Uji Aktivitas Ekstrak Etanol Daun Kelapa Sawit Sebagai Antikolesterol (Elaeis guineensis Jacq.) Menggunakan Mencit Jantan
Lampiran 1. Hasil identifikasi tanaman kelapa sawit (Elaeis guineensis Jacq.)
48
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 2. Bagan ekstraksi bahan secara maserasi
1200 g serbuk
Dimasukkan ke dalam sebuah bejana
Dituangi dengan etanol 80%
Ditutup
Dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya
sambil sesekali diaduk
Diserkai, diperas
Maserat I
Ampas
Dicuci dengan etanol 80%
Dipindahkan ke dalam bejana
tertutup
Dibiarkan di tempat sejuk, terlindung
dari cahaya selama 2 hari
Dienaptuangkan dan disaring
Maserat II
Ampas
Digabung dan dicukupkan
Dipekatkan dengan alat rotary evaporator
Ekstrak kental
Di freeze dryer
Ekstrak kering
Uji antikolesterol
49
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3. Bagan pengerjaan uji aktivitas antikolesterol pada mencit
Mencit
dipuasakan
Diukur kadar kolesterol total
awal dengan cholesterol test
Dicatat kadar kolesterol awal
Diinduksi dengan lemak kambing dan
kuning telur 1% bb selama 14 hari
Diukur kadar
hiperkolesterolnya
Mencit dibagi menjadi 6
kelompok, tiap kelompok
terdiri dari 5 ekor mencit
− Kelompok kontrol diberi
Na CMC 0,5%
− Kelompok uji EEDKS 100,
200, 300, dan 400 mg/kg
bb
− Kelompok pembanding
Simvastatin 1,3 mg/kg bb
Diberikan sediaan
uji selama 21 hari
Dicek kadar
kolesterol total pada
hari ke-7, 14, dan
21
50
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 4. Gambar tanaman kelapa sawit (Elaeis guinensis Jacq.) dan daun
kelapa sawit
Tanaman kelapa sawit (Elaeis guineensis Jacq.)
Helai daun kelapa sawit
51
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 5. Gambar simplisia dan serbuk daun kelapa sawit
Simplisia daun kelapa sawit
Serbuk daun kelapa sawit
52
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 6. Rekomendasi persetujuan etik penelitian kesehatan
53
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 7. Tabel konversi dosis hewan dengan manusia
Mencit
20 g
Tikus
200 g
Marmot
400 g
Kelinci
1,5 kg
Kera
4 kg
Anjing
12 kg
Manusia
70 kg
Mencit
20 g
Tikus
200 g
Marmot
400 g
Kelinci
1,5 kg
Kera
4 kg
Anjing
12 kg
Manusia
70 kg
1,0
7,0
12,25
27,8
64,1
124,3
387,9
0,14
1,0
1,74
3,0
9,2
17,8
56,0
0,008
0,57
1,0
2,25
5,2
10,2
31,5
0,04
0,25
0,44
1,0
2,4
4,5
14,2
0,016
0,11
0,19
0,42
1,0
1,9
6,1
0,008
0,06
0,10
0,22
0,52
1,0
3,1
0,0026
0,018
0,031
0,07
0,16
0,32
1,0
54
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 8. Contoh perhitungan dosis
1. Contoh perhitungan dosis simvastatin yang diberikan pada mencit
-
Syarat volume maksimum larutan sediaan uji yang diberikan pada mencit
dengan berat 20 g secara oral adalah 1 ml
-
Dosis manusia (berat 70 kg) = 10 mg
-
Dosis mencit (berat 20 g) = 10 mg x 0,0026 x
-
Menurut FI edisi III, penetapan kadar tablet = 20 tablet, maka diambil 20
1000
20g
= 1,3mg/kg bb
tablet simvastatin, digerus dan ditimbang berat totalnya = 3883 mg
-
Berat bahan aktif simvastatin dalam 20 tablet Simvastatin adalah
= 10 mg/tab x 20 tab = 200 mg
-
Serbuk simvastatin yang digunakan untuk mencit adalah :
1,3 ��
�
=
200 �� 3883 ��
� = 25,23 ≈ 25 ��
25 mg serbuk simvastatin ditambahkan dengan 10 ml suspensi Na-CMC
-
1
Volume yang diberikan = 100 ���
Misal Berat mencit 20 g. Maka volume suspensi simvastatin
1
yang diberikan adalah 100 �20� = 0,2 ��
2. Contoh perhitungan dosis ekstrak etanol daun kelapa sawit yang akan diberikan
pada mencit hiperkolesterolemia.
-
Dosis suspensi ekstrak etanol daun kelapa sawit yang akan dibuat adalah
100, 200, 300, dan 400 mg/kg bb.
a. Cara pembuatan suspensi ekstrak etanol daun kelapa sawit :
Timbang 100, 200, 300, dan 400 mg ekstrak etanol daun kelapa sawit,
masing-masing dilarutkan dalam 10 ml suspense Na-CMC
55
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 8. (Lanjutan)
b. Volume suspensi ekstrak etanol daun kelapa sawit yang akan diberikan
pada mencit dengan berat badan 20 g.
− Volume suspensi EEDKS 100 mg/kg bb yang diberikan adalah
20
1000
x 10 ml = 0,2 ml
− Volume suspensi EEDKS 200 mg/kg bb yang diberikan adalah
20
1000
x 10 ml = 0,2 ml
− Volume suspensi EEDKS 300 mg/kg bb yang diberikan adalah
20
1000
x 10 ml = 0,2 ml
− Volume suspensi EEDKS 400 mg/kg bb yang diberikan adalah
20
1000
x 10 ml = 0,2 ml
56
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 9. Data pengukuran kadar kolesterol darah mencit
1. Na CMC 0,5%
N
o
BB
(g)
1
29,8
2
30,1
3
21,6
4
28,3
5
27,7
Rata-rata
± SD
Kadar
kolesterol
awal (mg/dl)
144
146
142
146
140
143,60 ±
2,608
Kadar
hiperkolesterol
setelah 14 hari
(mg/dl)
251
271
262
275
283
268,40 ±
12,321
Kadar kolesterol setelah
perlakuan (mg/dl)
Hari ke7
14
232
229
260
255
259
250
273
268
275
271
259,80 ± 254,60 ±
17,167
16,772
21
220
248
242
263
265
247,60 ±
18,257
2. EEDKS 100 mg/kg bb
N
o
BB
(g)
1
27,7
2
24,9
3
27,3
4
27,5
5
24,6
Rata-rata
± SD
Kadar
kolesterol
awal (mg/dl)
152
148
150
132
141
144,60 ±
8,173
Kadar
hiperkolesterol
setelah 14 hari
(mg/dl)
272
255
264
290
282
272,60 ±
13,921
Kadar kolesterol setelah
perlakuan (mg/dl)
Hari ke7
14
250
226
236
202
255
227
278
237
269
240
257,60 ± 226,40 ±
16,410
14,943
21
198
185
190
193
196
192,40 ±
5,128
3. EEDKS 200 mg/kg bb
N
o
BB
(g)
1
28,7
2
29,6
3
28,3
4
26,8
5
26,2
Rata-rata
± SD
Kadar
kolesterol
awal (mg/dl)
148
142
125
144
140
139,80 ±
8,786
Kadar
hiperkolesterol
setelah 14 hari
(mg/dl)
291
250
284
263
277
273,00 ±
16,508
Kadar kolesterol setelah
perlakuan (mg/dl)
Hari ke7
14
268
222
232
202
266
219
239
199
238
207
248,60 ± 209,80 ±
17,024
10,232
21
180
190
172
178
167
177,40 ±
8,706
57
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 9. (Lanjutan)
4. EEDKS 300 mg/kg bb
N
o
BB
(g)
1
22,1
2
30,2
3
28,3
4
23,4
5
28,3
Rata-rata
± SD
Kadar
kolesterol
awal (mg/dl)
143
148
145
143
140
143,80 ±
2,950
Kadar
hiperkolesterol
setelah 14 hari
(mg/dl)
286
269
254
273
266
269,60 ±
11,589
Kadar kolesterol setelah
perlakuan (mg/dl)
Hari ke7
14
252
210
223
197
225
185
246
219
248
205
238,80 ± 203,20 ±
13,700
12,931
21
171
168
168
176
171
170,80 ±
3,271
5. EEDKS 400 mg/kg bb
N
o
BB
(g)
1
28,2
2
30,7
3
28,3
4
27,6
5
25,2
Rata-rata
± SD
Kadar
kolesterol
awal (mg/dl)
148
146
138
140
141
142,60 ±
4,219
Kadar
hiperkolesterol
setelah 14 hari
(mg/dl)
280
293
288
279
292
286,40 ±
6,580
Kadar kolesterol setelah
perlakuan (mg/dl)
Hari ke7
14
237
199
243
187
247
200
229
190
255
201
242,20 ± 195,40 ±
9,859
6,427
21
174
153
158
148
172
161,00 ±
11,533
6. Simvastatin 1,3 mg/kg bb
N
o
BB
(g)
1
30,2
2
28,7
3
23,8
4
22,5
5
28,5
Rata-rata
SD
Kadar
kolesterol
awal (mg/dl)
Kadar
hiperkolesterol
setelah 14 hari
(mg/dl)
148
144
109
148
132
136,20 ±
16,559
258
269
273
286
284
274,00 ±
11,467
Kadar kolesterol setelah
perlakuan (mg/dl)
Hari ke7
14
236
193
205
176
228
180
258
205
244
201
234,20 ± 191,00 ±
19,728
12,708
21
160
140
167
162
156
157,00 ±
10,296
58
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 10. Data pengukuran rata-rata kadar kolesterol mencit setelah
perlakuan
Kadar
kolesterol
awal
(mg/dl)
Kadar
hiperkolesterol
setelah 14 hari
(mg/dl)
1
Na CMC
0,5%
143,60 ±
2,608
268,40 ±
12,321
2
Simvastatin
1,3 mg/kg
bb
136,20 ±
16,559
274,00 ±
11,467
3
EEDKS 100
mg/kg bb
144,60 ±
8,173
272,60 ±
13,921
4
EEDKS 200
mg/kg bb
139,80±
8,786
273,00 ±
16,508
5
EEDKS 300
mg/kg bb
143,80 ±
2,950
269,60 ±
11,589
6
EEDKS 400
mg/kg bb
142,60 ±
4,219
286,40 ±
6,580
No
Perlakuan
Kadar Kolesterol Setelah
Perlakuan (mg/dl)
7
14
21
259,80
±
17,167
234,20
±
19,728
257,60
±
16,410
248,60
±
17,024
238,80
±
13,700
242,20
±
9,859
254,60
±
16,772
191,00
±
12,708
226,40
±
14,943
209,80
±
10,232
203,20
±
12,931
195,40
±
6,427
247,60
±
18,257
157,00
±
10,296
192,40
±
5,128
177,40
±
8,706
170,80
±
3,271
161,00
±
11,533
59
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 11. Data konsumsi makanan
1. Setelah pemberian induksi hiperkolesterol
Data konsumsi makanan (g)
N
o
Perlakuan
Hari ke1
1
2
3
4
5
6
Na CMC
0,5 %
EEDKS 100
mg/kg bb
EEDKS 200
mg/kg bb
EEDKS 300
mg/kg bb
EEDKS 400
mg/kg bb
Simvastatin
1,3 mg/kg
bb
2
3
4
5
6
7
20,134 21,352 19,767 20,415 18,336 19,882 20,221
19,083
21,908 20,318 18,720 19,442 22,314 21,509
20,483
20,902 21,782 22,390 20,672 19,982 19,102
18,211 17,561 18,838 18,363 18,401 21,145 20,645
22,698 22,507 20,198 19,388 19,621 21,979 15,046
19,201
21,494 18,948 20,210 17,089 19,988 20,170
Data konsumsi makanan (g)
N
o
Perlakuan
Hari ke8
1
2
3
4
5
6
Na CMC
0,5 %
EEDKS 100
mg/kg bb
EEDKS 200
mg/kg bb
EEDKS 300
mg/kg bb
EEDKS 400
mg/kg bb
Simvastatin
1,3 mg/kg
bb
9
10
11
12
13
14
20,235 19,913 19,515 19,371 18,439 12,057 15,132
18,137 20,153 17,381 18,532 19,646 20,778 21,714
20,435 21,116 14,209 21,546 18,571 18,185 19,022
22,101 21,986 18,585 18,499 17,205 22,938 20,409
20,299 19,544 20,212 19,496 18,131 17,613 15,651
19,953 19,348 18,729 21,693 17,027 16,102 17,392
60
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 11. (Lanjutan)
2. Setelah pemberian suspensi ekstrak etanol daun kelapa sawit
Data konsumsi makanan (g)
N
o
Perlakuan
Hari ke1
1
2
3
4
5
6
Na CMC
0,5 %
EEDKS 100
mg/kg bb
EEDKS 200
mg/kg bb
EEDKS 300
mg/kg bb
EEDKS 400
mg/kg bb
Simvastatin
1,3 mg/kg
bb
2
3
4
5
6
7
22,301 20,913 19,541 17,173 19,301 18,993 17,523
18,567 17,653 15,381 18,241 19,482 20,101 17,406
20,091 21,120 18,209 19,371 18,722 18,205 19,627
21,297 22,381 19,583 18,297 18,328 20,729 19,081
20,372 19,023 20,272 18,967 18,141 19,819 17,228
17,953 19,428 18,727 19,064 16,937 18,629 15,762
Data konsumsi makanan (g)
N
o
Perlakuan
Hari ke8
1
2
3
4
5
6
Na CMC
0,5 %
EEDKS 100
mg/kg bb
EEDKS 200
mg/kg bb
EEDKS 300
mg/kg bb
EEDKS 400
mg/kg bb
Simvastatin
1,3 mg/kg
bb
9
10
11
12
13
14
17,852 15,731 18,233 19,151 18,117 14,659 17,261
21,332 20,022 18,902 17,557 19,338 18,531 20,088
18,623 17,923 17,217 20,172 19,493 18,027 18,717
20,461 18,424 19,101 18,128 17,625 21,592 19,294
19,732 16,851 19,252 17,097 18,833 17,664 16,811
18,202 19,022 20,332 18,725 17,719 17,295 18,836
61
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 11. (Lanjutan)
Data konsumsi makanan (g)
N
o
Perlakuan
Hari ke15
1
2
3
4
5
6
Na CMC
0,5 %
EEDKS 100
mg/kg bb
EEDKS 200
mg/kg bb
EEDKS 300
mg/kg bb
EEDKS 400
mg/kg bb
Simvastatin
1,3 mg/kg
bb
16
17
18
19
20
17,639 16,619 18,926 17,677 19,282 18,395
21
20,106
19,067 20,775 17,508 18,264 19,296 18,981 22,018
20,492 18,598 18,279 22,058 20,732 20,416 19,272
16,962 18,767 20,258 15,958 17,196 18,562 19,824
21,619 19,117 19,052 20,417 18,814 19,024 17,962
18,493 15,737 17,395 18,762 18,417 17,303 19,492
62
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 12. Hasil uji analisis statistik kadar kolesterol awal dan hiperkolesterol
ANOVA
kadar
kolesterol
normal
(mg/dl)
Sum of
Squares
Between
Groups
Within
Groups
Total
kadar
Between
hiperkolester Groups
ol (mg/dl)
Within
Groups
Total
df
Mean
Square
F
Sig.
255.367
5
51.073
.679
.644
1806.000
24
75.250
2061.367
29
1037.200
5
207.440
1.342
.281
3708.800
24
154.533
4746.000
29
kadar kolesterol awal (mg/dl)
Tukey HSDa
kelompok
N
simvastatin
EEDKS 200
EEDKS 400
Na CMC
EEDKS 300
EEDKS 100
Sig.
5
5
5
5
5
5
Subset for alpha = 0.05
1
136.20
139.80
142.60
143.60
143.80
144.60
.649
kadar hiperkolesterol (mg/dl)
Tukey HSDa
kelompok
N
Na CMC
EEDKS 300
EEDKS 100
EEDKS 200
simvastatin
EEDKS 400
Sig.
5
5
5
5
5
5
Subset for alpha = 0.05
1
268.40
269.60
272.60
273.00
274.00
286.40
.237
63
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 13. Hasil uji analisis statistik kadar kolesterol mencit
ANOVA
Sum of
Squares
Between
Kadar setelah 7
Groups
hari perlakuan
Within
(mg/dl)
Groups
Total
Between
Kadar setelah 14
Groups
hari perlakuan
Within
(mg/dl)
Groups
Total
Between
Kadar setelah 21
Groups
hari perlakuan
Within
(mg/dl)
Groups
Total
df
Mean
Square
2663.867
5
532.773
6111.600
24
254.650
8775.467
29
14046.000
5
2809.200
3917.200
24
163.217
17963.200
29
27952.567
5
5590.513
2740.400
24
114.183
30692.967
29
F
Sig.
2.092
.101
17.211
.000
48.961
.000
64
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 13. (Lanjutan)
kadar setelah 7 hari perlakuan (mg/dl)
Tukey HSDa
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
simvastatin
5
234.20
EEDKS 300
5
238.80
EEDKS 400
5
242.20
EEDKS 200
5
248.60
EEDKS 100
5
257.60
Na CMC
5
259.80
Sig.
.153
kadar setelah 14 hari perlakuan (mg/dl)
Tukey HSDa
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
simvastatin
5
191.00
EEDKS 400
5
195.40
EEDKS 300
5
203.20
203.20
EEDKS 200
5
209.80
209.80
EEDKS 100
5
Na CMC
5
Sig.
3
226.40
254.60
.222
.080
1.000
65
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 13. (Lanjutan)
kadar setelah 21 hari perlakuan (mg/dl)
Tukey HSDa
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
simvastatin
5
157.00
EEDKS 400
5
161.00
EEDKS 300
5
170.80
EEDKS 200
5
177.40
EEDKS 100
5
Na CMC
5
Sig.
3
177.40
192.40
247.60
.058
.266
1.000
66
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 14. Data hasil analisis statistik konsumsi makanan
ANOVA
Jumlah konsumsi
makanan pada saat
induksi hiperkolesterol
minggu ke-1
Jumlah konsumsi
makanan pada saat
induksi hiperkolesterol
minggu ke-2
Jumlah konsumsi
makanan setelah
pemberian suspensi
EEDKS minggu ke-1
Jumlah konsumsi
makanan setelah
pemberian suspensi
EEDKS minggu ke-2
Jumlah konsumsi
makanan setelah
pemberian suspensi
EEDKS minggu ke-3
Sum of
Squares
df
Mean
Square
F
Sig.
Between
Groups
13.752
5
2.750
1.112
.371
Within
Groups
89.072
36
2.474
102.824
41
24.071
5
4.814
.988
.438
175.361
36
4.871
199.432
41
19.836
5
3.967
1.953
.109
73.110
36
2.031
92.946
41
21.297
5
4.259
2.738
.034
56.006
36
1.556
77.303
41
23.535
5
4.707
2.585
.043
65.556
36
1.821
89.091
41
Total
Between
Groups
Within
Groups
Total
Between
Groups
Within
Groups
Total
Between
Groups
Within
Groups
Total
Between
Groups
Within
Groups
Total
67
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 14. (Lanjutan)
Jumlah konsumsi makanan pada saat induksi hiperkolesterol minggu ke-1
Tukey HSDa
kelompok
N
EEDKS 300
simvastatin
Na CMC
EEDKS 400
EEDKS 100
EEDKS 200
Sig.
7
7
7
7
7
7
Subset for alpha = 0.05
1
19.02343
19.58571
20.01529
20.20529
20.47057
20.75900
.328
Jumlah konsumsi makanan pada saat induksi hiperkolesterol minggu ke-2
Tukey HSDa
kelompok
N
Na CMC
simvastatin
EEDKS 400
EEDKS 200
EEDKS 100
EEDKS 300
Sig.
7
7
7
7
7
7
Subset for alpha = 0.05
1
17.80886
18.60629
18.70671
19.01200
19.47871
20.24614
.327
Jumlah konsumsi makanan setelah pemberian suspensi EEDKS minggu ke1
Tukey HSDa
kelompok
N
simvastatin
EEDKS 100
EEDKS 400
EEDKS 200
Na CMC
EEDKS 300
Sig.
7
7
7
7
7
7
Subset for alpha = 0.05
1
18.07143
18.11871
19.11743
19.33500
19.39214
19.95657
.159
68
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 14. (Lanjutan)
Jumlah konsumsi makanan setelah pemberian suspensi EEDKS minggu ke2
Tukey HSDa
kelompok
N
Na CMC
EEDKS 400
simvastatin
EEDKS 200
EEDKS 300
EEDKS 100
Sig.
7
7
7
7
7
7
Subset for alpha = 0.05
1
2
17.28629
18.03429
18.58871
18.59600
19.23214
18.03429
18.58871
18.59600
19.23214
19.39571
.340
.062
Jumlah konsumsi makanan setelah pemberian suspensi EEDKS minggu ke3
Tukey HSDa
kelompok
N
simvastatin
EEDKS 300
Na CMC
EEDKS 100
EEDKS 400
EEDKS 200
Sig.
7
7
7
7
7
7
Subset for alpha = 0.05
1
17.94271
18.21814
18.37771
19.41557
19.42929
19.97814
.077
69
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 15. Gambar alat
Wadah strip
Strip kolesterol
Mencit putih jantan
Chip cholesterol test
Cholesterol test
EasyTouch®GCU
Oral sonde mencit
70
Universitas Sumatera Utara
48
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 2. Bagan ekstraksi bahan secara maserasi
1200 g serbuk
Dimasukkan ke dalam sebuah bejana
Dituangi dengan etanol 80%
Ditutup
Dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya
sambil sesekali diaduk
Diserkai, diperas
Maserat I
Ampas
Dicuci dengan etanol 80%
Dipindahkan ke dalam bejana
tertutup
Dibiarkan di tempat sejuk, terlindung
dari cahaya selama 2 hari
Dienaptuangkan dan disaring
Maserat II
Ampas
Digabung dan dicukupkan
Dipekatkan dengan alat rotary evaporator
Ekstrak kental
Di freeze dryer
Ekstrak kering
Uji antikolesterol
49
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3. Bagan pengerjaan uji aktivitas antikolesterol pada mencit
Mencit
dipuasakan
Diukur kadar kolesterol total
awal dengan cholesterol test
Dicatat kadar kolesterol awal
Diinduksi dengan lemak kambing dan
kuning telur 1% bb selama 14 hari
Diukur kadar
hiperkolesterolnya
Mencit dibagi menjadi 6
kelompok, tiap kelompok
terdiri dari 5 ekor mencit
− Kelompok kontrol diberi
Na CMC 0,5%
− Kelompok uji EEDKS 100,
200, 300, dan 400 mg/kg
bb
− Kelompok pembanding
Simvastatin 1,3 mg/kg bb
Diberikan sediaan
uji selama 21 hari
Dicek kadar
kolesterol total pada
hari ke-7, 14, dan
21
50
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 4. Gambar tanaman kelapa sawit (Elaeis guinensis Jacq.) dan daun
kelapa sawit
Tanaman kelapa sawit (Elaeis guineensis Jacq.)
Helai daun kelapa sawit
51
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 5. Gambar simplisia dan serbuk daun kelapa sawit
Simplisia daun kelapa sawit
Serbuk daun kelapa sawit
52
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 6. Rekomendasi persetujuan etik penelitian kesehatan
53
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 7. Tabel konversi dosis hewan dengan manusia
Mencit
20 g
Tikus
200 g
Marmot
400 g
Kelinci
1,5 kg
Kera
4 kg
Anjing
12 kg
Manusia
70 kg
Mencit
20 g
Tikus
200 g
Marmot
400 g
Kelinci
1,5 kg
Kera
4 kg
Anjing
12 kg
Manusia
70 kg
1,0
7,0
12,25
27,8
64,1
124,3
387,9
0,14
1,0
1,74
3,0
9,2
17,8
56,0
0,008
0,57
1,0
2,25
5,2
10,2
31,5
0,04
0,25
0,44
1,0
2,4
4,5
14,2
0,016
0,11
0,19
0,42
1,0
1,9
6,1
0,008
0,06
0,10
0,22
0,52
1,0
3,1
0,0026
0,018
0,031
0,07
0,16
0,32
1,0
54
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 8. Contoh perhitungan dosis
1. Contoh perhitungan dosis simvastatin yang diberikan pada mencit
-
Syarat volume maksimum larutan sediaan uji yang diberikan pada mencit
dengan berat 20 g secara oral adalah 1 ml
-
Dosis manusia (berat 70 kg) = 10 mg
-
Dosis mencit (berat 20 g) = 10 mg x 0,0026 x
-
Menurut FI edisi III, penetapan kadar tablet = 20 tablet, maka diambil 20
1000
20g
= 1,3mg/kg bb
tablet simvastatin, digerus dan ditimbang berat totalnya = 3883 mg
-
Berat bahan aktif simvastatin dalam 20 tablet Simvastatin adalah
= 10 mg/tab x 20 tab = 200 mg
-
Serbuk simvastatin yang digunakan untuk mencit adalah :
1,3 ��
�
=
200 �� 3883 ��
� = 25,23 ≈ 25 ��
25 mg serbuk simvastatin ditambahkan dengan 10 ml suspensi Na-CMC
-
1
Volume yang diberikan = 100 ���
Misal Berat mencit 20 g. Maka volume suspensi simvastatin
1
yang diberikan adalah 100 �20� = 0,2 ��
2. Contoh perhitungan dosis ekstrak etanol daun kelapa sawit yang akan diberikan
pada mencit hiperkolesterolemia.
-
Dosis suspensi ekstrak etanol daun kelapa sawit yang akan dibuat adalah
100, 200, 300, dan 400 mg/kg bb.
a. Cara pembuatan suspensi ekstrak etanol daun kelapa sawit :
Timbang 100, 200, 300, dan 400 mg ekstrak etanol daun kelapa sawit,
masing-masing dilarutkan dalam 10 ml suspense Na-CMC
55
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 8. (Lanjutan)
b. Volume suspensi ekstrak etanol daun kelapa sawit yang akan diberikan
pada mencit dengan berat badan 20 g.
− Volume suspensi EEDKS 100 mg/kg bb yang diberikan adalah
20
1000
x 10 ml = 0,2 ml
− Volume suspensi EEDKS 200 mg/kg bb yang diberikan adalah
20
1000
x 10 ml = 0,2 ml
− Volume suspensi EEDKS 300 mg/kg bb yang diberikan adalah
20
1000
x 10 ml = 0,2 ml
− Volume suspensi EEDKS 400 mg/kg bb yang diberikan adalah
20
1000
x 10 ml = 0,2 ml
56
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 9. Data pengukuran kadar kolesterol darah mencit
1. Na CMC 0,5%
N
o
BB
(g)
1
29,8
2
30,1
3
21,6
4
28,3
5
27,7
Rata-rata
± SD
Kadar
kolesterol
awal (mg/dl)
144
146
142
146
140
143,60 ±
2,608
Kadar
hiperkolesterol
setelah 14 hari
(mg/dl)
251
271
262
275
283
268,40 ±
12,321
Kadar kolesterol setelah
perlakuan (mg/dl)
Hari ke7
14
232
229
260
255
259
250
273
268
275
271
259,80 ± 254,60 ±
17,167
16,772
21
220
248
242
263
265
247,60 ±
18,257
2. EEDKS 100 mg/kg bb
N
o
BB
(g)
1
27,7
2
24,9
3
27,3
4
27,5
5
24,6
Rata-rata
± SD
Kadar
kolesterol
awal (mg/dl)
152
148
150
132
141
144,60 ±
8,173
Kadar
hiperkolesterol
setelah 14 hari
(mg/dl)
272
255
264
290
282
272,60 ±
13,921
Kadar kolesterol setelah
perlakuan (mg/dl)
Hari ke7
14
250
226
236
202
255
227
278
237
269
240
257,60 ± 226,40 ±
16,410
14,943
21
198
185
190
193
196
192,40 ±
5,128
3. EEDKS 200 mg/kg bb
N
o
BB
(g)
1
28,7
2
29,6
3
28,3
4
26,8
5
26,2
Rata-rata
± SD
Kadar
kolesterol
awal (mg/dl)
148
142
125
144
140
139,80 ±
8,786
Kadar
hiperkolesterol
setelah 14 hari
(mg/dl)
291
250
284
263
277
273,00 ±
16,508
Kadar kolesterol setelah
perlakuan (mg/dl)
Hari ke7
14
268
222
232
202
266
219
239
199
238
207
248,60 ± 209,80 ±
17,024
10,232
21
180
190
172
178
167
177,40 ±
8,706
57
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 9. (Lanjutan)
4. EEDKS 300 mg/kg bb
N
o
BB
(g)
1
22,1
2
30,2
3
28,3
4
23,4
5
28,3
Rata-rata
± SD
Kadar
kolesterol
awal (mg/dl)
143
148
145
143
140
143,80 ±
2,950
Kadar
hiperkolesterol
setelah 14 hari
(mg/dl)
286
269
254
273
266
269,60 ±
11,589
Kadar kolesterol setelah
perlakuan (mg/dl)
Hari ke7
14
252
210
223
197
225
185
246
219
248
205
238,80 ± 203,20 ±
13,700
12,931
21
171
168
168
176
171
170,80 ±
3,271
5. EEDKS 400 mg/kg bb
N
o
BB
(g)
1
28,2
2
30,7
3
28,3
4
27,6
5
25,2
Rata-rata
± SD
Kadar
kolesterol
awal (mg/dl)
148
146
138
140
141
142,60 ±
4,219
Kadar
hiperkolesterol
setelah 14 hari
(mg/dl)
280
293
288
279
292
286,40 ±
6,580
Kadar kolesterol setelah
perlakuan (mg/dl)
Hari ke7
14
237
199
243
187
247
200
229
190
255
201
242,20 ± 195,40 ±
9,859
6,427
21
174
153
158
148
172
161,00 ±
11,533
6. Simvastatin 1,3 mg/kg bb
N
o
BB
(g)
1
30,2
2
28,7
3
23,8
4
22,5
5
28,5
Rata-rata
SD
Kadar
kolesterol
awal (mg/dl)
Kadar
hiperkolesterol
setelah 14 hari
(mg/dl)
148
144
109
148
132
136,20 ±
16,559
258
269
273
286
284
274,00 ±
11,467
Kadar kolesterol setelah
perlakuan (mg/dl)
Hari ke7
14
236
193
205
176
228
180
258
205
244
201
234,20 ± 191,00 ±
19,728
12,708
21
160
140
167
162
156
157,00 ±
10,296
58
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 10. Data pengukuran rata-rata kadar kolesterol mencit setelah
perlakuan
Kadar
kolesterol
awal
(mg/dl)
Kadar
hiperkolesterol
setelah 14 hari
(mg/dl)
1
Na CMC
0,5%
143,60 ±
2,608
268,40 ±
12,321
2
Simvastatin
1,3 mg/kg
bb
136,20 ±
16,559
274,00 ±
11,467
3
EEDKS 100
mg/kg bb
144,60 ±
8,173
272,60 ±
13,921
4
EEDKS 200
mg/kg bb
139,80±
8,786
273,00 ±
16,508
5
EEDKS 300
mg/kg bb
143,80 ±
2,950
269,60 ±
11,589
6
EEDKS 400
mg/kg bb
142,60 ±
4,219
286,40 ±
6,580
No
Perlakuan
Kadar Kolesterol Setelah
Perlakuan (mg/dl)
7
14
21
259,80
±
17,167
234,20
±
19,728
257,60
±
16,410
248,60
±
17,024
238,80
±
13,700
242,20
±
9,859
254,60
±
16,772
191,00
±
12,708
226,40
±
14,943
209,80
±
10,232
203,20
±
12,931
195,40
±
6,427
247,60
±
18,257
157,00
±
10,296
192,40
±
5,128
177,40
±
8,706
170,80
±
3,271
161,00
±
11,533
59
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 11. Data konsumsi makanan
1. Setelah pemberian induksi hiperkolesterol
Data konsumsi makanan (g)
N
o
Perlakuan
Hari ke1
1
2
3
4
5
6
Na CMC
0,5 %
EEDKS 100
mg/kg bb
EEDKS 200
mg/kg bb
EEDKS 300
mg/kg bb
EEDKS 400
mg/kg bb
Simvastatin
1,3 mg/kg
bb
2
3
4
5
6
7
20,134 21,352 19,767 20,415 18,336 19,882 20,221
19,083
21,908 20,318 18,720 19,442 22,314 21,509
20,483
20,902 21,782 22,390 20,672 19,982 19,102
18,211 17,561 18,838 18,363 18,401 21,145 20,645
22,698 22,507 20,198 19,388 19,621 21,979 15,046
19,201
21,494 18,948 20,210 17,089 19,988 20,170
Data konsumsi makanan (g)
N
o
Perlakuan
Hari ke8
1
2
3
4
5
6
Na CMC
0,5 %
EEDKS 100
mg/kg bb
EEDKS 200
mg/kg bb
EEDKS 300
mg/kg bb
EEDKS 400
mg/kg bb
Simvastatin
1,3 mg/kg
bb
9
10
11
12
13
14
20,235 19,913 19,515 19,371 18,439 12,057 15,132
18,137 20,153 17,381 18,532 19,646 20,778 21,714
20,435 21,116 14,209 21,546 18,571 18,185 19,022
22,101 21,986 18,585 18,499 17,205 22,938 20,409
20,299 19,544 20,212 19,496 18,131 17,613 15,651
19,953 19,348 18,729 21,693 17,027 16,102 17,392
60
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 11. (Lanjutan)
2. Setelah pemberian suspensi ekstrak etanol daun kelapa sawit
Data konsumsi makanan (g)
N
o
Perlakuan
Hari ke1
1
2
3
4
5
6
Na CMC
0,5 %
EEDKS 100
mg/kg bb
EEDKS 200
mg/kg bb
EEDKS 300
mg/kg bb
EEDKS 400
mg/kg bb
Simvastatin
1,3 mg/kg
bb
2
3
4
5
6
7
22,301 20,913 19,541 17,173 19,301 18,993 17,523
18,567 17,653 15,381 18,241 19,482 20,101 17,406
20,091 21,120 18,209 19,371 18,722 18,205 19,627
21,297 22,381 19,583 18,297 18,328 20,729 19,081
20,372 19,023 20,272 18,967 18,141 19,819 17,228
17,953 19,428 18,727 19,064 16,937 18,629 15,762
Data konsumsi makanan (g)
N
o
Perlakuan
Hari ke8
1
2
3
4
5
6
Na CMC
0,5 %
EEDKS 100
mg/kg bb
EEDKS 200
mg/kg bb
EEDKS 300
mg/kg bb
EEDKS 400
mg/kg bb
Simvastatin
1,3 mg/kg
bb
9
10
11
12
13
14
17,852 15,731 18,233 19,151 18,117 14,659 17,261
21,332 20,022 18,902 17,557 19,338 18,531 20,088
18,623 17,923 17,217 20,172 19,493 18,027 18,717
20,461 18,424 19,101 18,128 17,625 21,592 19,294
19,732 16,851 19,252 17,097 18,833 17,664 16,811
18,202 19,022 20,332 18,725 17,719 17,295 18,836
61
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 11. (Lanjutan)
Data konsumsi makanan (g)
N
o
Perlakuan
Hari ke15
1
2
3
4
5
6
Na CMC
0,5 %
EEDKS 100
mg/kg bb
EEDKS 200
mg/kg bb
EEDKS 300
mg/kg bb
EEDKS 400
mg/kg bb
Simvastatin
1,3 mg/kg
bb
16
17
18
19
20
17,639 16,619 18,926 17,677 19,282 18,395
21
20,106
19,067 20,775 17,508 18,264 19,296 18,981 22,018
20,492 18,598 18,279 22,058 20,732 20,416 19,272
16,962 18,767 20,258 15,958 17,196 18,562 19,824
21,619 19,117 19,052 20,417 18,814 19,024 17,962
18,493 15,737 17,395 18,762 18,417 17,303 19,492
62
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 12. Hasil uji analisis statistik kadar kolesterol awal dan hiperkolesterol
ANOVA
kadar
kolesterol
normal
(mg/dl)
Sum of
Squares
Between
Groups
Within
Groups
Total
kadar
Between
hiperkolester Groups
ol (mg/dl)
Within
Groups
Total
df
Mean
Square
F
Sig.
255.367
5
51.073
.679
.644
1806.000
24
75.250
2061.367
29
1037.200
5
207.440
1.342
.281
3708.800
24
154.533
4746.000
29
kadar kolesterol awal (mg/dl)
Tukey HSDa
kelompok
N
simvastatin
EEDKS 200
EEDKS 400
Na CMC
EEDKS 300
EEDKS 100
Sig.
5
5
5
5
5
5
Subset for alpha = 0.05
1
136.20
139.80
142.60
143.60
143.80
144.60
.649
kadar hiperkolesterol (mg/dl)
Tukey HSDa
kelompok
N
Na CMC
EEDKS 300
EEDKS 100
EEDKS 200
simvastatin
EEDKS 400
Sig.
5
5
5
5
5
5
Subset for alpha = 0.05
1
268.40
269.60
272.60
273.00
274.00
286.40
.237
63
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 13. Hasil uji analisis statistik kadar kolesterol mencit
ANOVA
Sum of
Squares
Between
Kadar setelah 7
Groups
hari perlakuan
Within
(mg/dl)
Groups
Total
Between
Kadar setelah 14
Groups
hari perlakuan
Within
(mg/dl)
Groups
Total
Between
Kadar setelah 21
Groups
hari perlakuan
Within
(mg/dl)
Groups
Total
df
Mean
Square
2663.867
5
532.773
6111.600
24
254.650
8775.467
29
14046.000
5
2809.200
3917.200
24
163.217
17963.200
29
27952.567
5
5590.513
2740.400
24
114.183
30692.967
29
F
Sig.
2.092
.101
17.211
.000
48.961
.000
64
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 13. (Lanjutan)
kadar setelah 7 hari perlakuan (mg/dl)
Tukey HSDa
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
simvastatin
5
234.20
EEDKS 300
5
238.80
EEDKS 400
5
242.20
EEDKS 200
5
248.60
EEDKS 100
5
257.60
Na CMC
5
259.80
Sig.
.153
kadar setelah 14 hari perlakuan (mg/dl)
Tukey HSDa
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
simvastatin
5
191.00
EEDKS 400
5
195.40
EEDKS 300
5
203.20
203.20
EEDKS 200
5
209.80
209.80
EEDKS 100
5
Na CMC
5
Sig.
3
226.40
254.60
.222
.080
1.000
65
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 13. (Lanjutan)
kadar setelah 21 hari perlakuan (mg/dl)
Tukey HSDa
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
simvastatin
5
157.00
EEDKS 400
5
161.00
EEDKS 300
5
170.80
EEDKS 200
5
177.40
EEDKS 100
5
Na CMC
5
Sig.
3
177.40
192.40
247.60
.058
.266
1.000
66
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 14. Data hasil analisis statistik konsumsi makanan
ANOVA
Jumlah konsumsi
makanan pada saat
induksi hiperkolesterol
minggu ke-1
Jumlah konsumsi
makanan pada saat
induksi hiperkolesterol
minggu ke-2
Jumlah konsumsi
makanan setelah
pemberian suspensi
EEDKS minggu ke-1
Jumlah konsumsi
makanan setelah
pemberian suspensi
EEDKS minggu ke-2
Jumlah konsumsi
makanan setelah
pemberian suspensi
EEDKS minggu ke-3
Sum of
Squares
df
Mean
Square
F
Sig.
Between
Groups
13.752
5
2.750
1.112
.371
Within
Groups
89.072
36
2.474
102.824
41
24.071
5
4.814
.988
.438
175.361
36
4.871
199.432
41
19.836
5
3.967
1.953
.109
73.110
36
2.031
92.946
41
21.297
5
4.259
2.738
.034
56.006
36
1.556
77.303
41
23.535
5
4.707
2.585
.043
65.556
36
1.821
89.091
41
Total
Between
Groups
Within
Groups
Total
Between
Groups
Within
Groups
Total
Between
Groups
Within
Groups
Total
Between
Groups
Within
Groups
Total
67
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 14. (Lanjutan)
Jumlah konsumsi makanan pada saat induksi hiperkolesterol minggu ke-1
Tukey HSDa
kelompok
N
EEDKS 300
simvastatin
Na CMC
EEDKS 400
EEDKS 100
EEDKS 200
Sig.
7
7
7
7
7
7
Subset for alpha = 0.05
1
19.02343
19.58571
20.01529
20.20529
20.47057
20.75900
.328
Jumlah konsumsi makanan pada saat induksi hiperkolesterol minggu ke-2
Tukey HSDa
kelompok
N
Na CMC
simvastatin
EEDKS 400
EEDKS 200
EEDKS 100
EEDKS 300
Sig.
7
7
7
7
7
7
Subset for alpha = 0.05
1
17.80886
18.60629
18.70671
19.01200
19.47871
20.24614
.327
Jumlah konsumsi makanan setelah pemberian suspensi EEDKS minggu ke1
Tukey HSDa
kelompok
N
simvastatin
EEDKS 100
EEDKS 400
EEDKS 200
Na CMC
EEDKS 300
Sig.
7
7
7
7
7
7
Subset for alpha = 0.05
1
18.07143
18.11871
19.11743
19.33500
19.39214
19.95657
.159
68
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 14. (Lanjutan)
Jumlah konsumsi makanan setelah pemberian suspensi EEDKS minggu ke2
Tukey HSDa
kelompok
N
Na CMC
EEDKS 400
simvastatin
EEDKS 200
EEDKS 300
EEDKS 100
Sig.
7
7
7
7
7
7
Subset for alpha = 0.05
1
2
17.28629
18.03429
18.58871
18.59600
19.23214
18.03429
18.58871
18.59600
19.23214
19.39571
.340
.062
Jumlah konsumsi makanan setelah pemberian suspensi EEDKS minggu ke3
Tukey HSDa
kelompok
N
simvastatin
EEDKS 300
Na CMC
EEDKS 100
EEDKS 400
EEDKS 200
Sig.
7
7
7
7
7
7
Subset for alpha = 0.05
1
17.94271
18.21814
18.37771
19.41557
19.42929
19.97814
.077
69
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 15. Gambar alat
Wadah strip
Strip kolesterol
Mencit putih jantan
Chip cholesterol test
Cholesterol test
EasyTouch®GCU
Oral sonde mencit
70
Universitas Sumatera Utara