2.6 Pengolahan Data
Komponen yang terelusi mengalir ke detektor dan dicatat sebagai puncak-puncak yang secara keseluruhan disebut sebagai kromatogram.
W W
12
H
12
H Rt
Area
Gambar Kromatogram
2.6.1 Guna kromatogram
1. Kualitatif
Waktu retensi selalu konstan dalam setiap kondisi kromatografi yang sama dapat digunakan untuk identifikasi.
2. Kuantitatif
Luas puncak proporsional dengan jumlah sampel yang diinjeksikan dan dapat digunakan untuk menghitung konsentrasi.
3. Kromatogram dapat digunakan untuk mengevaluasi efisiensi pemisahan dan
kinerja kolom kapasitas ‘k’, selektifitas ‘ ’, jumlah pelat teoritis ‘N’, jarak
setara dengan pelat teoritis ‘HETP’ dan resolusi ‘R’.
2.6.2 Elusi Gradien dan Isokratik
Elusi pada KCKT dapat dibagi menjadi dua sistem yaitu: 1.
Sistem elusi isokratik. Pada sistem ini, elusi dilakukan dengan satu macam atau lebih fase gerak dengan perbandingan tetap komposisi fase gerak tetap selama elusi.
Universitas Sumatera Utara
2. Sistem elusi gradien. Pada sistem ini, elusi dilakukan dengan campuran fase gerak
yang perbandingannya berubah-ubah dalam waktu tertentu komposisi fase gerak berubah-ubah selama elusi.
Elusi gradien didefinisikan sebagai penambahan kekuatan fase gerak selama suatu analisis kromatografi berlangsung. Digunakan untuk meningkatkan resolusi campuran
yang kompleks terutama jika sampel mempunyai kisaran polaritas yang luas. Pengaruh yang menguntungkan dari elusi gradien adalah memperpendek waktu analisis senyawa-
senyawa yang secara kuat ditahan di dalam kolom Putra, 2007. Baku dalam terutama merupakan ragam yang berguna karena pemakaiannya
secara tepat dapat memperkecil galat yang disebabkan oleh penyiapan cuplikan, peralatan dan cara.
Ada beberapa persyaratan yang harus dipenuhi oleh senyawa baku yakni: a.
harus terpisah sama sekali dari puncak cuplikan b.
harus terelusi dekat dengan puncak yang diukur c.
konsentrasi dan tanggapan detektornya harus sama dengan konsentrasi dan tanggapan detektor puncak yang diukur
d. tidak boleh bereaksi dengan komponen cuplikan
e. tidak terdapat dalam cuplikan asal
Secara singkat, cara ini mencakup penambahan bahan baku yang jumlahnya diketahui. harus sangat murni dan mudah diperolehKemudian campuran itu dibuat untuk
disuntikkan ke dalam kromatogram. Berdasarkan luas puncak senyawa baku dan luas puncak komponen yang diminati, kita dapat menentukan susunan. Cara ini tidak
mengandaikan semua komponen terelusi dan dideteksi. Pada kenyataannya, cara ini
Universitas Sumatera Utara
sering menunjukkan bahwa memang ada komponen lain di dalam cuplikan asal, tetapi tidak ditentukan Johnson dan Stevenson, 1991.
2.7 Pemantauan Kadar Terapeutik
Kategori