi pelepasan senyawa dari pembawa dan
dapat berinteraksi dengan stratum korneum. Faktor yang mempengaruhi pelepasan
obat meliputi sifat fisikokimia zat aktif dan pembawa yakni kelarutan, ukuran
molekul, viskositas dan polaritas (Wiechers, 1989).
3) Larutan akseptor
Larutan akseptor yang digunakan dalam sel difusi sebaiknya tidak hanya
berperan sebagai penerima obat yang mengalami permeasi di dalamnya tetapi
sebaiknya menyediakan air, bahan-bahan biokimia, dan ion-ion yang diperlukan
untuk membran kulit dalam mempertahankan fungsinya dalam permeasi pada pH
dan kekuatan osmotik yang diinginkan (Skelly, 1987).
Larutan yang digunakan sebagi kompartemen akseptor yaitu dapat berupa
larutan fisiologis salin, larutan ringer, atau larutan fisiologis lainnya yang relevan.
Faktor penting lain dari larutan akseptor yang perlu diperhatikan yaitu suhu,
kelarutan senyawa dalam medium, dan pengadukan (Friend, 1992). Pengaturan
temperatur larutan akseptor penting untuk meminimalkan adanya variasi dalam
kondisi percobaan. Suhu sebaiknya dijaga pada kondisi fisiologi normal dengan
kenaikan temperatur dapat meningkatkan hidrasi dari kulit. Kenaikan suhu 10ºC
dapat menghasilkan kenaikan 2-3 kali dalam permeasinya (Frantz, 1990).

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI
17

Pengadukan pada larutan aseptor akan membuat larutan lebih homogen (Friend,
1992). Laju difusi obat melewati kulit mengikuti hukum Ficks I karena pada
dasarnya obat melalui kulit dengan cara difusi pasif (Shargel ,Wu-Pong, and Yu,
2004).

Dimana :
= Laju difusi
D

= Koefisien Difusi

A

= Luas Area Difusi

K

= Koefisien Partisi Obat

h

= Tebal membran Difusi

Cd

= Konsentrasi obat dalam kompartemen donor

Cr

= Konsentrasi obat dalam kompartemen reseptor
Nilai fluks (J) atau laju penetrasi obat dari kompartemen donor ke

kompartemen reseptor dapat dihitung dengan menggunakan persamaan:

Dimana :
Q

= Jumlah obat yang terpenetrasi

kp

= Koefisien permeabilitas stratum korneum

A

= Luas area pemberian obat

Cv

= Konsentrasi obat dalam sediaan

t

= Lama pemaparan terhadap obat

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI
18

{

∑

}

Keterangan :
Q

= Jumlah kumulatif genistein yang terpenetrasi per luas area difusi (µg
cm2)

Cn

= Konsentrasi genistein (µg/mL) pada sampling menit ke-n

V

= Volume sel difusi Franz ( mL)

∑

= Jumlah konsentrais genistein (µg/mL) pada sampling pertama (menit ke

S

= Volume sampling ( mL)

A

= Luas area membran (cm2)

– n) hingga sebelum menit ke – n

Dimana :
J

= Fluks (µg cm-2 jam-1)

Q

= Jumlah kumulatif genistein yang melalui membran (µg)

T

= Waktu (jam)

G. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)
Kromatografi adalah metode pemisahan dimana komponen yang
dipisahkan terdistribusi dalam dua fase, yakni fase diam (stationary phase) dan fase
gerak (mobile phase) yang bergerak ke satu arah (Rohman, 2007). Kromatografi
Cair Kinerja Tinggi (KCKT) biasa digunakan untuk menghitung kuantitas dalam
suatu sediaan formulasi. Prinsip KCKT adalah fase gerak yang dipompa dibawah

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI
19

tekanan kolom yang mengandung partikel-partikel fase diam dengan diameter 3-10
µm dimana partikel sampel dimasukkan melalui bagian atas kolom melalui katup
lengkung dan pemisahan akan dilakukan berdasarkan lamanya waktu relatif yang
diperlukan oleh komponen di dalam fase diam. Penentuan elemen yang keluar
dapat ditentukan dengan berbagai detektor (Watson, 2005).
Pemurnian senyawa alam biasanya digunakan teknik kromatografi untuk
memisahkan komponen senyawa alam yang kompleks. Ada beberapa metode
pemisahan dari kromatografi dalam pemurnian senyawa alami, metode pemisahan
tersebut yaitu kromatografi fase terbalik (reverse phase chromatography),
kromatografi fase normal (normal phase chromatography), dan gel permeation
chromatography (Sarker, Latif, and Gray, 2006). Kromatografi fase terbalik
(Reverse phase chromatography) adalah metode kebalikan dari kromatografi fase
normal dimana fase diam lebih bersifat non-polar daripada fase gerak ( Sarker,
Latif,

and

Gray,

2006).

Kromatografi

fase

terbalik

(Reverse

phase

chromatography) merupakan pilihan pertama ketika akan dilakukan suatu
pemisahan senyawa yang mempunyai bentuk ionik atau bersifat netral.
Fase diam dalam sistem kromatografi sangat menentukan waktu retensi
dan selektivitas dalam pembacaan data, dalam kromatografi fase terbalik kolom
yang digunakan terdiri dari fase yang lebih kurang polar seperti C8 atau C18,
organosilan yang diikat kovalen dengan gugus silanol pada permukaan silika untuk
membentuk fase gerak atau ligan R, biasanya- Cl,-Oet, atau –CH3 (Snyder,
Kirkland, and Dolan, 2010). Macam fase diam yang biasa digunakan dalam sistem
kromatografi fase terbalik yakni C8 atau C18, sedangkan fase diam yang digunakan

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI
20

pada kromatografi fase normal yakni silika. Struktur fase diam masing-masing
sistem kromatografi dapat dilihat pada tabel I (Sarker, Latif, and Gray, 2006).
Tabel I. Fase Diam Dalam Sistem Kromatografi ( Sarker, Latif, and Gray,
2006 )

Fase gerak yang digunakan dalam kromatografi fase terbalik umumnya
adalah campuran antara air dengan pelarut organik, seperti asetonitril (ACN),
metanol (MeOH), tetrahydofuran (THF) atau pelarut organik lainnya (Sarker, Latif,
and Gray, 2006). Selain itu dapat pula ditambahkan buffer, asam, atau basa untuk
mengurangi adanya senyawa yang terionisasi dan juga mengontrol derajat ionisasi
kelompok sianol yang tidak bereaksi untuk mengurangi puncak tailing (Sarker,
Latif, and Gray, 2006). Fase gerak yang digunakan dalam sistem kromatografi
memiliki kriteria yakni
1) memiliki kemurnian yang tinggi untuk mempertahankan integritas
sistem kromatografi dan sampel;
2) memiliki kompaktibilas dengan detektor dan tidak menganggu saat
dilakukan pengamatan terhadap satu senyawa target;

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI
21

3) memiliki kompatibilitas yang baik dengan sampel baik dalam hal
solubilitas dan ketidakreaktifan;
4) memiliki viskositas yang rendah untuk menjaga tekanan pada sistem
tetap stabil; dan
5) harganya terjangkau (Sarker, Latif, and Gray, 2006).
Pada tabel II terdapat beberapa macam fase gerak yang digunakan dalam
sistem kromatografi seperti asetonitril (ACN), metanol (MeOH), tetrahydofuran
(THF) atau pelarut organik lainnya beserta bobot molekul dan nilai UV cutoff
(Sarker, Latif, and Gray, 2006).
Tabel II. Fase Gerak yang Biasa Digunakan Dalam Sistem Kromatografi
(Sarker, Latif, and Gray, 2006).

Fase gerak juga harus bebas dari gas yang keluar dari solvent dengan cara
degassing, solvent yang tidak di degassing akan membentuk gelembung
mikroskopis dimana akan menganggu analisis. Selain degassing ada langkah lain
untuk menghilangkan gas yakni teknik vakum atau menempatkan wadah fase gerak
ke ultrasonic bath sebelum digunakan (Sarker, Latif, and Gray, 2006). Fase gerak

PLAGIAT
PLAGIATMERUPAKAN
MERUPAKANTINDAKAN
TINDAKANTIDAK
TIDAKTERPUJI
TERPUJI
22

yang akan digunakan juga harus disaring terlebih dahulu untuk menghindari adanya
partikel-partikel kecil yang akan menyumbat kolom (Rohman, 2009).

H. Virgin Coconut Oil
Virgin Coconut Oil (VCO) merupakan minyak yang diproses dari buah
kelapa tanpa mengalami pemanasan, berwarna bening dan mengandung banyak
asam laurat serta asam lemak rantai menengah (Medium Chain Fatty Acid)
sebanyak 60 % (Yulian, 2007). VCO dapat ditemukan dalam sediaan kosmetik
maupun sediaan topikal sebagai komponen salep, krim, dan emulsi. Manfaat pada
VCO dalam sediaan topikal yakni
1) mempunyai sifat daya sebar pada kulit yang baik;
2) tidak menghambat respirasi kulit;
3) mempunyai sifat penetrasi yang baik;
4) mempunyai sifat emolien yang baik;
5) lapisan yang terbentuk pada saat diaplikasikan ke kulit tidak terlihat;
6) kompaktibilitas yang baik; dan
7) mempunyai stabilitas yang baik te